DE677844C - Verfahren zum Reinigen von Extrakten, die das Nebennierenrindenhormon enthalten - Google Patents

Description

• Verfahren zum Reinigen von Extrakten, die das Nebennierenrindenhormon enthalten Extrakte, die das Nebennierenrindenhormon enthalten, müssen von den darin besonders reichlich vorhandenen Begleitstoffen von Lipoldcharakter einerseits und dem Adrenalin andererseits befreit werden, da diese durch ihren störenden Geschmack und ihre Giftwirkung die orale oder parenterale Verabreichung des Nebennierenrindenhormons erschweren.
• Das Nebennierenrindenhormon wird auf die Weise gewonnen, daß man die Drüsen mit Alkohol extrahiert und das Extrakt weiter reinigt. Ein viel benutztes und sehr zuverlässiges Reinigungsverfahren ist von Swing 1 e und P f i f f n e r angegeben worden. Bei diesem Verfahren zieht plan die Drüsen mit Alkohol aus, entfernt den Alkohol im Vakuum und fraktioniert anschließend mit Benzol und Aceton sowie Petroläther und 70%igem Alkohol. Die vorgerei:nigte Lösung wird dann über Permutit filtriert, um das' Adrenalin zu entfernen. Eine Abwandlung der angegebenen Arbeitsweise besteht darin, daß die Extraktion der Drüsen anstatt mit Alkohol mit Aceton durchgeführt wird. Die Acetonextrakte werden dann in ähnlicher Weise wie die Alkoholextrakte weiter gereinigt. Diese Arbeitsweise ist langwierig und erfordert große Mengen organischer Lösungsmittel.
• Im folgenden wird ein neues einfacheres Verfahren zur Abtrennung der Begleitstoffe und des Adrenalins beschrieben, bei dem in der Lösung des Nebennierenrindenhormons ein Niederschlag einer Ferrdverbindung, z. B. Ferrohydroxyd, Ferrophosphat oder Ferrocarbonat, erzeugt wird. Der Niederschlag wird abgetrennt und die Lösung gegebenenfalls konzentriert. Man erhält so in einfacher Weise ein wirksames und gut verträgliches Nebennierenrindenhormonpräparat. Will man das Präparat noch von -anorganischen Salzen befreien, so kann man der wäßrigen Lösung das Hormon in an sich bekannter Weise mit Benzol, Äther, Chloro-. form, Dichloräthylen oder einem anderen organischen Lösungsmittel entziehen.
• Das Verfahren läßt sich so4vohl auf die Ver-' arheitung vom frischen Nebennierenrinden als auch von Nebennierenrindentrockenpulver anwenden, ebensogut kann man jedoch ganze Nebennieren frisch oder getrocknet als Ausgangsmaterial für das vorliegende Verfahren benutzen.
• Die Erzeugung von Niederschlägen aus Ferroverbindwngen ist .als Mittel zum Ersteiweißen von Hormonlösungen bekannt. Daraus konnte jedoch nicht gefolgert werden, daß eiweißfreie Nebennierenauszüge durch Erzeugen derartiger Niederschläge von lipoidartigen Ballaststoffen und besonders von Adrenalin befreit werden könnten. Beispiel" i q.o kg frische Nebennieren werden mehrfach mit 70%igem Alkohol ,ausgezogen. Die vereinigten Extrakte werden im Vakuum bei niedriger Temperatur zur Befreiung von Alkohol ,auf etwa i o 1 eingeengt. In die konzentrierte wäßrige Lösung rührt man eine konzentrierte Lösung von 2 kg Ferrosulfat (Eisenvitriol) ein und bringt dann durch Zugabe von Calcum bzw. Barium-oder Strontiumhydroxyd das PH auf 8,5 bis g. Dabei entsteht eine voluminöse Fällung von Ferrohydroxyd, -die alle störenden Begleitstoffe von Lipoidcharakter und das Adrenalin nut sich niederreißt. Man entfernt den Niederschlag durch Filtrieren oder Zentrifugieren und bringt das klare Filtrat mit Phosphorsäure auf ein pH von 6,5. Dabei tritt eine leichte Fällung von Calciumphosphat ein bzw. Barium- oder Strontiumphosphat, die ab.-filtriert und verworfen wird. Der auf diese Weise erhaltene Extrakt wird nun auf das gewünschte Volumen eingeengt und ist in dieser Form für orale oder parenterale Verabreichung ,geeignet. Beispiel z i o kg Nebennierenpulver, gewonnen durch Vakuumtrocknung, werden mehrfach mit 70%igem Alkohol ausgezogen. Die vereinigten Auszüge werden zur Entfernung des Alkohols im Vakuum auf ,etwa 9 1 eingeengt. Das wäßrige Konzentrat wird mit einer konzentrierten wäßrigen Lösung von 1400 g Ferrochlorid versetzt und mit Natronlauge bzw: Kalilauge oder Ammoniak auf pii 8,5 bis 9 gebracht. Die dabei entstehende Fällung von Ferrohydroxyd wird durch Abfiltrieren oder Abschleudern entfernt oder verworfen. Das Filtrat wird mit Phosphorsäure auf pH 6,5 gebracht, die dabei eintretende Fällung von Calciumphosphat aus der Lösung abfiltriert und verworfen. Das Filtrat enthält das Nebennierenrindenhormon frei von störenden Lipoiden und Adrenalin. Zur Entfernung der gelösten Elektrolyte wird es in bekannter Weise wiederholt mit Benzol ausgezogen, wobei das Hormon in die Benzolphase geht. Die vereinigten. Benzolauszüge werden im Vakuum durch Abdampfen vom Benzol befreit. 'Der Abdampfrückstand kann in einer beliebige Menge von o,9oloiger Kochsalzlösung oder im. einer analogen für Injektionszwecke verwendbaren isotonischen Lösung aufgenommen werden. Er ist gut verträglich und hochwirksam. Beispiel 3 40 kg frische Nebennierenrinden werden, wie in Beispiele ßngegeben, mit Alkohol ausgezogen. Nach Entfernen des Alkohols wird das wäßrige Konzenträ.t mit einer konzentrierten Lösung von i ooo g Ferrochlorid versetzt und mit Natrium- bzw. Kaliumcarbonat auf ein pH von 8,5 bis 9 gebracht. Die auf diese Weise entstehende Fällung von Ferrocarbonat schlägt Adrenalin und störende Lipoide aus der Lösung nieder. Sie. wird durch Abfiltrieren oder Abschleudern abgetrennt und verworfen. Das Filtrat wird reit Phosphorsäure :auf PH 6,5 gebracht, das dabei ausfallende Calciumphosphat abfiltriert. Das Filtrat enthält dass Nebennierenrindenhormon frei von Lipoiden kund Adrenalin und kann in dieser Form oral ;oder parenteral verabreicht werden. Beispiel q iokg Nebennierenrindenpulver werden, wie in Beispiel i angegeben, extrahiert. Nach Abdampfen des Alkohols wird das wäßrige Konzentrat mit 1350g Ferrosulfat versetzt, worauf man mit Natriumphosphatlösung das pH auf 8,5 bis 9 bringt. Bei diesem pH erfolgt eine kräftige Ausscheidung von Ferrophosphat, die in gleicher Weise wie in den Beispielen i bis 3 angegeben, Adrenalin und alle anderen. störenden Begleitstoffe niederschlägt. Die weitere Verarbeitung erfolgt wie in Beispiel 2 angegeben, jedoch mit dem Unterschiede, daß zur Gewinnung des salzfreien Hormons die wäßrige Lösung des Nebennierenrindenhormons nach dem Abfiltrieren des Calciumphosphats mit Äther oder Chloroform ausgeschüttelt wird. Das Hormon geht in die Äther- bzw. Chloroformphase und kann daraus durch Abdampfen in hochgereinigter Form gewonnen werden.

Claims (1)

1. PATENTANSPRÜCHE: i. Verfahren zur Befreiung von eiweißfreien Auszügen, die Nebennierenrinden.-hormon enthalten, vorn Lipoiden und Adrenalin, dadurch gekennzeichnet, daß man in den Auszügen einen Niederschlag einer Ferroverbvndung, z. B. Ferrohydroxyd, Ferrocarbonat oder Ferrophosphat, erzeugt. z. Verfahren nach Anspruch i, dadurch g e 'kennzeichnet, #daß man den so gereinig t' ten Extrakten, gegebenenfalls nach vorherigem Einengen, die Wirkstoffe mit organischen Lösungsmitteln entzieht.