EA003140B1 - Способ получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам, растение, полученное указанным способом, и способ обработки растений гербицидами - Google Patents
Способ получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам, растение, полученное указанным способом, и способ обработки растений гербицидами Download PDFInfo
- Publication number
- EA003140B1 EA003140B1 EA200001219A EA200001219A EA003140B1 EA 003140 B1 EA003140 B1 EA 003140B1 EA 200001219 A EA200001219 A EA 200001219A EA 200001219 A EA200001219 A EA 200001219A EA 003140 B1 EA003140 B1 EA 003140B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- herbicides
- plants
- herbicide
- inhibitor
- plant
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
- C12N15/8202—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation by biological means, e.g. cell mediated or natural vector
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/72—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
- A01N43/80—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms five-membered rings with one nitrogen atom and either one oxygen atom or one sulfur atom in positions 1,2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N57/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds
- A01N57/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having alternatively specified atoms bound to the phosphorus atom and not covered by a single one of groups A01N57/10, A01N57/18, A01N57/26, A01N57/34
- A01N57/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having alternatively specified atoms bound to the phosphorus atom and not covered by a single one of groups A01N57/10, A01N57/18, A01N57/26, A01N57/34 containing acyclic or cycloaliphatic radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
- C12N15/8275—Glyphosate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
- C12N15/8277—Phosphinotricin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0069—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
- C12N9/1092—3-Phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase (2.5.1.19), i.e. 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Botany (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Catching Or Destruction (AREA)
Abstract
Изобретение относится: 1. К способу получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам; 2. К растению, устойчивому одновременно к нескольким гербицидам, в частности, к ингибиторам гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD) и к ингибиторам 5-енолпирувилшикимат -3-фосфатсинтазы (EPSPS) и/или к дигалогеногидроксибензонитрилам; 3. К способу обработки указанных растений несколькими гербицидами.
Description
Объектом настоящего изобретения является способ получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам.
Далее в описании гербициды будут иметь общее название, а именно, указанное в 10-м издании Тйс Ре811С1йе Мапиа1, Βπΐί81ι Сгор Рго1есйоп СоипсД
Известны растения, которые были трансформированы с целью придания им устойчивости к некоторым гербицидам, например, к дигалогеногидроксибензонитрилам, в частности, к бромоксинилу и иоксинилу, благодаря гену, кодирующему нитрилазу, разрушающую эти гербициды, или растения, устойчивые к гербицидам ингибиторам 5-енолпирувилшикимат-3фосфатсинтазы (ЕР8Р8), в частности, глифозату, сульфозату или фосаметину, или к ингибиторам ацетолактатсинтетазы (ЛЬ8), типа сульфонилмочевин, или к ингибиторам дигидроптероатсинтетазы, таким как азулам, или к ингибиторам глутаминсинтетазы, таким как глуфозинат.
Известны некоторые гербициды, такие как изоксазолы, описанные, в частности, во французских заявках 95 06800 и 95 13570, и, в частности, изоксафлутол, селективный гербицид кукурузы, дицетонитрилы, описанные в европейских заявках 0 496 630, 0 496 631, в частности, 2-циано-3 -циклопропил-1-(2-8О2СН3-4СР3фенил)пропан-1,3-дион и 2-циано-3-циклопропил-1 -(2-8О2СН3-4-2,3 С12фенил)пропан-1,3дион, трикетоны, описанные в европейских заявках 0 625 505 и 0 625 508, в частности, сулкотрион, или же трикетоны, описанные в И8Р 5 506 195, или пиразолинаты. Кроме того, был выделен ген, кодирующий гидроксифенилпируватдиоксигеназу (НРРИ), с целью придания устойчивости к этим вышеназванным гербицидам, а полученные содержащие его трансгенные растения демонстрируют значительную устойчивость и являются объектом неопубликованных французских заявок №№ 95/06800, 95/13570 и 96/05944.
Однако, сельскохозяйственная практика показывает, что для обработки растений фермеры предпочитают иметь у себя ассоциации гербицидов, в частности, чтобы решать различные проблемы по уничтожению сорняков, возникающие из-за ограниченного спектра отдельно взятых гербицидов. Для фермеров также представляет интерес наличие маркерного гена селекции, ассоциированного с геном, кодирующим устойчивость к гербицидам. Таким образом, сельское хозяйство нуждается в растениях, обладающих устойчивостью к нескольким гербицидам, предпочтительно, по меньшей мере, к двум или трем.
Было обнаружено, что растительной клетке и растению можно придать множественную гербицидную устойчивость.
Объектом изобретения является прежде всего способ получения растения с множествен ной гербицидной устойчивостью путем растительного трансгенеза, отличающийся тем, что на первой стадии вводят в несколько клеток различных растений, соответственно, один из генов, содержащих элементы регуляции, необходимые для его транскрипции в растениях, и последовательность, которая кодирует фермент, сообщающий растениям устойчивость к одному гербициду, и скрещивают растения с получением растения с множественной устойчивостью к гербицидам.
В качестве кодирующей последовательности можно использовать, в частности, все известные последовательности, придающие растениям устойчивость к некоторым ингибиторам. Это последовательность ЕР8Р8, кодирующая устойчивость к глифозату, сульфозату или фосаметину, в частности, последовательности мутированного или немутированного протеина, описанные в патентах И8Р 4 535 060, ЕР 115 673, И8Р 4 769 061, И8Р 5 094 945; И8Р 4 971 908, И8Р 5 145 783, ЕР 293 358; ЕР 378 985, АО 91/04323, АО 92 044 449, АО 92 06201. В дальнейшем этот тип гена будет называться последовательностью или геном ЕР8Р8.
Также можно назвать глифозатоксидоредуктазу (см. АО 92/000377) - фермент детоксификации глифозата;
- последовательность гена нитрилазы К1еЬ81е11а 8р., кодирующего устойчивость к дигалогенобензонитрилам, описанная в И8Р 4 810 648, и, в частности, гена, полученного от К1еЬ81е11а охаепае. который в дальнейшем будет называться геном или последовательностью ОХУ;
- последовательность НРРИ, описанная в вышеназванных неопубликованных французских заявках №№ 95/06800, 95/13570 и
96/05944. Эта последовательность НРРИ может быть любой природы.
В частности, эта последовательность может иметь бактериальное происхождение, как, например, род Р8еибошопа8, или растительное происхождение, например, от однодольного или двудольного растения, в частности, от ЛгаЫбор818 или от зонтичных, например моркови (Иаиси8 саго!а). Она может быть самородной или дикой или, при необходимости, мутированной, сохраняющей при этом свойство гербицидной устойчивости к ингибиторам НРРИ, таким как гербициды семейства изоксазолов или семейства трикетонов или пиразолинатов.
Можно также использовать другие последовательности:
последовательность фосфинотрицинацетилтрансферазы или последовательность глутаминсинтетазы, кодирующая устойчивость к глуфозинату (см. ЕР 0 242 236);
последовательность дигидроптероатсинтетазы, кодирующая устойчивость к азуламу (см.
ЕР 0 369 367);
последовательность АЬ8. кодирующая устойчивость к сульфонилмочевинам;
последовательность протопорфирогеноксидазы (ргоФх), кодирующая устойчивость к гербицидам семейства дифенилэфиров, таких как ацифторфен или оксифторфен, или последовательность оксадиазолов, таких как оксадиазон или оксадиаргил, или последовательность циклических имидов, таких как хлорфталим, или последовательность фенилпирразолов, таких как ΤΝΡ, или последовательности пиридинов и фенопилаты и сходные карбаматы (см. АО 95/34659).
Объектом изобретения является также трансформированное растение, устойчивое, по меньшей мере, к двум гербицидам, одним из которых является ингибитор ΗΡΡΌ. Это растение может быть получено скрещиванием, по меньшей мере, двух растений, каждое из которых содержит ген, кодирующий устойчивость к одному гербициду. Растения могут быть однодольными или двудольными, в частности, культурными растениями в крупном земледелии, неограничительными примерами двудольных растений являются табак, хлопок, рапс, соя, свекла, а однодольных растений - кукуруза и злаки; также это могут быть овощные культуры или цветы.
Трансформация клеток на первой стадии способа по изобретению может быть осуществлена любым известным соответствующим способом, широко описанным в специальной литературе и, в частности, в заявках и патентах, приведенных в данной заявке.
Одна серия методов состоит в бомбардировке клеток или протопластов частицами, к которым прикреплены последовательности ДНК. Согласно изобретению, эти ДНК могут переноситься одними и теми же частицами или разными. Другая серия методов состоит в том, что в качестве средства переноса в растение используют соответствующие векторы.
Могут быть использованы и другие методы, например, микроинъекция или электропорация.
Специалист может выбрать подходящий метод в зависимости от растения, в частности, от того, является оно однодольным или двудольным.
Было обнаружено, что растения, трансформированные согласно изобретению, обладают значительной устойчивостью к ингибиторам гидроксифенилпируватдиоксигеназы, например, к некоторым из последних гербицидов, таким как изоксазолы, описанные, в частности, во французских заявках 9506800 и 95 13570, а именно 4-[4-СБ3-2-(метилсульфонил)бензоил]-5циклопропилизоксазол, или изоксафлутол, селективный гербицид кукурузы, дицетонитрилы, описанные в европейских заявках 0 496 630, 0 496 631, в частности, 2-циано-3-циклопропил1-(2-8О2СН3-4-СБ3фенил)пропан-1,3-дион и 2 циано-3-циклопропил-1-(2-8О2СН3-4-2,3С12фенил)пропан-1,3-дион, трикетоны, описанные в европейских заявках 0 625 505 и 0 625 508, в частности, сулкотрион и пиразинолаты. Эти же растения, согласно изобретению, обладают значительной устойчивостью к другим гербицидам, например, таким как дигалогенобензонитрилы, а именно бромоксинил и иоксинил, глуфозат и его аналоги, глуфозинат.
Наконец, объектом данного изобретения является способ обработки растений, в частности, культур, с помощью гербицида данного типа, отличающийся тем, что гербицид наносят на растения, полученные способом согласно изобретению, как перед посевом, перед всходом так и после всхода культуры. Под гербицидом в настоящем изобретении подразумевают активное гербицидное вещество, взятое одно или в ассоциации с добавкой, которая изменяет его эффективность, такой как вещество, повышающее активность (синергический агент), или вещество, ограничивающее активность (поанглийски каГепег);
Разумеется, что вышеназванные гербициды при их практическом применении сочетают с добавками такого состава, как обычно используют в агрохимии.
Согласно изобретению, один из генов гербицидной устойчивости, присутствующих в растениях, может быть использован в качестве маркера селекции, либо ίη νίίτο, либо ίη νΐνο.
Различные аспекты изобретения станут более понятны с помощью экспериментальных примеров, приведенных ниже.
Пример 1. Выделение гена ΗΡΡΌ Ρ. Г1иогексепк А 32.
Из последовательности аминокислот ΗΡΡΌ Ρкеиάοтοηак κρ.Ρ.1.874 (опубликовано Кйе1 кс1и и. и др. 1992. Еиг. I. Вюсйет. 205; 459-466), выводят последовательность различных олигонуклеотидов, чтобы амплифицировать с помощью ПЦР часть кодирующей последовательности ΗΡΡΌ Ρ. Диогекеепк А 32 (выделена МсКе11аг, КС. 1982, I. Αρρί. Вас1егю1., 53:305-316). Фрагмент амплификации гена ΗΡΡΌ был использован для просеивания частичного геномного банка Р. Диогексепк А 32, чтобы выделить, таким образом, ген, кодирующий этот фермент.
А) Получение геномной ДНК Р. Диогексепк А 32
Бактерию культивировали в 40 мл минимальной среды М63 (КН2РО4 13,6 г/л, (ΝΗ4)28Ο4 2 г/л, Мд8О4 0,2 г/л, Бе8О4 0,005 г/л рН 7 плюс Ь - тирозин 10 мМ в качестве единственного источника углерода) при 28°С в течение 48 ч.
После промывания клетки помещают в 1 мл лизирующего буферного раствора (Юк ΗΟ
100 мМ рН 8,3, №1С1 1,4М и ΕΌΤΑ 10 мМ) и инкубируют 10 мин при 65°С. После обработки смесью фенол/хлороформ (24/1) и обработки хлороформом нуклеиновые кислоты осаждают добавлением одного объёма изопропанола, затем помещают в 300 мкл стерильной воды и обрабатывают в растворе рибонуклеазы 10 мкг/мл конечн. ДНК снова обрабатывают смесью фенол/хлороформ, хлороформом и осаждают добавлением 1/10 объёма ацетата натрия 3М рН5 и 2-х объёмов этанола. Затем ДНК помещают в стерильную воду и дозируют.
Б) Выбор олигонуклеотидов и синтезов
Из последовательности аминокислот ΗΡΡΌ Ркеиботоиак кр. Ρ.1.874 выбирают пять олигонуклеотидов, из которых два - в направлении от концевой группы ΝΗ2 к концевой группе СООН протеина, а три - в противоположном направлении (см. фиг. 1). Этот выбор был продиктован двумя следующими правилами:
- стабильный 3' - конец олигонуклеотида, то есть, по меньшей мере, два основания без амбивалентности,
- как можно более слабая дегенерация.
Выбранные олигонуклеотиды имеют следующие последовательности:
Р1: 5'ТА(С/Т)СА(О/А)АА(С/Т)СС1АТССО3'
Р2: 5'ОА(О/А)АС1СС1СС1АТСС-А3'
Р3:
5'АА(С/Т)ТСНАНА(О/А)(О/А)АА(С/Т)ТС(С/Т)ТС3'
Р4: 5'АА1СС1АС(О/А)ТС(С/Т)ТС(Т/О/А)АТ1СС3' Р5: 5'СС(С/Т)ТТ(А/О)АА(А/О)Т11СС(С/Т)ТС1СС3' Они были синтезированы на синтезаторе Сус1опе р1ик ΟΝΛ 8уп111ек1/ег марки МЮББОВЕ.
С этими 5 олигонуклеотидами, амплифицированными с помощью ПЦР, фрагменты амплификации, которые теоретически должны быть получены из последовательности 8ЕО ΙΌ №1, имеют следующие размеры:
с Р1 и Р3 приблизительно 690 нп с Р1 и Р4 приблизительно 720 нп с Р1 и Р5 приблизительно 1000 нп с Р2 и Р3 приблизительно 390 нп с Р2 и Р4 приблизительно 420 нп с Р2 и Р5 приблизительно 700 нп
В) Амплификация кодирующей части ΗΡΡΌ Р. Пногексепк А 32
Амплификация была проведена на приборе ΡΟΗ ΡΕΒΚΙΝ ЕБМЕВ 9600 и с Тас.| полимеразой ΡΕΒΚΙΝ ЕБМЕВ с её буферным раствором в стандартных условиях, то есть на 50 мкл реакции имеется 6ΝΤΡ в 200 мкМ, праймеры в 20 мкМ, Тас.| полимераза 2,5 единицы и ДНК Р. Пногексепк А 32 2,5 мкг.
Используемая программа амплификации: 5 мин при 95°С, затем 35 циклов (45 с 95°С, 45 с 49°С, 1 мин 72°С), затем 5 мин при 72°С.
В этих условиях все полученные фрагменты амплификации имеют размер, соответствующий вышеприведенным теоретическим размерам, что является хорошим показателем специфичности амплификации.
Фрагменты амплификации, полученные с Р1/Р4, Р1/Р5 и Р2/Р4, объединяют в рВ8П 8Κ (-) после расщепления этой плазмиды с помощью Есо ВУ и обработки конечной трансферазой в присут ствии 66ΤΤΡ. как описано ΗΟΕΤΟΝ Т.А. и СВАНАМ М.А., 1991, ΝΑ.Β., том 19, N 5, стр. 1156.
Один клон каждого из трёх типов частично секвенируют, это позволяет подтвердить, что в этих трёх случаях амплифицировали часть кодирующего участка ΗΡΡΌ Ρ. Пногексепк А 32. Фрагмент Р1/Р4 сохраняют как зонд для просеивания частичного геномного банка Р. Пногексепк А 32 и выделения полного гена ΗΡΡΌ.
Г) Выделение гена
С помощью 8ои!йегп можно показать, что фрагмент в 7 Кнп после расщепления ДНК Р. Ппогексепк А 32 с помощью рестрикционного фермента ВатШ гибридизуется с зондом ΗΡΡΌ Ρ1/Ρ4. Таким образом, 400 мкг ДНК Р. Пногексепк А 32 расщепили с помощью рестрикционного фермента ВатШ и очистили на геле агарозы фрагменты ДНК, составляющие примерно 7 Кнп.
Эти фрагменты объединяют в рВ8П 8Κ (-), в свою очередь расщеплённом с помощью ВатШ и дефосфорилированном обработкой щелочной фосфатазой. После трансформации в Е. сой ΌΗ1ΟΠ частичный геномный банк просеивают с помощью зонда ΗΡΡΌ Ρ1/Ρ4.
Был выделен положительный клон, названный ρΒΡ А. Его упрощенная карта представлена на фиг. 2. На этой карте указано положение кодирующей части гена ΗΡΡΌ. Она состоит из 1077 нуклеотидов, которые кодируют 358 аминокислот (см. 8ЕО ΙΌ №1). Аминокислотная последовательность ΗΡΡΌ Ρ. Пногексепк А 32 в значительной степени гомологична последовательности ΗΡΡΌ Бкепботопак кр. к1га1п Ρ.Ε874; действительно, имеется 92% совпадений между этими двумя протеинами (см. фиг. 3).
Пример 2. Трансформация промышленного табака ΡΕΌ6 геном нитрилазы (для конструкция 238).
Этот табак получен согласно европейской заявке № 0 337 899, страница 6, строка 50 и следующие, из конструкции 238, которая описана под названием рКПА-ВБ 238.
Пример 3. Скрещивание опылением.
В теплице проводят скрещивание опылением, соответственно линий Со 17, 173 и 238:
Со 17 с 238, чтобы получить растения табака ΡΕΌ6 для тестирования на двойную устойчивость к изоксафлутолу и бромоксинилу (растения ΗΡΡΌ + ΟΧΥ) и
Со 17 с 173, чтобы получить растения табака ΡΕΌ6 для тестирования на двойную устойчивость к изоксафлутолу и глифозату (растения ΗΡΡΌ + ΕΡ8Ρ8).
Три клона являются гомозиготными по задействованному гену, следовательно, потомство является гемизиготным для каждого из двух генов, введенных скрещиванием.
Скрещенные растения получают через шесть недель.
Пример 4. Измерение устойчивости табака при обработке проросшего растения изоксафлутолом и бромоксинилом или глифозатом.
В этой пробе каждый тест проводят на образце из 10 растений, причем ещё 10 растений оставляют необработанными.
Все виды обработки осуществляют пульверизацией из расчета 500 л раствора на гектар.
Для обработки проросших растений производят посев, затем пересаживают растения в чаши размером 9 см х 9 см.
Обработка проросших растений производится на стадии хорошего развития (3-4 листочка). Партии растений, соответственно, дикие и генетически трансформированные, как описано выше, разделяют на несколько частей:
а) необработанная партия,
б) другие партии, обработанные, соответственно, только одним гербицидом,
- проросшие растения, обработанные 2 дозами изоксафлутола (соответственно 200 и 400 г/га),
- проросшие растения, обработанные 2 дозами бромоксинила (соответственно 400 и 800 г/га),
- проросшие растения, обработанные 2 дозами глифозата (соответственно 800 и 1200 г/га),
в) другие партии, обработанные соответственно двумя гербицидами, в проросшей стадии, смесью, приготовленной перед самым использованием:
- двумя дозами изоксафлутола и бромоксинила (соответственно 200/400 и 400/800 г/га),
- двумя дозами изоксафлутола и глифозата (соответственно 200/800 и 400/1200 г/га).
Обработку проводят, используя следующие составы:
изоксафлутол 75%, бромоксинил (товарный продукт ΡΆΒΟΝΕΒ) в виде октаноата в эмульгирующемся концентрате 225 г/л и глифозат (РонпбϋΡ).
В этих условиях через 17 дней после обработки наблюдают следующие признаки фитотоксичности, которые указаны в таблице, в процентах деструкции, а также в таблице указано число растений на партию и дозы гербицидов, выраженные в граммах активного вещества на гектар:
Обработка проросших растений изоксафлутолом и бромоксинилом или глифозатом
Гербицид в г/л | Растения с геном устойчивость | |||||
* | ΙΙΡΡΙ) +ΟΧΥ | * | ΗΡΡΏ+ ΕΡ8Ρ8 | * | Без обработки = дикие | |
Контрольные дозы | 10 | 10 | 10 | |||
Изоксафлутол 200 Один 400 | 20 | 4% | 20 | 2% | 10 | 75% |
20 | 5% | 20 | 3% | 85% | ||
Бромоксинил 400 Один 800 | 10 | 3% | 10 | 0% | ||
10 | 0% | 10 | 0% | |||
Глифозат 800 Один 1200 | 20 | 0% | 10 | 100% | ||
20 | 0% | 10 | 100% | |||
Изоксафлутол 200 +бромоксинил 800 | 20 | 20% | 10 | 100% | ||
Изоксафлутол 400 +бромоксинил 800 | 20 | 30% | 10 | 100% | ||
Изоксафлутол 200 +глифозат 800 | 40 | 5% | 10 | 100% | ||
Изоксафлутол 400 +глифозат 1200 | 40 | 10% | 10 | 100% | ||
* количество растений
Представлены следующие последовательности:
8ΕΟ ΙΌ № 1 последовательность гена ΗΡΡΌ Ркеибошопаз Пногезсепз А 32.
8ΕΟ ΙΌ № 2 последовательность кДНК ΕΡ8Ρ8 АтаЫборз1з (Пайана
8ΕΟ ΙΌ № 3 и 4 последовательности, соответственно, гена и протеина ΕΡ8Ρ8 мутированной кукурузы, часть из 1340 нп клона ρΡΡΛ-ΜΕ-716
8ΕΟ ΙΌ № 5 и 8ΕΟ ΙΌ № 6 последовательности, соответственно, гена и протеина
ΕΡ8Ρ8 мутированной кукурузы, часть из 1340 нп клона ρΒΡΑ-ΜΕ-720.
Для сведения прилагаются фигуры, в качестве иллюстрации изобретения.
На фиг. 1 представлена белковая последовательность ΗΡΡΌ Ρзеиботопаз зр. з1гаш Ρ.Ι 874 и теоретическая нуклеотидная последовательность соответствующей кодирующей части; пять олигонуклеотидов, выбранных для амплификации одной части этого кодирующего участка, обозначены пятью стрелками.
На фиг. 2 представлена картография плазмиды с фрагментом геномной ДНК из 7 кЬ, содержащей ген ΗΡΡΌ Р. Виотезсепз А 32.
На фиг. 3 приводится сравнение аминокислотных последовательностей ΗΡΡΌ Ρ.Г1ио^езсеηз А 32 и ΗΡΡΌ Ρзеиботопаз зр з1гаш ΡΤ 874 (указаны только аминокислоты, различающиеся у двух последовательностей), а также консенсусная последовательность.
Claims (16)
1. Способ получения растения с множественной устойчивостью к гербицидам, отличающийся тем, что на первой стадии вводят в несколько клеток различных растений, соответственно, один из генов, содержащих элементы регуляции, необходимые для его транскрипции в растениях, и последовательность, которая кодирует фермент, сообщающий растениям устойчивость к гербициду, и скрещивают растения с получением растения с множественной устойчивостью к гербицидам.
2. Растение с множественной устойчивостью к гербицидам, полученное способом по п.1.
3. Способ обработки растения по п.2 гербицидами.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что используют, по меньшей мере, два гербицида.
5. Способ по п.3, отличающийся тем, что используют, по меньшей мере, три гербицида.
6. Способ по одному из пп.3-5, отличающийся тем, что один из гербицидов является ингибитором гидроксифенилпируватдиоксигеназы (ΗΡΡΌ).
7. Способ по одному из пп.4-6, отличающийся тем, что гербициды применяют одновременно.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что гербициды применяют в виде одной композиции, готовой к использованию.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что гербициды применяют в виде смеси, приготовленной перед самым использованием.
10. Способ по одному из пп.4-6, отличающийся тем, что гербициды применяют последовательно.
11. Способ по одному из пп.6-10, отличающийся тем, что гербицидом ингибитором ΗΡΡΌ является изоксафлутол.
12. Способ по одному из пп.6-10, отличающийся тем, что гербицидом ингибитором ΗΡΡΌ является сулкотрион.
13. Способ по одному из пп.4-12, отличающийся тем, что второй гербицид принадлежит к группе дигидрогеногидроксибензонитрилов.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что гербицид выбирают из группы, включающей бромоксинил и иоксинил.
15. Способ по одному из пп.4-14, отличающийся тем, что второй гербицид является ингибитором 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазы (ΕΡ8Ρ8).
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что ингибитором ΕΡ8Ρ8 является глифозат или сульфозат.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR9609137A FR2751347B1 (fr) | 1996-07-16 | 1996-07-16 | Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides |
PCT/FR1997/001256 WO1998002562A2 (fr) | 1996-07-16 | 1997-07-10 | Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200001219A1 EA200001219A1 (ru) | 2001-06-25 |
EA003140B1 true EA003140B1 (ru) | 2003-02-27 |
Family
ID=9494283
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA199900116A EA002980B1 (ru) | 1996-07-16 | 1997-07-10 | Химерная конструкция, включающая, по крайней мере, два гена устойчивости растений к гербицидам, линия растительных клеток, содержащая указанную конструкцию, растение, устойчивое, по крайней мере, к двум гербицидам, и способ обработки растений гербицидами |
EA200001219A EA003140B1 (ru) | 1996-07-16 | 1997-07-10 | Способ получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам, растение, полученное указанным способом, и способ обработки растений гербицидами |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA199900116A EA002980B1 (ru) | 1996-07-16 | 1997-07-10 | Химерная конструкция, включающая, по крайней мере, два гена устойчивости растений к гербицидам, линия растительных клеток, содержащая указанную конструкцию, растение, устойчивое, по крайней мере, к двум гербицидам, и способ обработки растений гербицидами |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US7250561B1 (ru) |
EP (1) | EP0937154A2 (ru) |
JP (1) | JP2000517166A (ru) |
KR (1) | KR20000023830A (ru) |
CN (1) | CN1154741C (ru) |
AR (1) | AR007884A1 (ru) |
AU (1) | AU734878B2 (ru) |
BR (2) | BR9710340B1 (ru) |
CA (1) | CA2261094C (ru) |
CO (1) | CO4770898A1 (ru) |
CU (1) | CU22809A3 (ru) |
CZ (1) | CZ11399A3 (ru) |
EA (2) | EA002980B1 (ru) |
FR (1) | FR2751347B1 (ru) |
HU (1) | HU223788B1 (ru) |
NZ (1) | NZ334188A (ru) |
PL (1) | PL190393B1 (ru) |
TR (1) | TR199900117T2 (ru) |
WO (1) | WO1998002562A2 (ru) |
ZA (1) | ZA976296B (ru) |
Families Citing this family (113)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2736926B1 (fr) * | 1995-07-19 | 1997-08-22 | Rhone Poulenc Agrochimie | 5-enol pyruvylshikimate-3-phosphate synthase mutee, gene codant pour cette proteine et plantes transformees contenant ce gene |
CA2269666A1 (en) * | 1996-11-07 | 1998-05-14 | Zeneca Limited | Herbicide resistant plants |
US7235716B2 (en) | 1997-06-03 | 2007-06-26 | Chromatin, Inc. | Plant centromere compositions |
US7119250B2 (en) | 1997-06-03 | 2006-10-10 | The University Of Chicago | Plant centromere compositions |
US7193128B2 (en) | 1997-06-03 | 2007-03-20 | Chromatin, Inc. | Methods for generating or increasing revenues from crops |
US6900012B1 (en) | 1997-06-03 | 2005-05-31 | The University Of Chicago | Plant artificial chromosome compositions and methods |
US7227057B2 (en) | 1997-06-03 | 2007-06-05 | Chromatin, Inc. | Plant centromere compositions |
WO1999005265A2 (en) * | 1997-07-23 | 1999-02-04 | Sanford Scientific, Inc. | Improved plastid transformation of higher plants and production of transgenic plants with herbicide resistance |
US7161064B2 (en) | 1997-08-12 | 2007-01-09 | North Carolina State University | Method for producing stably transformed duckweed using microprojectile bombardment |
US6069115A (en) * | 1997-11-12 | 2000-05-30 | Rhone-Poulenc Agrochimie | Method of controlling weeds in transgenic crops |
FR2771104B1 (fr) * | 1997-11-17 | 2000-12-08 | Rhone Poulenc Agrochimie | Gene chimere ayant un promoteur lumiere dependant conferant la tolerance aux inhibiteurs del'hppd |
JP4788011B2 (ja) * | 1998-04-30 | 2011-10-05 | 住友化学株式会社 | 雑草防除剤耐性の付与方法 |
BR9912745A (pt) | 1998-08-04 | 2001-11-06 | Cargill Inc | Promotores da desnaturase de ácido graxo de plantas |
DE19836673A1 (de) | 1998-08-13 | 2000-02-17 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Herbizide Mittel für tolerante oder resistente Zuckerrübenkulturen |
FR2785148B1 (fr) * | 1998-11-02 | 2000-12-15 | Rhone Poulenc Agrochimie | Nouvelles compositions herbicide a base de glyphosate et d'isoxazoles |
JP4570706B2 (ja) * | 1999-03-09 | 2010-10-27 | バイエルクロップサイエンス株式会社 | 水田雑草の防除方法 |
US7989202B1 (en) | 1999-03-18 | 2011-08-02 | The University Of Chicago | Plant centromere compositions |
JP4821038B2 (ja) * | 1999-10-29 | 2011-11-24 | 住友化学株式会社 | 除草剤耐性植物 |
EP1315801A1 (fr) * | 2000-09-08 | 2003-06-04 | Bayer CropScience S.A. | Hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase fusionnee a un peptidesignal, sequence d 'adn et obtention de plantes contenant un tel gene,tolerantes aux herbicides |
EP1362113B1 (en) | 2001-02-22 | 2011-01-12 | Biogemma | Constitutive promoter from arabidopsis |
TR201816453T4 (tr) | 2001-08-09 | 2018-11-21 | Northwest Plant Breeding Company | İmidazolinon herbisitlerine karşi direnci arttirilmiş buğday bitkileri. |
US8729341B2 (en) | 2004-02-23 | 2014-05-20 | University Of Chicago | Plants modified with mini-chromosomes |
MXPA06011412A (es) | 2004-03-30 | 2007-01-23 | Monsanto Technology Llc | Metodos para controlar patogenos en plantas utilizando n-fosfonometilglicina. |
EP2308977B2 (en) | 2004-04-30 | 2017-04-26 | Dow AgroSciences LLC | Novel herbicide resistance gene |
EP1929019A2 (en) | 2005-09-08 | 2008-06-11 | Chromatin, Inc. | Plants modified with mini-chromosomes |
BRPI0618025B1 (pt) * | 2005-10-28 | 2016-12-27 | Dow Agrosciences Llc | método para controlar ervas daninhas em uma área, polinucleotídeo isolado, célula de planta e planta resistente a herbicida |
ES2531882T3 (es) * | 2006-01-12 | 2015-03-20 | Cibus Europe B.V. | EPSPS mutantes |
PE20080886A1 (es) * | 2006-10-03 | 2008-08-21 | Monsanto Technology Llc | Metodo para la produccion de semilla de maiz hibrido y composiciones producidas a partir del mismo |
EP2094831B1 (en) * | 2006-12-07 | 2015-09-16 | Dow AgroSciences LLC | Novel selectable marker genes |
WO2008112972A2 (en) | 2007-03-15 | 2008-09-18 | Chromatin, Inc. | Centromere sequences and minichromosomes |
CN101998988A (zh) * | 2007-05-30 | 2011-03-30 | 先正达参股股份有限公司 | 赋予除草剂抗性的细胞色素p450基因 |
US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-01-17 | Beelogics Inc. | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
AR071237A1 (es) * | 2008-05-02 | 2010-06-02 | Pioneer Hi Bred Int | Seleccion quimica de gametos resistentes a glifosato de plantas a campo |
EP2299804A4 (en) * | 2008-06-11 | 2011-05-18 | Dow Agrosciences Llc | RECOMBINANT PRODUCTS FOR EXPRESSION OF HERBICIDE TOLERANT GENES, ASSOCIATED PLANTS, AND COMBINATIONS OF ASSOCIATED CHARACTERS |
GB0816880D0 (en) * | 2008-09-15 | 2008-10-22 | Syngenta Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
WO2010135324A1 (en) * | 2009-05-18 | 2010-11-25 | Monsanto Technology Llc | Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean |
CA2767724A1 (en) | 2009-07-23 | 2011-01-27 | Chromatin, Inc. | Sorghum centromere sequences and minichromosomes |
US8962584B2 (en) | 2009-10-14 | 2015-02-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. | Compositions for controlling Varroa mites in bees |
CA2781598C (en) | 2009-11-23 | 2020-06-02 | Bayer Cropscience N.V. | Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same |
KR101951958B1 (ko) | 2009-11-23 | 2019-02-25 | 바이엘 크롭사이언스 엔.브이. | 우량 이벤트 ee-gm3, 그리고 생물학적 시료에서 이러한 이벤트를 동정하기 위한 방법 및 키트 |
US9057072B2 (en) | 2009-11-24 | 2015-06-16 | Katholieke Universiteit Leuven, K.U. Leuven R&D | Banana promoters |
BR112012015690A2 (pt) * | 2009-12-23 | 2015-08-25 | Bayer Intelectual Property Gmbh | Plantas tolerantes a herbicidas inibidores de hppd. |
BR112012015692A2 (pt) * | 2009-12-23 | 2015-08-25 | Bayer Intelectual Property Gmbh | Plantas tolerantes a herbicida inibidor de hppds. |
AU2010334808B2 (en) * | 2009-12-23 | 2015-07-09 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Plants tolerant to HPPD inhibitor herbicides |
CN102869769A (zh) * | 2009-12-23 | 2013-01-09 | 拜尔知识产权有限公司 | 耐受hppd抑制剂型除草剂的植物 |
ES2659086T3 (es) * | 2009-12-23 | 2018-03-13 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Plantas tolerantes a herbicidas inhibidores de HPPD |
JP2010070578A (ja) * | 2010-01-05 | 2010-04-02 | Rhone Poulenc Yuka Agro Kk | 水田雑草の防除方法 |
WO2011112570A1 (en) | 2010-03-08 | 2011-09-15 | Monsanto Technology Llc | Polynucleotide molecules for gene regulation in plants |
WO2012021785A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods comprising sequences having hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (hppd) activity |
US20140056908A1 (en) * | 2010-10-08 | 2014-02-27 | Fraunhofer Usa Inc. | Closterovirus-based nucleic acid molecules and uses thereof |
US9018451B2 (en) * | 2010-12-03 | 2015-04-28 | M S Technologies, LLC | Optimized expression of glyphosate resistance encoding nucleic acid molecules in plant cells |
BR122019027736B1 (pt) * | 2010-12-28 | 2021-04-27 | Incorporated Administrative Agency, National Agriculture And Food Research Organization | Vetor e processo para a produção de uma planta |
EP3434780A1 (en) | 2011-09-13 | 2019-01-30 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
WO2013040005A1 (en) | 2011-09-13 | 2013-03-21 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
BR112014005795A2 (pt) | 2011-09-13 | 2020-12-08 | Monsanto Technology Llc | métodos de controle de plantas, de redução da expressão de um gene de hppd de uma planta, de preparação de um nucleotídeo, e de identificação de polinucleotídeos úteis na modulação da expressão do gene de hppd no tratamento externo de uma planta, composições e cassete de expressão microbiana |
US10829828B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-11-10 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
CN104160028A (zh) | 2011-09-13 | 2014-11-19 | 孟山都技术公司 | 用于杂草控制的方法和组合物 |
US10760086B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-09-01 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
BR112014005954A2 (pt) | 2011-09-13 | 2020-12-01 | Monsanto Technology Llc | métodos e composições químicas agrícolas para controle de planta, método de redução de expressão de um gene dhps em uma planta, cassete de expressão microbiana, método para fazer um polinucleotídeo, método de identificação de polinucleotídeos úteis na modulação de expressão do gene dhps |
UA116089C2 (uk) | 2011-09-13 | 2018-02-12 | Монсанто Текнолоджи Ллс | Спосіб та композиція для боротьби з бур'янами (варіанти) |
US9840715B1 (en) | 2011-09-13 | 2017-12-12 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delaying senescence and improving disease tolerance and yield in plants |
EP2755467B1 (en) | 2011-09-13 | 2017-07-19 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
BR112014005951A2 (pt) | 2011-09-13 | 2017-04-04 | Monsanto Technology Llc | métodos e composições para controle de erva daninha |
US10806146B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-10-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
US9920326B1 (en) | 2011-09-14 | 2018-03-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for increasing invertase activity in plants |
WO2013109754A1 (en) | 2012-01-17 | 2013-07-25 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant transcription factors, promoters and uses thereof |
MX344968B (es) * | 2012-02-01 | 2017-01-12 | Dow Agrosciences Llc | Peptido de transito al cloroplasto. |
CN104703998B (zh) | 2012-03-13 | 2020-08-21 | 先锋国际良种公司 | 植物中雄性育性的遗传减少 |
WO2013138309A1 (en) | 2012-03-13 | 2013-09-19 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Genetic reduction of male fertility in plants |
MX360866B (es) | 2012-05-24 | 2018-11-09 | A B Seeds Ltd | Composiciones y métodos para silenciar la expresión genética. |
WO2013188291A2 (en) | 2012-06-15 | 2013-12-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Methods and compositions involving als variants with native substrate preference |
US10041087B2 (en) | 2012-06-19 | 2018-08-07 | BASF Agro B.V. | Plants having increased tolerance to herbicides |
AR091489A1 (es) | 2012-06-19 | 2015-02-11 | Basf Se | Plantas que tienen una mayor tolerancia a herbicidas inhibidores de la protoporfirinogeno oxidasa (ppo) |
AR092564A1 (es) * | 2012-09-14 | 2015-04-22 | Bayer Cropscience Lp | Variantes de la enzima 4-hidroxifenil piruvato deoxigenasa (hppd) y metodos de uso para conferir tolerancia a herbicidas en plantas |
CN104870647A (zh) | 2012-10-18 | 2015-08-26 | 孟山都技术公司 | 用于植物害虫控制的方法和组合物 |
US10683505B2 (en) | 2013-01-01 | 2020-06-16 | Monsanto Technology Llc | Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression |
UY35251A (es) | 2013-01-01 | 2014-07-31 | Seeds Ltd Ab | MOLÉCULAS DE dsRNA AISLADAS Y MÉTODOS PARA USARLAS PARA SILENCIAR MOLÉCULAS DIANA DE INTERÉS |
US10000767B2 (en) | 2013-01-28 | 2018-06-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for plant pest control |
US9789511B2 (en) * | 2013-03-12 | 2017-10-17 | Nordson Corporation | Jetting devices |
WO2014164797A2 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-09 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
UY35379A (es) | 2013-03-13 | 2014-09-30 | Monsanto Technology Llc | ?métodos y composiciones para el control de malezas?. |
US20140283211A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Monsanto Technology Llc | Methods and Compositions for Plant Pest Control |
CA2903693A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Maize stress related transcription factor 18 and uses thereof |
US10568328B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-25 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
CN105143454A (zh) | 2013-03-15 | 2015-12-09 | 先锋国际良种公司 | Acc氧化酶多核苷酸和多肽的组合物和使用方法 |
MX359191B (es) | 2013-07-19 | 2018-09-18 | Monsanto Technology Llc | Composiciones y métodos para controlar leptinotarsa. |
US9850496B2 (en) | 2013-07-19 | 2017-12-26 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
UA120426C2 (uk) | 2013-11-04 | 2019-12-10 | Монсанто Текнолоджі Елелсі | Композиція та спосіб для боротьби з членистоногими паразитами та зараженням шкідниками |
UA119253C2 (uk) | 2013-12-10 | 2019-05-27 | Біолоджикс, Інк. | Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл |
EP3116303B1 (en) | 2014-01-15 | 2020-07-22 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control using epsps polynucleotides |
PT3099172T (pt) | 2014-01-31 | 2021-11-08 | Agbiome Inc | Agentes modificados de controlo biológico e seus usos |
WO2015153339A2 (en) | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling insect pests |
CA2953347A1 (en) | 2014-06-23 | 2015-12-30 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for regulating gene expression via rna interference |
EP3161138A4 (en) | 2014-06-25 | 2017-12-06 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression |
CN114009454A (zh) | 2014-07-29 | 2022-02-08 | 孟山都技术公司 | 用于控制昆虫害虫的组合物和方法 |
PL3256589T3 (pl) | 2015-01-22 | 2022-02-21 | Monsanto Technology Llc | Kompozycje i sposoby kontrolowania leptinotarsa |
AU2016270870A1 (en) | 2015-06-02 | 2018-01-04 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant |
AU2016270913A1 (en) | 2015-06-03 | 2018-01-04 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for introducing nucleic acids into plants |
WO2016203377A1 (en) * | 2015-06-17 | 2016-12-22 | BASF Agro B.V. | Plants having increased tolerance to herbicides |
WO2017223501A1 (en) | 2016-06-24 | 2017-12-28 | AgBiome, Inc. | Methods and compositions for spray drying gram-negative bacteria |
WO2019023226A1 (en) | 2017-07-26 | 2019-01-31 | AgBiome, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR IMPROVING PLANT HEALTH AND CONTROL OF PLANT DISEASES AND PLANT PESTS |
AR113436A1 (es) | 2017-10-09 | 2020-05-06 | Agbiome Inc | Composiciones y métodos para mejorar la salud de la planta y controlar fitoenfermedades y plagas |
CA3026528A1 (en) * | 2017-12-15 | 2019-06-15 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for ppo herbicide tolerance |
WO2019241370A1 (en) | 2018-06-12 | 2019-12-19 | AgBiome, Inc. | Compositions and methods for improving plant health and controlling plant disease |
WO2020006555A1 (en) | 2018-06-29 | 2020-01-02 | AgBiome, Inc. | Compositions comprising bacteria and methods for controlling plant pests and improving plant health |
JP2022512655A (ja) | 2018-10-10 | 2022-02-07 | アグバイオーム, インコーポレイテッド | 植物有害生物を制御し、植物の健康状態を改善するための組成物および方法 |
JP2022509508A (ja) | 2018-10-30 | 2022-01-20 | アグバイオーム, インコーポレイテッド | 植物有害生物を制御するおよび植物の健康状態を改善するための細菌組成物および方法 |
WO2020232103A1 (en) | 2019-05-13 | 2020-11-19 | AgBiome, Inc. | Dried biological control agents and their uses |
WO2020247848A1 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | AgBiome, Inc. | Compositions and methods for improving plant health and controlling plant disease |
WO2022225925A1 (en) | 2021-04-19 | 2022-10-27 | AgBiome, Inc. | Compositions and methods for improving plant health and controlling plant disease |
US20240251801A1 (en) | 2021-05-18 | 2024-08-01 | AgBiome, Inc. | Compositions and methods for improving plant health and controlling plant disease |
WO2023211979A2 (en) | 2022-04-26 | 2023-11-02 | AgBiome, Inc. | Use of bacterial strains to solubilize phosphorus for agriculture |
WO2024026305A1 (en) | 2022-07-26 | 2024-02-01 | AgBiome, Inc. | Compositions and methods based on pseudomonas chlororaphis for improving plant health and controlling plant disease |
Family Cites Families (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4535060A (en) | 1983-01-05 | 1985-08-13 | Calgene, Inc. | Inhibition resistant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthetase, production and use |
CA1313830C (en) | 1985-08-07 | 1993-02-23 | Dilip Maganlal Shah | Glyphosate-resistant plants |
FR2591069B1 (fr) * | 1985-12-09 | 1988-03-18 | Produits Ind Cie Fse | Produits herbicides a base d'esters de bromoxynil et/ou d'ioxynil |
US7705215B1 (en) * | 1990-04-17 | 2010-04-27 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof |
DE69034268D1 (de) * | 1989-08-10 | 2011-03-03 | Bayer Bioscience Nv | Pflanzen mit modifizierten Blüten |
AU655197B2 (en) * | 1990-06-25 | 1994-12-08 | Monsanto Technology Llc | Glyphosate tolerant plants |
WO1992004449A1 (en) * | 1990-08-31 | 1992-03-19 | Monsanto Company | Glyphosate tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
FR2673643B1 (fr) | 1991-03-05 | 1993-05-21 | Rhone Poulenc Agrochimie | Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide. |
FR2673642B1 (fr) | 1991-03-05 | 1994-08-12 | Rhone Poulenc Agrochimie | Gene chimere comprenant un promoteur capable de conferer a une plante une tolerance accrue au glyphosate. |
CA2105990A1 (en) * | 1991-03-12 | 1992-09-13 | Gunter Donn | Maize resistant to aryloxyphenoxyalkanecarboxylic acid herbicides |
GB9218664D0 (en) * | 1992-09-03 | 1992-10-21 | Rhone Poulenc Agrochimie | Herbicidal compositions |
CA2146113A1 (en) * | 1992-10-15 | 1994-10-15 | Adrianus Johannes Van Tunen | Genetic moderation of restoration or plant phenotypes |
DE4305696A1 (de) | 1993-02-25 | 1994-09-01 | Hoechst Ag | Nachweisverfahren zur Identifizierung von Inhibitoren |
US5530187A (en) | 1993-07-16 | 1996-06-25 | The Salk Institute For Biological Studies | Transgenic plants containing multiple disease resistance genes |
US5491076A (en) * | 1993-11-01 | 1996-02-13 | The Texas A&M University System | Expression of foreign genes using a replicating polyprotein producing virus vector |
FR2712302B1 (fr) | 1993-11-10 | 1996-01-05 | Rhone Poulenc Agrochimie | Eléments promoteurs de gènes chimères de tubuline alpha. |
GB9515941D0 (en) * | 1995-08-03 | 1995-10-04 | Zeneca Ltd | DNA constructs |
FR2734842B1 (fr) * | 1995-06-02 | 1998-02-27 | Rhone Poulenc Agrochimie | Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase, tolerantes a certains herbicides |
EP0938546A4 (en) * | 1996-07-25 | 2003-07-30 | Basf Ag | HPPD GENES AND INHIBITORS |
US6245968B1 (en) | 1997-11-07 | 2001-06-12 | Aventis Cropscience S.A. | Mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, DNA sequence and isolation of plants which contain such a gene and which are tolerant to herbicides |
US6069115A (en) * | 1997-11-12 | 2000-05-30 | Rhone-Poulenc Agrochimie | Method of controlling weeds in transgenic crops |
-
1996
- 1996-07-16 FR FR9609137A patent/FR2751347B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-07-10 EA EA199900116A patent/EA002980B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-07-10 TR TR1999/00117T patent/TR199900117T2/xx unknown
- 1997-07-10 PL PL97331165A patent/PL190393B1/pl unknown
- 1997-07-10 US US08/945,821 patent/US7250561B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1997-07-10 AU AU36259/97A patent/AU734878B2/en not_active Ceased
- 1997-07-10 CA CA002261094A patent/CA2261094C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1997-07-10 WO PCT/FR1997/001256 patent/WO1998002562A2/fr not_active Application Discontinuation
- 1997-07-10 CN CNB971979707A patent/CN1154741C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-07-10 EA EA200001219A patent/EA003140B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-07-10 BR BRPI9710340-3A patent/BR9710340B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-07-10 BR BRPI9710340A patent/BRPI9710340B8/pt unknown
- 1997-07-10 HU HU9903774A patent/HU223788B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-07-10 CZ CZ99113A patent/CZ11399A3/cs unknown
- 1997-07-10 NZ NZ334188A patent/NZ334188A/xx unknown
- 1997-07-10 JP JP10505667A patent/JP2000517166A/ja not_active Withdrawn
- 1997-07-10 EP EP97932879A patent/EP0937154A2/fr not_active Withdrawn
- 1997-07-15 AR ARP970103160A patent/AR007884A1/es active IP Right Grant
- 1997-07-16 ZA ZA976296A patent/ZA976296B/xx unknown
- 1997-07-16 CO CO97040274A patent/CO4770898A1/es unknown
-
1999
- 1999-01-15 CU CU1999004A patent/CU22809A3/es unknown
- 1999-01-16 KR KR1019997000322A patent/KR20000023830A/ko not_active Application Discontinuation
-
2007
- 2007-07-16 US US11/778,347 patent/US20080028481A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-08-12 US US12/539,919 patent/US7935869B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-03-29 US US13/074,657 patent/US20120005769A1/en not_active Abandoned
-
2013
- 2013-02-27 US US13/779,175 patent/US20130157854A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA003140B1 (ru) | Способ получения растения, устойчивого к нескольким гербицидам, растение, полученное указанным способом, и способ обработки растений гербицидами | |
KR101741266B1 (ko) | 대두 이벤트 127 및 이에 관한 방법 | |
JP2024020385A (ja) | Ppo除草剤耐性のための方法及び組成物 | |
CN111263810A (zh) | 使用多核苷酸指导的核酸内切酶的细胞器基因组修饰 | |
US20220333126A1 (en) | Methods and compositions for herbicide tolerance in plants | |
WO2022233271A1 (en) | Method for generating new gene in organism and use thereof | |
WO2020207125A1 (zh) | 用于检测玉米植物dbn9501的核酸序列及其检测方法 | |
KR101899619B1 (ko) | Aad-1 식물에 관련된 잡초 방제 방법 및 식재-전 및/또는 발아-전 제초제 적용 | |
BRPI0610051A2 (pt) | métodos e composições para melhorar a reprodução de plantas | |
UA114716C2 (uk) | Трасгенна рослина сої, стійка до гербіцидів | |
BRPI0806200B1 (pt) | métodos de controle de ervas e método de produção de uma linhagem vegetal híbrida de sorgo | |
JP2022543138A (ja) | ダイズ植物dbn8002を検出するための核酸配列およびそのための検出方法 | |
BRPI9814369B1 (pt) | sequência de dna, gene quimérico, vetor de clonagem, processo de transformação de células vegetais, processo de controle das ervas daninhas e processo de cultura das plantas | |
CN110881367A (zh) | 一种玉米事件t抗-4及其使用方法 | |
RU2451079C2 (ru) | Сорго, устойчивое к ацетолактатсинтазному гербициду | |
WO2020117837A1 (en) | Methods and compositions for improving silage | |
US11946061B2 (en) | Methods and compositions for herbicide tolerance in plants | |
CN102559703A (zh) | 一种来自葡萄冠瘿病拮抗菌水生拉恩氏菌的抗草甘磷除草剂基因AroA-Ra及其应用 | |
US20220389443A1 (en) | Gene for resistance to a pathogen of the genus heterodera | |
WO2023225475A2 (en) | Methods and compositions for generating dominant brachytic alleles using genome editing | |
CN114174518A (zh) | 非生物胁迫耐受性植物及方法 | |
CN114656540A (zh) | 蛋白质cyca3-1在提高玉米抗盐碱性中的应用 | |
Macintosh et al. | уть-ш Л J//ÁfKót | |
MXPA99000639A (en) | Chemical gene for various genes of herbicide tolerance, cell vegetable plants tolerantesa various herbici | |
MXPA99009130A (en) | Glyphosate resistant maize lines |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TC4A | Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU |
|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM |
|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): RU |