CN103180327B

CN103180327B - 稠环的4-氨基嘧啶及其作为可溶性鸟甘酸环化酶的刺激物的用途

Info

Publication number: CN103180327B
Application number: CN201180043602.XA
Authority: CN
Inventors: M·福尔曼; 约翰尼斯-彼得·施塔施; G·雷德利克; J·埃克斯达夫; N·格里布诺; A·诺尔; F·旺德; 李民坚
Original assignee: Bayer Pharma AG
Current assignee: Bayer Pharma AG
Priority date: 2010-07-09
Filing date: 2011-07-05
Publication date: 2016-08-10
Anticipated expiration: 2031-07-05
Also published as: WO2012004259A1; ES2572638T3; EP2590987B1; JP2013533250A; CN103180327A; JP5940062B2; HK1182697A1; US20130172372A1; KR20130132392A; CA2804471A1; EP2590987A1; US8765769B2

Abstract

本发明涉及新的稠环4‑氨基嘧啶、涉及其制备方法、涉及其单独或结合用于治疗和/或预防疾病的用途以及其用于制备治疗和/或预防疾病特别是治疗和/或预防心血管病症的药物的用途。

Description

稠环的4-氨基嘧啶及其作为可溶性鸟甘酸环化酶的刺激物的用途

本发明涉及新的稠环的4-氨基嘧啶、涉及其制备方法、涉及其单独或结合用于治疗和/或预防疾病的用途以及其用于制备治疗和/或预防疾病，特别是用于治疗和/或预防心血管病症的药物的用途。

在哺乳动物细胞中最重要的细胞传输系统之一是环磷酸鸟苷(cGMP)。其与一氧化氮(NO)——其从内皮释放并且传输激素和机械信号——一起形成NO/cGMP系统。鸟苷酸环化酶催化由鸟苷三磷酸(GTP)生物合成cGMP。迄今已知的这类家族的代表可根据结构特征或根据配体的类型分成两组：可被尿钠肽刺激的特殊鸟苷酸环化酶，以及可被NO刺激的可溶性鸟苷酸环化酶。可溶性鸟苷酸环化酶由两个亚单元组成并且极可能每个异质二聚体含有一个血红素，该血红素是调节位点的一部分。这对激活机制是至关重要的。NO可与血红素的铁原子连接且因此显著地增加酶的活性。相比之下，不含血红素的制剂不能被NO刺激。一氧化碳(CO)也能够与血红素的中心铁原子连接，但是被CO的刺激比被NO的刺激更小。

在cGMP的形成以及所产生的对磷酸二酯酶、离子通路以及蛋白激酶的调节的整个过程中，鸟苷酸环化酶在不同的生理过程中——更特别在平滑肌细胞的松弛和增殖中、在血小板聚集和血小板粘附中和在神经信号传递中、以及在基于上文提及的过程的中断的病症中——发挥关键的作用。在病理生理学的条件下，NO/cGMP系统可被抑制，其可导致例如高血压、血小板激活、细胞增殖增加、内皮功能病症、动脉粥样硬化、心绞痛、心力衰竭、心肌梗死、形成血栓、中风和性功能病症。

由于期望的高功效和低水平的副作用，一种有希望的方法是通过针对生物体中cGMP信号通路的影响而对上述病症进行可能的不依赖NO的治疗。

迄今，可溶性鸟苷酸环化酶的治疗性刺激已经通过使用专门的化合物(例如有机硝酸盐)实现，有机硝酸盐的作用基于NO。NO通过生物转化形成并且通过进攻血红素的中心铁原子来激活可溶性鸟苷酸环化酶。除副作用之外，这种治疗模式的重要缺点之一是形成耐受性。

在过去的几年里，存在一些对直接——即未经先释放NO——刺激可溶性鸟苷酸环化酶的化合物的描述，例如3-(5'-羟甲基-2'-呋喃基)-1-苄基吲唑[YC-1；Wu et al.,Blood 84(1994),4226；Mülschet al.,Brit.J.Pharmacol.120(1997),681]、脂肪酸[Goldberg et al.,J.Biol.Chem.252(1977),1279]、二苯基碘鎓六氟磷酸盐[Pettiboneet al.,Eur.J.Pharmacol.116(1985),307]、异甘草素[Yu et al.,Brit.J.Pharmacol.114(1995),1587]以及各种取代的吡唑衍生物(WO 98/16223)。

作为对可溶性鸟苷酸环化酶的刺激物，WO 00/06569公开了稠合的吡唑衍生物，且WO 03/095451公开了被氨基甲酸酯取代的3-嘧啶基吡唑并吡啶。WO 2010/065275公开了作为sGC活化剂的取代的吡咯并嘧啶和二氢吡啶并嘧啶。

本发明的一个目的是提供新物质，其充当对可溶性鸟苷酸环化酶的非常有效的刺激物。

本发明提供通式(I)的化合物及其N-氧化物、其盐、其溶剂化物、其N-氧化物的盐以及其N-氧化物或盐的溶剂化物，

其中

A为(C₁-C₃)-烷二基或下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点，

环Q为4至6元杂环，

且

其中(C₁-C₃)-烷二基可被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自氟、三氟甲基、(C₁-C₄)烷基、羟基和氨基，

其中(C₁-C₄)烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基独立地选自氟、三氟甲基和羟基，

R¹为氢或氟，

R²为(C₁-C₆)烷基或苄基，

其中(C₁-C₆)烷基被一个三氟甲基取代基取代，

其中(C₁-C₆)烷基可被1至3个氟取代基取代，

且

其中苄基被1至3个氟取代基取代。

本发明的化合物是式(I)的化合物及其盐、其溶剂化物及其盐的溶剂化物，由式(I)涵盖的、在后文详述的式的化合物及其盐、其溶剂化物及其盐的溶剂化物，以及由式(I)涵盖的、并在后文作为工作实施例详述的化合物及其盐、其溶剂化物及其盐的溶剂化物，只要由式(I)涵盖并在后文详述的化合物并非已经为盐、溶剂化物及盐的溶剂化物。

本发明的化合物还为式(I)的化合物的N-氧化物及其盐、其溶剂化物及其盐的溶剂化物。

在本发明的上下文中优选的盐为本发明的化合物的生理可接受盐。还涵盖不仅本身适于药物应用还可被用于例如分离或纯化本发明的化合物的盐。

本发明的化合物的生理可接受盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、萘二磺酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、马来酸盐和苯甲酸盐。

本发明的化合物的生理可接受盐还包括常用碱的盐，例如并优选碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)以及衍生自氨或衍生自含有1至16个碳原子的有机胺的铵盐，所述有机胺例如并优选乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己基胺、二甲氨基乙醇、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。

在本发明的上下文中，溶剂化物指的是本发明的化合物的形式，其是通过本发明的化合物与溶剂分子络合形成的固态或液态的络合物。水合物是溶剂化物的具体形式，其中与之络合的是水。在本发明的上下文中溶剂化物优选为水合物。

本发明的化合物根据其结构可以以不同的立体异构体的形式存在，即以构型异构体的形式存在或任选作为构象异构体(对映异构体和/或非对映异构体，包括阻转异构体)存在。因此，本发明涵盖对映异构体和非对映异构体，以及其各自的混合物。可以用已知的方法从所述对映异构体和/或非对映异构体的混合物中分离出立体异构的同质成分；对此目的优选使用色谱法，特别是在非手性相或手性相上的HPLC色谱法。

本发明的化合物可以以互变异构体的形式存在时，本发明涵盖所有的互变异构体。

本发明还涵盖本发明的化合物的所有适合的同位素变体。在本文中本发明的化合物的同位素变体应理解为意指如下的化合物：在本发明的化合物内的至少一个原子被置换为具有相同原子序数的另外的原子，但所述另外的原子与在自然中通常或主要存在的原子相比具有不同的原子质量。可纳入本发明的化合物的同位素的实例为氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，例如²H(氘)、³H(氚)、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁹I和¹³¹I。本发明的化合物的具体的同位素变体，例如，更具体地，其中纳入一种或多种放射性同位素的同位素变体可以有利于例如研究作用机制或活性成分在机体内的分布；由于比较容易制备和检测，特别是用³H或¹⁴C同位素标记的化合物适于此目的。此外，同位素(例如氘)的纳入可由于化合物的更好的代谢稳定性而产生特殊的治疗性优势，例如延长在机体中的半衰期或减少需要的活性剂量；因此，在一些情况下本发明的化合物的如此修饰还可构成本发明的优选实施方案。本发明的化合物的同位素变体可通过本领域技术人员已知的方法——例如通过下文描述的方法以及在操作实施例中描述的步骤——通过使用各自的试剂和/或起始化合物所对应的同位素变型来制备。

本发明还涵盖本发明的化合物的前药。术语“前药”包括如下的化合物：其本身具有或没有生物活性但是当在机体中驻留时转化为本发明的化合物(例如通过新陈代谢或水解)。

在可表示A的基团的式中，由符号*或#标记的线的终点不代表碳原子或CH₂基团，而是各个原子与A连接的键的一部分。

在本发明的上下文中，除非另有说明，取代基定义如下：

在本发明的上下文中烷基为具有1至4个碳原子的直链或支链烷基基团。优选的实例包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、1-甲基丙基、叔丁基。

在本发明的上下文中烷二基为具有1至3个碳原子的直链二价烷基基团。实例包括：亚甲基、乙-1,2-二基或丙-1,3-二基。

在本发明的上下文中杂环为具有总共4至6个环原子的饱和杂环，其含有一个或两个选自N、O和/或S的环杂原子且通过环碳原子连接。实例包括：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基和硫代吗啉基。优选氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基和四氢吡喃基。

如果在本发明的化合物中的基团被取代，除非另有说明，所述基团可以被单取代或多取代。在本发明的上下文中，出现多于一次的所有基团被彼此独立地定义。优选被一个、两个或三个相同或不同的取代基取代。

在本发明的上下文中优选通式(I-1)的化合物以及其N-氧化物、其盐、其溶剂化物、其N-氧化物的盐及其N-氧化物或盐的溶剂化物，

其中

A为(C₁-C₃)-烷二基或下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点，

环Q为4至6元杂环，

且

其中(C₁-C₃)-烷二基可被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自氟、三氟甲基和(C₁-C₄)烷基，

R¹为氢或氟。

在本发明的上下文中还优选下述式(I)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，

其中

A为下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点，

环Q为氮杂环丁烷环、氧杂环丁烷环、吡咯烷环、四氢呋喃环、哌啶环或四氢吡喃环

R¹为氢或氟。

R²为2,2,2-三氟乙基、3,3,3-三氟丙-1-基、4,4,4-三氟丁-1-基、3,3,4,4,4-五氟丁-1-基或苄基，

其中苄基被1至3个氟取代基取代。

其中

A为(C₁-C₃)烷二基

其中(C₁-C₃)烷二基可独立地被1个或2个选自氟、(C₁-C₄)烷基、羟基和氨基的取代基取代，

且

其中(C₁-C₃)烷二基被1个选自氟和三氟甲基的取代基取代，

R¹为氢或氟，

其中苄基被1至3个氟取代基取代。

在本发明的上下文中还优选下述式(I-1)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，

其中

A为下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点，

R¹为氢或氟。

其中

A为(C₁-C₃)烷二基

其中(C₁-C₃)烷二基可独立地被1个或2个选自氟和(C₁-C₄)烷基的基团取代，

且

其中(C₁-C₃)烷二基被1个选自氟和三氟甲基的取代基取代，

R¹为氢或氟。

在本发明的上下文中还优选下述式(I)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，其中

A为亚烷基或乙-1,2-二基，

其中亚烷基和乙-1,2-二基被1个或2个独立地选自氟和三氟甲基的基团取代。

其中

A为下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点，

环Q为4至6元杂环。

其中

A为下式的基团，

其中

*为与嘧啶环的连接位点，

#为与羰基基团的连接位点。

在本发明的上下文中还优选下述式(I)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，其中R¹为氟。

在本发明的上下文中还优选下述式(I)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，其中R²为3,3,4,4,4-五氟丁-1-基。

在本发明的上下文中还优选下述式(I)的化合物以及其盐、其溶剂化物、及其盐的溶剂化物，其中R²为苄基，其中苄基被1至3个氟取代基取代。

在本发明的上下文中特别优选下文的式(I)的化合物：

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮、

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮、

4-氨基-2-[5-氟-1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮、

4'-氨基-2'-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-4,5-二氢螺[呋喃-3,5'-吡咯并[2,3-d]嘧啶]-6'(7'H)-酮、

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮、

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-(三氟甲基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮、

4-氨基-5,5-二甲基-2-[1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮、

4-氨基-2-[5-氟-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮。

在本发明的上下文中特别优选下文的式(I)的化合物：

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-(三氟甲基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮。

在基团的各种结合或优选结合中规定的单个基团定义也——以不依赖于所规定的基团的各种结合的方式——按需被其他结合的基团定义代替。

特别优选两个或多个上文提及的优选范围的结合。

本发明又提供制备本发明的式(I)的化合物的方法，特征在于

[A]式(II)的化合物

其中R¹和R²各自如上文定义

在酸性的条件下转化为式(III)的化合物

其中R¹和R²各自如上文定义，

在惰性溶剂中、在适合的碱的存在下，式(III)的化合物与式(IV)的化合物

其中A如上文定义且

T¹为(C₁-C₄)烷基，

反应以得到式(I)的化合物

其中A、R¹和R²各自如上文定义。

[B]在惰性溶剂中、在适合的碱的存在下，式(III)的化合物与式(V)的化合物

其中

A¹为(C₂-C₃)烷二基、

其中(C₂-C₃)烷二基可以被1个或2个独立地选自氟、三氟甲基和(C₁-C₄)烷基的取代基取代，

其中(C₁-C₄)烷基可以被1至3个独立地选自氟、三氟甲基和羟基的取代基取代，

且

T²为(C₁-C₄)烷基，

反应以得到式(I-A)的化合物

其中A¹、R¹和R²各自如上文定义。

生成的式(I)和(I-A)的化合物可任选用适合的(i)溶剂和/或(ii)酸或碱转化成其溶剂化物、其盐和/或其盐的溶剂化物。

(II)→(III)的转化通过本领域技术人员已知的方法用两步法进行，首先在0℃至+40℃下在甲醇中与甲醇钠形成亚胺酯，随后在+50至+150℃下在适合的酸中亲核加成氨的等价物——例如氨水或氯化铵——以形成脒(III)。

形成脒(III)的适合的酸为无机酸，例如氯化氢/盐酸、硫酸、聚磷酸或磷酸，或有机酸，例如乙酸、三氟乙酸或甲酸。优选使用盐酸或乙酸。

用于于本方法的步骤(III)+(IV)→(I)的惰性溶剂为，例如醇类如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇、醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、烃类例如苯、二甲苯、甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈或水。还可以使用所提及的溶剂的混合物。优选叔丁醇。

用于本方法的步骤(III)+(IV)→(I)的适合的碱为碱金属氢氧化物(例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)、碱金属碳酸盐(例如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯)、碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠或碳酸氢钾)、碱金属醇盐(例如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钾)，或有机胺(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN))。优选使用叔丁醇钾。

反应(III)+(IV)→(I)通常在+20℃至+150℃、优选在+75℃至+100℃的温度范围内任选在微波中进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

用于本方法的步骤(III)+(V)→(I-A)的惰性溶剂为，例如醇类如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇、醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、烃类例如苯、二甲苯、甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈或水。还可以使用所提及的溶剂的混合物。

用于本方法的步骤(III)+(V)→(I-A)的适合的碱为碱金属氢氧化物(例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾)、碱金属碳酸盐(例如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯)、碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠或碳酸氢钾)、碱金属醇盐(例如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钾)，或有机胺(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN))。

优选使用在甲醇中的甲醇钠或在叔丁醇中的叔丁醇钾。

反应(III)+(V)→(I-A)通常在+20℃至+150℃、优选在+60℃至+100℃的温度范围内任选在微波中进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

上文描述的方法参照例如下文的合成路线图(路线图1和路线图2)举例说明：

路线图1

[a):1.甲醇钠、甲醇2.氯化铵、乙酸；b):KOt-Bu,t-BuOH]。

路线图2：

[a):NaOMe、甲醇、65℃].

式(II)的化合物从文献已知(参见，例如WO 03/095451，实施例4A)或可通过如下方法制备：在惰性溶剂中使式(VI)的化合物

其中R¹如上文定义，

与水合肼进行环化反应以得到式(VII)的化合物

其中R¹如上文定义，

然后在惰性溶剂中、在适合的路易斯酸的存在下将式(VII)的化合物先与亚硝酸异戊酯反应得到相应的重氮盐，然后用碘化钠使所述重氮盐直接转化为式(VIII)的化合物

其中R¹如上文定义，

随后在惰性溶剂中、在适合的碱的存在下，将式(VIII)的化合物与式(IX)的化合物

R²-x¹(IX)，

其中R²如上文定义且

X¹是适合的离去基团，例如甲苯磺酸酯、甲磺酸酯或卤素，特别是溴或碘，

反应以得到式(X)的化合物

其中R¹和R²各自如上文定义，

然后在惰性溶剂中使式(X)的化合物与氰化铜反应。

用于本方法的步骤(VI)→(VII)的惰性溶剂为，醇类如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇或1,2-乙二醇、醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、烃类例如苯、二甲苯、甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈或水。还可以使用所提及的溶剂的混合物。优选1,2-乙二醇。

反应(VI)→(VII)通常在+60℃至+200℃、优选在+120℃至+180℃的温度范围内进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

用于反应(VII)→(VIII)的惰性溶剂为，例如卤代烃类如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烯或氯苯、醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶或乙腈。优选DMF。

用于本方法的步骤(VII)→(VIII)的适合的路易斯酸为三氟化硼-乙醚络合物、硝酸铈(IV)铵(CAN)、氯化亚锡(II)、高氯酸锂、氯化锌(II)、氯化铟(III)或溴化铟(III)。优选三氟化硼-乙醚络合物。

反应(VII)→(VIII)通常在-78℃至+40℃、优选在0℃至+20℃的温度范围内进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

用于反应(VIII)+(IX)→(X)的惰性溶剂为，例如卤代烃类如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烯或氯苯、醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶或乙腈。优选DMF。

用于本方法的步骤(VIII)+(IX)→(X)的适合的碱为碱金属氢化物(例如氢化钠或氢化钾)、碱金属碳酸盐(例如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯)、碱金属碳酸氢盐(例如碳酸氢钠或碳酸氢钾)、碱金属醇盐(例如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钾)、氨基化物类(例如氨基钠、双(三甲基硅烷基)氨基锂、双(三甲基硅烷基)氨基钠或双(三甲基硅烷基)氨基钾或二异丙基氨基锂)、有机金属化合物(例如丁基锂或苯基锂)、或有机胺(例如三乙胺、二异丙基乙基胺、吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)或1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN))。优选碳酸铯。

反应(VIII)+(IX)→(X)通常在0℃至+60℃——优选在+10℃至+25℃——的温度范围内进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

用于本方法的步骤(X)→(II)的惰性溶剂为，例如醚类如乙醚、二噁烷、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二甘醇二甲醚、烃类例如苯、二甲苯、甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分、或其他溶剂例如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基亚丙基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶或乙腈。还优选使用所提及的溶剂的混合物。优选DMSO。

反应(X)→(II)通常在+20℃至+180℃、优选在+100℃至+160℃的温度范围内进行，任选在微波中进行。所述反应可在标准压力、增压或减压(例如从0.5至5巴)下进行。一般来说，使用标准压力。

所描述的制备方法可通过下文的合成路线图(路线图3)举例说明：

路线图3

[a):水合肼,1,2-乙二醇；b):亚硝酸异戊酯,NaI,THF；b):2-氟苄基溴,Cs₂CO₃,DMF；d):CuCN,DMSO]。

式(VI)的化合物从文献已知[参见，例如Winn M.,J.Med.Chem.1993,36,2676-7688；EP 634413-A1；CN 1613849-A；EP 1626045-A1；WO 2009/018415]，或可用与来自文献的已知方法相似的方法或如下文的合成路线图(路线图4)示出的方法来制备：

路线图4

[a):硫酸；b):锌,甲醇,冰醋酸；c):三氟乙酸酐,二氯甲烷]。

式(IV)和(V)的化合物市售可得且从文献中已知，并且可用与来自文献的已知方法相似的方法或如在下文的合成路线图(路线图5和6)中示例性示出的方法来制备：

路线图5

[a):1.LiHMDS,-78℃,THF,2.NBS；b):NaH,50℃,THF].

路线图6

[a):NaOMe,MeOH,65℃].

本发明的化合物是可溶性鸟苷酸环化酶的有效的刺激物，具有有价值的药理特性并因此适于在人和动物中治疗和/或预防病症。

本发明的化合物引起血管舒张并抑制血小板聚集，以及导致血压降低和冠状血流增加。这些作用由可溶性鸟苷酸环化酶的直接刺激和胞内cGMP上升介导。此外，本发明的化合物增强可增加cGMP水平的物质的作用，所述物质例如EDRF(来自内皮的松弛因子)、NO供体、原卟啉IX、花生四烯酸或苯肼衍生物。

本发明的化合物适于治疗和/或预防心血管病症、肺病症、血栓栓塞病症和纤维变性病症。

因此，本发明的化合物可用于药物，所述药物用于治疗和/或预防心血管病症，例如高血压、急性和慢性心力衰竭、冠心病、稳定型和不稳定型心绞痛、外周和心血管病症、心律失常、窦性和室性心律失常以及传导受损，例如I-III度房室传导阻滞(AB阻滞I-III)、室上性心动过速、心房颤动、心房扑动、心室纤维性颤动、心室扑动、室性快速型心律失常、扭转型室性心动过速、心房和心室期外收缩、AV-交界区期外收缩、病态窦房节综合征(Sick-Sinus syndrome)、晕厥、AV-折返性心动过速、Wolff-Parkinson-White综合征、急性冠状动脉综合征(ACS)、自身免疫性心脏病症(心包炎、心内膜炎、心脏瓣膜炎(valvolitis)、主动脉炎、心肌病)、休克例如心源性休克、感染性休克和过敏性休克、动脉瘤、拳师犬心肌病(boxer cardiomyopathy)(心室早发性收缩(PVC))；用于治疗和/或预防血栓栓塞病症和局部缺血，例如心肌缺血、心肌梗死、中风、心肌肥大、短暂性缺血发作、惊厥前期、炎性心血管病症、冠状动脉和外周动脉痉挛、水肿形成，例如肺水肿、脑水肿、肾脏水肿或由心力衰竭引起的水肿、外围灌注受损(impaired peripheral perfusion)、再灌注损伤、动脉和静脉血栓形成、微量白蛋白尿、心肌功能不全、内皮功能紊乱；用于预防在例如溶栓治疗、经皮腔内血管成形术(PTA)、经腔冠状动脉血管成形术(PTCA)、心脏移植和搭桥术后的再狭窄、以及微血管和大血管损害(血管炎)、提高的纤维蛋白原和低密度LDL的水平、以及提高的纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的浓度；以及用于治疗和/或预防勃起功能障碍和女性性功能障碍。

在本发明的上下文中，术语“心力衰竭”还涵盖更具体或更相关类型的疾病，例如急性失代偿性心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、全心衰竭(global failure)、缺血性心肌病、扩张型心肌病、肥厚型心肌病、特发性心肌病、先天性心脏缺损、心脏瓣膜缺损、与心脏瓣膜缺损相关的心力衰竭、二尖瓣狭窄、二尖瓣闭锁不全、主动脉瓣狭窄、主动脉瓣闭锁不全、三尖瓣狭窄、三尖瓣闭锁不全、肺动脉瓣狭窄、肺动脉瓣闭锁不全、复合性心脏瓣膜缺损、心肌炎、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病型心力衰竭、酒精型心肌病、心脏存储病症、舒张性心力衰竭和收缩性心力衰竭。

此外，本发明的化合物还可用于治疗和/或预防动脉硬化、扰动脂代谢、低脂蛋白血症(hypolipoproteinemias)、血脂异常、高甘油三酯血症、高脂血症、高胆固醇血症、无β脂蛋白血症、谷固醇血症、黄瘤病、丹吉尔病、肥胖症(adiposity)、肥胖症(obesity)和复合性高脂血症，以及代谢综合征。

此外，本发明的化合物可用于治疗和/或预防一期和二期雷诺现象、微循环病症、跛行、外周和自律性神经病、糖尿病微血管病、糖尿病视网膜病变、在四肢的糖尿病溃疡、坏疽、支端硬皮综合征、红斑狼疮、甲癣、风湿性疾病，以及用于促进伤口愈合。

此外，本发明的化合物还适于治疗泌尿病症，例如良性前列腺综合症(BPS)、良性前列腺增生(BPH)、良性前列腺肥大(BPE)、膀胱出口梗阻(BOO)、下尿路综合征(LUTS，包括猫泌尿综合征(FUS))、泌尿生殖系统病症，包括神经源性膀胱过动症(OAB)和(IC)、失禁(UI)，例如混合性尿失禁、急迫性尿失禁、压力性尿失禁或充溢性尿失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆疼痛、在男性和女性泌尿生殖系统中的器官的良性和恶性病症。

此外，本发明适于治疗和/或预防肾脏病症，特别是急性和慢性肾功能不全、以及急性和慢性肾衰竭。在本发明的上下文中，术语“肾功能不全”涵盖肾功能不全的急性和慢性临床表现，以及潜在的或相关的肾脏病症，例如肾灌注不足、透析相关性低血压(intradialytic hypotension)、梗阻性尿路病、肾小球病、肾小球性肾炎、急性肾小球性肾炎、肾小球硬化症、肾小管间质疾病、肾病病症，例如原发性和先天性肾脏疾病、肾炎、免疫性肾脏病症，例如肾转移排斥和免疫复合物诱导的肾脏病症、有毒物质诱导的肾病、造影剂诱导的肾病、糖尿病性和非糖尿病性肾病、肾盂肾炎、肾囊肿、肾硬化、高血压性肾硬化以及有下述诊断特征的肾病综合征，例如肌酐和/或水排泄的异常减少；尿素、氮、钾和/或肌酐的血液浓度异常升高；肾脏酶(例如谷酰基合成酶)的活性改变、尿液渗透压或尿量的改变；微量白蛋白尿、大量白蛋白尿的增加；肾小球和小动脉病灶；管扩张(tubulardilatation)；高磷酸盐血症和/或需要透析。本发明还涵盖本发明的化合物治疗和/或预防肾功能不全后遗症的用途，例如肺气肿、心力衰竭、尿毒症、贫血、电解质紊乱(例如高钙血症、低钠血症)以及骨代谢和碳水化合物代谢失调。

此外，本发明的化合物还适于治疗和/或预防哮喘症、肺动脉高血压(PAH)及肺高血压(PH)的其他形式包括与左心疾病相关的肺高血压、HIV、镰状细胞性贫血、血栓栓塞(CTEPH)、肉状瘤病、慢性阻塞性肺病(COPD)或肺纤维化；慢性梗阻性肺疾病(COPD)、急性呼吸窘迫综合症(ARDS)、急性肺损伤(ALI)、α-1抗胰蛋白酶缺失(AATD)、肺纤维化、肺气肿(例如由吸烟诱导的肺气肿)以及囊泡性纤维症(CF)。

在本发明中描述的化合物还为用于防治以NO/cGMP系统失调为特点的中枢神经系统病症的活性成分。更特别地，它们适于在认知损害后提高感知、注意力、学习能力或记忆力，其中认知损害为例如特别在下述状况/疾病/综合征中发生的认知损害：例如轻度认知损害、年龄相关的学习能力和记忆力损害、年龄相关的失忆、血管性痴呆、颅脑创伤、中风、中风后痴呆、创伤后颅脑创伤、综合注意力集中障碍、在具有学习和记忆困难的儿童中的注意力集中障碍、阿尔茨海默病、路易体痴呆、伴随额叶退化的痴呆，包括皮克氏综合征、帕金森病、进行性核性麻痹、伴随基底节变性的痴呆、筋萎缩性侧索硬化症(ALS)、亨廷顿氏舞蹈病、脱髓鞘、多发性硬化、丘脑变形、Creutzfeld-Jacob痴呆、HIV痴呆、伴随痴呆或科尔萨科夫综合症的精神分裂症。它们还适于治疗和/或预防中枢神经系统病症，例如焦虑、紧张和抑郁状态、CNS相关的性功能障碍和扰乱睡眠，以及适用于控制食物、兴奋剂和成瘾性物质的摄入的病理性失调。

此外，本发明的化合物还适于调节脑的血流量并因此作为防治偏头痛的有效试剂。它们还适于预防和控制脑梗死(脑卒中)后遗症，例如中风、脑缺血和颅脑损伤。本发明的化合物还可用于控制疼痛和耳鸣的状态。

此外，本发明的化合物具有抗炎作用并因此可用作治疗和/或预防下述疾病的抗炎药：败血症(SIRS)、多器官衰竭(MODS,MOF)、肾脏的炎症性病症、慢性炎症性肠病(IBD、克罗恩氏病、UC)、胰腺炎、腹膜炎、风湿性病症、炎症性皮肤病症和炎症性眼病症。

此外，本发明的化合物还可用于治疗和/或预防自身免疫性病症。

此外，本发明的化合物适于治疗和/或预防内脏器官——例如肺、心脏、肾脏、骨髓以及特别是肝脏——的纤维化病症，以及皮肤病学纤维化和眼的纤维化病症。在本发明的上下文中，术语“纤维化病症”特别涵盖下文的术语：肝纤维化、肝硬化、肺纤维化、心内膜心肌纤维化、肾病、肾小球性肾炎、间质性肾纤维化、由糖尿病导致的纤维化损伤、骨髓纤维化及相似的纤维化病症、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、肥厚性瘢痕(包括手术后的肥厚性瘢痕)、痣、糖尿病视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变及连接组织的病症(例如肉状瘤病)。

本发明的化合物还适于防治术后瘢痕，例如由青光眼手术导致的瘢痕。

本发明的化合物还可在美容上用于老化和角质化的皮肤。

此外，本发明的化合物适于治疗和/或预防肝炎、肿瘤、骨质疏松症、青光眼和胃轻瘫。

本发明还提供本发明的化合物用于治疗和/或预防病症，特别是上文提及的病症的用途。

本发明还提供本发明的化合物用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺高血压、缺血、血管病症、肾功能不全、血管栓塞病症、纤维性病症和动脉硬化的用途。

本发明还提供用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺高血压、缺血、血管病症、肾功能不全、血管栓塞病症、纤维性病症和动脉硬化的方法中的本发明的化合物。

本发明还提供本发明的化合物用于制备治疗和/或预防病症，特别是上文提及的病症的药物的用途。

本发明还提供本发明的化合物用于制备治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺高血压、缺血、血管病症、肾功能不全、血管栓塞病症、纤维性病症和动脉硬化的药物的用途。

本发明还提供使用有效剂量的至少一种本发明的化合物治疗和/或预防病症，特别是上文提及的病症的方法。

本发明还提供使用有效剂量的至少一种本发明的化合物治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺高血压、缺血、血管病症、肾功能不全、血管栓塞病症、纤维性病症和动脉硬化的方法。

本发明的化合物可被单独使用或——如果需要——与其他活性成分结合使用。本发明还提供包含至少一种本发明的化合物以及一种或多种其他活性成分、特别是用于治疗和/或预防上文提及的病症的药物。适合的活性成分结合物的优选实例包括：

·有机硝酸盐和NO供体，例如硝普钠、硝化甘油、单硝酸异山梨酯、硝酸异山梨酯、吗多明(molsidomine)或SIN-1，以及吸入性NO；

·抑制环磷酸鸟苷(cGMP)分解的化合物，例如磷酸二酯酶(PDE)1、2和/或5的抑制剂,特别是PDE 5抑制剂，例如西地那非、伐地那非和他达拉非；

·抗血栓形成剂，例如并优选选自血小管聚集抑制剂、抗凝血剂或纤维蛋白溶酶物；

·低血压活性成分，例如并优选选自钙拮抗剂、血管紧张素AII拮抗剂、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、α-受体阻断剂、β-受体阻断剂、盐皮质激素受体拮抗剂和利尿剂；和/或

·改变脂质代谢的活性成分，例如并优选选自甲状腺受体激动剂、胆固醇合成抑制剂，例如并优选选自羟甲戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)抑制剂或鲨烯合成抑制剂、酰基辅酶a-胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂、胆固醇转移蛋白(CETP)抑制剂、甘油三酯转移蛋白(MTP)抑制剂、PPAR-α,PPAR-γ和/或PPAR-σ激动剂、胆固醇吸收抑制剂、脂肪酶抑制剂、聚合胆汁酸吸附剂、胆汁酸再吸收抑制剂和脂蛋白(a)拮抗剂。

抗血栓形成试剂应优选理解为意指选自血小板聚集抑制剂、抗凝血剂或纤维蛋白溶酶物的化合物。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与血小板聚集抑制剂结合给药，所述血小板聚集抑制剂例如并优选阿司匹林、氯吡格雷(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidin)或双嘧达莫(dipyridamole)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与凝血酶抑制剂结合给药，所述凝血酶抑制剂例如并优选希美加群(ximelagatran)、达比加群(dabigatran)、美拉加群(melagatran)、比伐卢定(bivalirudin)或克赛(clexane)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与GPIIb/IIIa拮抗剂结合给药，所述GPIIb/IIIa拮抗剂例如并优选替罗非班(tirofiban)或阿昔单抗(abciximab)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与Xa抑制剂结合给药，所述Xa抑制剂例如并优选利伐沙班(rivaroxaban)(BAY 59-7939)、DU-176b、阿哌沙班(apixaban)、奥米沙班(otamixaban)、非地沙班(fidexaban)、雷扎沙班(razaxaban)、fondaparinux、艾卓肝素(idraparinux)、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与肝素或具有低分子量(LMW)的肝素衍生物结合给药。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与维生素K拮抗剂结合给药，所述维生素K拮抗剂例如并优选香豆素。

低血压试剂优选被理解为意指选自以下的化合物：钙拮抗剂、血管紧张素AII拮抗剂、ACE抑制剂、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、α-受体阻断剂、β-受体阻断剂、盐皮质激素受体拮抗剂和利尿剂。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与钙拮抗剂结合给药，所述钙拮抗剂例如并优选硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、维拉帕米(verapamil)或地尔硫卓(diltiazem)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与α-1-受体阻断剂结合给药，所述α-1-受体阻断剂例如并优选哌唑嗪(prazosin)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与β-受体阻断剂结合给药，所述β-受体阻断剂例如并优选普萘洛尔(propranolol)、阿替洛尔(atenolol)、噻吗洛尔(timolol)、吲哚洛尔(pindolol)、阿普洛尔(alprenolol)、氧烯洛尔(oxprenolol)、喷布洛尔(penbutolol)、布拉洛尔(bupranolol)、美替洛尔(metipranolol)、纳多洛尔(nadolol)、甲吲洛尔(mepindolol)、carazalol、索他洛尔(sotalol)、美托洛尔(metoprolol)、倍他洛尔(betaxolol)、塞利洛尔(celiprolol)、比索洛尔(bisoprolol)、卡替洛尔(carteolol)、艾司洛尔(esmolol)、拉贝洛尔(labetalol)、卡维地洛(carvedilol)、阿达洛尔(adaprolol)、兰地洛尔(landiolol)、奈比洛尔(nebivolol)、依泮洛尔(epanolol)或布新洛尔(bucindolol)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与血管紧张素AII拮抗剂结合给药，所述血管紧张素AII拮抗剂例如并优选洛沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、缬沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)或embursatan。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与ACE抑制剂结合给药，所述ACE抑制剂例如并优选依那普利(enalapril)、卡托普利(captopril)、赖诺普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、奎诺普利(quinopril)、培哚普利(perindopril)或泉多普利(trandopril)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与内皮素拮抗剂结合给药，所述内皮素拮抗剂例如并优选波生坦(bosentan)、达卢生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)或西他生坦(sitaxsentan)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与肾素抑制剂结合给药，所述肾素抑制剂例如并优选阿利吉仑(aliskiren)、SPP-600或SPP-800。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与盐皮质激素受体拮抗剂结合给药，所述盐皮质激素受体拮抗剂例如并优选螺内酯(spironolactone)或依普利酮(eplerenone)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与下述利尿剂结合给药：袢利尿剂，例如呋塞米(furosemide)、托拉塞米(torasemide)、布美他尼(bumetanide)和吡咯他尼(piretanide)；保钾利尿剂，例如阿米洛利(amiloride)和氨苯蝶啶(triamterene)；醛固酮拮抗剂，例如螺内酯(spironolactone)、坎利酸钾(potassium canrenoate)和依普利酮(eplerenone)；以及噻嗪类利尿剂，例如氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、希帕胺(xipamide)和吲达帕胺(indapamide)。

改变脂质代谢的试剂优选被理解为意指选自以下的化合物：CETP抑制剂、甲状腺受体激动剂、胆固醇合成抑制剂如HMG-CoA还原酶抑制剂或鲨烯合成抑制剂、ACAT抑制剂、MTP抑制剂、PPAR-α、PPAR-γ和/或PPAR-δ激动剂、胆固醇吸收抑制剂、聚合胆汁酸吸附剂、胆汁酸再吸收抑制剂、脂肪酶抑制剂和脂蛋白(a)拮抗剂。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与胆固醇酯转移蛋白(CETP)抑制剂结合给药，所述CETP抑制剂例如并优选达塞曲匹(dalcetrapib)、BAY 60-5521、anacetrapib oder CETP疫苗(CETi-1)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与甲状腺受体激动剂结合给药，所述甲状腺受体激动剂例如并优选D-甲状腺素、3,5,3'-三碘甲状腺氨酸(T3)、CGS23425或阿昔替罗(axitirome)(CGS 26214)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与他汀类的HMG-CoA还原酶抑制剂结合给药，所述他汀类的HMG-CoA还原酶抑制剂例如并优选咯伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、罗伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与鲨烯合成抑制剂结合给药，所述鲨烯合成抑制剂例如并优选BMS-188494或TAK-475。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与ACAT抑制剂结合给药，所述ACAT抑制剂例如并优选阿伐麦布(avasimibe)、甲亚油酰胺(melinamide)、帕替麦布(pactimibe)、依鲁麦布(eflucimibe)或SMP-797。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与MTP抑制剂结合给药，所述MTP抑制剂例如并优选英普他派(implitapide)、BMS-201038、R-103757或JTT-130。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与PPAR-γ激动剂结合给药，所述PPAR-γ激动剂例如并优选吡格列酮(pioglitazone)或罗格列酮(rosiglitazone)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与PPAR-δ激动剂结合给药，所述PPAR-δ激动剂例如并优选GW 501516或BAY 68-5042。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与胆固醇吸收抑制剂结合给药，所述胆固醇吸收抑制剂例如并优选依泽替米贝(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕马苷(pamaqueside)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与脂肪酶抑制剂结合给药，所述脂肪酶抑制剂例如并优选奥利司他(orlistat)。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与聚合胆汁酸吸附剂结合给药，所述聚合胆汁酸吸附剂例如并优选消胆胺(cholestyramine)、考来替泊(colestipol)、考来维仑(colesolvam)、CholestaGel或colestimide.

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与胆汁酸再吸收抑制剂结合给药，所述胆汁酸再吸收抑制剂例如并优选ASBT(＝IBAT)抑制剂，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635。

在本发明一个优选的实施方案中，本发明的化合物与脂蛋白(a)拮抗剂结合给药，所述脂蛋白(a)拮抗剂例如并优选gemcabene calcium(CI-1027)或烟酸。

本发明还提供包含至少一种本发明的化合物、通常连同一种或多种惰性的、非毒性的可药用赋形剂的药物，以及提供其用于上文提及的目的的用途。

本发明的化合物可系统地作用和/或局部地作用。对此目的，其可以适合的方式给药，例如通过口服、肠胃外、肺、鼻、舌下、舌、颊、直肠、真皮、透皮、结膜、耳道给药，或作为植入物或支架给药。

对这些给药途径，本发明的化合物可以适合的给药形式来给药。

对于口服给药适合的给药方式为根据现有技术操作的给药方式，其快速和/或缓和地释放本发明的化合物并且其含有结晶的和/或无定形和/或溶解形式的本发明化合物，例如片剂(未包衣或包衣片剂，例如具有抗胃液或推迟溶解或不溶性包衣，所述包衣控制本发明的化合物的释放)、在口腔中迅速崩解的片剂或薄膜/扁剂、薄膜/冻干剂或胶囊剂(例如硬或软明胶胶囊)、糖衣片剂、颗粒剂、丸剂、粉末剂、乳剂、悬浮剂、气溶胶或溶液剂。

肠胃外给药可通过不含吸收步骤(例如通过静脉内、动脉内、心内、椎内或腰内途径)或包含吸收步骤(例如通过肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内途径)而完成。适于肠胃外给药的给药形式包括溶液剂、悬浮剂、乳剂、冻干剂或无菌粉末形式的注射和输液用制剂。

对于其他的给药途径，适合的实例为可吸入药物形式(包括粉雾剂、喷雾剂)、滴鼻剂、溶液剂或喷雾剂、片剂、用于舌的薄膜/扁剂或胶囊剂、舌下或颊给药、栓剂、耳部或眼部制剂、阴道胶囊剂、水悬剂(洗剂、振荡合剂(shaking mixtures))、亲脂性悬浮剂、软膏剂、膏剂(creams)、透皮治疗性系统(例如贴剂)、乳剂、糊剂、泡沫剂、洒粉剂、植入物或支架。

优选口服或肠胃外给药，特别是口服给药。

本发明的化合物可被转化成所提及的给药形式。这可用本身已知的方式通过与惰性的、无毒的可药用赋形剂混合来完成。这些赋形剂包括载体(例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂和分散剂或润湿剂(例如十二烷基硫酸钠、聚氧失水山梨醇油酸酯)、粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然聚合物(例如白蛋白)、稳定剂(例如抗氧化剂，例如抗坏血酸)、染料(例如无机颜料，例如氧化铁)以及芳香剂和/或气味矫正剂。

一般来说，为实现有效的结果，已发现对肠胃外给药有利的给药量为从约0.001至1mg/kg体重，优选约0.01至0.5mg/kg体重。对于口服给药，剂量为约0.01至100mg/kg体重，优选约0.01至20mg/kg体重且最优选0.1至10mg/kg体重。

然而在一些情况如果需要可偏离所述剂量，具体地，取决于以下因素：体重、给药途径、对活性成分的个体反应、制剂的性质及给药时间或给药间隔。因此，在某些情况下，低于所提及的最小量可以是足够的，而在其他情况下，必须超过所提及的上限。对于相对大量地给药，可取的是在一天的时间内将这些剂量划分成几个单独的剂量。

下文的工作实施例阐明了本发明。本发明不限于这些实施例。

在下文的测试及实施例中的百分比——除非另有说明——为重量百分比；份为重量份。对于液体/液体溶液的溶剂比、稀释比及浓度值均基于体积计。

A.实施例

缩写和首字母缩略词：

aq. 水溶液

calc. 计算值

DCI 直接化学电离(在MS中)

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

eq. 当量

ESI 电喷雾电离(在MS中)

Et 乙基

h 小时

HPLC 高压高效液相色谱

HRMS 高分辨质谱

conc. 浓的

LC/MS 液相色谱耦合的质谱

LiHMDS 六甲基二硅基氨基锂

Me 甲基

min 分钟

MS 质谱

NMR 核磁共振谱

Pd₂dba₃ 三(二亚苄基丙酮)二钯

Ph 苯基

RT 室温

R_t 保留时间(在HPLC中)

t-Bu 叔丁基

THF 四氢呋喃

UV 紫外光谱

v/v (溶液)体积比体积的比例

XPHOS 二环己基(2',4',6'-三异丙基联苯-2-基)膦

LC/MS方法：

方法1(LC-MS):

仪器：Waters ACQUITY SQD UPLC系统；柱：Waters Acquity UPLC HSS T31.8μ50x1mm；洗脱液A:1l水+0.25ml 99％甲酸，洗脱液B：1l乙腈+0.25ml 99％甲酸；梯度：0.0分钟90％A→1.2分钟5％A→2.0分钟5％A；炉温:50℃；流速：0.40ml/分钟；UV检测：210-400nm。

方法2(LC-MS):

MS仪器：Waters ZQ；HPLC仪器：Agilent 1100Series；UV DAD；柱：ThermoHypersil GOLD 3μ20mm x 4mm；洗脱液A:1l水+0.5ml 50％甲酸，洗脱液B:1l乙腈+0.5ml50％甲酸；梯度：0.0分钟100％A→3.0分钟10％A→4.0分钟10％A；炉温：55℃；流速：2ml/分钟；UV检测：210nm。

方法3(LC-MS):

仪器：Waters ACQUITY SQD UPLC系统；柱：Waters Acquity UPLC HSS T31.8μ30x2mm；洗脱液A：1l水+0.25ml 99％甲酸，洗脱液B:1l乙腈+0.25ml 99％甲酸；梯度：0.0分钟90％A→1.2分钟5％A→2.0分钟5％A；炉温：50℃；流速：0.60ml/分钟；UV检测：208-400nm。

原料和中间体：

实施例1A

1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亚胺酰胺(carboximidamide)盐酸盐

该化合物的合成记载于WO 2003/095451，实施例6A。

实施例2A

2,6-二氯-5-氟代烟酰胺

在60-65℃下，将25g(130.90mmol)2,6-二氯-5-氟-3-氰基吡啶在浓硫酸(125ml)中的悬浮液搅拌1小时。在冷却至室温后，将烧瓶的内容物倾倒至冰水中并用乙酸乙酯萃取三次(每次100ml)。合并的有机相用水(100ml)洗涤，然后用饱和的碳酸氢钠水溶液(100ml)洗涤，干燥并在旋转蒸发仪上浓缩。得到的物质在高度真空下干燥。

收率：24.5g(理论值的90％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝7.95(br s,1H),8.11(br s,1H),8.24(d,1H)。

实施例3A

2-氯-5-氟代烟酰胺

在室温下，将21.9g(335.35mmol)锌在甲醇(207ml)中的悬浮液与44g(210.58mmol)2,6-二氯-5-氟烟酰胺混合。然后加入乙酸(18.5ml)，并且将混合物在搅拌下加热至回流，持续24小时。然后将烧瓶内除锌之外的内容物倒出，然后加入乙酸乙酯(414ml)和饱和的碳酸氢钠水溶液(414ml)，随后剧烈地搅拌。随后，反应混合物通过硅藻土用抽滤过滤并用乙酸乙酯洗涤三次(每次517ml)。移除有机相且用乙酸乙酯(258ml)洗涤水相。合并的有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(414ml)洗涤一次，干燥并在减压下浓缩。向由此得到的晶体中加入二氯甲烷(388ml)，并且将所得混合物搅拌20分钟。混合物再次用抽滤过滤、用乙醚洗涤并抽干。

收率：20.2g(理论值的53％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝7.87(br s,1H),7.99(dd,1H),8.10(br s,1H),8.52(d,1H)。

实施例4A

2-氯-5-氟烟腈(nicotinonitrile)

将81.2ml(582.25mmol)三乙胺加入到46.2g(264.66mmol)2-氯-5-氟烟酰胺在二氯甲烷(783ml)的悬浮液中，然后将混合物冷却至0℃。然后，在搅拌下缓慢滴加41.12ml(291.13mmol)三氟乙酸酐，并将混合物在0℃下搅拌1.5小时。随后，反应溶液用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤两次(每次391ml)，干燥并在减压下浓缩。

收率:42.1g(理论值的90％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝8.66(dd,1H),8.82(d,1H)。

实施例5A

5-氟-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺

首先将38.5g(245.93mmol)2-氯-5-氟烟腈的悬浮液加入到1,2-乙二醇(380ml)中，然后加入水合肼(119.6ml,2.459mol)。将所得混合物在搅拌下回流加热4小时。产物在冷却过程中沉淀。将水(380ml)加入到黄色晶体中，将混合物在室温下搅拌10分钟。然后将悬浮液通过烧结过滤器(frit)抽滤并用水(200ml)和-10℃的THF(200ml)洗涤。残留物在高真空下用五氧化二磷干燥。

收率:22.8g(理论值的61％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝5.54(s,2H),7.96(dd,1H),8.38(m,1H),12.07(m,1H)。

实施例6A

5-氟-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先将10g(65.75mmol)5-氟-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-胺加入到THF(329ml)中，然后将混合物冷却至0℃。然后逐渐加入16.65ml(131.46mmol)三氟化硼乙醚络合物。将反应混合物进一步冷却至-10℃。然后逐渐加入10.01g(85.45mmol)亚硝酸异戊酯在THF(24.39ml)中的溶液，将所得混合物再搅拌30分钟。混合物用冷的乙醚(329ml)稀释，并且滤出得到的固体。将由此制备的重氮盐分次加入到在0℃下的12.81g(85.45mmol)碘化钠在丙酮(329ml)中的溶液中，将混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物倒入冰水(1.8 l)中并用乙酸乙酯萃取两次(每次487ml)。收集的有机相用饱和的氯化钠水溶液(244ml)洗涤、干燥、过滤并浓缩。得到12.1g(纯度86％，理论值的60％)固体形式的所需化合物。粗产物不经进一步纯化即进行转化。

LC-MS(方法1):R_t＝1.68分钟；MS(ESIpos):m/z＝264(M+H)⁺

实施例7A

5-氟-1-(2-氟代苄基)-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先将12.1g(39.65mmol)来自实施例6A的化合物加入到DMF(217ml)中，然后加入8.25g(43.62mmol)2-氟苄基溴和14.21g(43.62mmol)碳酸铯。将混合物在室温下搅拌两小时。然后将反应混合物倒入水(1.17l)中并用乙酸乙酯(502ml)萃取两次。收集的有机相用饱和的氯化钠水溶液(335ml)洗涤、干燥、过滤并浓缩。残留物在硅胶上用色谱法分离(洗脱液：97:3石油醚/乙酸乙酯)，然后浓缩产物级分。得到9.0g(理论值的61％)固体形式的所需化合物。将所得固体加入到乙酸乙酯中并用10％的硫代硫酸钠水溶液洗涤，然后用饱和的氯化钠水溶液洗涤、干燥并浓缩。

LC-MS(方法2):R_t＝2.57分钟

MS(ESIpos):m/z＝372(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝5.73(s,2H),7.13-7.26(m,3H),7.33-7.41(m,1H),7.94(dd,1H),8.69-8.73(m,1H)。

实施例8A

5-氟-1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈

首先将16.03g(43.19mmol)5-氟-1-(2-氟代苄基)-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶(实施例7A)和4.25g(47.51mmol)氰化铜的悬浮液加入到DMSO(120ml)中并于150℃搅拌2小时。在冷却后，将烧瓶的内容物冷却至约40℃并倒入浓氨水(90ml)与水(500ml)的溶液中，加入乙酸乙酯(200ml)并将混合物简单搅拌。移除水相并用乙酸乙酯萃取两次(每次200ml)。合并的有机相用10％的氯化钠水溶液洗涤两次(每次100ml)，用硫酸钠干燥并在减压下浓缩。粗产物不经进一步纯化即进行转化。

收率:11.1g(理论值的91％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝5.87(s,2H),7.17-7.42(m,4H),8.52(dd,1H),8.87(dd,1H)。

实施例9A

5-氟-1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亚胺酰胺乙酸盐

将11.1g(41.07mmol)5-氟-1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈(实施例8A)加入到在甲醇(270ml)中的2.22g(41.07mmol)甲醇钠中，并将混合物在室温下搅拌2小时。然后加入2.64g(49.29mmol)氯化铵和乙酸(9.17ml)，然后将混合物加热至回流过夜。然后将其浓缩至干燥，然后将残留物加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml)中并用2N的氢氧化钠水溶液调整pH至10。将所得混合物在室温下剧烈搅拌约1小时。得到的悬浮液用抽滤过滤并用乙酸乙酯(100ml)、用水(100ml)并再次用乙酸乙酯(100ml)洗涤。残留物在高真空下用五氧化二磷干燥。

收率:9.6g(理论值的78％)

MS(ESIpos):m/z＝288(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝1.85(s,3H),5.80(s,2H),7.14-7.25(m,3H),7.36(m,1H),8.42(dd,1H),8.72(dd,1H)。

实施例10A

3,3-二氰基-2,2-二甲基丙酸甲酯

在THF(91ml)中，将1.816g(45.411mmol)氢化钠(60％在矿物油中)逐渐与3g(45.411mmol)丙二腈混合。随后加入5.876ml(45.411mmol)2-溴-2-甲基丙酸甲酯并将混合物在室温下搅拌过夜。此后加入另外5.876ml(45.411mmol)2-溴-2-甲基丙酸甲酯并将所得混合物在50℃下加热过夜。然后再加入1.762ml(13.623mmol)2-溴-2-甲基丙酸甲酯并将所得混合物在50℃下再加热4小时。然后将所得混合物与饱和的碳酸氢钠水溶液混合并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液洗涤、用硫酸钠干燥、过滤并浓缩至干燥。得到8.9g粗产物，其通过在硅胶上的色谱法纯化(4:1环己烷-乙酸乙酯)。

收率:6.47g(理论值的85％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.40(s,6H),3.74(s,3H),5.27(s,1H)。

实施例11A

3-溴代四氢呋喃-3-甲酸甲酯

将5.0g(38.419mmol)四氢呋喃-3-甲酸甲酯(类似于：J.Org.Chem.1996,2690的方法制备)溶解于200ml THF中并冷却至-78℃，然后加入76.83ml的浓度为1M的双(三甲基硅烷基)氨基锂在THF中的溶液。在-78℃下30分钟后，逐渐加入悬浮在50ml THF中的10.26g(57.63mmol)N-溴代丁二酰亚胺。此后，任由所得混合物升温至室温过夜。然后将所得混合物与水混合并用乙酸乙酯萃取。分离各相并且水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液洗涤，然后用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。粗产物通过在硅胶上进行色谱法纯化(洗脱液：二氯甲烷)。得到491mg(理论值的6％)目标化合物。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ[ppm]＝2.49(ddd,1H),2.74(ddd,1H),3.83(s,3H),4.03-4.10(m,1H),4.11-4.17(m,2H),4.31(d,1H)。

实施例12A

3-(二氰基甲基)四氢呋喃-3-甲酸甲酯

首先将440mg(11.00mmol)氢化钠(60％在矿物油中)加入到30mlTHF中，然后分次加入726mg(11.00mmol)丙二腈。此后，加入在THF(50ml)中的2.3g(11.00mmol)在实施例11A中得到的化合物。所得混合物在室温下搅拌6小时，然后在50℃下加热过夜。在冷却后，将混合物与饱和的碳酸氢钠水溶液混合并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液洗涤，然后用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。将残留物(2.66g)在高真空下干燥1小时，然后不经进一步纯化即进行转化。

实施例13A

2-甲氧基-4-甲基-6-氧-1,4,5,6-四氢吡啶-3-甲腈

该化合物的合成记载于：Heterocycles,1985；1135–1141。

实施例14A

2-甲氧基-6-羰基-4-(三氟甲基)-1,4,5,6-四氢吡啶-3-甲腈

首先将在甲醇(85ml)中的7.47g(138.39mmol)甲醇钠用冰冷却，然后分次加入6.04g(91.44mmol)丙二腈。随后，在搅拌下滴加11.84g(76.84mmol)4,4,4-三氟巴豆酸甲酯，并且所得混合物在室温下搅拌30分钟然后加热至回流1小时。此后，混合物在减压下浓缩至干燥。将残留物与水混合并用乙酸乙酯萃取四次。合并的有机相用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。通过在硅胶上的色谱法(3:1环己烷-乙酸乙酯)进行进一步纯化。得到1.95g目标化合物(理论值的11％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.61分钟；MS(ESIpos):m/z＝221(M+H)⁺

实施例15A

5-氟-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶

该合成记载于：WO 2006/130673，方案D。

实施例16A

3-碘-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先将10.00g(40.813mmol)实施例15A化合物加入到DMF(170ml)中，然后加入在DMF(30ml)中的12.30g(44.894mmol)1,1,1,2,2-五氟-4-碘代丁烷和14.628g(44.894mmol)碳酸铯。所得混合物在室温下搅拌2天。随后，加入另外12.30g(44.894mmol)1,1,1,2,2-五氟-4-碘代丁烷和14.628g(44.894mmol)碳酸铯并且将所得混合物在室温下搅拌2天。此后，加入3.485g(12.720mmol)1,1,1,2,2-五氟-4-碘代丁烷和4.145g(12.720mmol)碳酸铯并且将所得混合物在室温下搅拌过夜。在此阶段后，加入5.00g(18.250mmol)1,1,1,2,2-五氟-4-碘代丁烷和5.946g(18.250mmol)碳酸铯并且将所得混合物在室温下搅拌6天。然后将混合物在70℃搅拌2天。用抽滤滤出固体并用DMF洗涤，然后将液体在高真空下浓缩。残留物通过制备型HPLC纯化(甲醇：水(含0.1％甲酸)梯度)。得到5.48g(理论值的34％)固体形式的标题化合物。

LC-MS(方法3):R_t＝1.23分钟

MS(ESIpos):m/z＝392(M+H)⁺

1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝2.87-3.00(m,2H),4.81(t,2H),7.33(dd,1H),7.97(dd,1H),8.65(dd,1H)。

实施例17A

1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈

首先将5.480g(14.012mmol)实施例16A化合物和1.380g(15.414mmol)氰化亚铜的悬浮液加入到DMSO(50ml)中并于150℃搅拌3小时。在冷却后，将所得混合物通过硅藻土过滤并用乙酸乙酯和THF洗涤。随后用饱和的氯化铵水溶液和浓氨水(3:1,v/v)洗涤四次，然后用饱和的氯化钠水溶液洗涤。有机相用硫酸钠干燥、过滤并浓缩，然后在高真空下干燥。

收率:3.59g(理论值的88％)

LC-MS(方法1):R_t＝1.04分钟

MS(ESIpos):m/z＝291(M+H)⁺

1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝2.97-3.10(m,2H),4.94(t,2H),7.55(dd,1H),8.51(dd,1H),8.81(dd,1H)。

实施例18A

1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亚胺酰胺乙酸盐

将在甲醇(20ml)中的3.59g(12,371mmol)实施例17A化合物加入到在甲醇(40ml)中的0.668g(12.371mmol)甲醇钠中，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。然后加入0.794g(14,845mmol)氯化铵和乙酸(2.762ml)，并且将所得混合物加热至回流过夜。此后，将混合物浓缩至干，并将残留物与乙酸乙酯和1N氢氧化钠溶液混合。所得混合物在室温下剧烈搅拌约1小时。用抽滤滤出得到的固体并用乙酸乙酯和水洗涤。残留物在高真空下干燥。得到0.507g(理论值的11％，纯度100％)。对于各种洗涤级分，分离各相，且水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用水和饱和的氯化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥、过滤并浓缩，然后在高真空下干燥。又得到2.76g(理论值的43％，纯度71％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.58分钟

MS(ESIpos):m/z＝308(M+H)⁺

1H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ＝1.84(s,3H),2.95-3.08(m,2H),4.85(t,2H),7.39(dd,1H),8.63-8.67(m,2H)。

实施例19A

5-氟-3-碘-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶

首先将5.0g(19.010mmol)5-氟-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶加入到DMF(100ml)中，然后加入20.83g(76.042mmol)1,1,1,2,2-五氟-4-碘丁烷、以及14.86g(45.65mmol)碳酸铯和0.63g(3.802mmol)碘化钾。将混合物在140℃下搅拌过夜。然后将混合物冷却并与从200mg5-氟-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶类似进行的在先实验所得产物合并。用抽滤滤出固体并用DMF洗涤，然后将液体在高真空下浓缩。残留物通过制备型HPLC的方法纯化(甲醇：水梯度)。得到4.34g(理论值的52％)固体形式的标题化合物。

LC-MS(方法3):R_t＝1.30分钟

MS(ESIpos):m/z＝410(M+H)⁺

1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝2.84-3.00(m,2H),4.79(t,2H),7.93(dd,1H),8.71(dd,1H)。

实施例20A

5-氟-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲腈

首先将4.34g(10.609mmol)实施例19A化合物和1.045g(11.670mmol)氰化亚铜的悬浮液加入到DMSO(30ml)中并于150℃下搅拌2小时。在冷却后，将所得混合物通过硅藻土过滤，用乙酸乙酯和THF洗涤，然后用饱和的氯化铵水溶液和浓氨水(3:1v/v)萃取4次。合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液洗涤、用硫酸钠干燥、过滤并在减压下浓缩。

收率:3.19g(理论值的97％)

1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ＝2.94-3.09(m,2H),4.93(t,2H),8.54(dd,1H),8.88(dd,1H)。

实施例21A

5-氟-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-甲酰亚胺酰胺乙酸盐

将3.19g(10,351mmol)实施例20A化合物加入到在甲醇(25ml)中的0.559g(10.351mmol)甲醇钠中，并且将所得混合物在室温下搅拌2小时。此后，加入0.664g(12.421mmol)氯化铵和乙酸(2.31ml)并且将所得混合物加热至回流过夜。此后，将混合物浓缩至干并且将残留物与乙酸乙酯和1N氢氧化钠溶液混合。分离各相。水相再次用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相合并并浓缩。

收率:2.67g(理论值的37％，近似56％的纯度)

LC-MS(方法1):R_t＝0.68分钟

MS(ESIpos):m/z＝326(M+H)⁺

工作实施例：

实施例1

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

步骤a)

首先将1.51g(37.84mmol)氢化钠(60％在矿物油中)加入到10mlDMSO中。此后，在冷却下逐渐滴加在DMSO(10ml)中的2.5g(37.843mmol)丙二腈并且将所得混合物搅拌10分钟。随后在室温下，滴加在DMSO(10ml)中的3.582ml(37.843mmol)溴乙酸甲酯。将所得混合物在室温下再搅拌2小时。然后该反应通过加入饱和氯化铵水溶液停止，然后加入乙酸乙酯。分离各相且将水相再次用乙酸乙酯萃取。合并的有机相再次用饱和的氯化铵水溶液洗涤。随后用硫酸钠干燥、过滤并浓缩至干燥。粗产物不经进一步纯化即用于步骤b)：

步骤b)

首先将1.04g(3.403mmol)实施例1A化合物加入到叔丁醇中，然后加入458mg(4.083mmol)叔丁醇钾。随后，加入在叔丁醇中的470mg(3.403mmol)来自步骤a)的粗产物并且将所得混合物加热至回流过夜。在冷却后，加入水和乙酸乙酯，并且分离各相。水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用水洗涤一次并用饱和的氯化钠水溶液洗涤一次。随后用硫酸钠干燥、过滤并浓缩至干燥。残留物通过制备型HPLC的方法纯化(乙腈：水(+0.05％甲酸)梯度)。在产物级分被浓缩后，加入DMF、水和乙腈，形成不溶性残留物并将其滤出。在用乙腈洗涤所得固体后，获得23mg目标化合物(理论值的2％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.82分钟；MS(ESIpos):m/z＝376(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝3.34(s,2H),5.81(s,2H),6.85(s br,2H),7.13-7.25(m,3H),7.33-7.40(m,2H),8.63(dd,1H),8.99(dd,1H),10.95(s br,1H)。

实施例2

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先将5.887g(19.256mmol)实施例1A化合物加入到叔丁醇(50ml)中，然后加入2.593g(23.107mmol)叔丁醇钾。随后，逐滴加入在叔丁醇(25ml)中的3.2g(19.256mmol)实施例10A化合物并且将所得混合物加热至回流过夜。第二天，加入另外0.64g(3.851mmol)实施例10A化合物并且将所得混合物加热至回流再持续一天。在冷却后，滤出沉淀，将所述沉淀用乙醚洗涤。随后将所得沉淀悬浮在水中，再次滤出并用乙醚洗涤。在高真空下干燥后，得到6.65g目标化合物(理论值的85％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.90分钟；MS(ESIpos):m/z＝404(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.35(s,6H),5.82(s,2H),6.82(br s,2H),7.14-7.25(m,3H),7.33-7.40(m,2H),8.63(dd,1H),9.03(dd,1H),10.98(s br,1H)。

实施例3

4-氨基-2-[5-氟-1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

类似于实施例2的制备，使4.18g(12.035mmol)实施例9A化合物与2.20g(13.239mmol)实施例10A化合物反应。得到3.72g目标化合物(理论值的73％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.98分钟；MS(ESIpos):m/z＝422(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.34(s,6H),5.81(s,2H),6.85(br s,2H),7.13-7.25(m,3H),7.36(m,1H),8.69(dd,1H),8.84(dd,1H),10.96(s br,1H)。

实施例4

4'-氨基-2'-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-4,5-二氢螺[呋喃-3,5'-吡咯并[2,3-d]嘧啶]-6'(7'H)-酮

类似于实施例2的制备，使2.257g(7.382mmol)实施例1A化合物与1.434g(7.382mmol)实施例12A化合物反应。得到566mg目标化合物(理论值的17％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.84分钟；MS(ESIpos):m/z＝432(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝2.20-2.37(m,2H),3.71(d,1H),3.90(q,1H),4.10(d,1H),4.25-4.31(m,1H),5.82(s,2H),6.57(br s,2H),7.12-7.25(m,3H),7.33-7.41(m,2H),8.64(dd,1H),9.02(dd,1H),11.96(s br,1H)。

实施例5

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮

首先将2.174g(7.112mmol)实施例1A化合物和1.3g(7.823mmol)实施例13A化合物加入到20ml甲醇中，然后在室温下分次加入422mg(7.823mmol)甲醇钠。将所得混合物在室温下搅拌10分钟，然后加热至回流过夜。在冷却后，将乙酸(0.5ml)和水(20ml)加入到混合物中并将其置于冰浴中冷却。用抽滤滤出沉淀、用水和甲醇洗涤，然后在高真空下干燥。得到2.51g目标化合物(理论值的87％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.85分钟；MS(ESIpos):m/z＝404(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.04(d,3H),2.31(d,1H),2.79(dd,1H),3.13-3.19(m,1H),5.81(s,2H),6.93(br s,2H),7.12-7.25(m,3H),7.34-7.37(m,2H),8.62(dd,1H),9.14(dd,1H),10.56(s,1H)。

实施例6

4-氨基-2-[1-(2-氟代苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5-(三氟甲基)-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮

首先将694mg(2.271mmol)实施例1A化合物和500mg(2.271mmol)实施例14A化合物加入到10ml叔丁醇中，然后在室温下分次加入305mg(2.725mmol)叔丁醇钾。将所得混合物在室温下搅拌10分钟，然后加热至回流2天。在冷却后，将水和乙酸乙酯加入到混合物中。用抽滤滤出沉淀。浓缩滤液，加入一点乙酸乙酯和乙醚，并且用抽滤滤出形成的沉淀。随后将来自两个分步骤的合并的固体在高真空下干燥。得到588mg目标化合物(理论值的53％)。

LC-MS(方法1):Rt＝0.92分钟；MS(ESIpos):m/z＝458(M+H)⁺

1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]＝2.63(d,1H),3.19(dd,1H),4.16-4.20(m,1H),5.83(s,2H),7.13-7.40(m,7H),8.63(dd,1H),9.15(dd,1H),10.85(s,1H)。

实施例7

4-氨基-5,5-二甲基-2-[1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先将500mg(1.361mmol)实施例18A化合物加入到叔丁醇(7.5ml)中，然后加入183mg(1.361mmol)叔丁醇钾。随后，逐滴加入在叔丁醇(2.5ml)中的226mg(1.361mmol)实施例10A化合物并且将所得混合物加热至回流过夜。在冷却后，加入乙酸乙酯和水，分离各相并且将水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机相用饱和的氯化钠水溶液洗涤、用硫酸钠干燥、过滤并浓缩。残留物用甲醇搅拌并用抽滤滤出固体。该固体用甲醇剧烈地洗涤，并且合并的滤液被浓缩，然后通过制备型HPLC的方法纯化(乙腈：水(+0.05％甲酸)梯度)。得到127mg标题化合物(理论值的21％)。

LC-MS(方法1):R_t＝0.93分钟；MS(ESIpos):m/z＝442(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.36(s,6H),2.91-3.04(m,2H),4.88(t,2H),6.83(br s,2H),7.38(dd,1H),8.63(dd,1H),9.02(dd,1H),11.01(s br,1H)。

实施例8

4-氨基-2-[5-氟-1-(3,3,4,4,4-五氟丁基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮

首先将520mg(1.350mmol)实施例21A化合物加入到叔丁醇(10ml)中，并加入181mg(1.620mmol)叔丁醇钾。随后加入在叔丁醇(2.5ml)中的224mg(1.350mmol)实施例10A化合物并且将所得混合物加热至回流过夜。随后，加入另外112mg(0.675mmol)实施例10A化合物并且将所得混合物再加热至回流持续7.5小时。在冷却后，加入水和乙醇并且将混合物置于超声波浴中1小时。这个过程形成沉淀，用抽滤滤出所述沉淀并用水洗涤。将滤饼与少量乙醇(2-3ml)搅拌并再次用抽滤过滤。所得固体在高真空下干燥。得到212mg标题化合物(理论值的34％)。

LC-MS(方法1):R_t＝1.01分钟；MS(ESIpos):m/z＝460(M+H)⁺

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ[ppm]＝1.36(s,6H),2.92-3.04(m,2H),4.87(t,2H),6.88(br s,2H),8.71(s br,1H),8.85(dd,1H),11.01(s br,1H)。

B.药效的测定

本发明的化合物的药理作用可在下文的测定中示出：

B-1.体外血管舒张作用

将兔从颈部打昏，然后放血。取出主动脉，除去粘附组织并分割成1.5mm宽的环，在37℃下，将其在预应力下单独地放置于含有卡波金冲洗(carbogen-sparged)的Krebs-Henseleit溶液的5ml器官浴槽中，所述溶液具有下述成分(各为mM)：氯化钠119；氯化钾：4.8；二水氯化钙：1；七水硫酸镁：1.4；磷酸二氢钾：1.2；碳酸氢钠：25；葡萄糖：10。用Statham UC2细胞测定收缩力，使用A/D传感器(DAS-1802HC,Keithley InstrumentsMunich)将收缩力放大并数字化，然后平行记录在线性记录器中。为了产生收缩，将苯肾上腺素以增加的浓度累积地加入到浴槽中。在几个对照循环后，将待研究的物质在每下一轮中以每次增加的剂量加入，并且将收缩的程度与在上轮运行中获得的收缩程度进行比较。这被用于计算使对照值的大小减小50％所需的浓度(IC₅₀值)。标准给药体积为5μl；在浴槽溶液中的DMSO含量相当于0.1％。

本发明的化合物的代表性IC₅₀值在下表中示出(表1)：

表1:

实施例编号	IC₅₀[nM]
		2	48
3	9.3
		4	24

B-2.对重组鸟氨酸环化酶受体细胞系的作用

本发明的化合物的细胞作用在重组鸟氨酸环化酶受体细胞系上测定，如F.Wunderet al.,Anal.Biochem.339,104-112(2005)所述。

本发明的化合物的代表值(MEC＝最小有效浓度)在下表中示出(表2)：

表2:

实施例编号	MEC[μM]
		2	0.001
3	0,001
		4	0,003

B-3.对有意识的、自发性高血压的大鼠血压的无线电遥测测量

市售的来自DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI,USA的遥测系统被用于对下文描述的有意识的大鼠进行血压测量。

所述系统由3个主要组件组成：

-植入式发射器(遥测发射器)

-接收器(接收器)，其通过多路转接器(DSI Data ExchangeMatrix)连接于

-数据采集计算机。

所述遥测系统使得连续地记录有意识的动物在其通常的栖息地的血压、心率和身体活动成为可能。

动物材料

测试在体重>200g的成熟雌性自发性高血压大鼠(SHR Okamoto)中进行。来自Okamoto Kyoto医学院(1963)的SHR/NCrl是具有大大升高的血压的雄性Wistar Kyoto大鼠与具有稍微升高的血压的雌性大鼠的杂交种，且其被送交美国国立卫生研究院(U.S.National Institutes of Health)的F13。

在将发射器植入后，实验动物被单独圈养在3型Makrolon笼中。其可自由获得常规饲料和水。

在实验室内白天/夜晚的节律由在6:00am以及在7:00pm的室内照明改变。

发射器植入

在第一次实验应用至少14天之前，将所用的TA11PA-C40遥测发射器在无菌条件下手术植入到实验动物中。用这种方式安装仪器的动物可在伤口愈合以及安放植入物后被反复使用。

对于植入，用戊巴比妥(耐波他(Nembutal)，Sanofi:50mg/kg腹膜内给药)麻醉禁食的动物，然后在其腹部一大块面积上剃毛并消毒。在沿着白线打开腹腔后，将所述系统的装满液体的测量导管插入到在分叉点上方颅骨方向的降主动脉中并用组织胶(VetBonD^TM,3M)固定。发射器外壳在腹腔内被固定至腹壁肌肉，且伤口被一层层地封闭。

为了预防感染，在术后给予抗生素(Tardomyocel COMP,Bayer,1ml/kg，皮下注射)。

物质和溶液

除非另有说明，将待研究的物质各自通过管饲法口服给予一组动物(n＝6)。依照5ml/kg体重的给药体积，将测试物溶解于合适的溶剂混合物中或悬浮在0.5％的甲基纤维素(Tylose)中。

溶剂处理组的动物被用作对照组。

测试步骤

将所述遥测测量装置分配给24个动物。每个实验均以实验编号(V年月日)记录。

在所述系统中生存的安装仪器的大鼠各自被分配单独的接受天线(1010Receiver,DSI)。

所述植入式发射器可通过整合的磁开关在外部激活。在实验预备阶段中将其切换到传输。信号发射可通过数据采集系统(Dataquest^TM A.R.T.for WINDOWS,DSI)在线记录并相应地处理。数据被各自储存在为此目的创建的文件中并带有实验编号。

在标准程序中，在每种情况下以10秒为周期测量下述指标：

-收缩压(SBP)

-舒张压(DBP)

-平均动脉压(MAP)

-心率(HR)

-活性(ACT)。

在计算机控制下以5分钟间隔对测量值进行重复采集。作为绝对值获得的源数据在图表中用当前测量的气压(环境压力参考监视器；APR-1)校正并作为单独数据储存。其他技术细节在厂商公司(DSI)大量的文档中给出。

除非另有说明，在实验当天的9.00am给予测试物。在给药后，在24小时内测量上文描述的参数。.

评价

在实验结束后，使用分析软件(DATAQUEST^TM A.R.T.TM ANALYSIS)分类采集的单个数据。空白值被假定是给药前2小时，因此被挑选的数据集涵盖从实验当天7.00am至第二天9.00am的时间。

通过测量平均值(15分钟平均)使数据在一段可调节的时间上平滑并作为文本文档转移至储存介质中。将用这种方法预分类并压缩的测量值转移到Excel模板中并制表。对于每日的实验，将得到的数据储存在带有实验编号的专用文件中。结果和测试方案以编号分类的纸件的形式存档。

参考文献

Klaus Witte,Kai Hu,Johanna Swiatek,Claudia Müssig，Georg Ertl andLemmer:Experimental heart failure in rats:effects on cardiovascularcircadian rhythms and on myocardialβ-adrenergic signaling.Cardiovasc Res 47(2):203-405,2000；Kozo Okamoto:Spontaneous hypertension in rats.Int Rev ExpPathol 7:227-270,1969；Maarten van den Buuse:Circadian Rhythms of BloodPressure,Heart Rate,and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Ratsas Measured With Radio-Telemetry.Physiology&Behavior 55(4):783-787,1994

C.对于药物组合物的工作实施例

本发明的化合物可被转化成如下的药物制剂。

片剂：

组合物：

100mg本发明的化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米淀粉(天然)、10mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(BASF,Ludwigshafen,Germany)和2mg硬脂酸镁。

片重212mg、直径8mm、曲率半径12mm。

制备：

将本发明的化合物、乳糖和淀粉的混合物用5％(w/w)的PVP水溶液制粒。将所得颗粒干燥，然后与硬脂酸镁掺混5分钟。将该混合物用常用的压片机压片(对于片剂形式参见上文)。用于压片的压力指导值为15kN。

用于口服给药的悬浮剂：

组合物：

1000mg本发明的化合物、1000mg乙醇(96％)、400mg(来自FMC的黄原胶,Pennsylvania,USA)以及99g水。

单次剂量的100mg本发明的化合物相当于10ml的口服悬浮剂。

制备：

将Rhodigel悬浮在乙醇中；将本发明的化合物加入到悬浮液中。在搅拌下加入水。所得混合物搅拌约6小时直到Rhodigel的溶胀完成。

用于口服给药的溶液：

组合物：

500mg本发明的化合物、2.5g聚山梨酸酯和97g聚乙二醇400。单次剂量的100mg本发明的化合物相当于20g口服溶液剂。

制备：

在搅拌下，将本发明的化合物悬浮在聚乙二醇和聚山梨酸酯的混合物中。持续搅拌操作直至本发明的化合物的溶解完成。

静脉给药溶液：

将本发明的化合物以浓度低于饱和溶解度溶解于生理可接受溶剂中(例如等渗盐水、5％葡萄糖溶液和/或30％PEG 400溶液)。将该溶液进行无菌过滤并分置于无菌且无热原的注射容器中。

Claims

1.式(I)的化合物及其盐，

其中

A为C₁-烷二基，

且

其中C₁-烷二基被1或2个取代基取代，所述取代基独立地选自(C₁-C₄)烷基，

R¹为氟，

R²为苄基，

且

其中苄基被1至3个氟取代基取代。

2.制备权利要求1定义的式(I)的化合物的方法，其特征在于

[A]在酸性条件下，使式(II)的化合物

其中R¹和R²各自如权利要求1所定义

转化为式(III)的化合物

其中R¹和R²各自如权利要求1所定义，

在惰性溶剂中、在适合的碱的存在下，式(III)的化合物与式(IV)的化合物反应

其中A如权利要求1所定义且

T¹为(C₁-C₄)烷基，

以得到式(I)的化合物

其中A、R¹和R²各自如权利要求1所定义，

并且生成的式(I)的化合物任选用合适的(ii)酸或碱转化成其盐。

3.权利要求1定义的式(I)的化合物在制备用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、缺血、血管病症、肾功能衰竭、血栓形成病症、纤维化病症和动脉硬化的药物中的用途。

4.权利要求3的用途，其中所述高血压为肺高血压。

5.包含权利要求1定义的式(I)的化合物以及惰性的、无毒的可药用赋形剂的药物。

6.包含权利要求1定义的式(I)的化合物以及其他选自以下的活性成分的药物：有机硝酸盐、NO供体、cGMP-PDE抑制剂、抗血栓形成试剂、低血压试剂及脂质代谢调节剂。

7.权利要求5或6的药物，用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、缺血、血管病症、肾功能衰竭、血栓形成病症、纤维化病症和动脉硬化。

8.权利要求7的药物，其中所述高血压为肺高血压。