DE565065C

DE565065C - Verfahren zur getrennten Gewinnung einer blutdruckerhoehenden Substanz und einer aufden Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substanz aus dem Hypophysenhinterlappen

Info

Publication number: DE565065C
Application number: DEP59340D
Authority: DE
Original assignee: Davis & Co; Parke Davis and Co LLC
Current assignee: Davis & Co; Parke Davis and Co LLC
Priority date: 1927-12-31
Filing date: 1928-12-25
Publication date: 1932-11-25
Also published as: US1960493A

Description

Verfahren zur getrennten Gewinnung einer blutdruckerhöhenden Substanz und einer auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substanz aus dem Hypophysenhinterlappen Gegenstand vorliegender Erfindung bildet ein VErfahren zur getrennten Gewinnung einer blutdruckerhöhenden Substanz und einer auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substanz aus dem Hypophysenhinterlappen.
Es ist bis jetzt die Auffassung vertreten worden, daß der wäBrige Auszug aus dem Hypophysenhinterlappen eine einheitliche aktive Substanz enthält. Es wurde nun gefunden, daß diese Auffassung nicht richtig ist, daß man vielmehr zwei Substanzen abtrennen kann, von denen die eine den Blutdruck erhöht und die andere auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkt. Das Verfahren besteht darin, daB man die aus dem Auszug des Hypophysenhinterlappens gewonnene Substanz mit organischen Carbonsäuren, z. B. konzentrierte Essig- oder Propionsäure, auszieht und aus dieser Lösung nach dem Enteiweißen durch fraktionierte Fällung mit mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmitteln, wie Äther und Petroläther, die beiden Stoffe getrennt gewinnt.
Beispiel ioo g des mit Aceton behandelten entfetteten Hinterlappenpulvers, wie es im Handel zu erhalten ist, werden mit r0 1 1/4°;!oiger Essigsäure behandelt. Das Gemisch wird eine halbe Stunde lang auf 95°C erwärmt, schnell abgekühlt und filtriert. Der Rückstand wird mit einem Liter mit Essigsäure angesäuerten Wassers ausgezogen. Die vereinigten Filtrate werden bei niedriger Temperatur, z. B. durch einen Strom warmer Luft, auf einen Liter konzentriert und mit55ogAmmoniumsulfatversetzt. DerNiederschlag wird abfiltriert, getrocknet ur_d gepulvert. Das Gewicht beträgt ungefähr 2o bis 40 g je nach der Menge des vorhandenen Salzes. Dieses Produkt wird dann mit insgesamt 500 ccm reiner Essigsäure (99 bis ioo °/o) stufenweise ausgezogen.
In den vereinigten Auszügen wird die gesamte aktive Substanz mit i2jo ccm Schwefeläther und 25oo ccm Petroläther vollkommen ausgefällt, abgesaugt, mit Äther gewaschen und getrocknet. Man erhält etwa 5 bis xo g an Wirkstoff.
Die so vereinigte aktive Substanz wird in folgender Weise aufgearbeitet 5 g des Materials werden in 250 ccm 98°/oiger Essigsäure bei einer Temperatur von 40° C gelöst und mit dem 21/2fachen Volumen von Schwefeläther, der vorher auf 3o° erhitzt ist, versetzt. Den flockenartigen Niederschlag läßt man absitzen, was ungefähr 5 Minuten dauert. Der Niederschlag wird abgesaugt, mit Äther gewaschen und getrocknet. Das erhaltene Produkt wird dann wieder in 25o ccm 980,ioiger Essigsäure aufgelöst und wie vorher gefällt. Das gewonnene Material wiegt 4,5 bis 4,7 g.
Das Produkt enthält den wesentlichen Teil der blutdruckerhöhenden Substanz, vermischt mit geringeren Anteilen an auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkender Substanz. Das Filtrat enthält die auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkende Substanz mit Spuren von Salz. Diese Substanz kann durch Hinzufügen von Petroläther ausgefällt werden. Man geht dabei. in folgender Weise vor:-Die essigsauren Ätherfiltrate werden durch hartes Filtrierpapier filtriert und die klaren Filtrate mit io ccm Wasser und 2 Volumen (ungefähr 31) Petroläther behandelt. Es bildet sich ein feiner Nebel, der innerhalb mehrerer Stunden sich an den Seiten und dem Boden des Behälters ansammelt. Die klare Flüssigkeit wird abgegossen und der gummiartige Niederschlag in 5o ccm Wasser gelöst und filtriert. Das Filtrat enthält den wesentlichen Teil der auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substarz und nicht mehr als 3 bis q.°/0 der blutdruckerhöhenden Substanz.
Die blutdruckerhöhende Substanz, deren Gewinnung weiter oben beschrieben ist, kann in folgender Weise gereinigt und von den darin noch enthaltenen Bestandteilen an auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkender Substanz befreit werden 5 g der Substanz werden in ioo ccm 980;1oiger Essigsäure bei Zimmertemperatur gelöst und die Lösung durch Filtrieren oder Absaugen von einer kleinen Menge ungelöster Stoffe getrennt.
Zum Filtrat werden q o ccm Aceton zugegeben. Der Niederschlag, der in der Hauptsache aus Eiweiß besteht, wird abfiltriert und mit Äther gewaschen.
Die Behandlung mit Aceton wird nochmals wiederholt, und dem Filtrat werden ungefähr 25 ccm Schwefeläther zugesetzt. Der Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet.
Das Filtrat hiervon wird mit 125 ccm Schwefeläther behandelt und der Niederschlag filtriert und getrocknet.
Aus der Mutterlauge wird mit einem LUberschuß (ungefähr 5oo ccm) von Schwefeläther der Rest der Blutdruckerhöhungssubstanz niedergeschlagen.
Die ätherische Lösung enthält die Hauptmenge der auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substanz. Die letztere kann durch Zusatz von Petroläther, wie oben angegeben ist, niedergeschlagen werden. Man erhält so eine gummiartige Masse, die in Form eines weißen festen Stoffes durch Lösen in Alkohol und Ausfällen mit Äther erhalten wird.
Es gelingt, durch wiederholtes Lösen und fraktioniertes Fällen eine weitere Reinigung der Substanzen zu bewirken.
Beide Substanzen sind basisch und enthalten Kohlenstoff, Wasserstoff, Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff. Beide werden leicht durch starke Säuren und Alkalien zersetzt.
Es ist nicht nötig, daß als Ausgangsstoff für das Verfahren das durch Ausziehen des Hypophysenhinterlappens und nachfolgendes Aussalzen in an sich bekannter Weise erhaltene Produkt verwendet wird, man kann viehmehr auch unmittelbar von dem Hypophysenhinterlappen selbst ausgehen, indem man diesen durch Behandlung mit Aceton trocknet und entfettet und dann mit Essigsäure behandelt.

Claims

PATENTANSPRÜCHE: x. Verfahren zur getrennten Gewinnung einer blutdruckerhöhenden Substanz und einer auf den Uterusmuskel zusammenziehend wirkenden Substanz aus dem Hypophysenhinterlappen, dadurch gekennzeichnet, -daß der Hypophysenhinterlappen oder das in an sich bekannter Weise durch Extraktion und Aussalzen daraus gewonnene Produkt mittels organischer Carbonsäuren ausgezogen wird und daß aus dieser Lösung nach dem Enteiweißen durch fraktionierte Fällung mittels mit Wasser nicht mischbarer organischer Lösungsmittel, wie Äther und Petroläther, die beiden Stoffe getrennt gewonnen werden.
2. Ausführungsform nach Anspruch i, dadurch gekennzeichnet, daß die aus dem Hypophysenhinterlappenerhaltenen Auszüge vor der fraktionierten Fällung der aktiven Substanzen durch Acetonzusatz von Eiweißstoffen befreit werden.
3. AusführungsformnachArispruchz und 2, dadurch gekennzeichnet, daß die aktiven Niederschläge durch Lösen in den genannten Carbonsäuren und fraktioniertes Fällen der Lösung gemäß Anspruch i weiter gereinigt werden.