JP2022509508A - 植物有害生物を制御するおよび植物の健康状態を改善するための細菌組成物および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、植物において植物有害生物を制御するおよび/または目的の農学上の形質を改善するための細菌株および集団に関する。
植物有害生物によって引き起こされる損傷および病気は、顕著な農業損失の原因である。影響は、軽度の症状から破滅的な植物の損傷までの範囲に及び得、そして大きな経済的かつ社会的結果をもたらし得る。植物有害生物を有効に制御する方法が必要とされる。
植物において植物有害生物を制御するおよび/または 少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するための組成物および方法が、提供される。このような組成物および方法は、1種もしくはこれより多くの植物有害生物を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善する細菌株を含む。上記細菌株は、植物用の接種物として使用され得る。植物有害生物または植物有害生物によって引き起こされる植物の病気に感受性である植物を生長させるための方法、ならびに植物有害生物によって引き起こされる植物の病気または損傷を処理または防止するための方法および組成物がまた、提供される。目的の殺生物剤に対して抵抗性を有する改変された細菌株を作製するための方法および組成物が、さらに提供される。
I.全体像
1種もしくはこれより多くの植物有害生物を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するための組成物および方法が、提供される。生物学的因子、生物防除因子、細菌株、改変された細菌株、改変された生物学的因子、または改変された生物防除因子もしくはその活性改変体は、植物有害生物を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するために使用される微生物を記載するために、本明細書で使用される。
種々の生物防除因子または細菌株が提供され、これらは、1種もしくはこれより多くの植物有害生物を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するために使用され得る。このような細菌株は、以下を包含する:AIP045885(Pseudomonas chlororaphis株)、AIP075655(Pseudomonas chlororaphs株)、AIP009474(Bacillus subtilis株)、AIP0024525(Bacillus thurinigiensis株)、AIP033287(Bacillus subtilis株)、AIP0093798(Bacillus subtilis株)、AIP061639(Pseudomonas chlororaphis株)、AIP082862(Pseudomonas chlororaphis株)、AIP058187(Pseudomonas chlororaphis株)、AIP059286(Pseudomonas chlororaphis株)、およびAIP036706(Pseudomonas chlororaphis株)。AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、およびAIP036706のうちの1種もしくはこれより多くを含む細胞集団、ならびにこれらの株の各々に由来する胞子の集団、またはこれらの任意の調製物が、提供される。
AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、およびAIP036706の活性改変体が、さらに提供される。このような改変体は、植物において、1種もしくはこれより多くの植物有害生物を制御するか、または目的の1もしくはこれより多くの農学上の形質を改善する能力を保持する。従って、いくつかの実施形態において、本明細書で提供される細菌株の活性改変体は、植物有害生物に対して農薬活性を保持する。本明細書で使用される場合、「農薬活性(pesticidal activity)」とは、有害生物が死滅させられるかまたは制御されるように、1種またはこれより多くの有害生物(昆虫、真菌、細菌、線虫、ウイルスまたはウイロイド、原生動物病原体などが挙げられる)に対する活性に言及する。いくつかの実施形態において、改変体は、1種またはこれより多くの昆虫有害生物または線虫有害生物を制御する能力を保持する。特定の実施形態において、改変体は、甲虫類の昆虫有害生物(コーンルートワーム(例えば、ウェスタンコーンルートワーム)、コロラドハムシ、ゾウムシ(例えば、アリモドキゾウムシ)、または半翅類の昆虫有害生物が挙げられる)を制御する能力を保持する。
本明細書で提供される細菌株(すなわち、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体の細胞、またはAIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、ならびに/または組成物)は、細胞ペースト、水和剤、細胞ペレット、粉剤(dust)、粒剤(granule)、スラリー、乾燥粉末、水性もしくは油ベースの液体生産物などとして製剤化され得る。このような製剤は、キャリアおよび他の因子に加えて、本明細書で提供される細菌もしくはその活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物を含む。その製剤は、本明細書の他の箇所で開示されるように、種々の方法で使用され得る。
油;ホエー;流動パラフィン(White mineral oil)(石油);ウインターグリーン油;珪灰石(Ca(SiO3));ウール;キサンタンガム;酵母;ゼオライト(エリオナイトを除く(CAS登録番号66733-21-9));ゼオライト、NaA;酸化亜鉛鉄(Zinc iron oxide);酸化亜鉛(ZnO);およびステアリン酸亜鉛[オクタデカン酸、亜鉛塩]。
本明細書で提供される細菌株もしくは改変された細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物は、植物有害生物を制御するか、または目的の農学上の形質を改善するために、任意の植物種とともに使用され得る。目的の農学上の形質としては、植物の健康状態または商業的価値を改善する任意の形質が挙げられる。目的の農学上の形質の非限定的な例としては、以下が挙げられる:バイオマスの増大、旱魃耐性の増大、熱耐性、除草剤耐性、旱魃抵抗性、有害生物抵抗性(例えば、線虫抵抗性、昆虫抵抗性、真菌抵抗性、ウイルス抵抗性、細菌抵抗性)、雄性不稔性、低温耐性、塩耐性、増大した収量、増強された栄養素利用効率、増大した窒素利用効率、窒素ストレスへの増大した耐性、増大した発酵性炭水化物含有量、低減したリグニン含有量、増大した抗酸化物質含有量、増強された水利用効率、増大した生長力、増大した発芽効率、より速いもしくは増大した開花、増大したバイオマス、変化した根 対 苗条バイオマス比(root-to-shoot biomass ratio)、増強された土壌水分保持、またはこれらの組み合わせ。他の場合には、上記目的の農学上の形質としては、変化した油含有量、変化したタンパク質含有量、変化した種子炭水化物組成、変化した種子油組成、および変化した種子タンパク質組成、化学物質耐性、低温耐性、遅延した老化、病気抵抗性、旱魃耐性、穂重、生長改善、健康状態の増強、熱耐性、除草剤耐性、改善された窒素固定、改善された窒素利用、改善された根の構造、改善された水利用効率、増大したバイオマス、増大した根の長さ、増大した種子重量、増大した苗条の長さ、増大した収量、水を制限した条件下での増大した収量、穀粒の重量(kernel mass)、穀粒の水分含有量、金属耐性、穂の数、穂1本あたりの穀粒の数、莢の数、栄養増強、光合成能力改善、塩分耐性、青々したままでいる(stay-green)、生長力改善、成熟種子の増大した乾燥重量、成熟種子の増大した新鮮重量(increased fresh weight of mature seeds)、1植物体あたりの成熟種子の増大した数、増大したクロロフィル含有量、1植物体あたりの増大した莢の数、1植物体あたりの増大した莢の長さ、1植物体あたりのしおれた葉の低減した数、1植物体あたりのひどくしおれた葉の低減した数、および1植物体あたりのしおれていない葉の増大した数、代謝産物のレベルでの検出可能な調節、転写物のレベルでの検出可能な調節、または参照植物に対するプロテオームでの検出可能な調節。
具体的実施形態において、本明細書で提供される細菌株は、1種もしくはこれより多くの植物有害生物を標的とするものである。用語「有害生物」としては、昆虫、真菌、細菌、線虫、ウイルスもしくはウイロイド、原生動物病原体などが挙げられるが、これらに限定されない。
甲虫(rapeseed beetle);およびチビケシキスイ(pollen beetles)、Meligethes rufimanus、Meligethes nigrescens、Meligethes canadianus、およびMeligethes viridescens;ジャガイモ:Leptinotarsa decemlineata、コロラドハムシ;サツマイモ:Spartocera batatas、ジャイアントスイートポテトバグ(giant sweet potato bug);Charidotella(=Metriona) bicolor、ゴールデントータスビートル(golden tortoise beetle);Cylas formicarius、アリモドキゾウムシ;Cylas puncticollis、アリモドキゾウムシ;Cylas brunneus、アリモドキゾウムシ、Naupactus(=Graphognathus) spp.、シロヘリクチブトゾウムシ(whitefringed beetle);Conoderus rudis、コメツキムシの幼虫;Conoderus scissus、ラッカセイコメツキムシ(peanut wireworm);Blosyrus spp.、イモゾウムシ(rough sweet potato weevil);Acraea acerata、スイートポテトバタフライ(sweet potato butterfly);Agrius convolvuli、エビガラスズメ;Spodoptera exigua、アーミーワーム;Spodoptera eridania、アーミーワーム;Synanthedon spp.、スカシバ(clearwing moth);ケダニ(Hairiness mite)およびフシダニ(eriophyid mite);Euscepes postfasciatus,イモゾウムシ;Peloropus batatae、Peloropusゾウムシ(Peloropus weevil);Omphisia anastomasalis、サツマイモノメイガ、およびコガネムシ類の幼虫-オサムシ科昆虫(scarabid beetle)の種々の種の幼虫。
植物有害生物を制御するための方法が、本明細書で提供され、上記方法は、有効量の、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物を植物に適用する工程であって、ここで上記細菌株および/またはこれらに由来する組成物は、上記植物有害生物(例えば、昆虫または線虫有害生物)を制御する工程を包含する。植物有害生物に対する感受性を低減する、および/または植物有害生物への抵抗性を増大させる方法がまた、本明細書で提供され、上記方法は、植物有害生物、植物有害生物によって引き起こされる植物の病気もしくは損傷を有するか、または植物有害生物によって引き起こされる植物の病気もしくは損傷を発生させるリスクにある植物に、有効量の、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物を適用する工程であって、ここで上記細菌株および/またはこれらに由来する組成物は、上記植物有害生物を制御する工程を包含する。植物の病気または損傷を処理または防止する方法が、本明細書で提供され、上記方法は、植物の病気もしくは損傷を有するか、または植物の病気もしくは損傷を発生させるリスクにある植物に、有効量の、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物を適用する工程であって、ここで上記細菌株および/またはこれらに由来する組成物は、上記植物の病気もしくは損傷を引き起こす植物有害生物を制御する工程を包含する。特定の実施形態において、上記植物の損傷は、昆虫有害生物(例えば、甲虫類有害生物)によって引き起こされる。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの細胞;あるいはAIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態において、上記細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールまたは少なくとも約104~1016 CFU/ヘクタール、または少なくとも約105~1011 CFU/ヘクタールを含む。いくつかの実施形態において、上記組成物は、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの細胞;あるいはAIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み得る、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体に由来する。
表1
植物において有害生物および/または病気の抵抗性を誘導するための組成物および方法であって、ここで上記病気は、植物有害生物によって引き起こされるものがまた、提供される。よって、上記組成物および方法はまた、真菌有害生物、ウイルス、線虫、および昆虫を含む、任意のタイプの植物有害生物に対して植物を防御するにあたって有用である。植物有害生物による感染もしくは外寄生、または植物有害生物によって引きおこされる植物の病気に感受性である植物に、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の有効量を適用する工程を包含する、植物有害生物に対する抵抗性を誘導するための方法が、本明細書で提供される。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物は、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの細胞;あるいはAIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み得る。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物は、植物の病気または損傷を引き起こす有害生物への防御応答を増進する。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、少なくとも約105~1012 CFU/ヘクタールを含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含む。
本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物は、有効量で適用される。本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の有効量は、有害生物(例えば、昆虫有害生物)を制御、処理、防止、阻害する、および/あるいは目的の農学上の形質を改善するために十分な量である。具体的実施形態において、本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の有効量は、植物の病気もしくは損傷を引き起こす有害生物を制御、処理、防止、阻害する、および/あるいは植物の病気の重篤度を低減するかまたは植物の病気の発生を低減するために十分な量である。他の実施形態において、本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の有効量は、目的の農学上の形質を改善するならびに/または植物の健康状態、病気、植物有害生物による感染もしくは植物有害生物(例えば、昆虫有害生物)による外寄生に感受性である植物の生長もしくは収量を増進もしくは増大させるために十分な量である。本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の適用の割合は、標的とされている病原体、防御すべき作物、本明細書で提供される細菌株、その活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物の有効性、上記病気の重篤度、気候条件、改善すべき目的の農学上の形質などに従って変動し得る。本明細書で提供される方法は、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株、もしくはその活性改変体および/またはこれらに由来する組成物の、植物、植物部分、または栽培地への1回の適用、あるいは少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の、植物、植物部分、または栽培地への多数回の適用を含み得る。
本明細書中の他の箇所で考察されるように、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体、および/またはこれらに由来する組成物は、殺生物剤(すなわち、除草剤、殺虫剤、殺真菌剤、農薬、もしくは他の農作物保護化学物質)と組み合わせて使用され得る。このような場合には、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、目的の殺生物剤と適合性である。
ntong)、チアジアゾール銅(thiodiazole-copper)、亜鉛チアゾール(zinc thiazole));チアゾール殺真菌剤(エタボキサム、イソチアニル、メトスルホバックス、オクチリノン、オキサチアピプロリン、チアベンダゾール、チフルザミド);チアゾリジン殺真菌剤(フルチアニル、チアジフルオール);チオカルバメート殺真菌剤(メタスルホカルブ、プロチオカルブ);チオフェン殺真菌剤(エタボキサム、イソフェタミド、シルチオファム);トリアジン殺真菌剤(アニラジン);トリアゾール殺真菌剤(アミスルブロム、ビテルタノール、フルオトリマゾール、トリアズブチル);コナゾール殺真菌剤(トリアゾール)(アザコナゾール、ブロムコナゾール、シプロコナゾール、ジクロブトラゾール、ジフェノコナゾール、ジニコナゾール、ジニコナゾールM、エポキシコナゾール、エタコナゾール、フェンブコナゾール、フルキンコナゾール、フルシラゾール、フルトリアホール、フルコナゾール、フルコナゾール・シス、ヘキサコナゾール、フアンジュンズオ(huanjunzuo)、イミベンコナゾール、イプコナゾール、メトコナゾール、ミクロブタニル、ペンコナゾール、プロピコナゾール、プロチオコナゾール、キンコナゾール、シメコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール、トリアジメホン、トリアジメノール、トリチコナゾール、ウニコナゾール、ウニコナゾールP);トリアゾロピリミジン殺真菌剤(アメトクトラジン);ウレア殺真菌剤(ベンタルロン、ペンシクロン、キナザミド);亜鉛殺真菌剤(アシペタックス亜鉛、クロム酸銅亜鉛、クフラネブ、マンコゼブ、メチラム、ポリカルバメート、ポリオキソリム-亜鉛、プロピネブ、ナフテン酸亜鉛、亜鉛チアゾール(zinc thiazole)、亜鉛トリクロロフェノキシド(zinc trichlorophenoxide)、ジネブ、ジラム);未分類殺真菌剤(アシベンゾラル、アシペタックス、アリルアルコール、塩化ベンザルコニウム、ベトキサジン、ブロモタロニル(bromothalonil)、キトサン、クロロピクリン、DBCP、デヒドロ酢酸、ジクロメジン、ジエチルピロカーボネート、エチリシン(ethylicin)、フェナミノスルフ、フェニトロパン、フェンプロピジン、ホルムアルデヒド、フルフラール、ヘキサクロロブタジエン、メチルイソチオシアネート、ニトロスチレン、ニトロタル-イソプロピル、OCH、ペンタクロロフェニルラウレート、2-フェニルフェノール、フタリド、ピペラリン、プロパミジン、プロキナジド、ピロキロン、ナトリウムオルトフェニルフェノキシド、スピロキサミン、スルトロペン、チシオフェン、トリシクラゾール)またはメフェノキサム。
(a)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体の少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記細菌株もしくはその活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物、
を含む組成物。
ここで有効量の前記組成物は、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、
組成物。
(a)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記細菌株もしくはその活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれかに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/または
(c)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物;
を含む水和剤を含む組成物であって、
ここで有効量の前記組成物は、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、
組成物。
実施形態15に記載の組成物。
ここで有効量の前記細胞、胞子、前胞子、または細胞、胞子、および/もしくは前胞子の組み合わせは、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、
単離された生物学的に純粋な培養物。
ここで前記細菌培養物は、グルホシネートの存在下で成長でき;そして
ここで有効量の前記細菌培養物は、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、細菌培養物。
(a)有効量の、細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種;
(b)有効量の、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物;
を適用する工程を包含し、
ここで前記有効量は、前記植物有害生物を制御するか、または前記目的の農学上の形質を改善する、方法。
(a)前記栽培地に、前記植物有害生物に感受性である種子または植物を植える工程;および
(b)前記植物有害生物に感受性である種子または植物に、以下:
(i)有効量の、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;
(ii)有効量の、AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;あるいは
(iii)有効量の、細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種の全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物;
を適用する工程を包含し、
ここで前記有効量は、栽培地において植物有害生物を制御する、方法。
(a)AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株の細胞、胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせの集団を提供する工程であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細胞、胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み、ここで前記集団は、目的の殺生物剤に感受性である、工程;
(b)前記集団を、前記目的の殺生物剤の存在下で培養する工程;ならびに
(c)前記目的の殺生物剤に対して増大した抵抗性を有する改変された細菌株を選択する工程、
を包含する、方法。
(a)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含む、少なくとも1つ;
(b)AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、ここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含む、少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物;
を適用する工程を包含し、ここで前記有効量は、前記植物の病気を引き起こす前記植物有害生物を制御する、方法。
(a)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1つ、
(b)AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1つに由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP045885、AIP075655、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP059286、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、濾液、または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、濾液、または抽出物、
のうちの少なくとも1つを含むパーツのキット。
以下の実施例は、例証のために提供されるのであって、限定のために提供されるのではない。
表3A: 培養条件
切断葉に対する評価: 簡潔には、葉のディスク(各3cm直径)に、120μlのP. pachyrhiziの細菌株(1×108 胞子/ml 水)を噴霧した。葉のディスクに、細菌株の適用の1日後に、120μl P. pachyrhiziの胞子懸濁物(1×104 胞子/ml 滅菌蒸留水)を接種した。上記細菌株およびP.pachyrhizi接種物の適用の両方を、空気コンプレッサーに取り付けた噴霧器を使用して行った(Twizeyimana and Hartman, 2010)。葉のディスクを、プラスチック容器(Blister Box 20×20cm, Placon, Madison, WI)中で、飽和20×20cm 濾紙(Whatman International Ltd., Kent, England)上に向軸面を下にして置いた;2枚の濾紙を1箱あたり使用した。葉のディスクの入った箱を、遮光して12時間インキュベートし、続いて、23℃および95% RHで維持した組織チャンバ(Percival Scientific, Inc.)の中で13時間明(380umol m-2s-1)および11時間暗のサイクルでインキュベートした。インキュベーションの前に、箱をジップバッグ(Webster Industries, Peabody, MA)の中に入れた。その実験設計は、2つの複製を伴う完全乱塊法(randomized complete block design)であり、1回反復した。
表4:Phakopsora pachyrhiziに対する細菌株の活性
表5: Phytophthora infestansに対する細菌株の活性
表6:ソルガムの剥離葉アッセイでの細菌株による炭疽病制御(%)
表8: Grand Nain葉片上での細菌株によるシガトカ病の制御
出発培養物を、96ウェルブロックに1ml(1ウェルあたり)LB培地を満たすことによって調製する。冷凍庫ストックのスクリーンメイト(screenmate)から、ピペットチップまたは白金耳を使用して、ブロックの各ウェルに細菌株を接種する。この出発培養物を、30℃において、225rpmで24時間振盪しながら成長させる。アッセイ培養物を、2つの48ウェルブロックに約1.7ml(1ウェルあたり)の培地を満たすことによって調製する。その出発培養物の各ウェルから25μlをアッセイ培養ブロックに添加する。アッセイブロックを、30℃で、24時間、48時間または72時間のいずれかにわたって、225rpmにおいて成長させる。
出発培養物を、96ウェルブロックに1ml(1ウェルあたり)LB培地を満たすことによって調製した。そのブロックの各ウェルに、細菌株を接種した。その出発培養物を、30℃において、225rpmで24時間振盪しながら成長させた。アッセイ培養物を、2つの48ウェルブロックに約1.7ml(1ウェルあたり)の培地を満たすことによって調製した。その出発培養物の各ウェルから25μlをアッセイ培養ブロックに添加した。アッセイブロックを、30℃で、24時間、48時間または72時間のいずれかにわたって、225rpmにおいて成長させた。全ての微生物調製物を、調製の12時間以内に適用した。
ウェスタンコーンルートワーム(WCR)の卵を、Crop Characteristics(Farmington, MN)から購入した。60μl容積の全培養微生物懸濁物を、24ウェルプレート(Cellstar, 24-well, Greiner Bio One)のウェルの中の食餌の一番上の表面に接種し、乾燥させた。各ウェルは、500μl 食餌(Marroneら, 1985から改変)を含む。15~20匹の孵化幼虫を、先端が細い絵筆を使用して各ウェル中に導入し、上記プレートを、膜(Viewseal, Greiner Bio One)で覆った。バイオアッセイを周囲温度において保存し、4日目に、死滅率、成長阻害、および/または摂食阻害に関してスコア付けした。微生物を、3回またはこれより多くの独立した反復において70%超の死滅率が存在した場合に、WCRに対して活性とみなした。結果を表9に示す。
表9: 細菌株による昆虫の制御
処理:
1. 非処理チェック
2. 接種チェック
3. 6.2オンス/エーカーでQuadris
4. 2.1オンス/エーカーでQuadris
5. 7.5g/LでAIP045885
6. 7.5g/LでAIP075655
7. 7.5g/LでAIP009474
8. 7.5g/LでAIP024525
9. 7.5g/LでAIP033287
10. 7.5g/LでAIP093798
11. 7.5g/LでAIP061639
12。 7.5g/LでAIP082862
13. 7.5g/LでAIP058187
14. 7.5g/LでAIP059286
15. 7.5g/LでAIP036706
表6
葉面有害生物処理リスト:夏疫病
6~10処理
処理容積:100ガロン/エーカー
処理リスト:
1. 非接種、非処理チェック
2. 接種チェック
3. ラベル説明書に適用された協力者が選択した化学物質制御
4. ラベル説明書に適用された生物学的制御Serenade
5. 5g/Lでの実験的生物学的葉面処理+3オンス/100ガロンでのCapsil
表7
畝間試験処理リスト:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 畝間生物学的処理 5g/L+15ガロン/エーカーにおいて6オンス/100ガロンでのCapsil
4. 協力者が選択しかつ適用したとおりの病気の適切な畝間化学チェック
表9
表2中で以下に示した株の各々の100gの細胞ペーストを、5gのグリセロールおよび20gの合成ケイ酸カルシウムと、フードプロセッサーを使用して混合する。この材料を、水分活性が0.30未満になるように40℃で乾燥させる。その乾燥粉末製剤を、真空封入したマイラーパウチの中に22℃で貯蔵する。その乾燥粉末製剤は、農薬活性を保持する。
処理:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 0.4液量オンス/エーカーでQuadris
4. AIP045885 種子処理
5. AIP075655 種子処理
6. AIP009474 種子処理
7. AIP024525 種子処理
8. AIP033287 種子処理
9. AIP093798 種子処理
10. AIP061639 種子処理
11. AIP082862 種子処理
12. AIP058187 種子処理
13. AIP059286 種子処理
14. AIP036706 種子処理
処理:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 0.4液量オンス/エーカーでQuadris
4. AIP045885 種子処理
5. AIP075655 種子処理
6. AIP009474 種子処理
7. AIP024525 種子処理
8. AIP033287 種子処理
9. AIP093798 種子処理
10. AIP061639 種子処理
11. AIP082862 種子処理
12. AIP058187 種子処理
13. AIP059286 種子処理
14. AIP036706 種子処理
処理:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 0.4液量オンス/エーカーでQuadris
4. AIP045885 種子処理
5. AIP075655 種子処理
6. AIP009474 種子処理
7. AIP024525 種子処理
8. AIP033287 種子処理
9. AIP093798 種子処理
10. AIP061639 種子処理
11. AIP082862 種子処理
12. AIP058187 種子処理
13. AIP059286 種子処理
14. AIP036706 種子処理
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
以下:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記細菌株もしくはその活性改変体は、約10 5 CFU/g~約10 12 CFU/gまたは約10 5 CFU/ml~約10 12 CFU/mlで存在する、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約10 5 CFU/g~約10 12 CFU/gまたは約10 5 CFU/ml~約10 12 CFU/mlで存在する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物;を含む組成物であって、
ここで有効量の前記組成物は、植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物有害生物もしくは植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、組成物。
(項目2)
前記組成物は、細胞ペースト、水和剤、噴霧乾燥製剤、安定な製剤、または種子処理剤(seed treatment)を含む、項目1に記載の組成物。
(項目3)
以下:
(a)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
を含む細菌株の単離された生物学的に純粋な培養物であって、ここで有効量の前記培養物は、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目4)
前記細菌株は、除草剤、殺真菌剤、農薬、殺虫剤、または農作物保護化学物質から選択される殺生物剤に対して抵抗性であり、前記組成物または培養物は、前記殺生物剤の存在下で成長させることによって生産され、前記細菌株は、植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、項目1もしくは2に記載の組成物、または項目3に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目5)
前記殺生物剤は、グリホサートまたはグルホシネートを含む、項目4に記載の組成物または単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目6)
前記植物有害生物は、昆虫有害生物である、項目1,2、4、および5のいずれか1項に記載の組成物または項目3~5のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目7)
前記昆虫有害生物は、甲虫類の昆虫有害生物、半翅類の昆虫有害生物、または鱗翅類の昆虫有害生物を含む、項目6に記載の組成物または単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目8)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目1,2、4、および5のいずれか1項に記載の組成物または項目3~5のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目9)
植物有害生物集団を制御するための方法であって、前記方法は、前記集団と、有効量の、項目1、2、もしくは4~8のいずれか1項に記載の組成物または項目3~8のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物とを接触させる工程を包含し、ここで細菌株は、前記植物有害生物を制御する、方法。
(項目10)
植物有害生物もしくは植物の病気に感受性である植物を生長させるか、または植物において目的の農学上の形質を改善するための方法であって、前記方法は、前記植物に、
(a)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、植物有害生物もしくは前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御するか、または前記目的の農学上の形質を改善する、
方法。
(項目11)
前記方法は、前記植物の病気に感受性である前記植物の収量を増大させる、項目10に記載の方法。
(項目12)
栽培地において植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する方法であって、前記方法は、
(a)前記栽培地に、前記植物有害生物または植物の病気に感受性である種子または植物を植える工程;および
(b)前記植物有害生物または植物の病気に感受性である前記植物に、以下:
(i)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;
(ii)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;あるいは
(iii)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物;
を含む、有効量の組成物を適用する工程を包含し、
ここで前記有効量は、栽培地において植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。
(項目13)
植物の病気を処理または防止する方法であって、前記方法は、植物有害生物もしくは植物の病気を有するか、または植物有害生物もしくは植物の病気を発生させるリスクにある植物に、有効量の、以下:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 CFU/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み;ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 CFU/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、
を適用する工程を包含し、ここで前記有効量は、前記植物有害生物または前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。
(項目14)
前記植物有害生物は、昆虫有害生物である、項目9~13のいずれか1項に記載の方法。
(項目15)
前記昆虫有害生物は、甲虫類の昆虫有害生物、半翅類の昆虫有害生物、または鱗翅類の昆虫有害生物を含む、項目14に記載の方法。
(項目16)
前記植物有害生物または植物病原体は、1種またはこれより多くの真菌病原体である、項目9~13のいずれか1項に記載の方法。
(項目17)
前記方法は、有効量の殺生物剤を適用する工程をさらに包含し、ここで前記有効量の殺生物剤は、目的の生物を選択的に制御すると同時に、作物に有意に損傷を与えない、項目9~16のいずれか1項に記載の方法。
(項目18)
改変された細菌株を作製する方法であって、前記方法は、
(a)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株の集団を提供する工程であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記細菌株は、目的の殺生物剤に感受性である、工程;
(b)前記細菌株を、前記目的の殺生物剤の存在下で培養する工程;ならびに
(c)前記目的の殺生物剤に対して増大した抵抗性を有する改変された細菌株を選択する工程、
を包含する、方法。
(項目19)
殺生物剤、ならびに:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、ここで有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、ここで有効量は、少なくとも約10 12 ~10 16 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、を含むパーツのキット。
(項目20)
前記殺生物剤は、除草剤、殺真菌剤、殺虫剤、殺線虫剤、および/または農薬である、項目19に記載のキット。
Claims (20)
- 以下:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記細菌株もしくはその活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記胞子、前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物;
を含む組成物であって、
ここで有効量の前記組成物は、植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物有害生物もしくは植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、組成物。 - 前記組成物は、細胞ペースト、水和剤、噴霧乾燥製剤、安定な製剤、または種子処理剤(seed treatment)を含む、請求項1に記載の組成物。
- 以下:
(a)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
を含む細菌株の単離された生物学的に純粋な培養物であって、ここで有効量の前記培養物は、植物有害生物を制御するか、または植物の目的の農学上の形質を改善する、単離された生物学的に純粋な培養物。 - 前記細菌株は、除草剤、殺真菌剤、農薬、殺虫剤、または農作物保護化学物質から選択される殺生物剤に対して抵抗性であり、前記組成物または培養物は、前記殺生物剤の存在下で成長させることによって生産され、前記細菌株は、植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、請求項1もしくは2に記載の組成物、または請求項3に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
- 前記殺生物剤は、グリホサートまたはグルホシネートを含む、請求項4に記載の組成物または単離された生物学的に純粋な培養物。
- 前記植物有害生物は、昆虫有害生物である、請求項1,2、4、および5のいずれか1項に記載の組成物または請求項3~5のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
- 前記昆虫有害生物は、甲虫類の昆虫有害生物、半翅類の昆虫有害生物、または鱗翅類の昆虫有害生物を含む、請求項6に記載の組成物または単離された生物学的に純粋な培養物。
- 前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、請求項1,2、4、および5のいずれか1項に記載の組成物または請求項3~5のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
- 植物有害生物集団を制御するための方法であって、前記方法は、前記集団と、有効量の、請求項1、2、もしくは4~8のいずれか1項に記載の組成物または請求項3~8のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物とを接触させる工程を包含し、ここで細菌株は、前記植物有害生物を制御する、方法。
- 植物有害生物もしくは植物の病気に感受性である植物を生長させるか、または植物において目的の農学上の形質を改善するための方法であって、前記方法は、前記植物に、
(a)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、植物有害生物もしくは前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御するか、または前記目的の農学上の形質を改善する、
方法。 - 前記方法は、前記植物の病気に感受性である前記植物の収量を増大させる、請求項10に記載の方法。
- 栽培地において植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する方法であって、前記方法は、
(a)前記栽培地に、前記植物有害生物または植物の病気に感受性である種子または植物を植える工程;および
(b)前記植物有害生物または植物の病気に感受性である前記植物に、以下:
(i)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;
(ii)有効量の、AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含む少なくとも1種の細菌株であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、そしてここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、少なくとも1種の細菌株;あるいは
(iii)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物;
を含む、有効量の組成物を適用する工程を包含し、
ここで前記有効量は、栽培地において植物有害生物または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。 - 植物の病気を処理または防止する方法であって、前記方法は、植物有害生物もしくは植物の病気を有するか、または植物有害生物もしくは植物の病気を発生させるリスクにある植物に、有効量の、以下:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み;ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)有効量の、細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、
を適用する工程を包含し、ここで前記有効量は、前記植物有害生物または前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。 - 前記植物有害生物は、昆虫有害生物である、請求項9~13のいずれか1項に記載の方法。
- 前記昆虫有害生物は、甲虫類の昆虫有害生物、半翅類の昆虫有害生物、または鱗翅類の昆虫有害生物を含む、請求項14に記載の方法。
- 前記植物有害生物または植物病原体は、1種またはこれより多くの真菌病原体である、請求項9~13のいずれか1項に記載の方法。
- 前記方法は、有効量の殺生物剤を適用する工程をさらに包含し、ここで前記有効量の殺生物剤は、目的の生物を選択的に制御すると同時に、作物に有意に損傷を与えない、請求項9~16のいずれか1項に記載の方法。
- 改変された細菌株を作製する方法であって、前記方法は、
(a)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株の集団を提供する工程であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記細菌株は、目的の殺生物剤に感受性である、工程;
(b)前記細菌株を、前記目的の殺生物剤の存在下で培養する工程;ならびに
(c)前記目的の殺生物剤に対して増大した抵抗性を有する改変された細菌株を選択する工程、
を包含する、方法。 - 殺生物剤、ならびに:
(a)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、ここで有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、細菌株もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;
(b)AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、ここで有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(c)細菌株AIP075655、AIP059286、AIP045885、AIP09474、AIP024525、AIP033287、AIP093798、AIP061639、AIP082862、AIP058187、AIP036706、もしくはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つの全細胞培養物に由来する上清、発酵産物、濾液または抽出物であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、上清、発酵産物、濾液または抽出物、
を含むパーツのキット。 - 前記殺生物剤は、除草剤、殺真菌剤、殺虫剤、殺線虫剤、および/または農薬である、請求項19に記載のキット。
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