CN114561298B - 埃利青霉在防治植物害虫中的应用和防治方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及植物害虫防治技术领域，特别是涉及埃利青霉(Penicilliumehrlichii)在防治植物害虫中的应用和防治方法。本发明所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCCNO:M2021635。本发明提供的埃利青霉Z19对鳞翅目害虫有较好的杀虫活性，尤其是对棉铃虫、小菜蛾、茶尺蠖和甜菜夜蛾的7d杀虫效果均在80％以上。另外，相比于传统的化学防治，本发明提供的利用埃利青霉Z19防治害虫的方法能够安全、高效、无污染地控制植物害虫的危害，减少对生态环境的污染，提高农产品的质量安全，保障人类的健康。

Description

埃利青霉在防治植物害虫中的应用和防治方法
技术领域
本发明涉及植物害虫防治技术领域，特别是涉及埃利青霉在防治植物害虫中的应用和防治方法。
背景技术
植物内生菌是指能够生活在植物各种器官和组织的细胞间隙或细胞内，且对植株暂时性地没有致病性，并与植物建立了和谐共生关系的微生物类群。
植物内生菌在宿主植物体内定殖，不仅能促植物生长，有的还能增强宿主植物对生物(植物病原菌、害虫等)胁迫和非生物胁迫的抗性。植物内生菌自身产生或促进宿主植物产生一系列具有很高生物活性的次生代谢产物，从而表现出具有较好的杀虫或抑菌活性。内生菌现已被认为是生物防治的天然资源，因其安全和高活性，被广泛的应用在植物病虫害绿色防治中，具有广阔的应用潜力和开发应用价值。
茶树(Camellia sinensis)是一种多年生木本植物，是我国重要的经济作物。目前对茶树内生菌的研究相对较少，同时利用茶树内生菌资源防治农林植物主要的鳞翅目害虫研究报道更是未见相关报道。因此开发以茶树内生菌为微生物农药代替化学农药防治农林植物生长过程中的危害严重的害虫，对农业及农产品的质量安全和绿色健康可持续发展具有重要意义。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了埃利青霉Z19(Penicillium ehrlichii)在防治植物害虫中的应用和防治方法。本发明提供的埃利青霉Z19对鳞翅目害虫有较好的杀虫活性，尤其是对棉铃虫、小菜蛾、茶尺蠖和甜菜夜蛾的7d杀虫效果均在80％以上。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19在防治植物害虫中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
优选的，所述植物害虫包括鳞翅目害虫。
优选的，所述植物害虫包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫、棉铃虫中的一种或多种。
本发明提供了埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19在制备防治植物害虫制剂中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
优选的，所述植物害虫包括鳞翅目害虫。
本发明提供了一种防治植物害虫的方法，包括以下步骤：
将含有埃利青霉Z19的微生物菌剂施用在植物上；所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
优选的，以每mL或每g所述微生物菌剂计，所述微生物菌剂中的埃利青霉Z19的孢子数≥2×106个。
优选的，制备所述微生物菌剂的培养基包括PDA培养基。
优选的，所述植物害虫包括鳞翅目害虫。
优选的，所述植物害虫包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫和棉铃虫中的一种或多种。
有益效果：
本发明提供了埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19在防治植物害虫中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。本发明提供的埃利青霉Z19对鳞翅目害虫有较好的杀虫活性，尤其是对棉铃虫、小菜蛾、茶尺蠖和甜菜夜蛾的7d杀虫效果均在80％以上。
另外，相比于传统的化学防治，本发明提供的利用埃利青霉Z19防治害虫的方法能够安全、高效、无污染地控制植物害虫的危害，减少对生态环境的污染，提高农产品的质量安全，保障人类的健康。
生物保藏说明
埃利青霉Z19，拉丁名为Penicillium ehrlichii，于2021年5月31日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2021635。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1是埃利青霉Z19对棉铃虫1～7d杀虫活性效果；
图2是埃利青霉Z19对小菜蛾1～7d杀虫活性效果；
图3是埃利青霉Z19对茶尺蠖1～7d杀虫活性效果；
图4是埃利青霉Z19对甜菜夜蛾1～7d杀虫活性效果；
图5是埃利青霉Z19对斜纹叶蛾1～7d杀虫活性效果；
图6是埃利青霉Z19对粘虫1～7d杀虫活性效果；
图7是埃利青霉Z19对玉米螟1～7d杀虫活性效果；
图8是埃利青霉Z19对草地贪夜蛾1～7d杀虫活性效果。
具体实施方式
本发明提供了埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19在防治植物害虫中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
在本发明中，所述植物害虫优选包括鳞翅目害虫；进一步优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫、棉铃虫中的一种或多种；更优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、小菜蛾、棉铃虫中的一种或多种。在本发明中，所述植物优选包括茶树。本发明提供的埃利青霉Z19对鳞翅目害虫有较好的杀虫活性，尤其是对棉铃虫、小菜蛾、茶尺蠖和甜菜夜蛾的7d杀虫效果均在80％以上。
本发明还提供了埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19在制备防治植物害虫制剂中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
在本发明中，所述植物害虫优选包括鳞翅目害虫；进一步优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫、棉铃虫中的一种或多种；更优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、小菜蛾、棉铃虫中的一种或多种。
本发明还提供了一种防治植物害虫的方法，包括以下步骤：
将含有埃利青霉Z19的微生物菌剂施用在植物上；所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCC NO:M 2021635。
在本发明中，以每mL或每g所述微生物菌剂计，所述微生物菌剂中的埃利青霉Z19的孢子数优选为≥2×106个。
在本发明中，制备所述微生物菌剂的培养基优选包括PDA培养基；制备所述微生物菌剂时的温度优选为25℃。
在本发明中，所述植物害虫优选包括鳞翅目害虫；进一步优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫、棉铃虫中的一种或多种；更优选包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、小菜蛾、棉铃虫中的一种或多种。本发明提供的利用埃利青霉Z19防治害虫的方法能够安全、高效、无污染地控制植物害虫的危害，减少对生态环境的污染，提高农产品的质量安全，保障人类的健康。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的埃利青霉Z19在防治植物害虫中的应用和防治方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
内生菌株的分离与鉴定
取健康茶树根茎叶组织，将表面泥土用自来水洗净，先在70％(体积浓度)酒精中浸泡1min，然后放入3wt.％浓度次氯酸钠溶液浸泡4min，再置于70％(体积浓度)酒精中浸洗1s，最后用无菌水冲洗5遍，吸取100μL最后一遍冲洗的无菌水涂布于PDA培养基上，以制备对照培养基。
组织分离法：将表面消毒后的茶树组织切成5mm*5mm的小块，切面处贴在PDA培养基上，25℃恒温培养7d，每天观察，并用移菌环将新长出的菌丝挑出单独培养。
对分离出的内生真菌进行ITS和18S基因位点测序，并将测序结果于NCBI上进行BLAST比对得到相似菌种名称为Penicillium ehrlichii(表1)。
表1 ITS测序鉴定结果
Figure BDA0003527385590000041
将筛选的菌株命名为，埃利青霉(Penicillium ehrlichii)Z19，并送往中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2021635。
实施例2
利用实施例1筛选得到埃利青霉Z19对8种植物害虫(茶尺蠖(Ectropis obliqua)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、玉米螟(Pyrausta nubilalis)、粘虫(Mythimna separata)、棉铃虫(Helicoverpa armigera))进行毒力测定实验，并在不同处理时间统计死亡害虫的数量，并计算校正死亡率。具体内容如下：
采用PDA培养基培养(25℃恒温)埃利青霉Z19菌株，用0.1‰的吐温80溶液将PDA平板上培养7d的埃利青霉Z19分生孢子冲洗下来。利用血球计数法观测，并用0.1‰的吐温80溶液配置得到2×106(个/ml)孢子悬浮液。
采用孢悬液侵渍法开展对供试害虫的毒力测定，处理组为：将供试害虫的2龄幼虫，分别侵染在上述制备的孢子悬浮液中2秒后取出，单独饲养，每种害虫供试30头，每天观察其健康状况，统计死亡害虫的数量，每个处理组同时设置对照组(与处理组相似，唯一区别在于将孢子悬浮液替换为0.1‰的吐温80溶液)，并计算校正死亡率，实验结果见图1～图8。校正死亡率计算方法：
校正死亡率(％)＝(处理组死亡率-对照组死亡率)/(1-对照组死亡率)；
由图1～图8可知，埃利青霉Z19对所选的8种植物害虫均有一定的杀虫活性，特别是对棉铃虫4d杀虫毒力达到60％，5d杀虫毒力达到90％，第6d杀虫毒力达到100％(图1)；对小菜蛾1d杀虫毒力达到50％，2d杀虫毒力达到70％，3d杀虫毒力达到80％，5d杀虫毒力达到90％，第6d和第7d杀虫毒力维持在90％(图2)；对茶尺蠖4d杀虫毒力达到60％，5d杀虫毒力达到70％，7d杀虫毒力达到80％(图3)；对甜菜夜蛾4d杀虫毒力达到50％，5d杀虫毒力达到70％，6d杀虫毒力达到90％(图4)。
综上所述，本发明提供的埃利青霉Z19对鳞翅目害虫有较好的杀虫活性，尤其是对棉铃虫、小菜蛾、茶尺蠖和甜菜夜蛾的7d杀虫效果均在80％以上。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (7)

1.埃利青霉(Penicilliumehrlichii)Z19在防治植物害虫中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCCNO:M2021635；所述植物害虫为鳞翅目害虫。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物害虫包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫、棉铃虫中的一种或多种。
3.埃利青霉(Penicilliumehrlichii)Z19在制备防治植物害虫制剂中的应用，所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCCNO:M2021635；所述植物害虫为鳞翅目害虫。
4.一种防治植物害虫的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将含有埃利青霉Z19的微生物菌剂施用在植物上；所述埃利青霉Z19的保藏编号为：CCTCCNO:M2021635；所述植物害虫为鳞翅目害虫。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，以每mL或每g所述微生物菌剂计，所述微生物菌剂中的埃利青霉Z19的孢子数≥2×106个。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，制备所述微生物菌剂的培养基包括PDA培养基。
7.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述植物害虫包括茶尺蠖、甜菜夜蛾、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、玉米螟、粘虫和棉铃虫中的一种或多种。
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