KR20010089563A - Ｇｌｐ-1 수용체의 비펩티드 길항제 및 사용법 - Google Patents

Ｇｌｐ-1 수용체의 비펩티드 길항제 및 사용법 Download PDF

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란잔 자가트 라자팍세
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단 키엘
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쯔오 쉥 초우
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Abstract

본 발명은 장 호르몬(intestinal hormone) 글루카곤 유사 펩티드 1 (glucagon-like peptide 1; GLP-1) 길항제로써 작용하는 화합물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 유용한 물리적, 화학적 및 생물학적 특성을 갖는 비펩티드 GLP-1 길항제에 관한 것이다. 본 발명의 GLP-1 길항제는 GLP-1 수용체에 GLP-1 펩티드가 결합하는 것을 저해하고, 및/또는 GLP-1과 결합하는 기작에 의해 수용체의 작용을 억제한다. 더욱이, 본 발명은 GLP-1 수용체에 GLP-1이 결합하는 것을 저해하는 방법과 GLP-1 수용체의 작용을 저해하는 방법에 관한 것이다.
따라서, 본 발명의 목적은 약제학적으로 유용한 비-펩티드 GLP-1 길항제를 제공하는 것이다. 본 발명의 또다른 목적은 합성에 있어서 용이한 화합물 및 중간체 화합물의 제조 방법을 제공하는 것이다.

Description

ＧＬＰ-1 수용체의 비펩티드 길항제 및 사용법{Non-peptide antagonists of GLP-1 receptor and methods of use}
GLP-1은 인슐린 분비를 증진하며 글루코오스 흡수 및 대사의 조절에 기여하는, 미세 식이섭취관 내부로 배출되는 일종의 장 호르몬이다. GLP-1은 프로글루카곤의 번역 후 공정(post-translational processing)에 의해 유도되며, 장의 내분비 L-세포에 의해 분비된다(Fehman et al., 1995,Endocr. Rev.16:390-410; Thorens et al., 1995,Diabetes Metab.(Paris) 21:311-318). GLP-1의 인슐린-반응 효과(insulin-trophic effect)는 GLP-1이 당뇨 및 중증의 기타 글루코오스 불내성 질환(intolerance management) 문제의 치료에 유용한 수단이 되게 한다.
59세의 비 당뇨 여성을 대상으로 수행된 최근의 연구 결과에 따르면, GLP-1이 간접적으로 건강한 개인의 인슐린-대-글루카곤 비율을 증가시키는 것을 통해, 주로 간의 글루코오스 생산을 감소시키고 글루코오스의 대사적 감소율을 증가시킴으로써 혈장 글루코오스 수준을 낮춘다고 암시하고 있다(Larsson et al., 1997,Acta Physiol. Scand.160:413-422). 글루코오스 불내성은 노화 과정의 통상적인 특징이다; 노화는 유형Ⅱ 당뇨병의 발병인자로 알려져 왔다.
노화 과정에서 발생하는 β세포에서의 이상성에 관하여 고안된 시험에 있어서, 인슐린 반응은 시험된 각 연령층에 있어서 유사함이 발견되었다. ⅣGTT와 연계하여 GLP-1은 늙은 동물에서 글루코오스의 감소율을 증가시킴으로써 글루코오스에 대한 급성 인슐린 반응을 회복시키는 것으로 알려졌다. 도출된 결론은 GLP-1에 대한 인슐린 반응성이 유지되는 동물일지라도, 늙은 동물에 있어서는 글루코오스-매개 인슐린 반응이 약화되어 나타난다는 것이다(Ore et al., 1997,Journal of Gerontology: Biological Sciences52A(5):B245-B249).
GLP-1 효험제(agonist)는 내인성 GLP-1의 생리학적 및 약리학적 특성을 모방한 화합물(compound) 또는 제(agent)를 의미한다. GLP-1 길항제는 GLP-1 수용체에 결합하는 GLP-1 펩티드를 저해하고 및/또는 GLP-1에 결합함으로써 수용체의 작용을 억제하는 기능을 통해서 GLP-1의 효력을 약화시키는 화합물 또는 제를 의미한다.
글루카곤-유사 펩티드종 GLP-1-(7-36)-아미드 및 엑센딘-4-(1-39)는 GLP-1 효험제로써 확인되어 있다. 글루카곤-세크레틴-혈관작용성 장 펩티드 엑센딘-(9-39)는 GLP-1 길항제로써 확인된 바 있다(Montrose-Rafizaden et al., 1997,J.Biol.Chem.272(34):21201-21206).
펩티드 호르몬의 펩티드 길항제들은 종종 꽤 효험이 있다. 그러나, 펩티드 길항제의 사용은 효소적 분해에 대한 민감성과 낮은 생물적 분포, 즉, 소화계로부터 혈류내로의 용이한 수송 불능 등으로 인한 문제들과 연관되어 있다. 그러므로, 상기 길항제들은 소량 투여시 이들의 원하는 혈액 수준에 도달하기가 어려움으로 인하여 약물로서의 유효성이 제한되어 있다. 결과적으로, 이러한 이유로 인하여 GLP-1 길항제, 특히 비-펩티드 GLP-1 길항제가 필요하다.
GLP-1 길항제는 악액질(cachexia)에 의해 나타나는 질환에서 식욕을 증가시키기 위해 치료학적으로 유력하게 사용되고 있다. 예를 들면, Larsen 등에 의한 시험에서 GLP-1의 중추 투여가 섭식 행동에 관여하는 시상하부-뇌하수체-부신피질 축의 중추 CRH-함유 뉴런을 활성화시킴을 보여주고 있다(Larsen et al., 1997,Endocrinology138(10):4445-4455). 또한, GLP-1 효험제는 쥐에서 음식물과 물의 흡수를 저해하며, 이러한 효과가 GLP-1 수용체 길항제인 엑센딘-(9-39) 아미드에 의해 봉쇄됨을 보여주는 많은 증거들이 있다(Navarro et al., 1996,J.Neurochem.67(5): 1982-1991; Tang-Christensen, 1996,Amer.J.Physiol.271(4 Part 2):R848-856). 엑센딘-(9-39)는 다른 쥐 모델에서 단독으로 증가하였다(Turton et al., 1996,Nature379(6560):69-72). 부가하여, GLP-1 수용체 길항제는 식후 혈당 감소 및 덤핑 증후군(dumping syndrome)에 있어서 GLP-1 분비를 강화시킴으로 인하여 유용하다(Vecht, 1997,Scand.J.Gastroenterol. Suppl.223:21-27).
그러므로, 펩티드 GLP-1 길항제에 의해 나타나는 생체내 분해 및 생물적 분포의 문제점을 개선시킨, GLP-1의 치료학적 조절에 유용한 효과적인 비펩티드 GLP-1 길항제가 요구된다.
본 발명은 장 호르몬(intestinal hormone) 글루카곤 유사 펩티드 1 (glucagon-like peptide 1; GLP-1) 길항제로써 작용하는 화합물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 유용한 물리적, 화학적 및 생물학적 특성을 갖는 비펩티드 GLP-1 길항제에 관한 것이다. 본 발명의 GLP-1 길항제는 GLP-1 수용체에 GLP-1 펩티드가 결합하는 것을 저해하고, 및/또는 GLP-1과 결합하는 기작에 의해 수용체의 작용을 억제한다. 더욱이, 본 발명은 GLP-1 수용체에 GLP-1이 결합하는 것을 저해하는 방법과 GLP-1 수용체의 작용을 저해하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 목적은 약제학적으로 유용한 비-펩티드 GLP-1 길항제를 제공하는 것이다. 본 발명의 또다른 목적은 합성에 있어서 용이한 화합물 및 중간체 화합물의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 화합물은 이들이 더 좋은 생물적 분포를 가지며, 생리 효소에 의한 분해에 저항성을 가지므로 펩티드 화합물보다 약제학적으로 우수하다.
본 발명은 하기 일반식 (Ⅰ)의 GLP-1 길항제 화합물을 나타낸다:
여기서:
상기 R1은 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 및 C1-C6알콕시기로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 페닐 또는 피리딜 기이며;
상기 R2는:
,여기서, 상기 R'은: 수소; 히드록시기; -OR5, 여기서 상기 R5는 하나의 히드록시기 또는 알킬, 히드록시알킬, 카르복실, C1-C6알콕시카르보닐, 산소, 할로겐, 및 트리플루오로메틸기로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 아미노, C1-C6알콕시, 시클로알킬, 티오에테르, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴기로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬 또는 C2-C6알케닐기; 또는 -NR6R7, 여기서 상기 R6및 R7은 각각 독립적으로 수소, 또는 히드록시기, C1-C6알콕시기 또는 산소, 할로겐, 트리플루오로메틸, 및 카르복실기로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 아미노, 티오에테르, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 아미노 또는 이미노기, 또는 여기서 상기 -NR6R7은 질소 헤테로원자에 부가하여 O,N 및 S로부터 선택된 헤테로원자를 선택적으로 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로환 고리를 형성하고;
-(CH2)n-O-R", 여기서 n은 1 또는 2이고, R"은 수소, C5-C7헤테로아릴기, 또는, 여기서, 상기 R8은 수소, C1-C6알킬기, C3-C6시클로알킬기, 또는 할로겐, 메틸 및 트리플루오로메틸기로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에의해 선택적으로 치환된 5- 또는 6-원 헤테로아릴기;
-(CH2)p-N(R")(R"'), 여기서 p는 1 또는 2, R"은 상기의 정의와 동일하며, R"'은 수소 또는 선택적으로 시아노기가 치환된 C3-C6시클로알킬기로 선택적으로 치환된 알킬 또는 알콕시기;
-CH=N-R"", 여기서, 상기 R""은 수소, 히드록시, 또는 -OR9, 여기서 상기 R9는 알킬, 시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴기; 또는
O,N 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로환 고리로서, 상기 고리는 메틸, 메톡시메틸, 산소, 및 C1-C6알콕시기로부터 독립적으로 선택된 하나 또는 두 개의 치환체에 의해 선택적으로 치환되어 있는 것이고;
상기 R3는 수소 또는 C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 또는 (C1-C3알콕시)C1-C3알킬기;
또는 R2및 R3는 원자를 공유하여 O,N 및 S로부터 선택된 하나 또는 두개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 고리의 형태로 결합하였으며, 고리는 산소, 히드록시, 또는 O,N 및 S로부터 독립적으로 선택된 하나 또는 두개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로시클로알킬로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬기이며;
상기 R4는 수소 또는 아미노, 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸,시아노, C1-C6알킬, 또는 C2-C6알케닐기이다.
본 발명은 또한 일반식 Ⅰ의 화합물의 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 및 활성대사산물을 제공한다.
본 발명의 GLP-1 길항제는 GLP-1 수용체에 결합하는 GLP-1 펩티드를 저해하며, 및/또는 GLP-1에 결합함으로써 수용체의 작용을 억제한다.
이에 따라, 더욱이, 본 발명은 GLP-1 수용체에 대한 GLP-1의 결합을 저해하는 방법 및 본 발명의 화합물을 사용함으로써 GLP-1 수용체의 작용을 억제하는 방법을 제공한다.
종래 기술에서의 표현 방법에 따라,는, 중심 또는 골격 구조에 부착된 단편 또는 치환체라는 의미의 결합이라는 것을 표시하기 위해, 이하 구조식에서 사용하였다.
후술한 내용에 있어서, "알킬기"라 함은 메틸(Me), 에틸(Et), 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, t-부틸 등과 같은 포화 탄소원자 및 수소 원자의 직- 또는 분쇄의 1가 라디칼을 의미한다.
"알케닐기"라 함은 에테닐, 펜테닐, 부테닐, 프로페닐 등과 같은 이중결합을 하나 이상 포함한 직- 또는 분쇄의 알켄-형 라디칼을 의미한다.
"알키닐기"라 함은 에티닐, 부티닐, 프로피닐, 펜티닐, 헥시닐 등과 같은 삼중결합을 적어도 하나 포함한 직- 또는 분쇄의 알킨-형 라디칼을 의미한다.
"시클로알킬기"라 함은 3 내지 14개의 탄소 고리 원자를 포함하는, 각각이포화 또는 불포화된 비-방향족 1가의 단일환, 이중환, 삼중환 라디칼을 의미한다. 시클로알킬기의 도시적 예는 하기 단편을 포함한다.
"헤테로시클로알킬기"라 함은 질소, 산소 및 황에서 선택된 1 내지 5개의 헤테로 원자를 포함하여 3 내지 18개의 고리 원자를 포함하는, 포화 또는 불포화된 비-방향족 1가의 단일환, 이중환, 삼중환 라디칼을 의미한다. 헤테로시클로알킬기의 도시적 예는 하기 단편을 포함하며, 여기서 R은 임의의 적합한 치환체이다.
"아릴기"라 함은 6 내지 18개의 탄소 고리 원자를 포함하는 방향족 1가의 단일환, 이중환 또는 삼중환 라디칼을 의미한다. 아릴기의 도시적 예는 하기 단편을포함한다.
"헤테로아릴기"라 함은 질소, 산소 및 황에서 선택된 1 내지 5개의 헤테로 원자를 포함하여 4 내지 18개의 고리 원자를 포함하는 방향족 1가의 단일환, 이중환 또는 삼중환 라디칼을 의미한다. 헤테로아릴기의 도시적 예는 하기 단편을 포함한다.
"헤테로사이클"이라 함은 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬기를 의미한다.
"아실기"라 함은 -C(O)-R 라디칼을 의미하며, 여기서 상기 R은 탄소-, 산소-, 또는 질소-연결 치환체이다.
"술포닐기"라 함은 -SO2R 라디칼을 의미하며, 여기서 R은 탄소-, 산소-, 또는 질소-연결 치환체이다.
"아미노기"라 함은 NH2라디칼 또는 일차, 이차 또는 삼차 아민 라디칼을 의미한다(예, NHRa, 여기서 Ra는 알킬기; 및 -NRaRb, 여기서 상기 Ra및 Rb는 각각 독립적으로 알킬기이다).
"이미노" 치환체는 탄소-질소 이중 결합을 포함한 치환체를 의미하며, 예로는를 들 수 있다.
"알콕시기"라 함은 -ORa를 의미하며, 여기서 상기 Ra는 알킬기이다. 알콕시기의 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시 등이 있다.
"알콕시카르보닐기"라 함은 라디칼 -C(O)ORa를 의미하며, 여기서 상기 Ra는 알킬기이다.
"티오에테르"라 함은 알킬티오, 아릴티오 및 헤테로아릴티오기를 의미한다. "알킬티오기"는 라디칼 -SRa를 의미하며, 여기서 상기 Ra는 알킬기이다. "아릴티오기"는 라디칼 -SRc를 의미하며, 여기서 상기 Rc는 아릴기이다. "헤테로아릴티오기"는 라디칼 -SRd를 의미하며, 여기서 상기 Rd는 헤테로아릴기이다.
"아릴옥시기"는 라디칼 -ORc를 의미하며, 여기서 상기 Rc는 아릴기이다. "헤테로아릴옥시기"는 라디칼 -ORd를 의미하며, 여기서 상기 Rd는 헤테로아릴기이다.
"치환체(substituent)" 또는 "적합한 치환체(suitable substituent)"라 함은 당업자에 의한 통상적 시험을 통해 화학적으로 적합하다고 인식되거나 선택될 수 있는 임의의 치환체를 의미한다. 적합한 치환체의 도시적 예는 히드록시(-OH), 할로겐, 옥소기, 알킬기, 아실기, 술포닐기, 메르캅토기, 알킬티오기, 알콕시기, 시클로알킬기, 헤테로시클로알킬기, 아릴기, 헤테로아릴기, 카르복시기(-C(O)OH), 어미노기, 카바모일기(-C(O)NH2), 아릴옥시기, 헤테로아릴옥시기, 아릴티오기, 헤테로아릴티오기 등이 포함된다.
"선택적으로 치환된"이라 함은 특정기에 대하여, 선택적인 치환체가 명확하게 특정화되어 있지 않다면, 치환되지 않거나 또는 하나 이상의 적합한 치환체에 의해 치환됨을 의미하며, 치환체가 특정화된 경우에는 그 기가 치환되지 않거나, 특정 치환체에 의해 치환됨을 의미한다. 상기에 정의된 바에 따르면, 여기에 나타내지 않은 지시(예를 들어, 특정기는 치환되지 않음을 지시함에 따라)가 없는 경우, 다양한 기들이 치환되지 않을 수도 있고, 치환될 수도 있다.
"전구약물"이라 함은 생리적 조건하에서 또는 가수분해에 의해 전환되는 화합물을 의미하거나 또는 대사에 있어 약제학적으로 활성인 특정의 화합물을 의미한다.
"약제학적으로 활성인 대사산물"이라 함은 특정 화합물의 체내 대사를 통해 생산된 약리학적으로 활성인 생성물을 의미한다.
"용매화합물(solvate)"이라 함은 화합물의 생리적 유효성을 유지하는 특정 화합물의 약제학적으로 허용가능한 용매화합물 형태를 의미한다. 용매 화합물의 예로는 본 발명의 화합물이 물, 이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸아세테이트, 아세트산 또는 에탄올아민과 결합된 형태가 포함된다.
"약제학적으로 허용가능한 염"이라 함은 자유산 또는 염기 상태에서 생리적 유효성을 유지하는 특정 화합물의 염을 의미하며, 생리적이 아닌 경우나, 기타의 경우에는 부적당하다. 약제학적으로 허용가능한 염의 예로는 술페이트, 피로술페이트, 바이술페이트, 술파이트, 바이술파이트, 포스페이트, 모노히드로젠포스페이트, 디히드로젠포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 염소, 브롬, 요오드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포르메이트, 이소부티레이트, 카프로에이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 히드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 술포네이트, 크실렌술포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, γ-히드록시부티레이트, 글리콜레이트, 타르트레이트, 메탄술포네이트(메실레이트), 프로판술포네이트, 나프탈렌-1-술포네이트, 나프탈렌-2-술포네이트 및 만델레이트가 포함된다.
GLP-1의 작용은 하기 일반식 (Ⅰ)의 9H-β-카르볼린 화합물에 의해 상쇄된다.
[화학식 1]
여기서, R1, R2, R3및 R4는 상기에 정의한 바와 같다. 본 발명은 또한 상기 화합물의 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 및 활성 대사산물을 제공한다.
바람직한 구체화로써, 상기 R1은 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸 및 시아노로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환된 페닐기이다.
또한, 바람직하게는, 상기 R2가인 화합물이며, 여기서 R'은 상기에 정의된 바와 같고, 카르보닐기로부터 3~5Å 위치에 통상의 구조적 변형을 통해 가능한 수소결합 수용체 치환체를 포함한다.
여기에서 사용된 "수소결합 수용체 치환체"라 함은 -OH 또는 =NH와 같은 수소결합 공여자와 함께 수소 결합을 형성할 수 있는 N 또는 O를 포함한 치환체를 의미한다. 수소결합 수용체 치환체의 예로는등의 기를 포함한 단편이 포함된다. 이러한 유형의 R2기의 예로는 및이 포함된다. 종래 기술로써 알려진 바와 같이, 여기서 사용된 간략 부호는 -CH3를 표시한다.
또한, 바람직한 것은, 여기서, 상기 R3가 수소 또는 메톡시메틸인 화합물이다.
더욱 바람직한 구체화로써, 상기 R1은 2,5-디클로로페닐 또는 3,5-디니트로페닐이다.
다른 바람직한 구체화로써, 상기 R2및 R3는 원자와 함께 5- 또는 6-원 락톤 또는 락탐 고리의 형태로 결합된다.
또다른 바람직한 구체화로써, 상기 R2는 하기로부터 선택된다.
또한, 바람직한 구체화로써, R2및 R3와 이들이 결합한 원자에 의해 형성된 5- 또는 6-원 고리는 하기로부터 선택된다.
상기 일반식 (Ⅰ)로써 표시되는 특히 바람직한 화합물은 하기의 것들을 포함한다.
부가하여, 본 발명은 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 제조에 유용한 전구체, 빌딩 블록 및 중간체를 나타낸다. 그 예로써 본 발명의 범위 이내의 특정 전구체, 빌딩 블록 및 중간체를 도시하였다. 특정하게는, 하기의 화합물이 본 발명의 범위 이내의 해당 화합물을 합성하는데 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물은 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 및 활성대사산물을 포함한다. 화합물의 염은 상기에 정의된 바와 같이 무기 또는 유기산으로부터 유도된 약제학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명은 더욱이 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 활성대사산물과 전구약물을 포함한다. 본 발명의 활성대사산물은 신체의 다양한 기관에서 약물 대사 효소의 생체내 변환 반응에 따른 작용으로 인하여 화학적 구조에 변형을 받는 것들이다. 전구약물은 이러한 다양한 생체내 변환 반응을 통해, 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 전구체 화합물로부터 생체내에서 대사적으로 전환된 화합물이다. 전구약물의 예로는 생물적 가수분해가 가능한 에스테르와 아미드가 포함된다.
명세서 전반에 걸쳐 묘사된 본 발명의 임의의 화합물은 하나 이상의 비대칭 중심을 포함하며, 이에 따라, 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 기타 입체 이성질체의 형태를 발생시킨다. 본 발명은 이들의 라세믹체와 광학적으로 순수한 형태뿐만 아니라, 가능한 입체이성질체까지를 모두 포함한다. 광학 활성인 (R) 및 (S) 이성질체는 키랄 신톤, 키랄 시약을 사용하여 제조하거나, 또는 통상적 기술을 사용하여 얻을 수 있다. 여기서 묘사된 화합물은 E 및 Z 기하이성질체 둘 모두를 포함하는 올레핀형 이중 결합을 포함한다.
여기서 언급된 화학 구조는 토토머리즘 현상을 나타낼 수도 있다. 본 명세서 내에 도시된 구조는 가능한 토토머 형태 중의 하나만을 나타내고 있지만, 본 발명은 공지된 방법을 사용함으로써 재현할 수 있는 어떠한 토토머의 형태라도 포함하며, 도시된 구조식에 나타난 임의의 하나의 토토머 형태에 제한되지 않는다.
<약제학적 조성물 및 처리법>
본 발명의 약제학적 조성물은 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 유효량 및 비활성의 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함한다. 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 "유효량"은 결합 및/또는 GLP-1 수용체의 활성이 저해되는 화합물의 농도인 GLP-1의 길항적 양으로 결정한다. 상기량은 GLP-1의 결합과 관련된 인슐린 반응 효과의 조절을 위한 치료학적 유용성을 제공한다.
본 발명의 약제학적 조성물은 GLP-1 저해에 의해 매개된 질환 또는 징후의 치료가 요구되는 환자에게 투여하기에 적합한 투여 단위 형태로 제조된다. 투여에 적합한 형태로는(한정되는 것은 아니나) 종래에 알려진 바와 같이 경구(oral), 장관외(parenteral), 정맥내(intravenous), 근육내(intramuscular) 및경피(transdermal) 투여의 방법이 포함된다.
상기 조성물은 통상적인 과정에 따라, 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 유효량과 함께 공지되어 있는 약제학적으로 허용가능한 담체(carriers) 또는 희석제(diluents)를 결합함으로써 제조할 수 있다. 상기 공정은 원하는 제조물을 얻기 위해 적절하게 성분의 혼합(mixing), 과립화(granulating), 압축(compressing) 또는 용해(dissolving) 공정이 포함될 수 있다.
사용가능한 약제학적 담체의 예로는 고체 또는 액체가 가능하다. 고체 담체의 예로는 락토스, 백도토(terra alba), 수크로오스, 탈크, 젤라틴, 아가, 펙틴, 아카시아, 마그네슘스테아레이트, 스테아린산 등이 있다. 액체 담체의 예로는 시럽, 피넛유, 올리브유, 물 등이 있다. 유사하게, 담체 또는 희석제는 글리세릴모노스테아레이트 또는 글리세릴디스테아레이트를 단독으로, 또는 왁스, 에틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 메틸메타크릴레이트 등과 공유한 형태로의 공지된 시간-연장 물질(time-delay material)을 포함할 수 있다.
다양한 약제학적 형태가 도입 가능하다. 그러므로, 고체 담체가 사용되는 경우라면, 제조물은 정제(tablet), 파우더 또는 펠렛(pellet) 중에 경 젤라틴 캡슐(hard gelatin capsule)이 위치한 형태, 또는 트로키(troche)나 로젠지(lozenge)의 형태가 가능하다. 고체 담체의 양은 다양하지만, 약 25㎎ 내지 약 1g이 바람직하다. 액체 담체가 사용되는 경우라면, 제조물은 앰퓰(ampoule)이나 바이알(vial) 중의 시럽, 에멀전, 연 젤라틴 캡슐(soft gelatin capsule), 멸균 주입액(sterile injectable solution) 또는 현탁액, 또는 비수(nonaqueous) 액체 현탁액으로써 가능하다.
안정한 수용성의 투약 제형을 얻기 위하여, 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염을 숙신산 또는 바람직하게 시트르산의 0.3M 용액과 같은 유기 또는 무기산의 수용액에 용해시킨다. 만일 가용성 염의 형태가 불가능하다면, 일반식 (Ⅰ)의 화합물을 하나 이상의 적절한 공용매에 용해시킨다. 적절한 공용매의 예로는(한정되는 것은 아니나), 전체 부피의 0-60%의 농도범위로써 알콜, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜 300, 폴리솔베이트 80, 글리세린 등이 포함된다.
조성물은 물이나 등장식염수와 같은 적절한 수용성 부형제(aqueous vihicle) 또는 덱스트로스 용액에 활성 성분의 염 형태의 용액 형태가 될 수도 있다.
본 발명의 조성물에 사용된 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 실제 용량은 사용된 특정의 복합체, 제형화된 특정한 조성물, 투여 양식 및 특정 위치, 및 처방되는 숙주 및 징후에 따라서 결정된다. 주어진 징후들에 대한 가장 최선의 용량은 종래 공지된 기술에 따른 통상적인 투여량-결정 시험을 통해 결정할 수 있다.
경구 투여에 관한 예로써, 투여량은 일반적으로 적당 간격으로 반복투여 하는 방식으로 약 0.001 내지 1000㎎/체중㎏으로 한다.
<합성법>
후술하는 합성 프로토콜은 합성 구조도 또는 명세서 상의 기타 부분에서 확인되는 바람직한 중간체 화합물 및 최종 생성물을 인용하였다. 본 발명의 화합물의 제조에 관하여 후술한 일반예 또는 특정예를 통해 상세히 설명하였다. 경우에 따라, 반응이 본 발명의 공개범위 내에 포함된 각각의 화합물을 설명하는데 부합되지 않을 수도 있다; 이러한 화합물은 종래 기술을 이용함으로써 쉽게 인식될 수 있는 것들일 것이다. 상기한 모든 경우에 있어서, 반응은 간섭기의 적절한 보호, 다른 일반 시약으로의 변화, 또는 반응 조건의 통상적 변화 등 종래의 통상적 기술 수준(예, 여기에 인용된 것들을 포함하여 종래 기술을 참고로 하여) 이내의 변형을 통해 성공적으로 수행될 수 있다. 대안적으로, 여기에 공개된 기타의 반응 또는 여기서 공개되지 않은 통상적인 반응들이 본 발명의 화합물에 있어서의 제조에 적용 가능하다. 하기에 나타낸 제조방법에 있어서: 모든 출발물질은 공지되어 있고, 입수 가능하거나 또는 공지의 출발물질로부터 용이하게 제조가 가능하다; 모든 온도는 섭씨온도이며; 및 그밖에 특별히 지시된 사항이 없다면, 모든 부 및 비율은 중량에 의한 것이다.
시약은 알드리치 화학사(Aldrich Chemical Company) 또는 랑캐스터 합성사(Lancaster Synthesis Ltd.)와 같은 상업적 공급체로부터 구매하였으며, 특별한 지시가 없는 경우 더 이상의 정제 없이 사용하였다. 테트라히드로퓨란(THF) 및 N,N-디메틸포름아미드(DMF)는 알드리치사로부터 봉인된 병째로 구입하여 이를 받아 사용하였다. 모든 용매는 특별한 지시가 없는 한, 종래 기술로 알려진 표준법을 사용하여 정제하였다.
<생물적 평가>
일반적으로, 본 발명의 비-펩티드 길항제의 활성은 다양한 평가 및 기술을이용하여 측정할 수 있다. 본 발명의 GLP-1 길항제는 GLP-1과 이의 수용체의 결합을 저해하며, 및/또는 GLP-1에 결합함으로써 수용체의 작용을 저해한다. 그러므로, 결합 친화도 시험은 본 발명의 화합물의 길항제적 활성을 평가하는데 유용하다. 결합 친화도는 예를 들어, 수용체에 결합된 판독될 수 있는 라벨로 표지화된 리간드의 대체에 의해서 측정될 수 있다. 특정하게는, 종래 기술의 하나로써 본 발명의 화합물로 세포를 전처리하고 난 후, 방사능 표지된 GLP-1을 전처리된 세포에 항원투여함으로써 GLP-1 수용체에 대한 본 발명의 화합물의 특이적 결합 친화도를 계산하기 위한 시험관내 결합 시험을 수행할 수 있다.
부가적으로, 종래 기술의 일례로써 본 발명의 화합물로 처리한 세포에 있어서 측정된 세포내 cAMP 수준을 확인함으로써 GLP-1 수용체의 작용을 확인할 수 있음을 알 수 있다. 예로써, Montrose-Rafizadeh et al., 1997,J.Biol.Chem.272(34):21201-21206을 참조하라. 본 발명의 화합물을 처리한 후에, 세포에 GLP-1을 항원투여하고 세포내 cAMP 수준을 측정하였다. 길항제적 활성은 비-처리 대조군과 비교한 cAMP 수준의 감소에 의해 나타난다.
상기한 생물적 평가에 부가하여, 기타의 부가적 평가가 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 길항제적 활성을 측정하는데 적용될 수 있다. 예를 들면, GLP-1 활성 측정을 위한 공지된 평가로써, 섭취생물학적 평가(ingestion bioassay) 및 ANG Ⅱ-자극된 갈증 평가(ANG Ⅱ-stimulated thirst assay: Tang-Christensen et al., 1996,Amer.J.Physiol.271(4 Pt 2):R848-R856), 및 지방분해 평가(lipolysis assay: Montrose-Rafizadeh et al., 1997,J.Cell Phys.172(3):275-283)가 포함된다.
상술한 분석에 기초하여, 종래 기술의 일례로써 GLP-1에 의해 결합, 및/또는 GLP-1 수용체의 작용을 저해하는 본 발명의 화합물의 유효성을 측정할 수 있다. 더욱이, 상기 시험은 GLP-1 활성을 저해하는 본 발명의 화합물의 유효량을 측정하는데 유용하다.
<일반예(GENERAL EXAMPLE)>
방법 A: N-알킬화의 일반적인 공정
상기에 나타낸 화합물에 있어서, R1, R4및 R5는 상기한 바와 동일하다.
DMF 중의 염화알킬(1당량) 용액에 치환된 메틸 9H-카르볼린-3-카르복실레이트(1당량)의 DMF 용액을 첨가하고, 이 혼합액에 DMF 중의 수소화나트륨(유상의 60% NaH ~1당량) 현탁액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 일시적으로 흔들고, 약 한시간 동안 매 15분마다 일시적으로 흔들어 주는 처리를 하였다. DMF를 진공상에서 제거하였다.
방법 B: N-알킬화
상기 화합물들에 있어서, Z는 상기에 정의한 바와 같이 -CH2R1을 나타낸다.
메틸 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트 또는 유도체(5.0mmol)와 수소화나트륨(유상의 60% 0.20g, 5.0mmol)의 혼합물에 건조 DMF(11㎖)를 질소기류하에서 처리하였다. 15분간 교반한 다음, 기체를 완전히 증발시켜, 잔류 고체 물질의 자취를 지닌 β-카르볼린의 나트륨염(~0.40M)의 거의 맑은 상태의 옅은 갈색 용액을 얻었다. 상기 용액은 유사하게, DMF 중의 수소화나트륨 슬러리에 고체 β-카르볼린을 첨가하거나, 또는 DMF 중의 β-카르볼린 슬러리/용액에 수소화나트륨을 첨가하여 제조하였다. 반응이 대용량(40-80mmol)으로 수행되었을 경우에는 반드시 0℃로 냉각시켜야 한다.
나트륨염의 용액에 DMF 중의 염화알킬(1.0M 5㎖, 5.0mmol, 1당량) 용액을 첨가하여, 약간 방열하였다. 실온에서 2~24시간 동안 교반한 후, 진공에서 DMF를 제거하고, 잔유물을 물과 에틸아세테이트의 두 층으로 분리시켰다. 에틸아세테이트 층을 분리해 낸 다음, Na2SO4로 건조하고, 이를 여과하여 진공에서 응축시켜, 잔유물을 에틸아세테이트, 에틸아세테이트/에틸에테르, 또는 에틸아세테이트/석유에테르로부터 결정화하였다.
대안적으로, 생성물을 95:5의 디에틸에테르/8M NH3-CH3OH 또는 CHCl3중의 90:10의 트리클로로메탄(CHCl3)/2M NH3-CH3OH 전개 용출액을 사용한 실리카겔 크로마토그래피, 또는 역상 예비 HPLC(reverse-phase preparative HPLC)에 뒤이은 에틸에테르 또는 에틸 아세테이트/석유에테르로부터의 재결정에 의해 정제하였다.
방법 C: 카르복실산 이미다졸리드로부터의 에스테르화:
상기에 나타낸 화합물에 있어서, R5는 상기에서 정의한 바와 같다.
3-(1-이미다졸릴카르보닐)-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린을 거친 산의 에스테르화를 다음과 같은 방법에 의해 수행하였다(Staab, H.A.,ACIEE1962, 1:351 참고). DME(1,2-디메톡시에탄) 중의 알콜(0.40M 125㎕, 0.050mmol)에 DMF 중의 3-(1-이미다졸릴카르보닐)-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린(0.40M 125㎕, 0.050mmol, 1당량) 용액에 이어 DMF 중의 이미다졸릴 나트륨(0.1M의 25㎕, 0.0025mmol, 5mol%)을 첨가하였다. 후자는 이미다졸과 수소화나트륨으로부터 새로이 제조한 것이다. 결과 혼합물을 일시적으로 교반시키고, 18-24시간 동안 50℃로 가열하였다. 용매를 진공상에서 제거하고, 생성물을 예비 HPLC에 의해 잔유물로부터 분리하였다.
방법 D: 알콜의 에스테르화
상기에 나타낸 화합물에 있어서, R8은 위에서 정의한 바와 같다.
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올(상기)과 같은 알콜의 에스테르화를 다음과 같은 방법에 의해 수행하였다. DME 중의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올(0.5M 100㎕, 0.05mmol) 용액을 DCE(1,2-디클로로에탄) 중의 염산(0.5M 100㎕, 0.05mmol) 용액으로 처리하고, 그 혼합물을 일시적으로 교반시켰다. DME 중의 트리메틸아민(1.0M 100㎕, 0.1mmol, 2당량) 용액을 첨가하고, 그 혼합물을 다시 교반시켜, 이를 실온에서 밤새 방치하였다. 휘발성분을 진공상에서 제거하고, 생성물을 예비 HPLC에 의해 잔유물로부터 분리시켰다.
방법 E: 카르복실산의 에스테르화
9H-β-카르볼린-3-카르복실산(상기)과 같은 카르복실산은 본 발명에 따른 하기 방법으로 에스테르화하였다. 9H-β-카르볼린-3-카르복실산을 과량의 SOCl2와 함께 실온에서 밤새 교반시켰다. 과량의 SOCl2를 진공상에서 제거하고, 얻어진 조 염산을 CHCl3에 용해시켰다. 상기 용액에 Et3N(3당량)과 알콜(5당량)을 첨가하고, 얻어진 혼합물을 실온에서 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 수용액상 워크업을 시킨 후, 유기상으로부터의 잔유물을 실리카겔 크로마토그래피(CH2Cl2이용)를 거쳐 에스테르가 되게 하였다.
<특정예(SPECIFIC EXAMPLE)>
실시예 1
메틸 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
상기 화합물은 공지된 공정의 변형에 의해 제조하였다(Couts et al.,Heterocycles1984, 22:131 참고). L-트립토판 메틸 에스테르(161g, 0.738mol)의 자유 염기(free base)와 파라포름알데히드(22g, 0.733mol)의 혼합물에 톨루엔(1ℓ)을 첨가하였다. 그 혼합물을 효율적인 기계적 교반기로 환류시키고, 바레트 트랩(Barrett trap)을 이용하여 물을 제거하였다. 한 시간 후, 이론상의 양(13㎖) 만큼의 물을 포집하였다. 냉각기 상부를 통해 트리플루오로아세트산(5㎖, 0.065mol, 8.8mol%)을 첨가하고(발열), 이후 1.5시간 동안 상기 혼합물을 환류시켰다. 용매를 기화시킨 다음 10% 탄소상의 팔라듐(이전단계에서 얻은 수분 포함 물질 44g; 건조 중량=38g, 다음단계에서 제거되는 물의 양에 기초하여; -0.036mol Pd, 또는 4.8mol%)을 반응 용기에 첨가하였다. 크실렌(800㎖)를 첨가하고, 그 혼합물을 격렬하게 교반시킨 다음(기계적 교반기), Pd/C로부터 물을 제거하기 위해 바레트 트랩을 장치하여 밤새 환류시켰다. 그 후 반응 혼합물을 냉각조에서 냉각시키고, -20℃의 냉동고에 밤새 두었다. 얻어진 슬러지를 여과하고, 모액이 메틸 2-메틸-1,2,3,4-테트라히드로-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 구성하는 화합물을 포함하여 불순물을 함유하고, 그레이 필터 케이크가 생성물과 Pd/C 혼합물을 함유하도록 하였다. 필터 케이크를 종이 거름통으로 옮기고, 수개의 배치(batch)에서 메탄올(2-L 회수 플라스크에서 800㎖)로 속슬렛(Soxhlet) 장치로 추출하였다. 생성물이 반응용기에서 결정화되었을 때, 슬러리를 여과하고, 연노랑 고체를 메탄올로 씻어 이를 건조시키며, 여과액을 반응 용기로 회수하였다. 세 배치의 생성물 수득으로 총 76g을 얻게 되었다(트립토판 메틸 에스테르로부터 48%의 수율).
실시예 2
에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
무수 DMF(20㎖) 중의 에틸 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(2.40g, 10mmol)현탁액을 질소기류하의 냉각조에서 냉각시켰다. 수소화나트륨(석유상의 60% NaH 420mg, 10.5mmol)을 즉시 첨가하고, 그 혼합물을 대부분의 고체가 용해되고 수소의 기화가 멈출때까지 교반시켰다(약 10분). 식힌 혼합물을 서서히 교반시키면서 2,5-디클로로벤질클로라이드(2.15g, 1.0mmol)를 넣은 다음, 실온에서 두시간 이상 보온하였다. 얻어진 탁한 용액을 아세트산으로 중화한 후, 용매를 진공상에서 제거하여 황갈색 고체가 되게 하였다(3.94g). 조 생성물을 클로로포름과 에틸아세테이트를 사용한 실리카겔 상에서 크로마토그래피에 의해 분리하여 원하는 생성물을 얻었다(1.96g, 49%).1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.06(s,1H), 8.96(s,1H), 8.48(d, J=8.0,1H), 7.55-7.64(m,3H), 7.35-7.42(m,2H), 6.60(d,J=2.3,1H), 5.89(s,2H), 4.36(q,J=6.9,1H), 1.35(t,J=7.2,3H); C21H16Cl2N2O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 399, 399.0으로 확인.
실시예 3
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실산의 제조
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실산은 9-비치환된 화합물에 대한 설명으로부터 제조할 수 있다(Hagen et al.,Heterocycles1986, 24:2845 참고). 메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(15.0g, 0.0389mol), 수산화나트륨(2.0g, 0.05mol), 물(75㎖) 및 95% 에탄올(200㎖)의 혼합물을 한시간 동안 환류시켰다. 상기 혼합물을 진공상에서 응축시키고, 잔유물을 온수(500㎖)에 용해시킨 다음, 염산을 사용하여 격렬하게 흔들어 pH를 3으로 조절한 결과, 고체 침전을 형성하였다. 순수한 슬러리를 여과하고, 물을 사용하여 잘 씻은 다음, 진공상에서 밤새 70℃, 다음날에는 85℃의 온도로 건조시켜, 12.60g(87%)의 생성물을 얻었다. 이후, 뜨거운 아세트산으로 재결정함으로써, 생성물을 82%의 수율로 얻었다. 생성물은 다음과 같은 물성을 지닌다:1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.16(s,1H), 9.08(s,1H), 8.59(d,J=8.0,1H), 7.60-7.69(m,3H), 7.39-7.44(m,2H), 6.705(d,J=2.3,1H), 5.93(s,2H), 1.93(s,3H); C19H10Cl2N2O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 371, 371.0으로 확인.
실시예 4
3-(1-이미다졸카르보닐)-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린의 제조
건조 DMF(100㎖) 중의 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실산 (4.55g, 0.0123mol) 현탁액에 1,1-카르보닐디이미다졸(3.77g, 0.0233mol)을 첨가하여 불투명한 노란 용액 형태의 결과물을 생성하였다. 반응물을 질소기류하의 실온에서 5시간 동안 교반시켰다. 차가운 물(800㎖)을 첨가하고, 얻어진 침전물을 여과하여, 차가운 물로 씻어준 다음, 진공상에서 건조함으로써, 흰색 고체의 생성물 4.85g(94%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ9.13(s,1H), 9.12(s,1H), 8.87(s,1H), 8.33(d,J=7.9Hz,1H), 8.08(s,1H), 7.71(t,J=7.7,1H), 7.52-7.45(m,3H), 7.28-7.25(m,1H), 7.16(s,1H), 6.56(d,J=2.2Hz,1H), 5.74(s,2H). MS(APCI;(M+H)+)m/z421.
실시예 5
이소프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실산 아세테이트 염(1.30g, 3.02mmol)과 티오닐클로라이드(2.2㎖, 30mmol)의 혼합물을 2시간 동안 교반 및 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공상에서 응축시키고, 얻은 다크오일을 더이상의 정제 없이 사용하였다. 상기 오일을 15㎖(이론상, 0.2M)의 DMF에 용해시켰다. 상기 용액의 일정 부(2.5㎖, 0.5mmol)를 매우 과량의 이소프로판올과 트리에틸아민에 첨가하고, 얻은 혼합물을 60℃에서 밤새 교반시켰다. 실온에서 식힌 다음, 상기 혼합물을 메틸렌클로라이드와 섞어 흔들고, 그 혼합물을 물과 염수로 씻어주었다. 유기층을무수 황산나트륨으로 건조하고, 진공상에서 용매를 제거하였다. 실리카겔을 사용한 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 오일 상태의 생성물(144mg, 70%)을 얻었다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ8.80(s,1H), 8.75(s,1H), 8.13-8.16(m,1H), 7.50-7.56(m,1H), 7.20-7.33(m,3H), 7.08(dd,J=2.6,8.7,1H), 6.48(d,J=2.3,1H), 5.48(s,2H), 5.37(septet,J=6.4,1H), 1.43(d,J=6.4,6H).
실시예 6
9H-β-카르볼린-3-일메틸 아세테이트의 제조
무수아세트산(10㎖) 중의 9H-β-카르볼린-3-메탄올(99mg, 0.50mmol) 현탁액을 출발 물질이 모두 용해될때까지 실온에서 4시간 동안 교반시켰다. 진공상에서 무수아세트산을 제거하여 황갈색의 고체를 얻었다(122mg). 용출액으로써 에틸아세테이트를 사용한 실리카겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 표제 화합물 82mg (68%)을 얻었다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.49(s,1H), 8.99(s,1H), 8.13(d,J=8.0,1H), 8.07(s,1H), 7.56-7.61(m,2H), 7.26-7.34(m,1H), 5.43(s,2H), 2.15(s,3H). C14H12N2O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 241, 241.0으로 확인.
실시예 7
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 아세테이트의 제조
방법 A를 이용하여, 3-아세톡시메틸-9H-피리도[3,4-b]인돌로부터 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 아세테이트를 제조하였다. 클로로포름/에틸아세테이트 용출액을 사용한 실리카겔 상의 플래쉬 크로마토그래피를 통해 정제함으로써 89%의 수율로 생성물을 얻었다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ8.72(s,1H), 8.19(d,J=7.9,1H), 8.09(s,1H), 7.55-7.61(m,1H), 7.28-7.39(m,3H), 7.18(dd,J=2.3,8.7,1H), 6.51(d,J=2.3,1H), 5.54(s,2H), 5.42(s,2H), 2.19(s,3H).
실시예 8
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
건조 DMF(60㎖) 중의 수소화나트륨 현탁액(유상의 60% 분산액 1.60g, 0.04mmol)에 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(8.7g, 0.0385mol)를 교반시키면서 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소기류하에서 교반시키면서 실온으로 보온하였다. 실온에서 10분간 교반시킨 후, β-카르볼린의 나트륨염이 완전히 형성되면, 용액이 맑은 갈색이 된다. 반응 혼합물을 냉각조에서 식혀 2,5-디클로로벤질클로라이드 (7.82g, 0.040mol)를 첨가하고, 그 혼합물을 실온으로 보온하며 밤새 교반시켰다. 반응 혼합물을 물(200㎖)로 희석하고, 여과한 다음, 케이크를 물, 에틸아세테이트, 에테르로 씻고 건조하여, 표제 화합물 13.05g(88%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.88(s,1H), 8.78(s,1H), 8.20(d,J=7.8Hz,1H), 7.61(t,J=7.8Hz,1H), 7.45-7.35(m,3H), 7.18(dd,J=8.2,1.7Hz,1H), 6.52(s,1H), 5.56(s,2H), 4.06(s,3H): MS(APCI; (M+H)+)m/z385.
실시예 9
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올의 제조
메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(13.05g, 0.0339mol)와 수소화붕소나트륨(3.05g, 0.079mol)의 혼합물을 무수 에탄올(200㎖)상에서 15시간 동안 교반 및 환류시켰다. 에탄올을 기화시키고, 남은 잔유물을 10% 수용성 Na2CO3(100㎖)와 메틸렌클로라이드(100㎖)를 사용하여 층분리시켰다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 이를 기화시킨 다음, 남은 잔유물을 에테르로부터 결정화하여 아이보리 색 고체의 표제 화합물을 얻었다(11g, 91%).
대안적 합성방법으로, 메탄올(2㎖) 중의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일-메틸아세테이트(53.4mg, 0.13mmol) 용액에 수산화칼륨(54mg, 0.96mmol)을 넣고 교반시켜, TLC와 유량-주입 MS로 확인된 바와 같이, 즉시 가수분해시켰다. 생성물을 10:1 클로로포름/메탄올 용출액을 사용한 실리카겔 상의 플래쉬 크로마토그래피에 의해 분리시켜 순수한 생성물 35mg(75%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.58(s,1H), 8.10(d,J=9.0Hz,1H), 7.91(s,1H), 7.50(td,J=7.7Hz,1H), 7.23-7.32(6-다중선,2H), 7.10(dd,J=8.5Hz,2.4Hz,1H), 6.41(d,J=2.4Hz,1H), 5.48(s,2H), 4.87(s,2H), 3.62-3.77(br.s,1H); MS 모노동위원소 질량(계산치)355.9, MH+(실측치)357.0.
실시예 10
2-(디메틸아미노)에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(디메틸아미노)에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 D에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.96(s,1H), 8.82(s,1H), 8.26(d,J=8.2Hz,1H), 7.62(m,1H), 7.59-7.66(m,3H), 7.19(d,J=6.2Hz,1H), 6.52(s,1H), 5.61(d,J=8.4Hz,2H), 4.58(t,J=6.0Hz,2H), 2.81(t,J=6.1Hz,2H), 2.37(s,6H); MS(APCI; (M+H)+)m/z441.
실시예 11
2-메톡시에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-메톡시에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 D에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.95(s,1H), 8.85(s,1H), 8.27(d,J=7.8Hz,1H), 7.62(t,J=7.4Hz,1H), 7.41(m,3H), 7.21(t,J=2.4Hz,1H), 6.54(s,1H), 5.67(s,2H), 4.64(t,J=5.0Hz,2H), 3.83(t,J=3.7Hz,2H), 3.46(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z429.
실시예 12
2-히드록시에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-히드록시에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 D에 따라 제조하였다. 1H NMR(CDCl3) δ8.83(s,1H), 8.82(s,1H), 8.15(d,J=7.8Hz,1H), 7.62(t,J=7.2Hz,1H), 7.41(m,3H), 7.21(d,J=6.1Hz,1H), 6.49(s,1H), 5.54(s,2H), 4.61(t,J=4.7Hz,2H), 4.26(br s,1H), 4.08(t,J=3.5Hz,2H); MS(APCI;(M+H)+)m/z415.
실시예 13
9-(2,5-디클로로벤질)-3-(3-메틸-1,2,4-옥사디아졸-5-일)-9H-β-카르볼린의 제조
THF(3㎖) 중의 수소화나트륨(미네랄오일 상의 60중량% 40mg, 1.0mmol), 아세트아미독심(74mg, 1.0mmol) 및 분말화된 3Å 분자체(200mg)의 슬러리를 30분간 교반 및 환류시켰다. 플라스크에 정량적으로 전이되도록 하기 위해 추가 2㎖의 THF를 함께 사용한 메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(193mg, 0.50mmol)를 상기에 혼합시켰다. 이렇게 하여 얻어진 슬러리를, 반응이 TLC를 통해 종료될때까지(1.5시간 미만) 교반 및 환류시켰다. 프리티드 글래스펀넬 내의 실리카겔 10cc에, 용출액으로 THF를 사용하여 반응 혼합물을 통과시켜 거르고, 용매를 기화시켜, 193mg의 조 옥사디아졸을 얻었다. 생성물을 1:1 에틸아세테이트/석유에테르를 이용한 예비 TLC에 의해 정제하여, 79mg의 순수한 표제 화합물 79mg(39%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.96(s,1H), 8.92(s,1H), 8.28(d,J=7.5Hz,1H), 7.66(t,J=7.5Hz,1H), 7.47-7.41(m,3H), 7.23(dd,J=8.5,2.3Hz,1H), 6.57(d,J=2.3Hz,1H), 5.70(s,2H), 2.54(s,3H); MS(APCI;(M+H)+)m/z409.
실시예 14
부틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(195mg,0.5mmol )를 n-부탄올(15㎖)과 진한 황산과 함께 가열하였다; 반응이 TLC에 의해 완전히 종료된 후, 상기 혼합물을 45분에 걸쳐 서서히 결정화하였다. 반응 혼합물을 수용성 탄산나트륨과 에틸아세테이트를 이용하여 층분리시키고, 유기층을 황산나트륨으로 건조한 후, 여과, 기화하고, 남은 잔유물을 에틸아세테이트/석유에테르로부터 재결정하였다. 이로써 318mg의 흰색 고체가 분리되었으며, 이의 NMR 결과는 황산부틸나트륨과 일치하였다. 여과액을 1:1 에틸아세테이트/석유에테르를 이용하여 실리카겔에 통과시켜 여과하였으며, 상기 여과액은 에틸아세테이트와 석유에테르의 최소량으로 재결정하여 아이보리색의 고체 생성물을 얻었다(119mg, 56%).1H NMR(CDCl3) δ8.93(s,1H), 8.85(s,1H), 8.28(d,J=8.3Hz,1H), 7.64(ddd,J=8.3,7.2,1.1Hz,1H), 7.45-7.39(m,3H), 7.21(dd,J=8.5,2.4Hz,1H), 6.54(d,J=2.3Hz,1H), 4.49(t,J=7Hz,2H), 1.87(m,2H), 1.51(m,2H), 1.01(t,J=7Hz,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z427.
실시예 15
프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
부틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 합성에 나타낸 것과 마찬가지로, 메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(195mg,0.5mmol)를 n-프로판올(15㎖)과 진한 황산(1.5㎖)과 함께 환류시켜, 아이보리색의 고체를 얻었다(152mg, 74%).1H NMR(CDCl3) δ8.94(s,1H), 8.85(s,1H), 8.28(d,J=8.3Hz,1H), 7.64(t,J=7.5Hz,1H), 7.45-7.40(m,3H), 7.22(dd,J=8.5,2.3Hz,1H), 6.55(s,1H), 5.66(s,2H), 4.45(t,J=7Hz,2H), 1.93(m,2H), 1.07(t,J=7Hz,3H); MS(APCI;(M+H)+)m/z413.
실시예 16
에틸 9-[(5,6-디클로로-3-피리딜)메틸]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 A에 따라, 에틸 9-[(5,6-디클로로-3-피리딜)메틸]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트는 제조하여, 예비 얇은막 크로마토그래피(TLC)로 정제하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ8.91(s,2H), 8.23-8.26(m,2H), 7.59-7.68(m,1H), 7.39-7.45(m,3H), 5.62(s,2H), 4.53(q,J=7.2Hz,2H), 1.49(t,J=7.2,3H); C20H15Cl2N3O2(M+Cl-)에 대해 계산된 LRMS 434, 433.9로 확인.
실시예 17
에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 A에 따라, 에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 제조하여, 예비 얇은막 크로마토그래피로 정제하였다(수율:66%).1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ8.95(s,2H), 8.90(s,1H), 8.31(s,3H), 7.65-7.67(m,1H), 7.41-7.49(m,2H), 5.86(s,2H), 4.54(q,J=7.1,2H), 1.50(t,J=7.1,3H); C21H16N4O6(M-H)에 대해 계산된 LRMS 419, 419.0으로 확인.
실시예 18
에틸 9-(3-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 A에 따라, 에틸 9-(3-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를제조하여, 예비 얇은막 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 39%).1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ8.90(s,1H), 8.88(s,1H), 8.24(d,J=7.9,1H), 8.08-8.13(m,2H), 7.61-7.66(m,1H), 7.35-7.46(m,4H), 5.72(s,2H), 4.52(q,J=7.1,2H), 1.49(t,J=7.1,3H); C21H17N3O4(M-H)에 대해 계산된 LRMS 374, 374.0으로 확인.
실시예 19
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 시클로프로판카르복실레이트의 제조
메틸렌 클로라이드(5㎖) 중의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올(357mg,1.0mmol) 및 시클로프로필 카르보닐 클로라이드(133mg,1.27mmol) 용액을 10분간 방치하였다. 용매를 기화시키고, 남은 잔유물을 수용성 Na2CO3와 메틸렌 클로라이드를 이용하여 층분리시켰다. 추출된 물질을 Na2SO4로 건조한 후, 여과 및 기화하여 수지를 얻었다. 이를 에테르에 용해시키고, 에테르성 염산으로 처리한 실리카겔의 충전물에 통과시켜 여과한 후, 기화시키고, 잔유물을 에탄올/에틸아세테이트/에테르로 재결정하여 노란색 고체의 표제 화합물 270mg(58%)을 얻었다.1HNMR(CDCl3) δ8.85(s,1H), 8.44(s,1H), 8.25(d,J=7.9Hz,1H), 7.58(t,J=7.5Hz,1H), 7.35-7.28(m,3H), 7.10(dd,J=8,2.3Hz,1H), 6.37(d,J=2.3Hz,1H), 5.62(s,2H), 5.46(s,2H), 1.74(m,2H), 1.56(m,1H), 0.84-0.71(m,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z425.
실시예 20
이소프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
DMF 중의 이소프로필 4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트 (100mg,0.33mmol), NaH(0.36mmol, 미네랄오일상의 60중량% 현탁액 15mg) 및 2,5-디클로로벤질 클로라이드(80mg, 0.41mmol)의 혼합물을 방법 A에 따라 처리하였다. 용출액으로써 헥산/에테르(1:1)를 이용한 실리카상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 조 생성물을 정제하여, 엷은 노란색의 고체로써 원하는 생성물(90mg, 60% 수율)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.64(s,1H), 8.25(d,J=7.5Hz,1H), 7.49(t,J=7.7Hz,1H), 7.18-7.31(m,2H), 7.05-7.11(m,2H), 6.38(s,1H), 5.52(s,2H), 5.23(s,2H), 5.20-5.23(m,1H), 3.40(s,3H), 1.33(d,J=6.3Hz,6H); MS(APCI; (M+H)+)m/z457.
실시예 21
에틸 6-아미노-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
DMF(2㎖) 중의 에틸 6-아미노-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(100mg, 0.39mmol), NaH(0.58mmol, 미네랄오일상의 60중량% 현탁액 24mg) 및 2,5-디클로로벤질 클로라이드(115mg, 0.59mmol)의 혼합물을 방법 A에 따라 처리하였다. 용출액으로써 헥산/에틸아세테이트(7:3)를 이용한 실리카상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 조 생성물을 정제하여, 노란색의 고체로써 원하는 생성물(87mg, 54% 수율)을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ8.96(s,1H), 8.74(s,1H), 7.60(d,J=8.6Hz,1H), 7.48(d,1H), 7.41(dd,J=8.4Hz,2.1Hz,1H), 7.35(d,J=8.8Hz,1H), 7.01(d,J=8.6Hz,1H), 6.51(d,J=1.8Hz,1H), 5.80(s,2H), 5.10(br s,1H), 4.37(q,J=7.0Hz,2H), 1.37(t,J=7.0Hz,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z414.
실시예 22
6-(2,5-디클로로벤질)-1-메틸-1,6-디히드로-3H-퓨로[3',4':5,6]피리도[3,4-b]인돌-3-온의 제조
방법 A에 따라, DMF(1㎖) 중의 1-메틸-1,6-디히드로-3H-퓨로[3',4':5,6]피리도[3,4-b]인돌-3-온(9mg,0.038mmol), NaH(0.046mmol, 미네랄오일상의 60중량% 현탁액 2mg) 및 2,5-디클로로벤질 클로라이드(9mg, 0.046mmol)로부터 6-(2,5-디클로로벤질)-1-메틸-1,6-디히드로-3H-퓨로[3',4':5,6]피리도[3,4-b]인돌-3-온을 제조하였다. 용출액으로써 헥산/에테르(2:1)를 이용한 예비 얇은막 크로마토그래피에 의해 조 생성물을 정제하여, 노란색의 고체로써 원하는 생성물(5mg, 33% 수율)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.93(s,1H), 8.09(d,J=8.0Hz,1H), 7.65(t,J=7.8Hz,1H), 7.37-7.46(m,3H), 7.16(d,J=2.2Hz,1H), 6.42(d,J=2.2Hz,1H), 6.05(q,J=6.6Hz,1H), 5.70(s,2H), 1.92(d,J=6.6Hz,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z397.
실시예 23
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.93(m,2H), 8.86(s,1H), 8.28(m,3H), 7.68(t,1H), 7.47-7.34(m,2H), 5.80(s,2H), 4.53(t,2H), 3.69(m,4H), 2.81(t,2H), 2.53(m,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z506.
실시예 24
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 D에 따라 제조하였다. 이어, 크로마토그래피 정제를 실시하고, 자유 염기를 에테르성 염산으로 처리하며, 에탄올/에테르로부터 재결정을 통해 디히드로클로라이드 염 형태의 생성물을 11%의 수율로 분리하였다.1H NMR(DMSO-d6) δ11.7(br s,1H), 9.63(s,1H), 9.42(s,1H), 8.75(d,J=7.9Hz,1H), 7.81-7.70(m,2H), 7.63(d,J=8.5Hz,1H), 7.53(t,J=7.4Hz,1H), 7.44(dd,J=8.5,2.4Hz,1H), 6.68(d,J=2.4Hz,1H), 6.05(s,2H), 4.75(br s,2H,물 피크와 겹침), 4.00(br s,4H), 3.60(br s,4H), 3.22(br s,2H); MS(APCI;(M+H)+)m/z484.
실시예 25
에틸 9-(2-메톡시-5-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
에틸 9-(2-메톡시-5-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다. 생성물을 HPLC를 통해 정제하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.94(s,1H), 8.91(s,1H), 8.23-8.13(m,2H), 7.66(s,1H), 7.63(m,1H), 7.44(d,J=7.5Hz,1H), 7.32(t,J=7.5Hz,1H), 6.96(d,J=8.5Hz,1H), 5.60(s,2H), 4.52(q,J=6.7Hz,2H), 3.93(s,3H), 1.51(t,J=6.7Hz,3H); MS(APCI;(M+H)+)m/z406.
실시예 26
[9-(2,5-디클로로벤질-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 2-클로로니코티네이트의 제조
[9-(2,5-디클로로벤질-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 2-클로로니코티네이트를 방법 C에 따라 제조하였으며, 예비 TLC에 의해 정제하였다. 생성물은 자유염기의 형태로 분리되었다.1H NMR(CDCl3) δ8.77(s,2H), 8.51(dd,J=4.6,2.0Hz,1H), 8.29-8.21(m,s,겹침,3H), 7.60(t,J=7.8Hz,1H), 7.42-7.29(m,겹침,3H), 7.21(dd,J=8.5,2.3Hz,1H), 6.50(s,1H), 5.63(s,2H), 5.59(s,2H); MS(APCI;(M+H)+)m/z496.
실시예 27
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 니코티네이트의 제조
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸 니코티네이트를 방법 C에 따라 제조하였으며, 예비 TLC에 의해 정제하였다. 생성물은 에테르성 염산으로 자유염기를 처리한 염산염의 형태로 분리하고, 이어 에탄올/에테르로 재결정하였다(최종 수율:43%).1H NMR(DMSO-d6) δ9.61(s,1H), 9.40(s,1H), 9.18(s,1H), 9.02(d,1H), 8.75(m,2H), 7.8-7.39(m,6H), 6.70(s,1H), 6.03(s,2H), 5.89(s,2H), (주: 가정컨대 구별화되지 않고 광범위하게 나타남으로 인하여, 용매에서 물을 함유한 산성 수소가 관측되지 않음); MS(APCI;(M+H)+)m/z462.
실시예 28
이소프로필 9-(3,5-디니트로벤질)-4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 A에 따라, 이소프로필 4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트로부터 이소프로필 9-(3,5-디니트로벤질)-4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 44%의 수율로 제조하였다. 자유염기를 에테르성 염산으로 처리하여, 생성물을 염산염의 형태로 분리하였다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.38(s,1H), 8.72(t,J=2Hz,1H), 8.48(d,J=2Hz,2H), 8.37(d,J=7.5Hz,1H), 7.3(br s,1H), 6.24(s,2H), 5.31-5.23(s,m,겹침,3H), 3.41(s,3H), 1.41(d,J=6.3Hz,6H);MS(APCI;(M+H)+)m/z479.
실시예 29
2-(4-모폴리닐)에틸 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
β-카르볼린-3-카르복실산, 메틸에스테르(5.3g, 23.4mol), 4-(2-히드록시에틸)모폴린(4.62g, 35mmol), 4-디메틸아미노피리딘(1.2g, 9.8mmol), 4Å 분자체(5g) 및 크실렌(250㎖)의 현탁액을 48시간 동안 가열 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고, 진공상에서 응축한 다음, 얻어진 슬러리를 CH2Cl2(250㎖)로 층분리시켰다. 상기 혼합물을 진공항에서 여과하고, 잔유물을 CH2Cl2(2×25㎖)로 씻어주었다. 결합한 유기층을 수회 물로 씻어주고, Na2SO4로 건조하여 응축시켰다. 이렇게 하여 얻어진 조 생성물을 용출액으로 CH2Cl2중의 8% 2M NH3-CH3OH를 사용하여 실리카상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제함으로써, 엷은 노란색 고체의 원하는 화합물(4.8g, 64%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ9.09(s,1H), 8.88(s,1H), 8.21(d,J=7.9Hz,1H), 7.63(d,J=8.1Hz,1H), 7.63(d,J=8.1Hz,1H), 7.62(t,J=7.4Hz,1H), 7.38(t,J=7.4Hz,2H), 4.63(t,J=6.1Hz,2H), 3.73(t,J=4.6Hz,4H), 2.87(t,J=6.1Hz,2H), 2.59(t,J=4.6Hz,4H); MS(APCI;(M+H)+)m/z326.
실시예 30
9-(3,5-디니트로벤질)-3-[3-(메톡시메틸)1,2,4-옥사디아졸-5-일]-9H-β-카르볼린의 제조
에스테르로부터 옥사디아졸의 합성에 관한 문헌상의 공정을 변형시켜, 9-(3,5-디니트로벤질)-3-[3-(메톡시메틸)1,2,4-옥사디아졸-5-일]-9H-β-카르볼린을 제조하였다(Swain et al.,J.Med.Chem.1991,34:140 참고).
무수 에탄올(160㎖) 중의 히드록실아민 히드로클로라이드(2.02g, 29.2mmol), 탄산칼륨(5.48g, 39.6mmol) 및 2-메톡시아세토니트릴(1.42g, 20mmol)의 현탁액을 15시간 동안 가열 환류시켰다. 반응 혼합물을 식히고, 여과한 다음, 진공상에서 응축시켰다. 잔유물을 점진적 용출액으로써 CH2Cl2중의 10-30% 2M NH3-CH3OH를 사용하여, 실리카겔 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제함으로써, 흰색 고체의 2-메톡시아세트아미독심(1.35g, 65%)을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.25(br.s,1H), 5.40(br.s,1H), 3.76(s,2H), 3.25(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z105.
DMF(25㎖) 중의 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(2.26g, 10mmol), 수소화나트륨(11mmol, 60% 미네랄오일 분산액 상의 440mg) 및 3,5-디히드로벤질클로라이드 (2.17g, 10mmol)의 현탁액을 방법 B에 나타낸 바와 같이 처리하였다. 조 생성물을 에틸아세테이트/헥산으로 재결정하여, 노란색 고체의 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(2.85g, 70%)를 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.95(s,2H), 8.94(s,1H), 8.37(s,2H), 8.30(d,J=7.7Hz,1H), 7.67(t,J=7.4Hz,1H), 7.39-7.50(5-다중선,2H), 5.94(s,2H), 4.06(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z406.
무수 테트라히드로퓨란(15㎖) 중의 2-메톡시아세트아미독심(260mg, 2.5mmol) 및 4Å 분자체(1g)의 현탁액을 실온에서 0.5시간 동안 교반시킨 다음, 수소화 나트륨(2.75mmol, 60% 미네랄오일 현탁액 상의 110mg)을 처리하였다. 그 혼합물을 1시간 동안 가열 환류시켰다. 실온에서 냉각한 다음, 무수 테트라히드로퓨란(10㎖) 중의 메틸 9-(3,5-디니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 현탁액(205mg, 0.5mmol)을 첨가하였다. 이렇게 하여 얻은 혼합물을 15시간 동안 가열 환류시킨 다음, 식히고, 여과하여, 여과액을 진공상에서 응축시켰다. 잔유물을 용출액으로써 CH2Cl2중의 4% 2M NH3-CH3OH를 사용한 예비 얇은막 크로마토그래피에 의해 정제함으로써, 흰색 고체의 원하는 생성물(86mg, 38% 수율)을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.41(s,1H), 9.24(s,1H), 8.72(t,J=1.9Hz,1H), 8.59(d,J=7.8Hz,1H), 8.49(d,J=1.9Hz,2H), 7.94(d,J=8.3Hz,1H), 7.73(t,J=7.8Hz,1H),7.45(t,J=7.5Hz,1H), 6.20(s,2H), 4.67(s,2H), 3.42(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z461.
실시예 31
에틸 9-(2-시아노벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
에틸 9-(2-시아노벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다. 화합물은 아세토니트릴/물/트리플루오로아세트산 용출액을 사용한 RP-HPLC를 통해 정제함으로써, 트리플루오로아세트산 염의 형태로 분리하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.23(s,1H), 9.11(s,1H), 8.57(d,J=7.9,1H), 7.95-7.98(m,1H), 7.67-7.71(m,2H), 6.40-6.53(m,3H), 6.72-6.78(m,1H), 6.13(s,2H), 4.42(q,J=7.2,2H), 1.39(t,J=7.2,3H); C22H17N3O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 356, 356.1로 확인.
실시예 32
에틸 9-(4-메틸-3-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
에틸 9-(4-메틸-3-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트에틸 9-(4-메틸-3-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다. 생성물은 아세토니트릴/물/트리플루오로아세트산 용출액을 사용한 RP-HPLC를 통해 정제함으로써, 트리플루오로아세트산 염의 형태로 분리하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.21(s,1H), 8.93(s,1H), 8.45(d,J=8.0,1H), 7.88(s,1H), 7.78-7.83(m,1H), 7.58-7.68(m,1H), 7.30-7.45(m,3H), 5.89(s,2H), 4.31(q,J=7.2,2H), 2.35(s,3H), 1.30(t,J=7.2,3H); C22H19N3O4(M+H)에 대해 계산된 LRMS 390, 390.1로 확인.
실시예 33
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-메톡시-5-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-메톡시-5-니트로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.95(s,1H), 8.94(s,1H), 8.28(d,J=7.9Hz,1H), 8.23(dd,J=9.1Hz,2.8Hz,2H), 7.73(d,J=2.6Hz,1H), 7.66(t,J=7.7Hz,1H), 7.51(d,J=8.2Hz,1H), 7.43(t,J=7.5Hz,1H), 7.03(d,J=9.1Hz,1H), 5.66(s,2H), 4.63(t,J=6.1Hz,2H), 4.02(s,3H), 3.76(t,J=4.6Hz,4H), 2.89(t,J=6.0Hz,2H), 2.63(t,J=4.4Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z491.
실시예 34
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,4-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,4-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.95(s,1H), 8.86(s,1H), 8.23(d,J=8.1Hz,1H), 7.65(dd,J=8.0Hz,7.5Hz,2H), 7.56(d,J=1.8Hz,1H), 7.44(dd,J=8.3Hz,4.8Hz,2H), 7.02(dd,J=8.3Hz,1.2Hz,1H), 6.48(d,J=8.3Hz,1H), 5.70(s,2H), 4.62(t,J=6.0Hz,2H), 3.76(t,J=4.5Hz,4H), 2.88(t,J=6.0Hz,2H),2.63(t,J=4.4Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z484.
실시예 35
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,4-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,4-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.93(s,1H), 8.90(s,1H), 8.27(d,J=5.8Hz,1H), 7.66(t,J=7.7Hz,1H), 7.35-7.48(7-다중선,3H), 7.27(s,1H), 6.96(d,J=8.3Hz,1H), 5.60(s,2H), 4.62(t,J=6.2Hz,2H), 3.76(t,J=4.4Hz,4H), 2.88(t,J=6.1Hz,2H), 2.63(t,J=4.0Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z484.
실시예 36
2-(4-모폴리닐)에틸 9-[3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-[3-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.96(s,1H), 8.89(s,1H), 8.30(d,J=8.1Hz,1H), 7.68(t,J=7.7Hz,1H), 7.43-7.48(다중선,2H), 7.34(s,1H), 7.28(s,1H), 6.88(d,J=8.7Hz,1H), 5.70(s,2H), 4.63(t,J=6.1Hz,2H), 3.76(t,J=4.5Hz,4H), 2.89(t,J=6.1Hz,2H), 2.63(t,J=4.0Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z502.
실시예 37
2-(4-모폴리닐)에틸 9-[4-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-[4-플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.95(s,1H), 8.90(s,1H), 8.29(d,J=7.8Hz,1H), 7.68(t,J=7.7Hz,1H), 7.42-7.53(7-다중선,3H), 7.20-7.25(다중선,1H), 7.12(t,J=9.2Hz,1H), 5.67(s,2H), 4.62(t,J=6.0Hz,2H), 3.76(t,J=4.0Hz,4H), 2.89(t,J=6.1Hz,2H), 2.60(t,J=4.0Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z502.
실시예 38
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,3,4-트리플루오로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2,3,4-트리플루오로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.97(s,1H), 8.93(s,1H), 8.26(d,J=7.8Hz,1H), 7.68(td,J=7.2Hz,1.0Hz,1H), 7.53(d,J=8.3Hz,1H), 7.44(t,J=7.4Hz,1H), 6.78-6.87(10-다중선,1H), 6.57-6.65(다중선,1H), 5.68(s,2H), 4.62(t,J=6.1Hz,2H), 3.76(t,J=4.5Hz,4H), 2.89(t,J=6.1Hz,2H), 2.63(t,J=4.5Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z470.
실시예 39
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-브로모-5-플루오로메틸벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-브로모-5-플루오로메틸벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 A에 따라 제조하였다.1H NMR(CDCl3) δ8.94(s,1H), 8.83(s,1H), 8.28(d,J=7.8Hz,1H), 7.61-7.68(5-다중선,2H), 7.40-7.46(5-다중선,2H), 6.90(td,J=8.2Hz,2.9Hz,1H), 6.16(dd,J=9.0Hz,2.9Hz,1H), 5.64(s,2H), 4.62(t,J=6.1Hz,2H), 3.76(t,J=4.5Hz,4H), 2.88(t,J=6.1Hz,2H), 2.62(t,J=4.5Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z514.
실시예 40
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-시아노벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 A에 따라, 2-(4-모폴리닐)에틸 9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트로부터 2-(4-모폴리닐)에틸 9-(2-시아노벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 제조하였다. 자유염기를 에테르성 염산으로 처리하고, 아세톤/에테르로 결정화함으로써 생성물을 수율 25%의 디히드로클로라이드 염 형태로 분리하였다.1H NMR(DMSO-d6) δ11.8(br s,1H), 9.61(s,1H), 9.40(s,1H), 8.71(d,J=8Hz,1H), 7.93(d,J=8Hz,1H), 7.72(s,2H), 7.54-7.47(m,3H), 6.78(d,J=7.3Hz,1H), 6.22(s,2H), 4.79(br s,2H,물피크와 겹침), 4.00(br s,4H), 3.66(br s,4H), 3.27(br s,2H); MS(APCI; (M+H)+)m/z441.
실시예 41
2-(4-모폴리닐)에틸-9-[2,4-비스-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
알킬화 방법 A를 이용하여, 2-(4-모폴리노)에틸-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트로부터 2-(4-모폴리닐)에틸-9-[2,4-비스-(트리플루오로메틸)벤질]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 0.2mmol 용량으로 제조하였다(수율:45%).1H NMR(CDCl3)δ8.97(s,1H), 8.83(s,1H), 8.31(d,J=8Hz,1H), 8.07(s,1H), 7.66(t,J=7.5Hz,1H), 7.54(d,J=7.9Hz,1H), 7.47(t,J=7.5Hz,1H), 7.38(d,J=8Hz,1H), 6.79(d,J=7.9Hz,1H), 5.9(s,2H), 4.63(t,J=6Hz,2H), 3.75(m,4H), 2.88(t,J=6Hz,2H), 2.62(m,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z552.
실시예 42
6-(2,5-디클로로벤질)-1-히드록시-2-[2-(4-모폴리닐)에틸]-1,6-디히드로피롤로[3',4',5,6]피리도[3,4-b]인돌-3(2H)-온의 제조
6-(2,5-디클로로벤질)-1-히드록시-2-[2-(4-모폴리닐)에틸]-1,6-디히드로피롤로[3',4',5,6]피리도[3,4-b]인돌-3(2H)-온은 공지된 공정을 약간 변형시켜 제조하였다(Dodd et al.,J.Org.Chem.1993, 58:7587 참고): 무수 THF(12㎖) 중의 9-(2,5-디클로로벤질)-N-[2-(4-모폴리닐)에틸]-9H-β-카르볼린-3-카르복사미드(400mg,0.83mmol) 용액을 교반시킨 다음, 질소기류하에서 -78℃로 냉각시켰다. 내부 온도가 -78℃에 도달하면, 디에틸에테르/큐멘 용액 중의 1.0M 메틸리튬(4.2㎖, 4.2mmol)을 실린지로 0.3시간에 걸쳐 첨가하였다. 메틸리튬의 첨가가 완전히 종료되면, 반응 혼합물은 매우 어두운 청색을 띄게 된다. 그 용액을 -78℃에서 2시간동안 교반시키고, 드라이아이스-아세톤 조에 이어 냉각수 조에 두었다. 0.5시간 후, 무수 DMF(3070mg, 4.2mmol)를 방울방울 떨어뜨려 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 0℃로 식히고, 반응 혼합물의 내부 온도가 0-5℃로 유지되게 하면서 증류수를 서서히 첨가하였다. 용액을 감압하에서 약 10㎖로 응축시키고, 과량의 CH2Cl2를 첨가하여, 그 혼합물을 물로 씻어주었다. 유기층을 건조하고(Na2SO4), 진공상에서 용매를 제거하였다. 이렇게 하여 얻은 조 잔유물을 에테르로 수회 씻어주었다. 조 생성물을 용출액으로써 CH2Cl2중의 4% 2M NH3-CH3OH를 사용하여, 실리카 상의 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제함으로써, 엷은 노란색 고체의 락탐(106mg, 25%)을 얻었다. 미반응된 출발물질의 241mg(60%) 부분은 에테르 층과의 결합에 의한 기화 및 크로마토그래피 분율로 재현되었다.1H NMR(CDCl3) δ8.76(s,1H), 8.48(d,J=7.6Hz,1H), 7.66(td,J=8.2Hz,0.91Hz,1H), 7.46(t,J=7.4Hz,1H), 7.35-7.40(4-다중선,2H), 7.18(dd,J=8.5Hz,2.4Hz,1H), 6.42(d,J=2.3Hz,1H), 6.17(s,1H), 5.56(s,2H), 4.46(dt,J=9.6,2.7Hz,1H), 3.83(t,J=4.3Hz,4H), 3.47(td,J=9.8,1.5Hz,1H), 2.78-2.86(m,3H), 2.51-2.64(m,3H), 1.50-2.30(v.br.s,1H); MS(APCI; (M+H)+)m/z511.
실시예 43
3-(3-피리딜)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
3-(1-이미다졸릴카르보닐)-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린(505mg,1.20mmol) 및 3-피리딘프로판올(8.2g, 60mmol)의 현탁액을 톨루엔(15㎖) 상에서 80℃로 22시간 동안 가열하였다. 이렇게 하여 얻은 용액을 실온으로 식히고, 유기층을 Na2SO4로 건조하기에 앞서, 물로 수회 추출하였다. 용매를 기화시키고, 이어 생성된 조 생성물을, 용출액으로써 헥산/에틸아세테이트를 사용한 예비 얇은 막 크로마토그래피를 통해 분리하여, 엷은 노란색 고체의 원하는 생성물(470mg, 80% 수율)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.91(s,1H), 8.88(s,1H), 8.56(s,1H), 8.48(s,1H), 8.31(d,J=8.0Hz,1H), 7.67(AB q,J=7.4Hz,1H), 7.60(d,J=7.8Hz,1H), 7.42-7.48(m,3H), 7.22-7.28(m,2H), 6.60(s,1H), 5.70(s,2H), 4.53(t,J=6.5Hz,3H), 2.87(t,J=7.7Hz,3H), 2.26(t,J=7.3Hz,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z490.
실시예 44
테트라히드로-3-퓨라닐메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
테트라히드로-3-퓨라닐메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 방법 B에 따라 제조하였다. 화합물을 용출액으로써 아세토니트릴/물/트리플루오로아세트산을 사용한 RP-HLPC에 의해 정제하여, 트리플루오로산염의 형태로 생성물을 분리하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.12(s,1H), 9.02(s,1H), 8.54(d,J=4.72Hz,1H), 7.65-7.68(m,2H), 7.61(d,J=5.28Hz,1H), 7.39-7.45(m,2H), 6.65(d,J=1.6Hz,1H), 5.94(s,1H), 4.35(dd,J=4.05,6.48Hz,1H), 4.27(dd,J=4.75Hz,6.48,1H), 3.77-3.85(m,2H), 3.65-3.71(m,2H), 3.57-3.62(m,1H), 2.69-2.74(m,1H), 2.03-2.09(m,1H), 1.68-1.75(m,1H); C24H20Cl2N2O3(M+H)에 대해 계산된 LRMS 455, 455.1로 확인.
실시예 45
9-(2,5-디클로로벤질)-N-[2-(4-모폴리닐)에틸]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
9-(2,5-디클로로벤질)-N-[2-(4-모폴리닐)에틸]-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 공지된 공정의 변형에 의해 제조하였다(Dodd et al.,J.Org.Chem.1993, 58:7587 참고). -10℃로 냉각한 무수 CH2Cl2(12.5㎖) 중의 트리메틸알루미늄(헥산 상의 2M용액 2㎖, 4mmol)의 용액에 무수 CH2Cl2(2.5㎖) 중의 4-(2-아미노에틸)모르폴린 (261mg, 2mmol)을 방울방울 떨어뜨려 첨가하였다. 반응 혼합물을 -10℃에서 0.5시간 동안 교반시킨 후, 실온에서 0.5시간 동안 보온하였다. 반응 혼합물에 무수 CH2Cl2(5㎖) 중의 메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트 (800mg, 2mmol) 용액을 첨가하고, 그 후 15시간 동안 가열 환류시켰다. 용액을 실온에서 식히고, 1.8M 수용성 염산(5㎖)으로 서서히 반응을 종결시킨 후, 수용성 중탄산나트륨을 이용하여 pH 9.0-9.5로 염기성화함으로써, 흰색의 고체를 얻었다. 상기 현탁액을 실라이트의 패드를 통해 여과하고, 잔유물을 CH2Cl2(2×5㎖)로 씻어주었다. 건조(Na2SO4)시킨 여과액의 기화를 통해 노란색 고체를 얻었고, 에틸 아세테이트로부터의 재결정을 통해 원하는 카르복사미드를 80%(774mg)의 분리 수율로 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ9.00(s,1H), 8.68(s,1H), 8.43(t,J=3.9Hz,1H), 8.30(dd,J=7.5,1.1Hz,1H), 7.64(dt,J=7.7,1.1Hz,1H), 7.42(t,J=7.9Hz,2H), 7.23(dd,J=8.5,2.4Hz,1H), 6.54(s,1H), 5.67(s,2H), 3.77(t,J=4.6Hz,4H), 3.68(q,J=5.8,3.9Hz,2H), 2.67(t,J=6.2Hz,2H), 2.56(t,J=5.1Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z483.
실시예 46
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르보히드라진의 제조
메틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(4.8g, 12.5mmol), 히드라진(6㎖) 및 메탄올(50㎖)의 혼합물을 5시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 식히고, 침전을 여과에 의해 포집하였다. 이로써 얻은 고체에 메탄올(50㎖)을 처리하고, 그 슬러리를 10분간 교반시킨 다음, 여과 및 건조를 통해 4.6g(98%)의 표제 화합물을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.5(s,1H), 8.8(s,1H), 8.7(s,1H), 8.25(d,1H), 7.6-7.4(m,3H), 7.2-7.1(m,2H), 6.5(s,1H), 5.7(s,2H), 4.3(s,2H); MS(APCI; (M+H)+)m/z385.
실시예 47
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르발데히드 O-메틸옥심의 제조
DMF(1.5㎖) 중의 9H-β-카르볼린-3-카르발데히드 O-메틸옥심(46mg, 0.20mmol), NaH(0.22mmol, 미네랄 오일상의 60중량% 현탁액 9mg) 및 2,5-디클로로벤질 클로라이드(43mg, 0.22mmol)의 혼합물을 방법 A에 따라 처리하였다. 조 생성물을 용출액으로써 헥산/에틸아세테이트(7:3)를 사용한 예비 얇은막 크로마토그래피에 의해 정제하여, 흰색 고체의 원하는 생성물(37mg, 48% 수율)을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.00(s,1H), 8.64(s,1H), 8.45(d,J=7.8Hz,1H), 8.32(s,1H), 7.64-7.59(m,2H), 7.61(d,J=8.6Hz,1H), 7.41(dd,J=8.6,1.5Hz,1H), 7.36(m,1H), 6.60(d,J=2.5Hz,1H), 5.86(s,2H), 3.97(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z384.
실시예 48
4-[-2-{[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]카르보닐}히드라조노)-메틸]벤조산의 제조
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르보히드라지드(77mg, 0.2mmol), 4-포르밀 벤조산(30mg, 0.2mmol), DMSO(5㎖) 및 한방울의 빙초산의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 플라스크에 에틸아세테이트(50㎖)를 첨가하였다. 이 혼합물을 물과 염수로 추출하였다. 유기층으로부터 결정화한 생성물을 여과하여 80mg(78%)의 표제 화합물을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.0(s,2H), 8.5(d,1H), 8.3(s,1H), 8.0(d,2H), 7.8(d,2H), 7.5-7.7(m,4H), 6.8(s,1H), 5.9(s,2H); MS(APCI;(M+H)+)m/z517.
실시예 49
4-[1-2-{[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]카르보닐}히드라조노)-에틸]벤조산의 제조
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르보히드라지드(100mg, 0.25mmol), 4-포르밀 벤조산(50mg, 0.3mmol), DMSO(5㎖) 및 한방울의 빙초산의 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반시켰다. 상기 플라스크에 에틸아세테이트(50㎖)를 첨가하였다. 이 혼합물을 물과 염수로 추출하였다. 유기층으로부터 결정화한 생성물을 여과하여 97mg(73%)의 표제 화합물을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.0(s,2H), 8.5(d,1H), 8.25(s,1H), 8.0-7.9(m,4H), 7.6-7.5(m,3H), 7.4-7.3(m,2H), 6.6(s,1H), 5.9(s,2H), 2.4(s,3H); MS(APCI; (M+H)+)m/z531.
실시예 50
2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
이소프로필 4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(522mg, 1.75mmol), 4-(2-히드록시에틸)모폴린(6.7g, 51mmol), 4-디메틸아미노피리딘 (130mg, 1.05mmol), 4Å 분자체(500mg) 및 크실렌(25㎖)의 현탁액을 48시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고, 진공상에서 응축하며, 이로써 얻은 슬러리를 CH2Cl2(50㎖)로 층분리시켰다. 결합된 유기층을 물로 수회 씻은 다음,Na2SO4로 건조하여, 이를 응축시켰다. 조 생성물인 2-(4-모폴리닐)에틸 4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트가1H NMR상으로 순수한 95%의 수율로 얻어졌고, 이를 더 이상의 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
방법 A에 따라, DMF(2㎖) 중의 2-(4-모폴리닐)에틸 4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트(100mg, 0.27mmol), 수소화 나트륨(0.30mmol, 60% 미네랄 오일 현탁액 상의 12mg) 및 3,5-디니트로벤질 클로라이드(65mg, 0.30mmol)를 이용하여 표제 화합물을 제조하였다. 에틸아세테이트/헥산(7:3)을 사용한 예비 얇은막 크로마토그래피에 의해 조 생성물을 정제하여, 2-(4-모폴리닐)에틸 9-(3,5-디니트로벤질)-4-(메톡시메틸)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 얻었다(107mg, 72%).1H NMR(CDCl3) δ8.98(s,1H), 8.81(s,1H), 8.44(d,J=8.0Hz,1H), 8.31(d,J=1.9Hz,2H), 7.68(t,J=7.3Hz,1H), 7.49(t,J=7.6Hz,1H), 7.42(d,J=8.3Hz,2H), 5.83(s,2H), 5.44(s,2H), 4.59(t,J=5.8Hz,2H), 3.76(t,J=4.5Hz,4H), 3.56(s,3H), 2.85(t,J=5.8Hz,2H), 2.63(t,J=4.5Hz,4H); MS(APCI; (M+H)+)m/z550.
실시예 51
3-(4-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 B에 따라, 3-(4-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린 -3-카르복실레이트를 제조하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.10(s,1H), 8.94(s,1H), 8.53(d,J=7.9,1H), 8.47(d,J=5.3,2H), 7.59-7.68(m,3H), 7.40-7.45(m,2H), 7.32(d,J=5.6,2H), 6.64(d,J=2.3,1H), 5.93(s,2H), 2.77-2.85(m,4H), 2.08-2.16(m,2H); C27H21Cl2N3O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 490, 490.1로 확인.
실시예 52
3-(2-옥소-1-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 B에 따라, 3-(2-옥소-1-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 제조하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.17(s,1H),9.07(s,1H), 8.52(d,J=7.93Hz,1H), 7.56-7.69(m,3H), 7.37-7.44(m,2H), 6.64(d,J=2.3Hz,1H), 5.92(s,2H), 4.32(t,J=6.2Hz,2H), 3.33-3.40(m,4H), 2.16(t,J=7.9Hz,2H), 1.82-2.00(m,4H); C26H23Cl2N3O3(M+H)에 대해 계산된 LRMS 496, 496.1로 확인.
실시예 53
3-(2-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 B에 따라, 3-(2-피리디닐)프로필 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린 -3-카르복실레이트를 제조하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.14(s,1H), 8.97(s,1H), 8.56(d,J=4.5Hz,1H), 8.50(d,J=7.9Hz,1H), 7.60-7.75(m,5H), 7.39-7.46(m,2H), 7.34(d,J=7.6Hz,1H), 7.20-7.25(m,1H), 6.69(d,J=2.3Hz,1H), 5.90(s,1H), 4.46(t,J=6.4Hz,2H), 3.00(t,J=7.4Hz), 2.22-2.32(m,2H); C27H21Cl2N3O2(M+H)에 대해 계산된 LRMS 490, 490으로 확인.
실시예 54
2-[4-(에톡시카르보닐)-1-피페라지닐]에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
방법 B에 따라, 2-[4-(에톡시카르보닐)-1-피페라지닐]에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 제조하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.11(s,1H), 8.99(s,1H), 8.50(d,J=7.9Hz,1H), 7.59-7.67(m,3H), 7.38-7.44(m,2H), 6.65(d,J=2.3Hz,1H), 5.90(s,2H), 4.46-4.52(m,2H), 4.05(q,J=7.2Hz,2H), 3.35-3.45(m,4H), 2.75-2.87(m,2H), 2.45-2.60(m,4H), 1.18(t,J=7.2Hz,3H); C28H28Cl2N4O4(M+H)에 대해 계산된 LRMS 555, 555.1로 확인.
실시예 55
9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르발데히드의 제조
250㎖ 둥근바닥 플라스크에 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올(1.84g, 5.1mmol), 산화망간(Ⅳ)(1.14g, 13.1mmol) 및 디클로로에탄(60㎖)를 넣었다. 이 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반시켰다. 혼합물을 여과하고,진공상에서 응축시킨 다음, 잔유물을 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=10:1)에 의해 정제하여, 표제 화합물(1.6g, 87% 수율)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ10.3(s,1H), 8.9(s,1H), 8.8(s,1H), 8.3(d,1H), 7.7(t,1H), 7.5-7.4(m,3H), 7.2(s,1H), 6.6(s,1H), 5.7(s,2H); MS(CI):355,357,359.
실시예 56
[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸아민의 제조
무수 CH2Cl2(100㎖) 중의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메탄올 (7.14g, 20mmol) 용액을 질소기류하에서 냉각시키고, 교반시키면서 티오닐클로라이드(2.5g, 20.8mmol)를 방울방울 첨가하였다. 상기 용액을 실온으로 보온하고, 이후 15시간 동안 교반시켰다. 반응 혼합물을 무수 에탄올(50㎖)로 희석하고, 회전기화기로 응축시켜 엷은 노란색의 고체를 얻었다. 조 생성물을 무수 에테르의 첨가에 의해 결정화함으로써, 6.92g(84%)의 3-클로로메틸-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린 히드로클로라이드를 얻었다. 상기 염을 수용성 Na2CO3의 첨가에 의해 자유 염기 상태로 전환시키고, CH2Cl2로 결과 물질을 추출하였다. 유기층을 건조(Na2SO4)시키고, 진공상에서 응축시켜, 엷은 노란색 고체의 자유염기 상태 0.30g(100%)를얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.72(s,1H), 8.20(d,J=7.9,2.3Hz,1H), 8.18(s,1H), 7.60(t,J=7Hz,1H), 7.38(m,3H), 7.20(dd,J=8.3,2.3Hz,1H), 6.55(s,1H), 5.65(s,2H), 4.92(s,2H); MS 모노동위원소 질량(계산치)374.0, MH+(실측치)375.2, (MH+-HCl)339.1.
무수 에탄올(60㎖) 중의 3-클로로메틸-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린 히드로클로라이드(5.64g, 15mmol) 및 소듐아지드(2.0g, 30mmol)의 현탁액을 질소기류하에서 15시간 동안 환류시켰다. 이렇게 처리한 현탄액을 실온에서 식히고, 같은 부피의 CH2Cl2로 희석한 다음, 물(2×50㎖)과 염수(2.5㎖)로 각각 씻어주었다. 추출한 유기층을 무수 Na2SO4로 건조하고, 응축시켜 엷은 노란색 고체로써의 3-아지도메틸-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린 5.70g을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.75(s,1H), 8.20(d,J=7.4Hz,1H), 8.04(s,1H), 7.58(t,J=7.5Hz,1H), 7.32-7.40(m,3H), 7.20(dd,J=9.6,2.5Hz,1H), 6.53(d,J=2.3Hz,1H), 5.52(s,2H), 4.20(s,2H); MS 모노동위원소 질량(계산치)381.1, MH+(실측치)382.0, (MH+-N2)354.2.
아민에 대응하는 상기 아지드의 환원은 Gartiser et al.,의 Tetrahedron Lett., 1983, 24:1609에 공지되어 있는 공정에 따라 수행되었다. 에탄올(200㎖) 중의 3-아지도메틸-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린(4.60g, 12mmol), 포름산암모늄(3.90g, 61.7mmol) 및 10% 탄소상의 팔라듐(2.0g, 20mol%)의 현탁액을 질소기류하의 실온에서 15시간 동안 교반시켰다. 고체상을 제거하기 위해 반응 혼합물을 여과하고, 여과액을 응축한 다음, CH2Cl2(100㎖)로 희석하였다. 이렇게 하여 얻은 용액을 물(2×50㎖)과 염수(2.5㎖)로 씻어주었으며, 무수 Na2SO4로 건조시킨 후, 이를 응축하였다. 조 생성물을 에틸아세테이트로 재결정하여, 엷은 노란색 고체의 N-포르밀-[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸아민 3.0g(65%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.65(s,1H), 8.30(s,1H), 8.24(d,1H), 7.95(s,1H), 7.58(t,1H), 7.30-7.40(m,3H), 7.20(dd,1H), 6.51(s,1H), 5.60(s,2H), 4.78(d,1H); MS 모노동위원소 질량(계산치)383.1, MH+(실측치)384.9.
에탄올/물(5:1,48㎖) 상에서 수산화칼륨(5.40g, 9.4mmol)과 함께 처리한 상기 포름아미드(2.90g, 7.5mmol)를 6시간 동안 환류시켰다. 이로써 얻은 현탁액을 실온에서 식히고, 응축한 다음, CH2Cl2(50㎖)로 희석하였다. 유기층을 물(2×50㎖)로 씻고, 건조(Na2SO4)한 다음, 여과하고 응축시켜 노란색 고체의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸아민을 얻었다. 조 생성물을 에틸아세테이트/헥산으로 재결정하여 엷은 노란색 고체 1.48g(55%)을 얻었다.1H NMR(CDCl3) δ8.70(s,1H), 8.18(d,J=7.9Hz,1H), 8.03(s,1H), 7.58(td,J=7.2,1.1Hz,1H), 7.32-7.42(6-선 m,3H), 7.20(dd,J=9.6,2.6Hz,1H), 6.55(d,J=2.6Hz,1H), 5.60(s,2H), 4.28(d,1H), 1.96(br s,2H); MS 모노동위원소 질량(계산치)355.1, MH+(실측치)356.7.
실시예 57
N-{[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸}-5-메틸-3-이소옥사졸카르복사미드의 제조
DCE(0.25M) 상의 5-메틸이소옥사졸-3-카르보닐클로라이드 용액을 DME(0.25M,1당량) 상의 [9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸아민 용액에 이어, DME(1.0M,1당량) 상의 트리에틸아민 용액과 함께 처리하였다. 상기 혼합물을 교반시킨 후, 밤새 방치하였다. 용매를 기화시키고, 남은 잔유물을 예비 HPLC에 의해 정제하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.5(br t,1H), 9.40(s,1H), 8.74(s,1H), 8.60(d,J=7.8Hz,1H), 7.78(m,1H), 7.66-7.60(m,겹침,2H), 7.50-7.41(m,겹침,2H), 6.69(s,1H), 6.65(s,1H), 5.97(s,1H), 4.96(d,J=5.4Hz,2H), 2.49(s,DMSO 피크와 겹침). 상기 피크는13C NMR 스펙트럼 상에서 메틸렌기와 함께 13.7ppm에서 나타나며, 추측컨대1H 스펙트럼에서도 용매와 겹쳐있다. C24H18Cl2N4O2로 계산된 모노동위원소 질량:464.1, (M+H)실측치465.4.
실시예 58
N-{[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸-2-(트리플루오로메틸)}벤자미드의 제조
N-{[9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸}-5-메틸-3-이소옥사졸카르복사미드에 대해 나타낸 반응 공정을 이용하여 표제 화합물을 제조하였다.1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ9.41(t,J=5.6Hz,1H), 9.35(s,1H), 8.59(s,1H), 8.43(d,J=7.9Hz,1H), 7.84-7.60(m,겹침,7H), 7.50-7.33(m,겹침,2H), 6.66(d,J=2.4Hz,1H), 5.94(s,2H), 4.87(d,J=5.6Hz,2H). C27H18Cl2F3N3O로 계산된 모노동위원소 질량:527.1, (M+H)실측치528.5.
실시예 59
2-(2,5-디옥소-1-피롤리디닐)에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트의 제조
일반적 방법 C에 따라, 2-(2,5-디옥소-1-피롤리디닐)에틸 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르복실레이트를 제조하였다.1H NMR(300MHz, CDCl3) δ8.95(s,1H), 8.85(s,1H), 8.30(d,J=7.8Hz,1H), 7.65(m,1H), 7.47-7.42(m,겹침,3H), 7.23(dd,J=8.5,2.4Hz,1H), 6.59(d,J=2.4Hz,1H), 5.68(s,2H), 4.65(t,J=5Hz,2H), 4.05(t,J=5Hz,2H), 2.75(s,4H). C25H19Cl2N3O4로 계산된 모노동위원소 질량:495.1, (M+H)실측치495.8.
실시예 60
6-(2,5-디클로로벤질)1-히드록시-1,6-디히드롤-3H-퓨로[3',4',5,6]-피리도[3,4-b]인돌-3-온의 제조
6-(2,5-디클로로벤질)1-히드록시-1,6-디히드롤-3H-퓨로[3',4',5,6]-피리도[3,4-b]인돌-3-온은 공지된 공정을 약간 변형시켜, 하기와 같이 제조하였다 (Narasimhan et al.,Synthesis,1975, 797 참고). 진한 염산(35㎖, 406mmol) 중의 6-(2,5-디클로로벤질)1-히드록시-2-[2-[2-(4-모폴리닐)에틸]-1,6-디히드로피롤로[3',4',5,6]-피리도[3,4-b]인돌-3(2H)-온(2.51g,4.91mmol) 용액을 48시간 동안 환류시켰다(140℃의 항온조를 사용해서). 상기 용액은 약 24시간이 경과하면서 갈색에서 초록빛-노란색으로 변하였다. 이 용액을 식힌 다음, 포화 중탄산나트륨을 이용하여 pH ~9.0으로 염기성화하고, CH2Cl2(2×5㎖)로 2회 추출하였다. 수용액 층을 10% 수용성 염산을 이용하여 pH ~6정도로 산성화하였다. 이로써 얻은 엷은 갈색의 침전을 여과하고, CH2Cl2및 에테르로 각각 씻은 다음, 80℃의 진공상에서 15시간 동안 건조하였다. 약산성의 여과액을 밤새 방치하여 추가량의 고체를 침전시켰다. 이를 여과하고, 상기와 같은 처리를 함으로써 총 수율 1.6g(82%)을 얻었다.1H NMR(DMSO-d6) δ9.25(s,1H), 8.52(d,J=1.7Hz,1H, D2O와 교환), 8.30(d,J=7.8Hz,1H), 7.67(m,2H), 7.55(d,J=8.5Hz,1H), 7.42(t,J=5.8Hz,1H), 7.36(dd,J=8.4,1.6Hz,1H), 7.13(s,1H), 6.52(d,J=1.7Hz,1H), 5.94(s,2H);13C NMR(DMSO-d6) δ166.1, 140.1, 136.4, 135.3, 135.0, 134.8, 133.5, 130.8, 130.4, 129.6, 128.5, 128.1, 125.8, 123.1, 121.1, 120.5, 117.6, 109.9, 94.4, 43.5; MS 모노동위원소 질량(계산치)398.0, MH+(실측치)399.0.
실시예 61
2-([(4-시아노시클로헥실)메틸]{9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]}아미노)-2-옥소에틸아세테이트의 제조
상기 화합물을 제조하기 위해 사용된 공정의 첫 번째 단계는 환원적 아민화에 대해 나타난 공지된 공정의 변형에 따른 것이다(Abdel-Magid et al.,J.Org.Chem., 1996, 61:3849 참고). 메탄올(0.10M) 중의 9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-카르발데히드 용액을 메탄올(0.10M) 중의 (부분입체이성질체의 혼합물로써) 4-시아노시클로헥산메틸아민과 함께 처리하였다. 상기 혼합물을 일시적으로 교반시킨 다음, 실온에서 밤새 방치하였다. 이 용액을 즉시 제조한 포화 무수 에탄올(0.50M) 중의 수소화붕소나트륨 용액 2당량과 함께 처리하고, 교반시킨 다음, 실온에서 2시간 동안 방치하였다. 상기 용액을 전체 부피의 절반 가량의 물로 희석하고, 교반시킨 후(가스 발생), 휘발 성분을 진공상에서 제거하였다. 상기 고체 잔유물에 DCE 상의 아세톡시에틸클로라이드 0.1M 용액 1당량, 메틸렌클로라이드 상의 트리에틸아민 0.2M 용액 1당량을 첨가하여 그 혼합물을 2시간 동안 교반시켰다. 용매를 기화시키고, 잔유물을 예비 HPLC에 의해 크로마토그래피로 분리하였다. 상기 잔유물의 약 50mg정도를 15%의 DMSO, 30%의 이소프로판올 및 55%의 헥산 15㎖에 용해시켰다. 이를 헥산(A)과 이소프로판올(B) 구배를 12㎖/분으로 사용한 Kromasil 100-5 Sil(250×22㎜) 컬럼을 통해 용출시키고, 238㎜에서 관찰하였다.상기 컬럼은 15분간은 95%의 A와 5%의 B로 용출시키고, 뒤이어 시스 및 트랜스 이성질체 피크가 용출될 때(약 60-80분)까지 매 10분마다 B의 양을 2%씩 증가시켜 용출시켰다. 이 컬럼을 80%의 B와 20%의 A의 혼합물로 20분간 씻어주어 전체 작동 시간은 12분이 되었다.
시스 이성질체:화합물은 3차 아미드 결합에 대해 한쌍의 회전 이성질체로써 나타났다:1H NMR(DMSO-d6) δ8.92,8.86(s,1H), 8.30(m,1H), 8.17,7.98(s,1H), 7.59(m,겹침,3H), 7.40-7.31(m,2H), 6.45(br s,1H), 5.82(s,2H), 5.01,4.87(s,2H), 4.69(br s,2H), 3.17(m,2H), 2.55(m,Wh/2=29Hz,1H), 2.08,2.04(s,3H), 2.00-1.89(m,2H), 1.75-1.52(m,3H), 1.45-1.20(m,2H), 1.30-0.82(m,2H); C31H30Cl2N4O3에 대해 계산된 LRMS: 567.2; MH+(실측치)577.2.
트랜스 이성질체:화합물은 3차 아미드 결합에 대해 한쌍의 회전 이성질체로써 나타났다:1H NMR(DMSO-d6) δ8.92,8.85(s,1H), 8.30(m,1H), 8.19,7.98(s,1H), 7.60(m,겹침,3H), 7.38(dd,J=8.6,2.4Hz,1H), 7.30(m,1H), 6.51(d,J=2.6Hz,1H), 5.81(br s,2H), 5.03,4.90(s,2H), 4.71(br s,2H), 3.25,3.20(d,J=6.4Hz,7.2Hz,각각,2H), 3.09,3.03(m,Wh/2=8.7Hz,10.5Hz,각각,1H), 2.08,2.04(s,3H), 1.85-1.2(m,겹침,9H); C31H30Cl2N4O3에 대해 계산된 LRMS: 576.2; MH+(실측치)577.2.
실시예 62
N-{[(4-시아노시클로헥실)메틸]-N-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸}시클로프로판카르복사미드의 제조
상기 2-([(4-시아노시클로헥실)메틸]{9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]}아미노)-2-옥소에틸아세테이트에 나타낸 반응 공정과 유사한 공정으로, N-{[(4-시아노시클로헥실)메틸]-N-9-(2,5-디클로로벤질)-9H-β-카르볼린-3-일]메틸}시클로프로판카르복사미드를 제조하였다. 화합물은 3차 아미드 결합에 대해 회전 이성질체의 혼합물로써 나타났다.1H NMR(DMSO-d6) δ8.92,8.87(s,1H), 8.31(m,겹침,1H), 8.09,7.96(s,1H), 7.60(m,겹침,3H), 7.38(dd,J=8.7,2.6Hz,1H), 7.30(m,1H), 6.52,6.50(d,J=2.3Hz,1H), 5.82,5.80(s,2H), 4.93,4.73(s,2H), 3.44,3.27(d,J=7.2,6.8Hz,2H), 2.58(m,1H), 1.95(m,2H), 1.72-1.56(m,2H), 1.48-0.55(m,겹침,10H); C31H30Cl2N4O에 대해 계산된 LRMS: 544.2, MH+(실측치)545.2.
실시예 63
7-(2,5-디클로로벤질)-3-(2-히드록시에틸)-3,7-디히드로-4H-피리다지노[4',5':5,6]피리도[3,4-b]인돌-4-온의 제조
공지된 공정의 변형에 의해 상기 고리 형태를 제조하였다(Mylari et al., J.Org.Chem., 1991, 56:2587). 에탄올(0.033M) 중의 6-(2,5-디클로로벤질)-1-히드록시-1,6-디히드로-3H-퓨로[3',3':5,6]피리도[3,4-b]인돌-3-온 용액과 1당량의 2-히드록시에틸히드라진을 15시간 동안 환류시켰다. 용매를 기화시키고, 생성물을 HPLC에 의해 정제하였다.1H NMR(300MHz,DMSO-d6) δ9.48(s,1H), 9.29(s,1H), 8.78(d,J=8Hz,1H), 7.68(m,2H), 7.57(d,J=8.5Hz,1H), 7.48(m,1H), 7.37(dd,J=8.5,2.5Hz,1H), 6.55(d,J=2.5Hz,1H), 6.01(s,2H), 4.82(br s,1H), 4.28(t,J=6Hz,2H), 3.78(t,J=6Hz,2H); C22H16Cl2N4에 대해 계산된 LRMS: 438.1, (M+H)439.1.
<화합물의 생화학 활성에 관한 시험>
하기 평가는 세포와 본 발명의 화합물이 함께 전처리 되었을 때의 GLP-1활성을 측정하기 위해 수행되었다:
분석 1: GLP-1 결합 평가
수용체 결합은 순계(cloned) 사람 GLP-1 수용체가 어린 햄스터의 신장 세포 라인(BHK)에서 발현됨을 이용하여 평가하였다. 순계는 0.5mg/㎖ G-418을 나타내는 것으로부터 선택하였으며, 40계대(passage) 이상의 안정성을 나타내었다.
교회(confluence)에서의 성장 세포에 의해 원형질막을 제조하여, 표면으로부터 이들을 분리한 다음, 30mM NaCl, 1mM 디티오쓰레이톨(dithiothreitol), 5mg/ℓ 류펩틴(leupeptin), 5mg/ℓ펩스타틴(pepstatin), 100mg/ℓ박시트라신(bacitracin) 및 15mg/ℓ재조합체 아프로티닌(recombinant aprotinin)을 함유한 pH 7.4의 차가운 완충용액(10mM 트리스/HCl)에서 세포를 재고정하였다. 세포는 폴리트론(Polytron) PT 10-35 균질화기(Kinematica)와 원심분리기를 사용한 2회의 10-초 방출을 통해 균질화하였다. 원형질막을 함유한 침전을 완충용액에서 고정하고, 사용시까지 -80℃에 보관하였다.
결합 평가는 폴리프로필렌 관 또는 96-웰 플레이트에서 이중으로 시행하였다. 상기 평가에 사용한 완충용액은 0.1% 소혈청알부민(Sigma)과 0.01% 박시트라신을 함유한 pH 7.4의 25mM HEPE를 사용하였다. 통상적으로, 표본(GLP-1 또는 시험 화합물)의 100㎕를 각각의 관에 첨가하였다. 표지물질(tracer)(방사성-요오드화된 GLP-1; 20,000cpm)을 완충용액으로 희석하여, 100㎕를 각각의 관에 첨가하였다. 완충용액으로 희석된, 다음으로 새로 융해된 원형질막 단백질(0.5㎍)을 각각의 100㎕ 분별관에 첨가하였다. 상기 관을 37℃에서 1시간 동안 배양하였다. 비-특이적 결합이 100nM GLP-1의 존재하에 결정된다. 결합된 및 미결합된 표지물질은 이후, 진공 여과기로 분리하였다. 관을 각각에 대해 3㎖ 완충용액으로 2회 세척하였다. 필터는감마-신틸레이션기(scintillation)에서 산정되었다. 방사성 요오드화된 GLP-1이 고활성에 적합하기 때문에 분석에 사용한 방사성 요오드화된 GLP-1은 GLP-1 수용체에 대한 GLP-1의 해리상수의 단지 5-10%를 나타내는 조건하에서 수행되었고, 이에 따라, 길항제에서 측정된 IC50값은 K값에 거의 근접한다.
분석 2: GLP-1 기능 평가
기능 평가는 전체-세포 cAMP 분석에서 GLP-1 정-변환(right-shift) 투여-반응 곡선에서의 화합물의 활성, 또는 상기 세포에서 cAMP 축적을 자극하는 물질들의 활성을 측정한 것이다. 평가는 보로실리케이트 유리 12×75관에서 수행하였다. 평가에 있어서 완충용액의 농도는 10mM HEPE, 1mM EGTA, 1.4mM MgCl2, 0.1mM IBMX, 30mM NaCl, 4.7mM KCl, 2.5mM Na2H2PO4, 3mM 글루코오스 및 0.2% BSA이다. pH는 7.4로 조절하였다.
GLP-1-매개된 cAMP 축적을 길항하는 화합물의 활성 측정에 있어서, 세포(통상적으로 0.5㎖, 106/㎖)를 37℃에서 10분간 다양한 농도의 화합물로 전처리하였으며, 이후, 20분간 증가된 농도의 GLP-1으로 처리하였다. 효험제로써 작용하는 화합물의 활성을 측정하는데 있어서는, 단독 화합물의 다양한 농도로 처리하였다. 반응을 원심분리에 이어, 0.1% HCl 500㎕의 첨가에 의한 세포분해에 의해 종결하였다. 세포조직 파편을 펠렛화하고, cAMP를 함유한 상청액을 건조기화하였다. cAMP는 RIA 조(New England Nuclear)에서 분석하였다.
본 발명의 바람직한 화합물은 상기에 나타낸 GLP-1 결합 평가에 있어서 IC50결합 친화력이 1μM 미만으로 나타나며, 더욱 바람직한 화합물은 100nM 미만의 IC50결합 친화력을 갖는다. 상기 평가에서 사용된 요오드화된 GLP-1의 농도가 GLP-1 수용체에 대한 GLP-1의 해리상수의 5-10%를 나타내기 때문에 길항제의 IC50값은 거의 그들의 Ki값에 근접한다. GLP-1 기능 평가에 있어서 어떠한 시험 화합물도 효험제 활성을 나타내지는 않았다.
<약제학적 조성물>
본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 공지된 방법, 예를 들어, 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정화(dragee-making), 수파(levigating), 에멀전화, 캡슐화, 트랩화(entrapping), 또는 동결건조(lyophilizing) 공정 등을 이용하여 제조할 수 있다. 약제학적 조성물은 부형제를 함유한 하나 이상의 생리학적으로 허용가능한 담체, 및 활성 화합물의 용이한 제조를 위해 약제학적으로 사용가능한 보조제를 사용하여 통상적인 방법으로 제형화할 수 있다. 적절한 제형화는 선택되는 투여 경로에 의존한다.
주사제용으로, 본 발명의 제는 수용성 용액으로 제형화되며, 바람직하게는 행스액(Hanks's solution), 링거액 또는 생리 식염 완충액과 같은 생리학적으로 적합한 완충용액상에서 제형화된다. 점막통과(transmucosal) 투여용으로는, 투과될 막에 적절한 침투제가 제형화에 사용된다. 그러한 침투제는 일반적으로 종래기술로써 알려져 있다.
경구 투여용으로, 화합물은 종래기술로써 알려진 약제학적으로 허용가능한 담체와 활성 화합물의 결합에 의해서 쉽게 제형화된다. 본 발명의 화합물이 환자에게 경구투여되는 경우에 있어서, 제형화에 사용할 수 있는 그러한 담체는 정제, 환제, 당의정, 캡슐, 액체(liquid), 겔, 시럽, 슬러리, 현탁액 등이 있다.
경구투여용으로의 약제학적 제조는 고체 부형제를 사용하고, 선택적으로 결과 혼합물을 빻으며, 필요한 경우, 적절한 보조제를 첨가하고, 과립의 혼합물에 공정을 가하여 정제 또는 당의정 핵을 얻는다. 적절한 부형제로는 락토스, 수크로오스, 만니톨, 또는 솔비톨 등의 당류의 충진제, 및 옥수수녹말, 밀녹말, 쌀녹말, 감자녹말, 젤라틴, 트래거캔스 고무(gum tragacanth), 메틸셀룰로오스, 히드록시프로필메틸-셀룰로오스, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스, 및/또는 폴리비닐피롤리돈(PVP) 등의 셀룰로오스류가 포함된다. 필요한 경우, 가교된 폴리비닐피롤리돈, 아가, 또는 알긴산 또는 알긴산나트륨과 같은 이의 염 등 붕괴제가 첨가될 수 있다.
당의정 핵은 적절하게 코팅하여 사용한다. 이를 위해, 농축당 용액이 사용되며, 이는 선택적으로 아라비아 고무, 폴리비닐피롤리돈, 카르보폴(Carbopol) 겔, 폴리에틸렌글리콜, 및/또는 이산화티타늄, 래커액(lacquer solution), 및 적절한 유기 용매 또는 용매 화합물을 함유한다. 염료 또는 안료가 구별 또는 활성 화합물 투여의 다른 결합을 특징화하기 위해 정제 또는 당의정 코팅에 선택적으로 첨가된다.
경구적으로 사용될 약제학적 제조물에는 젤라틴으로 만든 봉합된 캡슐 뿐만아니라 젤라틴으로 만든 푸쉬-피트(push-fit) 캡슐, 및 글리세롤 또는 솔비톨과 같은 가소제가 포함된다. 푸쉬-피트 캡슐은 락토스와 같은 충진제, 녹말과 같은 결합제, 및/또는 탈크 또는 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제, 및 선택적으로 안정화제와 함께 사용된 선택적 부가혼합물에 있어서의 활성 성분을 포함한다. 연(soft) 캡슐에 있어서, 활성 화합물은 지방유, 액상 파라핀, 또는 액상 폴리에틸렌글리콜 등의 적절한 액체에 용해되거나 고정된다. 또한, 안정화제가 선택적으로 첨가된다. 경구 투여를 위한 모든 제형은 이러한 투여에 적합한 투여용량으로 되어 있다. 볼측 투여용으로써, 조성물은 통상적인 방법으로 정제 또는 로젠지의 형태로 제형화된다.
흡입투여용으로, 본 발명에 따른 화합물은 압축팩으로부터 분출되는 적합한 에어로졸 분사제, 또는 적절한 추진제, 예를 들면, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로메탄, 이산화탄소 또는 기타 기체 등을 사용한 분무제의 형태로 적절하게 전환시킬 수 있다. 압축 에어로졸의 경우, 투여용량은 종량적 배출을 위한 밸브를 통해 조절할 수 있다. 예를 들어 흡입 또는 살포용의 젤라틴의 캡슐 및 카트리지는 화합물의 파우더 혼합물 및 락토스 또는 녹말과 같은 적절한 파우더 베이스를 함유하여 제형화하였다. 화합물은 예를 들어, 농축괴 주입 또는 연속 주입에 의한 주사제의 투여를 위해 제형화할 수 있다. 주사제의 제형화는 부가 방부제와 함께, 예를 들어, 앰퓰 또는 다중투여 용기 형태의 단위 투여 형태로 나타난다. 조성물은 현탁액, 용액, 또는 오일 또는 수용성 부형제 상의 에멀전의 형태로 나타나며, 선택적으로, 고정, 안정화 및/또는 분산제 등의 제형화제를 함유한다.
비경구적 투여를 위한 약제학적 조성물은 수용액상에서 활성 화합물의 수용성 용액을 포함한다. 또한, 활성 화합물의 현탁액은 적절한 오일 주입 현탁액으로써 제조된다. 적절한 지용성 용매 또는 부형제에는 참깨유 같은 지방유, 또는 에틸올리에이트, 트리글리세라이드 또는 리포솜 같은 합성 지방산 에스테르가 포함된다. 수용성 주입 현탁액은 선택적으로 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 솔비톨, 또는 덱스트린 등 현탁액의 밀도를 증가시키는 기질을 함유한다. 선택적으로, 현탁액은 또한 적절한 안정화제 또는 고농축 용액의 제조를 위해 화합물의 용해도를 증가시키는 제를 함유한다.
대안적으로, 활성 성분은 사용전에 예를 들어, 스테릴 피로젠-프리워터 (sterile pyrogen-free water) 등의 적절한 부형제와 함께 파우더 제형으로 구조화할 수 있다. 화합물을 또한, 예를 들어, 코코아 버터 또는 기타 글리세리드와 같은 통상적인 좌약 기저(suppossitory base)를 함유한 좌약(suppossitory) 또는 관장정류(retention enemas) 등의 직장 조성물(rectal composition)로 제형화된다.
상술한 제형에 부가하여, 화합물은 또한 저장물(depot) 제형으로 제형화된다. 그러한 장기-활성 제형은 이식(예를 들어, 피하 또는 근육내로), 또는 근육내 주사를 통해 투여된다. 그러므로, 예를 들어, 화합물은 적절한 고분자 또는 소수성 물질(예를 들어, 허용가능한 오일상의 에멀전과 같은) 또는 이온 교환 수지, 또는 예를 들어 가용성이 결여된 염과 같은 가용성이 결여된 유도체 등으로 제형화된다.
본 발명의 소수성 화합물용 약제학적 담체는 벤질 알콜, 무극성 계면 활성제, 수-혼화성 유기 고분자, 및 수용액 상으로 구성된 공용매 시스템이다. 공용매 시스템은 바람직하게는 VPD 공용매 시스템이다. VPD는 3%의 w/v 벤질 알콜, 8%의 w/v 무극성 계면 활성제 폴리솔베이트 80, 및 65%의 w/v 폴리에틸렌글리콜 300, 및 나머지 부분이 무수 에탄올로 이루어진 용액이다. VPD 공용매 시스템(VPD:5W)은 수용액 상의 5% 덱스트로스와 1:1로 희석된 VPD를 포함한다. 상기 공용매 시스템은 소수성 화합물에 잘 용해되며, 자체적으로 계의 투여(systemic administration)에 있어서 낮은 독성을 제공한다. 바람직한 공용매 시스템은 비율은 용해도를 낮추거나 독성을 나타냄이 없이 매우 다양하다. 더욱이. 공용매 조성물의 유사물도 다양하다. 예를 들어, 기타의 저-독성 무극성 계면 활성제가 폴리솔베이트 80 대신에 사용될 수 있다; 폴리에틸렌글리콜의 분율크기도 다양하다; 예를 들어, 폴리비닐피롤리돈과 같은 기타의 생체적합성 고분자들이 폴리에틸렌글리콜을 대신하여 사용될 수 있다; 또한 기타의 당 또는 다당류들이 덱스트로스를 대신하여 사용될 수 있다.
대안적으로, 소수성의 약제학적 조성물에 대한 기타의 수송체계가 도입된다. 리포솜과 에멀전이 소수성 약제용의 수송 부형제 또는 담체의 예로 잘 알려져 있다. 비록 큰 독성을 감수해야 하긴 하지만, 디메틸술폭사이드와 같은 임의의 유기 용매가 또한 도입될 수 있다. 또한, 화합물은 치료제를 함유한 고형 소수성 고분자의 반투성 기질과 같은 지속-분비 체계(sustained-release system)를 이용하여 전달된다. 다양한 지속-분비 물질이 입증되었으며, 종래 기술로 잘 알려져 있다. 그들의 화학적 특성에 의해 결정된 지속-분비 캡슐은 수주 내지는 100일 이상의 주기로 화합물을 분비한다.
약제학적 조성물은 또한 적절한 고체 또는 겔상의 담체 또는 부형제를 함유한다. 그러한 담체 또는 부형제의 예로는(한정되는 것은 아니나) 탄산 칼슘, 인산칼슘, 다양한 당, 녹말, 셀룰로오스 유도체, 젤라틴, 및 폴리에틸렌글리콜과 같은 고분자 등이 포함된다.
본 발명의 화합물 중의 임의의 것들은 약제학적으로 적합한 대이온 (counterion)과의 염의 형태로 제공된다. 약제학적으로 적합한 염은 한정되지는 않으나, 염산, 황산, 아세트산, 락트산, 주석산, 말산, 숙신산 등의 많은 산과 함께 형성되는 것들이다. 염은 대응 자유-염기 형태보다 수용액 또는 기타의 양성자성 용매에 더 용해되기 쉽다.
본 발명에 의해 제공되는 화합물을 이용한 적절한 약제학적 조성물은 의도하는 효과, 즉, 처리된 숙주에 존재하던 증상의 발현을 억제하거나, 또는 증상 완화에 도달하기 위하여, 유효량으로 구성된 활성 성분을 포함한 조성물을 포함한다. 원하는 생물학적, 화학적 또는 기타의 효과를 얻기 위한 최적량의 결정은 종래 기술로 알져진 가능성의 범위 이내이다.
예를 들어, 주사제에 의해 투여되는 적절한 비경구적 약제학적 조성물은 0.9% 스테아릴염 10㎖와 혼합된 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 수용성 염 10mg을 포함하며, 이는 이후에 주사제에 의한 투여에 적합한 단위 투여 형태로 만들어진다.
또한, 경구 투여에 적합한 약제학적 조성물은 750mg의 락토오스와 혼합된 일반식 (Ⅰ)의 화합물 10mg을 포함하며, 이는 이후에 경구 투여용 경 젤라틴 캡슐과 같은 단위 투여 형태로 만들어진다.
한편, 본 발명은 특정예들와 바람직한 구체화들을 참조하여 이해할 수 있으며, 본 발명의 취지와 동떨어지지 않는 다양한 변형 및 변화가 행해질 수 있음은 종래 기술로써 자명한 것이다. 그러므로, 본 발명은 상술한 내용에 의해 한정되는 것이 아니라, 하기 청구항 및 상당어구에 의해 한정되는 것이다.
본 발명을 통해, 펩티드 GLP-1 길항제에 의해 나타나는 생체내 분해 및 생물적 분포의 문제점을 개선시킨, GLP-1의 치료학적 조절에 유용한 효과적인 비펩티드 GLP-1 길항제 및 상기 물질의 이용방법을 제공한다.

Claims (19)

  1. 하기 일반식 (Ⅰ)의 화합물:
    [화학식 1]
    여기서:
    상기 R1은 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 및 C1-C6알콕시로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 페닐 또는 피리딜 기이며;
    상기 R2는:, 여기서, 상기 R'은: 수소; 히드록시기; -OR5, 여기서 상기 R5는 하나의 히드록시기 또는 알킬, 히드록시알킬, 카르복실, C1-C6알콕시카르보닐, 산소, 할로겐, 및 트리플루오로메틸로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 아미노, C1-C6알콕시, 시클로알킬, 티오에테르, 헤테로시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴기로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬 또는 C2-C6알케닐기; 또는 -NR6R7, 여기서 상기 R6및 R7은 각각 독립적으로 수소, 또는 히드록시기, C1-C6알콕시기 또는 산소, 할로겐, 트리플루오로메틸, 및 카르복실기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 아미노, 티오에테르, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴기로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 아미노 또는 이미노기, 또는 여기서 상기 -NR6R7은 질소 헤테로원자에 부가하여 O,N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 헤테로원자를 선택적으로 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로환 고리를 형성하고;
    -(CH2)n-O-R", 여기서 n은 1 또는 2이고, 상기 R"은 수소, C5-C7헤테로아릴기, 또는, 여기서, 상기 R8은 수소, C1-C6알킬기, C3-C6시클로알킬기, 또는 할로겐, 메틸 및 트리플루오로메틸로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 5- 또는 6-원 헤테로아릴기;
    -(CH2)p-N(R")(R"'), 여기서 p는 1 또는 2, R"은 상기의 정의와 동일하며, R"'은 수소 또는 선택적으로 시아노기가 치환된 C3-C6시클로알킬기로 선택적으로 치환된 알킬 또는 알콕시기;
    -CH=N-R"", 여기서, 상기 R""은 수소, 히드록시, 또는 -OR9, 여기서 R9는 알킬, 시클로알킬, 아릴, 또는 헤테로아릴기; 또는
    O,N 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로환 고리로서, 상기 고리는 메틸, 메톡시메틸, 산소, 및 C1-C6알콕시기로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 또는 두 개의 치환체에 의해 선택적으로 치환되어 있는 것이고;
    상기 R3는 수소 또는 C1-C6알킬, C2-C6알케닐, 또는 (C1-C3알콕시)C1-C3알킬기이며;
    또는, 상기 R2및 R3는 원자를 공유하여, O,N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 두개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 고리의 형태로 결합하였으며, 고리는 산소, 히드록시, 또는 O,N 및 S로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 또는 두개의 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 헤테로시클로알킬로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬기이고;
    상기 R4는 수소 또는 아미노, 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, C1-C6알킬, 또는 C2-C6알케닐기이다;
    또는, 상기 화합물의 전구약물(prodrug), 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물(solvate), 또는 활성대사산물.
  2. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서;
    상기 R1은 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸 및 시아노기로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 페닐기이며;
    상기 R2는:, 여기서, R'은 상기 정의한 바와 동일하며, 내부에 카르보닐기로부터 3~5Å 떨어진 위치에 수소결합 수용체가 치환된 것이고;
    상기 R3는 수소 또는 메톡시메틸이다.
  3. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 R1은 2,5-디클로로페닐 또는 3,5-디니트로페닐이다.
  4. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 R2및 R3는 이들이 결합된 원자와 함께 5- 또는 6-원의 고리형인 락톤 또는 락탐을 형성한다.
  5. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 R2는 하기 구조로 이루어진 군으로부터 선택되었다;
    .
  6. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 R2및 R3와 이들이 서로 결합되어 있는 원자는 하기 구조로 이루어진 군으로부터 선택된 5- 또는 6-원 고리의 형태를 형성한다;
  7. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 화합물은 다음과 같은 구조를 갖는다;
    여기서 R5는 상기 정의한 바와 동일함.
  8. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물:
    여기서, 상기 화합물은 하기 구조로 이루어진 화합물의 군으로부터 선택된다;
  9. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물을 포함하는 약제학적 조성물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체.
  10. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물의 유효량을 포유동물에 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 인슐린의 분비를 조절하는 방법.
  11. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물의 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, GLP-1의 활성을 저해하는 방법.
  12. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물의 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, GLP-1 수용체와의 GLP-1 결합을 저해하는 방법.
  13. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물의 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, GLP-1 수용체의 작용을 저해하는 방법.
  14. 제 1항에 있어서의 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물의 유효량을 포유동물에 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 인슐린의 분비를 조절하는 방법.
  15. 제 1항에 있어서, IC50결합 친화도가 1μM 미만인 GLP-1 수용체 길항제인 화합물, 전구약물, 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용가능한 용매화합물, 또는 활성대사산물.
  16. 제 15항에 있어서의 GLP-1 수용체 길항제의 유효량 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  17. 제 15항에 있어서의 GLP-1 수용체 길항제의 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, GLP-1 수용체의 작용을 저해하는 방법.
  18. 9H-β-카르볼린 중심 구조를 가짐으로써, 비-펩티드 GLP-1 수용체 길항제의 제조에 유용한 하기 구조의 화합물,
    여기서:
    상기 R4는 수소 또는 아미노, 할로겐, 히드록시, 니트로, 트리플루오로메틸, 시아노, C1-C6알킬 또는 C2-C6알케닐기이며:
    상기 R5는 수소; 또는 히드록시 또는 아미노기로 선택적으로 치환된 C1-C6알킬 또는 C2-C6알케닐기; 산소, 할로겐, 및 트리플루오로메틸로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환체에 의해 선택적으로 치환된 C1-C6알콕시, 티오에테르, 아릴, 또는 헤테로아릴기이고;
    만일 R4가 수소라면, R5는 수소 또는 비 분지된 C1-C3알킬기가 아니며;
    만일 R4가 아미노 또는 브로모기라면, R5는 에틸기가 아니다.
  19. 하기 구조로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물:
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