KR102562576B1

KR102562576B1 - 유기 화합물

Info

Publication number: KR102562576B1
Application number: KR1020177018725A
Authority: KR
Inventors: 펑 리; 하이린 정; 그레첸 스나이더; 로렌스 피 웨노글; 조셉 핸드릭
Original assignee: 인트라-셀룰라 써래피스, 인코퍼레이티드.
Priority date: 2014-12-06
Filing date: 2015-12-07
Publication date: 2023-08-01
Also published as: US10105349B2; AU2015357498B2; US20190000807A1; KR20170089001A; CN107205993B; BR112017012005B1; RU2702732C1; EP3226862A1; BR112017012005A2; JP6608933B2; US10543194B2; IL252578A0; WO2016090382A1; CA2969597C; HK1244427A1; EP3226862A4; IL252578B; MX2017007377A; AU2015357498A1; CN107205993A

Abstract

본 발명은 상기에 기재된 바와 같은 신규한 화학식 I의 PDE2 억제 화합물, 약제로서의 그 용도 및 이들을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

유기 화합물{ORGANIC COMPOUNDS}

본 발명은 이하에 기재하는 바와 같은 화학식 I의 PDE2 억제 화합물, 약제로서의 그 용도 및 이들을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 이들 화합물은, 예를 들어 PDE2 매개 질환, 예컨대 불안증, 우울증, 자폐증 스펙트럼 장애(ASD), 조현병 및 인지력 손상의 치료에 유용하다.

PDE2는 뇌(해마, 선조체 및 전전두엽 피질 포함), 심장, 혈소판, 내피 세포, 부신 구상대 세포 및 마크로파지를 포함한 광범위하게 다양한 조직 및 세포 유형에서 발현되는 105 KDa의 동종이량체이다. cGMP가 이 효소에 바람직한 기질 및 이펙터 분자이지만, PDE2는 환형 아데노신 모노포스페이트(cAMP) 및 환형 구아노신 모노포스페이트(cGMP) 둘 모두를 가수분해시키고 많은 생리학적 과정에 관여하는 것으로 여겨지고 있다. 구체적으로, cGMP 신호전달을 감소시키는 일산화질소 신타제(NOS)의 억제가 불안완화 화합물인, 벤조디아제핀 클로르디아제폭시드의 행동 효과를 약화시키는 것으로 확인되었다. 또한, PDE2의 시판 수단 억제제, 예컨대 베이(Bay) 60-7550은 뇌에서 환형 뉴클레오티드 수준을 증가시키고 정상 및 스트레스받은 설치류에서 유의한 항불안증 및 항우울증 효과를 갖는 것으로 확인되었다(Xu et al., Eur. J. Pharmacol.(2005) 518:40-46; Masood et al., J. Pharmacol. Exp. Ther.(2008) 326:369-379; Masood et al., JPET(2009) 331:690-699; Xu et al., Intl. J. Neuropsychopharmacol.(2013) 16:835-847). 베이 60-7550에 의한 PDE2의 억제는 또한 자극된 초대 신경세포 배양물에서 용량 반응적 방식으로 cGMP 및 cAMP 수준을 상승시키고; 전기 자극에 반응하여 해마 슬라이스 조제물에서 LTP를 강화시키고; 신규 물체 인식 동물 모델에서 학습력 및 래트에서 사회 인식 작업을 강화시키며; 나이 손상 래트에서 신규 물체 기억의 습득 및 강화 단계를 개선시키고; 훈련 후 투여시 물체 위치 및 인식 작업에 대한 수행능을 개선시킨다. [Gomez et al., Bioorg. Med. Chem. Lett.(2013) 23:6522-6527]. 베이 60-7550은 또한 뇌에서 nNOS 활성의 강화를 통해 래트의 인지 및 기억 기능을 개선시키는 것으로 확인되었다(Domek-Lopacinska et al.(2008) Brain Res. 1216:68-77). 따라서, PDE2는 효과적인 행동 및 인지 기능에서 중요한 역할을 한다.

효과적인 행동 및 인식 기능 이외에도, 내피 세포에서, PDE2A mRNA 및 활성이 시험관내에서 종양 괴사 인자-α에 반응하여 고도로 유도되는 것으로 관찰되었다. 9-(6-페닐-2-옥소헥스-3-일)-2-(3,4-디메톡시벤질)-퓨린-6-온(PDP)에 의한 PDE2 활성의 선택적 억제는 내피 세포의 장벽 기능을 상당히 변경시켜서, PDE2가 아마도 병적 상태 하에서 순환계의 유체 및 단백질 온전성을 조절하는 데 중요한 기능을 한다는 것을 시사한다. 따라서, PDE2는 패혈증 또는 보다 국재된 염증 반응에 대한 양호한 약학적 표적이 될 수 있다.

최근 연구에서, PDE2 억제는 또한 폐 팽창을 유발하고, 폐혈관 리모델링을 방지하며 폐고혈압의 특징적인 우심실 비대를 감소시키는 것으로 확인되어, 폐고혈압에서 PDE2 억제의 치료적 가능성을 시사한다. [Bubb et al., "Inhibition of Phosphodiesterase 2 Augments cGMP and cAMP Signaling to Ameliorate Pulmonary Hypertension", Circulation, August 5, 2014, p.496-507, DOI:10.1161/CIRCULATIONAHA.114.009751].

유망한 약물 표적으로서의 PDE2의 동정 및 유망한 전임상 데이터에도 불구하고, 기존의 PDE2 화합물의 불충분한 대사 안정성 및 뇌 침투성에 부분적으로 기인하여 현재까지 임상 연구 중인 것으로 알려진 PDE2 억제제가 없다. 따라서, PDE2 활성을 선택적으로 억제하는 한편 우수한 생물물리적 특성이 입증된 화합물이 요구되고 있다.

본 개시는 경구 이용률 및 뇌 접근성이 개선된 강력하고 선택적인 PDE2 억제 특성을 갖는 신규한 화합물을 제공한다. 따라서, 제1 측면에서, 본 개시는 유리 형태 또는 염 형태의 하기 화학식 I의 화합물을 제공한다:

상기 식에서,

(i) R₁은 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이고;

(ii) R₂는

H,

-OH,

할로(예를 들어, 클로로),

C_1-4알킬(예를 들어, 메틸),

C_1-4알콕시(예를 들어, 메톡시 또는 에톡시),

-N(R_f)(R_g),

-C(O)N(R_h)(R_i),

-C(O)OR_j,

-CN,

C_1-4알킬티오(예를 들어, 에틸티오),

헤테로아릴(예를 들어, 피라졸릴, 예를 들어, 피라졸-1-일),

헤테로C_3-7사이클로알킬(예를 들어, 모르폴리닐(예를 들어, 모르폴린-1-일) 또는 피롤리디닐(예를 들어, 피롤리딘-1-일)), 및

아릴옥시(예를 들어, 페녹시)(여기서 상기 아릴은 하나 이상의 할로(예를 들어, 플루오로)로 임의로 치환됨)(예를 들어 4-플루오로페녹시)로 이루어진 군으로부터 선택되며;

(iii) R₃은 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이고;

(iv) R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 H, 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로), -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이고;

(v) R_f 및 R_g는 독립적으로 H, C_1-4알킬(예를 들어, 메틸) 또는 헤테로아릴(예를 들어, 피리딜(예를 들어, 피리드-2-일))이고;

(vi) R_h 및 R_i는 독립적으로 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이며;

(vii) R_j는 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다.

본 개시는 유리 형태 또는 염 형태의 하기와 같은 화학식 I의 화합물을 더 제공한다:

1.1 화학식 I로서, 여기서 R₁은 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.2 화학식 1.1로서, 여기서 R₁은 메틸이다;

1.3 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 H; -OH; 할로(예를 들어, 클로로); C_1-4알킬(예를 들어, 메틸); C_1-4알콕시(예를 들어, 메톡시 또는 에톡시); -N(R_f)(R_g); -C(O)N(R_h)(R_i); -C(O)OR_j; -CN; C_1-4알킬티오(예를 들어, 에틸티오); 헤테로아릴(예를 들어, 피라졸릴, 예를 들어, 피라졸-1-일); 헤테로C_3-7사이클로알킬(예를 들어, 모르폴리닐(예를 들어, 모르폴린-1-일) 또는 피롤리디닐(예를 들어, 피롤리딘-1-일)); 및 아릴옥시(예를 들어, 페녹시)(여기서 상기 아릴은 하나 이상의 할로(예를 들어, 플루오로)로 임의로 치환됨)(예를 들어 4-플루오로페녹시)로 이루어진 군으로부터 선택된다;

1.4 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 H이다;

1.5 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 -OH이다;

1.6 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 할로(예를 들어, 클로로)이다;

1.7 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 클로로이다;

1.8 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.9 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 메틸이다;

1.10 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 C_1-4알콕시(예를 들어, 메톡시 또는 에티옥시)이다;

1.11 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 메톡시이다;

1.12 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 에톡시이다;

1.13 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 N(R_f)(R_g)이다;

1.14 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f 및 R_g는 독립적으로 H, C_1-4알킬(예를 들어, 메틸) 또는 헤테로아릴(예를 들어, 피리딜(예를 들어, 피리드-2-일))이다;

1.15 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f는 H이고 R_g는 H, C_1-4알킬(예를 들어, 메틸) 또는 헤테로아릴(예를 들어, 피리딜(예를 들어, 피리드-2-일))에서 선택된다;

1.16 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f는 H이고 R_g는 피리딜(예를 들어, 피리드-2-일)이다;

1.17 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f는 H이고 R_g는 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.18 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f는 H이고 R_g는 메틸이다;

1.19 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f 및 R_g는 둘 모두 H이다;

1.20 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f 및 R_g는 둘 모두 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.21 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f 및 R_g는 둘 모두 메틸이다;

1.22 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R_f는 H이고 R_g는 헤테로아릴(예를 들어, 피리딜(예를 들어, 피리드-2-일))이다;

1.23 화학식 I 또는 1.13으로서, 여기서 R₂는 -C(O)N(R_h)(R_i)이다;

1.24 화학식 I 또는 1.23으로서, 여기서 R_h 및 R_i는 독립적으로 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다;

1.25 화학식 I 또는 1.23으로서, 여기서 R_h는 H이고 R_i는 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다;

1.26 화학식 I 또는 1.23으로서, 여기서 R_h는 H이고 R_i는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다;

1.27 화학식 I 또는 1.23으로서, 여기서 R_h는 H이고 R_i는 에틸이다;

1.28 화학식 I 또는 1.23으로서, 여기서 R_h 및 R_i는 둘 모두 H이다;

1.29 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 -C(O)OR_j이다;

1.30 화학식 I 또는 1.29로서, 여기서 R_j는 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다;

1.31 화학식 I 또는 1.29로서, 여기서 R_j는 H이다;

1.32 화학식 I 또는 1.29로서, 여기서 R_j는 C_1-4알킬(예를 들어, 에틸)이다;

1.33 화학식 I 또는 1.29로서, 여기서 R_j는 에틸이다;

1.34 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 -CN이다;

1.35 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 C_1-4알킬티오(예를 들어, 에틸티오)이다;

1.36 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 에틸티오이다;

1.37 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 헤테로아릴(예를 들어, 피라졸릴, 예를 들어, 피라졸-1-일)이다;

1.38 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 피라졸릴, 예를 들어, 피라졸-1-일이다;

1.39 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 헤테로C_3-7사이클로알킬(예를 들어, 모르폴리닐(예를 들어, 모르폴린-1-일) 또는 피롤리디닐(예를 들어, 피롤리딘-1-일))이다;

1.40 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 헤테로C_5-6사이클로알킬이다;

1.41 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 모르폴리닐(예를 들어, 모르폴린-1-일)이다;

1.42 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 피롤리디닐(예를 들어, 피롤리딘-1-일)이다;

1.43 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 아릴옥시(예를 들어, 페녹시)(여기서 상기 아릴은 하나 이상의 할로(예를 들어, 플루오로)로 임의로 치환됨), 예를 들어 4-플루오로페녹시이다;

1.44 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 페녹시(여기서 상기 페닐은 하나 이상의 할로(예를 들어, 플루오로)로 임의로 치환됨), 예를 들어 4-플루오로페녹시이다;

1.45 화학식 I, 또는 1.1-1.2 중 어느 하나로서, 여기서 R₂는 4-플루오로페녹시이다;

1.46 화학식 I 또는 1.1-1.45 중 어느 하나로서, 여기서 R₃은 H 또는 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.47 화학식 I 또는 1.1-1.45 중 어느 하나로서, 여기서 R₃은 H이다;

1.48 화학식 I 또는 1.1-1.45 중 어느 하나로서, 여기서 R₃은 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이다;

1.49 화학식 I 또는 1.1-1.45 중 어느 하나로서, 여기서 R₃은 메틸이다;

1.50 화학식 I 또는 1.1-1.49 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 H, 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로), -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.51 화학식 I 또는 1.1-1.50 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 H이다;

1.52 화학식 I 또는 1.1-1.51 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이다;

1.53 화학식 I 또는 1.1-1.51 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 클로로 또는 플루오로이다;

1.54 화학식 I 또는 1.1-1.53 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.55 화학식 I 또는 1.1-1.53 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 -O-C_3-6알킬이다;

1.56 화학식 I 또는 1.1-1.55 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이다;

1.57 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a 및 R_d는 독립적으로 H, 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로), -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)에서 선택된다;

1.58 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이고; R_d는 H, 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로) 또는 -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.59 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이고; R_d는 H이다;

1.60 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두H이고; R_a 및 R_d는 둘 모두 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이다;

1.61 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a 및 R_d는 둘 모두 클로로이다;

1.62 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이고; R_d는 -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.63 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이고; R_d는 -O-C_3-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.64 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두H이고; R_a는 클로로이고; R_d는 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시)이다;

1.65 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 클로로이고; R_d는 n-부톡시이다;

1.66 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고; R_a는 할로(예를 들어, 클로로 또는 플루오로)이고; R_d는 -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다;

1.67 화학식 I 또는 1.1-1.56 중 어느 하나로서, 여기서 R_a, R_b, R_c 및 R_e는 모두 H이고 R_d는 -O-C_1-6알킬이다;

1.68 전술한 화학식 중 어느 하나로서, 여기서 화합물은 하기 화학식 I(i)의 화합물이다:

;

1.69 전술한 화학식 중 어느 하나로서, 여기서 화합물은 하기 화학식 I(ii)의 화합물이다:

;

1.70 전술한 화학식 중 어느 하나로서, 여기서 화합물은 하기 화학식 I(iii)의 화합물이다:

;

1.71 전술한 화학식 중 어느 하나로서, 여기서 화합물은

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(4-플루오로페녹시)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(디메틸아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피롤리딘-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(1H-피라졸-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피리딘-2-일아미노)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(에틸티오)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실산;

에틸 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실레이트;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-N-에틸-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-3a,4-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드;

8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로프로필메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(2-클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(2,5-디클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

8-클로로-1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-클로로-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온; 및

1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

으로 이루어진 군으로부터 선택된다;

1.72 전술한 화학식 중 어느 하나로서, 여기서 화합물은 cGMP의 포스포디에스터라제 매개(예를 들어, PDE2 매개) 가수분해를, 예를 들어, 실시예 23에 기재된 바와 같은, PDE 검정법에서, 예를 들어 2 μM 미만, 보다 바람직하게는 250 nM 이하, 보다 바람직하게는 10 nM 이하의 IC₅₀으로 억제한다.

구체적인 실시형태에서, 본 개시는 유리 형태 또는 염 형태의 하기 화학식 I(i)의 화합물을 제공한다:

상기 식에서,

(i) R₁은 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이고;

(ii) R₂는 C_1-4알콕시(예를 들어, 메톡시 또는 에톡시)이고;

(iii) R₃은 H이고;

(iv) R_b, R_c 및 R_e는 H이고; R_a는 할로이고 R_d는 -O-C_1-6알킬(예를 들어, 프로폭시, 부톡시(예를 들어, n-부톡시, 이소부톡시), -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸)이다.

구체적인 실시형태에서, 본 개시는 유리 형태 또는 염 형태의 화학식 I(i)의 화합물을 제공하고, 여기서

(i) R₁은 C_1-4알킬(예를 들어, 메틸)이고;

(ii) R₂는 C_1-4알콕시(예를 들어, 메톡시 또는 에톡시)이고;

(iii) R₃은 H이고;

(iv) R_b, R_c 및 R_e는 H이고; R_a는 할로이고, R_d는 -OCH₂-사이클로부틸이다.

제2 측면에서, 본 개시는 유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태의 본 개시의 화합물, 즉 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii), 또는 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물을, 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 조합하여 또는 회합하여 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

본 개시는 또한 PDE2 매개 질환, 예를 들어, 이하에 기재된 바와 같은 질환의 치료(특히 불안증, 우울증, 자폐증 스펙트럼 장애(ASD), 조현병, 인지력 손상의 치료)를 위해 본 개시의 화합물을 사용하는 방법을 제공한다. 이 목록은 빠짐없이 철저한 것이 아니며 이하에 기재된 바와 같은 다른 질환 및 질병을 포함할 수 있다.

따라서, 제3 측면에서, 본 개시는 PDE2 매개 질환의 치료를 위한 방법을 제공하고, 이 방법은 치료를 필요로 하는 피험체에게 유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태의 본원에 개시된 본 개시의 화합물, 즉, 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii), 또는 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물, 또는 본원에 개시된 약학 조성물의 치료 유효량을 투여하는 단계를 포함한다.

제3 측면의 추가 실시형태에서, 본 개시는 피험체, 바람직하게 포유동물, 바람직하게 인간에서 하기 질환을 치료하는 방법을 제공하고, 이 방법은 상기 피험체에게 유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태의 본원에 개시된 본 개시의 화합물, 즉, 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii), 또는 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물, 또는 본원에 개시된 약학 조성물의 치료 유효량을 투여하는 단계를 포함한다:

신경학적 질환(예컨대 편두통; 뇌전증; 알츠하이머병; 파킨슨병; 뇌손상; 졸중; 뇌혈관 질환(뇌동맥경화증, 뇌 아밀로이드 혈관병증, 유전성 뇌출혈, 및 저산소성 뇌허혈증 포함); 척수성 근위축증; 측색 경화증; 다발성 경화증;

인지 장애(기억상실증, 노인성 치매, HIV 연관성 치매, 알츠하이머 연관성 치매, 헌팅톤병 연관성 치매, 루이소체 치매(Lewy body dementia), 혈관성 치매, 약물 관련 치매, 섬망증, 및 경도 인지 장애 포함); 및 파킨슨병 및 우울증과 연관된 인지 기능장애;

정신 지체(다운 증후군 및 취약 X 증후군 포함);

수면 장애(과수면증, 일주기 리듬 수면 장애, 불면증, 사건수면증, 및 수면 박탈 포함);

정신 질환(예컨대 불안증(급성 스트레스 장애, 범불안 장애, 사회 불안 장애, 공황 장애, 외상 후 스트레스 장애(PTSD), 강박 장애, 특정 공포증, 사회 공포증, 만성 불안 장애 및 강박 장애 포함);

인위성 장애(급성 환각성 조증 포함);

충동 조절 장애(병적 도박, 병적 방화, 병적 도벽 및 간헐적 폭발 장애 포함);

기분 장애(제I형 양극성 장애, 제II형 양극성 장애, 조증, 혼재성 정동 상태, 주우울증, 만성 우울증, 계절성 우울증, 정신병적 우울증 및 산후 우울증 포함);

정신운동성 장애(추체외로 및 운동 장애, 예를 들어, 파킨슨증, 루이소체 질환, 진전증, 약물 유발성 진전증, 약물 유발성 지연성 운동장애, L-도파 유발성 운동장애 및 하지 불안 증후군);

정신병적 장애(조현병(예를 들어, 연속성 또는 삽화성, 편집형, 파과형, 긴장형, 미분화형 및 잔류형 정신분열 장애 포함), 분열정동 장애, 정신분열형 장애, 및 망상 장애 포함);

약물 의존증(마약 의존증, 알코올 중독증, 암페타민 의존증, 코카인 중독증, 니코틴 의존증, 및 약물 금단 증후군 포함);

섭식 장애(거식증, 폭식증, 폭식 장애, 과식증, 및 냉식증 포함);

소아 정신 질환(주의력 결핍 장애, 주의력 결핍/과잉행동 장애, 행동 장애(예를 들어, 틱 장애, 예컨대 일시적, 만성, 운동성 또는 음성 틱 장애), 자폐증 및자폐증 스펙트럼 장애(ASD) 포함);

정신활성 물질 사용에 의한 정신 및 행동 장애;

심혈관 질환(예를 들어, 폐고혈압 및 폐동맥 고혈압); 및

통증(예를 들어, 골 및 관절 통증(골관절염), 반복성 운동 통증, 치통, 암성 통증, 근막 통증(근육 손상, 섬유근육통), 수술 전후의 통증(일반 외과, 부인과), 만성 통증 및 신경병증성 통증).

일 실시형태에서, 질환 또는 질병은 불안증, 우울증, 자폐증 스펙트럼 장애 및 조현병, 예를 들어 자폐증 및/또는 조현병 환자의 불안증 및/또는 우울증으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 실시형태에서, 질환 또는 질병은 조현병 또는 치매와 연관된 인지력 손상이다.

제4 측면에서, 본 개시는 본원에 개시된 바와 같은 PDE2 매개 질환의 치료를 위한 (의약의 제조에 사용하기 위한) 유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태의 본원에 개시된 본 개시의 화합물, 즉 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii), 또는 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물을 제공한다.

제5 측면에서, 본 개시는 본원에 개시된 바와 같은 PDE2 매개 질환의 치료에서 사용하기 위한, 유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태의 본원에 개시된 본 개시의 화합물, 즉 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii), 또는 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 조합하여 또는 회합하여 포함하는 약학 조성물을 제공한다.

문맥에서 달리 명시하거나 또는 명확하게 하지 않으면, 본원의 하기 용어들은 다음의 의미들을 갖는다:

(a) 본 개시에서 사용될 때, "알킬"은 선형이거나 또는 분지형일 수 있고, 예를 들어, 할로겐(예를 들어, 클로로 또는 플루오로), 하이드록시, 또는 카복시로 임의로 일치환, 이치환 또는 삼치환될 수 있는, 바람직하게 1개 내지 6개 탄소 원자를 가지며, 바람직하게는 1개 내지 4개 탄소 원자를 갖는, 포화 또는 불포화된 탄화수소 모이어티, 바람직하게는 포화된 탄화수소 모이어티이다.

(b) 본 개시에서 사용될 때, "아릴"은 예를 들어, 알킬(예를 들어, 메틸), 할로겐(예를 들어, 클로로 또는 플루오로), 할로알킬(예를 들어, 트리플루오로메틸) 또는 하이드록시로 임의로 치환된, 단환 또는 이환 방향족 탄화수소, 바람직하게는 페닐이다.

(c) 본 개시에서 사용될 때, "헤테로아릴"은 방향족 모이어티로서 방향족 고리를 구성하는 원자 중 1 이상은 탄소 대신 황 또는 질소이고, 예를 들어 피리딜 또는 티아디아졸릴이며, 예를 들어, 알킬, 할로겐, 할로알킬 또는 하이드록시로 임의로 치환될 수 있다.

본 개시의 화합물, 예를 들어, 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii)의 화합물, 예를 들어, 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물은 유리 형태 또는 염 형태, 예를 들어 산 부가염으로서 존재할 수 있다. 본 명세서에서 달리 언급하지 않으면, 용어 예컨대 "본 개시의 화합물"은 임의 형태, 예를 들어 유리 형태 또는 산 부가염 형태, 또는 그 화합물이 산성 치환기를 함유하는 경우, 염기 부가염 형태인 화합물을 포괄하는 것으로 이해해야 한다. 본 개시의 화합물은 약제로서 사용하고자 하며, 따라서, 약학적으로 허용되는 염이 바람직하다. 예를 들어, 본원의 유리 화합물 또는 그들의 약학적으로 허용되는 염의 단리 또는 정제를 위해 유용할 수 있는 약학 용도로 부적합한 염이 또한 포함된다. 본 개시의 화합물은 일부 경우에서 또한 프로드러그 형태로도 존재할 수 있다. 프로드러그 형태는 체내에서 본 개시의 화합물로 전환되는 화합물이다. 예를 들어, 본 개시의 화합물이 하이드록시 또는 카복시 치환기를 함유하는 경우, 이들 치환기는 생리적으로 가수분해 가능하고 허용되는 에스테르를 형성할 수 있다. 본 개시에서 사용될 때, "생리적으로 가수분해 가능하고 허용되는 에스테르"는 투여된 용량에서 그들 자체가 생리적으로 견딜 수 있는 산(하이드록시 치환기를 갖는 본 개시의 화합물의 경우) 또는 알코올(카복시 치환기를 갖는 본 개시의 화합물의 경우)을 생성시키도록 생리학적 조건 하에서 가수분해될 수 있는 본 개시의 화합물의 에스테르를 의미한다. 따라서, 본 개시의 화합물이 하이드록시 기를 함유하는 경우, 예를 들어 화합물-OH이면, 이러한 화합물의 아실 에스테르 프로드러그, 즉 화합물-O-C(O)-C_1-4알킬은 체내에서 가수분해되어 한편으로는 생리적으로 가수분해 가능한 알코올(화합물-OH) 및 다른 한편으로는 산(예를 들어, HOC(O)-C_1-4알킬)을 형성시킨다. 대안적으로, 본 개시의 화합물이 카복실산을 함유하는 경우, 예를 들어, 화합물-C(O)OH이면, 이러한 화합물의 산 에스테르 프로드러그, 화합물-C(O)O-C_1-4알킬은 가수분해되어 화합물-C(O)OH 및 HO-C_1-4알킬을 형성시킬 수 있다. 따라서 이해되는 바와 같이, 이 용어는 통상의 약학적 프로드러그 형태를 포괄한다.

본원에 개시된 본 개시의 화합물은 그들의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 라세미체를 비롯하여, 그들의 다형체, 수화물, 용매화물 및 착체를 포함한다. 본원의 범주에 속하는 일부 개별 화합물은 이중 결합을 함유할 수 있다. 본 발명에서 이중 결합의 표현은 이중 결합의 E 및 Z 이성질체 둘 모두를 포함하는 의미이다. 또한, 본 발명의 범위 내에 있는 일부 화합물은 하나 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있다. 본 발명은 광학적으로 순수한 입체이성질체 중 어느 하나를 비롯하여 입체이성질체의 임의 조합의 용도를 포함한다.

본 개시의 화합물은 또한 그들의 안정한 동위원소 및 불안정한 동위원소를 포함하고자 한다. 안정한 동위원소는 동일 종(즉, 원소)의 풍부한 핵종과 비교하여 하나의 추가 중성자를 함유하는 비방사능 동위원소이다. 이러한 동위원소를 포함하는 화합물의 활성은 유지되며, 이러한 화합물은 또한 비동위원소 유사체의 약동학을 측정하기 위한 유용성을 가질 것으로 예상된다. 예를 들어, 본 개시의 화합물 상의 일정 위치에서 수소 원자는 중수소(비방사능인 안정한 동위원소)로 치환될 수 있다. 기지의 안정한 동위원소의 예는 제한 없이, 중수소,　¹³ C,　¹⁵ N,　¹⁸ O를 포함한다. 대안적으로, 동일한 종(즉, 원소)의 풍부한 핵종과 비교하여 추가의 중성자를 함유하는 방사성 동위원소인 불안정한 동위원소, 예를 들어, ¹²³I,¹³¹I, ¹²⁵I,¹¹C, ¹⁸F는 I, C 및 F의 상응하는 풍부한 종을 치환시킬 수 있다. 본 발명의 화합물의 유용한 동위원소의 다른 예는 ¹¹C 동위원소이다. 이들 방사능 동위원소는 본 발명의 화합물의 방사선-영상화 및/또는 약동학적 연구에 유용하다. 동위원소 표지된 화학식 I의 화합물은 대체로 동위원소 표지된 시약으로 비동위원소 표지된 시약을 치환시키는 것을 수행하여 제조될 수 있다.

어구 "본 개시의 화합물" 또는 "본원의 PDE 2 억제제"는 본원에 개시된 화합물 중 어느 하나 및 전부, 예를 들어 유리 형태 또는 염 형태인, 본원에서 앞서 기재한 바와 같은 화학식 I, I(i), I(ii), I(iii), 또는 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물을 포함한다.

단어 "치료" 및 "치료하는"은 질환의 증상의 치료 또는 완화를 비롯하여 질 환의 원인의 치료를 포괄하는 것으로 그에 따라 이해한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 본원에 개시된 질환 또는 질병의 치료를 위한 방법을 제공한다. 다른 실시형태에서, 본 발명은 본원에 개시된 바와 같은 질환 또는 질병의 예방을 위한 방법을 제공한다.

치료 방법의 경우에서, 단어 "유효량"은 특정 질환 또는 질병을 치료하기 위한 치료적으로 유효한 양을 포괄하고자 한다.

용어 "폐고혈압"은 폐동맥 고혈압을 포괄하고자 한다.

용어 "피험체"는 인간 또는 비인간(즉, 동물)을 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 인간 및 비인간 둘 모두를 포괄한다. 다른 실시형태에서, 본 발명은 비인간을 포괄한다. 다른 실시형태에서, 이 용어는 인간을 포괄한다.

본 개시에서 사용될 때, 용어 "포함하는"은 제약을 두지 않고자 하며, 추가의, 비인용 성분 또는 방법 단계를 배제하지 않는다.

용어 "인지 장애"는 인지 결핍의 증상(즉, 동일한 일반 연령 개체군 내에서 다른 개체와 비교하여 개체의 하나 이상의 인지 측면, 예컨대 기억력, 지력, 학습력, 논리력, 주의력 또는 집행 기능(작업 기억)의 정상이하 또는 최적이하 기능)을 포함하는 임의 질병을 의미한다. 따라서, 인지 장애는 제한 없이, 기억상실증, 노인성 치매, HIV 연관성 치매, 알츠하이머 연관성 치매, 헌팅톤병 연관성 치매, 루이소체 치매, 혈관성 치매, 약물 관련 치매, 섬망증, 및 경도 인지 장애를 포함한다. 인지 장애는 또한 배타적이지 않지만 주로 정신병(조현병), 기분 장애, 양극성 장애, 졸중, 전두측두 치매, 진행성 핵상 마비, 뇌 외상 및 약물 남용, 아스퍼거 증후군 및 노화성 기억 손상과 관련된 질병일 수 있다.

유리 형태 또는 약학적으로 허용되는 염 형태인, 본원에서 앞서 기재한 바와 같은, 본 개시의 화합물, 예를 들어 화학식 I, I(i), I(ii) 또는 I(iii)의 화합물, 예를 들어, 화학식 1.1-1.72 중 어느 하나의 화합물은 단독 치료제로서 사용될 수 있지만, 또한 다른 활성제와 조합하여서 또는 다른 활성제와 공동 투여를 위해 사용될 수 있다.

본 발명을 실시하는 데 적용되는 용량은 물론 예를 들어, 치료하려는 특정 질환 또는 병태, 사용되는 본원의 특정 화합물, 투여 방식, 및 원하는 요법에 따라 가변적이다. 본 개시의 화합물은 경구, 비경구, 경피, 또는 흡입을 포함한 임의의 적합한 경로에 의해 투여될 수 있지만, 바람직하게는 경구 투여된다. 대체로, 예를 들어, 본원에서 앞서 기재한 바와 같은 질환의 치료에 대한 만족할 만한 결과는 약 0.01 내지 2.0 mg/kg 정도의 용량에서 경구 투여시 얻어지는 것을 의미한다. 따라서 대형 포유동물, 예를 들어 인간에서, 경구 투여용으로 표시된 1일 용량은 약 0.75 내지 150 mg 범위이고, 편리하게 1회 투여하거나, 또는 분할된 용량으로 2 내지 4회, 매일 또는 지속 방출 형태로 투여한다. 따라서, 경구 투여용 단위 제형은 예를 들어 약 0.2 내지 75 또는 150 mg, 예를 들어, 약 0.2 또는 2.0 내지 50, 75 또는 100 mg의 본 개시의 화합물을 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 함께 포함한다.

본 개시의 화합물을 포함하는 약학 조성물은 갈레노스 의학 분야에 공지된 통상의 희석제 또는 부형제 및 기술을 이용하여 제조될 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 임의의 통상의 약학 담체 또는 부형제를 포함할 수 있다. 적합한 약학 담체는 불활성 희석제 또는 충전제, 물 및 다양한 유기 용매(예컨대, 수화물 및 용매화물)를 포함한다. 약학 조성물은 바람직하다면, 추가의 성분들, 예컨대 풍미제, 결합제, 부형제 등을 포함할 수 있다. 따라서, 경구 투여의 경우, 다양한 부형제, 예컨대 시트르산을 함유하는 정제가 다양한 붕괴제, 예컨대 전분, 알긴산 및 일정 복합 실리케이트 및 결합제, 예컨대 수크로스, 젤라틴 및 아카시아와 함께 적용될 수 있다. 부가적으로, 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 라우릴 설페이트 및 탈크가 정제화 목적에 종종 유용하다. 유사한 유형의 고형 조성물이 또한 연질 및 경질 충전 젤라틴 캡슐에 적용될 수 있다. 따라서, 재료의 비제한적인 예는 락토스 또는 유당 및 고분자량 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 수성 현탁물 또는 엘릭시르가 경구 투여용으로 바람직한 경우, 그 안의 활성 화합물은 희석제, 예컨대 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 글리세린, 또는 이의 조합과 함께, 다양한 감미제 또는 풍미제, 착색제 또는 염료, 및 바람직하다면 유화제 또는 현탁제와 조합될 수 있다. 약학 조성물은 예를 들어, 정제, 캡슐, 알약, 분말, 지속 방출 제제, 용액제 또는 현탁제로서 경구 투여용, 멸균 용액제, 현탁제 또는 에멀션으로서 비경구 주사용, 연고 또는 크림으로서 국소 투여용 또는 좌제로서 직장 투여용으로 적합한 형태일 수 있다.

본 개시의 화합물 및 그들의 약학적으로 허용되는 염은 본원에 기술되고 예시된 방법을 이용하고 그와 유사한 방법 및 화학 분야에 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 그러한 방법은 제한 없이, 이하에 기재된 것들을 포함한다. 상업적으로 입수할 수 없으면, 이들 공정의 출발 물질은 기지 화합물의 합성법과 유사하거나 또는 비슷한 기술을 이용하여 화학 분야에서 선택되는 절차에 의해 제조할 수 있다. 본원에 인용된 모든 참조문헌은 그들 전체로 참조하여 본원에 편입시킨다.

실시예 1

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(4-플루오로페녹시)-3-메틸-1 H -피라졸로[4,3- c ][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

(a) 5-부톡시-2-플루오로벤젠아민

무수 DMF(15 mL) 중 4-플루오로-3-니트로페놀(1)(2.81 g, 17.9 mmol), 1-브로모부탄(3.43 g, 25.0 mmol) 및 세슘 카보네이트(11.6 g, 35.7 mmol)의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 감압 하에 용매를 제거한 후, 잔류물을 물(400 mL)로 처리하고 메틸렌(3×50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켜서 4-부톡시-1-플루오로-2-니트로벤젠을 오렌지색 오일로서 얻었다. EtOH(10 mL) 중 미정제 4-부톡시-1-플루오로-2-니트로벤젠의 용액에 서서히 진한 HCl(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분간 교반한 후, 주석(II) 클로라이드(8.40 g, 44.3 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물(500 mL)로 처리하고 메틸렌(4×50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수(40 mL)로 세척한 후, 감압 하에서 증발 건조시켰다. 얻어진 미정제 생성물을 용리액으로서 헥산 중 0 - 100% 에틸 아세테이트의 농도 구배를 이용하여 중성 알루미나 옥시드 컬럼으로 추가 정제하여 5-부톡시-2-플루오로벤젠아민을 오일로서 얻었다(2.42 g, 74% 수율). MS(ESI) m/z 184.1 [M+H]⁺.

(b) (5-부톡시-2-플루오로페닐)하이드라진

물(5 mL) 중 나트륨 나이트라이트(1.04 g, 15.1 mmol)의 용액을 0℃에서 진한 염산(12 mL) 중 5-부톡시-2-플루오로벤젠아민(2.30 g, 12.6 mmol)의 현탁물에 점적하였다. 첨가를 완료한 후, 반응 혼합물을 0℃에서 30분간 교반한 후, 진한 염산(3 mL) 중 주석(II) 클로라이드 2수화물(6.86 g, 30.4 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 후, 여과하였다. 필터 케이크를 6 N HCl(3×4 mL) 및 헥산(3×5 mL)으로 연속하여 세척한 후, 진공 하에 건조하여 3.18 g의 미정제 생성물을 얻어서 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS(ESI) m/z 199.1 [M+H]⁺.

(c) 8-브로모/클로로-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

디옥산(4 mL) 중 (4-부톡시-2-플루오로페닐)하이드라진(860 mg, 4.34 mmol) 및 3-아세틸-6-브로모-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온(500 mg, 1.77 mmol)의 현탁물에 진한 HCl(0.1 mL)을 첨가하였다. 밀봉 튜브 내 반응 혼합물을 실온에서 5분간 교반한 후 마이크로파 반응기에 160℃에서 5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물(200 mL)로 처리한 후 CH₂Cl₂/MeOH(10/1)(4×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켰다. 얻어진 잔류물은 용리액으로서 헥산 중 0 - 100% 에틸 아세테이트의 농도 구배를 이용하여 실리카-겔 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 580 mg의 생성물을 얻었고, 이는 22%의 8-클로로-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(MS(ESI) m/z 401.1 [M+H]⁺) 및 68%의 8-브로모-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(MS(ESI) m/z 445.1 [M+H]⁺)을 함유하였다. 2종의 화합물을 컬럼 상에서 공동 용리하고 추가 분리 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다.

(d) 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(4-플루오로페녹시)-3-메틸-1 H -피라졸로[4,3- c ][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

밀봉된 마이크로파 바이알 내 디옥산(0.6 mL) 중 8-브로모/클로로-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(41.0 mg), 4-플루오로페놀(112 mg, 1.00 mmol) 및 세슘 카보네이트(97 mg, 0.30 mmol)의 현탁물을 마이크로파 반응기에 160℃에서 5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물(100 mL)로 처리하고 CH₂Cl₂(4×25 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켰다. 얻어진 잔류물은 16분 동안 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 0 - 70% 아세토니트릴의 농도 구배를 이용하여 세미 분취용 HPLC 시스템으로 정제하여 17 mg의 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(4-플루오로페녹시)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.24(s, 1H), 7.81(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13(d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.88(dd, J = 6.0, 3.1 Hz, 1H), 6.85 - 6.78(m, 4H), 6.76 - 6.70(m, 1H), 6.62(dd, J = 9.2, 9.2 Hz, 1H), 4.03 - 3.78(m, 2H), 2.79(s, 3H), 1.81 - 1.74(m, 2H), 1.58 - 1.45(m, 2H), 1.00(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 477.2 [M+H]⁺.

실시예 2

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(디메틸아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 1의 합성법에 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였는데, 여기서는 40% 디메틸아민 용액이 4-플루오로페놀 대신 단계 (d)에서 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.82(s, 1H), 7.56(d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.15 - 7.08(m, 2H), 6.99 - 6.92(m, 1H), 6.80(d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.97(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.81(s, 3H), 2.77(s, 6H), 1.81 - 1.71(m, 2H), 1.53 - 1.42(m, 2H), 0.96(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 410.2 [M+H]⁺.

실시예 3

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피롤리딘-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 1의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조되었는데, 여기서는 피롤리딘이 4-플루오로페놀 대신 단계 (d)에서 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.28(s, 1H), 7.47(d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.15 - 7.08(m, 2H), 7.00 - 6.92(m, 1H), 6.55(d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.97(t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.16 - 3.01(m, 4H), 2.80(s, 3H), 1.95 - 1.84(m, 4H), 1.80 - 1.71(m, 2H), 1.53 - 1.43(m, 2H), 0.96(t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 436.2 [M+H]⁺.

실시예 4

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(1H-피라졸-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 1의 합성법에 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조되었고, 여기서는 1H-피라졸이 4-플루오로페놀 대신 단계 (d)에서 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.83(s, 1H), 8.15(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.83(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.67(dd, J = 1.7, 0.8 Hz, 1H), 7.59(dd, J = 2.6, 0.8 Hz, 1H), 7.25 - 7.16(m, 2H), 7.14 - 7.08(m, 1H), 6.33(dd, J = 2.6, 1.6 Hz, 1H), 4.00(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.84(s, 3H), 1.82 - 1.72(m, 2H), 1.53 - 1.43(m, 2H), 0.96(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 433.2 [M+H]⁺.

실시예 5

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피리딘-2-일아미노)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

디옥산(0.6 mL) 중 실시예 1의 단계 c에서 합성된 미정제 8-브로모/클로로-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(41.0 mg), 피리딘-2-아민(160 mg, 1.7 mmol), Pd₂(dba)₃(8 mg), Xantphos(10 mg) 및 세슘 카보네이트(130 mg, 0.40 mmol)의 현탁물을 100℃에서 60시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 DMF(5 mL)로 처리한 후 여과하였다. 여과물은 16분 동안 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 0 - 30% 아세토니트릴의 농도 구배를 이용하여 세미 분취용 HPLC 시스템으로 단리하여 11 mg의 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피리딘-2-일아미노)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.43(s, 1H), 9.67(s, 1H), 8.16 - 8.09(m, 1H), 7.68(d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.38 - 7.32(m, 1H), 7.32 - 7.27(m, 2H), 7.19 - 7.10(m, 2H), 6.98 - 6.91(m, 1H), 6.83 - 6.76(m, 1H), 3.99(t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.60(s, 3H), 1.71 - 1.60(m, 2H), 1.45 - 1.31(m, 2H), 0.87(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 459.2 [M+H]⁺.

실시예 6

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(에틸티오)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 1의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였고, 여기서는 에탄에티올이 4-플루오로페놀 대신 단계 (d)에서 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.00(s, 1H), 7.56(d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.24(d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.18 - 7.09(m, 2H), 7.03 - 6.98(m, 1H), 3.97(t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.81(s, 3H), 2.51(q, J = 7.4 Hz, 2H), 1.81 - 1.73(m, 2H), 1.53 - 1.44(m, 2H), 1.01(t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 427.2 [M+H]⁺.

실시예 7

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3- c ][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴

밀봉 마이크로파 바이알 내 피리딘(1.5 mL) 중 실시예 1의 단계 c에서 제조된 미정제 8-브로모/클로로-1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(140 mg) 및 구리(I) 시아나이드(50 mg, 0.56 mmol)의 현탁물을 마이크로파 반응기에 180℃에서 5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(15 mL)로 처리한 후, 여과하였다. 여과물을 물로 3회(3×5 mL) 세척한 후, 증발 건조하였다. 얻어진 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 71 mg의 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴을 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.23(s, 1H), 7.80(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.73(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.23 - 7.15(m, 1H), 7.13 - 7.08(m, 1H), 7.08 - 7.01(m, 1H), 4.00(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.82(s, 3H), 1.84 - 1.74(m, 2H), 1.53 - 1.47(m, 2H), 0.98(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 392.1 [M+H]⁺.

실시예 8

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3- c ][1,5]나프티리딘-8-카복실산

디옥산(1.0 mL) 중 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴(56 mg, 0.14 mmol)의 현탁물에 진한 염산(0.15 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 24시간 동안 교반하였다. 감압 하에 용매를 제거한 후, 잔류물을 진공 하에 더욱 건조시켜 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실산(45 mg, 77% 수율)을 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.87(s, 1H), 9.49(s, 1H), 8.30(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.90(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 - 7.23(m, 1H), 7.19 - 7.15(m, 1H), 7.14 - 7.08(m, 1H), 4.12 - 3.92(m, 2H), 2.84(s, 3H), 1.86 - 1.74(m, 2H), 1.53 - 1.45(m, 2H), 0.98(t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 411.1 [M+H]⁺.

실시예 9

에틸 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실레이트

밀봉된 마이크로파 바이알 내 에탄올(0.60 mL) 중 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실산(20 mg, 0.049 mmol) 및 진한 황산(10 ㎕)의 혼합물을 마이크로파 반응기에 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 얻어진 잔류물은 세미 분취용 HPLC로 정제하여 에틸 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실레이트(17 mg, 77% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.07(s, 1H), 8.23(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.79(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.19 - 7.13(m, 2H), 7.07 - 7.00(m, 1H), 4.35 - 4.24(m, 2H), 3.99(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.83(s, 3H), 1.82 - 1.72(m, 2H), 1.56 - 1.42(m, 2H), 1.30(t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 439.2 [M+H]⁺.

실시예 10

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-N-에틸-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드

(a) 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-4-클로로-N-에틸-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드

CH₂Cl₂(0.75 mL) 중 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실산(25 mg, 0.061 mmol)의 용액에 티오닐 클로라이드(45 ㎕, 0.62 mmol)를 첨가한 후, 2액적의 DMF를 첨가하였다. 46℃에서 밤새 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 증발 건조하였다. 잔류물을 CH₂Cl₂(0.80 mL)에 용해시킨 후, 에탄아민을 실온에서 30분간 용액을 통해 버블링하였다. 감압 하에 용매를 제거한 후, 잔류물을 물로 2회(2×1 mL) 세척한 후, 진공 하에 건조시켜 26 mg의 미정제 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-4-클로로-N-에틸-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드를 얻고, 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. MS(ESI) m/z 456.2 [M+H]⁺.

(b) 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-N-에틸-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드

밀봉된 바이알 내 디옥산(0.50 mL) 중 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-4-클로로-N-에틸-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드(26 mg, 0.057 mmol) 및 진한 염산(10 ㎕)의 현탁물을 마이크로파 반응기에 130℃에서 1시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 감압 하에 증발 건조시켰다. 얻어진 미정제 생성물을 세미 분취용 HPLC로 정제하여 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-N-에틸-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드(11 mg, 44% 수율)를 연노란색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.77(s, 1H), 8.30(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.81(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.26 - 7.16(m, 2H), 7.13 - 7.06(m, 1H), 6.84 - 6.76(m, 1H), 4.10 - 3.90(m, 2H), 3.42 - 3.24(m, 2H), 2.83(s, 3H), 1.87 - 1.72(m, 2H), 1.55 - 1.42(m, 2H), 1.11(t, J = 7.3 Hz, 3H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 438.2 [M+H]⁺.

실시예 11

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-3a,4-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드

디옥산(0.2 mL) 중 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴(10 mg, 0.026 mmol)의 현탁물에 6N NaOH 수용액(40 ㎕)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 감압 하에 증발 건조시켰다. 잔류물을 세미 분취용 HPLC 시스템으로 정제하여 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-3a,4-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드(3.2 mg, 30% 수율)를 회백색 고체로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.13(s, 1H), 8.29(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76(d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.25 - 7.14(m, 2H), 7.10 - 7.02(m, 1H), 6.59(s, 1H), 5.32(s, 1H), 3.99(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.81(s, 3H), 1.82 - 1.74(m, 2H), 1.52 - 1.46(m, 2H), 0.97(t, J = 7.4, 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 410.2 [M+H]⁺.

실시예 12

8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로프로필메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

(a) 5-(벤질옥시)-2-클로로벤젠아민

무수 N,N-디메틸아세타미드(10 mL) 중 4-클로로-5-니트로페놀(2.25 g, 13.0 mmol), (브로모메틸)벤젠(2.33 g, 13.6 mmol) 및 세슘 카보네이트(8.50 g, 25.9 mmol)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 감압 하에 용매를 제거한 후, 잔류물을 물(300 mL)로 처리한 후, 메틸렌으로 3회(3×30 mL) 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켜 4-(벤질옥시)-1-클로로-2-니트로벤젠을 오일로서 얻었다. EtOH(10 mL) 중 미정제 4-(벤질옥시)-1-클로로-2-니트로벤젠의 용액에 진한 HCl(8 mL)을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 5분간 교반한 후, 주석(II) 클로라이드(8.0 g, 42.0 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물(400 mL)로 처리한 후 메틸렌(4×30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 포화된 NaHCO₃(30 mL) 및 염수(30 mL)로 연속적으로 세척한 후, 증발 건조시켜 3.0 g의 5-(벤질옥시)-2-클로로벤젠아민을 연한 오렌지색 고체로서 얻었다. MS(ESI) m/z 234.1 [M+H]⁺.

(b) (5-(벤질옥시)-2-클로로페닐)하이드라진

물(3 mL) 중 나트륨 나이트라이트(226 mg, 3.28 mmol)의 용액을 0℃에서 진한 염산(5 mL) 중 5-(벤질옥시)-2-클로로벤젠아민(640 mg, 2.74 mmol)의 현탁물에 점적하였다. 첨가를 완료한 후, 반응 혼합물을 0℃에서 30분간 교반하였다. 진한 염산(3 mL) 중 주석(II) 클로라이드(2.08 g, 11.0 mmol)의 용액을 첨가하였다. 최종 현탁물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 여과하였다. 여과 케이크를 회수하였다. 여과물을 pH 10으로 10 N NaOH를 이용하여 염기화시킨 후, CH₂Cl₂(3×40 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켰다. 얻어진 잔류물 및 회수된 필터 케이크를 배합하고 에틸 아세테이트 중 0 - 20% 메탄올의 농도 구배를 이용하여 중성 알루미늄 옥시드 컬럼으로 정제하여 (5-(벤질옥시)-2-클로로페닐)하이드라진(300 mg, 44% 수율)을 얻었다. MS(ESI) m/z 249.1 [M+H]⁺.

(c) 8-클로로-1-(2-클로로-5-하이드록시페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

디옥산(2 mL) 중 (5-(벤질옥시)-2-플루오로페닐)하이드라진(650 mg, 2.6 mmol) 및 3-아세틸-6-브로모-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온(200 mg, 0.71 mmol)의 현탁물에 진한 HCl(0.1 mL)을 첨가하였다. 밀봉된 튜브 내 반응 혼합물을 실온에서 5분간 교반한 후 110℃에서 2일 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 물(200 mL)로 처리한 후 CH₂Cl₂/MeOH(10/1)(4×50 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 증발 건조시켜 409 mg의 미정제 8-클로로-1-(2-클로로-5-하이드록시페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 얻어, 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. 소량의 미정제 생성물을 구조 검증을 위해 세미 분취용 HPLC로 정제하였다. ¹H NMR(500 MHz, DMSO-d ₆) δ 11.70(s, 1H), 10.13(s, 1H), 7.77(d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54(d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.41(m, 1H), 7.02 - 6.95(m, 2H), 2.60(s, 3H). MS(ESI) m/z 361.0 [M+H]⁺ .

(d) 8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로프로필메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

밀봉된 반응 바이알 내 DMF(1.2 mL) 중 8-클로로-1-(2-클로로-5-하이드록시페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(60 mg, 0.17 mmol), (브로모메틸)사이클로프로판(30 mL, 0.27 mmol) 및 나트륨 카보네이트(36 mg, 0.23 mmol)의 현탁물을 100℃에서 2일 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여과물을 16분 동안 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 0 - 63% 아세토니트릴의 농도 구배를 이용하여 세미 분취용 HPLC 시스템으로 분리하여 8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로프로필메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 회백색 고체로서 얻었다(7 mg, 10% 수율). ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 11.08(s, 1H), 7.71(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.46(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.38(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.14 - 7.06(m, 2H), 3.86(dd, J = 7.0, 2.8 Hz, 2H), 2.83(s, 3H), 1.37 - 1.24(m, 1H), 0.73 - 0.62(m, 2H), 0.44 - 0.29(m, 2H). MS(ESI) m/z 415.1 [M+H]⁺.

실시예 13

1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

에탄올(2 mL) 중 2,5-디클로로페닐하이드라진(80 mg, 0.45 mmol) 및 3-아세틸-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온(62 mg, 0.30 mmol)의 현탁물에 진한 HCl(0.1 mL)을 첨가하였다. 밀봉 튜브 내 반응 혼합물을 마이크로파 반응기에 160℃에서 5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각 후, 반응 혼합물을 DMF(10 mL)로 희석한 후 여과하였다. 여과물을 세미 분취용 HPLC 시스템으로 단리하여 1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 얻었다(20 mg, 50% 수율:). ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 9.95(s, 1H), 8.27(dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.66 - 7.56(m, 2H), 7.52 - 7.43(m, 2H), 7.37(dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 2.81(s, 3H). MS(ESI) m/z 345.0 [M+H]⁺.

실시예 14

1-(2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3- c ][1,5]나프티리딘-4(5 H )-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였고, 여기서는 (2-클로로페닐)하이드라진이 2,5-디클로로페닐하이드라진 대신 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.22(s, 1H), 8.24(dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.64(dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.61 - 7.53(m, 2H), 7.52 - 7.42(m, 2H), 7.34(dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 2.82(s, 3H). MS(ESI) m/z 311.1 [M+H]⁺.

실시예 15

1-(2-클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

DMF(0.60 mL) 중 나트륨 히드라이드(24 mg, 0.10 mmol)의 교반 현탁물에 1-(2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(12 mg, 0.039 mmol)을 첨가하였다. 현탁물을 실온에서 0.5시간 동안 교반한 후, 메틸 요오다이드(274 mg, 1.93 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, -70℃로 냉각하였다. 물(1 mL)을 첨가하여 반응물을 켄칭한 후, DMF(5 mL)를 첨가하였다. 최종 혼합물을 여과하고 여과물을 세미 분취용 HPLC 시스템으로 단리하여 1-(2-클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(12 mg, 72% 수율)을 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.22(dd, J = 4.6, 1.2 Hz, 1H), 7.67(dd, J = 8.6, 1.0 Hz, 1H), 7.59 - 7.53(m, 2H), 7.51 - 7.41(m, 2H), 7.38(dd, J = 8.6, 4.2 Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 2.80(s, 3H). MS(ESI) m/z 325.1 [M+H]⁺.

실시예 16

1-(2,5-디클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 15의 합성법에 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였고, 여기서는 1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온이 1-(2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온 대신 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 8.27(dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1H), 7.71(dd, J = 8.7, 1.2 Hz, 1H), 7.60(d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.53 - 7.46(m, 2H), 7.44(dd, J = 8.6, 4.4 Hz, 1H), 3.76(s, 3H), 2.81(s, 3H). MS(ESI) m/z 359.0 [M+H]⁺.

실시예 17

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였고, 여기서는 (5-부톡시-2-클로로페닐)하이드라진이 2,5-디클로로페닐하이드라진 대신 첨가되었다. MS(ESI) m/z 383.2 [M+H]⁺.

실시예 18

1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조되고, 여기서는 (5-부톡시-2-플루오로페닐)하이드라진이 2,5-디클로로페닐하이드라진 대신 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.69(s, 1H), 8.32(dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 7.69(dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.37(dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H), 7.21 - 7.07(m, 2H), 7.04 - 6.96(m, 1H), 3.98(t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.82(s, 3H), 1.84 - 1.68(m, 2H), 1.56 - 1.42(m, 2H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 367.2 [M+H]⁺.

실시예 19

8-클로로-1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조되고, 여기서는 3-아세틸-6-브로모-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온이 3-아세틸-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온 대신 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.94(s, 1H), 7.67(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.58(d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.55 - 7.46(m, 2H), 7.38(d, J = 8.5 Hz, 1H), 2.81(s, 3H). MS(ESI) m/z 379.0 [M+H]⁺.

실시예 20

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-클로로-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조되었고, 여기서는 (5-부톡시-2-클로로페닐)하이드라진 및 3-아세틸-6-브로모-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온이 2,5-디클로로페닐하이드라진 및 3-아세틸-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온 대신 첨가되었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.83(s, 1H), 7.66(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.43(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.36(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.09(d, J = 2.9 Hz, 1H), 7.04(dd, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 3.99(dt, J = 14.3, 7.0 Hz, 2H), 2.81(s, 3H), 1.91 - 1.71(m, 2H), 1.56 - 1.40(m, 2H), 0.97(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 417.1 [M+H]⁺.

실시예 21

1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

디옥산(2.0 mL) 중 1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-클로로-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(50 mg, 0.12 mmol)의 용액에 아르곤 하에서, 일부분의, 나트륨 메톡시드 용액(0.5 N, MeOH 중 1 mL)을 첨가한 후, NaH(60 mg, 2.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분간 교반한 후 마이크로파 반응기에 밀봉된 튜브 내에서 160℃에서 6시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 추가의 나트륨 메톡시드 용액(0.5 N, MeOH 중 0.8 mL) 및 NaH(80 mg, 3.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 바이알을 밀봉하고 마이크로파 반응기에 160℃에서 추가 6시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(100 mL)로 켄칭한 후, CH₂Cl₂(4×25 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 감압 하에 증발 건조시켰다. 얻어진 잔류물을 16분 동안 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 0 - 70% 아세토니트릴의 농도 구배를 이용하여 세미 분취용 HPLC 시스템으로 정제하여 1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 회백색 고체(36 mg, 72% 수율)로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.82(s, 1H), 7.65(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.41(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.12(d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.98(dd, J = 8.9, 2.8 Hz, 1H), 6.87(d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.08 - 3.88(m, 2H), 3.36(s, 3H), 2.82(s, 3H), 1.83 - 1.69(m, 2H), 1.55 - 1.39(m, 2H), 0.96(t, J = 7.4 Hz, 3H). MS(ESI) m/z 413.1 [M+H]⁺.

실시예 22

1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

(a) 8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

표제 화합물은 실시예 13의 합성법에서 기재된 절차에 따라 유사한 방식으로 제조하였고, 여기서는 (2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)하이드라진 및 3-아세틸-6-브로모-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온이 2,5-디클로로페닐하이드라진 및 3-아세틸-4-하이드록시-1,5-나프티리딘-2(1H)-온 대신 첨가되었다.

(b) 1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온

메탄올(1.5 mL) 중 미정제 8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)-페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온(50 mg, 0.11 mmol)의 용액에 아르곤 하에서 나트륨 메톡시드 용액(5M, MeOH 중 1 mL)을 첨가한 후, CuI(22 mg, 0.12 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 밀봉 튜브에 마이크로파 반응기에서 130℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(20 mL)로 켄칭한 후, 에틸 아세테이트(20 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 감압 하에 증발 건조시켰다. 얻어진 잔류물을 16분간 0.1% 포름산을 함유하는 물 중 0 - 43% 아세토니트릴의 농도 구배를 이용하여 세미 분취용 HPLC 시스템으로 정제하여 1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온을 백색 고체(14 mg, 30% 수율)로서 얻었다. ¹H NMR(500 MHz, 클로로포름-d) δ 10.67(s, 1H), 7.62(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.41(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.13(d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.98(dd, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 6.86(d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.97 - 3.90(m, 2H), 3.36(s, 3H), 2.82(s, 3H), 2.79 - 2.72(m, 1H), 2.16 - 2.09(m, 2H), 1.99 - 1.90(m, 2H), 1.88 - 1.81(m, 2H). MS(ESI) m/z 425.1 [M+H]⁺.

실시예 23

시험관 내 PDE2 억제의 측정

r-hPDE2A(기탁 번호 NM_002599, 호모 사피언스 포스포디에스터라제 2A, cGMP-자극된, 전사물 변이체 1) 유전자의 재조합 cDNA 카피를 갖는 포유동물 발현 클로닝 벡터를 Origene에서 구매하였다. 단백질을 HEK293 세포의 일시적 형질감염을 통해 발현시켰다. 세포를 형질감염 후 48시간에 회수하고, 1회 TBS 완충액(50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl)으로 세척한 후, 차가운 균질화 완충액(50 mM Tris-HCl, pH 7.5, 5 mM MgCl₂, 1X 프로테아제 억제제 칵테일) 중에서 초음파처리로 용해시켰다. 균질물을 30분간 15,000 g에 4℃에서 원심분리하여 가용성 세포액 분획을 얻었다. 세포액의 단백질 농도는 표준물로서 소 혈청 알부민을 이용하여 BCA 단백질 검정 키트(Pierce)를 이용하여 결정하였다.

검정법: PDE2A는 기질로서 FL-cAMP를 이용하여 검정하였다. 효소 적정을 먼저 수행하여 PDE의 작업 농도를 결정하였다. 억제제 부재 하에서 100 ΔmP의 활성을 부여하는 효소의 농도를 PDE에 대해 적절한 작업 농도로 여겼다.

PDE 효소는 적정 곡선에 따라서 표준 반응 완충액(10 mM Tris-HCl pH 7.2, 10mM MgCl₂, 0.1% BSA, 0.05% NaN₃)에 희석하였다. PDE2 검정을 위해, 반응 완충액에 1 μM cGMP를 보충하여 효소를 완전하게 활성화시켰다. 99 ㎕의 희석된 효소 용액을 편평 바닥 96웰 폴리스티렌 플레이트의 각 웰에 첨가한 후 100% DMSO에 용해시킨 테스트 화합물 ∼1 ㎕를 첨가하였다. 화합물을 혼합하고 효소와 10분간 실온에서 사전 인큐베이션하였다.

FL-cNMP 전환 반응은 기질(45 nM 최종)을 첨가하여 개시하였다. 효소 및 억제제 혼합물(16 ㎕) 및 기질 용액(0.225 μM의 4 ㎕)을 384웰 마이크로타이터 플레이트에서 배합하였다. 반응물을 암실에 실온에서 15분간 인큐베이션하였다. 반응은 60 ㎕의 결합 시약(소포제의 1:1800 희석물이 보충된 결합 완충액 중 IMAP 비드의 1:400 희석물)을 384웰 플레이트의 각 웰에 첨가하여 중지시켰다. 플레이트를 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하여 진행되는 IMAP 결합이 완료될 수 있게 한 후, Envision 멀티모드 마이크로플레이트 판독기(PerkinElmer, Shelton, CT)에 위치시켜 형광 편광(Δmp)을 측정하였다.

감소된 Δmp로서 측정된, cAMP 농도의 감소는 PDE 활성의 억제를 의미한다. IC₅₀ 값은 0.00037 nM 내지 80,000 nM 범위의 화합물의 8 내지 16가지 농도 존재 하 에서 효소 활성을 측정한 후 약물 농도 대 ΔmP를 그래프화하여 결정하였다. 테스트웰 값은 동일 플레이트 상에서 시행한 대조군 반응에 대해 정규화하였다(값을 대조군의 %로 전환시킴). IC₅₀ 값은 4-파라미터 1-부위 용량 반응 모델을 피팅시킨, 비선형 회귀 소프트웨어를 이용하여 추정하였다(XLFit; IDBS, Cambridge, MA). 곡선의 바닥을 대조군의 0%에 고정하였다.

품질 관리: 억제제의 IC₅₀을 결정하기 위해, 100-200 밀리-편광 유닛의 최적 신호 범위를 제공하는 효소 농도를 선택하였다. 각 샘플 웰의 총 형광 강도를 측정하여 평균 및 표준 편차를 산출하였다. 임의 샘플 웰의 총 형광 강도가 평균 ± 3SD 범위 이내가 아니면, 그 특정 웰의 mp 값은 폐기하였다.

상기에 기재되거나 또는 유사하게 기재된 IMAP 절차를 이용하여, 본 발명자들은 나노몰 PDE2 억제 활성을 갖는 신규 화합물을 동정하기 위해 사유 PDE 포커싱 화합물 라이브러리를 스크리닝하였다. 예시된 본 개시의 화합물(예를 들어, 실시예 1-22의 화합물)을 테스트하여 대체로 IC₅₀ 값이 2 μM 미만으로 확인되었고, 화합물의 다수는 IC₅₀ 값이 250 nM 이하였고, 대부분의 화합물은 100 nM 미만이었고, 일부는 10 nM 미만이었다. 구체적으로, 베이 60-7550 및 실시예 17, 19, 20, 21 및 22의 IC₅₀ 값을 이하에 기재하였다.

실시예 24

마우스에서의 약동학적 실험

마우스에게 실시예 22의 화합물의 단일 경구 용량(10 mg/kg, PO)을 제공하고 혈장 및 뇌 이용률을 문헌 [Zhao et al., J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci.(2005) 819(1):73-80] 및 [Appels, N.M., et al., Rapid Commun. Mass Spec. 2005. 19(15): p. 2187-92]에 기재된 것과 유사한 방법을 이용하여 HPLC 및 LC-MS를 이용하여 측정하였다(0.25-4시간). 이 실험은 실시예 22의 화합물이 10 mg/kg PO에서 3 ng/mL의 Cmax; 0.25시간의 Tmax 및 0.04의 혈액 대 혈장 비를 갖는, 공개된 표준 베이 60-7550과 비교하여 하기 표에 도시한 바와 같이 양호한 뇌 접근성을 가짐을 보여준다.

실시예 25

생체 내 마우스 뇌에서의 cGMP의 측정

마우스에게 실시예 22의 화합물(3 mg/kg) 또는 베이 60-7550(3 mg/kg)의 단일 복강내(i.p.) 용량을 제공한 후 도 1에 도시된 바와 같이, 15분, 30분, 또는 60분 후에 머리의 집중 마이크로파 조사를 통해 폐사시켰다. 선조체를 마우스 뇌에서 해부하여 cGMP의 수준에 대해 검정하였다. 트리클로로아세트산(TCA)을 5% TCA의 최종 농도로 조직 샘플에 첨가하고 조직을 용액 중에서 즉시 초음파처리하여 얼음 상에 보관하였다. 초음파처리된 샘플을 15,000×g에서 20분간 4℃에서 원심분리하여 침전된 단백질을 제거하였다. TCA를 추출하기 위해, 샘플을 3회 물 포화된 에테르로 세척하였다. 다음으로 샘플을 진공(Speedvac, Savant SPD111V) 하에 실온에서 건조시키고 100 ㎕ EIA 완충액에 재현탁시켰다. 샘플 및 cGMP 연속 희석된 표준물을 0.64 M KOH 및 4% 아세트산 무수물을 이용하여 아세틸화시켜서 cGMP 항체의 친화성을 증가시켰다. 각 샘플은 8-포인트 cGMP 표준 희석물과 함께 사전 코팅된 검정법 플레이트에서 이중으로 테스트하였다. 또한, 블랭크, 최대 결합(B₀) 및 비특이적 결합 웰을 포함시켰다. 50 ㎕ 샘플 또는 표준물을 함유하는 모든 웰에, 균등한 부피의 AChE-연결된 cGMP 및 cGMP 항체를 첨가하였다. 플레이트를 4℃에서 18시간 동안 인큐베이션하였다. 다음으로, 웰을 5회 세척 완충액으로 세척하였다. 아세틸티오콜린 및 2-니트로벤조산을 함유하는 검출 시약을 첨가하고 플레이트를 B₀ 웰의 OD가 SoftMax 4.8 소프트웨어(Molecular Devices, Sunnyvale, CA)로 기록시 적어도 0.5가 될 때까지 실온에서 인큐베이션하였다. 각 데이터 포인트를 % B/B₀(100*[(샘플 또는 표준 OD - 평균 비특이적 결합)/(평균 B₀ - 평균 비특이적 결합)])로 전환시켰다. 표준물을 그래프화하고 4-파라미터 로지스틱 방정식에 피팅시켰다(도 1). 샘플의 농도는 마이크로소프트 엑셀 및 GraphPad Prizm을 이용하여 표준 곡선에서 내삽하였다.

상기에 기재되거나 또는 유사하게 기재된 절차를 이용할 때, 실험은 실시예 22의 화합물이 베이 60-7550과 비교해 전신 투여 후 마우스의 선조체에서 cGMP 수준을 증가시키는 것을 보여주었고(도 1 참조), 이는 베이 60-7550과 비교해 실시예 22의 화합물의 뇌 접근성이 개선되었음을 나타낸다.

Claims

유리 형태 또는 염 형태의 하기 화학식 I의 화합물:

상기 식에서,
(i) R₁은 C_1-4알킬이고;
(ii) R₂는
H,
-OH,
할로,
C_1-4알킬,
C_1-4알콕시,
-N(R_f)(R_g),
-C(O)N(R_h)(R_i),
-C(O)OR_j,
-CN,
C_1-4알킬티오,
헤테로아릴,
헤테로C_3-7사이클로알킬, 및
아릴옥시(여기서 상기 아릴은 하나 이상의 할로로 임의로 치환됨)로 이루어진 군으로부터 선택되고;
(iii) R₃은 H 또는 C_1-4알킬이고;
(iv) R_a, R_b, R_c, R_d 및 R_e는 독립적으로 H, 할로, -O-C_1-6알킬, -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸이고;
(v) R_f 및 R_g는 독립적으로 H 또는 C_1-4알킬이고;
(vi) R_h 및 R_i는 독립적으로 H 또는 C_1-4알킬이며;
(vii) R_j는 H 또는 C_1-4알킬이다.
제1항에 있어서, 유리 형태 또는 염 형태의 하기 화학식 I(i):

의 화합물인 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
(i) R₁은 C_1-4알킬이고;
(ii) R₂는 C_1-4알콕시이고;
(iii) R₃은 H이고;
(iv) R_b, R_c 및 R_e는 H이고; R_a는 할로이고 R_d는 -O-C_1-6알킬, -OCH₂-사이클로프로필, -OCH₂-사이클로부틸 또는 -OCH₂-사이클로펜틸인, 유리 형태 또는 염 형태의 화합물.
제1항 또는 제2항에 있어서, 유리 형태 또는 염 형태의,
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(4-플루오로페녹시)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(디메틸아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피롤리딘-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(1H-피라졸-1-일)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-8-(피리딘-2-일아미노)-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-8-(에틸티오)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카보니트릴;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실산;
에틸 1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복실레이트;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-N-에틸-3-메틸-4-옥소-4,5-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-4-옥소-3a,4-디하이드로-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-8-카복사미드;
8-클로로-1-(2-클로로-5-(사이클로프로필메톡시)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(2-클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(2,5-디클로로페닐)-3,5-디메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-플루오로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
8-클로로-1-(2,5-디클로로페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-클로로-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온;
1-(5-부톡시-2-클로로페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온; 및
1-(2-클로로-5-(사이클로부틸메톡시)페닐)-8-메톡시-3-메틸-1H-피라졸로[4,3-c][1,5]나프티리딘-4(5H)-온
으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물.
제1항 또는 제2항에 따른 화합물을, 약학적으로 허용되는 희석제 또는 담체와 조합하여 또는 회합하여 포함하는, 불안증, 우울증, 자폐증 스펙트럼 장애, 조현병, 및 조현병 또는 치매와 연관된 인지력 손상으로부터 선택되는 PDE2 매개 질환의 치료를 위한 약학 조성물.
제5항에 있어서, 질환이 자폐증 또는 조현병 환자의 불안증, 및 자폐증 또는 조현병 환자의 우울증으로부터 선택되는 약학 조성물.
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