JP7265585B2 - 植物の病気を制御するための細菌株およびその使用 - Google Patents
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Description
本発明は、植物において植物の病気を制御するおよび/または目的の農学上の形質を改善するための細菌株および集団に関する。
植物の病気は、顕著な農業損失の原因である。影響は、軽度の症状から破滅的な植物の損傷までの範囲に及び得、そして大きな経済的かつ社会的結果をもたらし得る。植物の病気および植物の病気を引き起こす病原体を有効に制御する方法が必要とされる。
植物において植物の病気を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するための組成物および方法が、提供される。このような組成物および方法は、植物の病気を引き起こす1種もしくはこれより多くの病原体を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善する生物防除因子または細菌株の集団を含む。上記生物学的因子または細菌株は、植物用の接種物として使用され得る。植物の病気に感受性である植物を生長させるための方法、ならびに植物の病気を制御するための方法および組成物がまた、提供される。植物において病気の抵抗性を増大させるための方法および組成物がさらに提供される。植物の健康状態を改善するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するための方法および組成物がまた、提供される。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
(項目1)
以下:
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む、組成物であって、
ここで前記細菌株、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在し、そしてここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(項目2)
前記植物の病気は、真菌性の植物の病気である、項目1に記載の組成物。
(項目3)
前記植物の病気は、アジア型ダイズさび病(ASR)である、項目1または2に記載の組成物。
(項目4)
前記細菌株またはその活性改変体は、約105 CFU/g~約1010 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1010 CFU/mlで存在する、項目1~3のいずれか1項に記載の組成物。
(項目5)
前記組成物は、細胞ペーストを含む、項目1~4のいずれか1項に記載の組成物。
(項目6)
前記組成物は、水和剤もしくは噴霧乾燥製剤、または安定な製剤を含む、項目1~5のいずれか1項に記載の組成物。
(項目7)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目1~6のいずれか1項に記載の組成物。
(項目8)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目7に記載の組成物。
(項目9)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目8に記載の組成物。
(項目10)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目8に記載の組成物。
(項目11)
前記病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目10に記載の組成物。
(項目12)
以下:
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む細胞ペーストを含む、組成物であって、
ここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(項目13)
前記植物の病気は、真菌性の植物の病気である、項目12に記載の組成物。
(項目14)
前記植物の病気は、アジア型ダイズさび病である、項目12~13のいずれか1項に記載の組成物。
(項目15)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目12~14のいずれか1項に記載の組成物。
(項目16)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目15に記載の組成物。
(項目17)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目16に記載の組成物。
(項目18)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目16に記載の組成物。
(項目19)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目18に記載の組成物。
(項目20)
以下:
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む水和剤を含む、組成物であって、
ここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(項目21)
前記植物の病気は、真菌性の植物の病気である、項目20に記載の組成物。
(項目22)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目20または21に記載の組成物。
(項目23)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目22に記載の組成物。
(項目24)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目23に記載の組成物。
(項目25)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目23に記載の組成物。
(項目26)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目25に記載の組成物。
(項目27)
前記活性改変体は、少なくとも1種の除草剤、殺真菌剤、農薬、もしくは他の農作物保護化学物質に抵抗性である、項目20~26のいずれか1項に記載の組成物。
(項目28)
前記活性改変体は、除草剤、殺真菌剤、農薬、もしくは他の農作物保護化学物質の圧力の下で選択され、かつ前記除草剤、殺真菌剤、農薬、もしくは他の農作物保護化学物質に抵抗性である、項目27に記載の組成物。
(項目29)
前記活性改変体は、本明細書で提供される細菌株またはその活性改変体を除草剤抵抗性にする除草剤抵抗性遺伝子で形質転換されており、ここで前記細菌株は、植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、項目27~29のいずれか1項に記載の組成物。
(項目30)
前記植物病原体は、ASRを引き起こす、項目29に記載の組成物。
(項目31)
前記除草剤は、グリホサート、グルホシネート(グルタミンシンターゼインヒビター)、スルホニルウレアおよびイミダゾリノン除草剤(分枝鎖アミノ酸合成インヒビター)からなる群より選択される、項目27~30のいずれか1項に記載の組成物。
(項目32)
以下:
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
を含む、細菌株の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目33)
前記細菌株は、除草剤、殺真菌剤、農薬、または農作物保護化学物質から選択される殺生物剤に対して抵抗性であり、前記培養物は、前記殺生物剤の存在下で成長させることによって生産され、前記細菌株は、植物の病気を引き起こす病原体を制御する、項目33に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目34)
前記物学的に純粋な培養物は、グリホサートの存在下で成長できる、項目33に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目35)
前記植物の病気は、真菌性の植物の病気である、項目33~34のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目36)
前記植物の病気は、ASRである、項目35に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目37)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目33~36のいずれか1項に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目38)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目37に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目39)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目38に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目40)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目38に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目41)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目40に記載の単離された生物学的に純粋な培養物。
(項目42)
以下:
(a)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
から成長される、細菌培養物であって、
ここで前記細菌培養物は、植物の病気を引き起こす植物病原体に対して抗病原体活性を有しかつグルホシネートの存在下で成長できるか、または有効量の前記細菌培養物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善する、
細菌培養物。
(項目43)
前記植物の病気は、真菌性の植物の病気である、項目42に記載の細菌培養物。
(項目44)
前記植物の病気は、ASRである、項目43に記載の細菌培養物。
(項目45)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目42~44のいずれか1項に記載の細菌培養物。
(項目46)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目45に記載の細菌培養物。
(項目47)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目46に記載の細菌培養物。
(項目48)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目46に記載の細菌培養物。
(項目49)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目48に記載の細菌培養物。
(項目50)
植物の病気に感受性である植物を生長させるか、または植物において目的の農学上の形質を改善するための方法であって、前記方法は、前記植物に、
(a)有効量の、細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種;ならびに/あるいは
(b)有効量の、AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1種であって、ここで前記改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含み、前記有効量は、前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御するか、または前記目的の農学上の形質を改善する、
方法。
(項目51)
前記方法は、前記植物の病気に感受性である植物の収量を増大させる、項目50に記載の方法。
(項目52)
前記植物の病気は、真菌病原体によって引き起こされる植物の病気である、項目50または51に記載の方法。
(項目53)
前記植物の病気は、アジア型ダイズさび病(ASR)である、項目52に記載の方法。
(項目54)
前記植物病原体は、少なくとも1種の真菌病原体を含む、項目50~53のいずれか1項に記載の方法。
(項目55)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目54に記載の方法。
(項目56)
前記植物病原体は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目55に記載の方法。
(項目57)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目55に記載の方法。
(項目58)
前記植物病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目57に記載の方法。
(項目59)
栽培地において植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する方法であって、前記方法は、
(a)前記栽培地に、前記植物の病気に感受性である種子または植物を植える工程;および
(b)前記植物の病気に感受性である植物に、以下:
(c)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(d)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、
を含む、有効量の少なくとも1種の細菌株を適用する工程を包含し;
そしてここで前記有効量は、少なくとも約105~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、
方法。
(項目60)
前記植物は、真菌性の植物の病気に感受性である、項目59に記載の方法。
(項目61)
前記植物は、アジア型ダイズさび病(ASR)に感受性である、項目60に記載の方法。
(項目62)
ASRに感受性である前記植物は、ダイズである、項目61に記載の方法。
(項目63)
前記組成物は、1種もしくはこれより多くの真菌病原体を制御する、項目59~62のいずれか1項に記載の方法。
(項目64)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される、項目63に記載の方法。
(項目65)
前記組成物は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を制御する、項目64に記載の方法。
(項目66)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目64に記載の方法。
(項目67)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目66に記載の方法。
(項目68)
前記方法は、有効量の殺生物剤を適用する工程をさらに包含し、ここで有効量の前記殺生物剤は、目的の生物を選択的に制御すると同時に、作物に有意に損傷を与えない、項目59~67のいずれか1項に記載の方法。
(項目69)
前記細菌株またはその活性改変体および前記殺生物剤は、同時に適用される、項目68に記載の方法。
(項目70)
前記細菌株またはその活性改変体および前記殺生物剤は、逐次的に適用される、項目68に記載の方法。
(項目71)
前記殺生物剤は、殺真菌剤である、項目68~70のいずれか1項に記載の方法。
(項目72)
改変された細菌株を作製する方法であって、前記方法は、
(a)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株の集団を提供する工程であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記細菌株は、目的の殺生物剤に感受性である、工程;
(b)前記細菌株を、前記目的の殺生物剤の存在下で培養する工程;ならびに
(c)前記目的の殺生物剤に対して増大した抵抗性を有する改変された細菌株を選択する工程、
を包含する、方法。
(項目73)
前記培養する工程は、前記殺生物剤の濃度を経時的に増大させる工程を包含する、項目72に記載の方法。
(項目74)
前記殺生物剤は、グリホサートまたはグルホシネートである、項目72または73に記載の方法。
(項目75)
植物の病気を処理または防止するための方法であって、前記方法は、植物の病気を有するかまたは植物の病気を発生させるリスクのある植物に、有効量の、
(a)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1種であって、ここで前記改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含み、前記細菌株は、前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。
(項目76)
前記細菌株またはその活性改変体は、1種もしくはこれより多くの植物の病気を処理または防止する、項目75に記載の方法。
(項目77)
前記1種もしくはこれより多くの植物の病気は、1種もしくはこれより多くの真菌性の植物の病気を含む、項目76に記載の方法。
(項目78)
前記1種もしくはこれより多くの真菌性の植物の病気は、アジア型ダイズさび病(ASR)を含む、項目77に記載の方法。
(項目79)
前記細菌株またはその活性改変体は、1種もしくはこれより多くの病原体を制御する、項目75~78のいずれか1項に記載の方法。
(項目80)
前記1種もしくはこれより多くの病原体は、1種もしくはこれより多くの真菌病原体を含む、項目79に記載の方法。
(項目81)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Botrytis cinerea、Cersospora spp、Cercospora sojina、Cercospora beticola、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Blumeria graminis f. sp. Tritici、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Golovinomyces cichoracearum、Erysiphe lagerstroemiae、Sphaerotheca pannosa、Colletotrichum cereale、Apiognomonia errabunda、Apiognomonia veneta、Colletotrichum gloeosporiodes、Discula fraxinea、Plasmopara viticola、Pseudoperonospora cubensis、Peronospora belbahrii、Bremia lactucae、Peronospora lamii、Plasmopara obduscens、Pythium cryptoirregulare、Pythium aphanidermatum、Pythium irregulare、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora capsici、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Fusarium oxysporum、Fusarium graminicola、Gibberella zeae、Colletotrichum graminicola、Phakopsora sp.、Phakopsora meibomiae、Phakopsora pachyrizi、Puccinia triticina、Puccinia recondita、Puccinia striiformis、Puccinia graminis、Puccinia spp.,Venturia inaequalis、Verticillium spp、Erwinia amylovora、Monilinia fructicola、Monilinia lax、およびMonilinia fructigenaからなる群より選択される、項目80に記載の方法。
(項目82)
前記組成物は、Botrytis cinerea、Cercospora sojina、Alternaria solani、Rhizoctonia solani、Erysiphe necator、Podosphaera xanthii、Colletotrichum cereal、Plasmopara viticola、Peronospora belbahrii、Pythium aphanidermatum、Pythium sylvaticum、Pythium myriotylum、Pythium ultimum、Phytophthora nicotianae、Phytophthora infestans、Phytophthora tropicalis、Phytophthora sojae、Fusarium graminearum、Fusarium solani、Phakopsora pachyrizi、およびVenturia inaequalisaからなる群より選択される1種もしくはこれより多くの真菌病原体を制御する、項目81に記載の方法。
(項目83)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Phakopsora pachyrhiziまたはPhakopsora meibomiaeを含む、項目81に記載の方法。
(項目84)
前記1種もしくはこれより多くの真菌病原体は、Phakopsora pachyrhiziを含む、項目83に記載の方法。
I.全体像
少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するおよび/または植物の健康状態を改善するおよび/または1種もしくはこれより多くの植物の病気を制御するための組成物および方法が、提供される。生物学的因子、生物防除因子、細菌株、改変された細菌株、改変された生物学的因子、または改変された生物防除因子もしくはその活性改変体は、病気の原因となる植物病原体を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するおよび/または植物の健康状態を改善するために使用される微生物を記載するために、本明細書で使用される。
種々の生物防除因子または細菌株が提供され、これらは、1種もしくはこれより多くの植物の病気を制御するおよび/または少なくとも1つの目的の農学上の形質を改善するおよび/または植物の健康状態を改善するために使用され得る。このような細菌株は、以下を包含する:AIP27511(Bacillus drentensis株)、AIP35174(Bacillus thuringiensis株)、AIP25773(Bacillus flexus株)、AIP15251(Bacillus frigoritolerans株)、AIP61892(Bacillus subtilus subsp. Subtilus株)、AIP79428(Burkholderia vietnamiensis株)、AIP14931(Bacillus thuringiensis株)、AIP39589(Bacillus acidiceler株)、およびAIP36895(Bacillus simplex株)。AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、およびAIP36895のうちの1種もしくはこれより多くを含む細胞集団、ならびにこれらの株の各々に由来する胞子の集団、またはこれらの任意の調製物が、提供される。
AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、およびAIP36895の活性改変体が、さらに提供される。このような改変体は、1種もしくはこれより多くの植物の病気を制御する(すなわち、病気の重篤度を低減するおよび/または病気の発生を低減する)および/または1種もしくはこれより多くの植物病原体を制御する能力を保持する。いくつかの実施形態において、改変体は、1種もしくはこれより多くの真菌性の植物の病気および/または1種もしくはこれより多くの真菌病原体を制御する能力を保持する。他の実施形態において、改変体は、ASRを制御する能力を保持する。
本明細書で提供される細菌株(すなわち、AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体、あるいはAIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ)は、細胞ペースト、水和剤、細胞ペレット、粉剤(dust)、粒剤(granule)、スラリー、乾燥粉末、水性もしくは油ベースの液体生産物などとして製剤化され得る。このような製剤は、キャリアおよび他の因子に加えて、本明細書で提供される細菌もしくはその活性改変体を含む。その製剤は、本明細書の他の箇所で開示されるように、種々の方法で使用され得る。
本明細書で提供される細菌株もしくは改変された細菌株またはその活性改変体は、目的の農学上の形質(agonomic trait of interest)を改善するために任意の植物種とともに使用され得る。目的の農学上の形質としては、植物の健康状態または商業的価値を改善する任意の形質が挙げられる。目的の農学上の形質の非限定的な例としては、以下が挙げられる:バイオマスの増大、旱魃寛容性の増大、熱寛容性、除草剤寛容性、旱魃抵抗性、昆虫抵抗性、真菌抵抗性、ウイルス抵抗性、細菌抵抗性、雄性不稔性、低温寛容性、塩寛容性、増大した収量、増強された栄養素利用効率、増大した窒素利用効率、窒素ストレスへの増大した寛容性、増大した発酵性炭水化物含有量、低減したリグニン含有量、増大した抗酸化物質含有量、増強された水利用効率、増大した生長力、増大した発芽効率、より速いもしくは増大した開花、増大したバイオマス、変化した根 対 苗条バイオマス比(root-to-shoot biomass ratio)、増強された土壌水分保持、またはこれらの組み合わせ。他の場合には、上記目的の農学上の形質としては、変化した油含有量、変化したタンパク質含有量、変化した種子炭水化物組成、変化した種子油組成、および変化した種子タンパク質組成、化学物質寛容性、低温寛容性、遅延した老化、病気抵抗性、旱魃寛容性、穂重、生長改善、健康状態の増強、熱寛容性、除草剤寛容性、草食動物抵抗性(herbivore resistance)、改善された窒素固定、改善された窒素利用、改善された根の構造、改善された水利用効率、増大したバイオマス、増大した根の長さ、増大した種子重量、増大した苗条の長さ、増大した収量、水を制限した条件下での増大した収量、穀粒の重量(kernel mass)、穀粒の水分含有量、金属寛容性、穂の数、穂1本あたりの穀粒の数、莢の数、栄養増強、病原体抵抗性、有害生物抵抗性、光合成能力改善、塩分寛容性、青々したままでいる(stay-green)、生長力改善、成熟種子の増大した乾燥重量、成熟種子の増大した新鮮重量(increased fresh weight of mature seeds)、1植物体あたりの成熟種子の増大した数、増大したクロロフィル含有量、1植物体あたりの増大した莢の数、増大した莢の長さ、1植物体あたりのしおれた葉の低減した数、1植物体あたりのひどくしおれた葉の低減した数、および1植物体あたりのしおれていない葉の増大した数、代謝産物のレベルでの検出可能な調節、転写物のレベルでの検出可能な調節、または参照植物に対するプロテオームでの検出可能な調節。
処理または低減または防止され得る植物の病気の例としては、真菌、ウイルスもしくはウイロイド、細菌、昆虫、線虫、原生動物などによって引き起こされる植物の病気が挙げられるが、これらに限定されない。真菌性の植物の病気の例としては、いくつか挙げると、以下が挙げられるが、これらに限定されない:アジア型ダイズさび病(ASR)、灰色カビ病、斑点病、ダイズ斑点病、夏疫病、立ち枯れ病(Damping off complex)、ブラウンパッチ、黒あざ病、根腐れ、ベリーロット(belly rot)、紋枯れ病、うどんこ病、炭疽病(Anthracnose leaf spot)、ベト病、ピシウム病、疫病(Late Blight)、赤カビ病(Fusarium Head Blight)、急性枯死症(SDS)、萎凋病(Fusarium Wilt)、腰折れ病(Corn Stalk Rot)、赤さび病、黒さび病、黄さび病、コムギさび病(Wheat Rust)、さび病、リンゴ黒星病、バーティシリウム萎凋病、火傷病、および灰星病。
Melanoplus femurrubrum, レッドレッグドグラスホッパー;Melanoplus differentialis、ディファレンシャルグラスホッパー(differential grasshopper);Melanoplus sanguinipes、渡りグラスホッパー;Mayetiola destructor、ヘシアンバエ;Sitodiplosis mosellana、ムギアカタマバエ;Meromyza americana、ムギキモグリバエ;Hylemya coarctata、コムギハナアブ(wheat bulb fly);Frankliniella fusca、ウスグロアザミウマ;Cephus cinctus、コムギクキバチ(wheat stem sawfly);Aceria tulipae、チューリップサビダニ;ヒマワリ:Cylindrocupturus adspersus、ヒマワリクキゾウムシ(sunflower stem weevil);Smicronyx fulus、赤ヒマワリクキゾウムシ(red sunflower seed weevil);Smicronyx sordidus、灰色ヒマワリ種子ゾウムシ(gray sunflower seed weevil);Suleima helianthana、ヒマワリハマキガ(sunflower bud moth);Homoeosoma electellum、ヒマワリガ(sunflower moth);Zygogramma exclamationis、ヒマワリ甲虫(sunflower beetle);Bothyrus gibbosus、キャロットビートル(carrot beetle);Neolasioptera murtfeldtiana、サンフラワーシードミッジ(sunflower seed midge);ワタ:Heliothis virescens、ニセアメリカタバコガ(tobacco budworm);Helicoverpa zea、アメリカタバコガ(cotton bollworm);Spodoptera exigua、シロイチモジヨトウ;Pectinophora gossypiella、ピンクボールワーム(pink bollworm);ワタノミゾウムシ(boll weevil)、例えば、Anthonomus grandis;Aphis gossypii、ワタアブラムシ;Pseudatomoscelis seriatus、ワタノミハムシ(cotton fleahopper);Trialeurodes abutilonea、バンデッドウイングドホワイトフライ(bandedwinged whitefly);Lygus lineolaris、サビイロカスミカメ;Melanoplus femurrubrum、レッドレッグドグラスホッパー;Melanoplus differentialis、ディファレンシャルグラスホッパー;Thrips tabaci、ネギアザミウマ;Franklinkiella fusca、タバコアザミウマ(tobacco thrips);Tetranychus cinnabarinus、ナミハダニ・赤色型;Tetranychus urticae、ナミハダニ・黄緑型;イネ:Diatraea saccharalis、サトウキビメイガ;Spodoptera frugiperda、ツマジロクサヨトウ;Helicoverpa zea、アメリカタバコガ;Colaspis brunnea、ブドウハムシ(grape colaspis);Lissorhoptrus oryzophilus、イネミズゾウムシ;Sitophilus oryzae、コクゾウムシ;Nephotettix nigropictus、ツマグロヨコバイ(rice leafhoper);アメリカコバネナガカメムシ、例えば、Blissus leucopterus leucopterus;Acrosternum hilare、ミドリカメムシ(green stink bug);ダイズ:Pseudoplusia includens、ダイズシャクトリムシ(soybean looper);Anticarsia gemmatalis、ハッショウマメキャタピラー(velvetbean caterpillar);Plathypena scabra、グリーンクローバーアオムシ(green cloverworm);Ostrinia nubilalis、ヨーロッパアワノメイガ;Agrotis ipsilon、タマナヤガ;Spodoptera exigua、シロイチモジヨトウ;Heliothis virescens、ニセアメリカタバコガ;Helicoverpa zea、アメリカタバコガ;Epilachna varivestis、インゲンテントウ;Myzus persicae、モモアカアブラムシ;Empoasca fabae、ジャガイモヒメヨコバイ;Acrosternum hilare、ミドリカメムシ;Melanoplus femurrubrum、レッドレッグドグラスホッパー;Melanoplus differentialis、ディファレンシャルグラスホッパー;Hylemya platura、タネバエ;Sericothrips variabilis、ダイズアザミウマ;Thrips tabaci、ネギアザミウマ;Tetranychus turkestani、イチゴハダニ(strawberry spider mite);Tetranychus urticae、ナミハダニ・黄緑型;オオムギ:Ostrinia nubilalis、ヨーロッパアワノメイガ;Agrotis ipsilon、タマナヤガ;Schizaphis graminum、アブラムシ;アメリカコバネナガカメムシ、例えば、Blissus leucopterus leucopterus;Acrosternum hilare、ミドリカメムシ;Euschistus servus、クサギカメムシ;Jylemya platura、タネバエ;Mayetiola destructor、ヘシアンバエ;Petrobia latens、ホモノハダニ;アブラナ:Vrevicoryne brassicae、ダイコンアブラムシ;Phyllotreta cruciferae、アブラナノミハムシ(crucifer flea beetle);Phyllotreta striolata、キスジノミハムシ;Phyllotreta nemorum、カブスジノミハムシ(striped turnip flea beetle);Meligethes aeneus、菜種甲虫(rapeseed beetle);およびチビケシキスイ(pollen beetles)、Meligethes rufimanus、Meligethes nigrescens、Meligethes canadianusおよびMeligethes viridescens;ジャガイモ:Leptinotarsa decemlineata、コロラドハムシ。
本明細書で提供されるのは、植物の病気を有するかまたは植物の病気を発生させるリスクのある植物に、本明細書で提供される少なくとも1種の細菌株もしくはその活性改変体の有効量を適用する工程を包含する、植物の病気を処理または防止するための方法であり、ここで上記細菌株は、上記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくははその活性改変体は、AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種;あるいはAIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み得る。いくつかの実施形態において、上記細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、少なくとも約1012~1016CFU/ヘクタールまたは少なくとも約104~1016CFU/ヘクタール、または少なくとも約105~1011CFU/ヘクタールを含む。
植物病原体に対する植物における病気の抵抗性を誘導するための組成物および方法がまた、提供される。よって、上記組成物および方法はまた、真菌病原体、ウイルス、線虫、および昆虫に対して植物を防御するにあたって有用である。植物病原体によって引きおこされる植物の病気に感受性である植物に、少なくとも1種の本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量を適用する工程を包含する、植物病原体に対する病気の抵抗性を誘導するための方法が、本明細書で提供される。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種;あるいはAIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせを含み得る。ある特定の実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、上記植物の病気を引きおこす病原体への防御応答を増進する。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、少なくとも約1012~1016CFU/ヘクタールを含む。
本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、有効量で適用される。本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、植物の病気を引きおこす病原体を制御、処理、防止、阻害する、および/あるいは植物の病気の重篤度を低減するかまたは植物の病気の発生を低減するために十分な量である。他の実施形態において、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効量は、目的の農学上の形質を改善するおよび/または植物の健康状態、病気に感受性である植物の生長もしくは収量を増進もしくは増大させるために十分な量である。本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の適用の割合は、標的とされている病原体、防御すべき作物、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体の有効性、上記病気の重篤度、気候条件、改善すべき目的の農学上の形質などに従って変動し得る。
本明細書中の他の箇所で考察されるように、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、殺生物剤(すなわち、除草剤、殺真菌剤、農薬、もしくは他の農作物保護化学物質)と組み合わせて使用され得る。このような場合には、本明細書で提供される細菌株もしくはその活性改変体は、目的の殺生物剤と適合性である。
銅殺真菌剤(アシペタックス-銅、ボルドー液(Bordeaux mixture)、バーガンディー液(Burgundy mixture)、チェスハント液(Cheshunt mixture)、酢酸銅、炭酸銅、塩基性、水酸化銅、ナフテン酸銅、オレイン酸銅、オキシ塩化銅(copper oxychloride)、ケイ酸銅、硫酸銅、硫酸銅、塩基性、クロム酸銅亜鉛(copper zinc chromate)、クフラネブ、クプロバム、酸化銅(I)、マンカッパー、オキシン銅、サイセントン(saisentong)、チオジアゾール銅(thiodiazole-copper));シアノアクリレート殺真菌剤(ベンザマクリル、フェナマクリル(phenamacril));ジカルボキシイミド殺真菌剤(ファモキサドン、フルオロイミド);ジクロロフェニルジカルボキシイミド殺真菌剤(クロゾリネート、ジクロゾリン、イプロジオン、イソバレジオン、ミクロゾリン、プロシミドン、ビンクロゾリン);フタルイミド殺真菌剤(カプタホール、キャプタン、ジタリムホス、ホルペット、チオクロルフェンヒム);ジニトロフェノール殺真菌剤(ビナパクリル、ジノブトン、ジノカップ、ジノカップ-4、ジノカップ-6、メプチルジノカップ、ジノクトン、ジノペントン、ジノスルホン、ジノテルボン、DNOC);ジチオカルバメート殺真菌剤(アモバム、アソメート、アジチラム、カルバモルフ、クフラネブ、クプロバム、ジスルフィラム、フェルバム、メタム、ナバム、テコラム、チウラム、ウルバシド(urbacide)、ジラム);環式ジチオカルバメート殺真菌剤(ダゾメット、エテム、ミルネブ);ポリマージチオカルバメート殺真菌剤(マンカッパー、マンコゼブ、マネブ、メチラム、ポリカルバメート、プロピネブ、ジネブ);ジチオラン殺真菌剤(イソプロチオラン、サイジュンマオ(saijunmao));燻蒸用殺真菌剤(二硫化炭素、シアン、ジチオエーテル、臭化メチル、ヨウ化メチル、テトラチオ炭酸ナトリウム);ヒドラジド殺真菌剤(ベンキノックス、サイジュンマオ(saijunmao));イミダゾール殺真菌剤(シアゾファミド、フェナミドン、フェナパニル、グリオジン、イプロジオン、イソバレジオン、ペフラゾエート、トリアゾキシド);コナゾール殺真菌剤(イミダゾール)(クリンバゾール、クロトリマゾール、イマザリル、オキスポコナゾール、プロクロラズ、トリフルミゾール);無機性殺真菌剤(アジ化カリウム、チオシアン酸カリウム、アジ化ナトリウム、硫黄、銅殺真菌剤もまた参照のこと、無機水銀殺真菌剤もまた参照のこと);水銀殺真菌剤;無機水銀殺真菌剤(塩化水銀(II)、酸化水銀(II)、塩化水銀(I));有機水銀殺真菌剤(臭化(3-エトキシプロピル)水銀(II)、酢酸エチル水銀(II)、臭化エチル水銀(II)、塩化エチル水銀(II)、エチル水銀2,3-ジヒドロキシプロピルメルカプチド(ethylmercury 2,3-dihydroxypropyl mercaptide)、エチル水銀ホスフェート、N-(エチル水銀)-p-トルエンスルホンアニリド、ヒドラルガフェン、塩化2-メトキシエチル水銀、安息香酸メチル水銀、メチル水銀ジシアンジアミド、メチル水銀ペンタクロロフェノキシド、8-フェニル水銀オキシキノリン(8-phenylmercurioxyquinoline)、フェニル水銀ウレア(phenylmercuriurea)、酢酸フェニル水銀、塩化フェニル水銀、ピロカテコールのフェニル水銀誘導体、硝酸フェニル水銀、サリチル酸フェニル水銀、チメロサール(thiomersal)、トリル水銀アセテート);モルホリン殺真菌剤(アルジモルフ、ベンザモルフ、カルバモルフ、ジメトモルフ、ドデモルフ、フェンプロピモルフ、フルモルフ、トリデモルフ);有機リン殺真菌剤(アンプロピルホス、ジタリムホス、EBP、エジフェンホス、ホセチル、ヘキシルチオホス、イネジン、イプロベンホス、イゾパムホス(izopamfos)、ケジュンリン(kejunlin)、ホスダイフェン、ピラゾホス、トルクロホスメチル、トリアミホス);有機スズ殺真菌剤(デカフェンチン、フェンチン、酸化トリブチルスズ);オキサチイン(oxathiin)殺真菌剤(カルボキシン、オキシカルボキシン);オキサゾール殺真菌剤(クロゾリネート、ジクロゾリン、ドラゾキソロン、ファモキサドン、ヒメキサゾール、メタゾキソロン、ミクロゾリン、オキサジキシル、オキサチアピプロリン、ピリソキサゾール、ビンクロゾリン);ポリスルフィド殺真菌剤(多硫化バリウム(barium polysulfide)、多硫化カルシウム(calcium polysulfide)、多硫化カリウム(potassium polysulfide)、多硫化ナトリウム(sodium polysulfide));ピラゾール殺真菌剤(ベンゾビンジフルピル、ビキサフェン、フェンピラザミン、フルキサピロキサド、フラメトピル、イソピラザム、オキサチアピプロリン、ペンフルフェン、ペンチオピラド、ピラクロストロビン、ピラメトストロビン、ピラオキシストロビン、ラベンザゾール、セダキサン);ピリジン殺真菌剤(ボスカリド、ブチオベート、ジピリチオン、フルアジナム、フルオピコリド、フルオピラム、パリノール、ピカルブトラゾクス、ピリベンカルブ、ピリジニトリル、ピリフェノックス、ピリソキサゾール、ピロキシクロル、ピロキシフル、トリクロピリカルブ);ピリミジン殺真菌剤(ブピリメート、ジフルメトリム、ジメチリモール、エチリモール、フェナリモール、フェリムゾン、ヌアリモール、トリアリモール);アニリノピリミジン殺真菌剤(シプロジニル、メパニピリム、ピリメタニル);ピロール殺真菌剤(ジメタクロン(dimetachlone)、フェンピクロニル、フルジオキソニル、フルオロイミド);四級アンモニウム殺真菌剤(ベルベリン、サンギナリン);キノリン殺真菌剤(エトキシキン、ハラクリネート、8-ヒドロキシキノリンスルフェート、キナセトール、キノキシフェン、テブフロキン);キノン殺真菌剤(クロラニル、ジクロン、ジチアノン);キノキサリン殺真菌剤(キノメチオネート、クロルキノックス、チオキノックス);チアジアゾール殺真菌剤(エトリジアゾール、サイセントン(saisentong)、チアジアゾール銅(thiodiazole-copper)、亜鉛チアゾール(zinc thiazole));チアゾール殺真菌剤(エタボキサム、イソチアニル、メトスルホバックス、オクチリノン、オキサチアピプロリン、チアベンダゾール、チフルザミド);チアゾリジン殺真菌剤(フルチアニル、チアジフルオール);チオカルバメート殺真菌剤(メタスルホカルブ、プロチオカルブ);チオフェン殺真菌剤(エタボキサム、イソフェタミド、シルチオファム);トリアジン殺真菌剤(アニラジン);トリアゾール殺真菌剤(アミスルブロム、ビテルタノール、フルオトリマゾール、トリアズブチル);コナゾール殺真菌剤(トリアゾール)(アザコナゾール、ブロムコナゾール、シプロコナゾール、ジクロブトラゾール、ジフェノコナゾール、ジニコナゾール、ジニコナゾールM、エポキシコナゾール、エタコナゾール、フェンブコナゾール、フルキンコナゾール、フルシラゾール、フルトリアホール、フルコナゾール、フルコナゾール・シス、ヘキサコナゾール、フアンジュンズオ(huanjunzuo)、イミベンコナゾール、イプコナゾール、メトコナゾール、ミクロブタニル、ペンコナゾール、プロピコナゾール、プロチオコナゾール、キンコナゾール、シメコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール、トリアジメホン、トリアジメノール、トリチコナゾール、ウニコナゾール、ウニコナゾールP);トリアゾロピリミジン殺真菌剤(アメトクトラジン);ウレア殺真菌剤(ベンタルロン、ペンシクロン、キナザミド);亜鉛殺真菌剤(アシペタックス亜鉛、クロム酸銅亜鉛、クフラネブ、マンコゼブ、メチラム、ポリカルバメート、ポリオキソリム-亜鉛、プロピネブ、ナフテン酸亜鉛、亜鉛チアゾール(zinc thiazole)、亜鉛トリクロロフェノキシド(zinc trichlorophenoxide)、ジネブ、ジラム);未分類殺真菌剤(アシベンゾラル、アシペタックス、アリルアルコール、塩化ベンザルコニウム、ベトキサジン、ブロモタロニル(bromothalonil)、キトサン、クロロピクリン、DBCP、デヒドロ酢酸、ジクロメジン、ジエチルピロカーボネート、エチリシン(ethylicin)、フェナミノスルフ、フェニトロパン、フェンプロピジン、ホルムアルデヒド、フルフラール、ヘキサクロロブタジエン、メチルイソチオシアネート、ニトロスチレン、ニトロタル-イソプロピル、OCH、ペンタクロロフェニルラウレート、2-フェニルフェノール、フタリド、ピペラリン、プロパミジン、プロキナジド、ピロキロン、ナトリウムオルトフェニルフェノキシド、スピロキサミン、スルトロペン、チシオフェン、トリシクラゾール)またはメフェノキサム。本発明の非限定的な実施形態は、以下を包含する:
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む、組成物であって、
ここで前記細菌株、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体は、約105 CFU/g~約1012 CFU/gまたは約105 CFU/ml~約1012 CFU/mlで存在し、そしてここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む細胞ペーストを含む、組成物であって、
ここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つ;
を含む水和剤を含む、組成物であって、
ここで有効量の前記細菌株組成物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善するか、または植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
組成物。
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1つ;あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1つであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
を含む、細菌株の単離された生物学的に純粋な培養物。
(a)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、細菌株またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ;
から成長される、細菌培養物であって、
ここで前記細菌培養物は、植物の病気を引き起こす植物病原体に対して抗病原体活性を有しかつグルホシネートの存在下で成長できるか、または有効量の前記細菌培養物は、前記植物の目的の農学上の形質を改善する、
細菌培養物。
(a)有効量の、細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種;ならびに/あるいは
(b)有効量の、AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1種であって、ここで前記改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含み、前記有効量は、前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御するか、または前記目的の農学上の形質を改善する、
方法。
(a)前記栽培地に、前記植物の病気に感受性である種子または植物を植える工程;および
(b)前記植物の病気に感受性である植物に、以下:
(i)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体;あるいは
(ii)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせであって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせ、
を含む、有効量の少なくとも1種の細菌株を適用する工程を包含し;
そしてここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 コロニー形成単位(CFU)/ヘクタールを含む、
方法。
(a)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体を含む少なくとも1種の細菌株の集団を提供する工程であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含み、前記細菌株は、目的の殺生物剤に感受性である、工程;
(b)前記細菌株を、前記目的の殺生物剤の存在下で培養する工程;ならびに
(c)前記目的の殺生物剤に対して増大した抵抗性を有する改変された細菌株を選択する工程、
を包含する、方法。
(a)細菌株AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちの少なくとも1種であって、ここで前記活性改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種;ならびに/あるいは
(b)AIP27511、AIP35174、AIP25773、AIP15251、AIP61892、AIP79428、AIP14931、AIP39589、もしくはAIP36895、またはこれらのうちのいずれかの活性改変体のうちのいずれか1種に由来する胞子、もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせのうちの少なくとも1種であって、ここで前記改変体は、Mash距離 約0.015以内のゲノムを有する細菌株を含む、少なくとも1種、
を適用する工程を包含し;
ここで前記有効量は、少なくとも約1012~1016 CFU/ヘクタールを含み、前記細菌株は、前記植物の病気を引き起こす植物病原体を制御する、
方法。
材料および方法
植物材料: 感受性ダイズ品種Williams 82を、切断葉(detached-leaf)技術(Twizeyimana and Hartman, 2010)を使用して、および生育チャンバ中の全植物体を使用して、株評価において使用した。簡潔には、ダイズ種子を、 18セルプラスチック挿入物中に蒔き、これにソイルレスミックス(Sunshine Mix, LC1; Sun Gro Horticulture Inc., Bellevue, WA)を満たし、平箱の中に置いた。セルに、蒔いたときに、遅延放出ペレット(Osmocote 19-6-12; 2ペレット/cm2)を施肥した。平箱を、70% 相対湿度(RH)で、14時間明および10時間暗の毎日のサイクルで、それぞれ24℃および20℃において維持した生育チャンバ(Percival Scientific, Inc., Boone, IA)の中で維持した。
切断葉に対する評価: 簡潔には、葉のディスク(各3cm直径)に、120μlのP. pachyrhiziの細菌株(1×108 胞子/ml 水)を噴霧した。葉のディスクに、細菌株の適用の1日後に、120μl P. pachyrhiziの胞子懸濁物(1×104 胞子/ml 滅菌蒸留水)を接種した。上記細菌株およびP.pachyrhizi接種物の適用の両方を、空気コンプレッサーに取り付けた噴霧器を使用して行った(Twizeyimana and Hartman, 2010)。葉のディスクを、プラスチック容器(Blister Box 20×20cm, Placon, Madison, WI)中で、飽和20×20cm 濾紙(Whatman International Ltd., Kent, England)上に向軸面を下にして置いた;2枚の濾紙を1箱あたり使用した。葉のディスクの入った箱を、遮光して12時間インキュベートし、続いて、23℃および95% RHで維持した組織チャンバ(Percival Scientific, Inc.)の中で13時間明(380umol m-2s-1)および11時間暗のサイクルでインキュベートした。インキュベーションの前に、箱をジップバッグ(Webster Industries, Peabody, MA)の中に入れた。その実験設計は、2つの複製を伴う完全乱塊法(randomized complete block design)であり、1回反復した。
両方の評価において、記録したデータは、接種後14日間記録した1cm直径の円の中の夏胞子層の数(夏胞子層の計数)であった。1cm直径の円の中で<10 夏胞子層を有する9個の細菌株を、生育チャンバ中の全植物体に対する評価後に、圃場で試験するために選択した(図1および表2)。
細菌株を、CHA培地(これは、1Lあたり、NaCl(5g)、トリプトン(10g)、ニュートリエントブロス(8g)、CaCl2(0.14mM)、MgCl2・6H2O(0.2mM)、およびMnCl2・4H2O(0.01mM)からなる)中で培養した。表3は、インキュベーション時間、達成された細菌の濃度(CFU/ml)および胞子形成のパーセンテージをまとめる。
表2に記載される種々の細菌株を、圃場のダイズに適用する。処理を、ASR処理に関する一般処理ガイドラインに従って均一な植物カバレッジを達成するために処理を適用するようにして、16.8ガロン/エーカーで適用する。第1の処理を、R1で適用し、追跡処理を、第1の処理の14日後および28日後に適用する。その具体的処理を以下に概説する。
処理:
1. 非処理チェック
2. 接種チェック
3. 6.2オンス/エーカーでQuadris
4. 2.1オンス/エーカーでQuadris
5. 7.5g/LでAIP27511
6. 7.5g/LでAIP35174
7. 7.5g/LでAIP25773
8. 7.5g/LでAIP15251
9. 7.5g/LでAIP61892
10. 7.5g/LでAIP79428
11. 7.5g/LでAIP14931
12. 7.5g/LでAIP39589
13. 7.5g/LでAIP36895
表2に記載される種々の細菌株を、圃場のダイズに適用する。細菌株処理を、ASR処理に関する一般処理ガイドラインに従って均一な植物カバレッジを達成するために処理を適用するようにして、20ガロン/エーカーで適用する。第1の処理を、R1で適用し、追跡処理を、第1の処理の14日後に適用する。その具体的処理を以下に概説する。
処理:
1. 非処理チェック
2. 接種チェック
3. 6.2オンス/エーカーでQuadris
4. 2.1オンス/エーカーでQuadris
5. 7.5g/LでAIP27511
6. 7.5g/LでAIP35174
7. 7.5g/LでAIP25773
8. 7.5g/LでAIP15251
9. 7.5g/LでAIP61892
10. 7.5g/LでAIP79428
11. 7.5g/LでAIP14931
12. 7.5g/LでAIP39589
13. 7.5g/LでAIP36895
11~14日齢のRhizoctonia solani感染子実をすり潰した。そのすり潰した接種物を、#10スクリーンを通してふるいにかけて、十分にすり潰されていないいかなる子実をも除去した。そのすり潰してふるいにかけた感染子実を、容積で1リットルの土壌ミックスに対してすり潰した接種物を1.5グラムで、Fafardスーパーファイン発芽培地に添加した。発芽ミックス、接種物、および75リットルの発芽培地あたり1リットルの水を、セメントミキサーに添加し、全てが十分に一体化するまで混合した。その十分に一体化した培地-接種物材料を、第2のふた付き保持容器の中に入れ、アッセイにおいて使用する前に20℃において18時間保持した。
実施例2で生産した培養物を、20分間、10,000rpmで遠心分離して、ペレットを生産した。その上清を流し捨て、培養液の別の容積を先のペレットに添加し、再び遠心分離した(これは、各採取に必要とされる遠心分離チューブの数を減らすためであった)。
植物材料および細菌株: 品種Williams 82を、これらの実験において使用した。細菌株を、以下のように調製した。発酵培養ブロスを遠沈し、そのペレット質量を秤量した。ペレット物質のうちの各100gに対して、5gのグリセロールを添加した(ペレット質量のうちの5%)。グリセロールを、均質な粘稠性が達成されるまで手で混合した。合計20g(細胞ペーストの20重量%)のMicrocel E(Imery’s Celite)を、Sabatierブレードを備えたフードプロセッサーに添加した。細胞ペースト、グリセロール、およびMicrocelを、部分的に乾燥した団粒様構造へと短時間ホモジナイズした。この最終生産物を、アルミニウムトレイに拡げ、40℃で一晩乾燥させた。一旦その生産物の乾燥状態が0.3もしくはこれより低い水分活性に達した後、それを製粉し、ふるいにかけ、4℃で貯蔵した。
圃場実験を、2015年にフロリダにおいて、クインシーのNorth Florida Research and Education Centerで行った。評価の間の7月から9月までの月平均温度は、24~27℃の範囲に及んだ。植物材料、細菌株およびP.pachyrhizi単離体は、フロリダでの温室実験(実施例7)に記載されるものに類似であった。植物に、R1生長ステージ(Fehrら 1971)においてプロトコルに従って株を噴霧し、1日後に、P.pachyrhiziの混合物を使用して接種し、その後に天然の感染を行った。株処理を、第1の処理の14日後に再適用した。
11~14日齢のRhizoctonia solani感染子実をすり潰す。そのすり潰した接種物を、#10スクリーンを通してふるいにかけて、十分にすり潰されていないいかなる子実をも除去する。そのすり潰してふるいにかけた感染子実を、容積で1リットルの土壌ミックスに対してすり潰した接種物を1.5グラムで、Fafardスーパーファイン発芽培地に添加する。発芽ミックス、接種物、および75リットルの発芽培地あたり1リットルの水を、セメントミキサーに添加し、全てが十分に一体化するまで混合する。その十分に一体化した培地-接種物材料を、第2のふた付き保持容器の中に入れ、アッセイにおいて使用する前に20℃において18時間保持する。
表2に記載される種々の細菌株を、表8に列挙される現在の農耕法の下で圃場において表8に列挙される作物に適用して、均質な植物カバレッジを達成し、適切な農耕法に従う。病気につき適切なタイミングで、処理を防止的におよび/または治癒的に適用する。
葉面病原体処理リスト:夏疫病
6~10処理
処理容積:100ガロン/エーカー
処理リスト:
1. 非接種、非処理チェック
2. 接種チェック
3. ラベル説明書に適用された協力者が選択した化学物質制御
4. ラベル説明書に適用された生物学的制御Serenade
5. 5g/Lでの実験的生物学的葉面処理+3オンス/100ガロンでのCapsil
表2に記載される種々の細菌株を、圃場に植える前に種子処理として表9に列挙される作物に適用する。細菌株処理を、病気の防止的制御のためにそして表10中の適用割合で適用する。その具体的処理を以下に概説する。
表1に記載される種々の細菌株もしくはその活性改変体を、病気の防止的制御としておよび表11に列挙される処理割合で、植えるときに畝間処理として表9に列挙される作物に適用する。その具体的処理を以下に概説する:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 畝間生物学的処理 5g/L+6オンス/100ガロンにおいて15ガロン/エー
カーにおいてCapsil
4. 協力者が選択しかつ適用したとおりの病気の適切な畝間化学チェック
種子処理製剤を、10g 製剤化株+30ml水+15ml Unicoat Polymerを混合することによって作製した。秤量した種子を滅菌したメイソンジャーの中に入れる。種子重量に基づく種子処理溶液の適切な量(.05ml/25g 種子)を、混合物を60秒間振盪するかまたは種子が視覚的に十分にコーティングされるまで振盪する。その種子を、ホイルローストパン(foil roasting pan)の中に単層にして入れ、1時間、または種子が乾燥するまで、層流フードの下に置く。種子が一旦乾燥した後、それらを気密容器の中に入れて、室温で貯蔵する。
表12中で以下に示した株の各々の100gの細胞ペーストを、5gのグリセロールおよび20gの合成ケイ酸カルシウムと、フードプロセッサーを使用して混合した。この材料を、水分活性が0.30未満になるように40℃で乾燥させたところ、その時点で、その材料は、表12中で示されるとおりのCFU/gを含んでいた。その乾燥粉末製剤を、真空封入したマイラーパウチの中に22℃で貯蔵した。その乾燥粉末製剤は、抗真菌活性を保持した。
細菌株AIP061892およびAIP079428を、種子処理としてダイズ変種W3103に適用した。その細菌株を、実施例14に記載されるように、水和剤として各々製剤化し、次いで、10gの製剤化細菌株と30ml 水および15ml Seed Coating Polymer(Unicoat)とを合わせ、次いで、均一な溶液が作製されるまで振盪することによって、種子処理に使用した。その完成した溶液を、1kgのダイズ種子に適用し、層流フードの下で12時間乾燥させた。
処理:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 0.4液量オンス/エーカーでQuadris
4. AIP061892種子処理
5. AIP079428種子処理
細菌株AIP061892およびAIP079428を、種子処理としてダイズ変種W3103に適用した。その細菌株を、実施例14に記載されるように、水和剤として各々製剤化し、次いで、10gの製剤化細菌株と30ml 水および15ml Seed Coating Polymer(Unicoat)とを合わせ、次いで、均一な溶液が作製されるまで振盪することによって、種子処理に使用した。その完成した溶液を、1kgのダイズ種子に適用し、層流フードの下で12時間乾燥させた。
処理:
1. 非接種チェック
2. 接種チェック
3. 0.4液量オンス/エーカーでQuadris
4. AIP061892種子処理
5. AIP079428種子処理
Claims (20)
- 生物防除因子NRRL No. B-67089を含む製剤であって、乾燥製剤または液体製剤である、製剤。
- 前記生物防除因子が、NRRL No. B-67089由来の胞子もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせの少なくとも1種をさらに含む、請求項1に記載の製剤。
- 前記乾燥製剤が、0.3またはこれより低い水分活性まで乾燥される、請求項1または2に記載の製剤。
- 前記製剤が、噴霧乾燥製剤、水和剤または粒剤である、請求項1または2に記載の製剤。
- 前記製剤が、22℃で30日間安定である、請求項1~4のいずれか1項に記載の製剤。
- 前記生物防除因子が、105 CFU/g~1012 CFU/gまたは105 CFU/ml~1012 CFU/mlで存在する、請求項1~5のいずれか1項に記載の製剤。
- 前記製剤が、農薬、殺真菌剤、殺虫剤または除草剤をさらに含む、請求項1~6のいずれか1項に記載の製剤。
- 前記殺真菌剤が、脂肪族窒素殺真菌剤、アミド殺真菌剤、アシルアミノ酸殺真菌剤、アニリド殺真菌剤、ベンズアニリド殺真菌剤、フルアニリド殺真菌剤、スルホンアニリド殺真菌剤、ベンズアミド殺真菌剤、フラミド殺真菌剤、フェニルスルファミド殺真菌剤、スルホンアミド殺真菌剤、バリンアミド殺真菌剤、抗生物質殺真菌剤、ストロビルリン殺真菌剤、メトキシアクリレートストロビルリン殺真菌剤、メトキシカルバニレートストロビルリン殺真菌剤、メトキシイミノアセトアミドストロビルリン殺真菌剤、メトキシイミノアセテートストロビルリン殺真菌剤、芳香族殺真菌剤、ヒ素を含む殺真菌剤、アリールフェニルケトン殺真菌剤、ベンゾイミダゾール殺真菌剤、ベンゾイミダゾール前駆体殺真菌剤、ベンゾチアゾール殺真菌剤、植物性殺真菌剤、架橋ジフェニル殺真菌剤、カルバメート殺真菌剤、ベンゾイミダゾリルカルバメート殺真菌剤、カルバニレート殺真菌剤、コナゾール殺真菌剤、コナゾール殺真菌剤(イミダゾール)、コナゾール殺真菌剤(トリアゾール)、銅殺真菌剤、シアノアクリレート殺真菌剤、ジカルボキシイミド殺真菌剤、ジクロロフェニルジカルボキシイミド殺真菌剤、フタルイミド殺真菌剤、ジニトロフェノール殺真菌剤、ジチオカルバメート殺真菌剤、環式ジチオカルバメート殺真菌剤、ポリマージチオカルバメート殺真菌剤、ジチオラン殺真菌剤、燻蒸用殺真菌剤、ヒドラジド殺真菌剤、イミダゾール殺真菌剤、無機性殺真菌剤、水銀殺真菌剤;無機水銀殺真菌剤、有機水銀殺真菌剤、モルホリン殺真菌剤、有機リン殺真菌剤、有機スズ殺真菌剤、オキサチイン殺真菌剤、オキサゾール殺真菌剤、ポリスルフィド殺真菌剤、ピラゾール殺真菌剤、ピリジン殺真菌剤、ピリミジン殺真菌剤、アニリノピリミジン殺真菌剤、ピロール殺真菌剤、四級アンモニウム殺真菌剤、キノリン殺真菌剤、キノン殺真菌剤、キノキサリン殺真菌剤、チアジアゾール殺真菌剤、チアゾール殺真菌剤、チアゾリジン殺真菌剤、チオカルバメート殺真菌剤、チオフェン殺真菌剤、トリアジン殺真菌剤、トリアゾール殺真菌剤、トリアゾロピリミジン殺真菌剤、ウレア殺真菌剤、亜鉛殺真菌剤、未分類殺真菌剤またはメフェノキサムを含む、請求項7に記載の製剤。
- 前記殺真菌剤が、プロチオコナゾール、アゾキシストロビン、フルオピコリド、クロロタロニル、ホセチル、フェンヘキサミド、フルトリアホール、ジフェノコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール、ピラクロストロビン、トリフロキシストロビン、プロピコナゾール、フルオキサストロビン、フルトラニル、メトコナゾールまたはメトラフェノンを含む、請求項8に記載の製剤。
- 種子および前記種子上のコーティングを含むコーティングされた種子であって、前記コーティングが、生物防除因子NRRL No. B-67089を含む製剤を含む、コーティングされた種子。
- 前記生物防除因子が、NRRL No. B-67089由来の胞子もしくは前胞子、または細胞、前胞子および/もしくは胞子の組み合わせの少なくとも1種をさらに含む、請求項10に記載のコーティングされた種子。
- 前記種子上の前記コーティングが、104 CFU/種子~108 CFU/種子の前記生物防除因子を含む、請求項10または11に記載のコーティングされた種子。
- 前記製剤が乾燥製剤である、請求項10~12のいずれか1項に記載のコーティングされた種子。
- 前記種子が単子葉植物由来である、請求項10~13のいずれか1項に記載のコーティングされた種子。
- 前記単子葉植物が、トウモロコシ、ソルガム、コムギ、コメ、サトウキビ、オオムギ、エンバク、ライ、雑穀、ココヤシ、パイナップルまたはバナナである、請求項14に記載のコーティングされた種子。
- 前記種子が双子葉植物由来である、請求項10~13のいずれか1項に記載のコーティングされた種子。
- 前記双子葉植物が、ヒマワリ、トマト、コショウ、ジャガイモ、ワタ、ダイズ、テンサイ、タバコ、サツマイモ、アルファルファ、ベニバナ、ラッカセイ、キャッサバ、コーヒー、カカオ、キュウリ、レタス、オリーブ、エンドウまたはチャである、請求項16に記載のコーティングされた種子。
- 前記コーティングが、農薬、殺真菌剤、殺虫剤または除草剤をさらに含む、請求項10~17のいずれか1項に記載のコーティングされた種子。
- 前記殺真菌剤が、脂肪族窒素殺真菌剤、アミド殺真菌剤、アシルアミノ酸殺真菌剤、アニリド殺真菌剤、ベンズアニリド殺真菌剤、フルアニリド殺真菌剤、スルホンアニリド殺真菌剤、ベンズアミド殺真菌剤、フラミド殺真菌剤、フェニルスルファミド殺真菌剤、スルホンアミド殺真菌剤、バリンアミド殺真菌剤、抗生物質殺真菌剤、ストロビルリン殺真菌剤、メトキシアクリレートストロビルリン殺真菌剤、メトキシカルバニレートストロビルリン殺真菌剤、メトキシイミノアセトアミドストロビルリン殺真菌剤、メトキシイミノアセテートストロビルリン殺真菌剤、芳香族殺真菌剤、ヒ素を含む殺真菌剤、アリールフェニルケトン殺真菌剤、ベンゾイミダゾール殺真菌剤、ベンゾイミダゾール前駆体殺真菌剤、ベンゾチアゾール殺真菌剤、植物性殺真菌剤、架橋ジフェニル殺真菌剤、カルバメート殺真菌剤、ベンゾイミダゾリルカルバメート殺真菌剤、カルバニレート殺真菌剤、コナゾール殺真菌剤、コナゾール殺真菌剤(イミダゾール)、コナゾール殺真菌剤(トリアゾール)、銅殺真菌剤、シアノアクリレート殺真菌剤、ジカルボキシイミド殺真菌剤、ジクロロフェニルジカルボキシイミド殺真菌剤、フタルイミド殺真菌剤、ジニトロフェノール殺真菌剤、ジチオカルバメート殺真菌剤、環式ジチオカルバメート殺真菌剤、ポリマージチオカルバメート殺真菌剤、ジチオラン殺真菌剤、燻蒸用殺真菌剤、ヒドラジド殺真菌剤、イミダゾール殺真菌剤、無機性殺真菌剤、水銀殺真菌剤;無機水銀殺真菌剤、有機水銀殺真菌剤、モルホリン殺真菌剤、有機リン殺真菌剤、有機スズ殺真菌剤、オキサチイン殺真菌剤、オキサゾール殺真菌剤、ポリスルフィド殺真菌剤、ピラゾール殺真菌剤、ピリジン殺真菌剤、ピリミジン殺真菌剤、アニリノピリミジン殺真菌剤、ピロール殺真菌剤、四級アンモニウム殺真菌剤、キノリン殺真菌剤、キノン殺真菌剤、キノキサリン殺真菌剤、チアジアゾール殺真菌剤、チアゾール殺真菌剤、チアゾリジン殺真菌剤、チオカルバメート殺真菌剤、チオフェン殺真菌剤、トリアジン殺真菌剤、トリアゾール殺真菌剤、トリアゾロピリミジン殺真菌剤、ウレア殺真菌剤、亜鉛殺真菌剤、未分類殺真菌剤またはメフェノキサムを含む、請求項18に記載のコーティングされた種子。
- 前記殺真菌剤が、プロチオコナゾール、アゾキシストロビン、フルオピコリド、クロロタロニル、ホセチル、フェンヘキサミド、フルトリアホール、ジフェノコナゾール、テブコナゾール、テトラコナゾール、ピラクロストロビン、トリフロキシストロビン、プロピコナゾール、フルオキサストロビン、フルトラニル、メトコナゾールまたはメトラフェノンを含む、請求項19に記載のコーティングされた種子。
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