DE60100866T2

DE60100866T2 - Cyklosporin, Hyaluronsäure und Polysorbate enthaltenes Augenarzneimittel

Info

Publication number: DE60100866T2
Application number: DE60100866T
Authority: DE
Inventors: Guido Di Napoli
Original assignee: Laboratoire Medidom SA
Current assignee: Laboratoire Medidom SA
Priority date: 2000-04-07
Filing date: 2001-03-23
Publication date: 2004-07-29
Anticipated expiration: 2021-03-24
Also published as: SK4602001A3; ZA200102769B; ES2206363T3; CN1317342A; EP1142566B1; PT1142566E; AU3340401A; AR028291A1; PL201055B1; CA2342133A1; PL346926A1; TR200302105T4; CZ20011229A3; CN1185009C; SK285220B6; JP2001316284A; EP1142566A1; CZ294385B6; ATE250924T1; CA2342133C

Description

Diese Erfindung betrifft eine topische ophthalmische Rezeptur mit einem Cyclosporin.
Die Cyclosporine stellen eine Klasse unpolarer cyclischer Oligopeptide dar, die zahlreiche pharmakologische Eigenschaften besitzen.
Insbesondere sind sie für ihre immunsuppressive and entzündungshemmende Aktivität bekannt, ferner ist ihre Wirksamkeit beschrieben worden, die Tränensekretion durch die Tränendrüse bei Patienten, die an immunvermittelter Keratoconjunctivitis sicca leiden, zu erhöhen oder wiederherzustellen.
Die Cyclosporine natürlichen Ursprungs, die in der Hauptsache das Cyclosporin A und daneben die Cyclosporine B bis I enthalten, können aus dem Pilz Trichoderma polysporum gewonnen werden.
Die Cyclosporine wie auch eine grosse Anzahl ihrer Analogen und Isomeren können gleichermassen synthetisch gewonnen werden.
Unter den Cyclosporinen ist das Cyclosporin A auf dem pharmazeutischen Gebiet am meisten untersucht und eingesetzt worden.
Die Aktivität eines Cyclosporins und insbesondere des Cyclosporins A, die Tränensekretion durch die Tränendrüse zu erhöhen oder wiederherzustellen, könnte verbessert werden, indem die Absorption des Cyclosporins in der Tränendrüse verbessert wird.
Wegen der sehr geringen Wasserlöslichkeit der Cyclosporine (20 bis 30 μg/ml beim Cyclosporin A) ist es sehr schwierig gewesen, eine ophthalmische Zusammensetzung zuzubereiten, die ein in einem wässrigen Medium gelöstes Cyclosporin enthält.
Deshalb sind die als lipophil bekannten Cyclosporine hauptsächlich in Rezepturen auf der Basis von Öl eingesetzt worden.
Im Dokument US-A-4 839 342 wird eine topische ophthalmische Zusammensetzung beschrieben, die ein Cyclosporin und insbesondere das Cyclosporin A sowie ein Vehikel enthält, um die Tränenproduktion bei Patienten zu erhöhen, die wegen einer Funktionsstörung der Tränendrüsen an einem Mangel an Tränen in den Augen leiden. Die konkret beschriebenen Vehikel sind Olivenöl, Erdnussöl, Rizinusöl, polyethoxyliertes Rizinusöl, Mineralöle, Vaselinen, Dimethylsulfoxid, ein Alkohol, Liposome, Siliconöle und deren Mischungen.
Im Dokument FR-A-2 638 089 wird eine topische ophthalmische Zusammensetzung beschrieben, die als Wirksubstanz ein Cyclosporin sowie als Vehikel ein Pflanzenöl wie Olivenöl, Erdnussöl, Rizinusöl, Sesamöl und Maisöl sowie eine Vaseline enthält, um das Auge betreffende Krankheiten und immunologische oder entzündliche Zustände und insbesondere die Keratoconjunctivitis sicca (KCS) oder die trockenen Augen zu behandeln.
Topische ophthalmische Rezepturen auf Ölbasis weisen aber Nachteile wie eine unangenehme Empfindung in den Augen auf oder führen zu einem verschwommenen Sehen. Darüber hinaus können die Öle die Symptome der trockenen Augen verstärken.
Ausserdem sind topische ophthalmische Rezepturen auf Ölbasis, die ein Cyclosporin enthalten, physikalisch instabil, und zwar weil die Cyclosporine dazu neigen, Konformationsänderungen zu erleiden und auszufallen.
Darüber hinaus weisen diese Rezepturen eine geringe biologische Verfügbarkeit und eine geringe Augenverträglichkeit auf, die sich durch eine Reizung der Augen äussert.
Mit dem Ziel, bestimmte unter den obigen Nachteilen wie zum Beispiel die Unannehmlichkeiten beim Einsatz auf ein Minimum zu beschränken sowie die biologische Verfügbarkeit und die Verträglichkeit der Rezeptur zu verbessern, ist im Dokument WO 95/31211 vorgeschlagen worden, die Menge an Öl zu verringern und die Ölphase in Wasser zu zerteilen, um eine Emulsion zu bilden, was zu einer topischen ophthalmischen Rezeptur in Gestalt einer Emulsion auf der Basis von Wasser und Öl geführt hat, die ein Cyclosporin im Gemisch mit einem Triglycerid mit langkettigen Fettsäuren wie Rizinusöl sowie mit Polysorbat 80 enthält. Diese Rezeptur enthält ausserdem einen Emulgator, zum Beispiel Pemulen^®.
Im Dokument JP-A-05 058 906 ist eine wässrige ophthalmische Zusammensetzung (Augentropfen) beschrieben worden, die Cyclosporin A und ein zwischen Polysorbat 80, polyethoxylierten Fettsäureestern und deren Mischungen ausgewähltes Tensid enthält.
Ebenfalls mit dem Ziel, die Probleme der Ausfällung des Cyclosporins zu unterdrücken und gleichzeitig die biologische Verfügbarkeit und die Verträglichkeit der Rezeptur zu verbessern, ist im Dokument US-A-S 951 971 (WO 93/23010) eine ölfreie wässrige ophthalmische Rezeptur vorgeschlagen worden, die ein Cyclosporin in einer Konzentration von 0,01 bis 0,075% (Gew./Vol.), Wasser sowie ein Tensid in einer Menge von 0,1 bis 3 (Gew./Vol.) enthält, das dafür bestimmt ist, die Löslichkeit des Cyclosporins in Wasser zu verbessern und das zwischen den polyethoxylierten Fettsäureestern, den polyethoxylierten Alkylphenylethern, den polyethoxylierten Alkylethern und deren Mischungen ausgewählt wird. Gemäss US-A-S 951 971 hat sich das Polysorbat 80, auch als Tween 80 bekannt, als Tensid nicht als geeignet erweisen, und zwar deshalb, weil es keine genügend hohe Aktivität besitzt, um ein Cyclosporin in den gewünschten Konzentrationen in Wasser zu solubilisieren.
Es ist das Ziel der vorliegenden Erfindung, die obigen Nachteile abzustellen, namentlich die Probleme der physikalischen Stabilität, und insbesondere die biologische Verfügbarkeit der Rezeptur in der Bindehaut, der Hornhaut und der Tränendrüse sowie die Augenverträglichkeit der Rezeptur zu verbessern, indem eine auf Wasser basierende topische ophthalmische Rezeptur zur Verfügung gestellt wird, die ein Cyclosporin enthält.
Dieses Ziel wurde erreicht, nachdem die Erfinder gefunden hatten, dass es in Gegenwart von Hyaluronsäure und von Polysorbat 80 in einer Cyclosporin enthaltenden wässrigen ophthalmischen Rezeptur überraschenderweise möglich war, das Cyclosporin zu solubilisieren und gleichzeitig die biologische Verfügbarkeit der Rezeptur in der Bindehaut, in der Hornhaut und in der Tränendrüse sowie die Augenverträglichkeit der Rezeptur zu verbessern, wenn diese Rezeptur örtlich in die Augen verabreicht wird.
Die Hyaluronsäure ist ein Mucopolysaccharid biologischen Ursprungs, das in der Natur weit verbreitet ist. Es kommt namentlich in verschiedenen tierischen Geweben wie den Nabelschnüren, der Synovialflüssigkeit, dem Glaskörper, den Hahnenkämmen und verschiedenen Bindegeweben wie der Haut und dem Knorpel vor.
Chemisch ist die Hyaluronsäure ein Glykosaminoglykan und besteht aus abwechselnden und wiederholten Einheiten der D-Glucuronsäure und des N-Acetyl-D-glucosamins, die eine lineare Kette mit einem Molekulargewicht von bis zu 13 × 10⁶ Dalton bilden.
Der pharmazeutische Einsatz der Hyaluronsäure bzw. eines ihrer Salze, insbesondere des Natriumhyaluronats, ist in der Literatur breit beschrieben worden.
Da die Hyaluronsäure bzw. ein Salz dieser Säure eine nichtimmunogene Substanz ist und hydrophile und viskoelastische Eigenschaften besitzt, wird sie seit mehreren Jahren als ein Ersatz für den Glaskörper des Auges bzw. als Trägermedium in der Augenchirurgie verwendet, wie zum Beispiel in US-A-4 141 973 beschrieben.
Weitere Anwendungen der Hyaluronsäure auf dem Gebiet der Ophthalmologie sind ebenfalls beschrieben worden.
So wird im Dokument EP-A-0 698 388 eine wässrige ophthalmische Zusammensetzung beschrieben, die ein Salz der Hyaluronsäure in einer Konzentration von 0,05 bis 2% als ein Mittel enthält, die Viskosität zu erhöhen, um als künstliche Tränenflüssigkeit eingesetzt zu werden.
Im Dokument WO-A-89/01772 wird eine topische ophthalmische Zusammensetzung auf Ölbasis beschrieben, die ein Cyclosporin enthält, um die Sekretion von Tränen durch die Tränendrüse zu erhöhen oder wiederherzustellen. Die Hyaluronsäure wird in einer Liste von Produkten angeführt, die in die Rezeptes als Additive oder als zusätzliche Wirkstoffe eingebaut werden können.
Einem ersten Aspekt zufolge hat die vorliegende Erfindung eine topische ophthalmische Rezeptur auf Wasserbasis zum Gegenstand, die ein Cyclosporin, Hyaluronsäure oder ein Salz dieser Säure sowie Polysorbat 80 enthält.
Einem zweiten Aspekt zufolge hat die vorliegende Erfindung die Verwendung eines Cyclosporins in Gemeinschaft mit Hyaluronsäure oder einem Salz dieser Säure sowie mit Polysorbat 80 zur Zubereitung einer Rezeptur auf Wasserbasis zum Gegenstand, die für einen topischen ophthalmischen Einsatz bestimmt ist.
Die vorliegende Erfindung liefert somit eine ophthalmische Rezeptur in Gestalt einer wässrigen Lösung, in der das Cyclosporin in mizellärer Form solubilisiert ist, die stabil ist und die eine gute biologische Verfügbarkeit in der Bindehaut, der Hornhaut, der Tränendrüse und dem Glaskörper sowie eine Augenverträglichkeit aufweist, die gegenüber einer Rezeptur, in der das Cyclosporin in einer Wasser-Öl-Emulsion solubilisiert ist, beträchtlich verbessert sind.
Weitere Vorteile der vorliegenden Erfindung werden aus der folgenden, eingehenden Beschreibung der Erfindung hervorgehen.
In der vorliegenden Anmeldung soll der Ausdruck „Cyclosporin" so verstanden werden, dass er jeden beliebigen einzelnen Vertreter der Klasse der Cyclosporine sowie deren Mischungen einschliesst, sofern nicht ein besonderes Cyclosporin genannt wird.
Es sei ebenfalls bemerkt, dass in der vorliegenden Anmeldung der Ausdruck „Hyaluronsäure" ohne Unterschied die Hyaluronsäure in ihrer sauren Form oder in Gestalt eines ihrer Salze bedeutet.
Gemäss der vorliegenden Erfindung enthält die Rezeptur der vorliegenden Erfindung ein Cyclosporin, Hyaluronsäure oder eines ihrer Salze sowie Polysorbat 80.
Die Rezeptes gemäss vorliegender Erfindung enthält bevorzugt 0,02 bis 2 Gewichtsprozent an Cyclosporin, 0,01 bis 2 Gewichtsprozent an Hyalonsäure oder einem ihrer Salze sowie 0,5 bis 40 Gewichtsprozent an Polysorbat 80, bezogen auf das Gesamtgewicht der Rezeptes.
Die Cyclosporine, die in der Rezeptes der vorliegenden Erfindung enthalten sein können, können entweder natürlichen oder synthetischen Ursprungs sein.
Einer bevorzugten Ausführungsform gemäss ist das in der Rezeptur enthaltene Cyclosporin ein Cyclosporin A.
Ein Cyclosporin A, das eingesetzt werden kann, um die Rezeptes der vorliegenden Erfindung zuzubereiten, ist zum Beispiel ein von Sigma in der Schweiz erhältliches, handelsübliches Cyclosporin A.
Die in der Rezeptes enthaltene Hyaluronsäure kann entweder in ihrer sauren Form oder in Gestalt eines ihrer Salze wie eines Alkali- oder Erdalkalimetallhyaluronats vorliegen, zum Beispiel des Natriumhyaluronats, des Kaliumhyaluronats, des Magnesiumhyaluronats, des Calciumhyaluronats oder anderer.
Die Hyaluronsäure oder ihr Salz hat bevorzugt ein Gewichtsmittel des Molekulargewichts von nicht weniger als 1 000 000 Dalton, stärker bevorzugt ein Gewichtsmittel des Molekulargewichts im Bereich von 1 300 000 bis 3 000 000 Dalton. Bevorzugt liegt das Molekulargewicht bei etwa 1 700 000 Dalton.
Bevorzugt liegt die Hyaluronsäure in Gestalt des Natriumhyaluronats vor.
Das Polysorbat 80, auch Tween 80 genannt, ist ein Polyethoxysorbitanmonooleat, das für seinen Einsatz als Tensid bekannt ist.
Ein Polysorbat 80, das verwendet werden kann, um die Rezeptur der vorliegenden Erfindung zuzubereiten, ist zum Beispiel ein von Sigma erhältliches, handelsübliches Polysorbat 80.
In einer besonders bevorzugten Ausführungsform enthält die Zusammensetzung 0,2 Gewichtsprozent an Cyclosporin A, 0,1 Gewichtsprozent an Hyaluronsäure und 5 Gewichtsprozent an Polysorbat 80, bezogen auf das Gesamtgewicht der Rezeptur.
Die Rezeptur der vorliegenden Erfindung kann ausserdem Additive wie Sorbit enthalten, das als isoosmotisches Mittel eingesetzt wird. Der Vorteil des Sorbits besteht darin, dass sein hydrodynamisches Volumen grösser als zum Beispiel das des NaCl ist. Weitere mögliche Additive sind der Mannit, die Polyole sowie Natrium- und Kaliumchlorid.
Damit die Rezeptur der vorliegenden Erfindung physiologisch annehmbar ist, sollte sie bevorzugt einen pH-Wert haben, der im Bereich von 6,5 bis 7,5 liegt, sowie eine Osmolalität, die im Bereich von 290 bis 310 mOsm/l, bevorzugt bei 300 mOsm/l liegt.
Die Rezeptur der vorliegenden Erfindung kann in Gestalt von Monodosierungen konfektioniert werden.
Die topische Rezeptur der vorliegenden Erfindung wird in Gestalt von Tropfen in die Augen verabreicht und eingesetzt, um die Sekretion der Tränen durch die Tränendrüse zu erhöhen oder wiederherzustellen, sowie auch dafür, die Aktivität der Tränendrüse anzuregen oder wiederherzustellen, und zwar insbesondere bei Patienten, die an Keratoconjunctivitis sicca, am Sicca-Syndrom, am Sjögren-Syndrom oder an chronischer Frühlings-Keratokonjunktivitis leiden, sowie als postoperative Prophylaxe in der Keratoplastik.
Die folgenden Beispiele sind dafür bestimmt, die vorliegende Erfindung und ihre Vorteile zu veranschaulichen. Sie sind keinesfalls so zu verstehen, dass sie die Breite der vorliegenden Erfindung begrenzen.
BEISPIELE
Beispiele für Rezepturen gemäss der vorliegenden Erfindung werden in Tabelle 1 hierunter vorgestellt.
Die Rezeptur Vgl. 1 ist eine Vergleichsrezeptur, die kein Cyclosporin enthält.
TABELLE 1
Die Rezepturen 1 bis 5 und Vgl. 1 sind Prüfungen unterworfen worden, um ihre Augenverträglichkeit zu bewerten, und die Rezepturen 1 bis 5 sind einem Stabilitätstest unterworfen worden.
Augenverträglichkeit der Rezepturen 1 bis 5 und Vgl. 1
Die lokale Verträglichkeit der Rezepturen 1 bis 5 und Vgl. 1 ist an Albinokaninchen aus Neuseeland bewertet worden (sechs in jeder Gruppe, davon 3 Männchen und 3 Weibchen), denen 12 Eintröpfelungen von je 0,1 ml der zu prüfenden Rezeptur in Zeitabständen von 30 Minuten in den rechten Bindehautsack verabreicht wurden.
Der Zustand der Augengewebe wurde gemäss dem Test nach Draize ausgewertet (S. C. Gad und C. P. Chengelis, „Ocular Irritation Test", in: Acute Toxicology Testing, Telford Press, Caldwell NJ USA, pp. 51–80). Die Prüfung erfolgte 30 Minuten nach dem letzten Eintröpfeln. Die Ermittlungen erfolgten durch zwei Beobachter, denen die Behandlung völlig unbekannt war, und zwar durch Zuteilung von willkürlichen Punktzahlen für den Zustand der Bindehaut (palpebral und bulbär), der Hornhaut und der Iris.
Das behandelte Auge wurde auch dem Fluoresceintest unterworfen, und zwar nach dem folgenden Verfahren. Vierzig Minuten nach dem letzten Einträufeln der zu prüfenden Rezeptur und nach Beendigung des Tests nach Draize wurde in das zu behandelnde Auge eine Lösung von 2% Fluorescein in physiologischer Kochsalzlösung getröpfelt, der Überschuss von Fluorescein wurde durch Waschen des Auges mit steriler physiologischer Kochsalzlösung beseitigt. Die Augengewebe wurden sodann aufmerksam betrachtet, um die absorbierte Fluoresceinmenge zu bewerten. Durch diese mit Hilfe einer Spaltlampe ausgeführte Bewertung konnte die gute Verträglichkeit aller Rezepturen, d. h. der Rezepturen 1 bis 5, die Cyclosporin A enthielten, sowie der Rezeptes Vgl. 1, die kein Cyclosporin A enthielt, demonstriert werden.
Im Test nach Draize haben die Hornhaut und die Iris immer ein normales Aussehen aufgewiesen. Die Bindehaut erwies sich als normal, Ödeme und Sekretionen waren abwesend, ausser dass in jeder der drei Gruppen von Kaninchen, die mit den Rezepturen 3, 4 und 5 behandelt worden waren, die 0,20, 0,5 bzw. 2,0% Cyclosporin A enthielten, zwei der sechs behandelten Augen eine Gefässhyperämie im mittleren Bereich aufwiesen, was gemäss dem Auswertungstest einer noch besseren Verträglichkeit entspricht.
Im Fluoresceintest ergaben sich keine Unterschiede zwischen den verschiedenen Rezepturen; keines der behandelten Augen hatte Fluorescein absorbiert.
Stabilität der Rezepturen 1 bis 5 der vorliegenden Erfindung
Alle Rezepturen erwiesen sich als stabil bei Umgebungstemperatur, in keiner der Rezepturen 1 bis 5 erfolgte eine Ausfällung des Cyclosporins A in den auf die Zubereitung der Rezeptur folgenden zwölf Monaten.
Rezeptes 3 der vorliegenden Erfindung ist danach mit einer Emulsion vom Öl-Wasser-Typ verglichen worden, und zwar bezüglich der biologischen Verfügbarkeit des Cyclosporins A in den Augengeweben und bezüglich der Augenverträglichkeit.
Vergleich zwischen Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und einer Emulsion vom Öl-Wasser-Typ
Die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung ist mit einer Cycloil genannten Öl-Wasser-Emulsion verglichen worden, die eine Rezeptur gemäss der Patentanmeldung WO-A-95/31211 ist, und zwar bezüglich der Augenverträglichkeit und bezüglich der biologischen Verfügbarkeit des Cyclosporins A in den Augengeweben.
Die Zusammensetzung der beiden Rezepturen ist in der folgenden Tabelle 2 zusammengefasst.
TABELLE 2
Biologische Verfügbarkeit im Auge
In diesem Versuch sind die Konzentrationen von Cyclosporin A in der Bindehaut, in der Hornhaut, im Glaskörper und in der Tränendrüse nach lokaler Verabreichung der beiden Rezepturen, nämlich der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und des Cycloils, bestimmt worden.
Die Prüfungen wurden an männlichen Albinokaninchen aus Neuseeland ausgeführt. Die Kaninchen wurden in zwei Gruppen von je 15 Kaninchen eingeteilt und in beiden Augen mit 50 μl pro Auge mit den beiden zu prüfenden Rezepturen behandelt. Entnahmen von Bindehaut, Hornhaut, Glaskörper und Tränendrüse erfolgten nach Tötung der Tiere eine, drei, sechs, zwölf und vierundzwanzig Stunden nach dem Eintröpfeln, jeweils an drei Kaninchen jeder Gruppe. Die Augen wurden operativ entfernt und mit einer physiologischen Kochsalzlösung gewaschen, ehe der Glaskörper (etwa 400 μl), die Hornhaut (etwa 120 mg), die Bindehaut (etwa 120 mg) und die Tränendrüse (etwa 800 mg) entnommen wurden.

Die quantitative Bestimmung des Cyclosporins A erfolgte mit Umkehrphasen-HPLC mit isokratischer Elution und UV-spektroskopischem Nachweis. Der Chromatogaph war ein Varian-Gerät, die Chromatographiebedingungen waren wie folgt:

Säule	C 18,60 × 4,6 mm, 3 μm (Alltech)
Mobile Phase	Acetonitril/Isopropanol/H₂O (66/2/32)
Durchlaufgeschwindigkeit	0,7 ml/min
Säulentemperatur	72°C
Nachweis	UV, 205 nm (0,1–0,002 AUFS)
Einspritzvolumen	25–50 μl
Retentionszeit	9,1 min

Die der Chromatographie unterworfenen Muster wurden wie folgt hergestellt.
Glaskörper
Zu 300 μl des Glaskörpers wurden 150 μl Acetnitril hinzugegeben, die so erhaltene Lösung wurde während etwa 1 min im Vortexmixer behandelt, dann während 3 min bei 3000 g zentrifugiert. Die überstehende Lösung wurde in ein Fläschchen überführt, mit 15 mg ZnSO₄ und 15 mg CdSO₄ behandelt, während 1 min im Vortexmixer behandelt und wäh rend 2 min bei 2000 g zentrifugiert. Die organische Phase wurde durch 0,45 um filtriert, und 50 bis 75 μl wurden in die Säule eingespritzt.
Hornhaut, Bindehaut und Tränendrüse
Die Gewebe wurden genau gewogen, kalt mit Methanol (etwa 1 ml) homogenisiert, während 15 min bei 3000 g zentrifugiert, die überstehende Lösung wurde mit Methanol (etwa 1 ml) aufgenommen und im Vakuum bei etwa 40°C getrocknet, der Rückstand wurde mit Acetonitril (150 μl) aufgenommen, mit wasserfreiem (NH₄)₂SO₄ behandelt, während 1 min im Vortexmixer behandelt und während 2 min bei 2000 g zentrifugiert. Die organische Phase wurde durch 0,45 um filtriert, und 50 bis 75 μl wurden in die Säule eingespritzt.
Analytisches Verfahren
Die Konzentrationen von Cyclosporin A in der Bindehaut, Hornhaut, Tränendrüse und dem Glaskörper der Kaninchen sind in den Tabellen 3 bis 6 dargestellt.
Konzentrationen von Cyclosporin A in der Bindehaut
Die folgende Tabelle 3 zeigt die Konzentrationen (ng/g) von Cyclosporin A in der Bindehaut der mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil behandelten Kaninchen, und zwar 1, 3, 6, 12 und 24 Stunden nach dem Einträufeln von 50 μl in den Bindehautsack der beiden Augen.
TABELLE 3
Aus der obigen Tabelle 3 ist ersichtlich, dass die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung eine bessere biologische Verfügbarkeit des Cyclosporins in der Bindehaut als die Rezeptur Cycloil gewährleistet, und zwar zu allen Zeiten, zu denen Entnahmen ausgeführt wurden.
Die höchste Konzentration findet sich nach einer Stunde, auch wenn man vermuten kann, dass sich die höchsten absoluten Konzentrationen von Cyclosporin in der Bindehaut gerade nach dem Eintröpfeln finden sollten.
Die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung, die auf Wasser basiert, gewährleistet bei allen Entnahmen immer höhere Konzentrationen von Cyclosporin A als die Öl-Wasser-Emulsion Cycloil.
Die FUK (Flächen unter der Kurve) betragen 12483 ± 234 ng g^–1 h^–1 für die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und 7378 ± 1891 ng g^–1 h^–1 für die Öl-Wasser-Emulsion Cycloil.
Die gleichen Beobachtungen gelten für die Hornhaut.
Konzentrationen von C Cyclosporin A in der Hornhaut
Tabelle 4 zeigt die Konzentrationen (ng/g) von Cyclosporin A in der Hornhaut der mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil auf Ölbasis behandelten Kaninchen, und zwar 1, 3, 6, 12 und 24 Stunden nach dem Einträufeln von 50 μl in den Bindehautsack der beiden Augen.
TABELLE 4
Wie aus der obigen Tabelle 4 ersichtlich, ergibt sich die höchste Konzentration des Medikaments nach drei Stunden mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung (3350 ± 920 ng/g), aber nach sechs Stunden mit Cycloil (2420 ± 870 ng/g).
Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung, die auf Wasser basiert, gewährleistet für alle Entnahmen Konzentrationen an Cyclosporin A, die immer höher als die für die Öl-Wasser-Emulsion Cycloil sind.
Konzentrationen von Cyclosporin A in der Tränendrüse
Tabelle 5 zeigt die Konzentrationen (ng/g) von Cyclosporin A in der Tränendrüse der mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil auf Ölbasis behandelten Kaninchen, und zwar 1, 3, 6, 12 und 24 Stunden nach dem Einträufeln von 50 μl in den Bindehautsack der beiden Augen.
TABELLE 5
Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung, die auf Wasser basiert, liefert eine maximale Konzentration von Cyclosporin A nach drei Stunden (149 ± 45 ng/g), während das Cycloil eine maximale Konzentration von Cyclosporin A von 53 ± 16 ng/g nach sechs Stunden liefert.
Wie vorherzusehen, sind die Konzentrationen von Cyclosporin A in der Tränendrüse, die in Tabelle 5 berichtet werden, deutlich geringer als die für die Bindehaut und die Hornhaut erhaltenen, aber sie sind immer noch höher als die Nachweisgrenze der Methode (15 ng/g).
Wie oben ersichtlich, ist die biologische Verfügbarkeit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung viel höher als die des Cycloils, und darüber hinaus ist Cyclosporin A noch 24 Stunden nach dem Eintröpfeln vorhanden, und zwar in Konzentrationen, die kleiner, aber messbar sind. Das Verhältnis von FUK_AN-023/FUK_cycloil, das das Verhältnis der biologischen Verfügbarkeiten darstellt, beträgt etwa drei.
Konzentrationen von Cyclosporin A im Glaskörper
Tabelle 6 zeigt die Konzentrationen (ng/g) von Cyclosporin A im Glaskörper der mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil auf Ölbasis behandelten Kaninchen, und zwar 1, 3, 6, 12 und 24 Stunden nach dem Einträufeln von 50 μl in den Bindehautsack der beiden Augen.
TABELLE 6
Die höchste Konzentration von Cyclosporin, das als wässrige Rezeptur (Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung) eingetröpfelt wurde, zeigte sich nach drei Stunden (44 ± 14 g/ml), während für die Emulsion auf Ölbasis, Cycloil, das Maximum sich nach sechs Stunden zeigte (22 ± 11 n/ml).
Die Konzentrationen von Cyclosporin A im Glaskörper von Kaninchen, die durch Eintröpfeln von 50 μl mit den beiden geprüften Rezepturen behandelt worden sind, erwiesen sich im Verhältnis zu den beiden Geweben (Hornhaut und Bindehaut), die die Augenoberfläche darstellen, als verhältnismässig gering. Dennoch war für den Glaskörper wie für die anderen Augengewebe die biologische Verfügbarkeit des in wässriger Rezeptur verabreichten Cyclosporins höher als die des als Wasser-Öl-Emulsion eingetröpfelten.
Bewertung der Verträglichkeit
Die Verträglichkeit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und des Cycloils wurde gemäss dem vorstehend beschriebenen, modifizierten Test nach Draize bewertet.
Zwei Gruppen von je sechs Tieren, drei männliche und drei weibliche Albinokaninchen von Neuseeland, wurden im rechten Auge behandelt, indem während sechs Stunden in 30-Minuten-Intervallen 12 Eintröpfelungen von je 0,1 ml der beiden zu prüfenden Zubereitungen ausgeführt wurden.
Der Test nach Draize zur Bewertung der Verträglichkeit wurde 30 Minuten nach der letzten Eintröpfelung durchgeführt. Nach diesem Test, und zwar 40 Minuten nach der letzten Eintröpfelung, wurde der Fluoresceintest durchgeführt. Die Ergebnisse dieser beiden Tests werden in den Tabellen 7 und 8 berichtet.
In der folgenden Tabelle 7 wird gemäss dem Test nach Draize der Grad der Rötung der Bindehaut von Kaninchen berichtet, die mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil durch Eintröpfeln ins rechte Auge behandelt worden waren. Die Rötung wurde nach einer willkürlichen Skala bewertet. Die Behandlung erfolgte 12 Mal in 30-Minuten-Abständen. Die Bewertung erfolgte 30 Minuten nach der letzten Eintröpfelung.
TABELLE 7
Wie ersichtlich, ergab die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung nur zwei aus sechs Fälle von Rötung bei einer bestimmten Hyperämie im zentralen Bereich, während Cycloil auf Ölbasis eine Häufigkeit von fünf Kaninchen unter sechs zeigte. Mit Cycloil war der Grad der Rötung bei vier Kaninchen gering, aber eine Stunde nach der letzten Eintröpfelung zeigte ein Kaninchen eine diffuse Hyperämie von karminroter Farbe, wobei die einzelnen Blutgefässe schwer zu unterscheiden waren.
Keines der behandelten Kaninchen zeigte ein Ödem oder eine mehr als normale Sekretion bei der Bindehaut.
In der folgenden Tabelle 8 wird der Grad von Hyperämie der Iris für Kaninchen, die mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung und mit Cycloil durch Eintröpfeln ins rechte Auge behandelt worden waren, berichtet. Die Iris-Hyperämie wurde mittels einer willkürlichen Skala bewertet. Die Behandlung erfolgte 12 Mal in Abständen von je 30 Minuten. Die Bewertung erfolgte 30 Minuten nach der letzten Eintröpfelung.
TABELLE 8
Nur ein Kaninchen der mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung behandelten Gruppe zeigte eine minimale Hyperämie bei den sekundären Blutgefässen der Iris, jedoch keine bei den tertiären Blutgefässen.
Die Häufigkeit dieser Art von – sehr leichter – Hyperämie war drei aus sechs in der mit Cycloil behandelten Gruppe.
In der folgenden Tabelle 9 wird der Grad der Hornhauttrübung von Kaninchen berichtet, die mit der erfindungsgemässen Rezeptur 3 und mit Cycloil durch Eintröpfeln ins rechte Auge behandelt worden waren. Die Trübung wurde mittels einer willkürlichen Skala bewertet. Die Behandlung erfolgte 12 Mal in Abständen von je 30 Minuten. Die Bewertung erfolgte 30 Minuten nach der letzten Eintröpfelung.
TABELLE 9
Nur ein Kaninchen der mit Cycloil behandelten Gruppe zeigte eine diffuse Zone von Hornhauttrübung, bei der jedoch immer eine gute Sichtbarkeit der Iris verblieb.
In der nachfolgenden Tabelle 10 wird der Grad der Fluoresceinabsorption im Hornhautepithelgewebe von Kaninchen berichtet, die mit der erfindungsgemässen Rezeptur 3 und mit Cycloil durch Eintröpfeln ins rechte Auge behandelt worden waren. Die Absorption wurde mittels einer willkürlichen Skala bewertet. Die Behandlung erfolgte 12 Mal in Abständen von je 30 Minuten. Die Bewertung erfolgte 40 Minuten nach der letzten Eintröpfelung.
TABELLE 10
Wie oben ersichtlich, erwies es sich, dass die Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung dem Fluoresceintest zufolge ebenfalls besser toleriert wird. Tatsächlich hatten drei Hornhäute der mit Cycloil behandelten Gruppe Fluorescein absorbiert, und eine davon, die des Kaninchens Nr. 9, zeigte das Vorliegen akzentuierter fluoreszierender Punkte, auch wenn sich die Strukturen der verschiedenen Gewebe dennoch als unterscheidbar erwiesen, wiewohl bei einem Verlust von Einzelheiten, wenn eine geeignete Beleuchtung eingesetzt wurde.
Nur zwei der sechs mit der Rezeptur 3 der vorliegenden Erfindung behandelten Kaninchen zeigten wenige kleine, fluoreszierende Punkte ohne jede sichtbare Färbung um den Aussenrand der Pupille herum.
Die obigen Ergebnisse zeigen somit deutlich, dass die wässrige Rezeptur gemäss der vorliegenden Erfindung sich nicht nur als besser verträglich erwies, sondern auch als besser biologisch verfügbar als eine Öl-Wasser-Emulsion auf der Basis von Rizinusöl, Tween 80 (Polysorbat 80), Glycerin und Pemulen^® TR-2 (Cycloil).

Claims

Topische ophthalmische Rezeptur in Gestalt einer wässrigen Lösung mit einem Cyclosporin, Hyaluronsäure oder einem ihrer Salze sowie Polysorbat 80.
Rezeptur gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie 0,02 bis 2 Gewichtsprozent an Cyclosporin, 0,01 bis 2 Gewichtsprozent an Hyaluronsäure oder einem ihrer Salze sowie 0,5 bis 40 Gewichtsprozent an Polysorbat 80, bezogen auf das Gesamtgewicht der Rezeptur, enthält.
Rezeptur gemäss Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Cyclosporin ein Cyclosporin A ist.
Rezeptur nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure oder ihr Salz ein Gewichtsmittel des Molekulargewichgts von nicht weniger als 1 300 000 Dalton besitzt.
Rezeptur gemäss Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure oder ihr Salz ein Gewichtsmittel des Molekulargewichts hat, das im Bereich von 1 300 000 bis 3 000 000 Dalton liegt.
Rezeptur nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure in Gestalt von Alkali- oder Erdalkalimetallhyaluronat vorliegt.
Rezeptur nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure in Gestalt von Natriumhyaluronat vorliegt.
Rezeptur nach einem beliebigen der Ansprüche 2 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass sie 0,2 Gewichtsprozent an Cyclosporin A, 0,1 Gewichtsprozent an Hyaluronsäure oder einem ihrer Salze und 5 Gewichtsprozent an Polysorbat, bezogen auf das Gesamtgewicht der Rezeptur enthält.
Rezeptur nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass sie ausserdem Additive umfasst.
Rezeptur nach einem beliebigen der Ansprüche 1 bis 9 zum Einsatz in Gestalt von Augentropfen, um die Tränensekretion durch die Tränendrüse zu erhöhen oder wiederherzustellen, die Aktivität der Tränendrüse anzuregen oder wiederherzustellen, und als postoperative Prophylaxe bei der Keratoplastik.
Verwendung eines Cyclosporins in Gemeinschaft mit Hyaluronsäure oder einem ihrer Salze sowie mit Polysorbat 80 für die Zubereitung einer ophthalmischen Rezeptur in Gestalt einer wässrigen Lösung, die für eine lokale Verabreichung in die Augen bestimmt ist, um die Tränensekretion durch die Tränendrüse zu erhöhen oder wiederherzustellen, die Aktivität der Tränendrüse anzuregen oder wiederherzustellen, und als postoperative Prophylaxe bei der Keratoplastik.
Verwendung gemäss Anspruch 11, bei der die Rezeptur 0,02 Gewichtsprozent an Cyclosporin, 0,01 bis 2 Gewichtsprozent an Hyaluronsäure oder einem ihrer Salze sowie 0,5 bis 40 Gewichtsprozent an Polysorbat 80, bezogen auf das Gesamtgewicht der Rezeptur enthält.
Verwendung gemäss Anspruch 11 oder 12, dadurch gekennzeichnet, dass das Cyclosporin ein Cyclosporin A ist.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 13, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure oder ihr Salz ein Gewichtsmittel des Molekulargewichts von nicht weniger als 1 300 000 Dalton besitzt.
Verwendung gemäss Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure oder ihr Salz ein Gewichtsmittel des Molekulargewichts besitzt, das im Bereich von 1 300 000 bis 3 000 000 Dalton liegt.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 15, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure in Gestalt von Alkali- oder Erdalkalimetallhyaluronat vorliegt.
Verwendung gemäss Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass die Hyaluronsäure in Gestalt von Natriumhyaluronat vorliegt.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Rezeptur für die Behandlung einer Keratoconjunctivitis sicca (KCS) bestimmt ist.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Rezeptur für die Behandlung des Sjögren-Syndroms bestimmt ist.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Rezeptur für die Behandlung des Sicca-Syndroms bestimmt ist.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Rezeptur für die Behandlung der chronischen Frühjahrs-Konjunktivitis bestimmt ist.
Verwendung nach einem beliebigen der Ansprüche 11 bis 17, dadurch gekennzeichnet, dass die Rezeptur für die Verwendung als postoperative Prophylaxe der Keratoplastik bestimmt ist.