BR112021008376A2 - composições e métodos para controlar pragas de plantas e melhorar a saúde das plantas - Google Patents

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Abstract

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA CONTROLAR PRAGAS DE PLANTAS E MELHORAR A SAÚDE DAS PLANTAS. São fornecidos composições e métodos para controlar pragas de plantas e/ou melhorar pelo menos uma característica agronômica de interesse em uma planta. Essas composições e métodos compreendem uma cepa bacteriana que pode ser usada como um inoculante para plantas. Portanto, também são fornecidos métodos para cultivar uma planta suscetível a uma praga de plantas e/ou a uma doença de plantas causada por uma praga de plantas, e métodos para controlar pragas de plantas e/ou doenças de plantas em uma planta suscetível à praga de plantas e/ou à doença de plantas.

Description

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA CONTROLAR PRAGAS DE PLANTAS E MELHORAR A SAÚDE DAS PLANTAS CAMPO DA INVENÇÃO
[0001] A invenção se refere a cepas e populações bacterianas para controlar pragas de plantas e/ou melhorar uma característica agronômica de interesse em uma planta.
ANTECEDENTES
[0002] Danos e doenças causadas por pragas de plantas são responsáveis por perdas agrícolas significativas. Os efeitos podem ir de sintomas leves a danos catastróficos às plantas, que podem provocar graves consequências econômicas e sociais. São necessários métodos para controlar efetivamente as pragas de plantas.
SUMÁRIO
[0003] São fornecidas composições e métodos para controlar pragas de plantas e/ou melhorar pelo menos uma característica agronômica de interesse em uma planta. Essas composições e métodos compreendem cepas bacterianas que controlam uma ou mais pragas de plantas, e/ou melhoram pelo menos uma característica agronômica de interesse. As cepas bacterianas podem ser usadas como um inoculante para plantas. Também são fornecidos aqui métodos para cultivar uma planta suscetível a uma praga de plantas e/ou a uma doença de plantas causada por uma praga de plantas, e para tratar ou prevenir uma doença de plantas ou um dano causado por uma praga de plantas. Além disso, são fornecidos métodos e composições para fabricar uma cepa bacteriana modificada com resistência a um biocida de interesse.
DESCRIÇÃO DETALHADA I. Visão geral
[0004] São fornecidas composições e métodos para controlar uma ou mais pragas de plantas e/ou melhorar pelo menos uma característica agronômica de interesse. Um agente biológico, agente de biocontrole, cepa bacteriana, cepa bacteriana modificada, agente biológico modificado ou agente de biocontrole modificado ou variante ativa do mesmo são usados neste documento para descrever um microrganismo que é usado para controlar pragas de plantas e/ou melhorar pelo menos uma característica agronômica de interesse. II. Cepas bacterianas
[0005] Vários agentes de biocontrole ou cepas bacterianas são fornecidos, os quais podem ser usados para controlar uma ou mais pragas de plantas e/ou melhorar pelo menos uma característica agronômica de interesse. Essas cepas bacterianas incluem AIP045885 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis), AIP075655 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphs), AIP009474 (uma cepa de Bacillus subtilis), AIP0024525 (uma cepa de Bacillus thurinigiensis), AIP033287 (uma cepa de Bacillus subtilis), AIP0093798 (uma cepa de Bacillus subtilis), AIP061639 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis), AIP082862 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis), AIP058187 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis), AIP059286 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis), e AIP036706 (uma cepa de Pseudomonas chlororaphis). São fornecidas populações de células que compreendem uma ou mais de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706, bem como populações de esporos derivados de cada uma dessas cepas, ou qualquer preparação das mesmas.
[0006] Assim, várias cepas bacterianas e/ou as composições pesticidas aqui fornecidas compreendem como um ingrediente ativo uma população de células que compreende uma ou mais de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706,, ou uma variante ativa de qualquer uma delas.
[0007] AIP045885 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A., em 3 de agosto de 2018 e recebeu o NRRL nº B-67650.
[0008] AIP075655 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A., em 3 de agosto de 2018 e recebeu o NRRL nº B-67651.
[0009] AIP009474 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A., em 3 de agosto de 2018 e recebeu o NRRL nº B-67657.
[0010] AIP024525 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67661.
[0011] AIP033287 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados
Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67659.
[0012] AIP093798 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67660.
[0013] AIP061639 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67654.
[0014] AIP082862 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67656.
[0015] AIP058187 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67655.
[0016] AIP059286 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67653.
[0017] AIP036706 foi depositada no Depósito de Patentes do Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos Estados
Unidos, 1815 North University Street, Peoria, Illinois 61604, E.U.A. em 3 de agosto, 2018 e recebeu o NRRL nº B-67652.
[0018] Cada um dos depósitos identificados acima será mantido sob os termos do Tratado de Budapeste sobre o Reconhecimento Internacional do Depósito de Microrganismos para Efeitos do Procedimento em Matéria de Patentes. Cada depósito foi feito meramente como uma conveniência para os peritos na técnica e não é uma admissão de que um depósito seja exigido sob 35 USC §112.
[0019] O termo "isolado(a)" abrange uma bactéria, esporo ou outra entidade ou substância que foi: (1) separada de pelo menos alguns dos componentes com os quais foi associada ao ser inicialmente produzida (seja na natureza ou em um ambiente experimental); e/ou (2) produzida, preparada, purificada e/ou fabricada pela mão do homem. Bactérias isoladas podem ser separadas de pelo menos cerca de 10%, cerca de 20%, cerca de 30%, cerca de 40%, cerca de 50%, cerca de 60%, cerca de 70%, cerca de 80%, cerca de 90% ou mais dos outros componentes aos quais foram inicialmente associadas.
[0020] Conforme aqui utilizado, uma substância é "pura" se estiver substancialmente livre de outros componentes. Os termos "purificar", "purificante" e "purificado(a)" se referem a uma bactéria, esporo ou outro material que foi separado de pelo menos alguns dos componentes aos quais foi associado ao ser inicialmente produzido ou gerado (seja na natureza ou em um ambiente experimental), ou durante qualquer momento após sua produção inicial. Uma bactéria ou esporo, ou uma população bacteriana ou uma população de esporos, pode ser considerada purificada se for isolada durante ou após a produção, por ex. de um material ou ambiente contendo a bactéria ou população bacteriana ou esporo, e uma bactéria purificada ou população bacteriana ou esporo pode conter até cerca de 10%, cerca de 20%, cerca de 30%, cerca de 40%, cerca de 50%, cerca de 60%, cerca de 70%, cerca de 80%, cerca de 90% ou acima de cerca de 90% de outros materiais e ainda ser considerada purificada. Em algumas configurações, bactérias purificadas ou esporos, e populações bacterianas ou populações de esporos, são mais do que cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90%, cerca de 91%, cerca de 92%, cerca de 93%, cerca de 94%, cerca de 95%, cerca de 96%, cerca de 97%, cerca de 98%, cerca de 99% ou mais do que cerca de 99% puras. Em configurações específicas, uma cultura de bactérias não contém nenhuma outra espécie bacteriana em quantidades a serem detectadas por técnicas bacteriológicas normais.
[0021] Em algumas configurações, as composições da invenção compreendem culturas substancialmente puras das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706.. As composições da invenção também fornecem progênie de culturas substancialmente puras das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706., em que a cultura tem todas as características fisiológicas e morfológicas da AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706, respectivamente. Por "população" entende-se um grupo ou conjunto que compreende dois ou mais indivíduos (ou seja, 10, 100, 1,000, 10,000, 1x106, 1x107 ou 1x108 ou mais) de uma determinada cepa bacteriana. São aqui fornecidas várias composições que compreendem uma população de pelo menos uma cepa bacteriana ou uma população mista de indivíduos de mais de uma cepa bacteriana. Em configurações específicas, a população de pelo menos uma cepa bacteriana (ou seja, células de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou esporos ou foresporos ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, formados a partir de uma ou mais de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas) compreende uma concentração de pelo menos cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1011 CFU/ml, cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1010 CFU/ml, cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml, cerca de 105 CFU/ml a cerca de 106 CFU/ml, cerca de 106 CFU/ml a cerca de 107 CFU/ml, cerca de 107 CFU/ml a cerca de 108 CFU/ml, cerca de 108 CFU/ml a cerca de 109 CFU/ml, cerca de 109 CFU/ml a cerca de 1010 CFU/ml, cerca de 1010 CFU/ml a cerca de 1011 CFU/ml, cerca de 1011 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml. Em outras configurações, a concentração da cepa bacteriana aqui fornecida ou de sua variante ativa compreende pelo menos cerca de 105 CFU/ml, pelo menos cerca de 106 CFU/ml, pelo menos cerca de 107 CFU/ml, pelo menos cerca de 108 CFU/ml, pelo menos cerca de 109 CFU/ml, pelo menos cerca de 1010 CFU/ml, pelo menos cerca de 1011 CFU/ml, ou pelo menos cerca de 1012 CFU/ml.
[0022] Um "esporo" se refere a pelo menos uma unidade reprodutiva dormente (na aplicação), mas viável, de uma espécie bacteriana. Métodos não-limitantes pelos quais os esporos são formados a partir de cada uma das AIP045885, AIP075655,
AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706 ( ou variantes de qualquer uma delas) são divulgados em outra parte deste documento. Reconhece-se, ainda, que as populações aqui divulgadas podem compreender uma combinação de células vegetativas e foresporos (células em um estágio intermediário de formação de esporos); uma combinação de foresporos e esporos; ou uma combinação de foresporos, células vegetativas e/ou esporos.
[0023] Conforme aqui utilizado, "derivado de" significa diretamente isolado ou obtido de uma fonte específica ou, alternativamente, que possui características identificativas de uma substância ou organismo isolado ou obtido de uma fonte específica. Caso a "fonte" for um organismo, "derivado de" significa que pode ser isolado ou obtido do próprio organismo ou caldo de cultura, suspensão ou meio usado para cultivar ou desenvolver o referido organismo. Um composto ou composição "derivado de" ou "obtido de" significa que o composto ou composição pode ser isolado ou produzido por uma cultura de células ou um caldo de células inteiras, ou suspensão, filtrado, sobrenadante, fração ou extrato derivado de uma cultura de células ou de um caldo de células inteiras.
[0024] Conforme aqui utilizado, "cultura de caldo inteiro" ou "caldo de células inteiras" se refere a uma cultura líquida contendo células e meios. Se as bactérias forem cultivadas em uma placa, as células podem ser colhidas em água ou em outra cultura líquida inteira. Os termos "cultura de caldo inteiro" e "caldo de células inteiras" são usados indistintamente.
[0025] Conforme aqui utilizado, "sobrenadante" se refere ao líquido remanescente quando as células cultivadas em caldo são colhidas em outro líquido a partir de uma placa de ágar e são removidas por centrifugação, filtração, sedimentação ou por outros meios bem conhecidos na técnica. Em algumas configurações, o sobrenadante pode ser diluído com outra composição, como água, tampão, meio fresco e/ou uma formulação. O sobrenadante diluído ainda é considerado um sobrenadante da invenção.
[0026] Conforme aqui utilizado, "filtrado" se refere ao líquido de uma cultura de caldo inteiro que passou através de uma membrana. O filtrado pode compreender uma quantidade concentrada de um composto ou metabólito eficaz em comparação com a concentração do composto ou metabólito eficaz na cultura de caldo inteiro ou sobrenadante. Conforme aqui utilizado, "extrato" se refere à substância líquida removida das células por um solvente (água, detergente, tampão e/ou solvente orgânico, por exemplo) e separada das células por centrifugação, filtração ou outro método conhecido na técnica. O extrato pode compreender uma quantidade concentrada de um composto ou metabólito eficaz em comparação com a concentração do composto ou metabólito eficaz nas células antes da extração. Alternativamente, o filtrado ou extrato pode então ser diluído com outra composição, como água, tampão, meio fresco e/ou uma formulação. Esses filtrados ou extratos diluídos ainda são considerados filtrados e extratos da invenção.
[0027] Conforme aqui utilizado, "metabólito" se refere a um composto, substância ou subproduto da fermentação de uma cepa bacteriana (ou seja, pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas). Um composto ou metabólito eficaz é um composto presente no sobrenadante, caldo de célula inteira ou cepa bacteriana que pode melhorar qualquer característica agronômica de interesse de uma planta, ou que controla uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa uma doença de plantas, quando aplicado a um planta de interesse em uma quantidade eficaz.
[0028] Em algumas configurações, uma composição da invenção compreende um filtrado ou extrato derivado da fermentação de uma cepa bacteriana, em que a referida composição compreende uma quantidade concentrada de um composto ou metabólito eficaz em comparação com a quantidade em um caldo de célula inteira ou sobrenadante da referida cepa bacteriana, em que a bactéria é pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Em outras configurações, uma composição da invenção compreende um filtrado diluído, extrato diluído ou sobrenadante diluído derivado da fermentação de uma cepa bacteriana, em que a referida composição compreende uma quantidade diluída do composto eficaz ou metabólito em comparação com a quantidade de caldo de células inteiras ou sobrenadante não-diluído da referida cepa bacteriana, em que a bactéria é pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. O filtrado diluído, extrato diluído ou sobrenadante diluído pode ainda compreender uma quantidade eficaz do composto ou metabólito eficaz.
[0029] As composições e métodos aqui descritos compreendem ou são derivados de uma cepa bacteriana (ou seja, pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos ou/e esporos, de qualquer uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas). Os métodos compreendem o cultivo de pelo menos uma dessas cepas bacterianas. Em algumas configurações, pelo menos uma dessas cepas bacterianas é cultivada e os compostos e/ou composições são obtidos pelo isolamento desses compostos e/ou composições da cultura de pelo menos uma dessas cepas bacterianas.
[0030] Em algumas configurações, pelo menos uma cepa bacteriana é cultivada em meio nutriente usando métodos conhecidos na técnica. A cepa bacteriana pode ser cultivada por cultivo em frasco de agitação ou por fermentação em pequena ou grande escala (incluindo, mas não se limitando a fermentação contínua, em lote, em lote alimentado ou em estado sólido) em fermentadores de laboratório ou industriais realizados em um meio adequado e sob condições que permitam o crescimento de células bacterianas. O cultivo pode ocorrer em meio nutriente adequado compreendendo fontes de carbono e nitrogênio e sais inorgânicos, usando procedimentos conhecidos na técnica. Os meios adequados estão disponíveis em fontes comerciais ou são preparados de acordo com publicações bem conhecidas na técnica.
[0031] Após o cultivo, os compostos, metabólitos e/ou composições podem ser extraídos do caldo de cultura. O extrato pode ser fracionado por cromatografia. O extrato pode ser purificado adicionalmente usando métodos bem conhecidos na técnica. O extrato também pode ser diluído usando métodos bem conhecidos na técnica.
[0032] As composições compreendendo uma célula de uma cepa bacteriana (ou seja, pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, e/ou uma composição derivada de qualquer uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas) pode ainda compreender um transportador agricolamente aceitável. O termo "transportador agricolamente aceitável" pretende incluir qualquer material que facilite a aplicação de uma composição ao sujeito pretendido (ou seja, uma planta ou parte de planta suscetível a danos ou doenças causados por uma praga de plantas ou uma planta ou parte de planta para melhorar uma característica agronômica de interesse). Os transportadores usados em composições para aplicação em plantas e partes de plantas são preferencialmente não fitotóxicos ou apenas ligeiramente fitotóxicos. Um transportador adequado pode ser um sólido, líquido ou gás dependendo da formulação desejada. Em uma configuração, os transportadores incluem transportadores líquidos polares ou não-polares, como água, óleos minerais e óleos vegetais. Transportadores adicionais são divulgados em outras partes deste documento. A, Variantes ativas de uma cepa bacteriana
[0033] Além disso, são fornecidas as variantes ativas das AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287,
AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706. Essas variantes irão reter a capacidade de controlar uma ou mais pragas de plantas ou melhorar uma ou mais características agronômicas de interesse em uma planta. Assim, em algumas configurações, as variantes ativas das cepas bacterianas aqui fornecidas irão reter atividade pesticida contra uma praga de planta. Conforme aqui utilizado, "atividade pesticida" se refere à atividade contra uma ou mais pragas, incluindo insetos, fungos, bactérias, nematoides, vírus ou viroides, patógenos protozoários, entre outros, de modo que a praga seja morta ou controlada. Em algumas configurações, as variantes irão manter a capacidade de controlar uma ou mais pragas de insetos ou pragas de nematoides. Em configurações particulares, as variantes irão reter a capacidade de controlar pragas de insetos coleópteros, incluindo lagartas da raiz do milho (por ex., lagarta da raiz do milho ocidental), besouro da batata do Colorado, gorgulhos (por ex., gorgulho da batata- doce) ou pragas de insetos hemípteros.
[0034] Variantes ativas das diversas cepas bacterianas aqui fornecidas incluem, por exemplo, qualquer isolado ou mutante de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706.
[0035] O termo "mutante" se refere a uma variante da cepa progenitora, bem como a métodos para obter um mutante ou variante, em que a atividade pesticida é maior do que aquela expressa pela cepa progenitora. A "cepa progenitora" é a cepa original antes da mutagênese. Para obter tais mutantes, a cepa progenitora pode ser tratada com um produto químico, como N- metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina, etilmetanossulfona (EMS),
ou por irradiação usando gama, raio x ou radiação UV, ou por outros meios bem conhecidos na técnica.
[0036] Em algumas configurações, a variante ativa contém pelo menos uma mutação em pelo menos um gene, em relação à cepa depositada. O(s) gene(s) podem ter um papel em, por exemplo, formação de biofilme, motilidade, quimiotaxia, secreção extracelular, transporte (por exemplo, proteínas transportadoras ABC), respostas ao estresse, voláteis, transcrição (por exemplo, fatores sigma alternativos e reguladores de transcrição globais), colonização da raiz, capacidade de estimular a resistência sistêmica induzida em uma planta e/ou metabolismo secundário, incluindo a síntese de lipopeptídeos, policetídeos, hidrolases macromoleculares (por exemplo, proteases e/ou carboidrases) e/ou compostos antimicrobianos, incluindo antibióticos. "Metabolismo secundário" se refere à síntese não-ribossômica e ribossômica de compostos antimicrobianos, incluindo lipopeptídeos cíclicos, policetídeos, iturinas, bacteriocinas (por exemplo, plantazolicina e amilociclina) e dipeptídeos (por exemplo, bacilisina).
[0037] Um exemplo de uma variante ativa é uma célula da cepa bacteriana AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706, em que a célula também compreende uma mutação no gene swrA que resulta em perda de função. A mutação swrA, que afeta a formação de biofilme (Kearns et al., Molecular Microbiology (2011) 52 (2): 357-369) pode resultar em uma variante ativa de uma cepa da invenção que tem capacidade aumentada para controlar uma praga de plantas ou melhorar uma característica agronômica de interesse de uma planta. Outros genes que estão envolvidos na formação de biofilme, como sfp, epsC, degQ e um gene de plasmídeo chamado rapP (vide, por exemplo, McLoon et al., J of Bacteriology, (2011) 193 (8): 2027-2034), também podem ser mutados em uma variante ativa de uma cepa bacteriana da invenção.
[0038] Em configurações específicas, a cepa bacteriana é compatível com um biocida. Um biocida é uma substância química que pode exercer um efeito de controle sobre um organismo por meios químicos ou biológicos. Os biocidas incluem pesticidas, como fungicidas ou inseticidas; herbicidas; outros produtos químicos de proteção de cultivo e semelhantes. Esses compostos são discutidos em detalhe em outra parte deste documento. Uma cepa bacteriana é compatível com um biocida quando a cepa bacteriana é capaz de sobreviver e/ou se reproduzir na presença de uma quantidade eficaz de um biocida de interesse. Nos casos em que a cepa bacteriana não for compatível com um biocida de interesse, conforme desejado, podem ser adotados métodos para modificar a cepa bacteriana para transmitir a compatibilidade de interesse. Esses métodos para produzir cepas bacterianas modificadas incluem técnicas de seleção e/ou técnicas de transformação.
[0039] Por "cepa bacteriana modificada" entende-se uma população em que a cepa foi modificada (por seleção e/ou transformação) para ter uma ou mais características adicionais de interesse. Em alguns casos, a cepa bacteriana modificada compreende qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Em configurações específicas, a cepa bacteriana modificada é compatível com um biocida de interesse,
incluindo, mas não se limitando a, resistência a um herbicida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção de cultivo. As cepas resistentes a biocidas modificadas têm as mesmas características de identificação que a cepa sensível original, exceto que são significativamente mais resistentes ao herbicida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção de cultivo específico. Sua identificação é imediatamente possível por meio da comparação com as características da cepa sensível conhecida. Assim, são fornecidas populações isoladas de cepas bacterianas modificadas.
[0040] Um aumento na resistência a um biocida (por ex., a um herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outra resistência química de proteção ao cultivo) refere-se à capacidade de um organismo (por ex., célula bacteriana ou esporo) de sobreviver e se reproduzir após a exposição a uma dose do biocida (por ex., herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo) que normalmente seria letal para o organismo não-modificado ou reduziria substancialmente o crescimento do organismo não- modificado. Em configurações específicas, o aumento na resistência a um biocida é demonstrado na presença de uma quantidade agricolamente eficaz do biocida.
[0041] Em tais casos, a cepa bacteriana modificada com resistência a um ou mais biocidas é útil para aumentar a competitividade de cepas bacterianas, particularmente sobre outros agentes microbianos que não são resistentes a herbicidas, inseticidas, fungicidas, pesticidas ou outros produtos químicos de proteção ao cultivo. Portanto, as composições aqui fornecidas incluem cepas bacterianas selecionadas ou fabricadas e populações modificadas de cepas bacterianas. Essas cepas bacterianas ou cepas bacterianas modificadas podem ser usadas como inoculante para plantas. Elas também podem ser aplicadas como uma aplicação por pulverização diretamente nas partes aéreas das plantas ou podem ser aplicadas como um revestimento de sementes, podendo ser misturadas com o herbicida ou outro produto químico em relação ao qual foram modificadas para se tornarem tolerantes.
[0042] Assim, as variantes ativas das cepas bacterianas aqui divulgadas incluem, por exemplo, uma cepa modificada, de modo que a variante ativa controle uma praga de plantas e ainda seja capaz de crescer na presença de pelo menos um biocida. As cepas bacterianas recombinantes com resistência a um herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo podem ser feitas mediante técnicas de engenharia genética, e essas cepas bacterianas fabricadas ou recombinantes podem ser cultivadas para produzir uma população modificada de cepas bacterianas. Uma cepa bacteriana recombinante é produzida pela introdução de polinucleotídeos na célula hospedeira bacteriana por transformação. Métodos para transformar microrganismos são conhecidos e estão disponíveis na técnica. Vide, em geral, Hanahan, D. (1983) Studies on transform of Escherichia coli with plasmids J. Mol. Biol. 166, 557–77; Seidman, CE (1994) In: Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel, FM et al. eds., John Wiley and Sons, NY; Choi et al. (2006) J. Microbiol. Methods 64: 391-397; Wang et al. 2010. J. Chem. Tecnol. Biotechnol. 85: 775–778. A transformação pode ocorrer por absorção natural de DNA nu por células competentes em seu ambiente no laboratório. Alternativamente, as células podem se tornar competentes por exposição a cátions divalentes sob condições frias, por eletroporação, por exposição a polietilenoglicol, por tratamento com nanopartículas fibrosas ou outros métodos bem conhecidos na técnica..
[0043] Genes de resistência a herbicidas para uso na transformação de uma cepa bacteriana recombinante incluem, mas não se limitam a, genes de desintoxicação de fumonisina (Patente dos EUA nº 5,792,931); mutantes de acetolactato sintase (ALS) que levam à resistência a herbicidas, em particular os herbicidas do tipo sulfonilureia, tais como as mutações S4 e/ou Hra; inibidores da glutamina sintase, tais como fosfinotricina ou basta (por ex., gene bar); e resistência ao glifosato (gene EPSPS); glufosinato e resistência a HPPD (WO 96/38576, Patente dos EUA nº 6,758,044; 7,250,561; 7,935,869; e 8,124,846), ou outros genes similares conhecidos na técnica. As divulgações de WO 96/38576, Patente dos EUA nº 5,792,931, Patente dos EUA nº 6,758,044; Patente dos EUA nº 7,250,561; Patente dos EUA nº 7,935,869; e Patente dos EUA nº 8,124,846 são aqui incorporadas por referência. O gene bar codifica resistência ao herbicida basta, o gene nptII codifica resistência aos antibióticos canamicina e geneticina, e os mutantes do gene ALS codificam resistência aos herbicidas de sulfonilureia, incluindo clorsulfurona, metsulfurona, sulfometurona, nicosulfurona, rimsulfurona, flazasulfurona e triasulfurona, e os herbicidas de imadizolinona, incluindo imazetapir, imazaquim, imazapir e imazametabenze.
[0044] Para identificar e produzir uma população modificada de cepas bacterianas mediante seleção, as cepas bacterianas são cultivadas na presença do herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo como a pressão de seleção. Os agentes suscetíveis são mortos enquanto os agentes resistentes sobrevivem para se reproduzir sem competição. À medida que as cepas bacterianas são cultivadas na presença do herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo, as cepas bacterianas resistentes se reproduzem com sucesso e se tornam dominantes na população, tornando-se uma população modificada de cepas bacterianas. Os métodos para selecionar cepas resistentes são conhecidos e incluem as Patentes dos EUA nº 4,306,027 e 4,094,097, aqui incorporadas por referência. A variante ativa da cepa bacteriana que compreende uma população modificada de cepas bacterianas terá as mesmas características de identificação que a cepa sensível original, exceto o fato de serem significativamente mais tolerantes ao herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo específico. Portanto, sua identificação é imediatamente possível por meio da comparação com as características da cepa sensível conhecida.
[0045] Outras variantes ativas das diversas bactérias aqui fornecidas podem ser identificadas empregando, por exemplo, métodos que determinam a relação de identidade de sequência entre o RNA ribossômico 16S; métodos para identificar grupos de cepas derivadas e funcionalmente idênticas ou quase idênticas incluem Tipagem de Sequências Multilocus (MLST), árvores de genes compartilhados concatenados, Alinhamento de Genomas Completos (WGA), Identidade Média de Nucleotídeos e métrica de distância MinHash (Mash).
[0046] Em um aspecto, as variantes ativas das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525,
AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706 incluem cepas que estão intimamente relacionadas a qualquer uma das cepas divulgadas ao empregar o método Bishop MLST de classificação de organismos conforme definido em Bishop et al. (2009) BMC Biology 7 (1) 1741-7007- 7-3. Assim, em configurações específicas, uma variante ativa de uma cepa bacteriana aqui divulgada inclui uma cepa bacteriana que se enquadra em pelo menos 80%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 98,5%, 98,8%, 99%, 99,1%, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8% ou 99,9% de corte de sequência empregando o método Bishop de classificação de organismos conforme estabelecido em Bishop et al. (2009) BMC Biology 7 (1) 1741-7007-7-3, o qual é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Variantes ativas das bactérias identificadas por tais métodos irão reter a capacidade de controlar pelo menos uma praga de plantas e/ou de melhorar pelo menos uma característica agronômica quando aplicadas em uma quantidade eficaz a uma planta, parte de planta ou área de cultivo, incluindo por exemplo, redução de pragas de plantas, redução de infestações de pragas de plantas e/ou aumento da resistência a pragas, incluindo resistência a pragas de insetos (por ex., insetos Coleóptera como lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou gorgulho da batata-doce).
[0047] Em outro aspecto, a variante ativa da(s) cepa(s) bacteriana(s) aqui divulgada(s) inclui cepas que estão intimamente relacionadas a qualquer uma das cepas divulgadas com base no método de classificação de organismos Identidade Média de Nucleotídeos (ANI). ANI (vide, por exemplo, Konstantinidis, KT, et al., (2005) PNAS USA 102 (7): 2567–72;
e Richter, M., et al., (2009) PNAS 106 (45): 19126– 31) e variantes (vide, por exemplo, Varghese, NJ, et al., Nucleic Acids Research (6 de julho de 2015): gkv657) são baseadas no resumo dos nucleotídeos médios compartilhados entre os genomas de cepas que se alinham em WGAs. Assim, em configurações específicas, uma variante ativa das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, e AIP036706 aqui divulgadas inclui uma cepa bacteriana que se enquadra em pelo menos 90%, 95%, 96%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 98,8%, 99%, 99,5% ou 99,8% de corte de sequência empregando o método ANI de classificação de organismos conforme estabelecido em Konstantinidis, KT, et al., (2005) PNAS USA 102 (7): 2567-72, o qual é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Variantes ativas das bactérias identificadas por tais métodos irão reter a capacidade de controlar pelo menos uma praga de plantas e/ou de melhorar pelo menos uma característica agronômica quando aplicadas em uma quantidade eficaz a uma planta, parte de planta ou área de cultivo, incluindo por exemplo, redução de pragas de plantas, redução de infestações de pragas de plantas e/ou aumento da resistência a pragas, incluindo resistência a pragas de insetos (por ex., insetos Coleóptera como lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou caruncho da batata-doce).
[0048] Em outro aspecto, as variantes ativas da(s) cepa(s) bacteriana(s) isolada(s) aqui divulgada(s) incluem cepas que estão intimamente relacionadas a qualquer uma das cepas acima (por exemplo, intimamente relacionadas a AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706) com base na identidade de sequência 16S rDNA. Vide Stackebrandt E, et al., “Report of the ad hoc committee for the re-evaluation of the species definition in bacteriology,” Int J Syst Evol Microbiol. 52(3):1043-7 (2002) a respeito do uso da identidade de sequência 16S rDNA para determinar parentesco em bactérias. Em uma configuração, a variante ativa é pelo menos 95% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA, pelo menos 96% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA, pelo menos 97% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA, pelo menos 98% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA, pelo menos 98,5% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência de 16S rDNA, pelo menos 99% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA, pelo menos 99,5% para qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência de 16S rDNA ou pelo menos 100% idêntica a qualquer uma das cepas acima com base na identidade de sequência 16S rDNA. Variantes ativas das bactérias identificadas por tais métodos irão reter a capacidade de controlar pelo menos uma praga de plantas e/ou de melhorar pelo menos uma característica agronômica quando aplicadas em uma quantidade eficaz a uma planta, parte de planta ou área de cultivo, incluindo por exemplo, redução de pragas de plantas, redução de infestações de pragas de plantas e/ou aumento da resistência a pragas, incluindo resistência a pragas de insetos (por ex., insetos Coleóptera como lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou caruncho da batata-doce).
[0049] A métrica de distância MinHash (Mash) é um método de comparação que define limites para a classificação hierárquica de microrganismos em alta resolução e requer poucos parâmetros e etapas (Ondov et al. (2016) Genome Biology 17: 132). A distância Mash estima a taxa de mutação entre duas sequências diretamente a partir de seus esboços MinHash (Ondov et al. (2016) Genome Biology 17: 132). A distância Mash corresponde fortemente ao método Identidade Média de Nucleotídeos (ANI) para classificação hierárquica (Vide Konstantinidis, KT et al. (2005) PNAS USA 102 (7): 2567–72, aqui incorporado por referência em sua totalidade). Ou seja, uma ANI de 97% é aproximadamente igual a uma distância Mash de 0,03, de modo que os valores apresentados como limites de classificação úteis na literatura sobre ANI podem ser aplicados diretamente com a distância Mash.
[0050] Variantes ativas da(s) cepa(s) bacteriana(s) aqui divulgada(s) incluem cepas que estão intimamente relacionadas a AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, ou AIP036706 com base na distância Minhash (Mash) entre sequências de DNA de genoma completo. Assim, em configurações específicas, uma variante ativa de uma cepa bacteriana aqui divulgada inclui cepas bacterianas com um genoma dentro de uma distância Mash inferior a cerca de 0,015 para as cepas divulgadas. Em outras configurações, uma variante ativa de uma cepa bacteriana aqui divulgada inclui uma distância métrica inferior a cerca de 0,001, 0,0025, 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 ou 0,030. Um genoma, no que se refere à distância Mash, inclui tanto o DNA cromossômico bacteriano como o DNA plasmídeo bacteriano. Em outras configurações, a variante ativa de uma cepa bacteriana tem um genoma que está acima de um limite de distância Mash para as cepas divulgadas que é maior do que a dissimilaridade causada por variação técnica. Em outros casos, a variante ativa de uma cepa bacteriana tem um genoma que está acima de um limite de distância Mash para as cepas divulgadas que é maior do que a dissimilaridade causada por variação técnica e tem uma distância Mash inferior a cerca de 0,015. Em outros casos, a variante ativa de uma cepa bacteriana tem um genoma que está acima de um limite de distância Mash para as cepas divulgadas que é maior do que a dissimilaridade causada por variação técnica e tem uma distância Mash inferior a cerca de 0,001, 0,0025, 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 ou 0,030.
[0051] Conforme aqui utilizado, "acima da variação técnica" significa acima da distância Mash entre duas cepas causada por erros nas montagens dos genomas, desde que os genomas comparados tenham tido sequenciamento de DNA com pelo menos 20X de cobertura com a tecnologia de sequenciamento de DNA Illumina HiSeq 2500 e que os genomas estejam pelo menos 99% completos com evidência de contaminação inferior a 2%. Embora 20X de cobertura seja um termo reconhecido na técnica, para maior clareza, um exemplo de 20X de cobertura é o seguinte: para um tamanho de genoma de 5 megabases (MB), 100 MB de sequenciamento de DNA de um determinado genoma é necessário para obter uma cobertura de sequenciamento de 20X em média em cada posição ao longo do genoma. Existem muitas coleções adequadas de genes marcadores para usar em cálculos de integridade do genoma, incluindo os conjuntos encontrados em Campbell et al. (2013) PNAS USA 110 (14): 5540-45, Dupont et al. (2012) ISMEJ 6:1625–1628 e a abordagem CheckM (Parks et al. (2015) Genome Research 25: 1043-1055); cada uma dessas referências é aqui incorporada em sua totalidade. A contaminação é definida como a porcentagem de genes marcadores de cópia tipicamente única que são encontrados em cópias múltiplas em determinada sequência de genoma (por ex., Parks et al. (2015) Genome Research 25: 1043-1055); cada uma dessas referências é aqui incorporada em sua totalidade. A integridade e a contaminação são calculadas usando a mesma coleção de genes marcadores. Salvo indicação em contrário, o conjunto de marcadores de coleção utilizados no ensaio de integridade e contaminação é aquele estabelecido em Campbell et al. (2013) PNAS USA 110 (14): 5540-45, aqui incorporado por referência.
[0052] As etapas exemplificativas para obter uma estimativa da distância entre os genomas em questão são as seguintes: (1) Devem ser produzidos genomas de qualidade suficiente para comparação. Um genoma de qualidade suficiente é definido como uma montagem de genoma criada com sequência de DNA suficiente para atingir pelo menos 20X de cobertura do genoma usando a tecnologia Illumina HiSeq 2500. O genoma deve estar pelo menos 99% completo com contaminação inferior a 2% para ser comparado ao genoma do micróbio reivindicado. (2) Os genomas devem ser comparados usando o fluxo de trabalho Minhash, conforme demonstrado em Ondov et al. (2016) Genome Biology 17: 132, aqui incorporado por referência em sua totalidade. Salvo indicação em contrário, os parâmetros utilizados são os seguintes: tamanho do "esboço" de 1000 e "comprimento k-mer" de 21. (3) Confirmar se a distância Mash entre os dois genomas é menor que 0,001, 0,0025, 0,005, 0,010, 0,015, 0,020, 0,025 ou 0,030. Usando os parâmetros e métodos indicados acima, uma distância Mash de 0,015 entre dois genomas significa que a taxa de mutação esperada é de 0,015 mutações por posição homóloga. Variantes ativas das bactérias identificadas por tais métodos irão reter a capacidade de controlar pelo menos uma praga de plantas e/ou de melhorar pelo menos uma característica agronômica quando aplicadas em uma quantidade eficaz a uma planta, parte de planta ou área de cultivo, incluindo por exemplo, redução de pragas de plantas, redução de infestações de pragas de plantas e/ou aumento da resistência a pragas, incluindo resistência a pragas de insetos (por ex., insetos Coleóptera como lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou caruncho da batata-doce). III. Formulações
[0053] As cepas bacterianas aqui fornecidas (isto é, células de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou variantes ativas de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, e/ou uma composição derivada de qualquer uma das AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas) podem ser formuladas como uma pasta celular, pós molháveis, um sedimento celular, poeiras, grânulos, uma polpa, um pó seco, produtos líquidos aquosos ou à base de óleo, entre outros. Tais formulações compreenderão as bactérias aqui fornecidas ou uma variante ativa das mesmas e/ou uma composição derivada delas, além de transportadores e outros agentes. As formulações podem ser usadas em uma variedade de métodos, conforme divulgado em outra parte deste documento.
[0054] As cepas bacterianas aqui divulgadas e as suas variantes ativas podem ser formuladas para incluir pelo menos um ou mais de um diluente, um solvente, promotor de espontaneidade, transportador, emulsificante, dispersante, protetor de congelamento, espessante e/ou adjuvante. Em algumas configurações, o diluente, solvente, promotor de espontaneidade, transportador, emulsificante, dispersante, protetor de congelamento, espessante e/ou adjuvante é um diluente, um solvente, promotores de espontaneidade, transportadores, emulsificantes, dispersantes, protetores de congelamento, espessantes e/ou adjuvantes não-naturais ou sintéticos. Em configurações específicas, as cepas bacterianas aqui divulgadas e as suas variantes ativas podem ser formuladas para incluir pelo menos um ou mais de um diluente, um solvente, promotor de espontaneidade, transportador, emulsificante, dispersante, protetor de congelamento, espessante e/ou adjuvante.
[0055] Exemplos de formulações típicas incluem líquidos solúveis em água (SL), concentrados emulsionáveis (EC), emulsões em água (EW), concentrados de suspensão (SC), suspoemulsões (SE), concentrados fluidos para tratamento de sementes (FS), dispersões em óleo (OD), grânulos dispersíveis em água (WG), grânulos (GR), concentrados de cápsulas (CS), grânulos dispersíveis em água (WG), grânulos (GR), iscas em bloco (BB), grânulos solúveis em água (SG), bem como formulações mistas de CS e SC (ZC). Esses e outros tipos de formulações possíveis são descritos, por exemplo, pela Crop Life International e em Pesticide Specifications, Manual on development and use of FAO and WHO specifications for pesticides, FAO Plant Production and Protection Papers - 173, elaborado pela FAO/WHO Joint Meeting on Pesticide Specifications, 2004, ISBN: 9251048576. As formulações podem compreender compostos agroquímicos ativos diferentes de um ou mais compostos ativos da invenção.
[0056] As formulações ou formas de aplicação das diversas cepas bacterianas ou de suas variantes ativas podem compreender, mas não estão limitadas a, auxiliares, tais como diluentes, solventes, promotores de espontaneidade, transportadores, emulsificantes, dispersantes, protetores de congelamento, biocidas, transportadores sólidos, surfactantes, espessantes e/ou outros auxiliares, tais como adjuvantes. Um adjuvante, neste contexto, é um componente que potencializa o efeito biológico da formulação, sem que o componente em si tenha efeito biológico. Exemplos de adjuvantes são agentes que promovem a retenção, propagação, fixação à superfície da folha ou penetração.
[0057] Os diluentes não-limitantes são, por exemplo, água, líquidos químicos orgânicos polares e não-polares, por exemplo, das classes dos hidrocarbonetos aromáticos e não- aromáticos (como parafinas, alquilbenzenos, alquilnaftalenos, clorobenzenos), os álcoois e polióis (os quais, caso apropriado, também podem ser substituídos, eterificados e/ou esterificados), as cetonas (como acetona, ciclohexanona), ésteres (incluindo gorduras e óleos) e (poli)éteres, as aminas, amidas, lactamas não-substituídas e substituídas (como N- alquilpirrolidonas) e lactonas, sulfonas e sulfóxidos (como dimetilsulfóxido). Se o diluente utilizado for água, também é possível empregar, por exemplo, solventes orgânicos como solventes auxiliares. Essencialmente, os solventes líquidos não-limitantes são: aromáticos, como xileno, tolueno ou alquilnaftalenos, aromáticos clorados e hidrocarbonetos alifáticos clorados, como clorobenzenos, cloroetilenos ou cloreto de metileno, hidrocarbonetos alifáticos, como ciclohexano ou parafinas, por exemplo, frações de petróleo, óleos minerais e vegetais, álcoois como butanol ou glicol e também seus éteres e ésteres, cetonas como acetona, metil etil cetona, metil isobutil cetona ou ciclohexanona, solventes fortemente polares como dimetilformamida e dimetilsulfóxido, e também água. Em princípio, é possível usar qualquer solvente adequado. Os solventes não-limitantes são, por exemplo, hidrocarbonetos aromáticos, tais como xileno, tolueno ou alquilnaftalenos, por exemplo, hidrocarbonetos clorados aromáticos ou alifáticos, tais como clorobenzeno, cloroetileno ou cloreto de metileno, por exemplo, hidrocarbonetos alifáticos, tais como ciclohexano, por exemplo, parafinas, frações de petróleo, óleos minerais e vegetais, álcoois, tais como metanol, etanol, isopropanol, butanol ou glicol, por exemplo, e também seus éteres e ésteres, cetonas, tais como acetona, metil etil cetona, metil isobutil cetona ou ciclohexanona, por exemplo, solventes fortemente polares, como dimetilsulfóxido e água.
[0058] Exemplos não-limitantes de transportadores adequados incluem, por exemplo, sais de amônio e minerais naturais moídos, como caulins, argilas, talco, giz, quartzo, atapulgita, montmorilonita ou terra diatomácea, e minerais sintéticos moídos, como sílica finamente dividida, alumina, além de silicatos, resinas, ceras e/ou fertilizantes sólidos naturais ou sintéticos. Também podem ser utilizadas misturas desses transportadores. Os transportadores adequados para grânulos incluem os seguintes: por exemplo, minerais naturais triturados e fracionados, como calcita, mármore, pedra-pomes, sepiolita, dolomita e também grânulos sintéticos de farinhas inorgânicas e orgânicas, além de grânulos de material orgânico,
como serragem, papel, cascas de coco, espigas de milho e caules de tabaco.
[0059] Diluentes ou solventes gasosos liquefeitos também podem ser usados. Exemplos não-limitantes são aqueles diluentes ou transportadores que à temperatura padrão e sob pressão padrão são gasosos, sendo exemplos propulsores de aerossol, como hidrocarbonetos halogenados, além de butano, propano, nitrogênio e dióxido de carbono. Exemplos de emulsificantes e/ou formadores de espuma, dispersantes ou agentes umectantes com propriedades iônicas ou não-iônicas, ou misturas dessas substâncias tensoativas, são sais de ácido poliacrílico, sais de ácido lignossulfônico, sais de ácido fenolsulfônico ou ácido naftalenossulfônico, policondensados de óxido de etileno com álcoois graxos ou com ácidos graxos ou com aminas graxas, com fenóis substituídos (de preferência alquilfenóis ou arilfenóis), sais de ésteres sulfossuccínicos, derivados de taurina (de preferência alquilturatos), ésteres fosfóricos de álcoois ou fenóis polietoxilados, ésteres de ácidos graxos de polióis e derivados dos compostos contendo sulfatos, sulfonatos e fosfatos, sendo exemplos éteres alquilarilpoliglicólicos, alquilsulfonatos, alquilsulfatos, arilsulfonatos, hidrolisados de proteínas, licores residuais de lignina-sulfito e metilcelulose. A presença de uma substância tensoativa é vantajosa se um dos compostos ativos e/ou um dos transportadores inertes não for solúvel em água e se a aplicação ocorrer em água.
[0060] Outros auxiliares que podem estar presentes nas formulações e nas formas de aplicação derivadas delas incluem corantes como pigmentos inorgânicos, sendo exemplos óxido de ferro, óxido de titânio, Azul da Prússia e corantes orgânicos,
como corantes de alizarina, corantes azo e corantes de ftalocianina de metal, além de nutrientes e nutrientes residuais, como sais de ferro, manganês, boro, cobre, cobalto, molibdênio e zinco.
[0061] Estabilizadores, como estabilizadores de baixa temperatura, conservantes, antioxidantes, estabilizadores de luz ou outros agentes que melhoram a estabilidade química e/ou física também podem estar presentes. Adicionalmente, podem estar presentes formadores de espuma ou antiespumantes.
[0062] Além disso, as formulações e formas de aplicação derivadas delas também podem compreender, como auxiliares adicionais, adesivos, como carboximetilcelulose, polímeros naturais e sintéticos em pó, grânulos ou forma de látex, como goma arábica, álcool polivinílico, acetato de polivinila, além de fosfolipídios naturais, como cefalinas e lecitinas e fosfolipídios sintéticos. Outros auxiliares possíveis incluem óleos minerais e vegetais.
[0063] É possível que haja outros auxiliares presentes nas formulações e nas formas de aplicação delas derivadas. Exemplos de tais aditivos incluem fragrâncias, coloides protetores, aglutinantes, adesivos, espessantes, substâncias tixotrópicas, penetrantes, promotores de retenção, estabilizadores, sequestrantes, agentes complexantes, umectantes e espalhadores. De um modo geral, os compostos ativos podem ser combinados com qualquer aditivo sólido ou líquido comumente usado para fins de formulação.
[0064] Os promotores de retenção adequados incluem todas as substâncias que reduzem a tensão superficial dinâmica, como o dioctil sulfossuccinato, ou aumentam a viscoelasticidade, como os polímeros de hidroxipropilguar, por exemplo.
[0065] Penetrantes adequados no presente contexto incluem todas as substâncias que são tipicamente usadas para aumentar a penetração de compostos agroquímicos ativos nas plantas. Penetrantes, neste contexto, são definidos pelo fato de que, a partir do licor de aplicação (geralmente aquoso) e/ou do revestimento por pulverização, eles são capazes de penetrar na cutícula da planta aumentando, assim, a mobilidade dos compostos ativos na cutícula. Esta propriedade pode ser determinada usando o método descrito na literatura (Baur et al., 1997, Pesticide Science 51: 131-152). Os exemplos incluem alcoxilatos de álcool, como etoxilato graxo de coco (10) ou etoxilato de isotridecil (12), ésteres de ácidos graxos como ésteres metílicos de colza ou óleo de soja, alcoxilatos de aminas graxas como etoxilato de sebo (15), ou sais de amônio e/ou fosfônio, como sulfato de amônio ou hidrogenofosfato de diamônio, por exemplo.
[0066] As diversas composições e formulações aqui divulgadas podem compreender uma quantidade de uma célula de uma cepa bacteriana, como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, e/ou pode compreender uma quantidade de uma composição derivada de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Essa quantidade pode compreender uma concentração da cepa bacteriana de pelo menos cerca de 104 a cerca de 1011, pelo menos cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 10 5 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 10 5 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 106 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 107 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 108 CFU/grama, cerca de 108 CFU/grama a cerca de 109 CFU/grama, cerca de 109 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 1010 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, ou cerca de 1011 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama. Em outras configurações, a concentração da cepa bacteriana compreende pelo menos cerca de 104 CFU/grama, pelo menos cerca de 105 CFU/grama, pelo menos cerca de 106 CFU/grama, pelo menos cerca de 107 CFU/grama, pelo menos cerca de 108 CFU/grama, pelo menos cerca de 109 CFU/grama, pelo menos cerca de 1010 CFU/grama, pelo menos cerca de 1011 CFU/grama, pelo menos cerca de 1012 CFU/grama. Essas concentrações da cepa bacteriana podem ocorrer em qualquer tipo de formulação de interesse, incluindo, por exemplo, em uma formulação líquida, pó molhável, formulação seca por pulverização, em uma pasta celular, grânulo molhável ou formulação seca por congelamento.
[0067] Em algumas configurações, a cepa bacteriana pode ocorrer em uma formulação líquida. As formulações líquidas podem compreender uma quantidade de uma célula de uma cepa bacteriana, como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, a partir de qualquer uma das AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas e/ou uma composição derivada das mesmas. Em formulações líquidas, a quantidade de cepa bacteriana, ou variante ativa da mesma, e/ou uma composição derivada da mesma, aqui divulgada pode compreender uma concentração de pelo menos cerca de 104 a cerca de 1011 CFU/mL, pelo menos cerca de 105 CFU/mL cerca de 1011 CFU/ mL, cerca de 105 CFU/ mL a cerca de 1010 CFU/ mL, cerca de 105 CFU/ mL a cerca de 1012 CFU/ mL, cerca de 105 CFU/ mL a cerca de 106 CFU/ mL, cerca de 106 CFU/ mL a cerca de 107 CFU/ mL, cerca de 107 CFU/ mL a cerca de 108 CFU/ mL, cerca de 108 CFU/ mL a cerca de 109 CFU/ mL, cerca de 109 CFU/ mL a cerca de 1010 CFU/ mL, cerca de 1010 CFU/ mL a cerca de 1011 CFU/ mL, ou cerca de 1011 CFU/ mL a cerca de 1012 CFU/ mL ou pelo menos cerca de 104 CFU/ mL, pelo menos cerca de 105 CFU/ mL, pelo menos cerca de 106 CFU/ mL, pelo menos cerca de 107 CFU/ mL, pelo menos cerca de 108 CFU/ mL, pelo menos cerca de 109 CFU/ mL, pelo menos cerca de 1010 CFU/ mL, pelo menos cerca de 1011 CFU/ mL, pelo menos cerca de 1012 CFU/ mL.
[0068] As formulações secas, como pastas celulares, pós molháveis e formulações secas por pulverização, podem compreender uma célula de uma cepa bacteriana, como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma delas, e/ou podem compreender uma composição derivada de qualquer uma das AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. A quantidade da cepa bacteriana na formulação seca (por ex., pastas celulares, pós molháveis e/ou formulações secas por pulverização) pode compreender uma concentração da cepa bacteriana de pelo menos cerca 105 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 1011 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 106 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 107 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 108 CFU/grama, cerca de 108 CFU/grama a cerca de 109 CFU/grama, cerca de 109 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 1010 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, ou cerca de 1011 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama. Em algumas configurações, a concentração da cepa bacteriana compreende pelo menos cerca de 105 CFU/grama, pelo menos cerca de 106 CFU/grama, pelo menos cerca de 107 CFU/grama, pelo menos cerca de 108 CFU/grama, pelo menos cerca de 109 CFU/grama, pelo menos cerca de 1010 CFU/grama, pelo menos cerca de 1011 CFU/grama, pelo menos cerca de 1012 CFU/grama ou pelo menos cerca de 1013 CFU/grama.
[0069] Conforme usado neste documento, uma "pasta de células" compreende uma população de células que foi centrifugada e/ou filtrada ou concentrada de outra forma. Também é fornecida uma semente revestida que compreende uma semente e um revestimento na semente, em que o revestimento compreende uma célula de pelo menos uma cepa bacteriana, como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma delas, e/ou pode compreender uma composição derivada de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a referida cepa bacteriana ou sua variante ativa está presente na semente em cerca de 105 CFU/semente a cerca de 107 CFU/semente, em cerca de 104 CFU/semente a cerca de 108 CFU/semente, em cerca de 104 CFU/semente a cerca de 105 CFU/semente, em cerca de 105 CFU/semente a cerca de 106 CFU/semente, em cerca de 106 CFU/semente a cerca de 107 CFU/semente, ou em cerca de 107 CFU/semente a cerca de 108 CFU/semente. Várias plantas de interesse são divulgadas em outra parte deste documento.
[0070] Em configurações particulares, são fornecidas sementes que compreendem um revestimento heterólogo na semente, em que o revestimento heterólogo compreende uma célula de pelo menos uma cepa bacteriana, como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos, e/ou pode compreender uma composição derivada de qualquer uma das AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a referida cepa bacteriana ou sua variante ativa está presente na semente em cerca de 105 CFU/semente a cerca de 107 CFU/semente, em cerca de 104 CFU/semente a cerca de 108 CFU/semente, em cerca de 104 CFU/semente a cerca de 105 CFU/semente, em cerca de 105 CFU/semente a cerca de 106
CFU/semente, em cerca de 106 CFU/semente a cerca de 107 CFU/semente, ou em cerca de 107 CFU/semente a cerca de 108 CFU/semente. Conforme aqui utilizado, "heterólogo(a)" em referência a um revestimento pode referir-se a um revestimento de semente compreendendo uma cepa bacteriana que não é encontrada na natureza na semente, ou, caso for encontrada na natureza na semente, é substancialmente modificada de sua forma nativa em composição e/ou concentração por intervenção humana deliberada. Em configurações particulares, "heterólogo(a)" em referência a um revestimento pode se referir a um revestimento de semente compreendendo uma cepa bacteriana suspensa em uma solução na qual a cepa bacteriana não é encontrada naturalmente. A solução de suspensão para revestimentos heterólogos pode ser natural ou não-natural e pode fornecer à cepa bacteriana propriedades que a cepa normalmente não possuiria. Por exemplo, a solução em suspensão de um revestimento heterólogo pode permitir a aderência da cepa bacteriana à semente de modo tal que a bactéria retenha a atividade durante o armazenamento e a germinação da semente.
[0071] Um revestimento de semente também pode compreender pelo menos um nutriente, pelo menos um biocida (por ex., herbicida ou pesticida). Vide, por exemplo, US App Pub. 20040336049, 20140173979 e 20150033811.
[0072] É fornecida, ainda, uma composição que compreende um caldo de células inteiras, sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que uma quantidade eficaz da composição melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta ou controla uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa doenças. A composição contém composto(s) eficaz(es), metabólito(s) e/ou proteína(s) que melhoram uma característica agronômica de interesse de uma planta ou controlam uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa doenças. O "sobrenadante" se refere ao líquido remanescente quando as células cultivadas em caldo são colhidas em outro líquido a partir de uma placa de ágar e são removidas por centrifugação, filtração, sedimentação ou por outros meios bem conhecidos na técnica. O sobrenadante também pode ser concentrado para produzir um filtrado. O filtrado pode compreender uma quantidade concentrada de um composto ou metabólito eficaz em comparação com a concentração do composto ou metabólito eficaz no sobrenadante ou no caldo de células inteiras. Em algumas configurações, o sobrenadante, filtrado ou extrato pode ser processado em um pó molhável e/ou uma formulação seca por pulverização. Em outras configurações, o sobrenadante, filtrado ou extrato pode ser concentrado (por ex., a água é removida), mas permanece em uma formulação líquida. A composição descrita acima pode ser aplicada sozinha ou em combinação com outra substância, em uma quantidade eficaz para controlar uma praga de plantas ou melhorar uma característica agronômica de interesse de uma planta.
[0073] As diversas formulações aqui divulgadas podem ser estáveis por pelo menos 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350 dias, 1,5 anos, 2 anos ou mais. Por estável pretende-se significar que a formulação retém bactérias viáveis e/ou retém uma quantidade eficaz de uma população bacteriana biologicamente ativa. A atividade biológica, conforme aqui utilizada, refere-se à capacidade da formulação de melhorar uma característica agronômica de interesse ou controlar uma praga de plantas. Em uma configuração, a formulação estável retém pelo menos cerca de 1%, cerca de 10%, cerca de 20%, cerca de 30% cerca de 40%, cerca de 50%, cerca de 60%, cerca de 70%, cerca de 80% ou cerca de 90% de CFU/grama na formulação em um determinado ponto de tempo de armazenamento em comparação com a CFU/grama produzida após a preparação imediata da formulação. Em outra configuração, a formulação estável retém pelo menos cerca de 30% a 80%, cerca de 50% a cerca de 80%, cerca de 60% a cerca de 70%, cerca de 70% a cerca de 80%, cerca de 40% a cerca de 50%, cerca de 50% a cerca de 60%, cerca de 60% a cerca de 70% da atividade biológica na formulação em um determinado ponto de tempo de armazenamento quando comparado com a atividade biológica encontrada na formulação imediatamente após a produção. Em outra configuração, a formulação estável em um determinado ponto de tempo de armazenamento retém pelo menos cerca de 30%, 45%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% da atividade biológica em comparação com a atividade biológica encontrada na formulação imediatamente após a produção. Em mais outra configuração, a formação estável retém qualquer combinação da viabilidade e atividade biológica observada acima.
[0074] As formulações compreendem preferencialmente entre 0,00000001% e 98% em peso de composto ativo ou, com particular preferência, entre 0,01% e 95% em peso de composto ativo, mais preferencialmente entre 0,5% e 90% em peso de composto ativo, com base no peso da formulação.
[0075] O teor de composto ativo das formas de aplicação preparadas a partir das formulações pode variar dentro de amplos intervalos. A concentração de composto ativo das formas de aplicação pode estar situada tipicamente entre 0,00000001% e 95% em peso de composto ativo, preferencialmente entre 0,00001% e 1% em peso, com base no peso da forma de aplicação. A aplicação ocorre de modo habitual, adaptada às formas de aplicação.
[0076] Além disso, a cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma e/ou uma composição derivada da mesma pode ser misturada com um biocida, como um fungicida, inseticida ou herbicida para aumentar sua atividade ou a atividade do produto químico ao qual foi adicionada. Em alguns casos, a combinação da cepa bacteriana (ou a composição derivada dela) e do produto químico pode mostrar atividade sinérgica, em que a mistura dos dois excede o que seria esperado por seu simples efeito aditivo. Em outras configurações, os agentes de biocontrole aqui descritos podem ser misturados com outros agentes de biocontrole.
[0077] Em configurações específicas, a cepa bacteriana, sua variante ativa e/ou uma composição derivada da mesma é compatível com produtos químicos agrícolas usados para melhorar o desempenho de biocidas. Esses produtos químicos agrícolas incluem protetores, surfactantes, adesivos, espalhadores, protetores de UV, além de auxiliares de suspensão e dispersão. Protetores são produtos químicos que melhoram ou modificam o desempenho dos herbicidas. Surfactantes, espalhadores e adesivos são produtos químicos incluídos em preparações de pulverização agrícola que alteram as propriedades mecânicas da pulverização (por exemplo, alterando a tensão da superfície ou melhorando a penetração da cutícula da folha). Os protetores UV melhoram o desempenho dos biocidas agrícolas ao reduzir a degradação pela luz ultravioleta. Os auxiliares de suspensão e dispersão melhoram o desempenho dos biocidas ao alterar seu comportamento em um tanque de pulverização. Nos casos em que a cepa bacteriana ou variante ativa não for compatível com um produto químico agrícola de interesse, se desejado, podem ser utilizados métodos para modificar a cepa bacteriana de modo a transmitir a compatibilidade de interesse. Esses métodos para produzir cepas bacterianas modificadas incluem técnicas de seleção e/ou técnicas de transformação.
[0078] A cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada pode ser usada para melhorar significativamente pelo menos uma característica agronômica de interesse (por ex., reduzir a suscetibilidade a pragas de plantas, como pragas de insetos e nematoides). A cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada pode ser usada com outros pesticidas para um programa de gerenciamento integrado de pragas eficaz. Em uma configuração, as populações de biocontrole podem ser misturadas com pesticidas conhecidos da maneira descrita em WO 94/10845, aqui incorporado por referência.
[0079] Exemplos não-limitantes de compostos e composições que podem ser adicionados à formulação incluem, mas se limitam a, Citrato de acetil tributila [Ácido cítrico, 2-(acetiloxi)- , éster de tributila]; Ágar; Cascas verdes de amêndoas; Cascas de amêndoas; Alfa-ciclodextrina; Aluminatosilicato; Silicato de alumínio e magnésio [Ácido silícico, sal de alumínio e magnésio]; Silicato de alumínio e potássio sódico [Ácido silícico, sal de alumínio e potássio sódico]; Silicato de alumínio; Silicato de alumínio e sódio [Ácido silícico, sal de alumínio e sódio]; Silicato de alumínio e sódio (1:1:1) [Ácido silícico (H4SiO4), sal de alumínio e sódio (1:1:1)]; Benzoato de amônio [Ácido benzoico, sal de amônio]; Estearato de amônio [Ácido octadecanoico, sal de amônio]; Amilopectina, ácido hidrolisado, 1-octenilbutanodioato; Amilopectina, 1- octadecenilbutanodioato de hidrogênio; Cola animal; Palmitato de ascorbil; Argila tipo atapulgita; Cera de abelha; Bentonita; Bentonita, sódica; beta-Ciclodextrina; Farinha de osso; Farelo; Migalhas de pão; (+)-Butil lactato; [Ácido lático, n- butil éster, (S)]; Butil lactato [Ácido lático, n-butil éster]; Butil estearato [Ácido octadecanoico, butil éster]; Xisto calcáreo; Calcita (Ca(Co3)); Acetato de cálcio; Acetato de cálcio monohidratado [Ácido acético, sal de cálcio, monohidratado]; Benzoato de cálcio [Ácido benzoico, sal de cálcio]; Carbonato de cálcio; Citrato de cálcio [Ácido cítrico, sal de cálcio]; Octanoato de cálcio; Silicato de óxido de cálcio (Ca3O(SiO4)); Silicato de cálcio [Ácido silícico, sal de cálcio]; Estearato de cálcio [Ácido octadecanoico, sal de cálcio]; Sulfato de cálcio; Sulfato de cálcio desidratado; Sulfato de cálcio hemihidratado; Alpiste; Carbono; Dióxido de carbono; Carboximetil celulose [Celulose, carboximetil éter]; Papelão; Cera de carnaúba; Goma de alfarroba [Goma de semente de alfarroba]; Carragena; Caseínas; Óleo de rícino; Óleo de rícino hidrogenado; Alimento para gatos; Celulose; Acetato de celulose; Celulose, mistura com carboximetil éter celulose, sal de sódio; Celulose, polpa; Celulose, regenerada; Queijo; Clorofila a; Clorofila b; Farelo cítrico; Ácido cítrico; Ácido cítrico, monohidratado; Pectina cítrica; Polpa cítrica; Cascas de vôngoles; Cacau; Farinha de casca de cacau; Cascas de cacau; Óleo de fígado de bacalhau; Borras de café; Biscoitos; Cortiça; Espigas de milho; Algodão; Farinha de semente de algodão; Trigo rachado; Ácido decanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol; Dextrinas; Digliceril monooleato [Ácido 9-octadecenoico, éster com 1,2,3-propanotriol]; Digliceril monoestearato [Ácido 9- octadecenoico, monoéster com xibis(propanodiol)]; Dilaurina [Ácido dodecanoico, diéster com 1,2,3-propanotriol]; Dipalmitina [Ácido hexadecanoico, diéster com 1,2,3- propanotriol]; Citrato dipotássico [Ácido cítrico, sal dipotássico]; Citrato dissódico [Ácido cítrico, sal dissódico]; Sulfato dissódico deca-hidratado; Terra diatomácea (menos de 1% de sílica cristalina); Ácido dodecanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol; Dolomita; Casca de abeto Douglas; Cascas de ovos; Ovos; (+)-Etil lactato [Ácido lático, éster etílico, (S)]; Etil lactato [Ácido lático, éster etílico]; Feldspato; Farinha de peixe; Óleo de peixe (não conforme com 40 CFR 180,950); Terra de Fuller; Ácido fumárico; gama-Ciclodextrina; Gelatinas; Goma gelana; Cola (como colágeno animal despolimizado); Glicerina [1,2,3- Propanotriol]; Monooleato de glicerina [Ácido 9-octadecenoico (Z)-, éster 2,3-dihidroxipropílico]; Dicaprilato de glicerila [Ácido octanoico, diéster com 1,2,3-propanotriol]; Dimiristato de glicerila [Ácido tetradecanoico, diéster com 1,2,3- propanotriol]; Dioleato de glicerila [Ácido 9-octadecenoico (9Z)-, diéster com 1,2,3-propanotriol]; Diestearato de glicerila; Monomiristato de glicerila [Ácido tetradecanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol]; Monooctanoato de glicerila [Ácido octanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol]; Monooleato de glicerila [Ácido 9-octadecenoico (9Z)-, monoéster com 1,2,3-propanotriol]; Monoestearato de glicerila [Ácido octadecanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol]; Estearato de glicerila [Ácido octadecanoico, éster com 1,2,3-
propanotriol]; Granito; Grafite; Goma guar; Goma arábica; Goma tragacanto; Gipsita; Hematita (Fe2O3); Ácido húmico; Óleo de algodão hidrogenado; Óleo de colza hidrogenado; Óleo de soja hidrogenado; Hidroxietil celulose [Celulose, 2-hidroxietil éter]; Hidroxipropil celulose [Celulose, 2-hidroxipropil éter]; Hidroxipropil metil celulose [Celulose, 2-hidroxipropil éter]; Óxido de magnésio de ferro (Fe2MgO4); Óxido de ferro (Fe2O3); Óxido de ferro (Fe2O3); Óxido de ferro (Fe3O4); Óxido de ferro (FeO); Álcool isopropílico [2-Propanol]; Miristato isopropílico; Caulim; Lactose; Lactose monohidratada; Lanolina; Borracha látex; Ácido láurico; Lecitinas; Extrato de alcaçuz; Cal (químico) dolomítico; Calcário; Óleo de linhaça; Carbonato de magnésio [Ácido carbônico, sal de magnésio (1:1); Benzoato de magnésio; Óxido de magnésio; Silicato de óxido de magnésio (Mg3O(Si2O5)2), monohidratado; Silicato de magnésio; Silicato de magnésio hidratado; Óxido de silício de magnésio (Mg2Si3O8); Estearato de magnésio [Ácido octadecanoico, sal de magnésio]; Sulfato de magnésio; Sulfato de magnésio heptahidratado; Ácido málico; Extrato de malte; Sabor de malte; Maltodextrina; Metilcelulose [Celulose, éter metílico]; Mica; Minerais do grupo mica; Leite; Semente de painço N/A; Óleo mineral (U.S.P.); 1-Monolaurina [Ácido dodecanoico, éster 2,3- dihidroxipropílico]; 1-Monomiristina [Ácido tetradecanoico, éster 2,3-dihidroxipropílico]; Monomiristina [Ácido decanoico, diéster com 1,2,3-propanotriol]; Monopalmitina [Ácido hexadecanoico, monoéster com 1,2,3-propanotriol]; Citrato monopotássico [Ácido cítrico, sal monopotássico]; Citrato monossódico [Ácido cítrico, sal monossódico]; Montmorillonita; Ácido mirístico; Sienito de nefelina; Nitrogênio; Carne de nútria; Nylon; Ácido octanoico, sal de potássio; Ácido octanoico, sal de sódio; Óleos, amêndoa; Óleos, trigo; Ácido oleico; Cascas de ostras; Óleo de palma; óleo de palma, hidrogenado; Ácido palmítico [Ácido hexadecanoico]; Cera de parafina; Manteiga de amendoim; Casca de amendoim; Amendoim; Musgo de turfa; Pectina; Perlite; Perlite, expandida; Gesso de paris; Polietileno; Oleato de poliglicerila; Estearato de poliglicerila; Acetato de potássio [Ácido acético, sal de potássio]; Silicato de alumínio potássico, anidro; Benzoato de potássio [Ácido benzoico, sal de potássio]; Bicarbonato de potássio [Ácido carbônico, sal monopotássico]; Cloreto de potássio; Citrato de potássio [Ácido cítrico, sal de potássio]; Humato de potássio [Ácidos húmicos, sais de potássio]; Miristato de potássio [Ácido tetradecanoico, sal de potássio]; Oleato de potássio [Ácido 9-octadecenoico (9Z)-, sal de potássio; Ricinoleato de potássio [Ácido 9-octadecenoico, 12- hidroxi-, sal monopotássico,(9Z,12R)-]; Sorbato de potássio [Ácido sórbico, sal de potássio]; Estearato de potássio [Ácido octadecanoico, sal de potássio]; Sulfato de potássio; Sulfato de potássio [Ácido sulfúrico, sal monopotássico]; Carbonato de 1,2-propileno [1,3-Dioxolan-2-ona, 4-metil-]; Pedra-pomes; Cor de repolho vermelho (expressa a partir de cabeças de repolho vermelho comestíveis através de um processo de prensagem usando apenas água acidificada); Lascas de cedro vermelho; Farinha de segunda escolha; Borracha; Serradura; Xisto; Sílica, amorfa, Fumê (sem cristalino); Sílica, amorfa, precipitada e gel; Sílica (sem cristalino); Sílica gel; Sílica gel, precipitada, sem cristalino; Sílica, hidratada; Sílica, vítrea; Ácido silícico (H2SiO3), sal de magnésio (1:1); Sabão (Os sais de sódio ou potássio solúveis em água dos ácidos graxos produzidos pela saponificação de gorduras e óleos ou pela neutralização do ácido graxo); Quilaia [saponina da quilaia]; Pedra-sabão; Acetato de sódio [Ácido acético, sal de sódio]; Alginato de sódio; Benzoato de sódio [Ácido benzoico, sal de sódio]; Bicarbonato de sódio; Carboximetilcelulose de sódio [Celulose, éter carboximetil, sal de sódio]; Cloreto de sódio; Citrato de sódio; Humato de sódio [Ácidos húmicos, sais de sódio]; Oleato de sódio; Ricinoleato de sódio [Ácido 9-octadecenoico, 12- hidroxi-, sal monossódico, (9Z,12R)-]; Estearato de sódio [Ácido octadecanoico, sal de sódio]; Sulfato de sódio; Sorbitol [D-glucitol]; Proteína de soja; Lecitinas de soja [Lecitinas, soja]; Cascas de soja; Farelo de soja; Soja, farinha; Ácido esteárico [Ácido octadecanoico]; Enxofre; Xaropes, amido hidrolisado, hidrogenado; Monooleato de tetraglicerila [Ácido 9-octadecenoico (9Z) -, monoéster com tetraglicerol]; Citrato tricálcico [Ácido cítrico, sal de cálcio (2:3)]; Citrato trietílico [Ácido cítrico, éster trietílico]; Citrato tripotássico [Ácido cítrico, sal tripotássico]; Citrato tripotássico monohidratado [Ácido cítrico, sal tripotássico, monohidratado]; Citrato trissódico [Ácido cítrico, sal trissódico]; Citrato trissódico desidratado [Ácido cítrico, sal trissódico, desidratado]; Citrato trissódico pentahidratado [Ácido cítrico, sal trissódico, pentahidratado]; Azul ultramarino [C.I.
Pigmento Azul 29]; Ureia; Vaniliana; Vermiculita; Vinagre (máximo 8% de ácido acético em solução); Vitamina C [Ácido L-ascórbico]; Vitamina; Farinha de nozes; Cascas de nozes; Trigo; Farinha de trigo; Óleo de germe de trigo; Soro de leite; Óleo mineral branco (petróleo); Óleo de wintergreen; Wollastonita (Ca(SiO3)); Lã; Goma xantana; Levedura; Zeólitos (excluindo erionita (CAS Reg.
No. 66733-21-9)); Zeólitos, NaA; Óxido de ferro zinco; Óxido de zinco (ZnO); e Estearato de zinco [Ácido octadecanoico, sal de zinco]. IV. Métodos de uso
[0080] As cepas bacterianas ou cepas bacterianas modificadas, suas variantes ativas e/ou composições delas derivadas fornecidas neste documento podem ser utilizadas com qualquer espécie de planta para controlar uma praga de plantas ou melhorar uma característica agronômica de interesse. As características agronômicas de interesse incluem qualquer característica que melhore a saúde da planta ou seu valor comercial. Exemplos não-limitantes de características agronômicas de interesse, incluindo aumento da biomassa, aumento da tolerância à seca, tolerância térmica, tolerância a herbicidas, resistência à seca, resistência a pragas (por ex., resistência a nematoides, resistência a insetos, resistência a fungos, resistência a vírus, resistência a bactérias), macho esterilidade, tolerância ao frio, tolerância ao sal, maior rendimento, maior eficiência no uso de nutrientes, maior eficiência no uso de nitrogênio, maior tolerância ao estresse de nitrogênio, maior teor de carboidratos fermentáveis, menor teor de lignina, maior teor de antioxidantes, maior eficiência no uso de água, maior vigor, maior eficiência na germinação, floração antecipada ou maior, maior biomassa, alteração da razão de raízes da biomassa, maior retenção de água no solo, ou uma combinação das anteriores. Em outros casos, a característica agronômica de interesse inclui uma alteração no teor de óleo, alteração no teor proteico, alteração na composição dos carboidratos das sementes, alteração na composição dos óleos das sementes, e alteração na composição proteica das sementes, tolerância química,
tolerância ao frio, senescência retardada, resistência a doenças, tolerância à seca, peso da espiga, melhoria no crescimento, otimização da saúde, tolerância ao calor, tolerância a herbicidas, resistência a herbívoros, melhor fixação de nitrogênio, melhor utilização de nitrogênio, melhor arquitetura da raiz, maior eficiência no uso de água, maior biomassa, maior comprimento de raiz, maior peso das sementes, maior comprimento dos brotos, maior rendimento, maior rendimento sob condições de água limitadas, massa do caroço, teor de umidade do caroço, tolerância ao metal, número de espigas, número de caroços por espiga, número de vagens, otimização da nutrição, melhoria da capacidade fotossintética, tolerância à salinidade, ficar verde, melhoria do vigor, maior peso seco de sementes maduras, maior peso fresco de sementes maduras, maior número de sementes maduras por planta, maior teor de clorofila, maior número de vagens por planta, maior comprimento de vagens por planta, menor número de folhas murchas por planta, menor número de folhas severamente murchas por planta e maior número de folhas não-murchas por planta, uma modulação detectável no nível de um metabólito, uma modulação detectável no nível de um transcrito ou uma modulação detectável no proteoma em relação a uma planta de referência.
[0081] Em uma configuração não-limitante, a cepa bacteriana, sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida pode ser utilizada com qualquer espécie de planta suscetível a uma praga de plantas ou em risco de desenvolver uma doença de plantas ou dano causado por uma praga de plantas. Por "resistência a pragas" entende-se que a cepa bacteriana, sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida pode inibir (inibir o crescimento,
alimentação, fecundidade ou viabilidade), suprimir (suprimir o crescimento, alimentação, fecundidade ou viabilidade), reduzir (reduzir a infestação de pragas, reduzir as atividades de alimentação de pragas em uma planta específica) ou matar (causar a morbidade, mortalidade ou fecundidade reduzida de) uma praga, como uma praga de inseto. Por “uma planta suscetível a uma praga” entende-se que uma praga é capaz de infectar ou danificar a planta. Por exemplo, uma planta suscetível a uma praga pode ser suscetível a danos causados por uma praga de fungo, inseto ou nematoide, conforme divulgado em outra parte deste documento.
[0082] Exemplos de espécies de plantas de interesse incluem, mas não se limitam a, milho (Zea mays), Brassica sp. (por ex. , B. napus, B. rapa, B. juncea), particularmente as espécies de Brassica úteis como fontes de óleo de sementes, alfafa (Medicago sativa), arroz (Oryza sativa), centeio (Secale cereale), sorgo (Sorghum bicolor, Sorghum vulgare), milheto (por ex., milheto pérola (Pennisetum glaucum), painço (Panicum miliaceum), milheto foxtail (Setaria italica), capim pé-de-galinha (Eleusine coracana)), girassol (Helianthus annuus), cártamo (Carthamus tinctorius), trigo (Triticum aestivum), soja (Glycine max), tabaco (Nicotiana tabacum), batata (Solanum tuberosum), amendoim (Arachis hypogaea), algodão (Gossypium barbadense, Gossypium hirsutum), batata- doce (Ipomoea batatus), mandioca (Manihot esculenta), café (Coffea spp.), coco (Cocos nucifera), abacaxi (Ananas comosus), árvores cítricas (Citrus spp.), cacau (Theobroma cacao), chá (Camellia sinensis), banana (Musa spp.), abacate (Persea americana), figo (Ficus casica), goiaba (Psidium guajava), manga (Mangifera indica), azeitona (Olea europaea),
mamão (Carica papaya), uva (Vitus spp.), morango (Fragaria x ananassa), cereja (Prunus spp.), maçã (Malus domestica), laranja (Citrus × sinensis) caju (Anacardiumoccidentale), macadâmia (Macadamia integrifolia), amêndoa (Prunus amygdalus), beterraba (Beta vulgaris), cana-de-açúcar (Saccharum spp.), aveia, cevada, vegetais, plantas ornamentais e coníferas.
[0083] Os vegetais incluem tomate (Lycopersicon esculentum), alface (por exemplo, Lactuca sativa), feijão comum (Phaseolus vulgaris), feijão-de-lima (Phaseolus limensis), ervilha (Lathyrus spp.) e membros do gênero Cucumis , como pepino (C. sativus), melão cantaloupe (C. cantalupensis) e melão comum (C. melo). As plantas ornamentais incluem azaleia (Rhododendron spp.), hortênsia (Macrophylla hydrangea), hibisco (Hibiscus rosasanensis), rosa (Rosa spp.), tulipa (Tulipa spp.), narciso (Narcissus spp.), petúnia (Petunia hybrida), cravo (Dianthus caryophyllus), poinsétia (Euphorbia pulcherrima) e crisântemo.
[0084] As coníferas que podem ser usadas na prática da presente invenção incluem, por exemplo, pinheiros como o pinheiro Loblolly (Pinus taeda), pinheiro americano (Pinus elliotii), pinheiro ponderosa (Pinus ponderosa), pinheiro contorta (Pinus contorta) e pinheiro de Monterrey (Pinus radiata); abeto de Douglas (Pseudotsuga menziesii); cicuta ocidental (Tsuga canadensis); abeto Sitka (Picea glauca); sequoia vermelha (Sequoia sempervirens); abetos verdadeiros, como o abeto prateado (Abies amabilis) e o abeto balsâmico (Abies balsamea); e cedros como o cedro vermelho ocidental (Thuja plicata) e o cedro amarelo do Alasca (Chamaecyparis nootkatensis). Em configurações específicas, as plantas da presente invenção são plantas de cultivo (por exemplo, milho, alfafa, girassol, Brassica, soja, algodão, cártamo, amendoim, sorgo, trigo, milheto, tabaco, etc.). Em outras configurações, as plantas de milho e soja são ideais, ao passo que em outras configurações diferentes as plantas de milho são ideais.
[0085] Outras plantas de interesse incluem plantas de grãos que fornecem sementes de interesse, plantas oleaginosas e plantas leguminosas. As sementes de interesse incluem sementes de grãos, como milho, trigo, cevada, arroz, sorgo, centeio, etc. As plantas oleaginosas incluem algodão, soja, cártamo, girassol, Brassica, milho, alfafa, palma, coco, etc. As plantas leguminosas incluem grãos, ervilha e legumes secos. Os grãos incluem guar, alfarroba, feno-grego, soja, feijão comum, feijão-frade, feijão-da-china, feijão-de-lima, fava, lentilha, grão-de-bico, etc. A. Pragas de plantas não-limitantes
[0086] Em configurações específicas, as cepas bacterianas aqui fornecidas são aquelas que têm como alvo uma ou mais pragas de plantas. O termo "pragas" inclui, mas não se limita a, insetos, fungos, bactérias, nematoides, vírus ou viroides, patógenos protozoários, entre outros.
[0087] Em configurações específicas, as cepas bacterianas aqui fornecidas são aquelas que têm como alvo um ou mais insetos ou pragas de insetos. O termo "insetos" ou "pragas de insetos", conforme aqui utilizado, se refere a insetos e outras pragas semelhantes. O termo "inseto" abrange ovos, larvas, formas juvenis e maduras de insetos. Os insetos podem ser direcionados em qualquer estágio de desenvolvimento. Por exemplo, os insetos podem ser direcionados após o primeiro ínstar, durante o segundo ínstar, terceiro ínstar, quarto ínstar, quinto ínstar ou qualquer outro estágio de desenvolvimento ou de crescimento adulto. Conforme utilizado neste documento, o termo "ínstar" é usado para denotar o estágio de desenvolvimento das formas larval ou ninfal de insetos. As pragas de insetos incluem insetos selecionados das ordens Coleóptera, Lepidoptera, Hemiptera, Diptera, Hymenoptera, Lepidoptera, Mallophaga, Homoptera, Hemiptera, Orthroptera, Thysanoptera, Trombidiformes, Dermaptera, Isoptera, Anoplura, Siphonaptera, Trichoptera, etc.
[0088] As pragas de insetos da ordem Coleóptera incluem, mas não se limitam a, Agriotes spp., Anthonomus spp., Atomaria linearis, Chaetocnema tibialis, Cosmopolites spp., Curculio spp., Dermestes spp., Epilachna spp., Eremnus spp., Leptinotarsa decem , Lissorhoptrus spp., Melolontha spp., Orycaephilus spp., Otiorhynchus spp., Phlyctinus spp., Popillia spp., Psylliodes spp., Rhizopertha spp. , Scarabeidae, Sitophilus spp., Sitotroga spp., Tenebrolium spp., Tenebrolium spp. e Trogoderma spp. Em configurações específicas, os insetos Coleóptera incluem, mas não se limitam a, carunchos das famílias Anthribidae, Bruchidae e Curculionidae (por ex., caruncho da batata-doce (Cylas formicarius (Fabricius)), bicudo do algodoeiro (Anthonomus grandis Boheman), caruncho da água do arroz (Lissorhoptrus oryzophilus Kuschel ), caruncho do arroz (Sitophilus oryzae L.)); besouros-pulga, besouros do pepino, lagartas da raiz, besouros das folhas, besouros da batata e larvas minadoras da família Chrysomelidae (por ex., besouro da batata do Colorado (Leptinotarsa decemlineata Say), Diabrotica spp. incluindo lagarta da raiz do milho ocidental (Diabrotica virgifera virgifera LeConte)); escaravelhos e outros besouros da família
Scaribaeidae (por ex., besouro japonês (Popillia japonica Newman) e escaravelho europeu (Rhizotrogus majalis Razoumowsky )); lagartas da família Elateridae e besouros da casca da família Scolytidae.
[0089] Conforme aqui divulgado, as pragas de insetos incluem pragas de Coleóptera do complexo de lagarta da raiz do milho: lagarta da raiz do milho ocidental, Diabrotica virgifera virgifera; lagarta da raiz do milho do norte, D. barberi; lagarta da raiz do milho do sul ou besouro malhado do pepino, Diabrotica undecimpunctata howardi; e a lagarta da raiz do milho mexicana, D. virgifera zeae. Em configurações específicas, a praga de inseto é a lagarta da raiz do milho ocidental, Diabrotica virgifera virgifera.
[0090] As pragas de insetos que podem ser controladas com as composições e métodos aqui divulgados também incluem insetos da ordem Lepidoptera, por ex.. Achoroia grisella, Acleris gloverana, Acleris variana, Adoxophyes orana, Agrotis ipsilon, Alabama argillacea, Alsophila pometaria, Amyelois transitella, Anagasta kuehniella, Anarsia lineatella, Anisota senatoria, Antheraea pernyi, Anticarsia gemmatalis, Archips spp., Argyrotaenia spp., Athetis mindara, Bombyx mori, Bucculatrix thurberiella, Cadra cautella, Choristoneura sp., Cochylls hospes, Colias eurytheme, Corcyra cephalonica, Cydia latiferreanus, Cydia pomonella, Datana integerrima, Dendrolimus sibericus, Desmiafeneralis spp., Diaphania hyalinata, Diaphania nitidalis, Diatraea grandiosella, Diatraea saccharalis, Ennomos subsignaria, Eoreuma loftini, Esphestia elutella, Erannis tilaria, Estigmene acrea, Eulia salubricola, Eupocoellia ambiguella, Eupoecilia ambiguella, Euproctis chrysorrhoea, Euxoa messoria, Galleria mellonella,
Grapholita molesta, Harrisina americana, Helicoverpa subflexa, Helicoverpa zea, Heliothis virescens, Hemileuca oliviae, Homoeosoma electellum, Hyphantia cunea, Keiferia lycopersicella, Lambdina fiscellaria fiscellaria, Lambdina fiscellaria lugubrosa, Leucoma salicis, Lobesia botrana, Loxostege sticticalis, Lymantria dispar, Macalla thyrisalis, Malacosoma spp., Mamestra brassicae, Mamestra configurata, Manduca quinquemaculata, Manduca sexta, Maruca testulalis, Melanchra picta, Operophtera brumata, Orgyia spp., Ostrinia nubilalis, Paleacrita vernata, Papilio cresphontes, Pectinophora gossypiella, Phryganidia californica, Phyllonorycter blancardella, Pieris napi, Pieris rapae, Plathypena scabra, Platynota flouendana, Platynota stultana, Platyptilia carduidactyla, Plodia interpunctella, Plutella xylostella, Pontia protodice, Pseudaletia unipuncta, Pseudoplasia includens, Sabulodes aegrotata, Schizura concinna, Sitotroga cerealella, Spilonta ocellana, Spodoptera spp., Thaurnstopoea pityocampa, Tinsola bisselliella, Trichoplusia hi, Tuta absoluta, Udea rubigalis, Xylomyges curiails e Yponomeuta padella.
[0091] Os métodos e composições aqui fornecidos também podem ser usados contra pragas de insetos da ordem Hemiptera, incluindo, mas não se limitando a, Lygus spp., incluindo Lygus spp. incluindo Lygus hesperus, Lygus lineolaris, Lygus pratensis, Lygus rugulipennis e Lygus pabulinus, Calocoris norvegicus, Orthops compestris, Plesiocoris rugicollis, Cyrtopeltis modestus, Cyrtopeltis notatus, Spanagonicus albofasciatus, Diaphnocoris chlorinonis, Labopidicola allii, Pseudatomoscelis seriatus, Adelphocoris rapidus, Poecilocapsus lineatus, Blissus leucopterus, Nysius spp. incluindo Nysius ericae e Nysius raphanus, Nezara viridula, Acrosternum hilare, Euschistus spp. incluindo Euschistus servus e Euschistus heros, Dichelops spp. incluindo Dichelops melacantus e Dichelops furcatus, Halyomorpha halys, Lipaphis erysimi, Aphis gossypii, Macrosiphum avenae, Myzus persicae, Acyrthosiphon pisum, Aphidoidea spp, Eurygaster spp., Coreidae spp., Pyrrhocoridae spp., Blostomatidae spp., Reduviidae spp., Cimicidae spp. Aleurocanthus woglumi, Aleyrodes proletella, Bemisia spp. incluindo Bemisia argentifolii e Bemisia tabaci, e Trialeurodes vaporariorum.
[0092] Os métodos e composições aqui fornecidos também podem ser usados contra pragas de insetos da ordem Thysenoptera, incluindo, mas não se limitando a, espécies de tripes, incluindo Frankliniella spp., por exemplo tripes das flores ocidentais (Frankliniella occidentalis (Pergande)); Thrips spp., por exemplo Thrips tabaci; Scirtothrips spp., por exemplo Scirtothrips dorsalis; Klambothrips spp., por exemplo Klambothrips myopori; Echinothrips spp., por exemplo Echinothrips americanus; e Megalurothrips spp., por exemplo Megalurothrips usitatus.
[0093] Os métodos e composições aqui fornecidos também podem ser usados contra pragas de insetos da ordem Trombidiformes, incluindo, mas não se limitando a, ácaros que se alimentam de plantas, incluindo ácaro-aranha de seis manchas (Eutetranychus sexmaculatus), ácaro texano (Eutetranychus banksi), ácaro purpúreo (Panonychus citri), ácaro vermelho europeu (Panonychus ulmi), ácaro McDaniel (Tetranychus mcdanieli), ácaro-aranha do Pacífico (Tetranychus pacificus), ácaro-aranha do morango (Tetranychus urticae), ácaro-aranha do abeto (Oligonychus ununguis), ácaro aranha Sugi (Oligonychus nondonensisi) e Tetranychus evansi.
[0094] As pragas de insetos de interesse também incluem Araecerus fasciculatus, caruncho do café; Acanthoscelides obtectus, caruncho do feijão; Bruchus rufmanus, caruncho da fava; Bruchus pisorum, caruncho da ervilha; Zabrotes subfasciatus, caruncho do feijão mexicano; Diabrotica balteata, besouro do pepino listrado; Cerotoma trifurcata, besouro das folhas de feijão; Diabrotica virgifera, lagarta da raiz do milho mexicana; Epitrix cucumeris, besouro-pulga da batata; Chaetocnema confinis, besouro-pulga da batata-doce; Hypera postica, caruncho da alfafa; Anthonomus quadrigibbus, gorgulho da maçã; Sternechus paludatus, caruncho da haste do feijão; Hypera brunnipennis, caruncho da alfafa egípcio; Sitophilus granaries, caruncho da tulha; Craponius inaequalis, gorgulho da uva; Sitophilus zeamais, caruncho do milho; Conotrachelus nenuphar, gorgulho da ameixa; Euscepes postfaciatus, caruncho da batata-doce das Índias Ocidentais; Maladera castanea, besouro de jardim asiático; Rhizotrogus majalis, escaravelho europeu; Macrodactylus subspinosus, escaravelho da rosa; Tribolium confusum, besouro da farinha confuso; Tenebrio obscurus, verme da farinha escuro; Tribolium castaneum, besouro da farinha vermelho; Tenebrio molitor, verme da farinha amarelo, e a família Drosophilidae, incluindo Drosophila suzukii, drosófila de asa manchada.
[0095] As pragas de insetos também incluem insetos selecionados das ordens Diptera, Hymenoptera, Mallophaga, Homoptera, Hemiptera, Orthroptera, Thysanoptera, Dermaptera, Isoptera, Anoplura, Siphonaptera e Trichoptera. As pragas de insetos da presente invenção também podem incluir aquelas da ordem Acari, incluindo, mas não se limitando a, ácaros e carrapatos. Em configurações específicas, as pragas de coleópteros incluem lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou caruncho da batata-doce.
[0096] As pragas de insetos que podem ser controladas com as composições e métodos da invenção para os principais cultivos incluem, mas não se limitam a: Milho: Ostrinia nubilalis, broca europeia do milho; Agrotis ipsilon, lagarta negra; Helicoverpa zeae, lagarta da espiga; Spodoptera frugiperda, lagarta do cartucho do milho; Diatraea grandiosella, broca do milho do sudoeste; Elasmopalpus lignosellus, lagarta-elasmo; Diatraea saccharalis, broca da cana-de-açúcar; lagarta da raiz do milho ocidental, por ex., Diabrotica virgifera virgifera; lagarta da raiz do milho do norte, por ex., Diabrotica longicornis barberi; lagarta da raiz do milho do sul, por ex., Diabrotica undecimpunctata howardi; Melanotus spp., pirilampos; Cyclocephala borealis, escaravelho mascarado do norte (larva branca); Cyclocephala immaculata, escaravelho mascarado do sul (larva branca); Popillia japonica, besouro japonês; Chaetocnema pulicaria, besouro da pulga do milho; Sphenophorus maidis, percevejo do milho; Rhopalosiphum maidis, pulgão da folha do milho; Anuraphis maidiradicis, pulgão da raiz do milho; Myzus persicae, pulgão verde do pêssego; Nezara viridula, maria- fedida; Blissus leucopterus leucopterus, percevejo das gramíneas; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto de perna vermelha; Melanoplus sanguinipes, gafanhoto migratório; Hylemya platura, verme da semente do milho; Agromyza parvicornis, larva da mancha do milho; Anaphothrips obscrurus, tripes da grama; Solenopsis milesta, formiga-ladra; Tetranychus urticae, ácaro-aranha de duas manchas; Sorgo:
Chilo partellus, broca do sorgo; Spodoptera frugiperda, lagarta do cartucho; Helicoverpa zea, lagarta da espiga; Elasmopalpus lignosellus, lagarta-elasmo; Feltia subterranea, lagarta-rosca; Phyllophaga crinita, larva branca; Eleodes, Conoderus e Aeolus spp., pirilampos; Oulema melanopus, larma- lesma; Chaetocnema pulicaria, besouro da folha do milho; Sphenophorus maidis, percevejo do milho; Rhopalosiphum maidis; pulgão da folha do milho; Sipha flava, pulgão amarelo da cana- de-açúcar; percevejo das gramíneas, por ex., Blissus leucopterus leucopterus; Contarinia sorghicola, mosca do sorgo; Tetranychus cinnabarinus, ácaro-aranha carmim; Tetranychus urticae, ácaro-aranha de duas manchas; Trigo: Pseudaletia unipunctata, lagarta do cartucho; Spodoptera frugiperda, lagarta do cartucho do milho; Elasmopalpus lignosellus, lagarta-elasmo; Agrotis orthogonia, agrotis ocidental; Elasmopalpus lignosellus, lagarta-elasmo; Oulema melanopus, larva-lesma; Hypera punctata, caruncho da folha do trevo; lagarta da raiz do milho do sul, por ex., Diabrotica undecimpunctata howardi; pulgão russo do trigo; Schizaphis graminum, pulgão verde dos cereais; Macrosiphum avenae, pulgão da espiga do trigo; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto de perna vermelha; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial; Melanoplus sanguinipes, gafanhoto migratório; Mayetiola destructor, mosca-de-hesse; Sitodiplosis mosellana, verme do trigo; Meromyza americana, verme do talo do trigo; Hylemya coarctata, mosca do bulbo do trigo; Frankliniella fusca, tripes do fumo; Cephus cinctus, mosca do talo do trigo; Aceria tulipae, eriofídeo do alho; Girassol: Cylindrocupturus adspersus, caruncho do talo do girassol; Smicronyx fulus, caruncho da semente do girassol vermelho; Smicronyx sordidus,
caruncho da semente do girassol cinza; Suleima helianthana, traça do botão do girassol; Homoeosoma electellum, traça do girassol; Zygogramma exclamationis, besouro do girassol; Bothyrus gibbosus, besouro da cenoura; Neolasioptera murtfeldtiana, mosca da semente do girassol; Algodão: Heliothis virescens, lagarta do fumo; Helicoverpa zea, lagarta do algodão; Spodoptera exigua, lagarta do cartucho da beterraba; Pectinophora gossypiella, lagarta rosada; bicudo do algodoeiro, por ex., Anthonomus grandis; Aphis gossypii, pulgão do algodoeiro; Pseudatomoscelis seriatus, pulga saltadora do algodoeiro; Trialeurodes abutilonea, mosca branca de asa listrada; Lygus lineolaris, percevejo opaco da planta; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto de perna vermelha; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial; Thrips tabaci, tripes da cebola; Frankliniella fusca, tripes do fumo; Tetranychus cinnabarinus, ácaro-aranha carmim; Tetranychus urticae, ácaro-aranha de duas manchas; Arroz: Diatraea saccharalis, broca da cana-de-açúcar; Spodoptera frugiperda, lagarta do cartucho; Helicoverpa zea, lagarta da espiga; Colaspis brunnea, vaquinha; Lissorhoptrus oryzophilus, caruncho da água do arroz; Sitophilus oryzae, caruncho do arroz; Nephotettix nigropictus, cigarrinha do arroz; percevejo das gramíneas, por ex., Blissus leucopterus leucopterus; Acrosternum hilare, percevejo-acrosterno; Soja: Pseudoplusia includens, lagarta falsa-medideira; Anticarsia gemmatalis, lagarta da soja; Plathypena scabra, lagarta verde do trevo; Ostrinia nubilalis, broca europeia do milho; Agrotis ipsilon, lagarta negra; Spodoptera exigua, lagarta do cartucho da beterraba; Heliothis virescens, lagarta do fumo; Helicoverpa zea, lagarta do algodão; Epilachna varivestis, besouro mexicano do feijão; Myzus persicae, pulgão verde do pêssego; Empoasca fabae, cigarrinha da batata; Acrosternum hilare, percevejo-acrosterno; Melanoplus femurrubrum, gafanhoto de perna vermelha; Melanoplus differentialis, gafanhoto diferencial; Hylemya platura, verme da semente do milho; Sericothrips variabilis, tripes da soja; Thrips tabaci, tripes da cebola; Tetranychus turkestani, ácaro-aranha do morango; Tetranychus urticae, ácaro-aranha de duas manchas; Cevada: Ostrinia nubilalis, broca europeia do milho; Agrotis ipsilon, lagarta negra; Schizaphis graminum, pulgão verde dos cereais; percevejo das gramíneas, por ex., Blissus leucopterus leucopterus; Acrosternum hilare, percevejo-acrosterno; Euschistus servus, percevejo marrom norte-americano; Jylemya platura, verme da semente do milho; Mayetiola destructor, mosca-de-hesse; Petrobia latens, ácaro marrom do trigo; Colza: Vrevicoryne brassicae, pulgão da couve; Phyllotreta cruciferae, besouro-pulga; Phyllotreta striolata, besouro- pulga listrado; Phyllotreta nemorum, besouro-pulga listrado do nabo; Meligethes aeneus, besouro da colza; e os besouros do pólen Meligethes rufimanus, Meligethes nigrescens, Meligethes canadianus e Meligethes viridescens; Batata: Leptinotarsa decemlineata, besouro da batata do Colorado; Batata-doce: Spartocera batatas, inseto gigante da batata-doce; Charidotella (=Metriona) bicolor, besouro tartaruga dourada; Cylas formicarius, caruncho da batata-doce; Cylas puncticollis, caruncho da batata-doce; Cylas brunneus, caruncho da batata-doce Naupactus (=Graphognathus) spp., besouros franjados de branco; Conoderus rudis, pirilampo; Conoderus scissus, pirilampo do amendoim; Blosyrus spp., caruncho rugoso da batata-doce; Acraea acerata, borboleta da batata-doce; Agrius convolvuli, lagarta da batata-doce; Spodoptera exigua, lagarta do cartucho; Spodoptera eridania, lagarta do cartucho; Synanthedon spp., traça de asa clara; Capilaridade e ácaros eriófitos; Euscepes postfasciatus, caruncho da batata-doce das Índias Ocidentais; Peloropus batatae, caruncho Peloropus; Omphisia anastomasalis, broca da haste da batata-doce, além de larvas brancas de várias espécies de besouros escarabeídeos.
[0097] Em algumas configurações, as composições e métodos aqui fornecidos controlam pragas de plantas de nematoides. Os nematoides incluem nematoides parasitas, como nematoides das galhas, do cisto e de lesão, incluindo os da espécie Meloidogyne, como Nematoide das galhas do sul (Meloidogyne incognita), Nematoide das galhas javanês (Meloidogyne javanica), Nematoide das galhas do norte (Meloidogyne hapla) e Nematoide das galhas do amendoim (Meloidogyne arenaria); nematoides da espécie Ditylenchus como Ditylenchus destructor e Ditylenchus dipsaci; nematoides da espécie Pratylenchus como o Nematoide de lesão radicular da espiga (Pratylenchus penetrans), Nematoide de lesão radicular do crisântemo (Pratylenchus fallax), Pratylenchus coffeae, Pratylenchus loosi e o Nematoide de lesão radicular da noz (Pratylenchus vulnus); Nematoides da espécie Globodera como Globodera rostochiensis e Globodera pallida; Nematoides da espécie Heterodera como Heterodera glycines (nematoide do cisto da soja); Heterodera schachtii (nematoide do cisto da beterraba); Heterodera avenae (nematoide do cisto do cereal); Nematoides da espécie Aphelenchoides como o Nematoide da ponta branca do arroz (Aphelenchoides besseyi), Aphelenchoides ritzemabosi e Aphelenchoides fragariae; Nematoides da espécie Aphelenchus como Aphelenchus avenae; Nematoides da espécie Radopholus, como o Nematoide cavernícola (Radopholus similis); Nematoides da espécie Tylenchulus como Tylenchulus semipenetrans; Nematoides da espécie Rotylenchulus como Rotylenchulus reniformis; Nematoides que vivem em árvores, como Bursaphelenchus xylophilus e o Nematoide de anel vermelho (Bursaphelenchus cocophilus) etc. e Globodera spp.; particularmente membros dos nematoides do cisto, incluindo, mas não se limitando a, Globodera rostochiensis e Globodera pailida (nematoides do cisto da batata); Espiral (Helicotylenchus spp.); Cavernícola (Radopholus similis); Bulbo e caule (Ditylenchus dipsaci); Reniforme (Rotylenchulus reniformis); Adaga (Xiphinema spp.); Botão e folha (Aphelenchoides spp .); e Doença da murchidão do pinheiro (Bursaphelenchus xylophilus). Os nematoides de lesão incluem Pratylenchus spp. O termo "nematoide" abrange ovos, larvas, formas juvenis e maduras de nematoides.
[0098] As cepas bacterianas ou suas variantes ativas e/ou uma composição derivada delas podem ser testadas quanto à atividade pesticida contra uma praga em qualquer estágio de desenvolvimento, incluindo estágios iniciais de desenvolvimento, por ex., como larvas ou outras formas imaturas. Por exemplo, larvas de pragas de insetos podem ser criadas em escuridão total de cerca de 20 ℃ a cerca de 30 ℃ e com cerca de 30% a cerca de 70% de umidade relativa. Os bioensaios podem ser realizados conforme descrito em Czapla e Lang (1990) J. Econ. Entomol. 83 (6): 2480-2485. Os métodos para criar larvas de insetos e para efetuar bioensaios são bem conhecidos pelos especialistas na técnica.
[0099] Em configurações específicas, as cepas bacterianas aqui fornecidas são aquelas que têm como alvo um ou mais insetos ou pragas de insetos. Por exemplo, as diversas cepas bacterianas aqui fornecidas têm como alvo uma ou mais pragas de insetos que causam danos às plantas. Por exemplo, qualquer uma das cepas bacterianas aqui fornecidas ou sua variante ativa pode ter atividade inseticida contra uma, duas, três, quatro, cinco ou mais pragas de insetos aqui descritas.
[00100] Em configurações específicas, uma célula da cepa bacteriana AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos pode controlar uma praga de inseto ou nematoide. Assim, em algumas configurações, a praga de plantas aqui divulgada é uma praga de inseto da ordem Coleóptera. Por exemplo, uma célula da cepa bacteriana AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos podem controlar a larva da raiz do milho, besouro da batata do Colorado, e carunchos. Em configurações específicas, uma célula da cepa bacteriana AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, pode ter atividade contra a lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado e/ou caruncho da batata-doce. Em configurações particulares, AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862,
AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, pode ter atividade contra nematoides de galha e percevejo verde do sul.
[00101] Os métodos e composições aqui divulgados podem ser usados para controlar uma ou mais pragas fúngicas. Uma praga fúngica pode ser, mas não está limitada a, um fungo selecionado do grupo que consiste em Aspergillus spp., Botrytis spp., Botrytis cinerea, Cersospora spp., Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria spp., Alternaria solani, Rhizoctonia spp., Rhizoctonia solani, Blumeria graminis f. sp. Tritici, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum spp, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea, Mycosphaerella spp., Phomopsis spp., Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora belbahrii, Bremia lactucae, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium spp., Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Fusarium virguliforme, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Penicillium spp., Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Venturia inaequalis, Verticillium spp., Erwinia amylovora, Monilinia spp., Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
[00102] Em algumas configurações, a praga fúngica é selecionada a partir do grupo que consiste em Botrytis cinerea, Cercospora sojina, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Erysiphe necator, Podosphaera xanthii, Colletotrichum cereale, Plasmopara viticola, Peronospora belbahrii, Pythium aphanidermatum, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Phakopsora pachyrizi, e Venturia inaequalis.
[00103] Em outras configurações, o patógeno fúngico é Phakopsora sp., incluindo Phakopsora pachyrhizi e/ou Phakopsora meibomiae.
[00104] Exemplos de condições de plantas fúngicas e doenças causadas por pragas fúngicas incluem, mas não estão limitados a, ferrugem asiática da soja (ASR), bolor cinzento, mancha foliar, mancha foliar olho-de-rã, pinta preta, tombamento por complexo de fungos, mancha marrom do gramado, rizoctoniose, podridão radicular, podridão do colo, queima da bainha, oídio, antracnose foliar, míldio, queima de Pythium, requeima, fusariose, síndrome de morte súbita (SDS), murcha de Fusarium, podridão do pé-de-milho, ferrugem parda, ferrugem negra, ferrugem amarelada, ferrugem do trigo, ferrugem, sarna da maçã, murcha de Verticillium, fogo bacteriano e podridão parda. B. Métodos de controle de pragas de plantas e tratamento ou prevenção de doenças de plantas
[00105] São fornecidos aqui métodos para controlar pragas de plantas que compreendem a aplicação a uma planta de uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma, e/ou uma composição dela derivada, em que a cepa bacteriana e/ou a composição dela derivada controla a praga de plantas, como uma praga de inseto ou nematoide.
Também são fornecidos aqui métodos para reduzir a suscetibilidade a uma praga de plantas e/ou aumentar a resistência a uma praga de plantas, compreendendo a aplicação a uma planta com uma praga de plantas, uma doença de plantas ou dano causado por uma praga de plantas, ou um dano ou risco de desenvolver uma doença de plantas ou dano causado por uma praga de plantas, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada, em que a cepa bacteriana e/ou a composição dela derivada controla a praga de plantas.
São fornecidos aqui métodos de tratamento ou prevenção de uma doença ou dano a plantas compreendendo a aplicação a uma planta com uma doença ou dano a plantas, ou em risco de desenvolver uma doença ou dano a plantas, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada, em que a cepa bacteriana e/ou a composição dela derivada controla uma praga de plantas que causa a doença ou dano a plantas.
Em configurações particulares, o dano à planta é causado por uma praga de inseto, como uma praga de coleópteros.
Em certas configurações, a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885,
AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Em algumas configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana ou variante ativa da mesma compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 CFU por hectare ou pelo menos cerca de 104 a 1016 CFU por hectare, ou pelo menos cerca de 105 a 1011 CFU por hectare. Em algumas configurações, a composição é derivada de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma que pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas.
[00106] Qualquer uma das cepas bacterianas aqui fornecidas, suas variantes ativas ou composições delas derivadas podem controlar uma, duas, três, quatro, cinco ou mais pragas de plantas aqui descritas. Em alguns métodos, a cepa bacteriana controla uma, duas, três, quatro, cinco ou mais pragas de insetos, como as pragas de coleópteros. Em algumas configurações, qualquer uma das cepas bacterianas aqui fornecidas ou suas variantes ativas podem ter atividade contra uma combinação de pragas de insetos e outras pragas de plantas, incluindo fungos, vírus ou viroides, bactérias, insetos, nematoides e pragas de protozoários. A cepa bacteriana fornecida aqui ou uma variante ativa da mesma pode ser empregada com qualquer espécie de planta suscetível a uma praga de planta de interesse.
[00107] Exemplos de doenças causadas por pragas de plantas exemplificativas são fornecidos no Quadro 1. Também são fornecidas espécies de cultivo exemplificativas não-limitantes que são suscetíveis às doenças de plantas causadas pelas pragas. Por exemplo, o Quadro 1 mostra que Bortrytis cinerea causa bolor cinzento em todos os cultivos com flores. Portanto, uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma que controla Bortrytis cinerea pode ser aplicada a uma planta com bolor cinzento ou em risco de desenvolver bolor cinzento, a fim de tratar ou prevenir o bolor cinzento na planta. Da mesma forma, o Quadro 1 mostra que Rhizoctonia solani causa tombamento por complexo de fungos no milho, tombamento por complexo de fungos na soja, mancha marrom no gramado e tombamento por complexo de fungos nas plantas ornamentais. Portanto, uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma que controla Rhizoctonia solani pode ser aplicada a uma planta com tombamento por complexo de fungos e/ou mancha marrom ou em risco de desenvolver tombamento por complexo de fungos e/ou mancha marrom, a fim de tratar ou prevenir o tombamento por complexo de fungos e/ou mancha marrom na planta. Em outro exemplo adicional, o Quadro 1 mostra que Colletotrichum cereale, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea causam antracnose foliar. Portanto, uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma que controla um ou mais de Colletotrichum ceral, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Colletotrichum gloeosporiodes, Discula fraxinea pode ser aplicada a uma planta com antracnose foliar ou em risco de desenvolver antracnose foliar a fim de tratar ou prevenir a antracnose foliar na planta.
Quadro 1 Espécie de Praga causal Doença cultivo todos os cultivos Botrytis cinerea bolor cinzento com flores Plantas ornamentai Cersospora spp Mancha foliar s Mancha foliar olho-de- Cercospora sojina rã Soja beterraba, espinafre, Cercospora beticola acelga plantas Alternaria solani Pinta preta solanáceas Tombamento por Rhizoctonia solani complexo de fungos Milho Tombamento por Rhizoctonia solani complexo de fungos Soja Rhizoctonia solani Mancha marrom Gramado Plantas Tombamento por ornamentai Rhizoctonia solani complexo de fungos s Rhizoctonia solani rizoctoniose batata Rhizoctonia solani podridão da raiz beterraba cucurbitác Rhizoctonia solani podridão do colo eas Rhizoctonia solani queima da bainha arroz
Blumeria graminis f. sp.
Tritici Oídio Trigo Erysiphe necator Oídio Uva Cucurbitác Podosphaera xanthii Oídio eas Plantas Golovinomyces ornamentai cichoracearum Oídio s Plantas ornamentai Erysiphe lagerstroemiae Oídio s Plantas ornamentai Sphaerotheca pannosa Oídio s Gramado, gramíneas, Colletotrichum cereale Antracnose foliar cereais Gramado, gramíneas, Apiognomonia errabunda Antracnose foliar cereais Gramado, gramíneas, Apiognomonia veneta Antracnose foliar cereais Gramado, Colletotrichum gramíneas, gloeosporiodes Antracnose foliar cereais Gramado, gramíneas, Discula fraxinea Antracnose foliar cereais Plasmopara viticola Míldio Uva
Pseudoperonospora Cucurbitác cubensis Míldio eas Peronospora belbahrii Míldio Manjericão Bremia lactucae Míldio Alface Peronospora lamii Míldio Coleus Plasmopara obduscens Míldio Impatiens Plantas Pythium Tombamento por ornamentai cryptoirregulare complexo de fungos s Gramado, plantas ornamentai Queima de Pythium / s, cultivo Tombamento por em Pythium aphanidermatum complexo de fungos fileiras Gramado, plantas ornamentai s, cultivo Tombamento por em Pythium irregulare complexo de fungos fileiras Gramado, plantas ornamentai s, cultivo Tombamento por em Pythium sylvaticum complexo de fungos fileiras Gramado, Tombamento por plantas Pythium myriotylum complexo de fungos ornamentai s, cultivo em fileiras Gramado, plantas ornamentai Queima de Pythium / s, cultivo Tombamento por em Pythium ultimum complexo de fungos fileiras cucurbitác eas, Phytophthora capsici pimenta Plantas ornamentai Phytophthora nicotianae s planta Phytophthora infestans Requeima solanácea Plantas ornamentai s, pimentas, árvores de frutos secos Phytophthora tropicalis tropicais Phytophthora sojae Soja Cereais- Fusarium graminearum Fusariose Trigo Síndrome de morte Fusarium solani súbita (SDS) Soja
Plantas Fusarium oxysporum Murcha de Fusarium herbáceas Podridão do pé-de- Fusarium graminicola milho Milho Podridão do pé-de- Gibberella zeae milho Milho Colletotrichum Podridão do pé-de- graminicola milho Milho Ferrugem asiática da Phakopsora pachyrizi soja (ASR) Soja Puccinia triticina Ferrugem parda Cereais Puccinia recondita Ferrugem negra Cereais Puccinia striiformis Ferrugem amarelada Cereais Puccinia graminis Ferrugem do trigo Cereais Plantas ornamentai Puccinia spp. Ferrugem s Venturia inaequalis Sarna da maçã Malus Verticillium spp Murcha de Verticillium Todas Família Erwinia amylovora Fogo bacteriano rosácea Frutas com Monilinia fructicola Podridão parda caroço Frutas com Monilinia laxa Podridão parda caroço Frutas com Monilinia fructigena Podridão parda caroço
[00108] Em configurações específicas, a cepa bacteriana aqui fornecida ou suas variantes ativas controlam uma ou mais pragas de nematoides. Por exemplo, a cepa bacteriana ou suas variantes ativas podem controlar ou tratar nematoides de galhas (Meloidogyne spp.). Nematoides parasitas de plantas podem atacar raízes, caule, folhagem e flores das plantas. Todos os nematoides parasitas de plantas têm aparelhos bucais perfurantes chamados estiletes. A presença de um estilete é o principal sinal de diagnóstico que diferencia os nematoides parasitas de plantas de todos os outros tipos de nematoides. Os sintomas típicos da raiz que indicam o ataque do nematoide são nós ou galhas na raiz, lesões na raiz, ramificação excessiva da raiz, pontas das raízes danificadas e sistemas de raiz atrofiados. Os sintomas nas partes da planta acima do solo que indicam infecção da raiz são: um declínio lento de toda a planta, murchando mesmo com muita umidade do solo, amarelecimento da folhagem e folhas cada vez menores. Esses são, de fato, os sintomas que apareceriam em plantas privadas de um sistema radicular em bom funcionamento. Os nematoides do bulbo e do caule produzem inchaços no caule e internódios mais curtos. Os nematoides dos botões e das folhas distorcem e matam o tecido dos botões e das folhas. Em alguns casos, como com o SCN, a perda de rendimento pode ocorrer sem sintomas visíveis.
[00109] Os termos "tratar", "tratamento" ou seus derivados implicam substancialmente inibir, retardar ou reverter a progressão de uma condição, melhorando substancialmente os sintomas de uma condição ou prevenindo substancialmente o aparecimento de sintomas ou condições provocadas pela praga de inseto, ou patógeno ou praga que causa a doença da planta.
[00110] O termo "controlar" uma praga de plantas se refere a um ou mais dentre inibir ou reduzir o crescimento, alimentação, fecundidade, reprodução e/ou proliferação de uma praga de plantas ou a morte (por ex., causando a morbidade, mortalidade ou fecundidade reduzida) de uma praga de plantas. Como tal, uma planta tratada com a cepa bacteriana aqui fornecida e/ou uma composição dela derivada pode mostrar uma menor infestação de pragas ou menores danos causados por pragas em uma quantidade estatisticamente significativa. Em configurações particulares, "controlar" e "proteger" uma planta de uma praga se refere a um ou mais dentre inibir ou reduzir o crescimento, germinação, reprodução e/ou proliferação de uma praga; e/ou matar, remover, destruir ou de outra forma diminuir a ocorrência e/ou atividade de uma praga. Como tal, uma planta tratada com a cepa bacteriana aqui fornecida e/ou uma composição dela derivada pode mostrar uma menor gravidade ou um menor desenvolvimento de doenças ou danos na presença de pragas de plantas por uma quantidade estatisticamente significativa.
[00111] O termo "prevenir" e suas variações significam o combate antecipado do crescimento, proliferação, infestação, germinação de esporos e crescimento de hifas de bactérias, fungos, vírus, insetos ou outras pragas. Neste caso, a composição é aplicada antes da exposição às pragas de plantas.
[00112] Os termos "melhorar" e "melhoria" se referem à melhoria na condição da planta tratada provocada pelas composições e métodos aqui fornecidos. A melhoria pode ser manifestada na forma de uma diminuição no crescimento da praga e/ou uma melhoria na altura, peso, número de folhas, sistema radicular ou rendimento da planta danificada ou doente. Em geral, o termo se refere à melhora do estado fisiológico de uma planta danificada ou doente.
[00113] O termo "inibir" e todas as suas variações pretendem abranger a restrição ou proibição do crescimento de bactérias, fungos, vírus, nematoides, insetos ou qualquer outra praga, bem como a germinação de esporos.
[00114] O termo "eliminar" se refere à erradicação ou remoção substancial de bactérias, fungos, vírus, nematoides, insetos ou quaisquer outras pragas por contato com a composição da invenção, opcionalmente, de acordo com os métodos da invenção descritos abaixo.
[00115] Os termos "retardar", "atrasar" e todas as suas variações pretendem abranger a desaceleração do progresso do crescimento de bactérias, fungos, vírus, nematoides, insetos ou qualquer outra praga, e da germinação de esporos. A expressão "retardar o início" é interpretada como prevenir ou retardar a progressão do crescimento, infestação, infecção, germinação de esporos e crescimento de hifas de bactérias, fungos, vírus, nematoides, insetos ou qualquer outra praga por um período de tempo, de modo que o referido crescimento, infestação, infecção, germinação de esporos e crescimento de hifas de bactérias, fungos, vírus, nematoides, insetos ou qualquer outra praga não progrida tanto no desenvolvimento, ou apareça mais tarde do que na ausência do tratamento de acordo com a invenção.
[00116] Uma planta, parte de planta ou área de cultivo tratada com a cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma pode mostrar uma gravidade reduzida ou desenvolvimento reduzido de doenças ou danos na presença de pragas de plantas por uma quantidade estatisticamente significativa. Uma gravidade reduzida ou desenvolvimento reduzido de doença ou dano pode ser uma redução de cerca de 10% a cerca de 20%, cerca de 20% a cerca de 30%, cerca de 30%
a cerca de 40%, cerca de 40% a cerca de 50%, cerca de 50% a cerca de 60%, cerca de 60% a cerca de 70%, cerca de 70% a cerca de 80%, cerca de 80% a cerca de 90% ou cerca de 90% a cerca de 100% em comparação com plantas de controle não-tratadas. Em outros casos, a planta tratada com uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma pode mostrar uma gravidade reduzida ou desenvolvimento reduzido de doenças ou danos na presença de uma praga de plantas pelo menos cerca de 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou cerca de 100% maior em comparação com plantas controle não-tratadas. Os métodos para avaliar os danos à planta ou a gravidade da doença são conhecidos e incluem a medição da porcentagem de área foliar danificada ou doente (Godoy et al. (2006) Fitopatol. Bras. 31 (1) 63-68 ou medindo contagens de uredinia.
[00117] Uma planta, parte da planta ou área de cultivo tratada com a cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma pode mostrar uma redução de pragas de plantas, incluindo pragas de insetos e/ou nematoides. Uma redução de pragas de plantas pode ser uma redução de cerca de 10% a cerca de 20%, cerca de 20% a cerca de 30%, cerca de 30% a cerca de 40%, cerca de 40% a cerca de 50%, cerca de 50% a cerca de 60%, cerca de 60% a cerca de 70%, cerca de 70% a cerca de 80%, cerca de 80% a cerca de 90% ou cerca de 90% a cerca de 100% em comparação com plantas de controle não-tratadas. Em outros casos, a planta tratada com uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma pode mostrar uma redução de pragas de plantas pelo menos cerca de 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou cerca de 100% maior em comparação com plantas controle não-tratadas. Os métodos para medir o número de pragas de plantas são conhecidos e incluem a contagem do número de pragas ou o contato das plantas com uma ou mais pragas e a determinação da capacidade da planta de sobreviver e/ou causar a morte das pragas. Vide, por exemplo, Czapla e Lang, (1990) J. Econ. Entomol. 83: 2480-2485; Andrews, et al., (1988) Biochem. J. 252: 199-206; Marrone, et al., (1985) J. of Economic Entomology 78: 290-293 e Pat. dos EUA nº 5,743,477, todas as quais são aqui incorporadas por referência em sua totalidade.
[00118] Em algumas configurações, as cepas bacterianas e suas variantes ativas e/ou uma composição derivada das mesmas, fornecidas neste documento, têm atividade pesticida contra uma praga de inseto (ou seja, atividade inseticida). Em algumas dessas configurações, a atividade inseticida é a atividade contra uma espécie de coleóptero. Em uma configuração, a atividade inseticida é contra um inseto lepidóptero. Em uma configuração, a atividade inseticida é contra uma espécie de hemíptero. Em algumas configurações, a atividade inseticida é contra uma ou mais pragas de insetos, como a lagarta da raiz do milho ocidental, lagarta da raiz do milho do sul, lagarta da raiz do milho do norte, lagarta da raiz do milho mexicana, besouro da batata do Colorado, caruncho da batata-doce ou maria-fedida.
[00119] Em configurações específicas, as cepas bacterianas, suas variantes ativas e/ou uma composição derivada das mesmas, fornecidas neste documento, reduzem os danos ou sintomas de doenças resultantes de uma praga de plantas por uma quantidade estatisticamente significativa, incluindo, por exemplo, pelo menos cerca de 10% a pelo menos cerca de 20%, pelo menos cerca de 20% a cerca de 50%, pelo menos cerca de 10% a cerca de 60%, pelo menos cerca de 30% a cerca de 70%, pelo menos cerca de 40% a cerca de 80%, ou pelo menos cerca de 50% a cerca de 90% ou mais. Portanto, os métodos da invenção podem ser utilizados para proteger as plantas de doenças ou danos causados por pragas de plantas.
[00120] Os ensaios que quantificam a resistência a danos e doenças após infestação por pragas são comumente conhecidos na técnica. Vide, por exemplo, Patente dos EUA nº 5,614,395, aqui incorporada por referência. Essas técnicas incluem, medindo ao longo do tempo, o diâmetro médio da lesão, a biomassa da praga e a porcentagem total de tecidos vegetais em decomposição. Por exemplo, uma planta que expressa um polipeptídeo pesticida ou que possui uma composição pesticida aplicada à sua superfície mostra uma diminuição na necrose do tecido (ou seja, diâmetro da lesão) ou uma diminuição na morte da planta após o desafio com uma praga, quando comparada a uma planta de controle que foi não exposta à composição pesticida. Alternativamente, a atividade pesticida pode ser medida por uma diminuição na biomassa da praga. Por exemplo, uma planta que expressa um polipeptídeo pesticida ou exposta a uma composição pesticida é desafiada com uma praga de interesse. Com o tempo, amostras de tecido dos tecidos infestados de pragas são obtidas e o RNA é extraído. A porcentagem de um transcrito de RNA de praga específico em relação ao nível de um transcrito específico de planta permite determinar o nível de biomassa da praga. Vide, por exemplo, Thomma et al. (1998) Plant Biology 95: 15107- 15111, aqui incorporado por referência.
[00121] Além disso, os ensaios de pesticidas in vitro incluem, por exemplo, a adição de várias concentrações da composição pesticida a discos de papel e a colocação dos discos em ágar contendo uma suspensão da praga de interesse. Após a incubação, zonas de inibição claras se desenvolvem em torno dos discos que contêm uma concentração eficaz da composição de pesticidas (Liu et al. (1994) Plant Biology 91: 1888-1892, aqui incorporado por referência). Além disso, a análise microespectrofotométrica pode ser usada para medir as propriedades pesticidas in vitro de uma composição (Hu et al. (1997) Plant Mol. Biol. 34: 949-959 e Cammue et al. (1992) J. Biol. Chem. 267: 2228-2233, ambos aqui incorporados por referência). C. Métodos para induzir resistência a pragas e/ou doenças em plantas e/ou para melhorar uma característica agronômica de interesse
[00122] Composições e métodos para induzir resistência a pragas e/ou doenças em uma planta, em que a doença é causada por uma praga de plantas, também são fornecidos. Consequentemente, as composições e métodos também são úteis na proteção de plantas contra qualquer tipo de praga de plantas,
incluindo pragas fúngicas, vírus, nematoides e insetos. São fornecidos aqui métodos de indução de resistência contra uma praga de planta compreendendo aplicar a uma planta que é suscetível a infecção ou infestação por uma praga de plantas, ou a uma doença de plantas causada pela praga de plantas, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida, uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada. Em certas configurações, a cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Em certas configurações, a cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada promove uma resposta defensiva à praga que causa a doença ou dano à planta. Em algumas configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa compreende pelo menos cerca de 10 5 a 10 12 CFU por hectare. Em algumas configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa compreende pelo menos cerca de 10 12 a 10 16 CFU por hectare.
[00123] Uma resposta defensiva na planta pode ser desencadeada após a aplicação na planta da cepa bacteriana aqui fornecida, de sua variante ativa e/ou da composição dela derivada, porém antes do desafio da praga e/ou após o desafio da praga da planta tratada com a cepa bacteriana aqui fornecida, com sua variante ativa e/ou com a composição dela derivada.
[00124] Em alguns métodos, a cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada induz resistência a uma, duas, três, quatro, cinco ou mais pragas de plantas aqui descritas. Em outros métodos, a cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada induz resistência a uma, duas, três, quatro, cinco ou mais pragas de insetos, pragas de plantas fúngicas ou pragas de nematoides aqui descritas.
[00125] Por "resistência a doenças" pode-se entender que as plantas evitem os sintomas de doenças que resultam das interações planta-praga. Ou seja, as pragas são impedidas de causar doenças nas plantas e os sintomas da doença associados ou, alternativamente, os sintomas da doença causados pela praga são minimizados ou diminuídos em comparação com um controle. Por "resistência a pragas" pode-se entender que as plantas evitam os sintomas que resultam da infecção ou infestação de uma planta por uma praga. Ou seja, as pragas são impedidas de causar doenças nas plantas e os sintomas da doença associados ou, alternativamente, os sintomas da doença causados pela praga são minimizados ou diminuídos em comparação com um controle. Também são fornecidos métodos para melhorar a saúde das plantas e/ou melhorar uma característica agronômica de interesse, compreendendo a aplicação a uma planta de uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa desta ou um derivado ativo desta. Em certas configurações, a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa pode compreender uma célula de pelo menos uma de
AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. Em algumas configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa compreende pelo menos cerca de 10 5 a 10 12 CFU por hectare. Em algumas configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa compreende pelo menos cerca de 10 12 a 10 16 CFU por hectare. Em algumas configurações, a composição é derivada de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma que pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas.
[00126] Em configurações particulares, a característica agronômica de interesse que é melhorada pelas cepas bacterianas ou pelas variantes ativas das mesmas aqui descritas é a melhoria da saúde da planta. Por "melhoria da saúde da planta" entende-se o aumento do crescimento e/ou rendimento de uma planta, aumento da tolerância ao estresse e/ou diminuição da resistência a herbicidas, para citar alguns. O aumento da tolerância ao estresse refere-se a um aumento na capacidade de uma planta para diminuir ou prevenir os sintomas associados a um ou mais estresses. O estresse pode ser um estresse biótico que ocorre como resultado de danos causados às plantas por outros organismos vivos, como uma praga (por exemplo, bactérias, vírus, fungos, parasitas), insetos, nematoides, ervas daninhas, plantas cultivadas ou nativas). O estresse também pode ser um estresse abiótico, como temperaturas extremas (altas ou baixas), ventos fortes, seca, salinidade, toxicidade química, estresse oxidativo, inundações, tornados, incêndios florestais, radiação e exposição a metais pesados. Exemplos não-limitantes de características agronômicas melhoradas são divulgados em outra parte deste documento. Em configurações específicas, uma quantidade eficaz da cepa bacteriana, variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada melhora a saúde da planta ou melhora uma característica agronômica de interesse por uma quantidade estatisticamente significativa, incluindo, por exemplo, pelo menos cerca de 10% a pelo menos pelo menos cerca de 20%, pelo menos cerca de 20% a cerca de 50%, pelo menos cerca de 10% a cerca de 60%, pelo menos cerca de 30% a cerca de 70%, pelo menos cerca de 40% a cerca de 80%, ou pelo menos cerca de 50% a cerca de 90% ou mais. D. Métodos de aplicação a uma planta ou parte de planta
[00127] As cepas bacterianas fornecidas neste documento, sua variante ativa e/ou a composição delas derivadas são aplicadas em uma quantidade eficaz. Uma quantidade eficaz de uma cepa bacteriana aqui fornecida, a variante ativa da mesma e/ou a composição dela derivada é uma quantidade suficiente para controlar, tratar, prevenir, inibir a praga, como uma praga de inseto e/ou melhorar uma característica agronômica de interesse. Em configurações específicas, uma quantidade eficaz de uma cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada é uma quantidade suficiente para controlar, tratar, prevenir, inibir uma praga que causa doenças ou danos às plantas e/ou reduzir a gravidade de doenças de plantas ou reduzir o desenvolvimento de doenças de plantas. Em outras configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada é uma quantidade suficiente para melhorar uma característica agronômica de interesse e/ou para promover ou aumentar a saúde, o crescimento ou o rendimento de uma planta suscetível a uma doença e/ou infecção por uma praga de plantas ou infestação por uma praga de plantas, como uma praga de inseto. A taxa de aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada pode variar de acordo com a praga a ser direcionada, o cultivo a ser protegido, a eficácia da cepa bacteriana aqui fornecida, sua variante ativa e/ou a composição dela derivada, a gravidade da doença, as condições climáticas, a característica agronômica de interesse a ser melhorada, entre outros. Os métodos aqui fornecidos podem compreender uma única aplicação de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida, uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada a uma planta, parte de planta ou área de cultivo, ou múltiplas aplicações de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma a uma planta, parte da planta ou área de cultivo.
[00128] Geralmente, a taxa de cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa é de 107 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare. Em outras configurações, para uma inoculação de campo, a taxa de aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma é de 3 x 107 a 1 x 1011 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare. (Isso corresponde a cerca de 1 kg a 10 kg de material formulado por hectare). Em outras configurações, para uma inoculação em campo, a taxa de aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma é de 3 x 107 a 1 x 1016 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare; cerca de 1x1012 a cerca de 1x1013 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare, cerca de 1x1013 a cerca de 1x1014 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare, cerca de 1x1014 a cerca de 1x1015 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare, cerca de 1x1015 a cerca de 1x1016 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare, cerca de 1x1016 a cerca de 1x1017 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare; cerca de 1x104 a cerca de 1x1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; cerca de 1x105 a cerca de 1x1013 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; cerca de 1x106 a cerca de 1x1012 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; cerca de 1x109 a cerca de 1x1011 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; ou cerca de 1x109 a cerca de 1x1011 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare.
Em outras configurações, para uma inoculação de campo, a taxa de aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma é de pelo menos cerca de 1x104, cerca de 1x105, cerca de 1x106, cerca de 1x107, cerca de 1x108, cerca de 1x109, cerca de 1x1010, cerca de 1x1011, cerca de 1x10121x1013, cerca de 1x1014, 1x1015, cerca de 1x1016 ou cerca de 1x1017 unidades formadoras de colônia (CFU) por hectare.
Em outras configurações, para uma inoculação em campo, a taxa de aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma é de pelo menos 1x107 a pelo menos cerca de 1x1012 CFU/hectare. Em configurações específicas, a cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma aplicada compreende a cepa depositada como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou um derivado ativo de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou um derivado ativo de qualquer uma delas.
[00129] Em algumas configurações, a composição aplicada é derivada de uma cepa bacteriana ou variante ativa da mesma compreendendo uma cepa depositada como AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou um derivado ativo de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou um derivado ativo de qualquer uma delas. Em algumas configurações, a composição aplicada pode ser um cultivo substancialmente puro, caldo de células inteiras, sobrenadante, filtrado, extrato ou composto derivado de uma cepa bacteriana da invenção ou uma variante ativa da mesma. A composição aplicada pode ser aplicada sozinha ou em combinação com outra substância, em uma quantidade eficaz para controlar uma praga de planta ou para melhorar uma característica agronômica de interesse em uma planta.
[00130] Uma quantidade eficaz da composição aplicada é a quantidade de células de microrganismo, sobrenadante, caldo de células inteiras, filtrado, fração celular ou extrato, metabólito e/ou composto sozinho ou em combinação com outra substância pesticida que é suficiente para modular a infestação de pragas de plantas ou o desempenho de uma característica agronômica de interesse na planta. A quantidade que estará dentro de uma faixa eficaz pode ser determinada por testes de laboratório ou de campo por um especialista na técnica.
[00131] Em algumas configurações, quando a composição é aplicada diretamente na semente, a quantidade eficaz é uma concentração de cerca de 0,05 a 25%, ou cerca de 0,1 a 20%, ou cerca de 0,5 a 15%, ou cerca de 1 a 10%, ou cerca de 2 a 5% do ingrediente ativo por 100 g de semente. Em algumas configurações, a quantidade eficaz é de cerca de 0,5 a 1% do ingrediente ativo por 100 g de semente.
[00132] Em algumas configurações, quando a composição é aplicada ao solo, por exemplo, em sulco, a quantidade eficaz é de cerca de 0,1 a 50 onças do ingrediente ativo por linha de 1000 pés. Em outra configuração, a quantidade eficaz para aplicação no solo é de cerca de 1 a 25 onças do ingrediente ativo por linha de 1000 pés. Em outra configuração, a quantidade eficaz é de cerca de 2 a 20 onças, ou cerca de 3 a 15 onças, ou cerca de 4 a 10 onças, ou cerca de 5 a 8 onças, do ingrediente ativo por linha de 1000 pés. Em outra configuração diferente, a quantidade eficaz é de cerca de 14 ou 28 onças do ingrediente ativo por linha de 1000 pés.
[00133] Qualquer taxa de aplicação agrícola apropriada para um biocida pode ser aplicada em combinação com a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa aqui divulgada. Métodos para testar a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa incluem, por exemplo, qualquer aumento estatisticamente significativo no controle da praga direcionada pela cepa bacteriana, sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada. Os métodos de ensaio para esse controle são conhecidos. Além disso, um aumento estatisticamente significativo na saúde, rendimento e/ou crescimento da planta pode ocorrer após a aplicação de uma quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa em comparação com a saúde, rendimento e/ou crescimento da planta que ocorre quando nenhuma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma é aplicada.
[00134] Também é fornecido um método para controlar ou inibir o crescimento de uma praga de plantas, como as que causam doenças em plantas, através da aplicação de uma composição que compreende uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma aqui fornecida (ou seja, uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas) e/ou uma composição derivada de uma cepa bacteriana ou variante ativa descrita acima. Por "aplicação" deve-se entender contatar uma quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma a uma planta, área de cultivo e/ou semente com uma ou mais das cepas bacterianas aqui fornecidas ou variante ativa das mesmas , de modo a alcançar um efeito desejado. Além disso, a aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma pode ocorrer antes do plantio do cultivo (por exemplo, no solo, na semente ou na planta). Em uma configuração específica, a aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada é uma aplicação foliar. Portanto, uma outra configuração da invenção fornece um método para controlar ou inibir o crescimento de uma praga de plantas aplicando a população de cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada em um ambiente no qual a praga de plantas possa crescer. A aplicação pode ser na planta, em partes da planta, nas sementes das plantas a serem protegidas ou no solo em que as plantas a serem protegidas estão crescendo ou irão crescer. A aplicação na planta ou em partes da planta pode ser antes ou depois da colheita. A aplicação nas sementes será anterior ao plantio das sementes.
[00135] Em algumas configurações, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é usada como uma aplicação foliar para controlar ou inibir o crescimento de um ou mais patógenos de nematoides do grupo que consiste em Nematoide de galha do sul (Meloidogyne incognita), Nematoide de galha javanês (Meloidogyne javanica), Nematoide de galha do norte (Meloidogyne hapla) e Nematoide de galha do amendoim.
[00136] Em algumas configurações, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é usada como uma aplicação foliar ou no solo ou em sementes para controlar ou inibir o crescimento de uma ou mais pragas de insetos. Por exemplo, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida, ou variante ativa da mesma, pode ser usada como uma aplicação foliar para controlar ou inibir o crescimento de insetos coleópteros, incluindo largarta da raiz do milho, lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado, caruncho e caruncho da batata- doce. Em outras configurações, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada ao solo no qual as plantas a serem protegidas estão crescendo ou crescerão para controlar ou inibir o crescimento de um ou mais nematoides ou pragas de nematoides. Em configurações específicas, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada à semente da planta para inibir (inibir o crescimento, alimentação, fecundidade ou viabilidade), suprimir (suprimir o crescimento, alimentação, fecundidade ou viabilidade), reduzir (reduzir a infestação de pragas, reduzir as atividades de alimentação de pragas em um cultivo específico) ou matar (causar a morbidade, mortalidade ou fecundidade reduzida de) uma praga de planta (por ex., uma praga de inseto, como uma praga de coleópteros).
[00137] Em outras configurações, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada ao propágulo da planta (ou seja, semente, folha, corte do caule, espiga, etc.) a partir do qual o as plantas a serem protegidas estão crescendo ou crescerão para controlar ou inibir o crescimento de uma ou mais pragas de plantas. Por exemplo, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada pode ser aplicada ao propágulo da planta para controlar ou inibir o crescimento de pragas de insetos (por ex., insetos coleópteros incluindo lagarta da raiz do milho, lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado, carunchos e carunchos da batata-doce). Em configurações específicas, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada, pode ser aplicada ao tecido da planta (incluindo frutas) antes ou após a colheita para controlar ou inibir o crescimento de uma praga de planta (por ex., uma praga de inseto, como insetos coleópteros, incluindo lagarta da raiz do milho, lagarta da raiz do milho ocidental, besouro da batata do Colorado, carunchos e carunchos da batata- doce). Em algumas configurações, uma quantidade eficaz de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada ao tecido da planta (incluindo frutas) após a colheita para controlar ou inibir o crescimento de uma ou mais pragas de nematoides.
[00138] Em outras configurações, uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma, e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada ao solo no qual a planta a ser protegida está crescendo ou crescerá para controlar ou inibir o crescimento de uma ou mais pragas selecionadas do grupo que consiste em Nematoide das galhas do sul (Meloidogyne incognita), Nematoide das galhas javanês (Meloidogyne javanica), Nematoide das galhas do norte (Meloidogyne hapla) e Nematoide das galhas do amendoim.
[00139] Em algumas configurações, uma quantidade eficaz de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aqui fornecida é aplicada à planta após a colheita para controlar ou inibir o crescimento de uma ou mais pragas selecionadas do grupo que consiste em Nematoide das galhas do sul (Meloidogyne incognita), Nematoide das galhas javanês (Meloidogyne javanica), Nematoide das galhas do norte (Meloidogyne hapla) e Nematoide das galhas do amendoim.
[00140] Conforme aqui utilizado, o termo "planta" inclui células vegetais, protoplastos vegetais, culturas de tecidos de células vegetais a partir das quais as plantas podem ser regeneradas, calos de plantas, aglomerados de plantas e células vegetais que estão intactas em plantas ou partes de plantas, como embriões, pólen, óvulos, sementes, folhas, flores, ramos, frutas, grãos, espigas, sabugos, cascas, caules, raízes, pontas de raízes, anteras, entre outros. Grão significa a semente madura produzida por cultivadores comerciais para outros fins que não o cultivo ou reprodução da espécie.
[00141] Em configurações específicas, a aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma (ou seja, uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas), e/ou uma composição derivada delas, é aplicada às sementes de uma planta, como as sementes de um planta de milho. A aplicação da cepa bacteriana, ou de uma variante ativa da mesma, à semente de milho pode compreender uma concentração de cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama, cerca de 1011 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama, cerca de 105 CFU/grama a cerca de 106 CFU/grama, cerca de 106 CFU/grama a cerca de 107 CFU/grama, cerca de 107 CFU/grama a cerca de 108 CFU/grama, cerca de 108 CFU/grama a cerca de 109 CFU/grama, cerca de 109 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama, cerca de 1010 CFU/grama a cerca de 1011 CFU/grama ou cerca de 1011 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama. Em algumas configurações, a concentração da cepa bacteriana compreende pelo menos cerca de 105 CFU/grama, pelo menos cerca de 106 CFU/grama, pelo menos cerca de 107 CFU/grama, pelo menos cerca de 108 CFU/grama, pelo menos cerca de 109 CFU/grama, pelo menos cerca de 1010 CFU/grama, pelo menos cerca de 1011 CFU/grama, pelo menos cerca de 1012 CFU/grama ou pelo menos cerca de 1013 CFU/grama. Em configurações específicas, a cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada aplicada à semente de milho é aplicada na forma de um revestimento de semente heterólogo, conforme descrito em outra parte deste documento. A concentração e o tempo de aplicação podem variar dependendo das condições e localização geográfica.
[00142] Em configurações específicas, a aplicação da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma (ou seja, uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas) e/ou uma composição derivada das mesmas, é aplicada às folhas de um planta de soja. O tempo de aplicação pode variar dependendo das condições e localização geográfica.
[00143] Vários métodos são fornecidos para controlar uma praga de plantas, como aquela que causa uma doença de plantas, em uma área de cultivo que contém uma planta suscetível à praga de plantas ou a uma doença de plantas causada por uma praga de plantas. O método compreende plantar a área de cultivo com sementes ou plantas suscetíveis à doença ou praga de plantas; e aplicar na planta suscetível à doença ou praga, na semente ou na área de cultivo da planta suscetível à doença ou praga uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma (ou seja, uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou um derivado ativo de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas), e/ou uma composição derivada da mesma, em que a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma controla a praga de plantas sem afetar significativamente a planta.
Em configurações específicas, a quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare.
Além disso, é fornecido um método para cultivar uma planta suscetível a uma praga de plantas ou a uma doença de plantas causada por uma praga de plantas.
O método compreende aplicar em uma planta suscetível à doença ou praga, em uma semente ou em uma área de cultivo da planta suscetível à doença ou praga uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma.
Em certas configurações, a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas.
Várias quantidades eficazes de pelo menos uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma são divulgadas em outra parte deste documento e, em um exemplo não-limitante, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare.
Em algumas configurações, a composição é derivada de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma e pode compreender uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas; ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas.
[00144] Métodos para aumentar o rendimento das plantas são fornecidos. O "rendimento" da planta refere-se à qualidade e/ou quantidade de biomassa produzida pela planta. Por "biomassa" entende-se qualquer produto de planta medido. Um aumento na produção de biomassa é qualquer melhoria no rendimento do produto de planta medido. Um aumento no rendimento pode compreender qualquer aumento estatisticamente significativo incluindo, mas não se limitando a, pelo menos um aumento de 1%, pelo menos um aumento de 3%, pelo menos um aumento de 5%, pelo menos um aumento de 10%, pelo menos um aumento de 20% aumento, pelo menos 30%, pelo menos 50%, pelo menos 70%, pelo menos 100% ou um aumento maior no rendimento em comparação com uma planta não exposta à cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma. Um método para aumentar o rendimento em uma planta também é fornecido e compreende aplicar a um cultivo ou área de cultivo uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare, e em que a referida composição controla uma praga de planta, aumentando assim o rendimento. Um método para aumentar o rendimento em uma planta também é fornecido, o qual compreende aplicar a um cultivo ou área de cultivo uma quantidade eficaz de uma composição derivada de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, um esporo ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a referida composição controla uma praga de planta, aumentando assim o rendimento.
[00145] Conforme usado neste documento, uma "área de cultivo" compreende qualquer região na qual se deseja cultivar uma planta. Essas áreas de cultivo incluem, mas não estão limitadas a, um campo no qual uma planta é cultivada (como um campo de cultivo, uma seara, um campo de árvores, uma floresta administrada, um campo para o cultivo de frutas e vegetais, etc.), uma estufa, uma câmara de crescimento, etc.
[00146] Em outras configurações, uma planta de interesse (ou seja, planta suscetível a uma praga de plantas ou doença de plantas causada por uma praga de plantas) e/ou a área de cultivo que compreende a planta, pode ser tratada com uma combinação de uma quantidade eficaz da cepa aqui fornecida, uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada e uma quantidade eficaz de um biocida ou outro agente de biocontrole. Por "tratado com uma combinação de" ou "aplicação de uma combinação de" uma cepa bacteriana aqui fornecida, uma variante ativa da mesma, uma composição dela derivada, e um biocida ou outro agente de biocontrole a uma planta, área de cultivo ou campo, entende-se que um ou mais de um determinado campo, planta e/ou erva daninha são tratados com uma quantidade eficaz de uma ou mais das cepas bacterianas aqui fornecidas ou variante ativa da mesma e um ou mais biocidas ou outro agente de biocontrole, a fim de alcançar um efeito desejado. Além disso, a aplicação de uma das cepas bacterianas aqui fornecidas, uma variante ativa da mesma e/ou uma composição delas derivadas e o biocida ou outro agente de biocontrole pode ocorrer antes do plantio do cultivo (por exemplo, ao solo, ou à planta). Além disso, a aplicação das cepas bacterianas aqui fornecidas, uma variante ativa da mesma e/ou uma composição delas derivadas e o biocida ou outro agente de biocontrole podem ser simultâneas ou as aplicações podem ser em momentos diferentes (sequenciais), desde que o efeito desejado for alcançado.
[00147] Em uma configuração não-limitante, a variante ativa compreende uma cepa bacteriana aqui fornecida que é resistente a um ou mais biocidas. Em configurações específicas, a cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma (ou seja, uma célula de pelo menos uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639,
AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas) é resistente ao glifosato. Em tais métodos, uma planta, cultivo ou área de cultivo é tratada com uma combinação de uma quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma que é resistente ao glifosato e uma quantidade eficaz de glifosato, em que a quantidade eficaz de glifosato é tal que controla seletivamente as ervas daninhas sem que o cultivo seja significativamente danificado.
[00148] Em outra configuração não-limitante, a variante ativa compreende uma cepa bacteriana aqui fornecida que é resistente ao glufosinato. Em tais métodos, uma planta, cultivo ou área de cultivo é tratada com uma combinação de uma quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma que é resistente ao glufosinato e uma quantidade eficaz de glufosinato, em que a quantidade eficaz de glufosinato é tal que controla seletivamente as ervas daninhas sem que o cultivo seja significativamente danificado. Em tais configurações, a quantidade eficaz da cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa é suficiente para resultar em um aumento estatisticamente significativo na saúde da planta, rendimento e/ou crescimento em comparação com a saúde da planta, rendimento e/ou crescimento que ocorre quando a mesma concentração de uma cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma que não foi modificada para ser resistente ao glufosinato é aplicada em combinação com a quantidade eficaz do glufosinato ou seu derivado ativo. Em uma outra configuração, a cepa bacteriana aqui fornecida ou variante ativa da mesma compreende uma quantidade eficaz de uma célula de pelo menos uma dentre AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, ou um esporo, ou um foresporo ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas. V. Biocidas para uso em combinação com a cepa bacteriana aqui fornecida ou suas variantes ativas
[00149] Conforme discutido em outro lugar neste documento, a cepa bacteriana fornecida neste documento ou sua variante ativa e/ou uma composição dela derivada pode ser usada em combinação com um biocida (isto é, um herbicida, inseticida, fungicida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo). Nesses casos, a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa é compatível com o biocida de interesse.
[00150] Por "tolerância a herbicidas, inseticidas, fungicidas, pesticidas, inseticidas ou outros produtos químicos de proteção ao cultivo ou resistência a inseticidas, fungicidas, pesticidas, inseticidas ou outros produtos químicos de proteção ao cultivo" entende-se a capacidade de um organismo (isto é, a planta e/ou a cepa bacteriana aqui fornecida ou sua variante ativa, etc.) para sobreviver e se reproduzir após a exposição a uma dose do herbicida, inseticida, fungicida, pesticida, inseticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo que normalmente é letal para o organismo de tipo selvagem.
[00151] Os herbicidas que podem ser usados nos diversos métodos e composições aqui divulgados incluem glifosato, inibidores de ACCase (Arloxifenoxi propionato (FOPS)); Inibidores de ALS (Sulfonilureia (SU)), Imidazonlinona (IMI), Pirimidinas (PM)); inibidor de proteína de microtúbulo (Dinitroanilina (DNA)); auxinas sintéticas (fenoxi (P)), ácido benzoico (BA), ácido carboxílico (CA)); Inibidor do fotossistema II (triazina (TZ)), triazinona (TN), nitrilos (NT), benzotiadiazinonas (BZ), ureias (EUA)); Inibidor de EPSP sintase (glicinas (GC)); Inibidor da síntese de glutamina (ácido fosfínico (PA)); Inibidor da DOXP sintase (Isoxazolidinona (IA)); Inibidor de HPPD (Pirazol (PA)), Triketona (TE)); Inibidores de PPO (difeniléter (DE), N- fenilftalimida (NP) (Ary triazinona (AT)); inibidores de VLFA (cloroacetamida (CA)), oxiacetamida (OA)); Inibidor do fotossistema I (Bipiridílio (BP)); entre outros.
[00152] Pesticidas que podem ser usados nos diversos métodos e composições aqui divulgados incluem imidacloprid clotianidina, compostos de arilpirazol (WO2007103076); organofosfatos, fenil pirazol, piretoides caramoiloximas, pirazoles, amidinas, hidrocarbonetos halogenados, carbamatos e seus derivados, terbufos, cloropirifos, fipronil, cloretoxifos, telfutrina, carbofurano, imidacloprida, tebupirimfos (Patente do EUA 5,849,320).
[00153] Os inseticidas que podem ser usados nos diversos métodos e composições aqui divulgados incluem imidacloprida, beta-ciflutrina, ciantraniliprol, diazinon, lambda- cialotrina, metiocarbe, pimetrozina, pirifluquinazon, espinetoram, espirotetramat, tiodicarbe, e Ti-435,
carbamatos, moduladores do canal de sódio/bloqueadores do canal de sódio dependentes de voltagem, piretroides como DDT, oxadiazinas como indoxacarbe, agonistas/antagonistas do receptor de acetilcolina, moduladores do receptor de acetilcolina, nicotina, bensultap, cartap, cloronicotinis, como acetamipride, bifentrina, clotianidina, dinotefurano, imidacloprid, nitenpiram, nitiazina, tiacloprid e tiametoxame, espinosinas como espinosade, ciclodieno organoclorados como canfeclor, clordano, endossulfano, gama-HCH, HCH, heptacloro, lindano, metoxiclor, fiproles como acetoprole, ethiprole, fipronil, vaniliprole, canal de cloreto, 6,1 mectinas como avermectina, emamectina, emamectina-benzoato, ivermectina e milbemicina, réplicas do hormônio juvenile como diofenolano, epofenonano, fenoxicarb, hidropreno, quinopreno, metopreno, piriproxifeno, e tripreno, agonistas de ecdisona/disruptores, diacil-hidrazina, cromafenozida, halofenozida, metoxifenozida, tebufenozida, inibidores da biossíntese de quitina, benzoilureias como bistrifluron, clorfluazuron, diflubenzuron, fluazuron, flucicloxuron, flufenoxuron, hexaflumuron, lufenuron, novaluron, noviflumuron, penfluron, teflubenzuron, triflumuron, buprofezin, ciromazina, inibidores da fosforilação oxidativa, disruptores de ATP, diafentiuron, organotinas como azociclotina, ciexatina, fenbutatin-óxido, pirroles como clorfenapir, os dinitrof enóis como binapacril, dinobuton, dinocap, DNOC, inibidores de transporte de elétrons de sítio I, METI's como fenazaquina, fenpyroximate, pirimidifeno, piridabeno, tebufenpirade, tolfenpirade, hidrametinon, dicofol, rotenona, espirodquinocil como fluacripiramina, ácidos, espirodquinocil, espirodquinocil, fluacripiramideto como flonicamida, agonistas octopaminérgicos como amitraz, inibidores de ATPase estimulados por magnésio como propargite, BDCA's como N2-[1,1-dimetil-2- (metilsulfonil)etil]-3-iodo-N1-[2-metil-4- [1,2,2,2-- tetrafluoro-1-(trifluorometil)etil]fenil]-1,2-benzeno, análogos de nereistoxina como oxalato de tiociclame e tiossulta de sódio. De preferência, o inseticida é um ou mais de clorpirifos e teflutrina.
[00154] Nematicidas que podem ser usados nos diversos métodos e composições aqui divulgados incluem, mas não estão limitados a, acibenzolar-S-metil, uma avermectina (por ex., abamectina), nematicidas de carbamato (por exemplo, aldicarbe, tiadicarbe, carbofurano, carbosulfano, oxamil, aldoxicarbe, etoprop, metomil, benomil, alanicarbe), nematicidas organofosforados (por ex., fenamifos (phenamifos), fensulfotion, terbufos, fostiazato, dimetoato, fosfocarbe, diclofention, isamidofos, fostietan, isazofos etoprofos, cadusafos, terbufos, clorpirifos, diclofention, heterofos, isamidofos, mecarfon, forate, tionazin, triazofos, diamidafos, fostietan, fosfamidon) e certos fungicidas como captan, tiofanato-metílico e tiabendazol.
[00155] Os fungicidas que podem ser utilizados nos diversos métodos e composições aqui divulgados incluem fungicidas alifáticos de nitrogênio (butilamina, cimoxanil, dodicina, dodina, guazatina, iminoctadina); fungicidas de amida (benzovindiflupir, carpropamida, cloraniformetano, ciflufenamida, diclocimet, diclocymet, dimoxistrobina, fenaminstrobina, fenoxanil, flumetover, furametpir, isofetamida, isopirazam, mandestrobina, mandipropamida, metominostrobina, orisastrobina, pentiopirade, procloraz, quinazamida, siltiofamida, triforina); fungicidas de ácido acilamino (benalaxil, benalaxil-M, furalaxil, metalaxil, metalaxil-M, pefurazoato, valifenalato); fungicidas de anilídeos (benalaxil, benalaxil-M, bixafen, boscalide, carboxina, fenehexamida, fluxapyroxad, isotianil, metalaxil, metalaxil-M, metsulfovax, ofurace, oxadixil, oxicarboxina, penflufen, piracarbolida, sedaxano, tifluzamida, tiadinil, vanguarda); fungicidas de benzanilida (benodanil, flutolanil, mebenil, mepronil, salicilanilida, tecloftalam); fungicidas de furanilida (fenfuram, furalaxil, furcarbanil, metfuroxam); fungicidas de sulfonanilida (flusulfamida); fungicidas de benzamida (ácido benzohidroxâmico, fluopicolida, fluopirame, tioximida, triclamida, zarilamida, zoxamida); fungicidas de furamida (cyclafuramida, furmeciclox); fungicidas de fenilsulfamida (diclofluanida, tolilfluanida); fungicidas de sulfonamidas (amisulbrom, ciazofamida); fungicidas de valinamida (bentiavalicarbe, iprovalicarbe); fungicidas antibióticos (aureofungina, blasticidina-S, cicloheximida, griseofulvina, casugamicina, moroxidina, natamicina, polioxinas, polioxorim, estreptomicina, validamicina); fungicidas de estrobilurina (fluoxastrobina, mandestrobina); fungicidas de metoxiacrilato de estrobilurina (azoxistrobina, bifujunzhi, coumoxistrobina, enoxastrobina, flufenoxistrobina, jiaxiangjunzhi, picoxistrobina, piraoxistrobina); fungicidas de metoxicarbanilato de estrobilurina (piraclostrobina, pirametotrobina, triclopiricarbe); fungicidas de metoximinoacetamida estrobilurina (dimoxistrobina, fenaministrobina, metominostrobina, orisastrobina); fungicidas de metoximinoacetamida estrobilurina (cresoxime-metilo, trifloxistrobina); fungicidas aromáticos (bifenil,
clorodinitronaftalenos, cloronebe, clorotalonil, cresol, dicloran, fenjuntong, hexaclorobenzeno, pentaclorofenol, quintozeno, pentaclorofenóxido de sódio, tecnazeno, triclorotrinitrobenzenos); fungicidas arsênicos (asomato, urbacida); fungicidas de aril fenil cetona (metrafenona, piriofenona); fungicidas de benzimidazol (albendazol, benomil, carbendazim, clorfenazol, cipendazol, debacarb, fuberidazol, mecarbinzida, rabenzazol, tiabendazol); fungicidas precursores do benzimidazol (furofanato, tiofanato, tiofanato-metilo); fungicidas benzotiazois (bentalurão, bentiavalicarbe, bentiazol, clobenthiazone, probenazol); fungicidas botânicos (alicina, berberina, carvacrol, carvone, osthol, sanguinarina, santonina); fungicidas de difenil em ponte (bithionol, diclorofeno, difenilamina, hexaclorofeno, parinol); fungicidas de carbamato (bentiavalicarbe, furofanato, iodocarbe, iprovalicarbe, picarbutrazox, propamocarbe, piribencarbe, tiofanato, tiofanato-metilo, tolprocarbe); fungicidas de benzimidazolilcarbamato (albendazol, benomil, carbendazim, cipendazol, debacarb, mecarbinzida); fungicidas de carbanilato (diehofencarbe, piraclostrobina, pirametostrobina, triclopiricarbe); fungicidas de conazol, fungicidas de conazol (imidazoles) (climbazol, coagrimazol, imazalil, oxpoconazol, procloraz, triflumizol); fungicidas de conazol (triazoles) (azaconazol, bromuconazol, ciproconazol, diclobutrazol, difenoconazol, diniconazol, diniconazol-M, epoxiconazol, etaconazol, fenbuconazol, fluquinconazol, flusilazol, flutriafol, furconazol, furconazol-cis, hexaconazol, imibenconazol, ipconazol, metconazol, miclobutanil, penconazol, propiconazol, protioconazol, quinconazol, simeconazol, tebuconazol, tetraconazol, triadimefon,
triadimenol, triticonazol, uniconazol, uniconazol-P); fungicidas de cobre (acipetacs-cobre, mistura de Bordeaux, mistura de Borgonha, mistura de Cheshunt, acetato de cobre, carbonato de cobre, básico, hidróxido de cobre, naftenato de cobre, oleato de cobre, oxicloreto de cobre, silicato de cobre, sulfato de cobre, sulfato de cobre, básico, cromato de zinco, cufranebe, cuprobam, óxido cuproso, mancopper, oxina-cobre, saisentong, tiodiazol-cobre); fungicidas de cianoacrilato (benzamacril, fenamacril); fungicidas de dicarboximida (famoxadona, fluoroimida); fungicidas de dicarboximida de diclorofenil (clozolinato, diclozolina, iprodiona, isovaledione, miclozolina, procimidona, vinclozolina); fungicidas de ftalimida (captafol, captan, ditalimfos, folpet, tioclorfenfim); fungicidas de dinitrofenol (binapacril, dinobuton, dinocap, dinocap-4, dinocap-6, meptyldinocap, dinocton, dinopenton, dinosulfon, dinoterbon, DNOC); fungicidas de ditiocarbamato (amobam, asomate, azithiram, carbamorph, cufranebe, cuprobam, disulfiram, ferbam, metam, nabam, tecoram, thiram, urbacide, ziram); fungicidas cíclicos de ditiocarbamato (dazomet, etem, milneb); fungicidas de ditiocarbamato polimérico (mancopper, mancozebe, manebe, metirame, policarbamato, propinebe, zinebe); fungicidas de ditiolano (isoprotiolano, saijunmao); fungicidas fumigantes (dissulfeto de carbono, cianogênio, ditioeter, brometo de metila, iodeto de metila, tetratiocarbonato de sódio); fungicidas de hidrazida (benquinox, saijunmao); fungicidas de imidazol (cazofamida, fenamidona, fenapanil, glicodina, iprodiona, isovaledione, pefurazoato, triazoxida); fungicidas de conazol (imidazoles) (climbazol, clotirazol, imazalil, oxpoconazol, procloraz, triflumizol); fungicidas inorgânicos
(azida de potássio, tiocianato de potássio, azida de sódio, enxofre, ver também fungicidas de cobre, ver também fungicidas inorgânicos de mercúrio); fungicidas de mercúrio; fungicidas inorgânicos de mercúrio (cloreto de mercúrio, óxido de mercúrio, cloreto mercuro); fungicidas de organomercúrio ((3- etoxipropil)brometo de mercúrio, acetato de etil-mercúrio, brometo de etil-mercúrio, cloreto de etil-mercúrio, 2,3- dihidroxipropil-mercaptido, fosfato de etil-mercúrio, N-(etil- mercúrio)-p-toluenossulfonanilida, hidrazafeno, cloreto de 2- metoxietilmetacúrio, benzoato de metilmercúrio, dicianodiamida de metilmercúrio, pentaclorofenóxido de metilmercúrio, 8- fenilmetilmercurioxiquinolina, fenilmercuriurea, acetato de fenilmercúrio, cloreto de fenilmercúrio, derivado de fenilmercúrio de pirocatecol, nitrato de fenilmercúrio, salicilato de fenilmercúrio, tiomersal, acetato de tolilmercúrio); fungicidas de morfolina (aldimorfe, benzamorf, carbamorfe, dimetomorfe, dodemorfe, fenepropimorfe, flumorfe, tridemorfe); fungicidas organofosforados (anfropilfos, ditalimfos, EBP, edifenphos, fosetil, hexiltiofos, inezin, iprobenfos, izopamfos, kejunlin, fosdifen, pirazofos, tolclofos-metilo, triamifos); fungicidas organotínicos (decafentina, fentina, óxido de tributilestanho); fungicidas de oxatiina (carboxina, oxicarboxina); fungicidas de oxazol (clozolinato, diclozolina, drazoxolon, famoxadona, hymexazol, metazoxolon, miclozolina, oxadixil, oxathiapiprolin, pirisoxazol, vinclozolina); fungicidas de polissulfeto (polissulfeto de bário, polissulfeto de cálcio, polissulfeto de potássio, polissulfeto de sódio); fungicidas de pirazole (benzovindiflupir, bixafen, fenpirazamina, fluxapiroxad, furametpyr, isopirazam, oxatiapiprolin, penflufen,
pentiopirad, piraclostrobin, pyrametostrobin, piraoxistrobin, rabenzazole, sedaxane); fungicidas de piridina (boscalide, butiobato, dipirona, fluaziname, fluopicolida, fluopirame, parinol, picarbutrazox, piribencarbe, piridinitril, pirifenox, pirisoxazol, piroxiclopiricarbe); fungicidas de pirimidinas (bupirimate, diflumetorim, dimethirimol, etirimol, fenarimol, ferimzone, nuarimol, triarimol); fungicidas de anilinopirimidinas (ciprodinil, mepanipirimol, pirimetanil); fungicidas de pirrole (dimetaclone, fenpiclonil, fludioxonil, fluoroimida); fungicidas de amônio quaternário (berberina, sanguinarina); fungicidas de quinolina (etoxileno, halacrinado, sulfato de 8-hidroxiquinolina, quinacetol, quinoxileno, tebufloquina); fungicidas de quinonas (cloranil, diclone, ditianon); fungicidas de quinoxalinas (chinometionat, clorquinox, tioquinox); fungicidas de tiadiazole (etridiazole, saisentong, tiodiazole-cobre, tiazole de zinco); fungicidas de tiazois (etaboxam, isotianil, metsulfovax, octhilinone, oxathiapiprolin, tiabendazol, tifluzamida); fungicidas de tiazolidinas (flutianil, thiadifluor); fungicidas de thiocarbamato (metassulfocarbe, protiocarbe); fungicidas de tiofeno (etaboxam, isofetamida, siltiofamida); fungicidas de triazina (anilazina); fungicidas de triazol (amisulbrom, bitertanol, fluotrimazole, triazbutil); fungicidas de conazol (triazois) (azaconazol, bromuconazol, ciproconazol, diclobutrazol, difenoconazol, diniconazol, diniconazol-M, epoxiconazol, etaconazol, fenbuconazol, fluquinconazol, flusilazol, flutriafol, furconazol, furconazol-cis, hexaconazol, huanjunzuo, imibenconazol, ipconazol, metconazol, miclobutanil, penconazol, propiconazol, protioconazol, quinconazol, simeconazol, tebuconazol, tetraconazol,
triadimefon, triadimenol, triticonazol, uniconazol, uniconazol-P); fungicidas de triazolopirimidina (ametoctradina); fungicidas de uréia (bentaluron, pencicuron, quinazamida); fungicidas de zinco (acipetacs-zinco, cromato de cobre zinco, cufranebe, mancozebe, metirame, policarbamato, polioxorim-zinco, propinebe, naftenato de zinco, tiazol de zinco, triclorofenóxido de zinco, zinebe, zirame); fungicidas não classificados (acibenzolar, acypetacs, álcool alílico, cloreto de benzalkonium, betoxazin, bromotalonil, quitosano, cloropicrina, DBCP, ácido desidroacético, diclomezina, pirocarboneto de dietila, etilicina, fenaminosulf, fenitropano, fenepropidina, formaldeído, furfural, hexaclorobutadieno, isotiocianato de metila, nitrostireno, nitrotal-isopropil, OCH, laurilato de pentaclorofenil, 2- fenilfenol, ftalida, piperalina, propamidina, proquinazida, piroquilon, ortofenilfenóxido de sódio, espiroxamina, sultropen, ticiofen, triciclazole) ou mefenoxam.
[00156] Em algumas configurações da invenção, um kit de peças é fornecido compreendendo uma cepa bacteriana aqui fornecida ou uma variante ativa da mesma e/ou uma composição dela derivada e pelo menos um biocida, em um arranjo espacialmente separado. Em algumas configurações, o biocida é um herbicida, fungicida, inseticida, pesticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo.
[00157] Configurações não-limitantes da invenção incluem:
1. Uma composição compreendendo: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida cepa bacteriana ou uma variante ativa da mesma está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml; (b) pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que o referido esporo, foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos ou uma variante ativa dos mesmos está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml; e/ou (c) um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015.
2. A composição da configuração 1, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
3. A composição da configuração 2, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani,
Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
4. A composição da configuração 1, em que a referida praga é uma praga de insetos.
5. A composição da configuração 4, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero ou hemíptero.
6. A composição de qualquer uma das configurações 1-5, em que a referida célula, esporo, foresporo, ou uma combinação de células, foresporos ou uma variante ativa de qualquer uma delas está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1010 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1010 CFU/ml.
7. A composição de qualquer uma das configurações 1-6, em que a referida composição compreende uma pasta celular.
8. A composição, de acordo com qualquer uma das configurações 1-7, em que a referida composição compreende um pó molhável.
9. Uma composição que compreende uma pasta de celular que compreende uma célula, um esporo, um foresporo ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos de pelo menos um da cepa bacteriana AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma célula, esporo, foresporo, ou uma combinação de células, esporos e/ou esporos com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que uma quantidade eficaz da referida composição controla uma praga de plantas ou melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta.
10. A composição da configuração 9, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
11. A composição da configuração 10, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
12. A composição da configuração 9, em que a referida praga de plantas é uma praga de insetos.
13. A composição da configuração 12, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero ou hemíptero.
14. Uma composição que compreende um pó molhável compreendendo: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida cepa bacteriana ou uma variante ativa da mesma está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml;
(b) pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que o referido esporo, foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos ou uma variante ativa dos mesmos está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml; e/ou (c) um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015; - em que uma quantidade eficaz da referida composição uma praga de plantas ou melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta.
15. A composição da configuração 14, em que a referida praga de plantas compreende pelo menos uma praga fúngica.
16. A composição da configuração 15, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
17. A composição da configuração 14, em que a referida praga de plantas compreende pelo menos uma praga de insetos.
18. A composição da configuração 16, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
19. A composição, de acordo com qualquer uma das configurações 14-18, em que a referida variante ativa é resistente a pelo menos um herbicida, nematicida, fungicida, pesticida, inseticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo.
20. A composição da configuração 19, em que a referida variante ativa é selecionada sob pressão de herbicida, fungicida, pesticida, inseticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo e é resistente ao referido herbicida, fungicida, pesticida, inseticida ou outro produto químico de proteção ao cultivo.
21. A composição, de acordo com qualquer uma das configurações 14-20, em que foi transformada com um gene de resistência a herbicidas que torna a célula, esporo, foresporo ou combinação de células, foresporo e/ou esporos resistentes a herbicidas.
22. A composição da configuração 21, em que o referido herbicida é selecionado do grupo que consiste em glifosato, glufosinato (inibidor da glutamina sintase), sulfonilureia e herbicidas imidazolinona (inibidores da síntese de aminoácidos de cadeia ramificada).
23. Uma cultura biologicamente pura isolada de uma cepa bacteriana que compreende uma célula, um esporo, um foresporo ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma célula, um esporo, um foresporo ou combinação de células, esporos e/ou foresporos com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que uma quantidade eficaz da referida célula, esporo, foresporo, ou combinação de células, esporos e/ou foresporos controla uma praga de plantas ou melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta.
24. A cultura biologicamente pura isolada da configuração 23, em que a referida cepa bacteriana é resistente a um biocida selecionado dentre um herbicida, um fungicida, um pesticida, um inseticida ou um produto químico de proteção ao cultivo, em que a referida cultura é produzida crescendo na presença do referido biocida.
25. A cultura biologicamente pura isolada da configuração 24, em que a referida cultura biologicamente pura é capaz de crescer na presença de glifosato.
26. A cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das configurações 23-25, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
27. A cultura biologicamente pura isolada da configuração 26, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
28. A cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das configurações 23-25, em que a referida praga de plantas compreende pelo menos uma praga de insetos.
29. A cultura biologicamente pura isolada da configuração 28, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
30. Uma cultura bacteriana cultivada a partir de uma célula, um esporo, um foresporo ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma célula, esporo, foresporo, ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que a referida cultura bacteriana é capaz de crescer na presença de glufosinato; e - em que uma quantidade eficaz de a referida cultura bacteriana controla uma praga de plantas ou melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta.
31. A cultura bacteriana da configuração 30, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
32. A cultura bacteriana da configuração 31, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp,
Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
33. A cultura bacteriana da configuração 30, em que a referida praga de plantas é uma praga de insetos.
34. A cultura bacteriana da configuração 33, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
35. Um método para controlar uma população de pragas de plantas que compreende o contato da referida população com uma quantidade eficaz da composição de qualquer uma das reivindicações 1-22, a cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das reivindicações 23-29, ou a cultura bacteriana de qualquer uma das reivindicações 30-34, em que a referida cepa bacteriana controla a referida praga de plantas.
36. Um método para cultivar uma planta suscetível a uma praga de plantas ou doença de plantas ou para melhorar uma característica agronômica de interesse em uma planta, compreendendo aplicar à planta: (a) uma quantidade eficaz de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; (b) uma quantidade eficaz de pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; e/ou, (c) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655,
AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que a referida quantidade eficaz controla a referida praga de plantas ou melhora a característica agronômica de interesse.
37. O método da configuração 36, em que o referido método aumenta o rendimento da planta suscetível à praga da plantas
38. O método da configuração 36 ou 37, em que a referida planta é soja.
39. O método de qualquer uma das configurações 36-38, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
40. O método da configuração 39, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici,
Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
41. O método de qualquer uma das configurações 36-38, em que a referida praga de plantas é uma praga de insetos.
42. O método da configuração 41, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
43. Um método para controlar uma praga de plantas em uma área de cultivo, compreendendo: (a) plantar a área de cultivo com sementes ou plantas suscetíveis à praga de plantas; e (b) aplicar na semente ou planta suscetível à praga de plantas: (i) uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; (ii) uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; ou (iii) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que a referida quantidade eficaz controla uma praga de plantas em uma área de cultivo.
44. O método da configuração 43, em que a referida semente ou planta é soja.
45. O método da configuração 43 ou 44, em que a referida praga de plantas compreende uma praga fúngica.
46. O método da configuração 45, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
47. O método da configuração 43 ou 44, em que a praga de plantas é uma praga de insetos.
48. O método da configuração 46, em que a praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
49. O método de qualquer uma das configurações 43-48, em que o referido método compreende ainda a aplicação de uma quantidade eficaz de um biocida, em que a referida quantidade eficaz do biocida controla seletivamente um organismo de interesse sem danificar significativamente a referida semente ou planta.
50. O método da configuração 49, em que a referida célula, esporo, foresporo, ou combinação de células, esporos e/ou foresporos ou variante ativa de qualquer um deles e o biocida são aplicados simultaneamente.
51. O método da configuração 49, em que a referida célula, esporo, foresporo, ou combinação de células, esporos e/ou foresporos ou variante ativa de qualquer um deles e o biocida são aplicados sequencialmente.
52. O método de qualquer uma das configurações 49-51 em que o biocida é um nematicida.
53. Um método para produzir uma cepa bacteriana modificada, compreendendo: (a) fornecer uma população de uma célula, um esporo, um foresporo ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma célula, esporo, foresporo, ou uma combinação de células, esporos e/ou foresporos com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida população é suscetível a um biocida de interesse;
(b) cultivar a referida população na presença do biocida de interesse; e, (c) selecionar uma cepa bacteriana modificada que possua uma maior resistência ao referido biocida de interesse.
54. O método da configuração 53, a referida cultura compreende aumentar a concentração do biocida ao longo do tempo.
55. O método da configuração 53 ou 54, em que o referido biocida é glifosato ou glufosinato.
56. Um método para tratar ou prevenir uma doença ou dano de plantas causado por uma praga de plantas, que compreende aplicar a uma planta com a referida praga de planta, a referida doença de planta, o referido dano, suscetível à referida praga de planta ou em risco de desenvolver a referida doença ou dano de planta: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 CFU per hectare; (b) pelo menos um de um esporo ou foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 CFU per hectare; e/ou (c) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que a quantidade eficaz controla a praga de plantas que causa a doença da planta.
57. O método da configuração 56, em que a referida planta é soja.
58. O método da configuração 56 ou 57, em que a cepa bacteriana ou sua variante ativa trata ou previne uma ou mais doenças de plantas.
59. O método da configuração 58, em que uma ou mais doenças de plantas são causadas por uma praga fúngica.
60. O método da configuração 59, em que a referida praga fúngica compreende um ou mais patógenos fúngicos selecionados do grupo que consiste em Aspergillus spp., Aspergillus flavus, Botrytis cinerea, Cersospora spp, Cercospora sojina, Cercospora beticola, Alternaria solani, Rhizoctonia solani, Blumeria graminis, Bremia lactucae,Erysiphe necator, Podosphaera spp., Podosphaera xanthii, Golovinomyces cichoracearum, Erysiphe lagerstroemiae, Sphaerotheca pannosa, Colletotrichm spp., Colletotrichum sublineolum, Colletotrichum cereale, Colletotrichum gloeosporiodes, Apiognomonia errabunda, Apiognomonia veneta, Discula fraxinea, Plasmopara viticola, Pseudoperonospora cubensis, Peronospora spp., Peronospora belbahrii, Peronospora lamii, Plasmopara obduscens, Pythium cryptoirregulare, Pythium aphanidermatum, Pythium irregulare, Pythium sylvaticum, Pythium myriotylum, Pythium ultimum, Phytophthora spp., Phytophthora capsici, Phytophthora nicotianae, Phytophthora infestans, Phytophthora tropicalis, Phytophthora sojae, Fusarium spp., Fusarium virguliforme, Fusarium graminearum, Fusarium solani, Fusarium oxysporum, Fusarium graminicola, Gibberella zeae, Colletotrichum graminicola, Phakopsora spp., Phakopsora meibomiae, Phakopsora pachyrizi, Puccinia triticina, Puccinia recondita, Puccinia striiformis, Puccinia graminis, Puccinia spp.,Venturia inaequalis, Verticillium spp, Mycosphaerella spp., Mycosphaerella fijiensis, Monilinia fructicola, Monilinia lax, e Monilinia fructigena.
61. O método da configuração 58, em que a referida uma ou mais doenças de plantas são causadas por uma praga de insetos.
62. O método da configuração 61, em que a referida praga de insetos é um inseto coleóptero, lepidóptero e/ou hemíptero.
63. Um kit de peças que compreende um biocida e pelo menos um dos seguintes: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, (b) pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287,
AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; e/ou (c) um sobrenadante, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP045885, AIP075655, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP059286, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015.
64. O kit da configuração 63, em que o biocida é um herbicida, fungicida, inseticida, nematicida ou pesticida.
[00158] Os seguintes exemplos são oferecidos a título de ilustração e não como limitação.
EXEMPLOS Exemplo 1: Cepas microbianas e métodos de cultivo Quadro 2: Cepas bacterianas selecionadas para avaliação da inibição da atividade da praga Gênero de Data de identificaç ID da NRRL depósit ão Vizinho 16S mais Cepa N° o taxonômica próximo 3 de AIP04588 B- agosto 5 67650 de 2018 Pseudomonas chlororaphis 3 de AIP07565 B- agosto 5 67651 de 2018 Pseudomonas chlororaphis
3 de AIP00947 B- agosto 4 67657 de 2018 Bacillus subtilis 3 de AIP02452 B- agosto 5 67661 de 2018 Bacillus thuringiensis 3 de AIP03328 B- agosto 7 67659 de 2018 Bacillus subtilis 3 de AIP09379 B- agosto 8 67660 de 2018 Bacillus subtilis 3 de AIP06163 B- agosto 9 67654 de 2018 Pseudomonas chlororaphis 3 de AIP08286 B- agosto 2 67656 de 2018 Pseudomonas chlororaphis 3 de AIP05818 B- agosto 7 67655 de 2018 Pseudomonas chlororaphis 3 de AIP05928 B- agosto 6 67653 de 2018 Pseudomonas chlororaphis 3 de AIP03670 B- agosto 6 67652 de 2018 Pseudomonas chlororaphis
[00159] As cepas bacterianas apresentadas no Quadro 2 foram cultivadas em meio. O Quadro 3A resume o tempo de incubação e a concentração de bactérias (CFU/ml) alcançada.
O Quadro 3B fornece a receita do meio.
Quadro 3A: Condições de cultura ID da Cepa Tempo de incubação (horas) Concentração (CFU/ml) AIP045885 72 2,11E+10 AIP075655 72 4,46E+10 AIP009474 72 3,62E+08 AIP061382 72 1,57E+10 AIP029105 72 4,90E+09 AIP024525 72 3,47E+09 AIP033287 72 7,40E+08 AIP093798 72 4,27E+09 AIP061639 72 2,63E+10 AIP082862 72 1,69E+10 AIP058187 73 2,48E+10 AIP059286 73 3,12E+10 AIP036706 72 2,22E+10
Quadro 3B: Receita do meio Quantidade Ingrediente (g/L) Fosfato de Sódio Dibásico 11,33 Heptahidratado Fosfato de Potássio 3 Monobásico Cloreto de Amônio 1,55 L(+)-Glutamato monossódico 14,01
Sulfato de Magnésio 0,5 Heptahidratado Extrato de Levedura Amberex10 Sulfato de Zinco 0,05 Sulfato de Ferro (II) 0,004 Heptahidratado Dextrose 75 Exemplo 2: Avaliação de cepas bacterianas contra ferrugem asiática da soja
[00160] Material vegetal: Foi utilizada a cultivar de soja suscetível Williams 82 na avaliação das cepas pela técnica de folha solta (Twizeyimana and Hartman, 2010) e usando planta inteira em câmaras de crescimento. Resumidamente, sementes de soja foram semeadas em recipientes de plástico de 18 células que foram preenchidas com mistura sem solo (Sunshine Mix, LC1; Sun Gro Horticulture Inc., Bellevue, WA) e colocadas dentro de uma bandeja. As células foram fertilizadas no plantio com pellets de liberação lenta (Osmocote 19-6-12; 2 pellets por cm2). As bandejas foram mantidas dentro de uma câmara de crescimento (Percival Scientific, Inc., Boone, IA) mantida a 70% de umidade relativa (UR) com um ciclo diário de 14 h de luz e 10 h de escuridão a 24º e 20 ° C, respectivamente.
[00161] Cepas bacterianas: As cepas apresentadas no Quadro 2 foram semeadas em meio Luria Bertani ou em cultura líquida, meio CHA que consiste em, por L, NaCl (5g), triptona (10g), caldo nutriente (8g), CaCl2 (0,14mM), MgCl2,6H2O (0,2mM), e MnCl2,4H2O (0,01 mM) e foram purificados para obter colônias únicas. Colônias isoladas foram caracterizadas morfologicamente ou por meio de técnicas moleculares.
[00162] Isolado de Phakopsora pachyrhizi: O isolado FL07-1 foi usado em todas as inoculações. O isolado foi um único esporo isolado obtido de folhas de soja infectadas coletadas no Condado de Gadseden, Flórida em 2007.
[00163] Avaliação da cepa:
[00164] Avaliação da folha solta: Resumidamente, discos foliares (3,5 cm de diâmetro cada) foram pulverizados com 120 μL de a cepa bacteriana (1 × 108 sporos/mL de água) de P. pachyrhizi. Os discos folirares foram inoculados com 120 μl de suspensão de esporos (1 × 104 esporos/ml de água destilada estéril) de P. pachyrhizi um dia após a aplicação da cepa bacteriana. As aplicações da cepa bacteriana e da inoculação de P. pachyrhizi foram feitas usando um atomizador acoplado a um compressor de ar. (Twizeyimana and Hartman, 2010). Os discos foliares foram colocados com o lado adaxial para baixo em papel de filtro saturado de 20 x 20 cm (Whatman International Ltd., Kent, Inglaterra) em um recipiente de plástico (Blister Box 20 x 20 cm, Placon, Madison, WI); dois papéis de filtro foram usados por caixa. Caixas com discos de folhas foram incubadas no escuro por um período de 12 h seguido por um ciclo de 13 horas de luz (380 umol m-2s-1) e 11 h de escuridão dentro de uma câmara de crescimento (Percival Scientific, Inc.) mantida a 23 ° C e 95% RH. Antes da incubação, as caixas foram colocadas dentro de sacos do tipo zip (Webster Industries, Peabody, MA). O desenho experimental foi um desenho em blocos completos aleatórios com 2 réplicas, e o experimento foi repetido uma vez.
[00165] Avaliação de planta inteira: As cepas bacterianas foram selecionadas a partir da seleção inicial (conduzida usando disco foliar) com base em suas contagens de uredinia e foram avaliadas em a planta inteira em câmaras de crescimento. Nesta avaliação, quando as plantas estavam no estágio V2 (Fehr et al. 1971), a primeira folha trifoliata totalmente expandida foi pulverizada com a cepa bacteriana, e a inoculação com P. pachyrhizi foi feita um dia depois, conforme descrito em avaliação da folha solta. As plantas pulverizadas foram mantidas em uma câmara de crescimento a 75% UR com um ciclo diário de 14 h e 10 h de luz e escuridão a 22 °C e 24 °C, respectivamente. O desenho experimental foi um desenho em blocos com 3 réplicas, e o experimento foi repetido uma vez.
[00166] Coleta de dados e resultados: Em ambas as avaliações, os dados registrados foram números de uredinia (contagens de uredinia) em um círculo de 1 cm de diâmetro registrados 14 dias após a inoculação. Nove cepas bacterianas com <10 uredinia em um círculo de 1 cm de diâmetro foram selecionadas após avaliação em planta inteira em câmara de crescimento a ser testada em campo. Quadro 4: Atividade de cepas bacterianas contra Phakopsora pachyrhizi Controle de ID da Cepa Doenças (%) AIP045885 Não testado AIP075655 96,4 AIP009474 100 AIP024525 63,5 AIP033287 86,6 AIP093798 97,2
Controle de ID da Cepa Doenças (%) AIP061639 39,2 AIP082862 74,9 AIP058187 57,2 AIP059286 65,1 AIP036706 57,6 Azoxistrobina (0,5ppm) 99,8 Exemplo 3: Avaliação de cepas bacterianas contra requeima em tomates
[00167] O cultivar de tomates Money Maker foi usado em um ensaio de folha solta para avaliar as cepas bacterianas de interesse. Folíolos totalmente expandidos de plantas de tomate com 4 a 5 semanas de vida foram excisados e cortados em discos de tamanhos iguais usando uma broca de cortiça de 3,5 cm de diâmetro. Para preparar o inóculo, P. infestans, genótipo US- 23, isola de tomates na Carolina do Norte (obtido do laboratório do Dr. Ristaino na North Carolina State University). Uma cultura de crescimento ativo com 2 semanas de vida foi inundada com água destilada estéril e o micélio foi removido. A suspensão micelial foi então rompida para manter a consistência.
[00168] Cada uma das cepas bacterianas de interesse foi semeada em placas de petri com ágar Luria Bertani (LB). Uma única colônia foi colhida e colocada em 50 ml de meio líquido LB ou em cultura líquida (meio CHA; por L, NaCl (5g), triptona (10g), caldo nutriente (8g), CaCl2 (0,14mM), MgCl2,6H2O (0,2 mM) e MnCl2,4H2O (0,01 mM)) em um frasco de 250 ml. As culturas foram colhidas após 48 horas por peletização de células e ressuspensão ao volume original em água estéril desionizada. Cada cultura foi titulada para determinar CFU/mL usando métodos de contagem de placa de diluição padrão e as placas foram inspecionadas quanto a sinais de contaminação. Água destilada estéril foi adicionada para atingir a concentração final necessária para a avaliação da cepa.
[00169] Discos foliares (3,5 cm de diâmetro cada) foram pulverizados com 120 μL da cepa bacteriana (1 ×108 CFU/ml, suspensos em tampão de cloreto de magnésio) usando um pulverizador de ponta de dedo de névoa fina com rosca nervurada (ID-S009, Container & Packaging Supply, Eagle, ID), adaptado a um tubo centrífugo cônico de 15 mL (Fisher Scientific, Cat No,14-59-53A). Os discos foliares foram inoculados com uma gota de 30 µL de suspensão micelial de P. infestans , 24 horas após a aplicação da cepa bacteriana. Os discos foliares foram colocados no lado abaxial em contato com uma camada dupla saturada de papel cromatográfico WhatmanTM de 3MM, 20 × 20 cm (Fisher Scientific Cat No. 3030-861), em um recipiente de plástico (BlisterBox P5887, 20 × 20 cm, Placon, Madison, WI). Caixas com discos foliares foram colocadas dentro de um saco de armazenamento com zíper duplo (ZIP IGS250-448632, AEP Industrial Inc. Montvale NJ) e incubadas em uma câmara de crescimento (Percival Scientific, Inc) ajustada em um ciclo de 13 horas de luz e 11h de escuridão, mantida a 18 °C e 95% UR. O desenho experimental foi um desenho em blocos completos aleatórios com 2 réplicas, e o experimento foi repetido uma vez.
[00170] A gravidade da requeima foi avaliada após 7 dias. O percentual de controle da doença indica quão bem a infecção pelo patógeno foi impedida. Os resultados são apresentados no Quadro 5. Quadro 5: Atividade de cepas bacterianas contra Phytophthora infestans Controle de ID da Cepa Doença (%) AIP045885 61,1 AIP075655 100 AIP009474 100 AIP024525 91,7 AIP033287 66,7 AIP093798 66,7 AIP061639 100 AIP082862 77,8 AIP058187 83,3 AIP059286 100 AIP036706 80,6 Mefenoxam (5ppm) 75,5 Exemplo 4: Avaliação de cepas bacterianas contra Colletotrichum sublineolum (antracnose do sorgo)
[00171] Um cultivar de sorgo 12-GS9016-KS585 foi cultivado na estufa para um suprimento constante de tecido foliar para avaliação da cepa bacteriana. Folhas de sorgo totalmente expandidas de plantas com 4 a 6 semanas de vida foram excisadas e cortadas em pedaços iguais, com 2,5 cm de largura.
Colletotrichum sublineolum, (obtido do laboratório do Dr. Isakeit na Texas A&M University) foi cultivado em 20% ágar de aveia por 14 dias. A cultura em crescimento ativo foi inundada com água destilada estéril, desalojando os esporos. A concentração da suspensão foi então ajustada para 1x106 esporos/mL. Tween 20 foi então adicionado à suspensão a 0,05%.
[00172] Cada uma das cepas bacterianas de interesse foi disposta em placas de petri com ágar Luria Bertani (LB). Uma única colônia foi colhida e colocada em 50 ml de meio líquido LB ou em cultura líquida (meio CHA; por L, NaCl (5g), triptona (10g), caldo nutriente (8g), CaCl2 (0,14mM), MgCl2,6H2O (0,2mM), e MnCl2,4H2O (0,01 mM)) em um frasco de 250 ml. As culturas foram colhidas após 48 horas por peletização de células e ressuspensão ao volume original em água estéril desionizada. Cada cultura foi titulada para determinar CFU/mL usando métodos de contagem de placa de diluição padrão e as placas foram inspecionadas quanto a sinais de contaminação. Água destilada estéril foi adicionada para atingir a concentração final necessária para a avaliação da cepa.
[00173] Pedaços de folhas foram pulverizados com 120 μL de cada cepa bacteriana (1 × 108 CFU/mL, suspensos em tampão de cloreto de magnésio) usando um pulverizador de ponta de dedo de névoa fina com rosca nervurada (ID-S009, Container & Packaging Supply, Eagle, ID), adaptado a um tubo centrífugo cônico de 15 mL (Fisher Scientific, Cat No,14-59-53A). Os pedaços de folhas tratados foram então dispostos em ágar 1% água corrigido com 6-Benzilaminopurina (BAP) e incubados à temperatura ambiente no escuro. 24 horas após o tratamento, os pedaços de folhas foram inoculados com uma gota de 30 µL de suspensão de esporos de C. sublineolum, aplicada em cada lado da coluna média. As placas foram então incubadas em câmara de crescimento (Percival Scientific, Inc) com fotoperíodo de 12 horas, mantidas a 25 °C e 95% de umidade relativa. O desenho experimental foi um desenho em blocos completos aleatórios com 2 réplicas, e o experimento foi repetido duas vezes.
[00174] A gravidade da antracnose foi avaliada em uma escala de 0 a 4 após 7 dias de acordo com Prom, et al., 2016 (Plant Path J. 15 (1): 11-16), com poucas modificações. 0- Sem sintomas ou manchas cloróticas, 1- reação de hipersensibilidade sem acérvulos, 2- lesões com acérvulos minúsculos e escassos, 3- lesões com acérvulos minúsculos e escassos ≤25% do tecido foliar e 4- lesões com acérvulos cobrindo ≥25% da superfície da folha. Os resultados (Quadro 6) foram analisados por meio de análise de variância (ANOVA) no JMP® (versão 13,2,1; SAS Institute Inc., Cary, NC) e diferenças significativas (P <0,05) foram observadas entre as cepas bacterianas. Quadro 6: Controle da doença da antracnose (%) por cepas bacterianas em ensaio de folhas soltas de sorgo Controle de Doença ID da Cepa (%) AIP045885 0 AIP075655 89,9 AIP009474 26,2 AIP024525 50 AIP033287 26,7
AIP093798 66,7 AIP061639 33,3 AIP082862 37,5 AIP058187 83,3 AIP059286 60,6 AIP036706 50 Pyraclostrobin (10ppm) 96,7 Exemplo 5: Avaliação de cepas bacterianas contra Podosphaera xanthii (oídio em cucurbitáceas)
[00175] Os discos foliares de abóboras saudáveis foram excisados e cortados em discos foliares uniformes de 35 mm de diâmetro usando uma grande broca da cortiça. Uma unidade experimental consistiu em um único disco foliar, cada um tratado com uma suspensão da bactéria selecionada. Os tratamentos incluíram as cepas AgBiome AIP061382, AIP075655 e AIP029105 e tratamentos de controle. Os controles foram discos foliares não-inoculados e inoculados, e o fungicida sintético tebuconazol a 10 ppm como controle positivo. As cepas bacterianas foram preparadas conforme descrito no Exemplo 2. Cada disco foliar foi pulverizado com 200 µL do tratamento (suspensão bacteriana ou fungicida sintético) na superfície adaxial 24 horas antes da inoculação com o patógeno, Podosphaera xanthii (cepa obtida do laboratório do Dr. McGrath, Cornell University). Após o tratamento com o fungicida, os discos foliares foram incubados no escuro por 24 horas a 23 ℃.
[00176] Discos foliares foram inoculados pulverizando-se uma suspensão 1 x 106 de conídios de P. xanthii na superfície foliar tratada. Os tratamentos foram colocados em caixas de plástico transparentes vedadas e foram incubados por seis dias a 25 ℃ com umidade relativa de 80% e fotoperíodo de 12 horas. Cada tratamento foi classificado em uma escala de gravidade da doença de 0 a 4, em que 0 é nenhum sintoma e 4 é mais de 50% do disco foliar coberto por colônias. O número de colônias de oídio também foi registrado para cada tratamento. Este experimento foi executado uma vez, e cada tratamento foi replicado de duas a três vezes. Os dados foram analisados no SAS JMP versão 14,0. Os resultados são apresentados no Quadro
7. Quadro 7: Controle do oídio por cepas bacterianas em discos de folhas soltas de abóbora Controle de Doença ID da Cepa (%) AIP045885 92 AIP075655 92 AIP009474 100 AIP024525 42 AIP033287 92 AIP093798 100 AIP061639 83 AIP082862 81 AIP058187 64 AIP059286 36
AIP036706 81 Tebuconazole (100ppm) 75 Exemplo 6: Avaliação de cepas bacterianas contra Mycosphaerella fijiensis (sigatoka negra)
[00177] Foi utilizado o cultivar musa suscetível Grand Nain. As plantas foram mantidas na estufa para um fornecimento constante de folhas livres de doenças. O inóculo usado nesta avaliação foi uma cultura de M. fijiensis obtida do International of Tropical Agriculture (IITA), Ibadan, Nigéria, a qual foi mantida em ágar V8 Juice.
[00178] Pedaços de folha menores (4 cm de comprimento x 3 cm de largura) foram cortados da folha excisada. Dois pedaços de folhas foram colocados em placas de petri de plástico com o lado adaxial em ágar corrigido com 5 mg/litro de ácido giberélico. Pedaços de folhas foram pulverizados com 120 μL de cepa bacteriana (1 × 108 CFU/mL de água destilada estéril) usando um pulverizador de ponta de dedo. Placas de petri com pedaços de folhas foram incubadas em temperatura ambiente no escuro por 24 h. Pedaços de folhas foram então inoculados com uma suspensão micelial de M. fijiensis. Fragmentos miceliais raspados de culturas em crescimento foram cortados em lâminas miceliais menores em destilados estéreis (em tubos cônicos de 50 ml) usando um homogeneizador (Omni International, Kennesaw, GA). A suspensão foi filtrada através de duas camadas de pano de algodão e depois foi agitada. Tween 20 (0,05% e 0,05% de Silwet L-77 (Loveland Industries Inc., Greeley, CO) foram adicionados e, usando um hemacitômetro, a suspensão foi ajustada com água destilada estéril a uma concentração de 1 ×
106 fragmentos miceliais/ml. Um dia após a inoculação, as placas foram incubadas em câmara de crescimento (Percival Scientific, Inc) ajustada para fotoperíodo de 14 horas, mantida a 25 °C e 90% de umidade relativa.
[00179] Os dados registrados foram o estágio mais avançado nas folhas inoculadas no momento da coleta de dados (há seis estágios reconhecidos para o desenvolvimento do sintoma da sigatoka negra). Os dados foram analisados por meio de análise de variância (ANOVA) no PROC GLM do SAS (versão 9,4; SAS Institute Inc., Cary, NC) e diferenças significativas (P <0,05) foram observadas entre os tratamentos. Os resultados são apresentados no Quadro 8. Quadro 8: Controle de sigatoka negra por cepas bacterianas em pedaços de folhas Grand Nain Controle de ID da Cepa Doença (%) AIP045885 83,3 AIP075655 83,9 AIP009474 66,7 AIP024525 0 AIP033287 77,8 AIP093798 16,7 AIP061639 50 AIP082862 0 AIP058187 29,2 AIP059286 33,3 AIP036706 8,3
Controle de ID da Cepa Doença (%) Mancozeb (10ppm) 83,7 Exemplo 7: Avaliação de cepas bacterianas contra espécies de insetos
[00180] Exemplo 7,1: Crescimento microbiano:
[00181] Uma cultura inicial foi preparada enchendo um bloco de 96 poços com 1 ml (por poço) de meio LB. De um screenmate de estoque de congelador, usando pontas de pipeta ou um ciclo de inoculação, cada poço do bloco é inoculado com uma cepa bacteriana. Esta cultura inicial é cultivada a 30ºC agitando a 225 rpms por 24 h. As culturas de ensaio são preparadas enchendo dois blocos de 48 poços com ~ 1,7 ml (por poço) de meio. Vinte e cinco µl de cada poço da cultura inicial são adicionados aos blocos de cultura de ensaio. Os blocos de ensaio são cultivados a 30 ºC por 24, 48 ou 72 h a 225 rpms.
[00182] Após o crescimento, os blocos de ensaio são removidos da incubadora/agitador e centrifugados por 20 min a 4000 rpms para sedimentar o conteúdo microbiano. O sobrenadante é então derramado de modo que apenas o pellet permaneceu. Os pellets são então ressuspensos em 0,5 ml de tampão e colocados em gelo até serem usados no ensaio. Todas as preparações microbianas são aplicadas dentro de 12 horas após a preparação.
[00183] Exemplo 7,2: Ensaio de disco foliar do besouro da batata do Colorado:
[00184] Uma cultura inicial foi preparada enchendo um bloco de 96 poços com 1 ml (por poço) de meio LB. Cada poço do bloco foi inoculado com uma cepa bacteriana. A cultura inicial foi cultivada a 30 ºC com agitação a 225 rpm por 24 h. As culturas de ensaio foram preparadas enchendo dois blocos de 48 poços com ~ 1,7 ml (por poço) de meio. Vinte e cinco µl de cada poço da cultura inicial foram adicionados aos blocos de cultura de ensaio. Os blocos de ensaio foram cultivados a 30 ºC por 24, 48 ou 72 horas a 225 rpm. Todas as preparações microbianas foram aplicadas dentro de 12 h após a preparação.
[00185] Um único pré-filtro foi colocado em cada poço de uma placa de 24 poços. 50 μl de ddH2O foram aplicados a cada filtro, para manter a umidade relativa ao longo do experimento. Folhas de batata não-danificadas e não-enroladas de uma planta de batata foram selecionadas para uso. Uma broca de cortiça nº 8 foi usada para fazer discos foliares. Um único disco foliar foi colocado de forma que o lado superior da folha ficasse voltado para cima em cada poço de uma placa de 24 poços. 100 μl de solução estoque a 1% de surfactante (espalhador Silwet ECO) foram adicionados a cada poço contendo uma preparação microbiana. A cultura foi completamente misturada e 40 μl foram pipetados para um disco foliar de batata. Deixou-se que o tratamento se espalhasse por toda a folha. Esse processo foi repetido para que todo tratamento bacteriano fosse aplicado a dois discos foliares.
[00186] Após os tratamentos, foram adicionadas a cada poço 5 ou 6 larvas secas de besouro da batata do Colorado (CPB) de 2º ínstar. Ovos de CPB foram criados no laboratório AgBiome e são originários de insetos adquiridos da Universidade do Maine. Depois de adicionar 5 ou 6 larvas a cada poço, as placas foram vedadas com uma tampa adesiva sensível à pressão e 4 pequenos orifícios foram adicionados acima de cada poço. As placas foram então colocadas em uma incubadora Percival e mantidas a 26 ºC e 55% UR com fotoperíodo de 12/12 luz:escuridão por 24 h. Após 24 h, as placas foram avaliadas quanto à porcentagem de cada disco foliar que foi consumido pelas larvas de CPB. As placas foram então devolvidas à incubadora. Quarenta e oito horas após o tratamento, as placas foram removidas da incubadora e a mortalidade de CPB foi registrada para todos os poços nos quais <20% do consumo de folhas estimado ocorreu na leitura de 24 horas. Um micróbio foi considerado ativo no CPB quando menos de 20% do disco foliar foi consumido e/ou houve mortalidade maior que 80% em três ou mais repetições independentes. Os resultados são apresentados no Quadro 9. “Nt” indica que a cepa bacteriana não foi testada no ensaio de disco de folha CPB.
[00187] Exemplo 7,3: Ensaio da lagarta da raiz do milho ocidental
[00188] Ovos da lagarta da raiz do milho ocidental (WCR) foram adquiridos em Crop Characteristics, Farmington, MN. Um volume de 60 µl de suspensão microbiana de cultura inteira foi inoculado na superfície superior da dieta em poços de uma placa de 24 poços (Cellstar, 24 poços, Greiner Bio One) e deixado secar. Cada poço contém 500 µl de dieta (modificado de Marrone et al., 1985). Quinze a vinte larvas neonatas foram introduzidas em cada poço usando um pincel de ponta fina e a placa foi coberta com membrana (Viewseal, Greiner Bio One). O bioensaio foi armazenado à temperatura ambiente e pontuado quanto à mortalidade, inibição do crescimento e/ou inibição da alimentação no dia 4. Um micróbio foi considerado ativo na WCR quando apresentou mortalidade superior a 70% em três ou mais repetições independentes. Os resultados são apresentados no Quadro 9.
Quadro 9: Controle de insetos por cepas bacterianas ID da Cepa CPB WCR AIP045885 Nt Negativo AIP075655 Ativo Negativo AIP009474 Nt Negativo AIP024525 Nt Negativo AIP033287 Negativo Negativo AIP093798 Nt Negativo AIP061639 Nt Negativo AIP082862 Nt Negativo AIP058187 Nt Negativo AIP059286 Nt Negativo AIP036706 Nt Negativo Exemplo 8. Ensaio de amortecimento de Rhizoctonia -- Traça da Soja, Tratamento de sementes/em Sulco
[00189] Grão infestado com Rhizoctonia solani com 11-14 dias é moído. O inóculo moído é passado por uma malha nº 10 para remover qualquer grão que não esteja bem moído. Os grãos infectados moídos, selecionados, são adicionados ao meio Fafard Superfine Germination com 1,5 gramas de inóculo moído para 1 litro de mistura de solo por volume. A mistura de germinação, inóculo e 1 litro de água por 75 litros de meio de germinação são adicionados a um misturador de cimento e misturados até que tudo esteja bem incorporado. O inóculo-meio bem incorporado é colocado em um recipiente de retenção secundário com uma tampa e mantido a 20 ° C por 18 horas antes de usar no ensaio.
[00190] Bandejas de plantio 606 células são preenchidas com meio de germinação inoculado, tomando cuidado para não acondicionar o meio com muita firmeza. Uma semente de soja é semeada por célula, plantando a uma profundidade de 1,5 a 2 cm, deixando orifícios abertos se forem aplicados tratamentos como uma formulação líquida. As células de plantio individuais são tratadas com a cepa ressuspensa apresentada na Quadro 2 a 3ml por célula/semente. O tratamento da semente é feito diretamente por cima da semente. Uma vez que os tratamentos são aplicados, as bandejas são sacudidas levemente para fechar os orifícios de plantação. As bandejas de plantio são levemente regadas e colocadas em uma cúpula de umidade no bandeja. Após 3-4 dias, as bandejas são verificadas quanto à umidade e levemente regadas conforme necessário para garantir que as células estejam uniformemente úmidas. A cúpula de umidade é substituída após a rega.
[00191] Coleta de dados e resultados: Após 10-12 dias, o ensaio é avaliado para determinar o número de sementes que germinaram. Os dados são relatados como a % de sementes que germinaram de um total de 6 sementes por tratamento. Exemplo 9. Ensaios de campo para as diversas cepas bacterianas ou suas variantes ativas
[00192] As diversas cepas bacterianas citadas no Quadro 2 são aplicadas à soja no campo. Os tratamentos são aplicados a 16,8 galões/acre, e os tratamentos são aplicados para obter uma cobertura uniforme da planta de acordo com as diretrizes gerais de tratamento para o tratamento de ASR. O primeiro tratamento é aplicado em R1 com um tratamento de acompanhamento aplicado aos 14 dias e 28 dias após o primeiro tratamento. Os tratamentos específicos são descritos a seguir.
[00193] Tratamentos:
1. Testemunha não-tratada
2. Testemunha inoculada
3. Quadris em 6,2 onças/acre
4. Quadris em 2,1 onças/acre
5. AIP045885 a 7,5g/L
6. AIP075655 a 7,5g/L
7. AIP009474 a 7,5g/L
8. AIP024525 a 7,5g/L
9. AIP033287 a 7,5g/L
10. AIP093798 a 7,5g/L
11. AIP061639 a 7,5g/L
12. AIP082862 a 7,5g/L
13. AIP058187 a 7,5g/L
14. AIP059286 a 7,5g/L
15. AIP036706 a 7,5g/L Exemplo 10. Ensaios de campo contra diversas pragas fúngicas para as diversas cepas bacterianas
[00194] As diversas cepas bacterianas citadas no Quadro 2 são aplicadas às culturas listadas no Quadro 6 no campo sob as práticas agronômicas atuais, conforme listado no Quadro 6 para obter cobertura uniforme da planta e seguir as práticas agronômicas adequadas. Os tratamentos são aplicados preventivamente e/ou curativamente nos momentos apropriados por doença. Quadro 6
Cultivo Patógen Ta Volume Número Intervalo/ o xa de de tempo de tratame tratame aplicação nto nto Todos os Bolor 5g 25-200 1 a 10 7 a 14 dias cultivos cinzent /L galões/ o acre Cultivos Mancha 5g 100-300 1 a 4 7 a 14 dias ornamentais foliar /L galões/ de acre Cercosp ora Soja Mancha 5g 5-20 1 a 3 V7, R1, R3, foliar /L galões/ R5 de acre Cercosp ora Beterraba, Mancha 5g 15-50 3 a 6 7 a 14 dias espinafre, foliar /L galões/ acelga de acre Cercosp ora Cultivos de Pinta 5g 15-50 4 a 10 7 a 14 dias solanáceas preta /L galões/ acre Uva Oídio 5g 15-50 3 a 8 7 a 14 dias /L galões/ acre Cucurbitáceas Oídio 5g 2 a 8 7 a 14 dias /L
Cultivo Patógen Ta Volume Número Intervalo/ o xa de de tempo de tratame tratame aplicação nto nto Gramado/outras Mancha 5g 87-120 2 a 6 7 a 14 dias gramíneas foliar /L galões/ de acre Antranc ose Uva Míldio 5g 50-100 2 a 6 7 a 14 dias /L galões/ acre Folhas verdes Míldio 5g 25 a 75 2 a 6 7 a 14 dias /L galões/ acre Manjericão Míldio 5g 25 a 75 2 a 6 7 a 14 dias /L galões/ acre Plantas Requeim 5g 100-300 2 a 6 7 a 14 dias ornamentais a /L galões/ acre Cucurbitácias/P Requeim 5g 25-100 2 a 10 7 a 14 dias imentas a /L galões/ acre Cultivos de Requeim 5g 25-100 2 a 10 7 a 14 dias solanáceas a /L galões/ acre Soja Requeim 5g 5-20 1 a 3 V4 a R5 a /L galões/ acre
Cultivo Patógen Ta Volume Número Intervalo/ o xa de de tempo de tratame tratame aplicação nto nto Soja Ferruge 5g 5-20 1 a 4 V4 a R5 m /L galões/ acre Família rosácea Fogo 5g 20-100 1 a 3 Pré/pós- bacteri /L galões/ flor ano acre Malus Sarna 5g 20-100 1 a 5 7 a 14 dias da maçã /L galões/ acre Frutas com Podridã 5g 20-100 1 a 3 Pré/pós- caroço o parda /L galões/ flor e acre grupo de frutas Arroz Queima 5g 5-20 1 a 3 Antes do da /L galões/ fechamento bainha acre do dossel Cereais Fusario 5g 5-20 1 a 2 Feekes 7, 9 se /L galões/ e/ou 10,51 acre
[00195] Os tratamentos específicos são descritos a seguir:
[00196] Lista de tratamento de pragas foliares: Pinta preta
[00197] 6 a 10 tratamentos
[00198] Volume de tratamento: 100 galões/acre
[00199] Lista de tratamentos:
1. Testemunha não-inoculada e não-tratada
2. Testemunha inoculada
3. Controle químico escolhido pelo cooperador aplicado segundo instruções do rótulo
4. Serenata de controle biológico aplicada segundo instruções do rótulo
5. Tratamento(s) foliar(es) biológico(s) experimental(is) a 5g/L mais Capsil a 3 onças/100 galões Exemplo 11: Ensaios de campo contra diversas pragas fúngicas para as diversas cepas bacterianas ou suas variantes ativas empregando tratamentos de sementes
[00200] As diversas cepas bacterianas citadas no Quadro 2 são aplicadas aos cultivos listados no Quadro 7 como tratamentos de sementes antes de serem plantadas no campo. Os tratamentos de cepas bacterianas são aplicados para o controle preventivo das doenças e segundo as taxas de aplicação do Quadro 8. Os tratamentos específicos são descritos a seguir. Quadro 7 Soja Canola Trigo Grãos de cereais Milho Cucurbitáceas Algodão Cultivos de solanáceas Beterrabas Folhas verdes Murcha de Óleo de Verticillium girassol e sementes
[00201] Lista de tratamentos do ensaio de tratamento de sementes:
1. Testemunha não-inoculada
2. Testemunha inoculada
3. Testemunha química do tratamento de sementes apropriada para a doença, escolhida e aplicada pelo colaborador
4. Tratamento(s) experimental(is) biológico(s) de sementes Quadro 8 Cultivo Praga Taxa Tratamento/Volume Cultivos em Pythium 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais 10e12 sementes Cultivos em Phytophthora 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais 10e12 sementes Cultivos em Murcha de 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais Fusarium 10e12 sementes Cultivos em Síndrome da 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais morte da 10e12 sementes soja Cultivos em Rhizoctonia 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais solani 10e12 sementes Cultivos em Murcha de 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais Verticillium 10e12 sementes Cultivos em Podridão do 10e4 a Tratamento de fileiras/vegetais pé-de-milho 10e12 sementes Exemplo 12. Ensaios de campo contra diversas pragas fúngicas para as diversas cepas bacterianas ou suas variantes ativas empregando tratamentos intrassulco
[00202] As diversas cepas bacterianas ou suas variantes ativas enumeradas no Quadro 2 são aplicadas aos cultivos listados no Quadro 8 como tratamentos intrassulco no momento do plantio como controle preventivo para as doenças e segundo as taxas de tratamento listadas no Quadro 14. Os tratamentos específicos são descritos a seguir:
[00203] Lista de tratamentos do ensaio intrassulco:
1. Testemunha não-inoculada
2. Testemunha inoculada
3. Tratamento(s) biológico(s) intrassulco a 5 g/L + Capsil a 6 onças/100 galões a 15 galões/acre
4. Testemunha química intrassulco apropriada para a doença, conforme escolhido e aplicado pelo colaborador Quadro 9 Cultivo Praga Taxa Tratamento/Volume Cultivos em Pythium 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais galões/acre Cultivos em Phytophthora 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais galões/acre Cultivos em Murcha de 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais Fusarium galões/acre Cultivos em Síndrome da 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais morte da galões/acre soja Cultivos em Rhizoctonia 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais solani galões/acre Cultivos em Murcha de 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais Verticillium galões/acre Cultivos em Podridão do 5g/L 2 a 15 fileiras/vegetais pé-de-milho galões/acre Exemplo 13. Protocolo para o tratamento de sementes de cepas de controle biológico
[00204] A formulação de tratamento de sementes é preparada pela mistura de 10g de cepa formulada mais 30ml de água e 15ml de polímero Unicoat. A semente pesada é colocada em um frasco tipo Mason esterilizado. Uma quantidade apropriada de solução de tratamento de sementes é baseada no peso da semente (0,05 ml/25 g de semente), a mistura é agitada por 60 segundos ou até que as sementes estejam visualmente bem revestidas. As sementes são colocadas em uma única camada em uma assadeira de papel alumínio e colocadas sob uma capela de fluxo laminar por 1 hora ou até que as sementes sequem. Assim que as sementes secam, elas são colocadas em um recipiente hermético e armazenadas em temperatura ambiente. Exemplo 14. Formulações de pó molhável
[00205] Cem gramas de pasta celular de cada uma das cepas indicadas no Quadro 2 são misturados com 5 g de glicerol e 20 g de silicato de cálcio sintético usando um processador de alimentos. Este material é seco a 40oC para uma atividade de água inferior a 0,30. A formulação em pó seco é armazenada em bolsas de mylar vedadas a vácuo a 22 °C. A formulação em pó seco retém a atividade pesticida. Exemplo 15. Testes de campo de Pythium.
[00206] As cepas bacterianas apresentadas no Quadro 2 são aplicadas como tratamentos de sementes à variedade de soja W3103. As cepas bacterianas são formuladas como um pó molhável conforme descrito no Exemplo 15 e, em seguida, transformadas em tratamentos de sementes combinando 10 g da cepa bacteriana formulada com 30 ml de água e 15 ml de polímero de revestimento de sementes (Unicoat) e, em seguida, agitando até formar uma solução uniforme. A solução final foi aplicada a 1 kg de semente de soja e deixada secar sob uma capela de fluxo laminar por 12 horas.
[00207] O inóculo de Pythium foi cultivado em grãos de milheto e aplicado via aplicação intrassulco a 1,25g/pés, e foi aplicado no plantio com soja tratada semeada a 130,000 sementes por acre no dia 1. A contagem de fileiras completas de plântulas foi feita 17 dias depois. Os tratamentos específicos são descritos a seguir.
[00208] Tratamentos:
1. Testemunha não-tratada
2. Testemunha inoculada
3. Quadris a 0,4 onças/acre de fluido
4. Tratamento de sementes com AIP045885
5. Tratamento de sementes com AIP075655
6. Tratamento de sementes com AIP009474
7. Tratamento de sementes com AIP024525
8. Tratamento de sementes com AIP033287
9. Tratamento de sementes com AIP093798
10. Tratamento de sementes com AIP061639
11. Tratamento de sementes com AIP082862
12. Tratamento de sementes com AIP058187
13. Tratamento de sementes com AIP059286
14. Tratamento de sementes com AIP036706 Exemplo 16. Ensaios de campo com Rhizoctonia solani
[00209] As cepas bacterianas apresentadas no Quadro 2 são aplicadas como tratamentos de sementes à variedade de soja W3103. Cada uma das cepas bacterianas são formuladas como um pó molhável conforme indicado no Exemplo 15 e, em seguida, transformadas em tratamentos de sementes combinando 10 g da cepa bacteriana formulada com 30 ml de água e 15 ml de polímero de revestimento de sementes (Unicoat) e, em seguida, agitando até formar uma solução uniforme. A solução final é aplicada a 1 kg de semente de soja e deixada secar sob uma capela de fluxo laminar por 12 horas.
[00210] O inóculo de Rhizoctonia solani é cultivado em grãos de sorgo e aplicado via aplicação intrassulco a 1,25 g/pés, e é aplicado no plantio com soja tratada semeada a 130,000 sementes por acre no dia 1. A contagem de fileiras completas de plântulas foi feita 17 dias depois. Os tratamentos específicos são descritos a seguir:
[00211] Tratamentos:
1. Testemunha não-tratada
2. Testemunha inoculada
3. Quadris a 0,4 onças/acre de fluido
4. Tratamento de sementes com AIP045885
5. Tratamento de sementes com AIP075655
6. Tratamento de sementes com AIP009474
7. Tratamento de sementes com AIP024525
8. Tratamento de sementes com AIP033287
9. Tratamento de sementes com AIP093798
10. Tratamento de sementes com AIP061639
11. Tratamento de sementes com AIP082862
12. Tratamento de sementes com AIP058187
13. Tratamento de sementes com AIP059286
14. Tratamento de sementes com AIP036706

Claims (20)

REIVINDICAÇÕES ORIGINAIS PCT/US2019/058581
1. Uma composição CARACTERIZADA POR compreender: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida cepa bacteriana ou uma variante ativa da mesma está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml; (b) pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que o referido esporo, foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos ou uma variante ativa dos mesmos está presente em cerca de 105 CFU/grama a cerca de 1012 CFU/grama ou cerca de 105 CFU/ml a cerca de 1012 CFU/ml; e/ou (c) um sobrenadante, produto de fermentação, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015;
- em que uma quantidade eficaz da referida composição melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta ou controla uma praga de plantas ou um patógeno de plantas que causa uma doença em plantas.
2. A composição da reivindicação 1, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a referida composição compreende uma pasta de células, um pó molhável, uma formulação seca por pulverização, uma formulação estável ou um tratamento de sementes.
3. Uma cultura biologicamente pura isolada de uma cepa bacteriana, CARACTERIZADA POR compreender: (a) AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; ou, (b) um esporo, ou foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; - em que uma quantidade eficaz da referida cultura controla uma praga de plantas ou melhora uma característica agronômica de interesse de uma planta.
4. A composição da reivindicação 1 ou 2, ou a cultura biologicamente pura isolada da reivindicação 3, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a referida cepa bacteriana é resistente a um biocida selecionado dentre um herbicida, um fungicida, um pesticida, um inseticida ou um produto químico de proteção ao cultivo, em que a referida composição ou cultura é produzida crescendo na presença do referido biocida, e em que a referida cepa bacteriana controla uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa uma doença em plantas.
5. A composição da cultura biologicamente pura isolada da reivindicação 4, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE que o referido biocida compreende glifosato ou glufosinato.
6. A composição de qualquer uma das reivindicações 1, 2, 4 e 5, ou cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das reivindicações 3-5, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a praga de plantas é uma praga de insetos.
7. A composição ou a cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma da reivindicação 6, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a praga de insetos compreende uma praga de inseto coleóptero, uma praga de inseto hemíptero ou uma praga de inseto lepidóptero.
8. A composição de qualquer uma das reivindicações 1, 2, 4 e 5, ou a cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das reivindicações 3-5, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE o patógeno de plantas compreende pelo menos um patógeno fúngico.
9. Um método para controlar uma população de pragas de plantas que compreende o contato da referida população com uma quantidade eficaz da composição de qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 4-8, ou a cultura biologicamente pura isolada de qualquer uma das reivindicações 3-8, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a referida cepa bacteriana controla a referida praga de plantas.
10. Um método para cultivar uma planta suscetível a uma praga de plantas ou doença de plantas ou para melhorar uma característica agronômica de interesse em uma planta, CARACTERIZADO POR compreender aplicar à planta: (a) uma quantidade eficaz de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; (b) uma quantidade eficaz de pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; e/ou, (c) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, produto de fermentação, filtrado, ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015; - em que a referida quantidade eficaz controla uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa a doença na planta ou melhora a característica agronômica de interesse.
11. O método da reivindicação 10, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE o referido método aumenta o rendimento da planta suscetível à doença da planta.
12. Um método para controlar uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa uma doença de plantas em uma área de cultivo, CARACTERIZADO POR compreender: (a) plantar a área de cultivo com sementes ou plantas suscetíveis à praga de plantas ou à doença de plantas; e (b) aplicar na planta suscetível à praga de plantas ou à doença de plantas uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo: (i) uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187,
AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; (ii) uma quantidade eficaz de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, e em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; ou (iii) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, produto de fermentação, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015;
- em que a referida quantidade eficaz controla uma praga de plantas ou patógeno de plantas que causa uma doença de plantas em uma área de cultivo.
13. Um método para tratar ou prevenir uma doença de plantas CARACTERIZADO POR compreender aplicar em uma planta com uma praga de plantas ou doença de plantas, ou em risco de desenvolver uma praga de plantas ou doença de plantas, uma quantidade eficaz de: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 CFU por hectare; e/ou (b) pelo menos um de um esporo ou foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706,, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015; em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 CFU por hectare; e/ou (c) uma quantidade eficaz de um sobrenadante, produto de fermentação, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015, - em que a quantidade eficaz controla a praga de plantas ou o patógeno de plantas que causa a doença da planta.
14. O método de qualquer uma das reivindicações 9-13, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a referida praga de planta é uma praga de insetos.
15. O método da reivindicação 9-14, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a praga de insetos compreende uma praga de inseto coleóptero, uma praga de inseto hemíptero ou uma praga de inseto lepidóptero.
16. O método de qualquer uma das reivindicações 9-13, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE a praga de planta ou patógeno de planta é um ou mais patógenos fúngicos.
17. O método de qualquer uma das reivindicações 9-16, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE o referido método também compreende a aplicação de uma quantidade eficaz de um biocida, em que a referida quantidade eficaz do biocida controla seletivamente um organismo de interesse sem danificar significativamente o cultivo.
18. Um método para produzir uma cepa bacteriana modificada, CARACTERIZADO POR compreender: (a) fornecer uma população de pelo menos uma cepa bacteriana compreendendo AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida cepa bacteriana é suscetível a um biocida de interesse; (b) cultivar a referida cepa bacteriana na presença do biocida de interesse; e, (c) selecionar uma cepa bacteriana modificada que possua uma maior resistência ao referido biocida de interesse.
19. Um kit de peças CARACTERIZADO POR compreender um biocida e: (a) pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; (b) pelo menos um de um esporo, ou um foresporo, ou uma combinação de células, foresporos e/ou esporos de qualquer uma de AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706 ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de uma distância Mash de cerca de 0,015, em que a referida quantidade eficaz compreende pelo menos cerca de 1012 a 1016 unidades formadoras de colônias (CFU) por hectare; e (c) um sobrenadante, produto de fermentação, filtrado ou extrato derivado de uma cultura de células inteiras de pelo menos uma das cepas bacterianas AIP075655, AIP059286, AIP045885, AIP09474, AIP024525, AIP033287, AIP093798, AIP061639, AIP082862, AIP058187, AIP036706, ou uma variante ativa de qualquer uma delas, em que a variante ativa compreende uma cepa bacteriana com um genoma dentro de um distância Mash de cerca de 0,015.
20. O kit da reivindicação 19, CARACTERIZADA PELO FATO DE QUE o biocida é um herbicida, fungicida, inseticida, nematicida e/ou pesticida.
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