DE69102069T2 - 5-aminosalicylsäurederivate zur therapie chronisch entzündlicher baucherkrankungen. - Google Patents

5-aminosalicylsäurederivate zur therapie chronisch entzündlicher baucherkrankungen.

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Description

  • Die Erfindung betrifft 5-Aminosalicylsäure (5-ASS)-Derivate der allgemeinen Formel 1:
  • worin R&sub1; Wasserstoff, α-Glutamyl (Glu) oder Aspartyl (Asp) ist und R&sub2; OH oder der Rest Leucyl-Prolyl ist, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff bzw. Hydroxy sein können.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel 1 .
  • Die Verbindungen der Erfindung der allgemeinen Formel 1 besitzen daher die folgenden Formeln: (R¹ = Glu und R² = OH) (R¹ = Asp und R² = OH) (R¹ = H und R² = Pro-Leu) (R¹ = Glu und R² = Pro-Leu) (R¹ = Asp und R² = Pro-Leu)
  • Die Erfindung betrifft auch nichttoxische Salze der obigen Verbindungen, sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen und Verfahren zu deren Herstellung.
  • Die genannten Verbindungen sind aufgrund ihrer topischen entzündungshemmenden Wirkung bei Schädigungen befallener Teile der Darmschleimhaut nützlich bei chronischen entzundlichen Darmerkrankungen.
  • Diese Aktivität beinhaltet Wechselwirkungen mit speziellen, auf dem Bürstensaum des Dünndarms vorhandenen Peptidasen, die selektiv die Aminosäurereste hydrolysieren können, wobei der wirksame Grundbestandteil 5-ASS freigesetzt wird. Es ist tatsächlich bekannt, daß einige entzündliche chronische Erkrankungen, wie Morbus Chron und die ulzeröse Entzündung bzw. der Katarrh des Kolons und des Rektums, seit vielen Jahren mit Arzneimitteln behandelt werden, die in der Lage sind, die Arachidonsäurederivate-Biosynthese, wie des PGE&sub2;, der Leucotriene und des Tromboxans B&sub2; zu hemmen. Sulfasalazin der Formel 7 war eines der ersten verwendeten Arzneimittel; es wird durch reduktive Spaltung der Azidbindung durch Darmbakterien zu 5-ASS und Sulfapyridin metabolisiert.1,2
  • Die Eigenschaften des Sulfasalazins scheinen nichttherapeutisch gegen Morbus-Chron und gegen die ulzeröse Entzundung bzw. den Katarrh des Kolons und des Rektums zu sein. Desweiteren ist das Sulfasalazin bei einigen Patienten für die folgenden Nebenwirkungen verantwortlich:
  • - Brechreiz und Anorexie (dosierungsabhängig),
  • - Hautausschlag, Blutdyskrasie (hydiosynkrasische Symptome),
  • - Abnahme der Anzahl und der Beweglichkeit der Spermatozoen.
  • Die gesamten obigen Wirkungen beruhen hauptsächlich auf Sulfapyridin, und bei ca. 10% der Patienten sind sie so ernst, daß sie den Abbruch der Behandlung erfordern.³
  • Des weiteren ist 5-ASS, der aktive Teil des Sulfasalazinmoleküls, beim pH des Magen nicht stabil und wird rasch im Dünndarm absorbiert.&sup4; Dies verhindert seine Verwendung als solche in der oralen Verwendung, es sei denn, in hohen Dosen.
  • Aminosalicyl-Derivate sind in der WO 86/03199 und der WO 81/02672 beschrieben. Darüber hinaus ist in der DE 2920292 eine Verbindung offenbart, die denjenigen der allgemeinen Formel 1 der vorliegenden Erfindung strukturell verwandt ist, d.h. ein L-γ-Glutamyl-3-carboxy-4-hydroxyanilid. Jedoch wird die genannte Verbindung für eine andere Anwendung vorgeschlagen, nämlich der Bestimmung der γ-GTP-Aktivität.
  • Die Verbindungen der allgemeinen Formel 1 mit speziellen Aminosäureresten, die an den 1-Carboxy- und/oder 5-Aminosubstituenten der korrespondierenden 5-ASS gebunden sind, werden in vivo in Höhe des Bürstensaums des Krummdarms hydrolysiert, wo spezielle Aminopeptidasen vorhanden sind (Aminopeptidasen A) 5-7,8,12, die in der Lage sind, selektiv eine N-terminale amidische Bindung zu hydrolysieren, wenn ein Glu- oder ein Asp- Rest an diese Position gebunden ist. Desweiteren ist bekannt, daß Dipeptide, die die Aminosäuren Glu oder Asp als endständige Reste enthalten, beständig gegen pankreatische Peptidasen sind 5-7, 8-10, ein wichtiges Erfordernis des Nichtauftretens der schnellen 5-ASS-Freisetzung. Schließlich ist im Bürstensaum stets eine zweite Klasse von Peptidasen vorhanden, nämlich die Carboxypeptidasen, die in der Lage sind, eine C-terminale Amidbindung zwischen einer Aminosäure und einem vor letzten Pro-Rest selektiv zu hydrolysieren.1-3,4-6
  • Dank dieser Eigenschaften können die Verbindungen der Erfindung dann einer chemoselektiven enzymatischen Hydrolyse unterliegen, so daß die 5-ASS direkt im distalen Darm freigesetzt werden kann.
  • Die Verbindungen der Erfindung werden leicht in flüssiger Phase mit Hilfe üblicher Verfahren für die Peptidsynthese, ausgehend von 5-Aminosalicylsäure, die geeignet geschützt ist, und anschließendem Reagieren mit N-geschützten Glutamin- oder Asparagin-Derivaten und/oder mit einem geeignet geschützten Leucyl-Prolyl-Derivat hergestellt. Die Entfernung der Schutzgruppen ergibt die gewünschten Verbindungen.
  • Ein allgemeines Synthese-Schema wird hierin unten berichtet und die experimentellen Bedingungen zur Herstellung der Verbindungen 2, 3, 4, 5 und 6 werden beschrieben. N-Cbz-L-methyl-glutamyl N-Cbz-L-methyl-aspartyl N-Cbz-L-methyl-glutamyl N-Cbz-L-methyl-aspartyl
    • 5-(N-Benzyloxycarbonyl)-aminosalicylsäure 8
  • 5-Aminosalicylsäure (30 g, 0,20 mol) wurde in einer gesättigten NaHCO&sub3;-Lösung (500 ml) suspendiert. Dann wurde festes NaHCO&sub3; (10 g) bei 0ºC unter Rühren zu der Suspension gegeben, und dann tropfenweise Benzylchlorformiat (36,7 g, 0,215 mol) hinzugegeben.
  • Als die Reaktion beendet war, war ein reichlicher Niederschlag des gewünschten Produkts entstanden, der abfiltriert wurde. Das Filtrat wurde mit Ethylether (2 x 100 ml) gewaschen, die wässrige Phase wurde mit 10%igem HCl angesäuert und mit Ethylacetat (3 x 100 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrokknet und im Vakuum eingedampft, um zusammen mit dem vorher abgetrennten Niederschlag 53 g von 8 (Ausbeute: 92%) zu ergeben.
  • ¹H-NMR (DMSO-d&sub6;):
  • ppm 5,17 (s, 2H, -CH&sub2;Ph); 7,00 - 8,05 (m, 8H, H-aromatisch); 9,8 (s, 1H, COOH).
    • 5-(N-Benzyloxycarbonyl)-amino-2-acetylsalicylsäure 9
  • Pyridin (1,39 ml) und Essigsäureanhydrid (35,5 g, 0,34 mol) wurden zu einer gerührten Suspension der Verbindung 8 in Essigsäure (280 ml) gegeben. Nach 2 Stunden wurde der gebildete Niederschlag abfiltriert und im Vakuum getrocknet. 40,1 g von 9 wurden erhalten (Ausbeute: 70%).
  • ¹H-NMR (MeOH-d&sub4;):
  • ppm 2,15 (s, 3H, -CO-CH&sub3;); 5,10 (s, 2H, -CH&sub2;Ph); 6,90 - 8,00 (m, 8H, H-aromatisch).
    • 5-(N-Benzylcarbonyl)-amino-2-acetylsalicylchlorid 10
  • Eine Suspension von 9 (35 g, 0,106 mol), Thionylchlorid (25,2 g, 0,21 mol), Pyridin (20 ml) in wasserfreiem Benzol (150 ml), die unter Rühren und Stickstoffatmosphäre gehalten wurde, wurde für 3 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Die resultierende klare Lösung wurde abgekühlt, um einen weißen Niederschlag zu erhalten, der abfiltriert und im Vakuum getrocknet wurde, um 29,89 g von 10 zu erhalten (Ausbeute: 81%).
    • 5-(N-Benzyloxycarbonyl)-amino-2-acetylsalicylsäuremethylester 11
  • Eine Suspension von 10 (10 g, 28,8 mmol) in Methanol (100 ml) wurde mit einem Magnetrührer bis zur vollständigen Auflösung (ca. 2 Stunden) gerührt. Die resultierende Lösung wird im Vakuum eingedampft, um 9,53 g von 11 zu ergeben (Ausbeute: 97%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):
  • ppm 2,2 (s, 3H, -CO-CH&sub3;); 3,8 (s, 3H, COOCH&sub3;); 5,10 (s, 2H, -CH&sub2;Ph); 6,8 - 7,9 (m, 8H, H-aromatisch).
    • 5-Amino-2-acetylsalicylsäuremethylester 12
  • Eine Lösung von 11 (7 g, 20,4 mmol) in Methanol (100 ml) und Ameisensäure (10 ml) wird in eine Palladiummohr enthaltende Kolonne gegossen. Das erhaltene Eluat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird aus Ethylacetat/n-Hexan kristallisiert, um 3,58 g von 12 zu ergeben (Ausbeute: 84%).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):
  • ppm 2,25 (s, 3H, -CO-CH&sub3;); 3,7 (s, 3H, COOCH&sub3;); 7,3 - 7,8 (m, 3H, H-aromatisch).
    • 5-(N-Benzyloxycarbonyl-L-methylglutamyl)-amino-2- acetylsalicylsäuremethylester 13 5-(N-Benzyloxycarbonyl-L-methylaspartyl)-amino-2- acetylsalicylsäuremethylester 14
  • Eine Lösung von N-Benzyloxycarbonyl-5-L-methylglutamyl (2,12 g, 7,18 mmol) oder von N-Benzyloxycarbonyl-4-L-methylaspartyl (2,01 g, 7,18 mmol) in wasserfreiem Methylenchlorid (10 ml), die unter Magnetrühren und Argonatmosphäre bei -10ºC gehalten wird, wird mit N-Methylmorpholin (1 ml, 7,9 mmol) und dann mit Chlorameisensäureisobutylester (Isobutylchlorformiat) (1 ml, 7,18 mmol) versetzt. Die Reaktionsmischung wird für 30 Minuten reagieren gelassen, dann wird sie filtriert und das Filtrat wird mit einer Lösung von 12 (7,15 mmol) in wasserfreiem Methylenchlorid (40 ml) vereint. Danach wird die Reaktionsmischung für 4 Stunden unter Magnetrühren und Argonatmosphäre gehalten, dann eingedampft und der Rückstand über eine Silicagel-Kolonne (d.-6cm, h.-20cm) chromatographiert, wobei zuerst mit Chloroform (500 ml) und dann mit Chloroform/Methanol (99:1) eluiert wird. 3,04 g von 13 (Ausbeute: 87%) oder 2,88 g von 14 (Ausbeute: 85%) wird erhalten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 13:
  • ppm 2.2 (s, 3H, -CO-CH&sub3;); 2.36 (m, 4H, -CH&sub2;-CH&sub2;-); 3.7 (s, 3H, COOCH&sub3;); 3.73 (s, 3H, COOCH&sub3;); 4.35 (m, 1H, -CH- NH-); 5.15 (s, 2h, -CH&sub2;Ph); 6.2 (d, 1H, NH); 7.15-8.05 (s, 3H, H-aromatisch).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 14
  • ppm 2.22 (s, 3H, -CO-CH&sub3;); 2.33 (m, 2H, -CH&sub2;-; 3.7 (s, 3H, COOCH&sub3;); 3.70 (s, 3H, COCCH&sub3;); 4.30 (m, 1H, -CH- NH-); 5.15 (s, 2h, -CH&sub2;Ph); 6.2 (d, 1H, NH); 7.15-8.05 (s, 3H, H-aromatisch).
    • 5-(N-L-Methylglutamyl)-amino-2-acetylsalicylsäuremethylester 15 5-(N-L-Methylaspartyl)-amino-2-acetylsalicylsäuremethylester 16
  • Eine Lösung von 13 (5 g, 10,29 mmol) oder 14 (4,85 g, 10,29 mmol) in Methanol (50 ml) und Ameisensäure (5 ml) wird in eine Palladiummohr enthaltende Kolonne gegossen. Das erhaltene Eluat wird unter vermindertem Druck eingedampft, und der Rückstand wird dann aus Ethylacetat/n-Hexan kristallisiert, um 3,44 g von 15 (Ausbeute: 95%) oder 3,34 g von 16 (Ausbeute 96%) zu ergeben.
    • (N-L-Glutamyl)-amino-2-salicylsäure 2 (N-L-Aspartyl)-amino-2-salicylsäure 3
  • Eine Lösung von 15 (2 g, 5,68 mmol) oder 16 (1,91 g, 5,68 mmol) in 2N NaOH (50 ml) wird für 6 Stunden bei Raumtemperatur unter Magnetrühren gehalten. Dann wird die Mischung mit 10%igem HCl angesäuert, um einen Niederschlag zu bilden, der abfiltriert und im Vakuum getrocknet wird, um 1,5 g von 2 (Ausbeute: 94%) oder 1,46 g von 3 (Ausbeute: 96%) zu ergeben.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 2
  • ppm 2.35 (m, 4H, -CH&sub2;-CH&sub2;-); 4.30 (m, 1H, -CH-NH-); 6.1 (d, 1H, NH); 7.2-8.05 (m, 3H, H-aromatisch).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 3
  • ppm 2.30 (m, 2H, -CH&sub2;-); 4.35 (m, 1H, -CH-NH-); 6.1 (d, 1H, NH); 7.2-8.05 (m, 3H, H-aromatisch).
    • 5-(N-Benzyloxycarbonyl)-amino-2-acetylsalicyl L-prolin-L- leucin-O-methyl 18
  • Eine Lösung von 10 (28 g, 0,08 mol) und 17 (19,4 g, 0,08 mol) in wasserfreiem Kohlenstofftetrachlorid (300 ml) wurde unter Magnetrühren und Stickstoffatmosphäre für 12 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Dann wird die Reaktionsmischung filtriert, und das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird auf Silicagel (d.-5cm, h.-20cm) chromatographiert, wobei mit Chloroform eluiert wird, um 25 g des Tripeptids 18 (Ausbeute: 57%) zu erhalten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 3
  • ppm 0.95 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.5-2.15 (m, 10H, -CO- CH&sub3;,-CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 3.15 (s, 3H, COOMe); 3.7 (m, 2H, -CH&sub2;-N-CO); 4.2-4.7 (m, 2H, -CH-CO, -NH-CH- COOMe); 5.1 (d, 2H, CH&sub2;Ph); 6.9-8.0 (m, 8H, H-aromatisch).
    • 5-Amino-2-acetylsalicyl L-prolin-L-leucin-O-methyl 19
  • Eine Lösung von 18 (17 g, 0,03 mol) in Methanol (110 ml) und Ameisensäure (11 ml) wird in eine Kolonne mit Palladiummohr gegossen. Das erhaltene Eluat wird unter vermindertem Druck eingedampft, dann wird der Rückstand mit einer gesättigten NaHCO&sub3;-Lösung (100 ml) gelöst und mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte werden mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft, um 10 g von 19 (Ausbeute: 80%) zu ergeben.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;)
  • ppm 0.95 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.6-2.35 (m, 10H, -CO- CH&sub3;,-CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 3.6-4.8 (m, 7H, COOMe, -CH&sub2;-N-CO, -CH-CO, -NH-CH-COOMe); 6.85 (m, 3H, H- aromatisch).
    • 5-Aminosalicyl L-prolin-L-leucin 4
  • Eine Lösung von 19 (5 g, 0,012 mmol) in 2N NaOH (50 ml) wird für 6 Stunden bei Raumtemperatur unter Magnetrühren gehalten, und dann wird die Reaktionsmischung mit 10%igem HCl neutralisiert, um einen Niederschlag zu bilden, der dann abfiltriert und im Vakuum getrocknet wird, um 4,09 g von 4 (Ausbeute: 94%) zu erhalten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;):
  • ppm 0.95 (2d, 6H, CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.6-2.30 (m, 7H, -CH&sub2;-CH, CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 4.2 (m, 4H, -NH-CH-COCH, CH&sub2;-N-CO, -CH-CO); 6.80-7.20 (m, 3H, aromatisch).
    • 5-[N-(N'-Benzyloxycarbonyl)-5'-methyl-L-glutamyl]-amino-2- acetylsalicyl L-prolin-L-leucin-O-methyl 20 5-[N-(N'-Benzyloxycarbonyl)-4'-methyl-L-aspartyl]-amino-2- acetylsalicyl L-prolin-L-leucin-O-methyl 21
  • Eine Lösung von N-Benzyloxycarbonyl-5-L-methylglutamyl (2,12 g, 7,18 mmol) oder von N-Benzyloxycarbonyl-4-L-methylaspartyl (2,01 g, 7,18 mmol) in wasserfreiem Methylenchlorid (10 ml) wird bei -10ºC unter Magnetrühren und einer Stickstoffatmosphäre mit N-Methylmorpholin (1 ml, 7,9 mmol) und dann mit Chlorameisensäureisobutylester (1 ml, 7,18 mmol) versetzt. Die Reaktionsmischung wird für 30 Minuten reagieren gelassen, dann abfiltriert, und das Filtrat wird mit einer Lösung des Tripeptids 19 (3 g, 7,15 mmol) in wasserfreiem Methylenchlorid (8 ml) vereint. Die Reaktionsmischung wird für 4 Stunden unter Magnetrühren und Argonatmosphäre gehalten, dann wird sie eingedampft und der Rückstand wird über eine Silicagel-Kolonne (d.- 3cm, h.-20cm) chromatographiert, wobei zuerst mit Chloroform (500 ml) und dann mit 99:1 Chloroform/Methanol eluiert wird. 3 g des Tripeptids 20 (Ausbeute: 60%) oder 3,18 g von 21 (Ausbeute: 65%) werden erhalten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 2:
  • ppm 0.85 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.35-2.50 (m, 14H, -CO- CH&sub3;, -CO-(CH&sub2;)&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH, -CO-CH-CH&sub2;-CH&sub2;-); 3.5-4.1 (m, 8H, COOMe, COOMe, -CH&sub2;-N-CO); 4.15-4.75 (m, 3H, -CO- CH-NHCbz, -NH-CH-COOMe, -N-CH-CO); 5.1 (s, 2H, -CH&sub2;Ph); 6.2-7.8 (s, 8H, aromatisch).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 21:
  • ppm 0.80 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.35-2.50 (m, 12H, -CO- CH&sub3;, -CO-CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH, -CO-CH-CH&sub2;-CH&sub2;-); 3.55-4.15 (m, 8H, COOMe, COOMe, -CH&sub2;-N-CO); 4.15-4.80 (m, 3H, -CO- CH-NHCbz, -NH-CH-COOMe, -N-CH-CO); 5.15 (s, 2H, -CH&sub2;Ph); 6.2-7.8 (s, 8H, aromatisch).
    • 5-(N-5'-Methyl-L-glutamyl)-amino-2-acetylsalicyl L-prolin-L- leucin-O-methyl 22 5-(N-4'-Methyl-L-aspartyl)-amino-2-acetylsalicyl L-prolin-L- leucin-O-methyl 23
  • Eine Lösung von 20 (3 g, 4,31 mmol) oder 21 (2,93 g, 4,31 mmol) in Methanol (50 ml) und Ameisensäure (50 ml) wird in eine Kolonne mit Palladiummohr gegossen. Das erhaltene Eluat wird unter vermindertem Druck eingedampft, dann wird der Rückstand mit gesättigter NaHCO&sub3;-Lösung (50 ml) gelöst und mit Ethylacetat (4 x 20 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte werden mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft, um 2,13 g des Tripeptids 22 (Ausbeute: 88%) oder 2,13 g von 23 (Ausbeute: 90%) zu ergeben.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 22:
  • ppm 0.85 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.37-2.40 (m, 14H, -CO- CH&sub3;, -CO-(CH&sub2;)&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 3.5-4.1 (m, 8H, COCMe, COOMe, -CH&sub2;-N-CO); 4.15-4.70 (m, 3H, -N- CH-CO, -NH-CH-COOMe, -CO-CH-NH&sub2;); 7.1-7.7 (s, 3H, H- aromatisch).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 23:
  • ppm 0.87 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.30-2.45 (m, 12H, -CO- CH&sub3;, -CO-CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 3.5-4.15 (m, 8H, COOMe, COOMe, -CH&sub2;-N-CO); 4.20-4.75 (m, 3H, -N-CH- CO, -NH-CH-COOMe, -CO-CH-NH&sub2;); 7.1-7.7 (s, 3H, H- aromatisch).
    • 5-(N-L-glutamyl)-aminosalicyl L-Prolin-L-leucin 5 5-(N-L-aspartyl)-aminosalicyl L-Prolin-L-leucin 6
  • Eine Lösung von 22 (2 g, 3,56 mmol) oder 23 (1,95 g, 3,56 mmol) in 2N NaOH (30 ml) wird für 6 Stunden bei Raumtemperatur mit einem Magnetrühren gerührt, und die Reaktionsmischung wird dann mit 10%igem HCl neutralisiert und gekühlt, um einen Niederschlag zu erhalten, der abfiltriert und im Vakuum getrocknet wird, um 1,75 g von 5 (Ausbeute: 99%) oder 1,62 g von 6 (Ausbeute: 95%) zu ergeben.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 5:
  • ppm 0.85 (2d, 6H, -CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.37-2.30 (m, 11H, -CO- (CH&sub2;)&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH -CO); 3.8 (m, 2H, -CH&sub2;-N- CO); 4.15-4.70 (m, 3H, -N-CH-CO, -CH-COOH, -CO-CH-NH&sub2;); 7.1-7.6 (m, 3H, aromatisch).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;) von 6:
  • ppm 0.85 (2d, 6H, CH(CH&sub3;)&sub2;); 1.35-2.35 (m, 9H, -CO-CH&sub2;- CH, -CH&sub2;-CH, -CH&sub2;-CH&sub2;-CH-CO); 3.83 (m, 2H, CH&sub2;-N-CO); 4.13-4.75 (m, 3H, -N-CH-CO, -CH-COOH, CO-CH-NH&sub2;); 7.1- 7.6 (m, 3H, aromatisch).
  • Am besten werden die pharmakokinetischen Eigenschaften der Verbindungen der vorliegenden Erfindung durch das Analysieren der zurückgewonnenen Urine und Fäzes auf 5-ASS und N-Acetyl-5- ASS verglichen mit 5-ASS als solcher und Sulfasalazin bewiesen.
  • Insbesondere werden männliche Fischerratten mit einem Gewicht von 200 - 250 g verwendet.
  • Ein Teil der Tiere wird der äußeren Kolostomie unterworfen. Nach einer Vollnarkose mit Hilfe von intraperitoneal verabreichtem Pentobarbital (Nembutal 7,5 mg/100 g Körpergewicht) wurde eine Median-Laparotomie durchgeführt, und dann der aufsteigende Dickdarm durchtrennt und mit der äußeren Unterleibswand verbunden, gefolgt vom Vernähen des Schnittes.
  • Nach ca. 7 Tagen, die erforderlich waren, die Darmfunktion wiederherzustellen, wurden 5-ASS, Sulfasalazin und die Derivate 2, 3, 4, 5 und 6 bei Dosierungen, die 60 mg/kg 5-ASS äquivalent waren, durch eine Metallsonde, die in den Magen eingeschoben wurde, verabreicht.
  • Die gleiche Verabreichung wurde auch bei Tieren durchgeführt, die nicht der Operation unterworfen worden waren.
  • Die Ratten wurden dann in Stoffwechselkäfige gegeben, aus denen Fäzes und Urin in 2 Stunden-Intervallen für 48 Stunden entnommen wurden.
  • Die Testergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt. Rückgewinnungsprozentanteile von 5-ASS + N-Acetyl-5-ASS in Fäzes und Urin duch HPLC Urin Fäzes 5-ASS Sulafasalazin Verbindung
  • Die Untersuchung beweist, daß die Verbindungen der vorliegenden Erfindung, verglichen mit Sulfasalazin und 5-ASS besonders aktiv sind.
  • Daher können die Verbindungen der vorliegenden Erfindung bequem als aktiver Bestandteil von pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Behandlung von chronischen entzündlichen Darmerkrankungen, wie von Morbus Chron und der ulzerösen Entzündung bzw. des Katarrhs des Kolons und des Rektums verwendet werden, da sie eine topische entzündungshemmende Wirkung auf beschädigte Trakte der Darmschleimhaut besitzen.
  • Beispiele der genannten pharmazeutischen Zusammensetzungen zur oralen Verabreichung umfassen: Kapseln, Perlen, Tabletten, Briefchen, die 200 bis 1000 mg des aktiven Bestandteils je Einheitsdosis umfassen und die zwei- bis dreimal täglich zu verabreichen sind, entsprechend der zu behandelnden Krankheit und den Erkrankungen des Patienten.
  • Pharmazeutische Zusammensetzungen für die rektale Verabreichung sind: Zäpfchen, die 200 bis 1000 mg des aktiven Bestandteils je Einheitsdosis enthalten, und die zwei- bis dreimal täglich zu verabreichen sind, und Einläufe, die 2 bis 10 g des aktiven Bestandteils je Einheitsdosis enthalten, und die zwei- bis dreimal täglich zu verabreichen sind, entsprechend der zu behandelnden Erkrankung und der Verfassung des Patienten.
  • Die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können andere aktive Bestandteile mit einer komplementären oder sonstwie nützlichen Wirkung enthalten.
    • Literaturstellen
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  • 2) K.M. Das, M.A. Eastwood, J.P. McManus und W. Sircus; Scand. J. Gastroen.; 1974, 9, 137
  • 3) K.M. Das, M.A. Eastwood, J.P. Mc Manus und W. Sircus; Eng. J. Med.; 1973, 289, 491.
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  • 9) H. Skovbjerg, O. Noren und H. Sjostran; Scand. J. Clin. Lab. Invest.; 1978, 38, 723.
  • 10) M. Triadou, J. Bataille und J. Schmitz; Gastroen.; 1983, 85, 1326.
  • 11) E.E. Sterchi, J.R. Green und M.J. Lentze; Biochem. Soc. Trans.; 1981, 9, 130.
  • 12) N. Tobey, W. Heizer, R. Yeh, T. Huang und C. Hoffer; Gastroen.; 1985, 88, 913.

Claims (5)

1. Verbindungen mit der allgemeinen Formel I
worin R&sub1; Wasserstoff, d-Glutamyl (Glu) oder Aspartyl (Asp) ist, und R&sub2; OH oder den Rest Leucyl-Prolyl bedeutet, mit der Maßgabe, daß R&sub1; und R&sub2; nicht gleichzeitig Wasserstoff beziehungsweise Hydroxy sein können.
2. Verbindung nach Anspruch 1 mit den folgenden Formeln 2-6 (R¹=Glu und R²=OH) (R¹=Asp und R²=OH) (R¹=H und R²=Pro-Leu) (R¹=Glu und R²=Pro-Leu)
(R&sub1;=Asp und R²=Pro-Leu)
3. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Ansprüche 1- 2, umfassend die Umsetzung eines geeignet geschützten 5- Aminosalicylsäurederivats mit einem geschützten Glutamin- oder Aspartamsäurederivat und/oder mit einem geeignet geschützten Leucyl-Prolyl-derivat, gefolgt von der Entfernung der Schutzgruppen.
4. Pharmazeutische Zusammensetzungen, enthaltend als aktiven Bestandteil eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1-2 in einem Gemisch mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger.
5. Verwendung der Verbindungen der Ansprüche 1-2 zur Herstellung von Medikamenten für die Behandlung von chronischen Darmentzündungen, Morbus Crohn und Colitis ulcerosa.
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