DE69923587T2

DE69923587T2 - Nichtpeptidische antagonisten des glp-1 rezeptors und verwendungsmethoden

Info

Publication number: DE69923587T2
Application number: DE69923587T
Authority: DE
Inventors: Kenneth Larry TRUESDALE; A. Richard BYCHOWSKI; Javier Gonzalez; Atsuo Kuki; Jagath Ranjan RAJAPAKSE; Min Teng; Dan Kiel; S. Daljit DHANOA; Yufeng Hong; Tso-Sheng Chou; L. Anthony LING; David Michael Johnson; Edward Vlad GREGOR
Original assignee: Agouron Pharmaceuticals LLC
Current assignee: Agouron Pharmaceuticals LLC
Priority date: 1998-12-10
Filing date: 1999-12-08
Publication date: 2005-06-23
Anticipated expiration: 2019-12-09
Also published as: CA2350887A1; EP1137413A4; US6469021B1; NZ511698A; ZA200104128B; EP1137413B1; AU1751800A; PT1137413E; DE69923587D1; WO2000033839A1; JP2002531501A; BR9916965A; ATE288268T1; EP1137413A2; WO2000033839B1; AU758968B2; ES2233089T3; KR20010089563A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein Verbindungen, die als Antagonisten für das intestinale Hormon gluconartiges Peptid 1 (GLP-1) wirken. Genauer betrifft die Erfindung Nichtpeptid-GLP-1-Antagonisten, die vorteilhafte physikalische, chemische und biologische Eigenschaften haben. Die GLP-1-Antagonisten der vorliegenden Erfindung hemmen die Bindung des GLP-1-Peptids an den GLP-1-Rezeptor und/oder verhindern die Aktivierung des Rezeptors durch gebundenes GLP-1. Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Hemmung der Bindung von GLP-1 an den GLP-1-Rezeptor und ein Verfahren zur Hemmung der Aktivierung des GLP-1-Rezeptors.
GLP-1 ist ein intestinales Hormon, das innerhalb von Minuten nach der Nahrungsaufnahme freigesetzt wird, das die Insulinfreisetzung potenziert und die Regulierung von Glucoseaufnahme und Metabolismus fördert. GLP-1 entsteht durch posttranslationale Prozessierung von Proglucagon und wird von intestinalen endokrinen L-Zellen ausgeschieden (Fehman et al., 1995, Endocr. Rev. 16:390-410; Thorens et al., 1995, Diabetes Metab. (Paris) 21:311-318). Die insulintrophen Wirkungen von GLP-1 machen es zu einem geeigneten Ziel bei dem Umgang mit Diabetes und anderen Problemen mit der Glucoseintoleranz bei kritischen Erkrankungen.
Die Ergebnisse von Studien, die kürzlich bei nicht-diabetischen Frauen im Alter von 59 Jahren durchgeführt wurden, deuten darauf hin, dass GLP-1 Plasmaglucosepegel reduziert hauptsächlich, indem es die Leberglucoseproduktion reduziert und die metabolische Clearance-Rate der Glucose erhöht, indem bei gesunden Personen indirekt das Verhältnis von Insulin zu Glucagon erhöht wird (Larsson et al., 1997, Acta Physiol. Scand. 160:413-422). Die Glucoseintoleranz ist ein allgemeines Merkmal des Alterungsprozesses; es wurde gefunden. dass Altern ein ätiologischer Faktor für Diabetes mellitus Typ II ist.
Bei einer Untersuchung, die die Anomalitäten in Betazellen auffinden sollte, die beim Alterungsprozess auftreten, wurde gefunden, dass die Insulinantwort in den beiden untersuchten Altersgruppen ähnlich war. Es wurde gefunden, dass GLP-1 zusammen mit IVGTT die akute Insulinantwort auf Glucose wiederherstellt, während die Clearance der Glucose bei älteren Tieren erhöht wurde. Der daraus gezogene Schluss ist, dass eine gestörte Glucose-vermittelte Insulinantwort bei älteren Wesen vorhanden ist, obwohl die Wesen bzw. Tiere ihre Insulinresponsivität auf GLP-1 behielten (Ore et al., 1997, Journal of Gerontology: Biological Sciences 52A(5):B245-B249).
Ein GLP-1-Agonist bezieht sich auf eine Verbindung oder ein Mittel, die/das die physiologischen und pharmakologischen Eigenschaften von endogenem GLP-1 nachahmt. Ein GLP-1-Antagonist bezieht sich auf eine Verbindung oder ein Mittel, die/das die Wirkungen von GLP-1 schwächt durch die Fähigkeit dieser Verbindungen oder Mittel, die Bindung des GLP-1-Peptids an den GLP-1-Rezeptor zu hemmen und/oder die Aktivierung des Rezeptors durch gebundenes GLP-1 zu hemmen.
Die Glucagon-artigen Peptide GLP-1-(7-36)-Amid und Exendin-4-(1-39) wurden als GLP-1-Agonisten aufgefunden. Das Glucagon-Secretin-vasoaktive intestinale Peptid Exendin-(9-39) wurde als GLP-1-Antagonist aufgefunden (Montrose-Rafizadeh et al., 1997, J. Biol. Chem. 272(34):21201-21206).
Peptidantagonisten von Peptidhormonen sind häufig sehr potent. Die Verwendung von Peptidantagonisten ist typischerweise jedoch mit Problemen verbunden aufgrund der Empfindlichkeit gegenüber enzymatischem Abbau und schlechter biologischer Verteilung, d.h. der Unfähigkeit, leicht vom Verdauungssystem in den Blutstrom transportiert zu werden. Solche Antagonisten haben somit eine begrenzte Wirksamkeit als Wirkstoffe oder Arzneimittel, da es schwierig ist, den gewünschten Blutpegel der Peptidantagonisten mit geringen Dosierungen zu erreichen. Demzufolge besteht ein Bedarf für GLP-1-Antagonisten und insbesondere für Nichtpeptid-GLP-1-Antagonisten.
GLP-1-Antagonisten haben ein Potenzial, therapeutisch verwendet zu werden, um das Essen bzw. die Nahrungsaufnahme bei Störungen, die durch Kachexie gekennzeichnet sind, zu steigern. Z.B. hat die Arbeit von Larsen et al. gezeigt, dass die zentrale Verabreichung von GLP-1 die zentralen CRH-haltigen Neurouen der Achse Hypothalamus-Hypophyse-Nebennierenrinde aktiviert, was für Futterverhalten verantwortlich sein könnte (Larsen et al., 1997, Endocrinology 138(10):4445-4455). Viel deutet darauf hin, dass GLP-1-Agonisten Futter- und Wasseraufnahme bei Ratten hemmen und diese Wirkungen werden von dein GLP-1-Rezeptorantagonisten Exendin-(9-39)-Amid blockiert (Navarro et al., 1996, J. Neurochem. 67(5):1982-1991; Tang-Christensen, 1996, Amer. J. Physiol. 271(4 Teil 2):R848-856). Exendin-(9-39) allein erhöht die Nahrungsaufnahme bei anderen Rattenmodellen (Turton et al., 1996, Nature 379(6560):69-72). Außerdem können GLP-1-Rezeptorantagonisten für eine postprandiale Hypoglykämie und das Dumping-Syndrom nützlich sein, wo es eine überschäumende GLP-1-Freisetzung gibt (Vecht, 1997, Scand. J. Gastroenterol. Suppl. 223:21-27).
Es gibt somit einen Bedarf für wirksame Nichtpeptid-GLP-1-Antagonisten, die nützlich sind zur therapeutischen Regulierung von GLP-1, die den in-vivo-Abbau und Probleme bei der biologischen Verteilung vermeiden, die von Peptid-GLP-1-Antagonisten gezeigt werden.
Es ist bekannt, dass pharmazeutische Zusammensetzungen, die β-Carbolin-Derivate enthalten, nützlich sind für die klinische Behandlung der anomalen Funktion des γ-Aminobuttersäure-Neurotransmissionssystems (US-5 834 482).
Zusammenfassung der Erfindung
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, Nichtpeptid-GLP-1-Antagonisten bereitzustellen, die nützlich als Pharmazeutika sind. Eine weitere Aufgabe der Erfindung besteht darin, Verfahren zur Verfügung zu stellen, um die Verbindungen und Zwischenproduktverbindungen zu synthetisieren, die in solchen Synthesen nützlich sind. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind pharmazeutisch Peptidverbindungen überlegen, da sie eine bessere biologische Verteilung und Toleranz gegenüber einem Abbau durch physiologische Enzyme liefern.
Die Erfindung ist auf GLP-1-antagonisierende Verbindungen der allgemeinen Formel
gerichtet, worin
R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Hydroxyl, Nitro, Trifluormethyl, Cyano, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen,
R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₂-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R^– jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆,-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe sind, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zusätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl;
-(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist;
-CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder
ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen;
R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist;
oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- bis 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff, Hydroxyl oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus O, N und S und
R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆,-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist.
Die Erfindung ist auch auf Prodrugs, pharmazeutisch annehmbare Salze und pharmazeutisch annehmbare Solvate der Verbindungen der Formel (I) gerichtet.
Die GLP-1-Antagonisten der vorliegenden Erfindung hemmen die GLP-1-Peptidbindung an den GLP-1-Rezeptor und/oder verhindern die Aktivierung des Rezeptors durch gebundenes GLP-1. Die Erfindung ist somit weiterhin auf die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Bindung von GLP-1 an den GLP-1-Rezeptor und zur Hemmung der Aktivierung des GLP-1-Rezeptors gerichtet.
Detaillierte Beschreibung und bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung
Gemäß einer im Stand der Technik verwendeten Konvention wird
in Strukturformeln verwendet, um die Bindung darzustellen, die der Anknüpfungspunkt der Einheit oder des Substituenten an den Kern oder die Gerüststruktur ist.
Der Ausdruck "Alkylgruppe", wie er hier verwendet wird, soll geradkettige oder verzweigte einwertige Reste aus gesättigten Kohlenstoffatomen und Wasserstoffatomen bedeuten, wie Methyl (Me), Ethyl (Et),Propyl. Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t-Butyl und dgl.
Der Ausdruck "Alkenylgruppe" bezieht sich auf geradkettige oder verzweigte alkenartige Reste, die eine oder mehrere Doppelbindungen enthalten, wie Ethenyl, Pentenyl, Butenyl, Propenyl und dgl.
"Alkinylgruppe" bezieht sich auf geradkettige oder verzweigte alkinartige Reste, die mindestens eine Dreifachbindung enthalten, wie Ethinyl, Butinyl, Propinyl, Pentinyl, Hexinyl und dgl.
Eine "Cycloalkylgruppe" soll einen nicht aromatischen einwertigen, monocyclischen, bicyclischen oder tricyclischen Rest bedeuten, der 3 bis 14 Ringkohlenstoffatome enthält, die jeweils gesättigt oder ungesättigt sein können. Beispiele für Cycloalkylgruppen schließen die folgenden Einheiten ein:
Eine "Heterocycloalkylgruppe" soll einen nicht aromatischen einwertigen monocyclischen, bicyclischen oder tricyclischen Rest bedeuten, der gesättigt oder ungesättigt ist und 3 bis 18 Ringatome enthält, was 1 bis 5 Heteroatome ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel einschließt. Beispiele für Heterocycloalkylgruppen schließen die folgenden Anteile ein, wobei R jeder geeignete Substituent ist:
Eine "Arylgruppe" soll einen aromatischen einwertigen monocyclischen, bicyclischen oder tricyclischen Rest bedeuten, der 6 bis 18 Ringkohlenstoffatome enthält. Beispiele für Arylgruppen schließen die folgenden Anteile ein:
Eine "Heteroarylgruppe" soll einen aromatischen einwertigen monocyclischen, bicyclischen oder tricyclischen Rest mit 4 bis 18 Ringatomen bedeuten, der 1 bis 5 Heteroatome einschließt ausgewählt aus Stickstoff, Sauerstoff und Schwefel. Beispiele für Heteroarylgruppen schließen die folgenden Einheiten ein:
Ein "Heterocyclus" soll eine Heteroaryl- oder Heterocycloalkylgruppe bedeuten.
Eine "Acylgruppe" soll einen -C(O)-R-Rest bedeuten, wobei R ein über Kohlenstoff, Sauerstoff, Stickstoff oder Schwefel gebundener Substituent ist.
Eine "Sulfonylgruppe" soll einen -SO₂R-Rest bedeuten, wobei R ein über Kohlenstoff, Sauerstoff oder Stickstoff verknüpfter Substituent ist.
Eine "Aminogruppe" soll einen -NH₂-Rest oder einen primären, sekundären oder tertiären Aminrest bedeuten (d.h. NHR_a, wobei R_a eine Alkylgruppe ist und -NR_aR_b, wobei R_a und R_b jeweils unabhängig eine Alkylgruppe ist).
Ein "Imino"-Substituent bezieht sich auf einen Substituenten, der eine Kohlenstoff-Stickstoff-Doppelbindung aufweist, z.B.
Eine "Alkoxygruppe" soll den Rest -OR_a bedeuten, wobei R_a eine Alkylgruppe ist. Beispielhafte Alkoxygruppen schließen Methoxy, Ethoxy, Propoxy und dgl. ein.
Eine "Alkoxycarbonylgruppe" soll den Rest -C(O)OR_a bedeuten, wobei R_a eine Alkylgruppe ist.
Der Ausdruck "Thioether" bezieht sich auf Alkylthio-, Arylthio- und Heteroarylthiogruppen. Eine "Alkylthiogruppe" soll den Rest -SR_a bedeuten, wobei R_a eine Alkylgruppe ist. Eine "Arylthiogruppe" soll den Rest -SR_c bedeuten, wobei R_c eine Arylgruppe ist. Eine "Heteroarylthiogruppe" soll den Rest -SR_d bedeuten, wobei R_d eine Heteroarylgruppe ist.
Eine "Aryloxygruppe" soll den Rest -OR_c bedeuten, wobei R_c eine Arylgruppe ist. Eine "Heteroaryloxygruppe soll den Rest -OR_d bedeuten, wobei R_d eine Heteroarylgruppe ist.
Der Ausdruck "Substituent" oder "geeigneter Substituent" soll jeden chemisch geeigneten Substituenten bedeuten, der vom Fachmann auf diesem Gebiet erkannt oder ausgewählt werden kann, z.B. durch Routinetests. Erläuternde Beispiele für geeignete Substituenten schließen Hydroxy (-OH), Halogen, Oxogruppen, Alkylgruppen, Acylgruppen, Sulfonylgruppen, Mercaptogruppen, Alkylthiogruppen, Alkoxygruppen, Cycloalkylgruppen, Heterocycloalkylgruppen, Arylgruppen, Heteroarylgruppen, Carboxy(-C(O)OH), Aminogruppen, Carbamoyl-(-C(O)NH₂), Aryloxygruppen, Heteroaryloxygruppen, Arylthiogruppen, Heteroarylthiogruppen und dgl. ein.
Der Ausdruck "gegebenenfalls substituiert" soll andeuten, dass die spezifische Gruppe unsubstituiert oder mit einem oder mehreren geeigneten Substituenten substituiert ist, wenn die fakultativen Substituenten nicht ausdrücklich spezifiziert sind, wobei in diesem Fall der Ausdruck anzeigt, dass die Gruppe unsubstituiert oder mit den spezifizierten Substituenten substituiert sein kann. Wie oben definiert, können verschiedene Gruppen unsubstituiert oder substituiert sein (d.h. sie sind gegebenenfalls substituiert), wenn nicht anders angegeben (z.B. indem angegeben ist, dass die spezifische Gruppe unsubstituiert ist).
"Prodrug" soll eine Verbindung sein, die unter physiologischen Bedingungen oder durch Solvolyse oder metabolisch in eine spezifische Verbindung umgewandelt wird, die pharmazeutisch aktiv ist.
Ein "Solvat" soll eine pharmazeutisch annehmbare Solvatform einer spezifschen Verbindung bedeuten, die die biologische Wirksamkeit einer solchen Verbindung behält. Beispiele für Solvate schließen Verbindungen der Erfindung ein in Kombination nur Wasser, Isopropanol, Ethanol, Methanol, DMSO, Ethylacetat, Essigsäure oder Ethanolamin.
Ein "pharmazeutisch annehmbares Salz" soll ein Salz bedeuten, das die biologische Wirksamkeit der freien Säuren und Basen der spezifischen Verbindung behält und nicht biologisch oder in anderer Weise unerwünscht ist. Beispiele für pharmazeutisch annehmbare Salze schließen Sulfate, Pyrosulfate, Bisulfate, Sulfite, Bisulfite, Phosphate, Monohydrogenphosphate, Dihydrogenphosphate, Metaphosphate, Pyrophosphate, Chloride, Bromide, Iodide, Acetate, Propionate, Decanoate, Caprylate, Acrylate, Formiate, Isobutyrate, Caproate, Heptanoate, Propiolate, Oxalate, Malonate, Succinate, Suberate, Sebacate, Fumarate, Maleate, Butin-1,4-dioate, Hexin-1,6-dioate, Benzoate, Chlorbenzoate, Methylbenzoate, Dinitrobenzoate, Hydroxybenzoate, Methoxybenzoate, Phthalate, Sulfonate, Xylolsulfonate, Phenylacetate, Phenylpropionate, Phenylbutyrate, Citrate, Lactate, γ-Hydroxybutyrate, Glycollate, Tartrate, Methansulfonate (Mesylate), Propansulfonate, Naphthalin-1-sulfonate, Naphthalin-2-sulfonate und Mandelate ein.
Die Wirkung von GLP-1 wird antagonisiert durch 9H-β-Carbolinverbindungen der allgemeinen Formel (I)
wobei R¹, R², R³ und R⁴ wie oben definiert sind. Die Erfindung ist auch auf Prodrugs, pharmazeutisch annehmbare Salze und pharmazeutisch annehmbare Solvate solcher Verbindungen gerichtet.
In einer bevorzugten Ausführungsform ist R¹ eine Phenylgruppe, die mit einer oder mehreren Gruppen substituiert ist, die ausgewählt sind aus Halogen, Hydroxyl, Nitro, Trifluormethyl und Cyano.
Bevorzugt sind auch Verbindungen, in denen R²
ist, wobei R' wie oben definiert ist, und einen Wasserstoffbindungsakzeptor-Substituenten beinhaltet, der durch normale Konformationsvariationen eine Position 3 bis 5 Å von der Carbonylgruppe entfernt annehmen kann. Der Ausdruck "Wasserstoffbindungsakzeptor-Substituent", wie er hier verwendet wird, beziht sich auf einen Substituenten, der ein N oder O enthält, das eine Wasserstoffbindung mit einem Wasserstoffbindungsdonor bilden kann, wie -OH oder =NH. Beispielhafte Wasserstoffbindungsakzeptor-Substituenten schließen Anteile ein, die eine Gruppe wie
enthalten. Beispielhafte Gruppen R² dieser Art schließen
ein. Wie im Stand der Technik bekannt, wird die verkürzte Darstellung
hier verwendet, um -CH₃ darzustellen.
Bevorzugt sind auch Verbindungen, in denen R³ Wasserstoff oder Methoxymethyl ist.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist R¹ 2,5-Dichlorphenyl oder 3,5-Dinitrophenyl.
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform bilden R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Lacton- oder Lactamring.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist R² ausgewählt aus:
In einer weiteren Ausführungsform ist der 5- oder 6-gliedrige Ring, der durch R² und R³ und die Atome, die an sie gebunden sind, gebildet wird, ausgewählt aus
Besonders bevorzugte Verbindungen, die durch die obige Formel (I) dargestellt werden, schließen die folgenden ein
Zusätzlich ist die vorliegende Erfindung auf Vorläufer, Aufbaublöcke und Zwischenprodukte, die zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) nützlich sind, gerichtet. Die Beispiele erläutern spezifische Vorläufer, Aufbaublocks und Zwischenprodukte im Schutzbereich der vorliegenden Erfindung. Insbesondere können die folgenden Verbindungen verwendet werden, um bestimmte Verbindungen im Schutzbereich der Erfindung zu synthetisieren:
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung schließen Prodrugs, pharmazeutisch annehmbare Salze und pharmazeutisch annehmbare Solvate der Verbindungen der Formel (I) ein. Die Salze der Verbindungen sind pharmazeutisch annehmbare Salze, die von anorganischen oder organischen Säuren, wie oben definiert, abgeleitet sind.
Die Erfindung beinhaltet weiterhin Prodrugs der Verbindungen der Formel (I). Prodrugs sind Verbindungen, die durch die verschiedenen Biotransformationsreaktionen metabolisch in vivo aus einer Vorläuferverbindung in eine Verbindung der Formel (I) umgewandelt werden. Beispiele für Prodrugs schließen biologisch hydrolysierbare Ester und Amide ein.
Einige hier beschriebene erfindungsgemäße Verbindungen enthalten ein oder mehrere Asymmetriezentren und können daher zu enantiomeren, diastereoisomeren und anderen stereoisomeren Formen führen. Die vorlie gende Erfindung soll alle solche möglichen stereoisomeren ebenso wie racemischen und optisch reinen Formen einschließen. Optisch aktive (R)- und (S)-Isomere können hergestellt werden unter Verwendung chiraler Synthone, chiraler Reagenzien oder können unter Verwendung üblicher Techniken aufgetrennt werden. Wenn die hier beschriebenen Verbindungen olefinische Doppelbindungen enthalten, sind sowohl die geometrischen E- als auch Z-Isomeren umfasst.
Die chemischen Formeln, auf die hier Bezug genommen wird, können das Phänomen des Tautomerismus aufweisen. Da die Formelzeichnungen in der Beschreibung nur eine der möglichen tautomeren Formen darstellen können, versteht es sich, dass die Erfindung jede tautomere Form umfasst, die erzeugt werden kann, indem die offenbarten Hilfsmittel angewendet werden und dass sie nicht auf irgendeine tautomere Form beschränkt ist, die in den Formelzeichnungen verwendet wird.
Pharmazeutische Zusammensetzungen und Behandlungsmethoden
Die pharmazeutischen Zusanmensetzungen der Erfindung beinhalten eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I) und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger oder ein Verdünnungsmittel. Eine "wirksame Menge" einer Verbindung der Formel (I) soll eine GLP-1-antagonistische Menge sein, die eine Konzentration der Verbindung ist, bei der Bindung und/oder Aktivierung des GLP-1-Rezeptors gehemmt wird. Eine solche Menge liefert therapeutischen Nutzen zur Regulierung von insulintrophen Effekten, die mit der GLP-1-Bindung verbunden sind.
Die erfinderischen pharmazeutischen Zusammensetzungen werden in Dosierungseinheitsform hergestellt, die zur Verabreichung an einen Patienten, der eine Behandlung einer Krankheit oder eines Zustandes, der durch GLP-1-Hemmung vermittelt wird, benötigt, geeignet sind. Geeignete Formen der Verabreichung schließen (ohne darauf beschränkt zu sein) orale, parenterale, intravenöse, intramuskuläre und transdermale Methoden ein, die allgemein im Stand der Technik bekannt sind.
Die Zusammensetzungen können hergestellt werden, indem eine wirksame Menge der Verbindung der Formel (I) mit bekannten pharmazeutischen Trägern oder Verdünnungsmitteln mit üblichen Prozeduren vereinigt wird. Diese Prozeduren können je nach Bedarf ein Vermischen, Granulieren, Komprimieren oder Lösen der Inhaltsstoffe für das gewünschte Präparat beinhalten.
Der hier angewendete pharmazeutische Träger kann z.B. entweder fest oder flüssig sein. Beispielhaft für feste Träger sind Lactose, Terra alba, Saccharose, Talk, Gelatine, Agar, Pektin, Gummi arabicum, Magnesiumstearat, Stearinsäure und dgl. Beispielhaft für flüssige Träger sind Sirup, Erdnussöl, Olivenöl, Wasser und dgl. In gleicher Weise kann der Träger oder das Verdünnungsmittel Zeitverzögerungsmaterial, wie es im Stand der Technik bekannt ist, enthalten, wie Glycerylmonostearat oder Glyceryldistearat allein oder mit einem Wachs, Ethylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Methylmethacrylat oder dgl.
Eine Vielzahl von pharmazeutischen Formen kann angewendet werden. Wenn ein fester Träger verwendet wird, kann somit das Präparat tablettiert werden, in eine Hartgelatinekapsel in Pulver- oder Pelletform gebracht werden oder in Form einer Pastille sein. Die Menge an festem Träger kann variieren und ist bevorzugt etwa 25 mg bis etwa 1 g. Wenn ein flüssiger Träger verwendet wird, kann das Präparat in Form von Sirup, Emulsion, Weichgelatinekapsel, steril injizierbarer Lösung oder Suspension in einer Ampulle oder einem Fläschchen oder eine nicht wässrige flüssige Suspension sein.
Um eine stabile wasserlösliche Dosisform zu erhalten, wird ein pharmazeutisch annehmbares Salz einer Verbindung der Formel (I) in einer wässrigen Lösung einer organischen oder anorganischen Säure, wie einer 0,3 M Lösung von Zuckersäure oder bevorzugt Citronensäure gelöst. Wenn eine lösliche Salzform nicht verfügbar ist, wird die Verbindung der Formel (I) in einem oder mehreren geeigneten Co-Lösungsmitteln gelöst. Beispiele für geeignete Co-Lösungsmittel schließen (ohne darauf beschränkt zu sein) Alkohol, Propylenglycol, Polyethylenglycol 300, Polysorbat 80, Glycerin und dgl. in Konzentrationen im Bereich von 0 bis 60% des Gesamtvolumens ein.
Die Zusammensetzung kann auch in Form einer Lösung einer Salzform des aktiven Inhaltsstoffs in einem geeigneten wässrigen Träger, wie Wasser oder einer isotonischen Kochsalzlösung oder Dextroselösung sein.
Es ist davon auszugehen, dass die tatsächlichen Dosierungen der Verbindungen der Formel (I), die in erfinduugsgemäßen Zusammensetzungen verwendet werden, je nach dem jeweilig verwendeten Komplex, der jeweilig formulierten Zusammensetzung, der Verabreichungsart und der jeweiligen Stelle, dem Wirt und dem Zustand, der behandelt wird, ausgewählt werden. Optimale Dosierungen für einen gegebenen Satz an Bedingungen können vom Fachmann auf diesem Gebiet unter Verwendung üblicher Dosierungsbestimmungstests festgestellt werden. Für die orale Verabreichung ist z.B. die allgemein angewendete Dosis etwa 0,001 bis etwa 1000 mg/kg Körpergewicht, wobei der Behandlungsverlauf in geeigneten Intervallen wiederholt wird.
Synthesemethoden
Die folgenden Syntheseprotokolle beziehen sich auf bevorzugte Zwischenproduktverbindungen und Endprodukte, die in den Syntheseschemata oder an anderen Stellen in der Beschreibung gezeigt sind. Die Herstellung von Verbindungen der vorliegenden Erfindung wird im Detail beschrieben unter Verwendung der folgenden allgemeinen und spezifischen Beispiele. Gelegentlich kann die Reaktion, wie sie beschrieben wird, nicht für jede im offenbarten Schutzbereich der Erfindung eingeschlossene Verbindung anwendbar sein; die Verbindungen, für die dies zutrifft, werden leicht vom Fachmann auf diesem Gebiet erkannt. In all diesen Fällen können die Reaktionen erfolgreich mit Routinemodifikationen, die im Bereich des Wissens eines Fachmanns auf diesem Gebiet liegen, durchgeführt werden (z.B. durch Bezugnahme auf Lehren im Stand der Technik einschließlich der hier zitierten), z.B. durch geeigneten Schutz von störenden Gruppen, durch Veränderung anderer konventioneller Reagenzien oder durch Routineveränderungen von Reaktionsbedingungen. Alternativ sind andere Reaktionen, die hier offenbart werden, oder die ansonsten üblich sind, zur Herstellung der entsprechenden erfindungsgemäßen Verbindungen anwendbar. Bei den unten beschriebenen präparativen Methoden sind alle Ausgangsmaterialien bekannt, verfügbar oder können leicht aus bekannten Ausgangsmaterialien hergestellt werden; alle Temperaturen sind in °C angegeben und, wenn nicht anders angegeben, beziehen sich alle Teile und Prozentangaben auf Gewicht.
Reagenzien wurden von kommerziellen Anbietern erworben, wie Aldrich Chemical Company oder Lancaster Synthesis Ltd. und wurden ohne weitere Reinigung verwendet, wenn nicht anders angegeben. Tetrahydrofuran (THF) und N,N-Dimethylformamid (DMF) wurden von Aldrich in abgeschlossenen Flaschen erworben und so verwendet, wie sie erhalten wurden. Alle Lösungsmittel wurden gereinigt unter Verwendung von dem Fachmann auf diesem Gebiet bekannten Standardmethoden, wenn nicht anders angegeben.
Biologische Assays
Allgemein kann die Aktivität von Nichtpeptidantagonisten der vorliegenden Erfindung bestimmt werden unter Verwendung einer Vielzahl von Assays und Techniken. Die GLP-1-Antagonisten der vorliegenden Erfindung hemmen die Bindung von GLP-1 an seinen Rezeptor und/oder hemmen die Rezeptoraktivierung durch gebundenes GLP-1. Somit sind Bindungsaffinitätsuntersuchungen nützlich, um die antagonistische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen festzustellen. Die Bindungsaffinität kann z.B. bestimmt werden durch Verdrängung eines an den Rezeptor gebundenen Liganden, wobei der Ligand mit einer nachweisbaren Markierung markiert ist. Insbesondere könnte ein Fachmann auf diesem Gebiet eine in-vitro-Bindungsstudie durchführen, um die spezifische Bindungsaktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen an den GLP-1-Rezeptor zu berechnen, indem Zellen mit den Verbindungen vorbehandelt werden und dann die vorbehandelten Zellen mit radioaktiv markiertem GLP-1 getestet werden.
Außerdem würde ein Fachmann auf diesem Gebiet annehmen, dass die Aktivierung des GLP-1-Rezeptors gemessen werden kann, indem die intrazellulären cAMP-Pegel, die in mit erfindungsgemäßen Verbindungen behandelten Zellen gemessen werden, bestimmt werden. Siehe z.B. Montrose-Rafizadeh er al., 1997, J. Biol. Chem. 272(34):21201-21206. Nach Behandlung mit den erfindungsgemäßen Verbindungen werden die Zellen mit GLP-1 beaufschlagt und die intrazellulären cAMP-Pegel bestimmt. Die antagonistische Aktivität würde durch den verminderten Pegel an cAMP bezogen auf eine nicht behandelte Kontrolle festgestellt.
Zusätzlich zu diesen biologischen Tests bzw. Assays sind andere periphere Tests geeignet, um die antagonistische Aktivität der Verbindungen der Formel (I) zu bestimmen. Z.B. schließen bekannte Tests zur Bestimmung der GLP-1-Aktivität einen Aufnahmebioassay und durch ANG-II stimulierte Durstassays ein (Tang-Christensen et al., 1996, Amer. J. Physiol. 271(4 Pt 2):R848-R856) und Lipolyseassays (Montrose-Rafizadeh et al., 1997, J. Cell Phys. 172(3):275-283).
Basierend auf den vorhergehenden Tests kann ein Fachmann auf diesem Gebiet die Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Hemmung der Bindung und/oder Aktivierung des GLP-1-Rezeptors durch GLP-1 bestimmen. Weiterhin sind solche Untersuchungen nützlich, um die wirksamen Mengen der erfindungsgemäßen Verbindungen festzustellen, um GLP-1-Aktivität zu hemmen.
Allgemeine Beispiele
Methode A: Allgemeines Vorgehen zur N-Alkylierung
In den oben angegebenen Verbindungen sind R¹, R⁴ und R⁵ wie oben definiert.
Zu einer Lösung von Alkylhalogeniden in DMF (1 Äquivalent) wird eine DMF-Lösung eines substituierten 9H-β-Carbolin-3-carbonsäuremethylesters (1 Äquivalent) und eine Suspension von Natriumhydrid in DMF (~ 1 Äquivalent von 60% NaH in Öl) zu der Mischung zugegeben. Die Mischung wird zugedeckt, kurz bewegt und kurz alle 15 Minuten lang geschüttelt ungefähr über einen Zeitraum von 1 Stunde. Das DMF wird im Vakuum entfernt.
Methode B: N-Alkylierung
In den obigen Verbindungen bedeutet Z-CH₂R¹, wie oben definiert.
Eine Mischung von 9H-β-Carbolin-3-carbonsäuremethylester oder einem Derivat (5,0 mmol) und Natriumhydrid (0,20 g 60% in Öl, 5,0 mmol) wird mit trockenem DMF (11 ml) unter Stickstoff behandelt. Nach 15-minütigem Rühren ist die Gasentwicklung im Wesentlichen abgeschlossen, was eine hellbraune, fast klare Lösung des Natriumsalzes des β-Carbolins (~ 0,40 M) mit einer Spur von noch verbleibendem festen Material liefert. Diese Lösung wird auf gleiche Weise hergestellt durch Zugabe des festen β-Carbolins zu einer Aufschlämmung von Natriumhydrid in DMF oder durch Zugabe von Natriumhydrid zu einer Aufschlämmung/Lösung des β-Carbolins in DMF. Die Abkühlung auf 0°C ist notwendig, wenn die Reaktion in größerem Maßstab durchgeführt wird (40 bis 80 mmol).
Zu der Lösung des Natriumsalzes wird eine Lösung eines Alkylhalogenids in DMF (5 ml von 1,0 M, 5,0 mmol, 1 Äquivalent) zugegeben, was zu einer leichten Exotherme führt. Nach 2- bis 24-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wird das DMF im Vakuum entfernt und der Rückstand zwischen Wasser und Ethylacetat aufgetrennt. Die Ethylacetatphase wird abgetrennt, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert, im Vakuum entfernt und der Rückstand aus Ethylether, Ethylacetat/Ethylether oder Ethylacetat/Petrolether kristallisiert.
Alternativ werden die Produkte durch Chromatographie auf Silicagel gereinigt unter Verwendung von 95:5 Diethylether/8 M NH₃-CH₃OH oder einer Gradientenelution von 90:10 Trichlormethan (CHCl₃)/2 M NH₃-CH₃OH in CHCl₃ oder präparative Reverse-Phase-HPLC gefolgt von einer Umkristallisation aus Ethylether oder Ethylacetat/Petrolether.
Methode C: Veresterung eines Carbonsäureimidazolids
In den oben angegebenen Verbindungen ist R⁵ wie oben definiert.
Die Veresterung von Säuren über 3-(1-Imidazolylcarbonyl)-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin kann mit der folgenden Methode durchgeführt werden (A.H. Staab, ACIEE 1962, 1:351). Zu einer Lösung eines Alkohols (125 μl 0,40 M, 0,050 mmol) in DME (1,2-Dimethoxyethan) wird eine Lösung von 3-(1-Imidazolylcarbonyl)-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin (125 μl 0,40 M, 0,050 mmol, 1 Äquivalent) in DMF zugegeben und anschließend eine Lösung von Imidazolylnatrium (25 μl 0, 1 M, 0,0025 mmol, 5 Mol-%) in DMF. Letzteres wird frisch aus Imidazol und Natriumhydrid hergestellt. Die entstehende Mischung wird kurz bewegt und 18 bis 24 Stunden lang auf 50°C erhitzt. Die Lösungsmittel werden im Vakuum entfernt und das Produkt aus dem Rückstand durch präparative HPLC isoliert.
Methode D: Veresterung eines Alkolols
In den oben aufgeführten Verbindungen ist R⁸ wie oben definiert.
Die Veresterung eines Alkohols, wie [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methanol (siehe oben) kann nur der folgenden Methode durchgeführt werden. Eine Lösung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methanol (100 μl 0,5 M, 0,05 mmol) in DME wird mit einer Lösung eines Säurechlorids (100 μl 0,5 M, 0,05 mmol) in DCE (1,2-Dichlorethan) versetzt und die Mischung kurz bewegt. Eine Lösung von Triethylamin (100 μl 1,0 M, 0,1 mmol, 2 Äquivalente) in DME wird zugegeben und die Mischung wieder bewegt und bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Die flüchtigen Bestandteile werden im Vakuum entfernt und das Produkt aus dem Rückstand mit präparativer HPLC entfernt.
Methode E: Veresterung einer Carbonsäure
Eine Carbonsäure, wie 9H-β-Carbolin-3-carbonsäure (siehe oben) kann gemäß der vorliegenden Erfindung wie folgt verestert werden. 9H-β-Carbolin-3-carbonsäure wird mit überschüssigem SOCl₂ bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Das überschüssige SOCl₂ wird im Vakuum entfernt und das entstehende rohe Säurechlorid wird in CHCl₃ gelöst. Zu dieser Lösung wird Et₃N (3 Äquivalente) und ein Alkohol (5 Äquivalente) zugegeben und die entstehende Mischung bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Reaktionsmichung wird einer wässrigen Aufarbeitung unterzogen und der Rückstand aus der organischen Phase wird auf Silicagel (CH₂Cl₂) chromatographiert, was den Ester liefert.
Spezifische Beispiele
Beispiel 1
Herstellung von 9H-β-Carbolin-3-carbonsäuremethylester
Diese Verbindung wurde mit einer Modifikation eines bekannten Verfahrens (Couts et al., Heterocycles 1984, 22:131) hergestellt. Zu einer Mischung der freien Base von L-Tryptophanmethylester (161 g, 0,738 Mol) und Paraformaldehyd (22 g, 0,733 Mol) wurde Toluol (1 l) zugegeben. Die Mischung wurde unter wirksamem mechanischen Rühren am Rückfluss erhitzt und das Wasser unter Verwendung einer Barrett-Falle entfernt. Nach 1 Stunde wurde fast die theoretische Menge an Wasser (13 ml) gesammelt. Trifluoressigsäure (5 ml, 0.065 Mol, 8,8 Mol-%) wurden über den oberen Teil des Kühlers (exotherm) zugegeben und die Mischung weitere 1,5 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und 10% Palladium auf Kohlenstoff wurden zu dem Topf (44 g feuchtes Material gewonnen aus einem vorherigen Durchlauf; Trockengewicht = 38 g bezogen auf das in der nachfolgenden Stufe entfernte Wasser; ~ 0,036 Mol Pd oder 4,8 Mol-%) zugegeben. Xylol (800 ml) wurde zugegeben und die Mischung heftig gerührt (mechanischer Rührer) und über Nacht mit einer Barrett-Falle am Rückfluss erhitzt, um das Wasser aus dem Pd/C zu entfernen. Die Reaktionsmischung wurde dann in einem Eisbad und dann über Nacht in einem Gefrierschrank bei –20°C gekühlt. Die entstehende Aufschlämmung wurde filtriert, was Mutterlaugen, die Verunreinigungen enthielten, einschheßlich einer Verbindung, die mit 2-Methyl-1,2,3,4-tetrahydro-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester übereinstimmte, und einen grauen Filterkuchen lieferte, der eine Mischung aus Produkt und Pd/C enthielt. Der Filterkuchen wurde in einen Papierfingerhut überfülut und in einer Soxhlet-Vorrichtung mit Methanol (800 ml in einem 2-l-Kolben) in verschiedenen Chargen extrahiert. Als das Produkt in dem Topf kristallisierte, wurde die Aufschlämmung filtriert, der hellgelbe Feststoff mit Methanol gewaschen und getrocknet und das Filtrat in den Topf zurückgebracht. Drei Chargen Produkt wurden gesammelt, was insgesamt 76 g Produkt lieferte (46% Ausbeute aus Tryptophanmethylester).
Beispiel 2
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
Eine Suspension von 9H-β-Carbolin-3-carbonsäureethylester (2,40 g, 10 mmol) in wasserfreiem DMF (20 ml) wurde in einem Eisbad unter Stickstoff gekühlt. Natriumhydrid (420 mg von 60%, NaH in Mineralöl, 10,5 mmol) wurde auf einmal zugegeben und die Mischung gerührt, bis sich der größte Teil der Feststoffe gelöst hatte und die Wasserstoffentwicklung aufhörte (ungefähr 10 Minuten). Die kalte Mischung wurde mit 2,5-Dichlorbenzylchlorid (2,15 g, 1,0 mmol) langsam unter Rühren versetzt und dann 2 Stunden lang auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die entstehende trübe Lösung wurde mit Essigsäure neutralisiert, dann das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, was einen lohfarbenen Feststoff lieferte (3,94 g). Das rohe Material wurde auf Silicagel chromatographiert unter Verwendung einer Mischung von Chloroform und Ethylacetat, was das Titelprodukt lieferte (1,96 g, 49%).
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,06 (s, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,48 (d, J = 8,0, 1H), 7,55-7,64 (m, 3H), 7,35-7,42 (m, 2H), 6,60 (d, J = 2,3, 1H), 5,89 (s, 2H), 4,36 (q, J = 6,9, 1H), 1,35 (t, J = 7,2, 3H);
LRMS berechnet für C₂₁H₁₆Cl₂N₂O₂ (M + H) 399, gefunden 399,0.
Beispiel 3
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure wurde hergestellt, wie für die entsprechende 9-unsubstituierte Verbindung beschrieben (Hagen et al., Heterocycles 1986, 24:2845). Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (15,0 g, 0,0389 Mol), Natriumhydroxid (2,0 g, 0,05 Mol), Wasser (75 ml) und 95% Ethanol (200 ml) wurde 1 Stunde lang am Rückfluss erhitzt. Die Mischung wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand in warmem Wasser (500 ml) gelöst und der pH-Wert auf 3 eingestellt unter Verwendung von verdünnter HCl unter heftigem Rühren, was zum Ausfällen eines Feststoffs führte. Die feine Aufschlämmung wurde filtriert, sorgfältig mit Wasser gewaschen und im Vakuum über Nacht bei 70°C und einen weiteren Tag bei 85°C getrocknet, was 12,60 g (87%) des Produkts lieferte. In einem weiteren Durchlauf wurde das Produkt in einer Ausbeute von 82% nach Umkristallisation aus heißer Essigsäure isoliert. Das Produkt hatte die folgenden Eigenschaften:
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,16 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 8,59 (d, J = 8,0, 1H), 7,60-7,69 (m, 3H), 7,39-7,44 (m, 2H), 6,705 (d, J = 2,3, 1H), 5,93 (s, 2H), 1,93 (s, 3H);
LRMS berechnet für C₁₉H₁₀Cl₂N₂O₂ (M + H) 371, gefunden 371,0.
Beispiel 4
Herstellung von 3-(1-Imidazolylcarbonyl)-9-(2 5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin
Zu einer Suspension von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure (4,55 g, 0,0123 Mol) in trockenem DMF (100 ml) wurde 1,1-Carbonyldiimidazol (3,77 g, 0,0233 Mol) zugegeben, was zur Bildung einer opaken, gelben Lösung führte. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff 5 Stunden lang gerührt.
Kaltes Wasser (800 ml) wurde zugefügt und der entstehende Niederschlag filtriert, mit kaltem Wasser gewaschem und im Vakuum getrocknet, was 4,85 g (94%) des Produkts als weißen Feststoff lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 9,13 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 8,87 (s, 1H), 8,33 (d, 1 = 7,9 Hz, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,71 (t. J = 7,7 Hz, 1H), 7,52-7,45 (m, 3H), 7,28-7,25 (m, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,56 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,74 (s, 2H).
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 421.
Beispiel 5
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester
Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureacetatsalz (1,30 g, 3,02 mmol) und Thionylchlorid (2,2 ml, 30 mmol) wurde gerührt und 2 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde im Vakuum eingeengt und das entstehende dunkle Öl wurde ohne weitere Reinigung verwendet. Das Öl wurde in 15 ml DMF (theoret. 0,2 M) gelöst. Ein Anteil (2,5 ml, 0,5 mmol) dieser Lösung wurde zu einem großen Überschuss an Isopropanol und Triethylamin zugegeben und die entstehende Mischung bei 60°C über Nacht gerührt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde die Mischung mit Methylenchlorid geschüttelt und die Mischung mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen. Die organische Phase wurde mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Die Reinigung mit Flash-Chromatographie auf Silicagel lieferte das Produkt als Öl (144 mg, 70%).
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,80 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,13-8,16 (m, 1H), 7,50-7,56 (m, 1H), 7,20-7,33 (m, 3H), 7,08 (dd, J = 2,6, 8,7, 1H), 6,48 (d, J = 2,3, 1H), 5,48 (s, 2H), 5,37 (Septett, J = 6,4, 1H), 1,43 (d, J = 6,4, 6H).
Beispiel 6
Herstellung von 9H-β-Carbolin-3-ylmethylacetat
Eine Suspension von 9H-β-Carbolin-3-methanol (99 mg, 0,50 mmol) in Essigsäureanhydrid (10 ml) wurde 4 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt, wobei sich in dieser Zeit das Ausgangsmaterial löste. Die Entfernung des Essigsäureanhydrids im Vakuum lieferte einen lohfarbenen Feststoff (122 mg). Die Reinigung mit Flash-Chromatographie auf Silicagel mit Ethylacetat als Elutionsmittel lieferte 82 mg (68%) der Titelverbindung.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,49 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,13 (d, J = 8,0, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,56-7,61 (m, 2H), 7,26-7,34 (m, 1H), 5,43 (s, 2H), 2,15 (s, 3H);
LRMS berechnet für C₁₄H₁₂N₂O₂ (M + H) 241, gefunden 241,0.
Beispiel 7
Herstellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylacetat
[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylacetat wurde hergestellt aus 3-Acetoxymethyl-9H-pyrido[3,4-b]indol unter Verwendung von Methode A. Die Reinigung mit Flash-Chromatographie auf Silicagel mit Chloroform/Ethylacetat als Elutionsmittel lieferte das Produkt in einer Ausbeute von 89%.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 6,72 (s, 1H), 8,19 (d, J = 7,9, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,55-7,61 (m, 1H). 7,28-7,39 (m, 3H), 7,18 (dd, J = 2,3, 8,7, 1H), 6,51 (d, 1 = 2,3, 1H), 5,54 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 2,19 (s, 3H).
Beispiel 8
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester
Zu einer Suspension von Natriumhydrid (1,60 g einer 60%igen Dispersion in Öl, 0,04 Mol) in trockenem DMF (60 ml) wurde 9H-β-Carbolin-3-carbonsäuremethylester (8,7 g, 0,0385 Mol) bei –20°C unter Rühren zugegeben. Die Mischung wurde unter Rühren unter Stickstoff auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Nach 10- minütigem Rühren bei Raumtemperatur schien die Bildung des Natriumsalzes des β-Carbolins vollständig zu sein, was zu einer klaren braunen Lösung führte. Die Reaktionsmischung wurde in einem Eisbad gekühlt, 2,5-Dichlorbenzylchlorid (7,82 g, 0,040 Mol) zugegeben und die Mischung auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Wasser (200 ml) verdünnt, filtriert und der Kuchen mit Wasser, Ethylacetat, Ether gewaschen und getrocknet, was 13,05 g (88%) des Titelprodukts lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,88 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 8,20 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,45-7,35 (m, 3H), 7,18 (dd, J = 8,2, 1,7 Hz, 1H), 6,52 (s, 1H), 5,56 (s, 2H), 4,06 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 385.
Beispiel 9
Hersrellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methanol
Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (13,05 g, 0,0339 Mol) und Natriumborhydrid (3 g, 0,079 Mol) wurde gerührt und in wasserfreiem Ethanol (200 ml) 15 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Das Ethanol wurde verdampft und der Rückstand zwischen 10% wässrigem Na₂CO₃ (100 ml) und Methylenchlorid (100 ml) aufgetrennt. Die organische Phase wurde über MgSO₄ getrocknet, eingedampft und der Rückstand aus Ether kristallisiert, was das Titelprodukt als elfenbeinfarbenen Feststoff lieferte (11 g, 91 %).
In einer alternativen Synthese wurde eine Lösung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylacetat (53,4 mg, 0,13 mmol) in Methanol (2 ml) mit Kaliumhydroxid (54 mg, 0,96 mmol) versetzt und gerührt, was zu einer fast sofortigen Hydrolyse führte, was durch DC und Flow-Injection-MS gezeigt wurde. Das Produkt wurde nur Flash-Chromatographie auf Silicagel isoliert unter Verwendung von 10:1 Chloroform-Methanol, was 35 mg (75%) des reinen Produktes lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,58 (s, 1H), 8,10 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,50 (td, J = 7,7 Hz, 1H), 7,23-7,32 (6-Linien-Multiplett, 2H), 7,10 (dd, J = 8,5 Hz, 2,4 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,48 (s, 2H); 4,87 (s, 2H), 3,62-3,77 (br, s, 1H);
MS Monoisotopenmasse (berechnet) 355,9 MH⁺ (beobachtet) 357,0.
Beispiel 10
Herstellung von 2-(Dimethylamino)ethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(Dimethylamino)ethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde hergestellt mit Methode D.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,96 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,26 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,59-7,66 (m, 3H), 7,19 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 6,52 (s, 1H), 5,61 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,58 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,81 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,37 (s, 6H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 441.
Beispiel 11
Herstellung von 2-Methoxyethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-Methoxyethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde hergestellt mit der Methode D.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,95 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,27 (d, 1 = 7,8 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,41 (m, 3H), 7,21 (t, J = 2,4 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,64 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 3,83 (t, J = 3,7 Hz, 2H), 3,46 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 429.
Beispiel 12
Herstellung von 2-Hydroxyethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-Hydroxyethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde hergestellt mit Methode D.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,83 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,15 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,41 (m, 3H), 7,21 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,54 (s, 2H), 4,61 (t, J = 4,7 Hz, 2H), 4,26 (br s, 1 H), 4,08 (t, J = 3,5 Hz, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 415.
Beispiel 13
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-3-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-9H-β-carbolin
Eine Aufschlämmung von Natriumhydrid (40 mg 60 Gew.-% in Mineralöl, 1,0 mmol), Acetamidoxim (74 mg, 1,0 mmol) und pulverförmigen 3-Å-Molekularsieben (200 mg) in THF (3 ml) wurde gerührt und 30 Minuten lang am Rückfluss erhitzt. Hierzu wurde 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (193 mg, 0,50 mmol) unter Verwendung von weiteren 2 ml THF, um quantitativ in den Kolben zu überführen, zugegeben. Die entstehende Aufschlämmung wurde gerührt und am Rückfluss erhitzt, bis die Reaktion gemäß DC (1,5 Stunden oder weniger) abgeschlossen war. Die Reaktionsmischung wurde durch 10 cm³ Silicagel in einem Frittenglastrichter filtriert unter Verwendung von THF als Elutionsmittel, was 193 mg des rohen Oxadiazols nach verdampfen des Lösungsmittels lieferte. Das Produkt wurde mit präparativer DC gereinigt unter Verwendung von 1:1 Ethylacetat/Petrolether, was 79 mg (39%) der reinen Titelverbindung lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,96 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,28 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,47-7,41 (m, 3H), 7,23 (dd, J = 8,5, 2,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 2,54 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 409.
Beispiel 14
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäurebutylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (195 mg, 0,5 mmol) wurde mit n-Butanol (15 ml) und konz. Schwefelsäure erhitzt; die Mischung wurde langsam 45 Minuten lang destilliert, wonach die Reaktion gemäß DC vollständig zu sein schien. Die Reaktionsmischung wurde zwischen wässrigem Natriumcarbonat und Ethylacetat aufgetrennt, die organische Phase über Natriumsulfat getrocknet, filtriert, eingedampft und der Rückstand aus Ethylacetat/Petrolether umkristallisiert. Hieraus wurden 318 mg eines weißen Feststoffs isoliert, dessen ¹H-NMR mit dem von Natriumbutylsulfat übereinstimmte. Das Filtrat wurde durch Silicagel filtriert unter Verwendung von 1:1 Ethylacetat/Petrolether und das Filtrat aus einer minimalen Menge Ethylacetat und Petrolether umkristallisiert, was das Produkt als elfenbeinfarbigen Feststoff lieferte (119 mg, 56%).
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,93 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,28 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,64 (ddd, J = 8,3, 7,2, 1,1 Hz, 1H), 7,45-7,39 (m, 3H), 7,21 (dd, J = 8,5, 2,4 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,49 (t, J = 7 Hz, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,51 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7 Hz, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 427.
Beispiel 15
Herstellung von 9-(2 5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäurepropylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (195 mg, 0,5 mmol) wurde mit n-Propanol (15 ml) und konz. Schwefelsäure (1,5 ml) am Rückfluss erhitzt, wie für die Synthese von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäurebutylester beschrieben, was einen elfenbeinfarbenen Feststoff lieferte (152 mg, 74%).
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,94 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,28 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,45-7,40 (m, 3H), 7,22 (dd, J = 8,5, 2,3 Hz, 1H), 6,55 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,45 (t, J = 7 Hz, 2H), 1,93 (m, 2H), 1,07 (t, J = 7 Hz, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 413.
Beispiel 16
Herstellung von 9-[(5,6-Dichlor-3-pyridyl)methyl]-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-[(5,6-Dichlor-3-pyridyl)methyl]-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit Methode A hergestellt und mit präparativer Dünnschichtchromatographie (DC) gereinigt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,91 (s, 2H), 8,23-8,26 (m, 2H), 7,59-7,68 (m, 1H), 7,39-7,45 (m, 3H), 5,62 (s, 2H), 4,53 (q, J = 7,2, 2H), 1,49 (t, J = 7,2, 3H);
LRMS berechnet für C₂₀H₁₅Cl₂N₃O₂ (M + Cl^–) 434, gefunden 433,9.
Beispiel 17
Herstellung von 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-(3,5-Dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit Methode A hergestellt und mit präparativer Dünnschichtchromatographie gereinigt (Ausbeute 66%).
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,95 (s, 2H), 8,90 (s, 1H), 8,31 (s, 3H), 7,65-7,67 (m, 1H), 7,41-7,49 (m, 2H), 5,86 (s, 2H), 4,54 (q, J = 7,1, 2H), 1,50 (t, J = 7,1, 3H);
LRMS berechnet für C₂₁H₁₆N₄O₆ (M – H) 419, gefunden 419,0.
Beispiel 18
Herstellung von 9-β-Nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-(3-Nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit Methode A hergestellt und mit präparativer Dünnschichtchromatographie gereinigt (Ausbeute 39%).
¹N-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,90 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,24 (d, J = 7,9, 1H), 8,08-8,13 (m, 2H), 7,61-7,66 (m, 1H), 7,35-7,46 (m, 4H), 5,72 (s, 2H), 4,52 (q, J = 7,1, 2H), 1,49 (t, J = 7,1, 3H);
LRMS berechnet für C₂₁H₁₇N₃O₄ (M – H) 374, gefunden 374,0.
Beispiel 19
Herstellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylcyclopropancarboxylat
Eine Lösung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methanol (357 mg, 1,0 mmol) und Cyclopropylcarbonylchlorid (133 mg, 1,27 mmol) in Methylenchlorid (5 ml) wurde 10 Minuten lang stehen gelassen. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand zwischen wässrigem Na₂CO₃ und Methylenchlorid aufgetrennt. Der Extrakt wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und eingedampft, was ein Harz lieferte. Dieses wurde in Ether gelöst und durch eine Pfropfen aus Silicagel filtriert, mit etherischem Chlorwasserstoff versetzt, ver dampft und der Rückstand aus Ethanol/Ethylacetat/Ether umkristallisiert, was 270 mg (58%) der Titelverbindung als gelben Feststoff lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,85 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,25 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,35-7,28 (m, 3H), 7,10 (dd, J = 8, 2,3 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,62 (s, 2H), 5,46 (s, 2H), 1,74 (m, 2H), 1,56 (m, 1H), 0,84-0,71 (m, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 425.
Beispiel 20
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-4-(methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester
Eine Mischung von 4-(Methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester (100 mg, 0,33 mmol), NaH (0,36 mmol, 15 mg einer 60 gew.-%igen Suspension in Mineralöl) und 2,5-Dichlorbenzylchlorid (80 mg, 0,41 mmol) in DMF (2 ml) wurde gemäß Methode A behandelt. Die Reinigung des rohen Produktes mit Säulenchromatographie auf Silica nur Hexan/Ether (1:1) als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (90 mg, 60% Ausbeute) als fahlgelben Feststoff.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,64 (s, 1H), 8,25 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,18-7,31 (m, 2H), 7,05-7,11 (m, 2H), 6,38 (s, 1H), 5,52 (s, 2H), 5,23 (s, 2H), 5,20-5,23 (m, 1H), 3,40 (s, 3H), 1,33 (d, J = 6,3 Hz, 6H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 457.
Beispiel 21
Herstellung von 6-Amino-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
Eine Mischung von 6-Amino-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester (100 mg, 0,39 mmol), NaH (0,58 mmol, 24 mg einer 60 gew.-%igen Suspension in Mineralöl) und 2,5-Dichlorbenzylchlorid (115 mg, 0,59 mmol) in DMF (2 ml) wurde gemäß Methode A behandelt. Die Reinigung des rohen Produktes mit Säulenchromatographie auf Silica mit Hexan/Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (87 mg, 54%, Ausbeute) als gelben Feststoff.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 8,96 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,41 (dd, 1 = 8,4 Hz, 2,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,80 (s, 2H), 5,10 (br s, 1H), 4,37 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 7,0 Hz, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 414.
Beispiel 22
Herstellung von 6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-methyl-1,6-dihydro-3H-furo[3',4':5,6]pyrido[3, 4-b]indol-3-on
6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-methyl-1,6-dihydro-3H-furo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3-on wurde hergestellt unter Verwendung der Methode A aus 1-Methyl-1,6-dihydro-3H-furo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3-on (9 mg, 0,038 mmol), NaH (0,046 mmol, 2 mg einer 60 gew.-%igen Suspension in Mineralöl) und 2,5-Dichlorbenzylchlorid (9 mg, 0,046 mmol) in DMF (1 ml). Die Reinigung des rohen Produktes durch präparative Dünnschichtchromatographie mit Hexan/Ether (2:1) als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (5 mg, 33% Ausbeute) als gelben Feststoff.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,93 (s, 1H), 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,65 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,37-7,46 (m, 3H), 7,16 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,05 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 1,92 (d, J = 6,6 Hz, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 397.
Beispiel 23
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(3,5-dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(3,5-dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,93 (m, 2H), 8,86 (s, 1H), 8,28 (m, 3H), 7,68 (t, 1H), 7,47-7,34 (m, 2H), 5,80 (s, 2H), 4,53 (t, 2H), 3,69 (m, 4H), 2,81 (t, 2H), 2,53 (m, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 506.
Beispiel 24
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode D hergestellt. Nach der chromatographischen Reinigung wurde die freie Base mit etherischem Chlorwasserstoff versetzt und das Produkt als Dihydrochloridsalz in einer Ausbeute von 11% nach Umkristallisation aus Ethanol/Ether isoliert.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 11,7 (br s, 1H), 9,63 (s, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,75 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,81-7,70 (m, 2H), 7,63 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,53 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 8,5, 2,4 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,05 (s, 2H), 4,75 (br s, 2H, Überlappung mit dem Wasser-Peak), 4,00 (br s, 4H), 3,60 (br s, 4H), 3,22 (br s, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 484.
Beispiel 25
Herstellung von 9-(2-Methoxy-5-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-(2-Methoxy-5-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit Methode A hergestellt. Das Produkt wurde mit Reverse-Phase-HPLC gereinigt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,94 (s, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,23-8,13 (m, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,63 (m, 1H), 7,44 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,32 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,60 (s, 2H), 4,52 (q, J = 6,7 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 1,51 (t, J = 6,7 Hz, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 406.
Beispiel 26
Herstellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl-2-chloronicotinat
[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl-2-chloronicotinat wurde mit der Methode C hergestellt und mit Reverse-Phase-HPLC gereinigt. Das Produkt wurde als freie Base isoliert.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,77 (s, 2H), 8,51 (dd, J = 4,6, 2,0 Hz, 1H), 8,29-8,21 (in, s, Überlappung, 3H), 7,60 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,42-7,29 (m, Überlappung, 3H), 7,21 (dd, J = 8,5, 2,3 Hz, 1H), 6,50 (s, 1H), 5,63 (s, 2H), 5,59 (s, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 496.
Beispiel 27
Herstellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylnicotinat
[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylnicotinat wurde mit der Methode C hergestellt und mit präparativer DC gereinigt. Das Produkt wurde als Hydrochloridsalz isoliert durch Behandlung der freien Base mit etherischem Chlorwasserstoff und anschließende Umkristallisation aus Ethanol/Ether (Gesamtausbeute: 43%).
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,61 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 9,02 (d, 1H); 8,75 (m, 2H), 7,8-7,39 (m, 6H), 6,70 (s, 1H), 6,03 (s, 2H), 5,89 (s, 2H) (Anmerkung: die sauren Wasserstoffatome einschließlich des Wassers im Lösungsmittel wurden nicht beobachtet, wahrscheinlich aufgrund zu starker Verbreiterung);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 462.
Beispiel 28
Herstellung von 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-4-(methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester.
9-(3,5-Dinitrobenzyl)-4-(methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester wurde aus 4-(Methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester nur Methode A in einer Ausbeute von 44% hergestellt. Die freie Base wurde mit etherischem Chlorwasserstoff versetzt und das Produkt als Hydrochloridsalz isoliert.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,38 (s, 1H), 8,72 (t, J = 2 Hz, 1H), 8,48 (d, J = 2, Hz, 2H), 8,37 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,3 (br s, 1H), 6,24 (s, 2H), 5,31-5,23 (s, m, Überlappung, 3H), 3,41 (s, 3H), 1,41 (d, J = 6,3 Hz, 6H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 479.
Beispiel 29
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9H-β-carbolin-3-carboxylat
Eine Suspension von β-Carbolin-3-carbonsäuremethylester (5,3 g, 23,4 mmol), 4-(2-Hydroxyethyl)-morpholin (4,62 g, 35 mmol), 4-Dimethylaminopyridin (1,2 g, 9,8 mmol), 4-Å-Molekularsieben (5 g) und Xylol (250 ml) wurde 48 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt, im Vakuum eingeengt und die entstehende Aufschlämmung zwischen CH₂Cl₂ (250 ml) aufgetrennt. Die Mischung wurde im Vakuum filtriert und der Rückstand mit CH₂Cl₂ (2 × 25 ml) gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen wurden mehrere Male mit Wasser gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Die Reinigung des rohen Produktes mit Säulenchromatographie auf Silica mit 8% 2 M NH₃-CH₃OH in CH₂Cl₂ als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (4,8 g, 64%) als fahlgelben Feststoff.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 9,09 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,21 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,38 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 4,63 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,73 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 2,87 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,59 (t, J = 4,6 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 326.
Beispiel 30
Herstellung von 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-3-[3-(methoxymethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-9H-β-carbolin
9-(3,5-Dinitrobenzyl)-3-[3-(methoxymethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-9H-β-carbolin wurde hergestellt gemäß einer Modifikation eines Literaturverfahrens zur Synthese von Oxadiazolen aus Estern (Swain et al., J. Med. Chem. 1991, 34:140).
Eine Suspension von Hydroxylaminhydrochlorid (2,02 g, 29,2 mmol), Kaliumcarbonat (5,48 g, 39,6 mmol) und 2-Methoxyacetonitril (1,42 g, 20 mmol) in absolutem Ethanol (160 ml) wurde 15 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde gekühlt, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde nur Säulenchromatographie auf Silicagel gereinigt mit einer Gradientenelution von 10 bis 30% 2 M NH₃-CH₃OH in CH₂Cl₂, was 2-Methoxyacetamidoxim (1,35 g, 65%) als weißen Feststoff lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,25 (br s, 1H), 5,40 (br s, 2H), 3,76 (s, 2H), 3,25 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 105.
Eine Suspension von 9H-β-Carbolin-3-carbonsäuremethylester (2,26 g, 10 mmol), Natriumhydrid (11 mmol, 440 mg einer 60%igen Mineralöldispersion) und 3,5-Dinitrobenzylchlorid (2,17 g, 10 mmol) in DMF (25 ml) wurde behandelt, wie in Methode B beschrieben. Die Umkristallisation des rohen Materials aus Ethylacetat/Hexan lieferte 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (2,85 g, 70%) als gelben Feststoff.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,95 (s, 2H), 8,94 (s, 1H), 8,37 (s, 2H), 8,30 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,67 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,39-7,50 (5-Linien-Multiplett, 2H), 5,94 (s, 2H), 4,06 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 406.
Eine Suspension von 2-Methoxyacetamidoxim (260 mg, 2,5 mmol) und 4-Å-Molekularsieben (1 g) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (15 ml) wurde 0,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und dann mit Natriumhydrid (2,75 mmol, 110 mg einer 60%igen Mineralölsuspension) versetzt. Die Mischung wurde 1 Stunde lang am Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde eine Suspension von 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremetlylester (205 mg, 0,5 mmol) in wasserfreiem Tetrahydrofuran (10 ml) zugegeben. Die entstehende Mischung wurde 15 Stunden lang am Rückfluss erhitzt, gekühlt, filtriert und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit präparativer Dünnschichtchromatographie gereinigt mit 4% 2 M NH₃-CH₃OH in CH₂Cl₂ als Elutionsmittel, was das gewünschte Produkt (86 mg, 38% Ausbeute) als weißen Feststoff lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,41 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 8,72 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 8,59 (d, J = 7,8, 1H), 8,49 (d, J = 1,9 Hz, 2H), 7,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,73 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,45 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,20 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 3,42 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 461.
Beispiel 31
Herstellung von 9-(2-Cyanobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-(2-Cyanobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit der Methode A hergestellt. Die Verbindung wurde mit RP-HPLC gereinigt unter Verwendung von Acetonitril/Wasser/Trifluoressigsäure als Elutionsmittel und als Trifluoracetatsalz isoliert.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,23 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,57 (d, J = 7,9, 1H), 7,95-7,98 (m, 1H), 7,67-7,71 (m, 2H), 6,40-6,53 (m, 3H), 6,72-6,78 (m, 1H), 6,13 (s, 2H), 4,42 (q, J = 7,2, 2H), 1,39 (t, J = 7.2. 3H);
LRMS berechnet für C₂₂H₁₇N₃O₂ (M + H) 356, gefunden 356,1.
Beispiel 32
Herstellung von 9-(4-Methyl-3-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester
9-(4-Methyl-3-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureethylester wurde mit Methode A hergestellt. Das Produkt wurde mit RP-HPLC gereinigt unter Verwendung von Acetonitril/Wasser/Trifluoressigsäure als Elutionsmittel und als Trifluoracetatsalz isoliert.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,21 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,45 (d, J = 8,0, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,78-7,8 (m, 1H), 7,58-7,68 (m, 1H), 7,30-7,45 (m, 3H), 5,89 (s, 2H), 4,31 (q, J = 7,2, 2H), 2,35 (s, 3H). 1,30 (t, J = 7,2, 3H);
LRMS berechnet für C₂₂H₁₉N₃O₄ (M + H) 390, gefunden 390,1.
Beispiel 33
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-methoxy-5-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-methoxy-5-nitrobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,95 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,28 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,23 (dd, J = 9,1 Hz, 2,8 Hz, 2H), 7,73 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,63 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,76 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 2,89 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 4,4 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 491.
Beispiel 34
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,4-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,4-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,95 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,65 (dd, J = 8,0 Hz, 7,5 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 8,3 Hz, 4,8 Hz, 2H), 7,02 (dd, 7 = 8,3 Hz, 1,2 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 4,62 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 2,88 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,88 (t, J = 4,4 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 484.
Beispiel 35
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(3,4-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(3,4-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,93 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,27 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,35-7,48 (7-Linien-Multiplett, 3H), 7,27 (s, 1H), 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,60 (s, 2H), 4,62 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,4 Hz, 4H), 2,88 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 4,0 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 484.
Beispiel 36
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-[3-fluor-5-(trifluormethyl)benzyl]-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-[3-fluor-5-(trifluormethyl)benzyl]-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,96 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,30 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,43-7,48 (Multiplett, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,88 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 5,70 (s, 2H), 4,63 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,76 (t. J = 4,5 Hz, 4H), 2,89 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 4,0 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 502.
Beispiel 37
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzyl]-1-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(4-fluor-3-(trifluormethyl)benzyl]-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,95 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,29 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,68 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,42-7,53 (7-Linien-Multiplett, 3H), 7,20-7,25 (Multiplett, 1H), 7,12 (t, 1 = 9,2 Hz, 1H), 5,67 (s, 2H), 4,62 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,0 Hz, 4H), 2,89 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,60 (t, J = 4,0 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 502.
Beispiel 38
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,3,4-trifluorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2,3,4-trifluorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,97 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,26 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,68 (td, J = 7,2 Hz, 1,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,44 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,78-6,87 (10-Linien-Multiplett, 1H), 6,57-6,65 (Multiplett, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,62 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 2,89 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 4,5 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 470.
Beispiel 39
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-brom-5-fluormethylbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-brom-5-fluormethylbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode A hergestellt.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,94 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,28 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,61-7,68 (5-Linien-Multiplett, 2H), 7,40-7,46 (5-Linien-Multiplett, 2H), 6,90 (td, J = 8,2 Hz, 2,9 Hz, 1H), 6,16 (dd, J = 9,0 Hz, 2,9 Hz, 1H), 5,64 (s, 2H), 4,62 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 2,88 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,62 (t, J = 4,5 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 514.
Beispiel 40
Herstellung von 2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-cyanobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
2-(4-Morpholinyl)ethyl-9-(2-cyanobenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde aus 9H-β-Carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester gemäß Methode A hergestellt. Die freie Base wurde mit etherischem Chlorwasserstoff versetzt und das Produkt als Dihydrochloridsalz in einer Ausbeute von 25% nach Kristallisation aus Aceton/Ether isoliert.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 11,8 (br s, 1H), 9,61 (s, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,71 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,72 (s, 2H), 7,54-7,47 (m, 3H), 6,78 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,22 (s, 2H), 4,79 (br s, 2H, Überlappung mit Wasser-Peak), 4,00 (br s, 4H), 3,66 (br s, 4H), 3,27 (br s, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 441.
Beispiel 41
Herstellung von 9-[2,4-Bis(trifluormethyl)benzyl]-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester
9-[2,4-Bis(trifluormethyl)benzyl]-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester wurde hergestellt aus 9H-β-Carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholino)ethylester unter Verwendung der Alkylierungsmethode A in einem Maßstab von 0,2 mmol (Ausbeute 45%).
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,97 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,31 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,66 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,9 (s, 2H), 4,63 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,75 (m, 4H), 2,88 (t, J = 6 Hz, 2H), 2,62 (m, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 552.
Beispiel 42
Herstellung von 6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-2-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1,6-dihydropyrrolo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3(2H)on
6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-2-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1,6-dihydropyrrolo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3(2H)on wurde hergestellt mit einer geringen Modifikation eines angegebenen Verfahrens (Dodd et al., J. Org. Chem. 1993, 58:7587): Eine Lösung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-N-[2,(4-morpholinyl)ethyl]-9H-β-carbolin-3-carboxamid (400 mg, 0,83 mmol) in wasserfreiem THF (12 ml) wurde gerührt und unter Stickstoff auf –78°C gekühlt. Als eine innere Temperatur von –78°C erreicht war, wurde 1,0 M Methyllithium in Diethylether/Cumol (4,2 ml, 4,2 mmol) mit einer Spritze über einen Zeitraum von 0,3 Stunden zugegeben. Die Reaktionsmischung entwickelte eine sehr tiefblaue Farbe nach vollständiger Zugabe des Methyllithiums. Die Lösung wurde 2 Stunden lang bei –78°C gerührt und das Trockeneis-Acetonbad durch ein Eis-Wasserbad ersetzt. Nach 0,5 Stunden wurde wasserfreies DMF (3070 mg, 4,2 mmol) tropfenweise zugegeben und die Reaktionsmischung bei Raumtemperatur weitere 15 Stunden lang gerührt. Die Lösung wurde auf 0°C gekühlt und destilliertes Wasser wurde langsam zugegeben, während die innere Temperatur der Reaktionsmischung auf 0 bis 5°C gehalten wurde. Die Lösung wurde auf etwa 10 ml unter vermindertem Druck eingeengt, überschüssiges CH₂Cl₂ zugegeben und die Mischung mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Na₂SO₄) und die Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der entstehende rohe Rückstand wurde mehrere Male mit Ether gewaschen. Die Reinigung des rohen Materials mit Säulenchromatographie auf Silica mit 4% 2 M MH₃-CH₃OH in CH₂Cl₂ als Elutionsmittel lieferte das Lactam (106 mg, 25%) als fahlgelben Feststoff. Ein Anteil von 241 mg (60%) nicht umgesetztem Ausgangsmaterial wurde gewonnen, indem die vereinigten Etherphasen und Chromatographiefraktionen eingedampft wurden.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,76 (s, 1H), 8,48 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,66 (td, J = 8,2 Hz. 0,91 Hz, 1H), 7,46 (t, J 7,4 Hz, 1H), 7,35-7,40 (4-Linien-Multiplett, 2H), 7,18 (dd, 1 = 8,5 Hz, 2,4 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,56 (s, 2H), 4,46 (dt, J = 9,6, 2,7 Hz, 1H), 3,83 (t, J = 4,3 Hz, 4H), 3,47 (td, 1 = 9,8, 1,5 Hz, 1H), 2,78-2,86 (m, 3H), 2,51-2,64 (m, 3H), 1,50-2,30 (v br s, 1H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 511.
Beispiel 43
Herstelluntg von 3-(3-Pyridyl)propyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
Eine Suspension von 3-(1-Imidazolylcarbonyl)-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9h-β-carbolin (505 mg, 1,20 mmol) und 3-Pyridinpropanol (8,2 g, 60 mmol) wurde 22 Stunden lang in Toluol (15 ml) auf 80°C erhitzt. Die entstehende Lösung wurde auf Raumtemperatur gekühlt und mehrere Male mit Wasser extrahiert, bevor die organische Phase nur Na₂SO₄ getrocknet wurde. Das Verdampfen des Lösungsmittels und die anschließende präparative Dünnschichtchromatographie des entstehenden rohen Materials mit Hexan/Ethylacetat (6:4) als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (470 mg, 80% Ausbeute) als fahlgelben Feststoff.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,91 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,67 (AB q, J = 7,4 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,42-7,48 (m, 3H), 7,22-7,28 (m, 2H), 6,60 (s, 1H), 5,70 (s, 2H), 4,53 (t, J = 6,5 Hz, 3H), 2,87 (t, J = 7,7 Hz, 3H), 2,26 (t, J = 7,3 Hz, 3H);
MS (ACPl; (M + H)⁺) m/z 490.
Beispiel 44
Herstellung von Tetrahydro-3-furanylmethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat
Tetrahydro-3-furanylmethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit Methode B hergestellt. Die Verbindung wurde mit RP-HPLC gereinigt unter Verwendung von Acetonitril/Wasser/Trifluoressigsäure als Elutionsmittel und das Produkt wurde als Trifluoracetatsalz isoliert.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,12 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,54 (d, J = 4,72 Hz, 1H), 7,65-7,68 (m, 2H), 7,61 (d, J = 5,28 Hz, 1H), 7,39-7,45 (m, 2H), 6,65 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,35 (dd, J = 4,05, 6,48 Hz, 1H), 4,27 (dd, J = 4,75 Hz, 6,48, 1H), 3,77-3,85 (m, 2H), 3,65-3,71 (m, 2H), 3,57-3,62 (m, 1H), 2,69-2.74 (m, 1H), 2,03-2,09 (m, 1H), 1,68-1,75 (m, 1H);
LRMS berechnet für C₂₄H₂₀Cl₂N₂O₃ (M + H) 455, gefunden 455,1.
Beispiel 45
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-N-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-9H-β-carbolin-3-carboxylat
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-N-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-9H-β-carbolin-3-carboxylat wurde mit einer Modifikation eines bekannten Verfahrens hergestellt (Dodd et al., J. Org. Chem., 1993, 58:7587). Zu einer Lösung von Trimethylaluminium (2 ml einer 2 M Lösung in Hexan, 4 mol) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (12,5 ml), die auf –10°C gekühlt war, wurde eine Lösung von 4-(2-Aminoethyl)morpholin (261 mg, 2 mmol) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (2,5 ml) tropfenweise zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 0,5 Stunden lang bei –10°C gerührt und dann 0,5 Stunden lang auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Eine Lösung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (800 mg, 2 mmol) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (5 ml) wurde zu der Reaktionsmischung zugegeben und letztere 15 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur gekühlt, langsam mit 1,8 M wässriger Salzsäure (5 ml) abgeschreckt und nur wässrigem Natriumbicarbonat auf einen pH-Wert von 9,0 bis 9,5 basisch gemacht, was einen weißen Feststoff lieferte. Die Suspension wurde durch ein Kissen aus Celite filtriert und der Rückstand mit CH₂Cl₂ (2 × 5 ml) gewaschen. Das Verdampfen des getrockneten (über Na₂SO₄) Filtrats lieferte einen gelben Feststoff, der bei Umkristallisation aus Ethylacetat das gewünschte Carboxamid isoliert, in einer Ausbeute von 80% (774 mg) lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 9,00 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,43 (t, J = 3,9 Hz, 1H), 8,30 (dd, J = 7,5, 1,1 Hz, 1H), 7,64 (dt, J = 7,7, 1,1 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,23 (dd, J = 8,5, 2,4 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 5,67 (s, 2H), 3,77 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,68 (q, J = 5,8, 3,9 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,56 (t, J = 5,1 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 483.
Beispiel 46
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbohydrazid
Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäuremethylester (4,8 g, 12,5 mmol), Hydrazin (6 ml) und Methanol (50 ml) wurde 5 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt und der Niederschlag durch Filtration gesammelt. Der Feststoff wurde mit Methanol (50 ml) versetzt und die Aufschlämmung 10 Minuten lang gerührt, filtriert und getrocknet, was 4,6 g (98%) der Titelverbindung lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,5 (s, 1H), 8,8 (s, 1H), 8,7 (s, 1H), 8,25 (d, 1H), 7,6-7,4 (m, 3H), 7,2-7,1 (m, 2H), 6,5 (s, 1H), 5,7 (s, 2H), 4,3 (s, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 385.
Beispiel 47
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbaldehyd-O-methyloxim
Eine Mischung von 9H-β-Carbolin-3-carbaldehyd-O-methyloxim (46 mg, 0,20 mmol), NaH (0,22 mmol, 9 mg einer 60 gew.-%igen Suspension in Mineralöl) und 2,5-Dichlorbenzylchlorid (43 mg, 0,22 mmol) in DMF (1,5 ml) wurde gemäß Methode A behandelt. Die Reinigung des rohen Produktes mit präparativer Dünnschichtchromatographie mit Hexan/Ethylacetat (7:3) als Elutionsmittel lieferte das gewünschte Produkt (37 mg, 48% Ausbeute) als weißen Feststoff.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,00 (s, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,45 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,32 (s, 1H), 7,64-7,59 (m, 2H), 7,61 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,36 (m, 1H), 6,60 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,86 (s, 2H), 3,97 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 384.
Beispiel 48
Herstellung von 4-[2-{[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]carbnyl}hydrazono)methyl]benzoesäure
Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbohydrazid (77 mg, 0,2 mmol), 4-Formylbenzoesäure (30 mg, 0,2 mmol), DMSO (5 ml) und einem Tropfen Eisessig wurde bei Raumtemperatur 12 Stunden lang gerührt. Ethylacetat (50 ml) wurde dem Kolben zugegeben. Die Mischung wurde mit Wasser und Kochsalzlösung extrahiert. Das Produkt, das aus der organischen Phase kristallisierte, wurde filtriert, was 80 mg (78%) der Titelverbindung lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,0 (s, 2H), 8,3 (s, 1H), 8,3 (s, 1H), 8,0 (d, 2H), 7,8 (d, 2H), 7,5-7,7 (m, 4H), 7,3-7,4 (m, 2H), 6,8 (s, 1H), 5,9 (s, 2H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 517.
Beispiel 49
Herstellung von 4-[1-(2-{[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]carbonyl}hydrazono)ethyl]benzoesäure
Eine Mischung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbohydrazid (100 mg, 0,25 mmol), 4-Acetylbenzoesäure (50 mg, 0,3 mmol), DMSO (5 ml) und einem Tropfen Eisessig wurde 12 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Ethylacetat (50 ml) wurde in den Kolben gegeben. Die Mischung wurde mit Wasser und Kochsalzlösung extrahiert. Das Produkt, das aus der organischen Phase kristallisierte, wurde filtriert, was 97 mg (73%) der Titelverbindung lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,0 (s, 2H), 8,5 (d, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,0-7,9 (m, 4H), 7,6-7,5 (m, 3H), 7,4-7,3 (m, 2H), 6,6 (s, 1H), 5,9 (s, 2H), 2,4 (s, 3H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 531.
Beispiel 50
Herstellung von 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-4-(methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester
Eine Suspension von 4-(Methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäureisopropylester (522 mg, 1,75 mmol), 4-(2-Hydroxyethyl)morpholin (6,7 g, 51 mmol), 4-Dimethylaminpyridin (130 mg, 1,05 mmol), 4-Å-Molekularsieben (500 mg) und Xylol (25 ml) wurde 48 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt, im Vakuum eingeengt und die entstehende Aufschlämmung mit CH₂Cl₂ (50 ml) aufgetrennt. Die Mischung wurde filtriert und der Rückstand mit CH₂Cl₂ (2 × 5 ml) gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen wurden mehrere Male mit Wasser gewaschen, über Na₂SO_{4 getrocknet und} eingeengt. Das rohe Produkt, 4-(Methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester war gemäß ¹H-NMR zu etwa 95% rein und wurde in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung verwendet.
Die Titelverbindung wurde mit der Methode A hergestellt unter Verwendung von 4-(Methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester (100 mg, 0,27mmol), Natriumhydrid (0,30 mmol, 12 mg einer 60%igen Mineralölsuspension) und 3,5-Dinitrobenzylchlorid (65 mg, 0,30 mmol) in DMF (2 ml). Die Reinigung des rohen Materials mit präparativer Dünnschichtchromatographie mit Ethylacetat/Hexan (7:3) lieferte 9-(3,5-Dinitrobenzyl)-4-(methoxymethyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(4-morpholinyl)ethylester (107 mg, 72%).
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,98 (s, 1H), 8,81 (s, 1H), 8,44 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 1,9 Hz, 2H), 7,68 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 5,83 (s, 2H), 5,44 (s, 2H), 4,59 (t, 7 = 5,8 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 4,5 Hz, 4H), 3,56 (s, 3H), 2,85 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,63 (t, J = 4,5 Hz, 4H);
MS (APCl; (M + H)⁺) m/z 550.
Beispiel 51
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(4-pyridinyl)propylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(4-pyridinyl)propylester wurde mit Methode B hergestellt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,10 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,53 (d, J = 7,9, 1H), 8,47 (d, J = 5,3, 2H), 7,59-7,68 (m, 3H), 7,40-7,45 (m, 2H), 7,32 (d, J = 5,6, 2H), 6,64 (d, J = 2,3, 1H), 5,93 (s, 2H), 2,77-2,85 (m, 4H), 2,08-2,16 (m, 2H);
LRMS berechnet für C₂₇H₂₁Cl₂N₃O₂ (M + H) 490, gefunden 490,1.
Beispiel 52
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(2-oxo-1-pyrrolidinyl)propylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(2-oxo-1-pyrrolidinyl)propylester wurde mit Methode B hergestellt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,17 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,52 (d, J = 7,93 Hz, 1H), 7,56-7,69 (m, 3H), 7,37-7,44 (m, 2H), 6,64 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,92 (s, 2H), 4,32 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,33-3,40 (m, 4H), 2,16 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 1,82-2,00 (m, 4H);
LRMS berechnet für C₂₆H₂₃Cl₂N₃O₃ (M + H) 496, gefunden 496,1.
Beispiel 53
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(2-pyrdinyl)propylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-3-(2-pyridinyl)propylester wurde mit Methode B hergestellt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,14 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,56 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,50 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,60-7,75 (m, SH), 7,39-7,46 (m, 2H), 7,34 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,20-7,25 (m, 1H), 6,69 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,46 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,00 (t, J = 7,4 Hz), 2,22-2,32 (m, 2H);
LRMS berechnet für C₂₇H₂₁Cl₂N₃O₂ (M + H) 490, gefunden 490.
Beispiel 54
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-[4-(ethoxycarbonyl)-1-piperazinyl]ethylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-[4-(ethoxycarbonyl)-1-piperazinyl]ethylester wurde mit Methode B hergestellt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,11 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,50 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,59-7,67 (m, 3H), 7,38-7,44 (m, 2H), 6,65 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,90 (s, 2H), 4,46-4,52 (m, 2H), 4,05 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,35-3,45 (m, 4H), 2,75-2,87 (m, 2H), 2,45-2,60 (m, 4H), 1,18 (t, J = 7,2 Hz, 3H);
LRMS berechnet für C₂₈H₂₈Cl₂N₄O₄ (M + H) 555, gefunden 555,1.
Beispiel 55
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbaldehyd
Ein 250-ml-Rundkolben wurde mit [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl)methanol (1,84 g, 5,1 mmol), Mangan(IV)oxid (1,14 g, 13,1 mmol) und Dichlormethan (60 ml) beschickt. Die Reaktionsmischung wurde 12 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand chromatographiert (Hexan:Ethylacetat = 10: 1), was die Titelverbindung lieferte (1,6 g, 87% Ausbeute).
¹H-NMR (CDCl₃) δ 10,3 (s, 1H), 8,9 (s, 1H), 8,8 (s, 1H), 8,3 (d, 1H), 7,7 (t, 1H), 7,5-7,4 (m, 3H), 7,2 (s, 1H), 6,6 (s, 1H), 5,7 (s, 2H);
MS (Cl): 355, 357, 359.
Beispiel 56
Herstellung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylamin
Eine Lösung von [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methanol (7,14 g, 20 mmol) in wasserfreiem CH₂Cl₂ (100 ml) wurde unter Stickstoffatmosphäre auf 0°C gekühlt und Thionylchlorid (2,5 g, 20,8 mmol wurde unter Rühren tropfenweise zugegeben. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und weitere 15 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit wasserfreiem Ethanol (50 ml) verdünnt und an einem Rotationsverdampfer eingeengt, was einen fahlgelben Feststoff lieferte. Das rohe Material wurde durch Zugabe von wasserfreiem Ether kristallisiert, was 6,92 g (84%) 3-Chlormethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolinhydrochlorid lieferte. Dieses Salz wurde in die freie Base umgewandelt durch Zugabe von wässrigem Na₂CO₃ und dann wurde die entstehende Mischung mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die organische Phase wurde getrocknet (Na₂SO₄) und im Vakuum eingeengt, was 0,30 g (100%) der freien Base als fahlgelben Feststoff ergab.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,72 (s, 1H), 8,20 (d, J = 7,9, 2,3 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,60 (t, J = 7 Hz, 1H), 7,38 (m, 3H), 7,20 (dd, 1 = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 6,55 (s, 1H), 5,65 (s, 2H), 4,92 (s, 2H);
MS Monoisotopische Masse (berechnet) 374,0, MH+ (beobachtet) 375,2, (MH+-HCl) 339,1.
Eine Suspension von 3-Chlormethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolinhydrochlorid (5,64 g, 15 mmol) und Natriumazid (2,0 g, 30 mmol) in wasserfreiem Ethanol (60 ml) wurde 15 Stunden lang unter Stickstoff am Rückfluss erhitzt. Die entstehende Suspension wurde auf Raumtemperatur gekühlt, mit einem gleichen Volumen an CH₂Cl₂, verdünnt und mit Wasser (2 × 50 ml) und Kochsalzlösung (2,5 ml) gewaschen. Der organische Extrakt wurde über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt, was 5,70 g (100%) 3-Azidomethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin als fahlgelben Feststoff ergab.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,75 (s, 1H), 8,20 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,58 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,32-7,40 (m, 3H), 7,20 (dd, J = 9,6, 2,5 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,52 (s, 2H), 4,20 (s, 2H);
MS Monoisotopische Masse (berechnet) 381,1, MH+ (beobachtet) 382,0, (MH+-N2) 354,2.
Die Reduktion dieses Azids zu dem entsprechenden Amin wurde ausgeführt gemäß einem von Gartiser et al., Tetrahedron Lett. 1983, 24:1609 veröffentlichten Verfahren. Eine Suspension von 3-Azidomethyl-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin (4,60 g, 12 mmol), Ammoniumformiat (3,90 g, 61,7 mmol) und 10% Pd auf Kohlenstoff (2,0 g, 20 Mol-%) in Ethanol (200 ml) wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff 15 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde filtriert, um die Feststoffe zu entfernen und das Filtrat eingeengt und mit CH₂Cl₂ (100 ml) verdünnt. Die entstehende Lösung wurde mit Wasser (2 × 25 ml) und Kochsalzlösung (25 ml) gewaschen, über wasserfreiem Na₂SO₄ getrocknet und eingeengt. Das rohe Produkt wurde aus Ethylacetat umkristallisiert, was 3,0 g (65%) N-Formyl-[9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylamin als fahlgelben Feststoff lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,65 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,58 (t, 1H), 7,30-7,40 (m, 3H), 7,20 (dd, 1H), 6,51 (s, 1H), 5,60 (s, 2H), 4,78 (d, 1H);
MS Monoisotopische Masse (berechnet) 383,1, MH+ (beobachtet) 384,9.
Dieses Formamid (2,90 g, 7,5 mmol) wurde mit Kaliumhydroxid (5,40 g, 9,4 mmol) in Ethanol/Wasser (5:1, 48 ml) 6 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Die entstehende Suspension wurde auf Raumtemperatur gekühlt, eingeengt und mit CH₂Cl₂ (50 ml) verdünnt. Die organische Phase wurde mit Wasser (2 × 25 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und eingeengt, was [9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylamin als gelben Feststoff lieferte. Das rohe Material wurde aus Ethylacetat/Hexan umkristallisiert, was 1,48 g (55%) eines fahlgelben Feststoffs lieferte.
¹H-NMR (CDCl₃) δ 8,70 (s, 1H), 8,18 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,58 (td, J = 7,2, 1,1 Hz, 1H), 7,32-7,42 (6-Linien-m, 3H), 7,20 (dd, J = 9,6, 2,6 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,60 (s, 2H), 4,28 (d, 1H), 1,96 (br s, 2H);
MS Monoisotopische Masse (berechnet) 355,1, MH+ (beobachtet) 356,7.
Beispiel 57
Herstellung von N-{[9-(2 5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl}-5-methyl-3-isoxazolcarboxamid
Eine Lösung von 5-Methylisoxazol-3-carbonylchlorid in DCE (0,25 M) wurde mit einer Lösung von[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methylamin in DME (0,25 M, 1 Äquivalent) und anschließend einer Lösung von Triethylamin in DME (1,0 M, 1 Äquivalent) versetzt. Die Mischung wurde bewegt und über Nacht stehen gelassen. Das Lösungsmittel wurde eingedampft und der Rückstand mit präparativer HPLC gereinigt.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,5 (br t, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,60 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,78 (m, 1H), 7,66-7,60 (m, Überlappung, 2H), 7,50-7,41 (m, Überlappung, 2H), 6,69 (s, 1H), 6,65 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,96 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,49 (s, Überlappung mit DMSO-Peak). Ein Peak bei 13,7 ppm im ¹³C-NMR-Spektrum stimmte überein mit der Methylgruppe, die wahrscheinlich mit dem Lösungsmittel im ¹H-NMR-Spektrum überlappt.
Monoisotopische Masse berechnet für C₂₄H₁₈C_l2N₄O₂: 464,1, (M + H) gefunden 465,4.
Beispiel 58
Herstellung von N-{9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl-2-(trifluormethyl)}benzamid
Die Titelverbindung wurde hergestellt unter Verwendung des für N-{[9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl}-5-methyl-3-isoxazolcarboxamid beschriebenen Verfahrens.
¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9,41 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 9,35 (s, 1H), 8,59 (s, 1H), 8,43 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,84-7,60 (m, Überlappung, 7H), 7,50-7,33 (m, Überlappung, 2H), 6,66 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,94 (s, 2H), 4,87 (d, J = 5,6 Hz, 2H).
Monoisotopische Masse berechnet für C₂₇H₁₈Cl₂F₃N₃O: 527,1, (M + H) gefunden 528,5.
Beispiel 59
Herstellung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)ethylester
9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbonsäure-2-(2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl)ethylester wurde mit der allgemeinen Methode C hergestellt.
¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8,95 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,30 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,47-7,42 (m, Überlappung, 3H), 7,23 (dd, J = 8,5, 2,4 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,68 (s, 2H), 4,65 (t, J = 5 Hz, 2H), 4,05 (t, J = 5 Hz, 2H), 2,75 (s, 4H).
Monoisotopische Masse berechnet für C₂₅H₁₉Cl₂N₃O₄: 495,1, (M + H) gefunden 495,8.
Beispiel 60
Herstellung von 6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-1,6-dihydro-3H-furo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3-on
6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-1,6-dihydro-3H-furo[3',4':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3-on wurde mit einem Literaturverfahren (Narasimhan et al., Synthesis, 1975, 797) mit einigen Modifikationen wie folgt hergestellt. Eine Lösung von 6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-2-[2-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1,6-dihydropyrrolo[3',4':5,6]-pyrido[3,4-b]indol-3(2H)-on (2,51 g, 4,91 mmol) in konzentrierter Salzsäure (35 ml, 406 mmol wurde 48 Stunden lang am Rückfluss erhitzt (unter Verwendung einer Badtemperatur von 140°C). Die Lösung färbte sich im Verlauf von etwa 24 Stunden von braun nach grünlich-gelb. Die Lösung wurde gekühlt, mit gesättigtem NaHCO₃ auf pH ~9 basisch gemacht und zweimal mit CH₂Cl₂ (2 × 25 ml) extrahiert. Die wässrige Phase wurde mit 10% wässriger Salzsäure auf pH ∼6 angesäuert. Der entstehende fahlbraune Niederschlag wurde filtriert, mit CH₂Cl₂ und Ether gewaschen und im Vakuum bei 80°C 15 Stunden lang getrocknet. Beim Stehen über Nacht fiel aus dem schwach sauren Filtrat eine weitere Menge an Feststoff aus. Dieses wurde filtriert und wie oben behandelt, was eine vereinigte Ausbeute von 1,6 g (82%) lieferte.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,25 (s, 1H), 8,52 (d, J = 1,7 Hz, 1H, Austausch mit D₂O), 8,30 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,67 (m, 2H), 7,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,36 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,52 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 5,94 (s, 2H);
¹³C-NMR (DMSO-d₆): δ 166,1, 140,1, 136,4, 135,3, 135,0, 134,8, 133,5, 130,8, 130,4, 129,6, 128,5, 128,1, 125,8, 123,1, 121,1, 120,5, 117,6, 109,9, 94,4, 43,5;
MS Monoisotopische Masse (berechnet) 398,0, MH+ (beobachtet) 399,0.
Beispiel 61
Herstellung von 2-([(4-Cyanocyclohexyl]methyl]{[9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl}amino)-2-oxoethylacetat
Die erste Stufe der Sequenz, die verwendet wurde, um diese Verbindung herzustellen, war eine Modifikation eines Verfahrens, das für eine reduktive Aminierung berichtet wurde (Abdel-Magid et al., J. Org. Chem., 1996, 61:3849). Eine Lösung von 9-(2,5-Dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-carbaldehyd in Methanol (0,10 M) wurde mit 1 Äquivalent 4-Cyanocyclohexanmethylamin (als Mischung von Diastereomeren) in Methanol (0,10 M) versetzt. Die Mischung wurde kurz bewegt und bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Die Lösung wurde mit 2 Äquivalenten einer frisch hergestellten Lösung von Natriumborhydrid in nicht denaturiertem wasserfreien Ethanol (0,50 M) versetzt, bewegt und bei Raumtemperatur 2 Stunden lang stehen gelassen. Die Lösung wurde mit der Hälfte ihres Volumens an Wasser verdünnt, bewegt (Gas entwickelte sich) und die flüchtigen Bestandteile im Vakuum entfernt. Zu dem festen Rückstand wurde 1 Äquivalent einer 0,1 M Lösung von Acetoxyacetylchlorid in DCE, 1 Äquivalent einer 0,2 M Lösung von Triethylamin in Methylenchlorid zugegeben und die Mischung 2 Stunden lang bewegt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und der Rückstand mit präparativer HPLC chromatographiert. Ungefähr 50 mg des Rückstandes wurden in 15 ml 15% DMSO, 30% Isopropanol und 55% Hexan gelöst. Dies wurde auf einer Kromasil 100-5 Sil (250 × 22 mm)-Säule eluiert unter Verwendung eines Gradienten von Hexan (A) und Isopropanol (B) mit 12 ml/min, während bei 238 mm überwacht wurde. Die Säule wurde mit einer Mischung aus 95% A und 5% B 15 Minuten lang eluiert und auschließend die Menge an B alle 10 Minuten um 2% erhöht, bis die Peaks für das cis- und trans-Isomer eluierten (etwa 60 bis 80 Minuten). Die Säule wurde mit einer Mischung von 80% B und 20% A 20 Minuten lang gewaschen bei einer insgesamten Durchlaufzeit von 120 Minuten.
cis-Isomer: Die Verbindung erschien als ein Satz von Rotameren um die Tertiäramidbindung.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 8,92, 8,86 (s, 1H), 8,30 (m, 1H), 8,17, 7,98 (s, 1H), 7,59 (m, Überlappung, 3H), 7,40-7,31 (m, 2H), 6,45 (br s, 1H), 5,82 (s, 2H), 5,01, 4,87 (s, 2H), 4,69 (br s, 2H), 3,17 (m, 2H), 2,55 (m, W_h/2 = 29 Hz, 1H), 2,08, 2,04 (s, 3H), 2,00-1,89 (m, 2H), 1,75-1,52 (m, 3H), 1,45-1,20 (m, 2H), 1,30-0,82 (m, 2H);
LRMS berechnet für C₃₁H₃₀Cl₂N₄O₃: 567,2; MH+ (beobachtet) 577,2.
trans-Isomer: Die Verbindung erschien als ein Satz von Rotameren um die Tertiäramidbindung.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 8,92, 8,85 (s, 1H), 8,30 (m, 1H), 8,19, 7,98 (s, 1H), 7,60 (m, Überlappung 3H), 7,38 (dd, J = 8,6, 2,4 Hz, 1H), 7,30 (m, 1H), 6,51 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,81 (br s, 2H), 5,03, 4,90 (s, 2H), 4,71 (br s, 2H), 3,25, 3,20 (d, J = 6,4 Hz bzw. 7,2 Hz, 2H), 3,09, 3,03 (m, W_h/2 = 8,7 Hz bzw. 10,5 Hz, 1H), 2,08, 2,04 (s, 3H), 1,85-1,2 (m, Überlappung, 9H);
LRMS berechnet für C₃₁H₃₀Cl₂N₄O₃: 576,2, MH+ (beobachtet) 577,2.
Beispiel 62
Herstellung von N-{[(4-Cyanocyclohexyl)methyl]-N-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl}cyclopropancarboxamid
N-{[(4-Cyanocyclohexyl)methyl]-N-9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl; cyclopropancarboxamid wurde hergestellt mit dem Verfahren, das oben für 2-([(4-Cyanocyclohexyl)methyl]{[9-(2,5-dichlorbenzyl)-9H-β-carbolin-3-yl]methyl}amino)-2-oxoethylacetat beschrieben wurde. Diese Verbindung erscheint als Mischung von Rotameren um die Tertiäramidbindung.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 8,92, 8,87 (s, 1H), 8,31 (m, Überlappung, 1H), 8,09, 7,96 (s, 1H), 7,60 (m, Überlappung, 3H), 7,38 (dd, J = 8,7, 2,6 Hz, 1H), 7,30 (m, 1H), 6,52, 6,50 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,82, 5,80 (s, 2H), 4,93, 4,73 (s, 2H), 3,44, 3,27 (d, J = 7,2, 6,8 Hz, 2H), 2,58 (m, 1H), 1,95 (m, 2H), 1,72-1,56 (m, 2H), 1,48-0,55 (m, Überlappung, 10H);
LRMS berechnet für C₃₁H₃₀Cl₂N₄O: 544,2, MH+ (beobachtet) 545,2.
Beispiel 63
Herstellung von 7-(2,5-Dichlorbenzyl)-3-(2-hydroxyethyl)-3,7-dihydro-4H-pyridazino[4',5':5,6]pyrido(3,4-b]indol-4-on
Dieses Ringsystem wurde hergestellt mit einer Modifikation eines angegebenen Verfahrens (Mylari et al., J. Org. Chem., 1991, 56:2587). Eine Lösung von 6-(2,5-Dichlorbenzyl)-1-hydroxy-1,6-dihydro-3H-furo-[3',3':5,6]pyrido[3,4-b]indol-3-on und 1 Äquivalent 2-Hydroxyethylhydrazin in Ethanol (0,033 M) wurde 1 Stunden lang am Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde verdampft und das Produkt mit präparativer HPLC gereinigt.
¹H-NMR (DMSO-d₆) δ 9,48 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,78 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,68 (m, 2H), 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,37 (dd, J = 8,5, 2,5 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,82 (br s, 1H), 4,28 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,78 (t, J = 6 Hz, 2H);
LRMS berechnet für C₂₂H₁₆Cl₂N₄: 438,1, (M + H) gefunden 439,1.
Testen der Verbindungen auf biochemische Aktivität
Die folgenden Assays wurden durchgeführt, um die GLP-1-Aktivität zu bestimmen, wenn die Zellen mit den erfindungsgemäßen Verbindungen vorbehandelt wurden.
Assay 1: GLP-1-Bindungsassay
Die Rezeptorbindung wurde untersucht unter Verwendung von kloniertem humanen GLP-1-Rezeptor. der in einer Babyhamster-Nierenzelllinie (BHK) exprimiert wurde. Klone wurden ausgewählt in Gegenwart von 0.5 mg/ml G-418 und es wurde gezeigt, dass sie über mehr als 40 Passagen stabil waren.
Plasmamembranen wurden hergestellt, indem Zellen bis zum Zusammenfließen gezüchtet wurden, von der Oberfläche abgenonmmen wurden und die Zellen in kaltem Puffer (10 mM Tris/HCl), pH 7,4, der 30 mM NaCl, I mM Dithiothreitol, 5 mg/l Leupeptin, 5 mg/ml Pepstatin, 100 mg/l Bacitracin und 15 mg/l rekombinantes Aprotinin enthielt, resuspendiert wurden. Die Zellen wurden durch zwei 10 Sekunden lange Bursts unter Verwendung eines Polytron PT 10-35-Homogenisators (Kinematica) homogenisiert und zentrifugiert. Der Niederschlag, der die Plasmamembranen enthielt, wurde in Puffer suspendiert und bei –80°C aufbewahrt, bis er benötigt wurde.
Bindungsassays wurden in doppelter Ausführung in Polypropylenröhrchen oder 96-Napf-Platten durchgeführt. Der in diesem Test verwendete Puffer war 25 mM HEPES, pH 7,4, der 0,1 % Rinderserumalbumin (Sigma) und 0,01% Bacitracin enthielt. Typischerweise wurden 100 μl Probe (GLP-1 oder Testverbindung) jedem Röhrchen zugegeben. Tracer (radioiodiertes GLP-1; 20.000 cpm) wurde in Puffer verdünnt und 100 μl jedem Röhr chen zugegeben. Frisch aufgetautes Plasmamembranprotein (0,5 μg), verdünnt in Puffer, wurde dann in Anteilen von jeweils 100 μl in jedes Röhrchen gegeben. Die Röhrchen wurden 1 Stunde lang bei 37°C inkubiert. Die nicht spezifische Bindung wurde in Gegenwart von 100 nM GLP-1 bestimmt. Gebundener und ungebundener Tracer wurden dann durch Vakuumfiltration getrennt. Die Röhrchen wurden zweimal mit 3 ml Puffer pro Röhrchen gewaschen. Die Filter wurden in einem Gamma-Szintillationszähler gezählt. Da radioaktiv iodiertes GLP-1 mit hoher Aktivität verfügbar ist, konnten die Tests unter solchen Bedingungen durchgeführt werden, dass radioaktiv iodiertes GLP-1, das in den Tests verwendet wurde, nur 5 bis 10% der Dissoziationskonstante von GLP-1 für den GLP-1-Rezeptor bildete und sich somit die gemessenen IC₅₀-Werte des Antagonisten stark an die K_i-Werte annäherten.
Assay 2: GLP-1-Funktionstest
Mit dem funktionellen Test oder Assay wurde die Fähigkeit der Verbindungen, entweder die GLP-1-Dosis-Wirkungs-Kurve in einem Gesamtzell-cAMP-Test nach rechts zu verschieben oder ihre Fähigkeit, die cAMP-Ansammlung in diesen Zellen zu stimulieren, getestet. Der Test wurde in Borsilicatglasröhrchen 12 × 75 durchgeführt. Die Pufferkonzentrationen im Test waren 10 mM HEPES, 1 mM EGTA, 1,4 mM MgCl₂, 0,1 mM IBMX, 30 mM NaCl, 4,7 mM KCl, 2,5 mM NaH₂PO₄, 3 mM Glucose und 0,2% BSA. Der pH-Wert wurde auf 7,4 eingestellt.
Um die Fähigkeit von Verbindungen festzustellen, die durch GLP-1 vermittelte cAMP-Ansammlung zu antagonisieren, wurden Zellen (typischerweise 0,5 ml, 10⁶/ml) mit verschiedenen Konzentrationen der Verhindungen 10 Minuten lang bei 37°C vorbehandelt, dann mit steigenden Konzentrationen von GLP-1 20 Minuten lang beaufschlagt. Bei der Bestimmung der Fähigkeit der Verbindungen, als Agonisten zu wirken, wurden Zellen mit verschiedenen Konzentrationen der Verbindungen alleine behandelt. Die Reaktionen wurden durch Zentrifugation beendet und anschließend durch Zelllyse unter Zugabe von 500 μl 0,1% HCl. Zellbruchstücke wurden pelletisiert und der Überstand, der cAMP enthielt, zur Trockene eingeengt. cAMP wurde unter Verwendung eines RIA-Kits (New England Nuclear) gemessen.
Bevorzugte Verbindungen der Erfindung zeigten IC₅₀-Bindungsaffinitäten von weniger als 1 μM beim oben beschriebenen GLP-1-Bindungsassay und bevorzugtere Verbindungen hatten IC₅₀-Bindungsaffinitäten von weniger als 10 nM. Da die Konzentration an iodiertem GLP-1, das in den Tests verwendet wurde, nur 5 bis 10% der Dissoziationskonstante von GLP-1 für den GLP-Rezeptor bildete, näherten sich die IC₅₀-Werte der Antagonisten eng ihren K_i-Werten an. Keine der getesteten Verbindungen zeigte eine Agonistaktivität in dem GLP-1-Funktionsassay.
Pharmazeutische Zusammensetzungen
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen, die erfindungsgemäße Verbindungen enthalten, können hergestellt werden unter Verwendung bekannter Techniken, z.B. mithilfe von üblichen Misch-, Lösungs-, Granulierungs-, Drageeherstellungs-, Pulverisierungs-, Emulsions-, Verkapselungs-, Einfang- oder Lyophilisierungsverfahren. Pharmazeutische Zusammensetzungen werden in üblicher Weise formuliert unter Verwendung eines oder mehrerer physiologisch annehmbarer Träger, die Hilfsstoffe enthalten, die die Verarbeitung der aktiven Verbin dungen zu Präparaten, die pharmazeutisch verwendet werden können, erleichtern. Die genaue Formulierung hängt von dem ausgewählten Verabreichungsweg ab.
Zur Injektion werden die erfindungsgemäßen Mittel in wässrigen Lösungen formuliert, bevorzugt in physiologisch kompatiblen Puffern, wie Hank's Lösung, Ringer-Lösung oder physiologischem Kochsalzpuffer. Für die transmucosale Verabreichung werden Penetranzien, die geeignet sind, die Schranke zu durchdringen, in der Formulierung verwendet. Solche Penetranzien sind im Stand der Technik allgemein bekannt.
Für die orale Verabreichung werden die Verbindungen leicht formuliert, indem die aktiven Verbindungen mit pharmazeutisch annehmbaren Trägern, die im Stand der Technik bekannt sind, vereinigt werden. Solche Träger ermöglichen es, die Verbindungen der Erfindung in Form von Tabletten, Pillen, Dragees, Kapseln, Flüssigkeiten, Gelen, Sirupen, Aufschlämmungen, Suspensionen und dgl. zu formulieren für die orale Aufnahme durch einen zu behandelnden Patienten. Pharmazeutische Präparate für die orale Verwendung werden erhalten als feste Hilfsstoffe, gegebenenfalls durch Vermahlen der entstehenden Mischung, Zugabe geeigneter Hilfsmittel, falls erwünscht, und Verarbeitung der Mischung von Körnchen, um Tabletten oder Drageekerne zu erhalten. Geeignete Hilfsstoffe schließen Füllstoffe, wie Zucker, einschließlich Lactose, Saccharose, Mannit oder Sorbit, und Cellulosepräparate, wie Maisstärke, Weizenstärke, Reisstärke, Kartoffelstärke, Gelatine, Gummi arabicum, Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose und/oder Polyvinylpyrrolidon (PVP) ein. Falls erwünscht, werden Sprengmittel zugegeben, wie vernetztes Polyvinylpyrrolidon, Agar oder Alginsäure oder ein Salz davon, wie Natriumalginat.
Drageekerne werden mit geeigneten Beschichtungen versehen. Für diesen Zweck werden konzentrierte Zuckerlösungen verwendet, die gegebenenfalls Gummi arabicum, Polyvinylpyrrolidon, Carbopol-Gel, Polyethylenglycol und/oder Titandioxid, Lacklösungen und geeignete organische Lösungsmittel oder Lösungsmittelmischungen enthalten können. Färbenmittel oder Pigmente werden gegebenenfalls den Tabletten oder Drageebeschichtungen zugegeben zur Kennzeichnung oder um verschiedene Kombinationen von Dosen aktiver Verbindungen zu unterscheiden.
Pharmazeutische Präparate, die oral verwendet werden können, schließen Push-fit-Kapseln aus Gelatine ebenso wie weiche verschlossene Kapseln aus Gelatine und einem Weichmacher, wie Glycerin oder Sorbit ein. Die Push-fit-Kapseln enthalten die aktiven Inhaltsstoffe gegebenenfalls in Mischung mit Füllstoffen, wie Lactose, Bindemitteln, wie Stärken und/oder Gleitmitteln, wie Talk oder Magnesiumstearat und gegebenenfalls Stabilisatoren. In weichen Kapseln werden die aktiven Verbindungen in geeigneten Flüssigkeiten, z.B. fetten Ölen, flüssigem Paraffin oder flüssigen Polyethylenglycolen gelöst oder suspendiert. Außerdem werden gegebenenfalls Stabilisatoren zugegeben. Alle Formulierungen für die orale Verabreichung sind in Dosierungen, die für eine solche Verabreichung geeignet ist. Für die buccale Verabreichung haben die Zusammensetzungen die Form von Tabletten oder Pastillen, die in üblicher Weise formuliert werden.
Für die Verabreichung durch Inhalation werden die Verbindungen zur Verwendung gemäß der vorliegenden Erfindung geeigneterweise in Form eines Aerosolsprays aus unter Druck gesetzten Verpackungen oder einem Vernebler unter Verwendung eines geeigneten Treibmittels, z.B. Dichlordifluormethan, Trichlorfluormethan, Dichlortetrafluorethan, Kohlendioxid oder anderen geeigneten Gasen abgegeben. Im Fall eines unter Druck gesetzten Aerosols wird die Dosierungseinheit bestimmt, indem ein Ventil vorgesehen wurd, um eine abgemessene Menge abzugeben. Kapseln und Patronen aus Gelatine werden z.B. zur Verwendung in einem Inhalator oder Insufflator formuliert, die eine Pulvermischung der Verbindung und einen geeigneten Pulvergrundstoff, wie Lactose oder Stärke, enthalten.
Die Verbindungen werden für die parenterale Verabreichung durch Injektion, z.B. durch Bolusinjektion oder kontinuierliche Infusion formuliert. Formulierungen zur Injektion werden in Einheitsdosierungsform bereitgestellt, z.B. in Ampullen oder Mehrdosisbehältern mit zugegebenem Konservierungsmittel. Die Zusammensetzungen haben solche Formen, wie Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen in öligen oder wässrigen Trägern und enthalten gegebenenfalls Formulierungsmittel, wie Suspensions-, Stabilisierungs- und/oder Dispersionsmittel.
Pharmazeutische Formulierungen für die parenterale Verabreichung schließen wässrige Lösungen der aktiven Verbindungen in wasserlöslicher Form ein. Außerdem werden Suspensionen der aktiven Verbindungen nach Bedarf als ölige Injektionssuspensionen hergestellt. Geeignete lipophile Lösungsmittel oder Träger schließen fette Öle, wie Sesamöl, oder synthetische Fettsäureester, wie Ethyloleat, Triglycerid oder Liposomen ein. Wässrige Injektionssuspensionen enthalten gegebenenfalls Substanzen, die die Viskosität der Suspension erhöhen, wie z.B. Natriumcarboxymethylcellulose, Sorbit oder Dextran. Gegebenenfalls kann die Suspension auch geeignete Stabilisatoren oder Mittel, die die Löslichkeit der Verbindungen erhöhen, enthalten, die die Herstellung von hoch konzentrierten Lösungen zulassen.
Alternativ wird der aktive Inhaltsstoff in Pulverform für die Konstitution mit einem geeigneten Träger, z.B. sterilem pyrogenfreien Wasser, vor der Verwendung bereitgestellt. Die Verbindungen werden auch in rektalen Zusammensetzungen, wie Zäpfchen oder Klistieren formuliert, die z.B. übliche Zäpfchengrundstoffe, wie Kakaobutter oder andere Glyceride enthalten.
Zusätzlich zu den vorher beschriebenen Formulierungen werden die Verbindungen auch als Depotpräparate formuliert. Solche lang wirkenden Präparate werden durch Implantation (z.B. subcutan oder intramuskulär) oder intramuskuläre Injektion verabreicht. So werden z.B. die Verbindungen mit geeigneten polymeren oder hydrophoben Materialien (z.B. als Emulsion in einem geeigneten Öl) oder Ionenaustauschharzen oder als kaum lösliche Derivate, z.B. als kaum lösliches Salz formuliert.
Ein pharmazeutischer Träger für die hydrophoben Verbindungen der Erfindung ist ein Co-Lösungsmittelsystem mit Benzylalkohol, einem nicht polaren Tensid, einem mit Wasser mischbaren organischen Polymer und einer wässrigen Phase. Das Co-Lösungsmittelsystem ist wünschenswerterweise das VPD-Co-Lösungsmittelsystem. VPD ist eine Lösung von 3% G/V Benzylalkohol, 8% G/V des nicht polaren Tensids Polysorbat 80 und 65% G/V Polyethylenglycol 300, dessen Volumen in absolutem Ethanol eingestellt wird. Das VPD-Co-Lösungsmittelsystem (VPD:5W) enthält VPD verdünnt 1:1 mit 5% Dextrose in Wasserlösung. Dieses Co-Lösungsmittelsystem löst hydrophobe Verbindungen gut und erzeugt selbst kaum Toxizität bei systemischer Verabreichung. Die Anteile eines wünschenswerten Co-Lösungsmittelsystems variieren erheblich, ohne die Löslichkeit und die Toxizitätseigenschaften zu zerstören. Weiterhin kann die Identität der Co-Lösungsmittelkomponenten variiert werden. Z.B. können andere nicht polare Tenside mit geringer Toxizität anstelle von Polysorbat 80 verwendet werden; die Fraktionsgröße des Polyethylenglycols kann variiert werden; andere biokompatible Polymere können Polyethylenglycol ersetzen, z.B. Polyvinylpyrrolidon; und andere Zucker oder Polysaccharide können Dextrose ersetzen.
Alternativ werden andere Abgabesysteme für hydrophobe pharmazeutische Verbindungen angewendet. Liposomen und Emulsionen sind wohl bekannte Beispiele für Abgabeträger oder Träger für hydrophobe Arzneimittel. Bestimmte organische Lösungsmittel, wie Dimethylsulfoxid, werden auch angewendet, wenn auch gewöhnlich auf Kosten einer höheren Toxizität. Außerdem werden die Verbindungen abgegeben unter Verwendung eines Systems mit verzögerter Freisetzung, z.B. semipermeable Matrizes fester hydrophober Polymere, die das therapeutische Mittel enthalten. Verschiedene Materialien mit verzögerter Freisetzung wurden etabliert und sind dem Fachmann auf diesem Gebiet wohl bekannt. Kapseln mit verzögerter Freisetzung können abhängig von ihrer chemischen Art die Verbindungen über einen Zeitraum von wenigen Wochen bis zu mehr als 100 Tagen freisetzen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen enthalten auch geeignete feste oder gelartige Träger oder Hilfsstoffe. Beispiele für solche Träger oder Hilfsstoffe schließen Calciumcarbonat, Calciumphosphat, verschiedene Zucker, Stärken, Cellulosederivate, Gelatine und Polymere, wie Polyethylenglycole, ein (ohne darauf beschrankt zu sein).
Einige der erfindungsgemäßen Verbindungen werden als Salze mit pharmazeutisch kompatiblen Gegenionen bereitgestellt. Pharmazeutisch kompatible Salze können mit vielen Säuren gebildet werden, einschließlich Salzsäure, Schwefelsäure, Essigsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Bernsteinsäure etc., ohne darauf beschränkt zu sein. Salze sind eher in wässrigen oder anderen protonischen Lösungsmitteln löslich, als die entsprechenden freien Baseformen.
Pharmazeutische Zusammensetzungen, die zur Verwendung der erfindungsgemäß bereitgestellten Verbindungen geeignet sind, schließen Zusammensetzungen, ein, bei denen die aktiven Inhaltsstoffe in einer wirksamen Menge, um den vorgesehenen Zweck zu erzielen, enthalten sind, z.B. um die Entwicklung von Symptomen des zu behandelnden Patienten zu verhindern oder bereits bestehende Symptome zu lindern. Die Bestimmung der optimalen Menge, um die gewünschten biologischen, chemischen oder anderen Wirkungen zu bewirken, liegt im Können des Fachmanns auf diesem Gebiet.
Z.B. kann eine parenterale pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Verabreichung durch Injektion geeignet ist, 10 mg eines wasserlöslichen Salzes einer Verbindung der Formel (I) gemischt mit 10 ml 0,9% steriler Kochsalzlösung enthalten, die anschließend in eine Dosierungseinheitsform eingearbeitet wird, die zur Verabreichung durch Injektion geeignet ist.
Zusätzlich kann eine orale pharmazeutische Zusammensetzung, die zur Verabreichung geeignet ist, 10 mg einer Verbindung der Formel (I) gemischt mit 750 mg Lactose enthalten, die anschließend in eine Dosierungseinheitsform eingearbeitet wird, wie eine Hartgelatinekapsel, für die orale Verabreichung.
Während die Erfindung unter Bezugnahme auf spezifische Beispiele und bevorzugte Ausführungsformen erläutert wurde, ist es für den Fachmann auf diesem Gebiet selbstverständlich, dass verschiedene Modifikationen und Variationen gemacht werden können. Somit soll die Erfindung nicht auf die vorhergehende Beschreibung beschränkt werden, sondern durch die folgenden Ansprüche und deren Äquivalente definiert werden.

Claims

Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zusätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff, Hydroxyl oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; wobei dann, wenn R¹ unsubstituiertes Phenyl oder 2-Nitrophenyl ist, R²
ist, R³ H ist und R⁴ H ist, R⁵ keine Ethylgruppe ist; oder ein Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung.
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei R¹ eine Phenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl- und Cyanogruppen; R²
ist, wobei R' wie oben definiert ist und wobei ein Wasserstoffbindungsakzeptor-Substituent 3 bis 5 Å von der Carbonylgruppe entfernt angeordnet ist und R³ Wasserstoff oder Methoxymethyl ist.
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei R' 2,5-Dichlorphenyl oder 3,5-Dinitrophenyl ist.
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein Lacton oder Lactam ist.
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei R² ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus:
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei R² und R³ und die Atome, an die sie gebunden sind, zusammen einen 5- bis 6-gliedrigen Ring bilden ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei die Verbindung die Formel
hat, worin R⁵ wie oben definiert ist.
Verbindung, Prodrug, pharmazeutisch annehmbares Salz oder pharmazeutisch annehmbares Solvat nach Anspruch 1, wobei die Verbindung ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus
Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend eine wirksame Menge einer Verbinding, einer Prodrug, eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes oder eines pharmazeutisch annehmbaren Solvats nach Anspruch 1 und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger.
Verwendung einer Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substitutiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zusätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff-, Hydroxyl- oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; oder ein Prodrug, ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Regulation der Sekretion von Insulin bei einem Säugetier.
Verwendung einer Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-C₆,-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zu sätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff, Hydroxyl oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; oder ein Prodrug, ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung von GLP-1-Aktivität.
Verwendung einer Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zusätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einer Sauerstoff-, Hydroxyl- oder C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist. die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; oder ein Prodrug, ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Bindung von GLP-1 an den GLP-1-Rezeptor.
Verwendung einer Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe, einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zu sätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff, Hydroxyl oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; oder ein Prodrug, ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Aktivierung des GLP-1-Rezeptors.
Pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend eine Verbindung der Formel
worin R¹ eine Phenyl- oder Pyridylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- und C₁-C₆-Alkoxygruppen, R²
ist, wobei R' Wasserstoff; eine Hydroxygruppe; -OR⁵, wobei R⁵ eine C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe oder einer Amino-, C₁-C₆-Alkoxy-, Cycloalkyl-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl-, Hydroxyalkyl-, Carboxyl-, C₁-C₆-Alkoxycarbonyl-, Sauerstoff-, Halogen- und Trifluormethylgruppen; oder -NR⁶R⁷ ist, wobei R⁶ und R⁷ jeweils unabhängig Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl-, Amino- oder Iminogruppe ist, die gegebenenfalls mit einer Hydroxygruppe. einer C₁-C₆-Alkoxygruppe oder einer Amino-, Thioether-, Heterocycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Sauerstoff-, Halogen-, Trifluormethyl- und Carboxylgruppen, oder wobei -NR⁶R⁷ einen 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Ring bildet, der gegebenenfalls zusätzlich zu dem Stickstoffheteroatom ein Heteroatom ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S enthält; -(CH₂)_n-O-R'', wobei n 1 oder 2 ist und R'' Wasserstoff, eine C₅-C₇-Heteroarylgruppe oder
ist, wobei R⁸ Wasserstoff, eine C₁-C₆-Alkylgruppe, eine C₃-C₆-Cycloalkylgruppe oder eine 5- oder 6-gliedrige Heteroarylgruppe ist, die gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Halogen, Methyl und Trifluormethyl; -(CH₂)_p-N(R'')(R'''), wobei p 1 oder 2 ist, R'' wie oben definiert ist und R''' Wasserstoff oder eine Alkyl- oder Alkoxygruppe ist, die gegebenenfalls mit einer C₃-C₆-Cycloalkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit Cyano substituiert ist; -CH=N-R'''', wobei R'''' Wasserstoff, eine Hydroxygruppe oder -OR⁹ ist, wobei R⁹ eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Aryl- oder Heteroarylgruppe ist oder ein 5- oder 6-gliedriger heterocyclischer Ring ist, der 1 bis 3 Heteroatome aufweist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit einem oder zwei Substituenten substituiert ist, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Methyl-, Methoxymethyl-, Sauerstoff- und C₁-C₆-Alkoxygruppen; R³ Wasserstoff oder eine C₁-C₆-Alkyl-, C₂-C₆-Alkenyl- oder (C₁-C₃-Alkoxy)-C₁-C₃-alkylgruppe ist; oder R² und R³ zusammen mit den Atomen, an die sie gebunden sind, einen 5- oder 6-gliedrigen Ring bilden, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus O, N und S, wobei der Ring gegebenenfalls mit Sauerstoff, Hydroxyl oder einer C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, die gegebenenfalls mit einem 5- oder 6-gliedrigen Heterocycloalkylring substituiert ist, der ein oder zwei Heteroatome aufweist, unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus O, N und S und R⁴ Wasserstoff oder eine Amino-, Halogen-, Hydroxyl-, Nitro-, Trifluormethyl-, Cyano-, C₁-C₆-Alkyl- oder C₂-C₆-Alkenylgruppe ist; oder ein Prodrug, ein pharmazeutisch annehmbares Salz oder ein pharmazeutisch annehmbares Solvat dieser Verbindung; wobei die Verbindung, das Prodrug, das pharmazeutisch annehmbare Salz oder das pharmazeutisch annehmbare Solvat ein GLP-1-Rezeptorantagonist ist mit einer IC₅₀-Bindungsaffinität von weniger als 1 μM, und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger.
Verwendung eines GLP-1-Rezeptorantagonisten wie in Anspruch 14 definiert zur Herstellung eines Arzneimittels zur Hemmung der Aktivierung des GLP-1-Rezeptors.
Verbindung ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus