DE60002226T2

DE60002226T2 - Zusammensetzung zur vorbeugung und/oder behandlung von kreislaufstörungen, enthaltend l-carnitin derivate und ginkgo biloba extrakte

Info

Publication number: DE60002226T2
Application number: DE60002226T
Authority: DE
Inventors: Claudio Cavazza
Original assignee: Sigma Tau HealthScience SpA
Current assignee: Sigma Tau HealthScience SpA
Priority date: 1999-10-08
Filing date: 2000-10-02
Publication date: 2004-03-04
Anticipated expiration: 2020-10-03
Also published as: IL148963A0; TNSN00186A1; ATE237341T1; EP1218022A2; US6641849B1; CZ20021062A3; PL199996B1; MXPA02003501A; NO20021640D0; WO2001026666A2; ITRM990618A0; AR025790A1; AU780643B2; HU227042B1; DE60002226D1; WO2001026666A3; ES2195939T3; PL354413A1; ITRM990618A1; CA2386770C

Description

Diese Erfindung betrifft eine Zusammensetzung, die zur Vorbeugung und/oder Behandlung von Kreislauferkrankungen auf peripherer und zerebraler Ebene geeignet ist.
Dementsprechend kann die Zusammensetzung die Form einer Nahrungseränzung oder einer tatsächlichen Medizin in Abhängigkeit von dem Träger oder der Verhinderungswirkung oder der strikt therapeutischen Wirkung, die die Zusammensetzung bei den bestimmten Individuen ausüben soll, die diese verwenden, einnehmen und diese Aktivität entfalten.
Mehr spezifisch umfaßt die Zusammensetzung dieser Erfindung als charakterisierende aktive Bestandteile:

(a) eine Mischung aus L-Carnitin, Acetyl-L-carnitin und Propionyl-L-carnitin oder der pharmakologisch akzeptablen Salze davon und
(b) einen Extrakt von Ginkgo biloba oder ein oder mehrere der Ginkgolide, ausgewählt von Ginkgo biloba oder Mischungen davon.

Die biologischen und pharmakologischen Eigenschaften der Carnitine im Hinblick auf das Herz und die vaskulären und zerebralen Energiegehalte sind sehr gut bekannt.
L-Carnitin und in unterschiedlichem Ausmaß seine Analoga wie Acetyl-L-carnitin und Propionyl-L-carnitin sind in der Lage eine gute Wirkung bei Myokardinsuffizienz und Koronarerkrankungen ebenso wie bei peripheren vaskulären Erkrankungen auszuüben.
Diese vorteilhaften Wirkungen der Carnitine erfolgen aufgrund des komplexen Mechanismus der Wirkung dieser Substanzen, der sich insbesondere die Möglichkeit der Energiezufuhr zu verschiedenen zell- und gewebemetabolischen Verfahren durch die Aktivierung der metabolischen Systeme der β-Oxidation von Fettsäuren und der verstärkten Verwendung von Glucose oder durch die Inhibition von Lipidperoxidations-Verfahren und eine Verminderung der freien Radikale bezieht.
Von besonderem Interesse scheint die Wechselwirkung mit L-Carnitin und vor allem Acetyl-L-carnitin zu sein, die beim cerebralen Niveau ausgeübt wird.
Es wurde tatsächlich festgestellt, daß Acetyl-L-carnitin nach der postischämischen Reperfusion den Metabolismus der Phosphor-tragenden Derivate und Glucose und im allgemeinen die zerebrale Funktion wieder herstellen kann und ebenso in der Lage ist, die deutlicheren postischämischen neurologischen Schädigungen zu verhindern.
Die gleiche Schutzwirksamkeit von Acetyl-L-carnitin wurde ebenfalls nach einem Schlaganfall ebenso wie in bezug auf die Produkte der Peroxidation festgestellt.
Dies experimentellen Feststellungen belegen die guten klinischen Wirkungen, die mit Acetyl-L-carnitin bei den verschiedenen Phänomenen erhalten werden, die sich auf das zerebrale Altern beziehen.
Ginkgo biloba-Extrakte weisen ebenfalls eine pharmakologische und klinische Aktivität auf, die durch eine permanente gute Wirkung beim Kreislaufniveau und insbesondere beim zerebralen Kreislaufniveau charakterisiert ist, mit dem Ergebnis, daß signifikante Ergebnisse mit ihrer Verwendung bei der Behandlung und Vorbeugung von peripherer und insbesondere zerebraler vaskulärer Insuffizienz erreicht werden.
Ginkgo biloba ist eine Pflanze der Familie Ginkgoaceae, die ursprünglich aus China und Japan stammt, aber nun in Europa weitverbreitet ist und seit vielen Jahren in der Populärmedizitt als entzündungshemmendes, Antiasthma- und Antihustenmittel und seit kurzem nach der Isolierung seiner aktiven Bestandteile bei einer Serie von Erkrankungen verwendet wird, die durch Kreislaufinsuffizienz oder Entzündungs- oder degenerative Abnormalitäten gekennzeichnet sind, die durch peroxidative Phänomene induziert sind, wie Atheriosklerose, Thrombose oder Atmungserkrankungen.
Die mit den aktiven Bestandteilen, die in den Blättern von Ginkgo biloba vorhanden sind, durchgeführten Analysen, insbesondere durch Gaschromatographie-(HPLC)-Analyse haben eine Vielzahl von chemisch und pharmakologisch differenzierten Substanzen ergeben, die in erster Linie aus der Gruppe der Flavonoide, Benzoide, Diterpene und Sesquiterpene und organischen Säuren bestehen.
Die isolierten Flavonoide umfassen Amentoflavon, Bilobetin, Isoginkgetin, Sciadopitysin, Ginkgetin, Catechin und Epicatechin, Isoquercetin, Isorhamnetol-3-O-rutinosid, Kaempferol-3-O-rutinosid, Kaempferol-7-O-glucosid, Syringetin-3-O-rutinosid, Quercetin-3-O-rutinosid, Luteolin, Kaempferol, Quercetin und Myricetin.
Die Benzoide umfassen Gallocatechin und Epigallocatechin. Die Dipertene umfassen Ginkgolid A, Ginkgolid B, Ginkgolid C, Ginkgolid J und Ginkgolid M.
Die Sesquiterpene umfassen Bilobalid, und die organischen Säuren umfassen 6-Hydroxykinurensäure, Hydroxybenzoesäure, Kinurensäure, Ascorbinsäure und 3-Methoxy-4-hydroxybenzoesäure.
Extensive Berichte in der Literatur haben gezeigt, daß all diese Verbindungen sowohl alleine als auch in Kombination in der Lage sind, eine antioxidative Wirkung durch Einfangen freier Radikale, eine vaskuläre Regulationswirkung und eine antianoxische Wirkung zu entfalten, ebenso wie den zerebralen Energiemetabolismus zu modulieren.
Die meisten dieser Studien, insbesondere die klinischen Versuche, wurden nicht nur bezüglich der Verbindungen, die von Ginkgo biloba-Extrakten isoliert wurden, sondern ebenfalls mit einem standardisierten Ginkgo biloba-Extrakt mit 24% Glycosidflavonoiden und 6% Terpenlactonen durchgeführt.
Die antioxidative Aktivität von Ginkgo biloba-Extrakten wurde durch Experimente bestätigt, die sowohl in vitro als auch in vivo durchgeführt wurden. Es wurde in vitro festgestellt, daß Ginkgo biloba-Extrakte in der Lage sind, die Lipidperoxidation der Erythrozyt-Membranen, die durch Wasserstoffperoxid induziert wird, ebenso wie die Peroxidation der polyungesättigten Fettsäuren, die in den Membranen der hepatischen Mikrosomen vorhanden sind, die durch Eisen(III)-Ionen induziert wird, zu inhibieren. Es wurde in vivo beobachtet, das Ginko biloba-Extrakte in der Lage sind, eine Schutzwirkung auf spinale Läsionen, die durch Ischämie induziert werden und mit der Lipidperoxidation zusammenhängen, ausüben. Ebenso sehr deutlich demonstriert wird die Inhbitionsaktivität von Ginkgo biloba-Extrakten auf den Plättchenaktivierungsfaktor (PAF), der ein Faktor ist, der nicht nur der Plättchenaggregation unterliegt, sondern ebenfalls. ishämische Kreislaufstörungen beim Herz- und zerebralen Niveau verantwortlich ist. Die antüschämische Aktivität von Ginkgo biloba-Extrakten wurde in mehreren klinischen Versuchen bestätigt, und solche Extrakte erwiesen sich ebenfalls bei der Verhinderung des intermittierenden Claudicatio und der peripheren Arteriopathie im allgemeinen als wirksam. Erkrankungen, die mit erektilen vaskulären Erkrankungen und Tinnitus zusammenhängen, zeigten eine Verbesserung durch die Verwendung von Ginkgo biloba-Extrakten.
Bei der Zerebralinsuffizienz vaskulären und degenerativen Ursprungs ergab jedoch die Verwendung von Ginkgo biloba-Extrakten die wichtigsten Ergebnisse. Klinische Experimente haben bewiesen, daß die Verabreichung von Ginkgo biloba-Extrakten in der Lage ist, vorteilhafte Wirkungen auf die Altersdemenz und Alzheimer-Erkrankung ebenso wie bei der Depression zu zeigen, was bei diesen Studien ebenfalls ihre Auszeichnung gegenüber Arzneimitteln wie Tacrine belegt, das bei diesen Zuständen in großem Umfang verwendet wird.
Es wurde nun überraschend festgestellt, daß eine Zusammensetzung, die als charakterisierende aktive Bestandteile:

(a) eine Mischung aus L-Carnitin, Acetyl-L-carnitin und Propionyl-L-carnitin oder den pharmakologisch akzeptablen Salzen davon und
(b) einen Extrakt von Ginkgo biloba oder ein oder mehrere Ginkgolide, die von Ginkgo biloba isoliert sind, oder Mischungen davon enthält, insbesondere nützlich ist bei der Vorbeugung und/oder Behandlung von peripherer oder zentraler Kreislaufinsuffizienz bei Myokard-, Zerebral- und peripheren vaskulären Niveaus ebenso wie bei Koronarerkrankungen, nervöser Depression, Insomnie, Ermüdung, intermittierendem Claudicatio, Tinnitus oder Erektionsstörungen des Penis, zerebralen funktionellen Defiziten, sowohl vaskulär als auch metabolisch, und artikulären oder gastrischen Entzündungsreaktionen.

Der Ausdruck "Ginkgolide, die von Ginkgo biloba isoliert sind" soll Ginkgolid A, Ginkgolid B, Ginkgolid C, Ginkgolid J und Ginkgolid M wie oben erwähnt enthalten.
Die Kombination von Acetyl-L-carnitin und Propionyl-L-carnitin oder pharmakologisch akzeptablen Salzen davon mit einem Ginkgo biloba Extrakt entfaltet nicht nur eine komplementäre Wirkung der beiden Typen von Komponenten sondern ebenfalls eine reale synergistische Wirkung, die eine reziprokale Verstärkung ihrer Aktivität ergibt, was äußerst nützlich ist für das Erreichen einer sicheren und extensiveren praktischen Verwendung sowohl bei der Behandlung als auch bei der Vorbeugung von Krankheitsformen, die mit der Zerebralfunktion zusammenhängen, bei denen die Carnitine und der Ginkgo biloba-Extrakt jeweils ihre eigenen nützlichen Funktionen entfalten.
Experimente, die durch Kombination der verschiedenen Komponenten dieser Erfindung durchgeführt wurden, ergaben tatsächlich eine unerwartete und starke synergistische Wirkung, die deutlich bewiesen werden kann, indem diese Versuche verwendet werden, die am aussagefähigsten im Hinblick auf die praktische Verwendung der therapeutischen oder vorbeugenden Charakteristiken sind, die für die Zusammensetzung, die das Ziel dieser Erfindung ist, vorausgesagt werden.
Eine Serie von Experimenten, die durch Kombination einer Carnitin-Mischuny mit Ginkgo biloba-Extrakt durchgeführt wurden, d.h. die Formulierung, die das Ziel dieser Erfindung ist, hat das Erreichen einer starken, nicht erwarteten synergistischen Wirkung der individuellen Komponenten bewiesen, was zu einer reziproken Verstärkung ihrer Wirkungen wie die Aussicht einer effektiveren Verwendung als Nahrungs- und Diätergänzung oder selbst als Arzneimittel bei der Vorbeugung und/oder Behandlung von hauptsächlichen Kreislauferkrankungen beim peripheren und zerebralen Niveau führt, wobei die zuletztgenannte Depression, senile Demenz und Alzheimer-Erkrankung oder Mängel umfaßt, die sich auf das Altern beziehen.
Es wurde ebenfalls festgestellt, daß vorteilhaft die Komponente (a) weiterhin ein "Carnitin" enthalten kann, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Valeryl-L-carnitin, Isovaleryl-L-carnitin und Butyryl-Lcarnitin oder deren pharmakologisch akzeptablen Salze oder Mischungen davon.
In der Zusammensetzung dieser Erfindung kann das Gewichtsverhältnis von (a) zu (b) im Bereich von 20 : 1 bis 5 : 1 und bevorzugt von 15 : 1 bis 7 : 1 liegen.
Der Ginkgo biloba-Extrakt kann ein flüssiger, alkoholischer oder hydroalkoholischer Extrakt, eine Tinktur, ein vernebelter Extrakt oder ein trockenes Pulver sein.
Vorteilhaft umfaßt der Ginkgo biloba-Extrakt zumindest 24% Glycosidflavonoide und zumindest 6% terpenische Lactone.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung kann weiterhin Vitamine Coenzyme, Mineralsubstanzen, Aminosäuren und Antioxidantien umfassen. Das Medikament oder die Nahrungsergänzung kann in fester, halbfester oder flüssiger Form vorliegen. Es kann in der Form von Tabletten, Pastillen, Pillen, Kapseln, Granulaten, Sirupen, Ampullen oder Tropfen vorliegen.
Experimentelle Versuche
PAF-induzierte Mortalitätsversuche
Der Plättchen-Aktivierungsfaktor (PAF) ist ein acetyliertes Alkylphosphoglycerid, dessen Freisetzung im Körper unter verschiedenen Stimuli Reaktionen vom Kreislauftyp verursacht, die hauptsächlich mit einer erhöhten Kapillar-Permeabilität mit anschließender Extravasation von Blut, erhöhter Plättchenaggregation und Thrombose, reduziertem Koronarfluß, Freisetzung von Entzündungsfaktoren, lysosomalen Enzymen und Superoxiden zusammenhängt.
Bei intravenöser Verabreichung (10 μg/kg) an Tiere, verursacht PAF den Tod der damit behandelten Tiere innerhalb kurzer Zeit, d.h. innerhalb von ungefähr einer Stunde, hauptsächlich als Ergebnis eines Kardiozirkulationskollapses.
Eine Serie von Versuchen wurde unter Verwendung des von Young (Young J. N., Postaglandins 30: 545, 1985) und von Myers (Myers H., Br. J. Pharmacol., 79: 595, 1983) beschriebenen Verfahrens durchgeführt, um zu ermitteln ob Ginkgo biloba-Extrakte (deren anti-PAF-Aktivität bekannt ist) Tiere, die mit PAF injiziert sind, vor Tod schützen und ob die Carnitine (insbesondere Propionyl-L-carnitin, dessen vaskuläre Reaktionsaktivität bekannt ist) in der Lage sind, die Schutzwirkung gegenüber PAF zu erhöhen.
Die Versuche wurden bei Albino-Mäusen mit einem mittleren Gewicht von 25 g durchgeführt, die in verschiedene Gruppen unterteilt waren, wobei die erste als Kontrollgruppe diente und intravenöse Injektionen von PAF in einer Dosis von 20 μg/kg erhielten, während die anderen Gruppen intraperitoneale Injektionen aus dem Ginkgo biloba-Extrakt oder aus den verschiedenen Carnitinen alleine oder in Zumischung oder aus Ginkgo biloba plus Carnitinen eine Stunde vor der PAF-Verabreichung erhielten. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 gezeigt.
Die Ergebnisse dieser Versuche zeigen an, daß nicht nur der Ginkgo biloba Extrakt, sondern ebenfalls Carnitine in der Lage sind, zumindest einen Teilschutz gegenüber Tod zu ergeben, was durch intravenöse Injektion von PAF induziert wird, aber daß die Kombination von Carnitinen plus Ginkgo biloba zu einer reziprokalen Verstärkung der Schutzwirkung führt.
Diese synergistische Wirkung ist mit Acetyl-L-carnitin aber vor allem mit Propionyl-L-carnitin oder mit den verschiedenen Carnitinen in Kombinatiton plus Ginkgo biloba-Extrakt festzustellen.
Tabelle 1 PAF-induzierte Mortalitätsversuche
PAF-induzierte Entzündungsreaktionsversuche Bei diesen Experimenten wurde eine Lösung mit PAF in die Pfoten von Ratten entsprechend dem Verfahren von Burstein injiziert (Burstein S. H., J. Pharmacol. Exptl. Ther., 251: 531, 1989).
Wie bekannt ist, verursacht in die Ratte injiziertes PAF die Freisetzung von zahlreichen phlogogenen Substanzen einschließlich Prostaglandinen, was innerhalb kurzer Zeit zum Beginn eines beachtlichen Ödems führt (Bonnet J., J. Agent Actions, 11: 559, 1981).
Unter Anwendung des von Goldenberg (Goldenberg M. M., Prostaglandins, 28: 271, 1984) und Silva (Silva P. M. R., Inflammation 10: 393, 1986) beschriebenen Verfahrens wurde eine Lösung aus PAF bei einer Gesamtdosis von 2 μg in die hinteren Pfoten von Ratten injiziert, und die folgende ödematöse Reaktion wurde mit einem plethysmographischen Verfahren entsprechend der Technik ausgewertet, die von Ferreira beschrieben ist (Ferreira S. H., J. Pharmacol., 127: 83, 1979).
Die Versuche wurden in verschiedenen Gruppen von Ratten durchgeführt, von denen eine eine Kontrollgruppe war, während die anderen intraperitoneale Verabreichungen von Acetyl-L-carnitin (300 mg/kg) oder Propionyl-L-carnitin (300 mg/kg) oder eine Kombination von L-Carnitin (75 mg/kg), Acetyl-L-carnitin (75 mg/kg) und Propionyl-L-carnitin (75 mg/kg oder aus einem Ginkgo biloba-Extrakt (100 mg/kg) oder Ginkgo biloba-Extrakt plus Carnitinen eine Stunde vor der PAF-Injektion erhielten. Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 gezeigt.
Die Ergebnisse dieses Versuches demonstrieren, daß der Ginkgo biloba-Extrakt und ebenfalls Propionyl-L-carnitin und Acetyl-L-carnitin in der Lage sind, die Intensität der PAF-induzierten Ödeme zu vermindern, daß aber die maximale Wirkung die ist, die mit einer Kombination aus Ginkgo biloba-Extrakten plus Propionyl-L-carnitin oder Carnitin-Komplex erhältlich ist. In diesem Fall wird eine starke synergistische Wirkung zwischen der Inhibitionswirkung von Ginkgo biloba und der von Carnitinen ermittelt.
Tabelle 2 Inhibition der PAF-induzierten Entzündungsreaktionen
Koronarspasmus-Versuche
Die Verstärkung der Aktivität von Ginkgo biloba bei der Kombination mit Carnitinen wurde ebenfalls bei der Auswertung der Wirkungen der Verabreichung dieser Substanzen alleine und den Kombinationen auf Pitresininduzierten experimentellen Koronarspasmus festgestellt.
Es ist bekannt, daß die intravenöse Injektion von 1 v/kg Pitrssin in der Ratte charakteristische elektrokardiographische Abnormalitäten verur sacht, die in der Ableitung II am meisten feststellbar sind, daß sie T-Welle (asphyxiale T-Welle) aufgrund der verminderten Myokardialoxygenierung beeinträchtigt, die mit dem reduzierten Koronarfluß zusammenhängt, der durch den Pitressin-induzierten vaskulären Spasmus erzeugt wird.
Bei diesen Versuchen erhielten die Ratten vor der Injektion mit Pitressin die oralen Verabreichungen von 100 mg/kg Ginkgo biloba-Extrakten oder 300 mg/kg Carnine alleine oder Carnitin-Mischung oder Carnitin oder Carnitin-Mischung in Kombination mit Ginkgo biloba für drei aufeinanderfolgende Tage.
Wie von den Ergebnissen in Tabelle 3 ersichtlich ist, sind sowohl der Ginkgo biloba-Extrakt als auch die Carnitine (insbesondere Propionyl-Lcarnitin und die Mischung aus L-Carnitin plus Propionyl-L-carnitin plus Acetyl-L-carnitin) in der Lage, eine Schutzwirkung auf den Koronarspasmus auszuüben, aber die maximale Wirkung ist die, die mit der Kombination von Ginkgo biloba-Extrakt plus Carnitinen erzielt wird, was nahezu einen vollständigen Schutz der somit behandelten Tiere gegenüber den Anzeichen des Koronarspasmus ergibt, so daß bei diesen Versuchen ebenfalls eine beachtliche synergistische Wirkung erhalten wird, die von den Aktivitäten von Ginkgo biloba und den Carnitinen resultiert.
Tabelle 3 Inhibition des Koronarspasmus mit Pitressin
Plättchenaggregationsversuche
Bei diesen Versuchen wurden Blutproben von gesunden Freiwilligen mit einem Plättchengehalt von wenigstens 300 000/mm³ genommen. Das Verfahren von Born (Born J. V. R., J. Physiol., 26: 25 1963) wurde zum Induzieren der Plättchenaggregation verwendet.
Die Plättchenaggregation wurde durch Collagen (2,5 μg/ml) induziert und zu Beginn und nach 10-minütiger Inkubation mit Propionyl-L-carnitin, Acetyl-L-carnitin, Ginkgo biloba-Extrakt oder mit diesen Verbindungen in verschiedenen Kombinationen gemessen.
Die Plättchenaggregation wurde nach der Inkubation mit Propionyl-Lcarnitin oder mit Acetyl-L-carnitin vermindert, obwohl nur zu einem gewissen Ausmaß, und nach der Inkubation mit Ginkgo biloba-Extrakt in einem signifikanten Ausmaß reduziert.
Die Plättchenaggregation wird jedoch nahezu vollständig bei der Kombination des Ginkgo biloba-Extraktes mit Propionyl-L-carnitin plus Acetyl-L-carnitin inhibiert. Die ED_50S die für die verschiedenen verwendeten Komponenten gefunden wurden, sind tatsächlich 30,5 ± 0,41 μg für Propionyl-L-carnitin, 26,4 ± 0,34 μg für Acetyl-L-carnitin und 38,4 μg für Ginkgo biloba-Extrakt. Die Kombination von Ginkgo biloba und Propionyl-Lcarnitin, Acetyl-L-carnitin oder beiden Carnitinen zusammen bei den gleichen Dosen führt zu einer 100%igen Inhibition der Collagen-induzierten Aggregation, was eine beachtliche synergistische Wirkung zwischen den Carnitinen und Ginkgo biloba demonstriert.
Versuche bezüglich H₂O₂-Toxizität auf Pheochromocytoma-Zellen (PC-12) Die Lipidperoxidation, die durch H₂O₂ induziert ist, kann merklich das Überleben der PC-12-Zellen vermindern. Antioxidationsmittel, die zu der Kultur gegeben werden, sind in der Lage, die Lipidperoxidationsschädigung zu vermindern und das Überleben zu verlängern (Nordman R., Free Rad. Biol. Med., 1227, 1996). Bei diesen Versuchen wurde eine Phechromocytoma-Zell(PC-12)-Kultur verwendet, die 3 × 10⁵ M Zellen/ml enthielt, die 30 Minuten 0,1 mM H₂O₂ vorgelegt wurde.
Nach 24-stündiger Beobachtung war das Überleben der mit H2O2 allein behandelten Zellen ungefähr 38%, während das Überleben sich auf 45 bis 55% erhöhte, wenn die Zellen mit Propionyl-L-carnitin bzw. Acetyl-Lcarnitin (gleich 10^–8 M) inkubiert wurde, und stieg auf 60%, wenn mit Ginkgo biloba 10^–4 M-Extrakt inkubiert wurde.
Das Überleben der Zellen war 85%, wenn Propionyl-L-carnitin oder Acetyl-L-carnitin mit Ginkgo biloba-Extrakt bei der ersten verwendeten Konzentration vermischt wurden, war aber 100%, wenn Ginkgo biloba mit Propionyl-L-carnitin und Acetyl-L-carnitin vermischt wurde, was die Fähigkeit dieser Kombination beweist, eine synergistische Schutzwirkung zwischen Acetyl-L-carnitin, Propionyl-L-carnitin und Ginkgo biloba auszuüben.
Versuche zum Schutz gegenüber experimentell induzierter Zerebralischämie Weil ein Hauptfaktor, der zur Verursachung der Schädigung nach einer Zerebralischämie verantwortlich ist, bekanntermaßen die Produktion von Superoxiden und freien Radikalen ist (Litton S. A., Nature, 364: 625, 1993) wurde bei diesen Versuchen die Zerebralischämie durch Verdecken der mittleren Zerebralarterie (MCA) der Ratte entsprechend dem Verfahren, das von Scharkey beschrieben ist (Scharkey Y., Nature, 371: 336, 1994) durch Injektion von Endothelin-1 (120 pml) für eine Dauer von 3 Minuten mit einer Mikrokanüle, die stereotaktisch in der Pyriform cortex beim Niveau der mittleren zerebralen Arterie (MCA) injiziert wurde, verursacht.
Die somit erzeugte ischämische Fläche wurde nach 3 Tagen mit einer transkardialen Perfusion einer Paraformaldehyd-Lösung (4% in PBS) untersucht.
Nach Entfernung des Gehirns und Anordnen in einem Fixator mit 10% Saccharose wurden Cryostat-Sektionen in Methylviolett fixiert und unter dem optischen Mikroskop untersucht.
Die Verabreichung von Propionyl-L-carnitin (50 mg/kg), Acetyl-Lcarnitin (50 mg/kg) und einer Lösung aus Ginkgo biloba (10 mg/kg) oder diesen Verbindungen in Kombination wurde intravenös 5 Minuten nach der Injektion von Endothelin-1 durchgeführt.
Das Volumen der Infarktfläche wurde entsprechend dem Verfahren berechnet, das von Park beschrieben ist (Park C., Anns. Neurol., 20: 150, 1989). Diese Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.
Die Ergebnisse der durchgeführten Versuche beweisen, daß die individuellen Verbindungen, die bei diesem Experiment verwendet wurden, eine deutlich meßbare Schutzwirkung auf die Bildung von ischämischen Läsionen ausüben. Jedoch ist die maximale Wirkung die, die mit der Verabreichung der Kombination der verschiedenen Verbindungen erreichbar ist.
Unter diesen Umständen ist daher der erhaltene Schutz nahezu voll-ständig, was die beachtliche und nicht vorhersehbare synergistische Wirkung demonstriert, die sich entwickelt, wenn die individuellen Verbindungen zugemischt werden, so daß die Zusammensetzung dieser Erfindung gebildet wird.

Tabelle 4 Versuche der zerebralen Ischämie, die durch Endothelin-1 induziert wird [Größenordnung der Ischämie (Volumen mm³) aufgrund der MCA-Verdeckung (% Reduktion des Volumens im Vergleich zur Kontrolle)]

	Volumen(mm3 )
Propionyl-L-carnitin	32,6 ± 2,4
Acetyl-L-carnitin	21,6 ± 1,8
Propionyl-L-carnitin + Acetyl-L-carnitin	39,2 ± 3,4
Ginkgo biloba	28,7 ± 2,9
Propionyl-L-carnitin + Ginkgo biloba	76,8 ± 6,5
Acetyl-L-carnitin + Ginkgo biloba	66,5 ± 7,4
Propionyl-L-carnitin + Acetyl-L-carnitin + Ginkgo biloba	92,7 ± 8,1

Erläuternde, nicht-beschränkende Beispiele von Zusammensetzungen dieser Erfindung werden nachfolgend angegeben.
Mit pharmakologisch akzeptablen Salzen von L-Carnitin oder Alkanoyl-L-carnitin ist irgendein Salz dieser aktiven Bestandteile mit einer Säure gemeint, das keine unerwünschten toxischen oder Nebenwirkungen ergibt.
Solche Salze sind dem Pharmazieexperten gut bekannt.
Beispiele von geeigneten Salzen sind, obwohl diese nicht exklusiv sind: Chlorid; Bromid; Iodid; Aspartat, saures Aspartat; Citrat, saures Citrat; Tartrat; Phosphat, saures Phosphat; Fumarat, saures Fumarat; Glycerophosphat; Glucosephosphat; Lactat; Maleat, saures Maleat; Orotat; Oxalat, saures Oxalat; Sulfat, saures Sulfat; Trichloracetat, Trifluoracetat und Methansulfonat.
Eine Liste von FDA-anerkannten pharmakologisch akzeptablen Salzen ist in Int. J. Pharm. 33 (1986), 201–217 angegeben.

Claims

Kombinatioszusammensetzung, umfassend als charakterisierende aktive Bestandteile: (a) eine Mischung aus L-Carnitin (LC), Acetyl-L-carnitin (ALC) und Propionyl-L-carnitin (PLC) oder die pharmakologisch akzeptablen Salze davon; und (b) einen Extrakt von Ginkgo biloba oder ein oder mehrere Ginkgolide, die davon isoliert sind, oder Mischungen davon.
Zusammensetzung nach Anspruch 1, worin das Gewichtsverhältnis LC : ALC : PLC 1 : 1 : 1 ist.
Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, worin der Bestandteil (a) weiterhin zumindest ein anderes Carnitin enthält, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Valeryl-L-carnitin, Isovaleryl-L-carnitin und Butyryl-L-carnitin oder deren pharmakologisch akzeptablen Salze oder Mischungen davon.
Zusammensetzung nach den Ansprüchen 1 bis 3, worin das Gewichtsverhältnis (a) : (b) von 20 : 1 bis 5 : 1 ist.
Zusammensetzung nach den Ansprüchen 1 bis 3, worin das Gewichtsverhältnis (a) : (b) von 15 : 1 bis 7 : 1 ist.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin der Extrakt von Ginkgo biloba ein flüssiger alkoholischer, hydroalkoholischer Extrakt, eine Tinktur, ein vernebelter Extrakt oder ein trockenes Pulver ist.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin der Extrakt von Ginkgo biloba zumindest 24% glycosidische Flavonoide und zumindest 6 $ terpenische Lactone umfaßt.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, worin das pharmakologisch akzeptable Salz von L-Carnitin oder seinen Derivaten ausgewählt wird aus der Gruppe, bestehend aus: Chlorid; Bromid; Iodid; Aspartat, saurem Aspartat; Citrat, saurem Citrat; Tartrat; Phosphat, saurem Phosphat; Fumarat, saurem Fumarat; Glycerophosphat; Glucosephosphat; Lactat; Maleat, saurem Maleat; Orotat; Oxalat, saurem Oxalat; Sulfat, saurem Sulfat; Trichloracetat, Trifluoracetat und Methansulfonat.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, die weiterhin Vitamine, Coenzyme, Mineralsubstanzen, Aminosäuren und Antioxidantien umfaßt.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, die in der Form einer Diätergänzung oral verabreichbar ist.
Zusammensetzung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, die in der Form eines Medikamentes parenteral, rektal, sublingual oder transdermal verabreichbar ist.
Nahrungsergänzung nach Anspruch 10, zur Vorbeugung und/oder Behandlung von peripherer oder zentraler Kreislaufinsuffizienz beim myokardialen, zerebralen, peripheren vakulären Niveau oder von Koronarerkrankungen, nervösen Depressionen, Insomnie, Ermüdung, intermittierendem Claudicatio, Tinnitus oder Penis-Erektionsstörungen, vaskulären und metabolischen zerebralen Funktionsmängeln und von artkulären und gastrischen Entzündungsreaktionen.
Medikament nach Anspruch 11, zur Vorbeugung und/oder Behandlung von peripherer oder zentraler Kreislaufinsuffizienz beim myokardialen, zerebralen, peripheren vakulären Niveau oder von Koronarerkrankungen, nervösen Depressionen, Insomnie, Ermüdung, intermittierendem Claudicatio, Tinnitus oder Penis-Erektionsstörungen, vaskulären und metabolischen zerebralen Funktionsmängeln und von artkulären und gastrischen Entzündungsreaktionen.
Nahrungsergänzung nach Anspruch 12, in fester, halbfester oder flüssiger Form.
Medikament nach Anspruch 13 in fester, halbfester oder flüssiger Form.
Nahrungsergänzung nach Anspruch 14, in der Form von Tabletten, Pastillen, Pillen, Kapseln, Granulaten oder Sirupen.
Medikament nach Anspruch 15 in der Form von Tabletten, Pastillen, Pillen, Kapseln, Granulaten, Sirupen, Ampullen oder Tropfen.
Verwendung einer Kombinationszusammensetzung, umfassend die folgenden Bestandteile: (a) eine Mischung aus L-Carnitin (LC), Acetyl-L-carnitin (ALC) und Propionyl-L-carnitin (PLC) oder die pharmakologisch akzeptablen Salze davon; und (b) einen Extrakt von Ginkgo biloba oder ein oder mehrere Ginkgolide, die davon isoliert sind, oder Mischungen davon, zur Erzeugung eines Medikamentes zur Vorbeugung und/oder Behandlung von peripherer oder zentraler Kreislaufinsuffizienz beim myokardialen, zerebralen, peripheren vakulären Niveau oder von Koronarerkrankungen, nervösen Depressionen, Insomnie, Ermüdung, intermittierendem Claudicatio, Tinnitus oder Penis-Erektionsstörungen, vaskulären und metabolischen zerebralen Funktionsmängeln und von artkulären und gastrischen Entzündungsreaktionen.