DE3546659C2

DE3546659C2 -

Info

Publication number: DE3546659C2
Application number: DE3546659A
Authority: DE
Inventors: Takashi Sagamihara Kanagawa Jp Yamada
Original assignee: Olympus Optical Co Ltd
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 1984-09-21
Filing date: 1985-09-17
Publication date: 1992-05-27
Anticipated expiration: 2005-09-18
Also published as: US4837159A; JPH0690211B2; JPS6176957A; DE3533157A1; DE3533157C2

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Steuern eines automa tischen immunologischen Analysiergerätes mit den Merkmalen des Oberbegriffs des Patentanspruches 1.

Aufgrund des Fortschrittes in der medizinischen Analysentechnik können heute sehr kleine Mengen von biologischen Substanzen in Proben analysiert werden, so daß bestimmte Krankheiten sehr früh erkannt werden können. Beispielsweise können bösartige Tumore, wie α-Fetoprotein und karzino-embryonales Antigen, abnormale Hormon-Ausscheidungen, wie Insulin und Thyroxin, und immunologische Krankheiten, wie Immunoglobulin in einem sehr frühen Stadium diagnostiziert werden und auch der Behandlungs verlauf dieser Krankheiten kann sehr gut verfolgt werden. Auch kann durch die Messung von unvollständigen Antigenen, z. B. niedermolekulare Spezies, die Medikamentierung gesteuert werden.

Viele biologische Substanzen werden immunologisch dadurch un tersucht, daß eine Antigen/Antikörper-Reaktion ausgenutzt wird, wobei unterschiedliche Verfahren entwickelt worden sind. Bei spielsweise wird die Existenz oder Nicht-Existenz von geballten Klümpchen von Antigen/Antikörper-Verbindungen, welche durch die Antigen/Antikörper-Reaktion gebildet worden sind, durch das Agglutinationsverfahren, das Sedimentationsverfahren, Trübungs messungen oder dergleichen auf die biologischen Substanzen un tersucht. Bei diesen Verfahren ist die Empfindlichkeit aber re lativ gering, so daß eine große Menge von Antigen/Antikörper- Verbindungen erforderlich ist. Auch können nur qualitative Ana lysen oder nur halb-quantitative Analysen durchgeführt werden. Um diese Nachteile zu vermeiden sind unterschiedliche Verfahren vorgeschlagen worden. In einem dieser Verfahren wird ein Anti gen oder ein Antikörper an feine Teilchen aus Kohlenstoff oder einem synthetischen Kunstharz gebunden, welche dann einer Anti gen/Antikörper-Reaktion mit der zu untersuchenden biologischen Substanz ausgesetzt werden und die Substanzen werden mittels eines Agglutinationsverfahrens oder einer Trübungsmessung un tersucht. In einem anderen bekannten Verfahren werden Antigen/ Antikörper-Verbindungen mit hoher Empfindlichkeit dadurch nach gewiesen, daß Antigene oder Antikörper verwendet werden, die mit einer "Markierung" versehen sind, wie einem Radioisotop, fluoreszierendem Material, lumineszierendem Material oder einem Enzym. Das vorstehend zuerst genannte Verfahren ist aber dem zuletzt genannten Verfahren hinsichtlich der Empfindlichkeit unterlegen, so daß sich die Markierung immer mehr durchgesetzt hat.

Die markierende Substanzen verwendenden Verfahren werden in folgende Klassen unterteilt: Radio-Immuno-Analysen, welche Radioisotope als Markierer verwenden, Fluoreszenz-Immuno-Analy sen, welche fluoreszierende Materialien verwenden und Enzym- Immuno-Analysen, welche Enzyme als markierende Substanzen be nutzen. Unter diesen Verfahren wurde die Enzym-Immuno-Analyse insbesondere deshalb entwickelt, weil sie keine besonders auf wendigen Installationen und Meßtechniken erfordert, vielmehr leicht mittels eines herkömmlichen Kolorimeters durchgeführt werden kann. Die Enzym-Immuno-Analyse wird weiterhin unterteilt in homogene und heterogene Verfahren. Bei der homogenen Analyse wird die Änderung der Aktivität des markierenden Enzyms auf grund des Auftretens oder Nicht-Auftretens der immunologischen Reaktion direkt gemessen, um die zu analysierenden Substanzen nachzuweisen. Bei der heterogenen Analyse werden unlösliche Träger, wie Glasperlen oder Teilchen aus synthetischem Kunst stoff, benutzt, auf welche ein Antigen oder ein Antikörper fixiert wird, worauf durch Enzyme markiertes Antigen oder Anti körper, welches mit dem auf dem Träger fixierten Antikörper oder Antigen verbunden ist und freies durch Enzyme markiertes Antigen oder Antikörper, welche nicht mit dem Antikörper oder Antigen auf dem Träger gebunden ist, durch Waschungen vonein ander getrennt werden und sodann wird die Aktivität des markie renden Enzyms gemessen, um die Menge der zu analysierenden Sub stanz zu bestimmen. Nachfolgend soll der Vorgang des Trennens des gebundenen Antigens oder Antikörpers vom freien Antigen oder Antikörper der Einfachheit halber als B-F-Trennung be zeichnet werden (B-F: bound-free). Obwohl die homogene Analyse mit einfachen Verfahren durchführbar ist, kann sie nur nieder molekulare Haptene, wie medizinische Substanzen, analysieren, nicht aber hochmolekulare biologische Substanzen. Im Gegensatz hierzu ist zwar bei der heterogenen Analyse eine Waschung erforderlich, um die B-F-Trennung durchzuführen, doch läßt dieses Verfahren sich auf nieder- und auf hochmolekulare Substanzen anwenden. Deshalb hat sich in jüngster Zeit die heterogene Enzym-Immuno-Analyse durchgesetzt. Bei der heteroge nen Enzym-Immuno-Analyse wurde das Vergleichsverfahren und das sogenannte "Sandwich"-Verfahren entwickelt.

Ein Verfahren der eingangs genannten Art ist aus der DE-OS 34 02 304 bekannt. Dort werden die Reaktionsgefäße entlang der endlosen Reaktionsreihe um zumindest zwei Umdrehungen trans portiert, um zumindest zwei Waschungen einschließlich einer BF- Trennung zu bewirken. Sollen an mehreren Proben unterschiedli che Messungen durchgeführt werden, wobei die verschiedenen Pro ben jeweils unterschiedliche Zeiten für die Antigen/Antikörper- Reaktion erfordern, so ist es bei Durchführung unterschiedli cher Messungen relativ schwierig, Reagentien bereitzustellen, bei welchen die Reaktionszeiten der immunologischen Reaktionen und der Enzym-Reaktionen gleich sind. Wenn deshalb im Stand der Technik diesen unterschiedlichen Reaktionszeiten dadurch Rech nung getragen wird, daß die Zeitspanne zum Überführen der Reak tionsgefäße variiert wird, so hat dieses Verfahren den Nach teil, daß am Gerät selbst sehr aufwendige Einrichtungen erfor derlich sind.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein gattungsgemäßes Verfahren zum Steuern eines automatischen immunologischen Ana lysiergerätes derart auszubilden, daß mit hohem Durchsatz Mes sungen unterschiedlicher Art durchgeführt werden können, die unterschiedliche Reaktionszeiten aufweisen.

Erfindungsgemäß wird diese Aufgabe dadurch gelöst, daß der Be trieb der Wascheinrichtung so gesteuert wird, daß bei einem ersten Durchgang eines Reaktionsgefäßes durch die Waschstation der Betrieb der Wascheinrichtung ausgesetzt wird und bei einem nachfolgenden Durchgang nach einem oder mehreren Durchläufen des Reaktionsgefäßes um die endlose Reaktionsreihe die Wasch einrichtung betrieben wird.

Nachfolgend werden Ausführungsbeispiele der Erfindung anhand der Zeichnung näher erläutert. Dabei zeigt bzw. zeigen:

Fig. 1 eine schematische Darstellung eines Analysiergerätes zur Durchführung einer Enzym-Immuno-Analyse; und

Fig. 2A bis 2D schematische Ansichten des Betriebs des in Fig. 1 gezeigten Analysiergerätes;

Fig. 1 zeigt schematisch ein Analysiergerät zur Durchführung einer Enzym-Immuno-Analyse. Bei diesem Ausführungsbeispiel ist eine einzige Reaktionsreihe vorgesehen. Als Reaktionsgefäß dient ein U-förmiges Röhrchen 11, welches Schenkel 11a bzw. 11b mit großem und kleinem Durchmesser aufweist (s. Fig. 2). Auf dem Drehtisch 12 sind äquidistant vierundzwanzig U-förmige Röhrchen 11 entlang dem Umfang angeordnet. Der Drehtisch 12 wird intermittierend in Richtung des Pfeiles a mit einer gegebenen Periode von beispielsweise 15 sek gedreht, wobei die U-förmigen Röhrchen 11 in einen Thermostaten 10 (Fig. 2) eingetaucht sind. Die Stellungen, an denen die U-förmigen Röhrchen 11 beim schrittweisen Drehen des Drehtisches 12 ange halten werden, sind mit den Bezugszeichen S₁ bis S₂₄ versehen. Bei diesem Ausführungsbeispiel wird in das in der Station S₁ positionierte U-förmige Röhrchen 11 eine Probe aus dem Proben behälter 15 abgegeben, welcher direkt an einer Proben-Ansaug stellung eines Probenbehälters 14 angeordnet ist. Zum Überfüh ren dient eine Proben-Abgabevorrichtung 13. Der Probenbehälter 14 trägt vierundzwanzig Probengefäße 15, die mit gleichen Ab ständen auf einer Scheibe verteilt sind, die sich intermittie rend in Richtung des Pfeiles b synchron zur Drehung des Dreh tisches 12 dreht. In das U-förmige Röhrchen 11 in der Station S₃ wird selektiv ein Enzym-Reagens 17 entsprechend den zu untersuchenden Substanzen mittels einer Reagens-Zugabeein richtung 16 eingegeben. In das in der Station S₄ angeordnete U-förmige Röhrchen 11 wird ein Farb-Reagens 19 mittels der Reagens-Zugabeeinrichtung 18 eingeführt. In das in der Station S₁₇ befindliche U-förmige Röhrchen 11 wird ein Träger 21, wie ein synthetisches Kunstharzteilchen oder eine Glasperle, aus einem Träger-Vorratsbehälter 20 eingeführt. Der Träger 21 hat einen Durchmesser, der kleiner ist als der innere Durchmesser des Schenkels 11a mit größerem Durchmesser des U-förmigen Röhr chens 11, doch ist der Durchmesser des Trägers größer als der innere Durchmesser des Schenkels 11b des Röhrchens 11, der einen kleineren Durchmesser aufweist. Auf der Außenfläche des Trägers 21 sind zuvor Antikörper oder Antigene fixiert worden, welche die Antigen/Antikörper-Reaktion mit dem Antigen oder Antikörper in der zu prüfenden Probe auslösen. Weiterhin werden in dem Träger-Vorratsgefäß 20 die Träger 21 mittels einer Pufferlösung angefeuchtet. An der Station S₁₉ wird in dem U- förmigen Röhrchen 11 befindliche Reaktionsflüssigkeit in ein Kolorimeter 22 gesaugt und an der Station S₂₀ wird der in dem U-förmigen Röhrchen 11 enthaltene Träger 21 mittels einer Trä ger-Entfernungseinrichtung 23 herausgenommen. In der Station S₂₂ wird in das U-förmige Röhrchen 11 eine Waschflüssigkeit, wie ein Ionen-Austauscher-Wasser, eine Pufferlösung für immuno logische Analysen, eine physiologische Salzlösung oder der gleichen eingegeben. In das in der Station S₂₄ befindliche U-förmige Röhrchen wird selektiv eine Pufferlösung 26 mittels der Pufferlösungs-Zugabeeinrichtung 25 eingegeben. An den Stationen S₂ bis S₄ wird eine umwälzende Luftpumpe 27 abnehmbar an die Schenkel 11b mit kleinerem Durchmesser der U-förmigen Röhren angeschlossen und an den Stationen S₂₂ und S₂₃ wird eine Absaugpumpe 28 an die Schenkel 11b des U-förmigen Rohres 11 angelegt.

Die für die unterschiedlichen Meßarten erforderlichen Reaktions zeiten werden gleich einer Summe aus einer minimalen Zeitspanne und einem ganzzahligen Vielfachen einer Grund-Zeitspanne ge setzt, wobei die minimale Zeitspanne der Rotationsdauer des U-förmigen Röhrchens 11 vom Reaktionsbeginn, z. B. in der Pro ben-Zugabestation S₁, bis zum Stop in der Station S₂₂ (bei spielsweise 15 sek · 21) entspricht, und die Grund-Zeitspanne derjenigen Zeit entspricht, welche das U-förmige Röhrchen braucht, um aus der Station S₂₂ nach einer Drehung wieder in die Station S₂₂ zu gelangen (beispielsweise 15 sek · 24).

Nunmehr soll der Betrieb des in Fig. 1 gezeigten Analysier gerätes anhand der Fig. 2A bis 2D erläutert werden.

Während einer ersten Drehung des Drehtisches 12 wird an der Station S₁₇ ein mit Pufferlösung angefeuchteter Träger 21 über den Schenkel 11A gemäß Fig. 2A in das U-förmige Röhrchen 11 eingegeben. Sodann wird an der Station S₂₂ intermittierend Waschflüssigkeit in den Schenkel 11A eingesprüht, etwa ent sprechend einer Dusche, wozu die Waschpumpe 24 dient. Gleich zeitig wird die Waschflüssigkeit aus dem schmaleren Schenkel 11b des Röhrchens 11 ausgesaugt, wozu die Absaugpumpe 28 dient.

Sodann wird in der Station S₂₃ jegliche verbliebene Waschflüs sigkeit mittels der Pumpe 28 endgültig aus dem Röhrchen 11 ent fernt. Auf diese Weise wird das U-förmige Röhrchen 11 gewaschen und gleichzeitig wird auch die Pufferlösung vom Träger 21 ent fernt. Hierdurch ist gewährleistet, daß die aus der Pufferlö sungs-Vorratseinrichtung 25 hinzuzufügende Pufferlösung 26 immer eine konstante Menge aufweist.

Sodann wird gemäß Fig. 2B in der Station S₂₄ eine gegebene Menge an Pufferlösung 26 mittels der Zugabeeinrichtung 25 in den Schenkel 11a des U-förmigen Röhrchens mit größerem Durch messer eingegeben. Dann wird an der Station S₁ eine vorgegebene Probenmenge mittels der Proben-Zugabeeinrichtung 13 in den Schenkel 11a mit größerem Durchmesser des Röhrchens 11 aus dem Probengefäß 15 eingegeben, welches an der Proben-Ansaugstellung des Probenhalters 14 angeordnet ist. Sodann werden an den Sta tionen S₂, S₃, S₄ und S₅ Luftströme in den Schenkel 11b mit kleinerem Durchmesser mittels der Luftpumpe 27 eingeleitet, um den Träger 21 zu rühren. Auf diese Weise wird eine erste Anti gen/Antikörper-Reaktion beschleunigt. Die Träger-Zuführeinrich tung 20, die Pufferlösungs-Zuführeinrichtung 25, die Proben- Zuführeinrichtung 13 und der Probenhalter 14 sind außer Betrieb gesetzt, sobald das betroffene U-förmige Röhrchen bedient wor den ist.

Nach einer zweiten Drehung des Drehtisches 12 wird an der Station S₂₂ das Röhrchen 11 an seinem Schenkel 11b mit kleine rer Öffnung mittels der Absaugpumpe 28 besaugt und gleichzeitig wird Waschflüssigkeit intermittierend in den Schenkel 11a mit größerer Öffnung aus der Waschpumpe 24 eingesprüht. Die in dem Röhrchen verbleibende Waschflüssigkeit wird gemäß Fig. 2B an den Stationen S₂₂ und S₂₃ entfernt. Auf diese Weise werden das U-förmige Röhrchen 11 und der darin enthaltene Träger 21 voll ständig gewaschen, um die erste B-F-Trennung durchzuführen.

Die vorstehende Erläuterung gilt für den Fall, daß die Reak tionszeitspanne minimal ist. Ist die Reaktionszeitspanne gleich der Summe der minimalen Zeitspanne und einem ganzzahligen Viel fachen der Grund-Zeitspanne, so wird die erste B-F-Trennung wie folgt durchgeführt. Das U-förmige Röhrchen 11, in welches die Probe an der Station S₁ eingefügt ist, wird in die Station S₂₂ überführt und sodann wird das U-förmige Röhrchen 11 um eine vorgegebene Anzahl von Drehungen gedreht, wobei alle anderen Einrichtungen außer dem Drehtisch 12 und der Luftpumpe 27 außer Betrieb sind. Danach wird die erste B-F-Trennung wie oben durchgeführt, wobei das Röhrchen 11 in die Station S₂₂ über führt wird.

Sodann wird an der Station S₃ eine vorgegebene Menge eines mittels eines Enzymes markierten Reagenzes 17 mittels der Reagens-Zugabeeinrichtung 16 gemäß Fig. 2C in den Schenkel 11a mit größerer Öffnung des U-förmigen Röhrchens 11 eingeführt. Das Reagens 17 und der Träger 21 werden an den Stationen S₃, S₄ und S₅ durch Luftströme hinreichend gerührt, welche in den Schenkel 11b mit kleinerer Öffnung mittels der Luftpumpe 27 eingeführt werden, um eine zweite Antigen/Antikörper-Reaktion durchzuführen.

Danach werden an den Stationen S₂₂ und S₂₃ das U-förmige Röhr chen 11 und der Träger 21 mittels der Waschpumpe 24 und der Absaugpumpe 28 gewaschen, um eine zweite B-F-Trennung durchzu führen. In der zweiten Antigen/Antikörper-Reaktion kann die Reaktions-Zeitspanne gegenüber der minimalen Zeitspanne um ein ganzzahliges Vielfaches der Grund-Zeitspanne verlängert sein, was auch für die erste Antigen/Antikörper-Reaktion gilt. Sodann wird gemäß Fig. 2D an der Station S₄ eine vorgegebene Menge eines Farb-Reagenzes 19, z. B. ein Enzym-Substrat-Reagens, in das U-förmige Röhrchen 11 mittels der Reagens-Zugabeeinrichtung 18 eingeführt. Sodann werden an den Stationen S₄ und S₅ das Farb-Reagens 19 und der Träger 21 mittels der Luftpumpe 27 ge rührt, um die Reaktion des Farb-Reagenzes 19 mit dem markieren den Enzym des Reagenzes 17 zu fördern, welches an den Träger 21 gebunden ist.

Sodann wird an der Station S₁₉ die Reaktionsflüssigkeit im U-förmigen Röhrchen 11, in welches das Farb-Reagens 19 einge führt ist, in das Kolorimeter 22 gesaugt, um eine kolorimetri sche Messung durchzuführen. Wie in Fig. 2D dargestellt ist, weist das Kolorimeter 22 eine Strömungszelle 22a auf, durch welche die Reaktionsflüssigkeit fließt, sowie eine Lichtquelle 22b und einen Detektor 22c, welche auf gegenüberliegenden Sei ten der Strömungszelle 22a angeordnet sind. Von der Lichtquelle 22b stammendes Licht wird über Interferenzfilter 22d in die Strömungszelle 22a gelegt und das die Strömungszelle 22a passierende Licht wird mittels einer Lichtführung 22e zum De tektor 22c gelenkt.

In der Station S₂₀ wird der Träger 21 aus dem Schenkel 11a mit großer Öffnung des U-förmigen Röhrchens 11 mittels der Träger- Entfernungseinrichtung 23 angesaugt. In der Station S₂₂ wird Waschflüssigkeit in den Schenkel 11a mit größerem Durchmesser eingeleitet und die Waschflüssigkeit wird aus dem Schenkel 11b mit kleinerem Durchmesser des Röhrchens abgesaugt. Die in dem Röhrchen verbleibende Waschflüssigkeit wird an der Station S₂₃ entfernt. Auf diese Weise wird das U-förmige Röhrchen 11 für die nächste Zugabe eines Trägers vorbereitet.

Wie vorstehend im Detail erläutert, wird bei diesem Ausfüh rungsbeispiel eine endlose Reaktionsreihe verwendet und nur eine Wascheinrichtung mit einer Waschpumpe 24 und einer Absaug pumpe 28 sind für die Waschoperationen einschließlich der B-F-Trennung erforderlich. Deshalb läßt sich die Reaktions- Zeitspanne leicht willkürlich variieren, indem mittels einer Steuerung die Wascheinrichtung an- bzw. ausgestellt wird.

Claims

1. Verfahren zum Steuern eines automatischen immunologischen Analysiergerätes, bei dem Substanzen in Proben analysiert wer den und eine Anzahl von Reaktionsgefäßen (11) mit Trägern (21), auf die ein Antikörper oder Antigen fixiert ist, entlang einer endlosen Reaktionsreihe schrittweise bewegt werden; Proben und markierte Reagentien in die Reaktionsgefäße (11) zur Einleitung einer Antigen/Antikörper-Reaktion eingegeben werden; eine B-F- Trennung durch Trennung von Antigen oder Antikörper, welche am Träger gebunden sind, und freiem Antigen oder Antikörper mit tels einer Wascheinrichtung (24, 28) nach Ablauf einer für die Antigen/Antikörper-Reaktion erforderlichen Reaktionszeitspanne durchgeführt wird; und die gegebenen Substanzen in der Probe mittels der markierenden Substanzen des markierten Reagenzes vermessen werden, wobei die Reaktionszeitspanne durch die für einen Schritt erforderliche Zeitspanne und die Anzahl der Schritte zwischen dem Reaktionsstart (Station S₁, S₃) und der Waschstation (S₂₂) beeinflußt wird, dadurch gekennzeichnet, daß der Betrieb der Wascheinrichtung (24, 28) so gesteuert wird, daß bei einem ersten Durchgang eines Reaktionsgefäßes (11) durch die Waschstation (S₂₂) der Betrieb der Waschein richtung (24, 28) ausgesetzt wird und bei einem nachfolgenden Durchgang nach einem oder mehreren Durchläufen des Reaktions gefäßes um die endlose Reaktionsreihe die Wascheinrichtung betrieben wird.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Reaktionsgefäße entlang einer kreisförmigen Reaktions reihe transportiert werden, die durch einen Drehtisch gebildet wird, der intermittierend um gleiche Wegstücke gedreht wird.

3. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Träger einzeln in die Reaktionsgefäße zugeführt werden und daß nach einer immunologischen Messung und nach Entfernung der Träger die Reaktionsgefäße für die Durchführung einer neuen Analyse gewaschen werden.

4. Verfahren nach einem der Ansprüche 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß während einer ersten Drehung des Drehtisches nach Hinzufü gen eines Trägers in ein Reaktionsgefäß eine Probe in das Reak tionsgefäß hinzugefügt wird, um eine erste Antigen/Antikörper- Reaktion innerhalb einer ersten Reaktionszeitspanne durchzufüh ren, daß während einer nachfolgenden Drehung des Drehtisches die Reaktionsgefäße und Träger gewaschen werden, um eine erste B-F-Trennung durchzuführen, worauf ein mit einem Enzym markier tes Reagens in das Reaktionsgefäß überführt wird, um eine zwei te Antigen/Antikörper-Reaktion innerhalb einer zweiten Reak tionszeitspanne durchzuführen, daß während der nachfolgenden Drehung des Drehtisches das Reaktionsgefäß und der Träger gewa schen werden, um eine zweite B-F-Trennung durchzuführen, daß ein Farb-Reagens einschließlich eines Enzyms in das Reak tionsgefäß überführt wird, um eine Prüfflüssigkeit zu bilden, und daß während der nachfolgenden Drehung des Drehtisches die Prüfflüssigkeit kolorimetrisch vermessen, der Träger entfernt und das Reaktionsgefäß gewaschen werden.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß nach Zugabe des Trägers in das Reaktionsgefäß aber vor der Einfügung der Probe in das Reaktionsgefäß, das Reaktionsgefäß und der Träger gewaschen werden.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß vor der Zugabe des Trägers in das Reaktionsgefäß eine Puf ferlösung in das Reaktionsgefäß gesprüht wird.

7. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Stellung der Wascheinrichtung (24, 28) in bezug auf die endlose Reaktionsreihe veränderbar ist.