DE3337207A1

DE3337207A1 - Verfahren zur herstellung von psoralenfreien alkylangelicinen

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Publication number: DE3337207A1
Application number: DE19833337207
Authority: DE
Inventors: Francarosa Baccichetti; Franco Padova Bordin; Carlo Trieste Bragadin Monti; Francesco Padova Carlassare; Mario Trento Cristofolini; Francesco Dall'acqua; Adriano Guiotto; Giovanni Padova Pastorini; Giovanni Trento Recchia; Giovanni Rodighiero; Paolo Rodighiero; Daniela Padova Vedaldi
Original assignee: Consiglio Nazionale delle Richerche CNR
Current assignee: Consiglio Nazionale delle Richerche CNR
Priority date: 1982-10-18
Filing date: 1983-10-13
Publication date: 1984-04-19
Also published as: JPS59104387A; CA1228860A; IT8284148A0; JPH0633269B2; AU559082B2; GB2128997A; IT1165797B; AT384810B; DE3337207C2; US5001147A; FR2534585A1; AU2014183A; ES526910A0; ATA370383A; GB8327200D0; ES8608523A1; FR2534585B1; GB2128997B; ZA837585B; CH662566A5

Description

Verfahren zur Herstellung von psoralenfreien Alkylangelicinen

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Alkylangelicinen ( winkelförmigen Furocumarinen ), die frei von Psoralenen ( linearen Furocumarinen ) sind, und derart gewonnene Alkylangelicine. Sie finden besondere Anwendung bei der photochemischen Therapie von Psoriasis und von anderen Hauterkrankungen, die durch eine zelluläre Hyperproliferation gekennzeichnet sind, sowie bei der photochemischen Therapie von Vitiligo und von Alopecia aerata.

Es ist allgemein bekannt, daß die photochemische Therapie von Psoriasis, Mycosis fungoides und anderen Hauterkrankungen, die durch eine zelluläre Hyperproliferation gekennzeichnet sind, durch die kombinierte Aktion von Psoralenen ( bifunktionellen linearen Furocumaririen) und langwelligem-ultraviöl et ten Licht erfolgt; diese Therapie ist auch unter der Bezeichnung PUVA ( Zusammensetzung aus "Psoralene" + "UV-A-Licht" (320-400 nm) ) bekannt ( vgl. Parrish u.a., New England Journal of Medicine - 291., 1207, (1974) ).

Bei dieser Behandlung wird die Eigenschaft der Psoralene genutzt, die darin besteht, eine lichtschädigende, selektive Wirkung auf die zelluläre Haut-DNS zu haben.

Die proliferationshemmende Aktivität beruht auf den mono- und bifunktionellen Schädigungen der DNS (im zweiten Falle hängt dies mit den Querverbindungen zwischen den Strängen zusammen, die zwischen zwei Basen bestehen, welche zu zwei komplementären Strängen des Makromoleküls gehören), die auf zellulärer Ebene durch die Psoralene hervorgerufen werden.

* w j w Φ *> ·

Ein weiteres Merkmal der Psoralene besteht darin, daB sie eine Hautpigmentieiung verursachen können; auch in diesem Falle wird die Wirkung dank der kombinierten Aktion der Psoralene und des langwelligen UV-A-Lichts erzielt. Diese Eigenschaft wird bei der Therapie von Vitiligo oder Leukoderma verwendet ( vgl. A.M. El Mofty " Depigmentierung und Psoralene", Pergamon Press, Oxford (1968) ).

Die PUVA-Therapie kann entweder durch orale Verabreichung oder durch lokale Applikation von Psoralenen und nachfolgender Bestrahlung mit UV-A-Licht erföl gen.

Diese Therapie wird als die wirksamste Behandlungsmethode für einige Arten von Psoriasis, für die Anfangsstadien von Mycosis fungoides und für Vitiligo -

angesehen; nichtsdestotrotz wurde eine Anzahl von Nebenwirkungen verzeichnet, darunter das Risiko von Hautkrebs ( vgl. R.S."Stern u.a., "Risiko von Hautkarzinomen bei Patienten, die einer photochemischen Therapie gegen Psoriasis mit oraler Verabreichung von Methoxalen unterzogen wurden", New England Journal of Medicine, 300, 852 (1979) ), das Risiko einer leberschädigenden Wirkung ( vgl. H. Tronnier u.a., "Photochemische Therapie in der Derma to log ie, in "Photochemotherapie: grundlegende Technik und Nebenwirkungen", Berichte aus der Deutsch-Schwedischen Tagung über Photomedizin in Oberursel, BRD, S. 71, 23.-25. April 1975, Hrsg. E.G. Jung, Schattauer Verlag, Stuttgart-New York, 1976 ) und von grauem Star ( vgl. S. Lerman u.a., "Methode zum Nachweis von 8-Methoxypsoralenen in der Linse des Auges", Science 197, 1287 (1977) ). Diese Risikofaktoren treten bei der oralen Verabreichung von Psoralenen auf.

O O O OO

Darüber hinaus besteht das Problem der Phototoxi-r zität der Haut, das sich bei lokaler Applizierung von Psoralenen als besonders schwerwiegend erweist.

Tatsächlich ist allgemein bekannt, daß auch sehr

2 geringe Dosierungen von Psoralenen ( 1-5 pg/cm ) durch Photoinduktion die Erscheinung eines schmerzhaften und lästigen Hauterythems beim Menschen und beim Meerschweinchen verursachen; nach einigen Tagen folgt auf dieses Erythem eine dunkle Pigmentierung ( vgl. Pathak u.a., " Biologische Bestimmung von natürlichem und synthetischem Furocumarin (Psoralene)", J. Inv. Deramtol., 32, 509 (1959) ).

Einige Studien über dieses Thema scheinen darauf hinzudeuten, daß die Phototoxizitat der Haut hauptsächlich auf den durch Photoinduktion hervorgerufenen bifunktionellen Läsionen der Hautzellen-CNS durch die Psoralene beruht ( vgl. F. Dall'Acqua u. F. Bordin, " Jüngste Erkenntnisse über die photobiologischen Eigenschaften von Furocumarinen in den molekularen Grundlagen von Hauterkrankungen", Hrsg. M.A. Pathak und P. Chandra, Plenum, NY im Druck ); darüber hinaus scheinen die Ergebnisse anderer Studien darauf hinzuweisen, daß auch die gentoxische Wirkung (gemessen an der mutagenen Aktivität),

mit der der krebserregende Effekt von Psoralenen eindeutig in Verbindung steht, zum größten Teil den Querverbindungen zuzuschreiben ist ( vgl. L. Dubertret u.a., " Psoralene in der Kosmetik und in der Dermatologie", Hrsg. J. Cahn u.a., Pergamon Press, 1981, S. 245 ).

Lm diese unerwünschten Nebenwirkungen der Psoralene auszuschalten, sind einige monofunktionelIe Furocumarine vorgeschlagen worden, d.h. Furocumarine, die nur monofunktionelIe Lichtschädigung der zellulären DNS hervorrufen können. Es wurde insbesondere vorgeschla-

33372Q7

gen, Angelicinderivate mit einer oder mehreren Alkyl-Gruppen zu verwenden, mit dem

Ziel, sowohl die Fähigkeit, mit der DNS eine Photoreaktion einzugehen, als auch die proliferationshemmende Wirkung zu verstärken. Die Alkyl-Gruppen,, wurden insbesondere in den Positionen A-, 5-, 4¹- und 5'- eingeführt.

Die auf diese Weise erhaltenen Alkyl angel ic ine haben auch im Dunkeln eine starke Affinität gegenüber DNS gezeigt; sie bilden einen molekularen Komplex mit dem Makromolekül und induzieren für die nachfolgende Bestrahlung auf eine selektive und sehr wirkungsvolle Art mon.of unkt ionel Ie Lichtschädigungen der DNS und weisen ebenfalls eine starke proliferationshemmende AKtivität auf.

Diese bekannten Alkylangelicine, und insbesondere die Methylangelicine, haben bei lokaler Applikation eine starke Wirkung bei der Therapie von Psoriasis gezeigt. Gleichzeitig können sie praktisch keine Phototoxizität der Haut hervorrufen; darüber hinaus wurde nachgewiesen, daß ihre genschädigende Wirkung im allgemeinen geringer ist als die von Psoralenen ( vgl. US-PS 4, 312, 883 ).

Dennoch ergaben sich bei der Herstellung dieser Verbindungen durch chemische Synthese einige Schwierigkeiten bezüglich der Erreichung von Reinheitsgraden, die nicht nur für Laborversuche über ihre proliferationsherrmende Aktivität sondern insbesondere auch für ihre klinischen Tests akzeptabel sind. Eigentlich beginnt die Synthese dieser Alkylangelicine bei den geeigneten O-Preny1-Unbel1iferonen_f . also den O-Monoalkylallyl- oder den O-Dialkylallyl-Umbelliferonen, oder O-Acyl-Umbelliferonen bei denen die Al-

- 8 - S

kyl- oder Acylgruppe in di^_eO_riteU^:un„g,^:um^e!a.g«srt 333 7207 wird (Claisen oder Fries). Eine derartige Umlagerung ist nicht eindeutig, da sie nicht nur in der 8-Stellung, sondern auch in der 6-Stellung vorkommt. Die 6-Prenyl-Zwischenprodukte, also die 6-Monoalkylallyl oder die 6-Dialkylallyl-Zwischenprodukte, oder 6-Acyl-Zwischenprodukte bilden im Laufe der nachfolgenden Syntheseschritte Alkylpsoralene (d. h. lineare Furocumarine), welche Isomere von Alkylangelicinen sind.

Berücksichtigt man die Tatsache, daß Methylpsoralene sehr gut Strangquerverbindungen bei der CNS verursachen können, kann ihre Anwesenheit in denArgeliainen,auch wenn sie nur in Spuren vorhanden sind, die photobiolcgisehen und phototherapeutischen Eigenschaften dieser Angeli ine weitgehend verändern. Besonders die Methylpsoralene zeigen eine starke Haut-phototoxische Wirkung ( vgl. Rodighiero u.a. , Il Farmaco, " Photochemische und photobiologische Eigenschaften von 4,5·-Dimethylpsoralenen ", Edizioni Scientifiche, 36, 648, 1981; G. Caporale u.a., "Haut-photosensibilisierende Wirkung einiger Methy lpsoralene¹¹, Experimentia 23, 985 (167) ).

Aus diesen Gründen beinhaltet die Synthese der obengenannten Alkylangelieine ein gezwungenermassen sorgfältiges, langwieriges und aufwendiges Verfahren zur Trennung der benötigten 8-AlIy1-Zwischenprodukte oder der 8-Acylumbel1iferone von den entsprechenden 6-Isomeren.

Bei dieser Erfindung wird dieses Problem anhand eines Herstellungsverfahrens von psoralenfreien Alkylangelicinen mit der Formel (1) gelöst,

wobei R ein Alkyl ist, R., R₂, R , und R₅ unabhängig voneinander entweder Wasserstoff oder Alkyl sind, R, ist Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy methyl, Acetoxymethyl, Methoxymethyl sowie Aminomethyl, Alkylaminomethyl, Dialkylaminomethy1 oder eine Gruppe der Formel

- CH₂ - O - (CH₂)₂ —

wobei R₇ und R„ gleichzeitig Wasserstoff, Methyl oder Äthyl sind, und zwar frei oder als Salz

Jk das dadurch gekennzeichnet ist, daß ein 6-Alkyl

umbel 1iferon-O-Derivat mit der Formel (2)

bei dem R, R,, R₂, R₃ die obenerwähnte Bedeutung haben und bei dem R. ein Acylrest mit der Formel

- CO - R₉

ist, bei dem Rg eine Alkylgruppe ist oder

ein Allylrest mit der Formel

- OR₁₀ - CH = Cl-R₁₁ ist,

wobei R.„ und R,, unabhängig voneinander entweder

WasserstoffoderAlkylsind,

nach Fries oder Cl aisen umgelagert wird, wobei

die Verbindung der Formel (3)

(3)

bzw. der Formel (4)

(4)

CH-R₄₁ CH

erhalten werden. CH-R

JlO

Im Falle der Verbindung (3) wird dann mit Bromessigsäureethylester kondensiert, anschließend zur Säure hydrolisiert und daraufhin durch Essigsäureanhydrid und Natriumacetat cyklisiert, was ein 6-Alkylangeliein mit der Formel (1) ergibt, bei dem R₅ Wasserstoff und R₆ eine Alkylgruppe ist, während im Falle der Verbindung (4), acetyliert, bromiert und in alkalischem Milieu cyklisiert wird, was zu einem 6-Alkylangelizin mit der Formel (1) führt, wobei R₅ Alkyl und Rg Wasserstoff oder Alkyl ist, oder, nachdem es davor ozonisiert und mit Wasserstoff und Katalysator in ein cL,*L-Alkyl- (8 -cumarinyl)azetaldehyd reduziert worden ist, wird es in saurem Milieu cyklisiert, was zu einem 6-Alkylangelic in mit der Formel (1) führt, bei dem R₅ Wasserstoff ist, und, wenn R, bei der Verbindung (1) Wasserstoff ist, wird es durch Behandlung mit Chlormethylme thy lather in das entsprechende 4'-Chlormethylangelicin überführt, was dann in die entsprechenden 4'-Hydroxymethy1-, 4'-Acetoxymethy1 -, 4¹-Aminomethyl- , 4'-Alky1aminomethy1 -, 4'-Dialkylami η ome t h y 1 - 4 · -Aminoethoxymethy 1- oder 4' -Dimethylaminoethoxymethyl- oder 4'-Diethylaminoethojiymethyl-Derivate umgewandelt wird und schließlich, um wasserlösliche Verbindungen zu erhalten, werden die Derivate, die die Aminogruppe enthalten, ob substituiert oder nicht, in die entsprechenden Hydrochloride überführt.

Die gemäß der Erfindung durch dieses Verfahren gewonnenen Alkylangelicine sind durch die allgemeine Formel (1)

Al

gekennzeichnet, wobei R Alkyl ist, und R,, R~ R, und R₁- unabhängig voneinander entweder Wasserstoff oder Alkyl sind, R^ Wasserstoff, Alkyl, Hydroxymethyl, Acetoxymethy1, Methoxymethy1 sowie Aninomethyl, Al ky 1 ami nome thy 1 _f Dialky laminomethy 1 oder eine Gruppe mit der Formel

-CH₂ - O - (CH₂J₂ — N

ist, wobei R₇ und R_Q gleichzeitig Wasserstoff, Methyl oder Ethyl sind, wobei die Verbindungen frei oder als Salz vorliegen.

Vorzugsweise werden die Alky!angeli eine gemäß der Erfindung aus einer Gruppe ausgewählt

die 6-Methyl-Angelicin, 6,5-Dimethy1angelicin, 6,5'-Dimethylangelicin, 6,5,5'-Trimethy1-angelicin, 6,4,5'-Trimethy!angel ic in, 6,4-Dimethy1 angelicin, 6,4'-Dimethylangelicin, 6,5,4'-Trimethy1-angelicin und 6,4,4·-Trimethylangelic in umfaßt.

Im wesent1ichen werden die 6-Alkylangelizine gemäß der vorliegenden Erfindung ausgehend von einem Lmbelliferon gewonnen, bei dem die 6-Position bereits durch eine Alkyl gruppe substituiert ist; auf diese Art können die 7-Allyloxy- oder 7-Acyloxy-umbel1iferon-Zwischenprodukte durch Umlagerung der Allyl- oder Acylgruppe nurdie 8-Acylderivaten bilden. Demnach ist die Anwesenheit von Psoralenen, auch nur von Spuren davon, während der nachfolgenden Syntheseschritte absolut ausgeschlossen.

Die vorliegende Erfindung ist nachfolgend anhand der untenstehenden Beispiele näher erklärt. Wenn nicht anders erwähnt, beziehen sich die Mengen- und Prozentangaben auf das Gewicht.

Eine Mischung von 2,4-Dihydroxytoluol (18,7 g), Monohydroxybernsteinsäure (18,7 g) und konzentrierter H₂SO. (37 ml) wurde gelinde erwärmt, bis die Gasentwicklung fast aufhörte. Die hochrote Reak tionsmischung wurde dann unter kraftigem Umrühren in kochendes Wasser (300 ml) gegossen und die Suspension weiter gerührt bis die gummi artige Masse, die sich anfänglich gebildet hatte, vol1 ständig dispergiert war. Der feste Stoff wurde abfiltriert, getrocknet und aus reinem Ethand kristallisiert, wodurch man 6-Methyl-7-hydroxycumarin(l) ( 14,5 g; Schmelzpunkt 253-4° C mi t Zers.) erhielt.

Be|s.p_j_eJ__2

Auf eine ähnliche Weise wie im Beispiel 1 beschrieben, erhielt man ausgehend von 3,5-Dihydroxy-2-methy1 toluol ( 9,6 g ) das 5_S6-D!methyl-7-hydroxycumarin (II), kristallisiert aus Methanol ( 8,5 g; Schmelzpunkt 262⁰C mit Zers.)

Eine Lösung von 2,4-DihydroxytoIuol (10,0 g) in Essigester (12 ml) wurde in kleinen Mengen in konzentrierte H₂SO^ ( 26 ml) gegossen und im Eisbad abgekühlt. Nach vollendeter Beimischung wurde der erhaltene feste Stoff abfiltriert, mehrmals mit Wasser neutral gewaschen,

getrocknet und aus MeOH kristallisiert, wodurch man 4,6-Dimethyl-7-hydroxycumarin (III) ( 10,64 g; Schmelzpunkt 273° C ) erhielt.

(Ill)

Eine Mischung von 6-Methyl-hydroxycumarin (I) ( 14,5 g), wasserfreiem K₂CO₃ (5g), Allylbromid (15ml) und Aceton (100 ml)--wurde 12 Stunden lang unter Umrühren unter Rückfluß erhitzt. Der feste Stoff wurde abfiltriert und mehrere Male mit Aceton gewaschen. Die Acetonlösung und die vereinigten Waschflüssigkexten wurden bis zur Trockene konzentriert und der Rückstand aus MeOH kristallisiert, wodurch man 6-Methyl-7-al Iy1 oxycumarin (IV) (11,4g; Schmelzpunkt 124-5⁰C) gewann.

(IV) .

CH₂=CH-CH₂-O

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 4 beschrieben, erhielt man aus 5,6-Dimethy1-7-hydroxycumarin (II) (5,0 g) 5,6-Dimethyl-7-allyloxycumarin (V), kristallisiert aus MeOH (3,8 g; Schmelzpunkt 123⁰C)

Aus 4,6-Dimethyl-7-hydroxycumarin (III) (9,6 g) erhielt man 4,6-Dimethyl-7-alIyloxycumarin (VI), kristallisiert aus MeOH (10,0 g; Schmelzpunkt 134° C).

Eine Lösung 6-Methyl-7-hydroxycumarin (IV) (11,4g) in Diethylanilin (80 ml) wird 2 Stunden lang unter Zurückfluß erhitzt. Nach Abkühlen der Lösung wurde diese mit η-Hexan verdünnt (500 ml) und ergab einen Niederschlag, der durch Filtern abgefangen, mehrere Male mit η-Hexan gewaschen und aus EtQAc kristallisiert wurde, wodurch man 6-Methyl-7-hydroxy-8-alIy1-cumarin (VII) (6,3 g; Schmelzpunkt 161-2⁰C) gewann.

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 7 beschrieben, erhielt man aus 5,6-Dimethy1-7-allyloxycuma rin (V) (2,0g) 5,6-Dimethyl-7-hydroxy-8-al lylcumarin (VIII), kristallisiert aus EtOAc/Cyklohexan (1,2g; Schmelzpunkt 169-70⁰C).

(VIII)

Aus 4,6-Dimethyl-7-al lyloxycumarin (VI) (9,5 g) erhielt man 4,6-Dimethyl-7-hydroxy-8-al lylcumarin (IX), kristallisiert aus EtOAc/Cyklohexan (6,2g; Schmelzpunkt 179-80⁰C).

(IX)

CH₃

CH

CH,

Beispiel 10

Un die Alky!angelicine mit einer Alkylgruppe an dem Furanring herzustellen wurden die 8-Al1ylcumarine acetyliert und bromiert, wodurch man 8-(2',3' -Dibrompropyl)-Derivate erhielt, die anschließend mit Ethanol KCH cyklisiert wurden, um die entsprechenden 5'-Methy1ange1ieine zu gewinnen.

Auf diese Weise ließ man eine Mischung von 6-Methyl-

7-Hydroxy-8-allylcumar /VII) (6,3 g), wasserfreiem
Natriumacetat (1,5 g) und Acetanhydrid (40 ml) eine
Stunde unter Rückfluß kochen. Die Reaktionsmischung
wurde vorsichtig mit Wasser (40 ml) verdünnt, 10 Min. unter Rückfluß gekocht und anschließend in Wasser
(300 ml) gegossen, wodurch sich ein Niederschlag ergab, der abfiltriert und mehrere Male mit Wasser gewaschen wurde. Das trockene Produkt wurde aus MeOH kristallisiert und ergab 6-Methyl-7-acetoxy-8-allylcumarin (X) ( 6,1 g; Schmelzpunkt 110-11⁰C).

^(X) CH₃COO

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 10 beschrieben, erhielt man ausgehend von 5,6-Dimethy1-7-hydroxy-8-al lylcumar in (VIII) (2,5 g) 5 ,6-Dimethy 1-V-^
oxy-8-alIyI cumarin (XI), kristallisiert aus MeCH
(2,2 g ; Schmelzpunkt 148-9° C);

5H₂-CH=CH,

Aus 4,6-Dimethyl-7-hydroxy-8-allylcumarin (IX) (3 g) erhielt man 4,6-Dimethy1-7-acetoxy-8-allylcumarin (XII), kristallisiert aus MeCH (2,4 g; Schmelzpunkt 139-140° C)

CH₃COb

4P

Be_i_S£_i_e]__13

Einer Lösung von ö-Methyl-Vacetoxy-S-AHylcumarin (X) (7g) in 100 ml Essigsäure wurde 50 ml Essigsäure die die stöchiometrisehe Menge Brom enthielt,bei Raumtemperatur tropfenweise beigemischt.

Nach Beendigung der Beimengung, wurde die Lösung 30 Minuten lang gerührt, das Lösungsmittel unter reduziertem Druck verdampft und der feste Rückstand aus MeOH kristallisiert, was das 6-Methy1-7-acetoxy-S-(2',3'-dibrompropy1)cumarin (XIII) (6,8 g; Schmelzpunkt 154-5° C) ergab.

(XIII)

Beispiele 14-15

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 13 beschrieben, wurde aus 5,6-Dimethyl-7-acetoxy-8-a1lylcumarin (XI) (2,6 g) 5,6-Dimethyl-7-acetoxy-8-(2',3'-dibrompropyl)cumarin (XIV) gewonnen, (2,1 g; Schmelzpunkt 168-9° C) kristallisiert
aus MeOH. H₃C

Aus 4,6-Dimethyl-7-acetoxy-8-allylcumarin (XII) (2,3g) erhielt man 4,6-Dimethy 1-7-acetoxy-8-(2',3'-dibrompropyl)cumarin (XV), kristallisiert aus MeCH (1,5 g; Schmelzpunkt 135-137° C).

- * β ο

(XV)

CH_aCO0

CH₃ Br-CH₂-CH-Br

Einer Lösung von 6-Methyl-7-Acetoxy-8-(2',3'-dibrompropyl)cumarin (XIII) (1,5g) in 100 ml Ethanol mischte man eine 4% KQH-Ethanollösung bei, entsprechend
einem Cumarin/KOH - Molverhältnis von 1:10. Man ließ die Mischung 80 Minuten lang im Dunkeln unter Rückfluß kochen, dann wurde sie abgeschreckt, mit H₂O (200 ml) ver dünnt und mit verdünntem HCL angesäuert. Der dadurch erhaltene Niederschlag wurde abfiltriert, mit H₂O ge waschen, getrocknet und auf einer Si 1ikagelsäule durch Eluierung mit CHCl₃ chromatographiert, wodurch man das 6,5'-Dimethylangelicin (XVI) erhielt, kristallisiert aus MeCH (0,52 g; Schmelzpunkt 175-6° C).

Hf,

(XVI)

Auf eine ähnliche Weise wie im Beispiel 16 beschrieben, erhielt man ausgehend von 5,6-Dimethy1-7-acetoxy-8-(2·,3'-dibrompropyl)cumarin (XIV) (1,07 g) 6,5,5'-Trimethy!angelizin (XVII), kristallisiert aus MeCH ( 0,38 g; Schmelzpunkt 204-5° C).

(XVII)

Aus 4 , 6-Dimethy 1 -7-ac et oxy-8-(2 ' , 3 ' -d ib romp ropy 1 leumarin (XV) (2,1 g) gewann man 6,4,5'-Trimethy1 angeli■ ein (XVIlI), kristallisiert aus MeCH (0,62g; Schmelzpunkt 183° C).

H₃C

Das nachfolgend beschriebene Verfahren wird zur
Herstellung _von Alky1ange1iζinen ohne Alkylgruppen
an demFuranring verwendet. Die 8-AlIy1-Derivate
der cumarine (VII), (VII), IX) wurden ozonisiert und dann reduziert, wodurch man die 8-C.umar iny !acetaldehyde erhält, die anschließend mit 85% H-PO cyklisiert wurden.

Das 6-Methy 1 -/-hydroxy-8-a 1 Iy lcuniar in (VlI) (1,7 g)

wurde in Essigester (150 inl) gelöst und durch

diese Lösung, die im Eisbad abgekühlt wurde, ein

Strom ozonisierten Sauerstoff durchgeperlt, bis

man 1,1 mal die s töchi ornetr i sehe Menge Ozon erreichte.

Daraufhin wurde die Lösung sofort in Gegenwart von

10% igem Pd auf CaCO, ( 0,3 g) hydriert und die Mischung

gerührt bis die schnelle Absorption von Wasserstoff aufhörte. Den Katalysator entfernte man durch Filtern, das Lösungsmittel wurde bei reduziertem Druck verdampft und der Rückstand mit 85% igem H,,PO. (60 ml ) behandelt. Die Reaktionsmischung wurde daraufhin in ein thermos tatisches Bad bei 100° C für 20 Minuten gelegt, gekühlt , mit t-LO (200 ml) verdünnt und mit CHCl₃ extrahier.t. Aus der mit Na₃SO₄ getrockneten organischen Phase wurde das Lösungsmittel unter reduziertem Druck verdampft und der Rest auf einer Silikagel-Säule durch Eluierung mit CHCl, chromatographiert

wodurch man das 6-Methylangelic in (XIX), kristallisiert aus MeCH ( 0,18 g; Schmelzpunkt 164-5° C) erh i e11.

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 19 beschrieben erhielt man aus 5 ,6-Dimethy 1 -7-h ydroxy-8-ral Iy lcumarin (VII) (2,0 g) das 6,5-Dimethylangelic in (XX), kristallisiert aus MeCH (0,21 g; Schmelzpunkt 219-20° C)

(XX) HJG,

«τ -

Aus 4,6-Dimethyl-7-hydroxy-8-aiJylcumarin (IX) (3,2 g) erhielt man das 6,4-Dimethylangelic in (XXI), kristallisiert aus MeCH (0,42 g; Schmelzpunkt 150 1° C).

CH,

Bej_s_p_i_e]__22

Lm die Alkylangelicine mit einer Alkylgruppe in der 4'-Position an demFuranring herzustellen, wurden die geeigneten Lmbel1iferone (I), (II), (III) acetyl iert und die 7-Acetoxycumarine, die man auf diese Weise erhielt, wurden nach Fries umgelagert. Die 8-Acetyl-umbel 1iferone wurden in die Ethylester der 7-(8-Acety 1cumariny1) oxyessigsäuren überführt, die daraufhin hydrolisiert und cyklisiert wurden, wodurch man die gewünschten 4 '-Methylangelicine gewann. Auf eine solche Weise ließ man eine Mischung aus 6-Methyl-7-hydroxycumarin (I) (10,ο g), Acetanhydrid (40 ml) und wasserfreiem AcCNa (4,0 g) eine Stunde lang unter Rückfluß kochen. Der Reaktionsmischung mengte man vorsichtig das gleiche Volumen H₂O bei und ließ das Ganze 10 Minuten lang unter Rückfluß kochen. Die Mischung wurde mit H₉O (300 ml) verdünnt, abgekühlt und der Niederschlag abfiltriert, dann mehrere Male mit H₂O gewaschen, getrocknet und aus MeOH kristallisiert, was das 6-Methyl-7-acetoxycumarin (XXII) (10,0 g; Schmelzpunkt 147° C) ergab.

(XXII)

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 22 beschrieben, bereitete man aus 5,6-Dimethy l-7-h,ydroxycumar in (II) (5,0 g) 5,6-Dimethy1-7-acetoxycumarin (XXIII)

kristallisiert aus MeCH (4,6 g; Schmelzpunkt 206° C).

(XXIII)

Aus 4,6-Dimethy1-7-hydroxycumarin (III) (8,0g) erhielt man 4,6-Dimethy1-7-acetoxycumarin (XXIV), kristallisiert aus MeCH (7,8g; Schmelzpunkt 160-1° C).

(XXIV)

Eine Mischung aus 6-Methyl-7-acetoxycumarin (XXII) (2,o g), wasserfreiem AlCl₃ (4,4 g) und NaCl (2,0 g) wurde bei 160-170 ⁰C anderthalb Stunden lang erwärmt. Nach Abkühlen der Reaktionsmischung Zersetzte man diese mit verdünntem HCl (50 ml), ließ sie 10 Minuten lang

unter Rückfluß kochen, goß sie in H„O (200 ml) und extrahierte sie mit EtOAc. Die getrocknete organische Phase (Na„SO.) ergab bei Verdampfung des Lösungsmittels einen Rückstand, der

3«

aus MeOH kristallisiert wurde, was zum 6-Methyl-7-hydroxy-8-acetylcumarin (XXV) (1,1g ; Schmelzpunkt 170° C ) führte.

(XXV)

HO

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 25 beschrieben, erhielt man aus 5,6-Dimethy1-7-acetoxycumarin (XXIII) (3,0 g) 5,6-Dimethyl-7-hydroxy-8-acetylcumarin (XXVI), kristallisiert aus EtQAc ( 0,95g; Schmelzpunkt 216-8° C).

(XXVI)

Aus 4,6-Dimethyl-7-acetoxycumarin (XXIV) (3g) erhielt man 4,6-Dimethy1-7-hydroxy-8-ac_etylcumarin (XXVII), kristallisiert aus MeOH (1,05g; Schmelzpunkt 236-7° C)

(XXVII)

IS

Eine Mischung aus 6-Methyl^-hydroxy-e-acetylcumarin (XXV) (1,8g) und Bromessigester. (3 ml) wurde in Aceton (50 ml) aufgelöst und in Gegenwart von wasserfreiem K„CO, 3 Stunden lang unter Rückfluß gekocht. Nach Abkühlen wurde der feste Stoff abfiltriert und das Lösungsmittel bei reduziertem Druck verdampft. Der Rest wurde aus EtOAc/Cyklohexan kristall i s iert ,und der Ethylester der 7-(6-Methyl-8-acety lcumarinyl) oxyessigsäure (XXVIII) (1,7g; Schmelzpunkt 88-9⁰C) erhalten.

(XXVIII) C₈H-OOC-CH₂-O

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 28 beschrieben wurde aus 5,6-Dimethy1-7-hydroxy-8-acetylcumarin (XXVI) (l.Ag^der Ethylester der 7-(5,6-Dimethy1-8-a'ce ty lcumarinyl) oxyessigsäure (XXIX) gewonnen, die aus EtOAc/Cyklohexan kristallisiert wurde (0,8g; Schmelzpunkt 109° C).

(XXIX)

Aus 4,6-Dimethy 1-7-hydro xy-8-acety lcumar in (XXVII) (3,2 g) erhält man den Ethylester von 7-(4,6-Dinnethyl-8-acetylcumar iny 1) oxyessigsäure (XXX), kristal lisiert aus EtOAc/ yklohexan (2,2 g; Schmelzpunkt 96-7° C).

Der Ethylester der 7-(6-Methy 1-8-acetylcmmar iny 1 )oxyessigsäurc (XXVIIl) (1,8 g) wurde in einer Wasser-Methanollösung (1/1) von 5%-igemKCH (70 ml )aufgelöst und die Lösung 15 Minuten lang im Dunkeln unter Rückfluß gekocht. Nach Abkühlung und Ansäuerung mit verdünntem HCl, .wurde die Lösung mit H₂O ( 200 ml) verdünnt und der feste Niederschlag durch Filtern gewonnen, ge trocknet und aus EtOAc/ yklohexan kristallisiert, was die 7-(6-Methyl-8-acetylcumariny 1 )oxyessigsäure (χχχΐ) (1,1 g; Schmelzpunkt 196-7° C) ergab.

(XXXI)

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 31 beschrieben, wurde aus dem Ethylester der 7-(5,6-Dimethy1 8-acetylcumar iny 1)oxyessigsäure (XXEX) (1,7g) die 7-(5,6-Dimethyl-8-acetylcumariny1)oxyessigsäure (XXXII) gewonnen, kristal1isert aus MeOH ( 1,3g; Schmelzpunkt 219-20° C).

CH₃

^(XXXI ¹ ⁾ H00C-CH_s-0

Aus dem Äthylester der 7-(4,6-Dimethy 1-8-acetylcuimar inyl) oxyessigsäure (XXX; 1,9g) erhielt man die 7-(4,6-

Dimethyl-8-acety lcumar iny 1) oxyessigsäure (XXXIII), kristallisiert aus EtOAc ( 1,35g; Schmelzpunkt 184-6° C) .

CH₃

(XXXI I I ) HOOC-CH₂-O

Man ließ eine Mischung aus 7-(6-Methy 1-8-acetylcumarinyl) oxyessigsäure (XXXI; 3,7g), wasserfreiem AcONa

( 3g) und A etanhydrid (30 ml)eine Stunde lang unter Rückfluß kochen. Unter diesen Bedingungen wurde die Verbindung (XXXI) cyklisiert und dabei fast vollständig decarboxyliert. Der Mischung mengte man vorsichtig H„0 (30 ml)

bei und ließ dann das Ganze abermals 10 Minuten unter Rückfluß kochen. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde mit H₂O (300 ml) verdünnt, durch NaHCO₃-Zugabe alkalisch gemacht und die Suspension mit EtOAc mehrere Male extrahiert. Aus der getrockneten organischen Phase (Na_?SO.) ließ man das Lösemittel verdampfen und den Rückstand aus MeOH kristallisieren, wodurch man 6,4'-Dimethylangelicin (XXXIV) ( 2,1g; Schmelzpunkt 156-7° C) erhielt.

(XXXIV)

Auf eine ähnliche Weise wie in Beispiel 34 beschrieben gewann man aus der 7- (5 ,6-Dimethy 1 -8- acetylcumari«yl) oxyessigsäure (XXXII) (2,2 g) das 6,5,4'-Trimethylangelic in (XXXV), kristallisiert aus MeCH ( 1,15 g; Schmelzpunkt 229° C).

CH₃
H₃C,

(XXXV)

CH₃

Aus der 7-(4,6-Dimethy1-8- acetylcumarinyl)oxyessigsäure (CCCIII; 1,7 g) erhielt man das 6,4,4'-Tr imethy1angelicin (XXXVI), kristallisiert aus MeCH (0,85 g; Schmelzpunkt 201-2° C).

CH,

(XXXVI)

CH.

Die gemäß der Erfindung erhaltenen 6-Alkylangelic ine stellen gegenüber den bekannten Alkylangel icine einen nennenswerten technischen Fortschritt dar, und dies sowohl bezüglich ihrer therapeutischen Sicherheit, da sie absolut frei von Psoralenen sind, als auch bezüglich der Einfachheit ihrer Gewinnung.

In der Tat gewährleistet das absolute Fehlen von Psoralenen, daß die prol i f erat ionshermnende Wirkung nur monofunktionellen DNS-Läsionen zuzuschreiben ist, und gleichzeitig ermöglicht es die Erhaltung der Verbindung anhand eines schnelleren, einfacheren, weniger 'aufwendigen und wirksameren Verfahrens.

Die 6-Alkylangeli eine weisen eine starke Affinität gegenüber DNS im Dunkeln auf, wobei sich molekulare Zwischenkomplexe bilden; darüber hinaus verbinden sich die durch Bestrahlung mit DNS verbundenen 6-Methylangelieine sehr stark mit dem Makromolekül und verursachen somit nur monofunktionelIe Läsionen ( Tabelle I ).

be i _P£äk 1 l

Die 6-Alkylangelicine zeigen eine starke prolifera tionshemmende Wirkung bei Ehr lieh- Ascites-Tumorzellen ( Tabelle II ) und auf der Haut von Mäu sen bezüglich ihrer hemmenden Wirkung auf die DNS-

Synthese ( Tabelle III ). Diese Verbindungen können praktisch keine Phototoxicität auf der Kaut bei Albino-Meerschweinchen hervorrufen (Tabelle II).

Tabelle I

Bindungsparameter - _Von Komplexen

aus 6-Alkylangelieinen und DNS und Geschwindigkeitskonstante ihrer Photoreaktionen mit dem Makromolekül.

Verbindung	K-Werte n^a	560	l/n	b Geschwir	idigkeitskons
		925+64		χ min	χ 10²
		,990+232
angelicin		,300+541	15.87	0.063+0.003	1.10
6-methylangelicin		,975+136	20.83	0.048+0.002	3.60
6,4-dimethylangelicin	2	,100+1190	15.87	0.063+0.003	5.23
6,4' -dimethylangelicin	6	,310+281	16.39	0.061+0.003	9.90
6,5' -dimethylangelicin	1	,730+339	12.82	0.078+0.004	3.00
6,4,4'-trimethylangelicin	10		10.99	0.091+0.0045	13.30
6,4,5'-trimethylangelicin	3	22.22	0.045+0.002	7.02
6,5,5'-trimethylangelicin	3	14.29	0.070+0.0035	2.30
		7.81^C	0.128C	3.10

a) Gemäß Mc Ghee und Von Rlippel ( vgl. J. Mol. Biöl., 86, 469, 1974 ) wird η hier als die Anzahl von Nukleotiden definiert, die von einem gebundenen Molekül Angelieinderivat absorbiert wird,

b) l/n definiert, gemäß Mc Ghee und Von Hippe], die Häufigkeit der Bindestellen; in anderen Worten, die Anzahl der pro Nukleotid gebundenen Liganden, und es kann somit analog zum Wert "n" betrachtet werden, den man bei der klassischen Seatchard-Methode erhält ( vgl. Ann. N.Y. Acad. Sei 5J., 660, 1949 ).

c) Als Referenzverbindung ; die Angaben entstammen von Dell'Acqua u.a. ( vgl. J. Invest. Dermatol., 29, 283, 1979 ).

27

TABELLE I I

Photobiologische Eigenschaften von 6-Alkylange!ic inen

	8=M0P (b)	13.8 +	ΙΟ"¹⁸) -	l· Abw.	Relative Wirkq.	tes- erythemer- — regende Wirkg. auf d. Haut (a)
	angelicin	25.0 +	0.6		181	_{+ +}
	€-methylangelicin	26.3 +	1.1		100	-
	6„4-dimethylangelicin	4.0 +	1.4		95	-
	S,4'-dimethylangeliein	2.28+	1.3		625	-
Furancumarin Hemmung der DNS-Synthese in Ehrlich- Asci Tumorzellen	S,5'-dimethylangelicin	11.87+	0.63		1096	-
IDj-pfOuanten χ	6,<5,S'-trimethylangelicin <e, 4,4 ·-trimethylangelicin	3.67+ 0.06+	0.77		210	-
		1.5 0.007		646 41666	- "

a) bestimmt gemäß Bordin u.a. ( vgl. Il Farmaco, Ed. Sc, 36, 506, 1981 ).

b)

Als Referenzverbindung

TABELLE I I I

Verhinderung der epidermalen · DNS-Synthese bei lebenden Mäusen nach topischer Applikation ( 50yg/cm ) der Verbindung und UV-A-Bestrahlung ( 9 J/cm ) (a)

Furancumar in

% Verhinderung + Abw.

Kein Arzneimittel,nur Lösungsmittel 8-MOP (b)

Angelicin (b)

6-Methylangelisin

6,4-Dimethylangelfcin 6,4'-Dimethylangelfc:in 6,5-Dimethylangelicin 6,5,5'-Trimethylangelicin

2,5 + 1,3

61.0 + 1,6 17,5 + 2,5 29,25 +13,3 47,05 + 4,3 36,56 + 3,9 52,83 + 2,3

36.01 +11,7

a) bestimmt gemäß Bordin u.a. (vgl. Il Farmaco, Ed. Sc., 36, 506, 1981 )

b) Referenzverbindungen

Die 6-Alky1ange1 icine sind in der Lage, eine dunkle Pigmentierung der Haut beim Menschen hervorzurufen, ohne aber dadurch bei therapeutischen Dosierungen Erytheme zu verursachen ( Tabelle IV ).

TABELLE IV - Ergebnisse der topischen Photochemotherapie unter Anwendung von 6-Alkylangelicinen bei Psoriasis-Patienten

	Name	M.	Geschl. , Max. - 6-Methyl— anaelicine	Si	*	«•-DMA 9 J/cb	UV-A-Dosis „,	^öeQ_1HA	S-MOP	Eryth.-Blda. Pigm.-Kan.
Nr.		F.	I	e,<	¹ »	I'-TMA β J/Cffl²	Anz.	loot	95»	6-HA 8-MOP 6-HA B-HOP
	p.a.	P.			β	I '-TMA 4 J/ca	IS	90t	TOt
1	H.S.	r.		*	I' -TMA IB J/cb²	IS	loot	75t
2	B.H.	r.	β.4,	I'-THA « J/oa²	U	9St		+ »♦+ +
3	U.A.	V.	«,4	Γ -THA β J/coi²	Il	90t	90t	t++a) t
β	D. B. V.	t.			IS	100«	SOt	++♦ ++ t
S	r.B.			9	loot	85t	*»t+bl » ■**
S	C.H.P.	9			++ + ++
7

a) Die Behandlung mit 8-MDP wurde nach 4 Applikationen aufgrund schwerer Blasenreaktion gestoppt.

b) Die Behandlung mit 8-MDP wurde nach 5 Applikationen aufgrund schwerer Erythembildung gestoppt .

+ + f sehr stark ++ stark + mäßig

nicht vorhanden

DMA Dimethylangelicin
TMA Trimethylangelicin

Die 6-Alkylangelicine zeigen eine geringe Toxizität, geringer als die von 8-M3P ( 8-Methoxypsoralen), dem am häufigsten verwendeten Arzneimittel für die PUVA-Therapie. Die in Methylzellulosesuspension verabreichten 6,4'-Dimethylangelic ine zeigen zum Beispiel eine akute Toxizität, die sich durch nachstehende Werte darstellen läßt, ausgedrückt in LD_5n bei Mäusen:

per intraperitoneum 0,75 g/Kg (O,3g/Kg für 8-MDP)

per os >2g/Kg (o,75g/Kg für 8-M3P)

η e

Die genschädigende Wirkung der 6-Alkylangelicine, im Sinne der mutationserregenden Wirkung, ist viel geringer als bei 8-MDP ( Tabelle V).

TABELLE_V

Mutationserregende Wirkung von 6-Alkylangel ic inen bei E.coli WP2-uvr A bei Bestrahlung mit UV-A-Licht (a)

Fuid cumarin	10	Anzahl	Mutanten je	30 60	10⁶ Überlebende
	0.4 0.24 0.96 0.84 0.62	Bestrahlunqszeit (	1.5 3.1 0.99 1.83 2.63 1.24 1.98 1.23 1.93	Sekunden)
	20	90
8-MOP (b) 6,4-dlmethylancjelicJ.n 614'-dimethylangelicln 6,4,4'-trimethylangelicin *6,4,5-trimethylangelicin**	1.15 0.7 1.76 1.18 0.91	7.0

a) Der Versuch wurde bei einer Furocumarin-Konzentration von 5 yg/ml gemäß Venturini u.a. durchgeführt ( vgl. Chem.-Biol. Wechselwirkungen, 30, 203, 1980 ).

b) Als Referenzverbindung

Die therapeutische Wirksamkeit der zwei 6-Alkylangelicine, d.h. des 6,4'-Dimethylangelic ins und des 6,4,4'-Trimethylangelic ins, die aufgrund ihrer proliferation shemmenden Aktivität, ihrer geringen genschädigenden Wirkung und ihrer nicht vorhandenen Haut-Phototoxizitat bei Meerschweinchen unter den verschiedenen neuen Verbindungen ausgewählt wurden, wurde dadurch getestet, daß man ihre Fähigkeit maß, Psoriasis1 äsionen bei verschiedenen Patienten zu heilen ( siehe Tabelle IV ).

Un eine vergleichende Bewertung zu ermöglichen, wurde auch die Wirksamkeit von 8-MDP ( 8-Methoxypsoralen ), dem am häufigsten verwendeten Präparat für PUVA-Behandlungen, unter denselben Versuchsbedingungen getestet.

Bei den behandelten Patienten wurden verschiedene 4 χ 4 cm große Bereiche der befallenen Haut verwendet :

a) Im ersten Bereich wurde eine Ethanollösung (0,1% W/V) der untersuchten Verbindung so lange appliziert,

2 bis man eine Konzentration von 5 μ g/cm erreichte.

Daraufhin ließ man sie durch die Körperwärme (oder durch einen warmen Luftstrom ) verdampfen. Nach 20 Minuten wurde der Bereich mit einer Niederdruck -Quecksilber-Fluorescenzlampe des Typs PUVA WALD-MAMvI SYLVANIA F 15 T 8 bestrahlt, die ein Hochlei stungs-UV-A-Licht ausstrahl te.

Die Bestrahlungsdosen bewegten sich zwischen 2,5 und

2
13 J/cm ; insbesondere betrug die Anfangsdosis 2,5

2 2

J/cm und wurde allmählich bis auf 13 J/cm je nach Hauttoleranz erhöht.

Auf einen zweiten Hautbereich wurde eine Ethanollösung von 8-Methoxypsoralen (8-MOP)

bis zu einer Konzentration von 5 appliziert und der Bereich auf identische Weise wie unter Punkt a) beschrieben, bestrahlt.

c) ein dritter Bereich wurde auf dieselbe Weise behandelt wie in a) beschrieben, jedoch nicht mit UV-A-Licht bestrahlt.

d) ein vierter Bereich wurde wie in a) bestrahlt, dabei verwendete man dieselbe Dosis UV-A-Licht, jedoch keinerlei Verbindung.

Die Behandlung mit den zwei 6-Methylangelic inen wurde im allgemeinen 5 Mal in der Woche für 2 oder 3 Wochen weitergeführt. Eine gute Heilung der Psoriasisläsionen war im allgemeinen nach 9 Behandlungen zu beobachten, während im Falle der 8-M3P, der Heilungsgrad bei gleicher Behandlung eindeutig geringer war ( ca. 80% ). Hinzu kommt, daß erschien, daß die 6-Methylangel ic ine auf keinen Fall Hauterytheme verursachen konnten, selbst bei den Patienten, die unter Behandlung mit 8-MOP eine schwere phototoxische Reaktion aufgewiesen hatten.

Der mit den Angel icinderivaten behandelte Bereich bei dem keine Bestrahlung erfolgt war, zeigte keine Besserung, während der allein mit UV-A-Licht behandelte Bereich eine sehr geringe Besserung aufwies.

Während die 6,4'-Dimethyl angel ic ine eine eindeutige dunkle Pigmentierung des behandelten Bereichs verursachten, schwächer jedoch als die unter denselben Bedingungen durch 8-MDP hervorgerufene, schien das 6,4,4'-Trimethylange!ic in aktiver zu sein.

Of

Die pro]iferationshemmenden Wirkungen wurden durch histologisehe Untersuchungen von Biopsieprüf1ingen der getesteten Bereiche kurz nach der Behandlung oder einen Monat später nachgewiesen.

Die starke Wirkung der gemäß dieser Erfindung hergestellten 6-Alky1 angel ic ine, die sich in der Hemmungder epiderrnalen DNS-Synthese bei Mäusen nach oraler Verabreichung ausdrückt ( siehe Tabelle VI), ermöglicht es, diese Verbindungen auch bei oraler Verabreichung beim Menschen und UV-A-Bestrahlung als wirksam zu erachten.

Folgende pharmakologisehe Zusammensetzungen können für die orale Verabreichung der 6-Alky1 angelicine verwendet werden :

6-Alkylangelicin (Arzneimittel) 30 mg Milchzucker (Verdünner) 70 bis 120 mg

Mg -Stearat (Gleitmittel) 1 bis 1,5 mg

Na-Laury1sulphat (Netzmittel) I,^ mg enthalten in einer üblichen harten oder weichen Gelatinekapsel.

6-Alkylangelic in (Arzneimittel) 30 mg Milchzucker (Verdünner) 240 mg

Mg-Stearat (Gleitmittel) 2 mg

Maisstärke (Sprengmittel u. Gleitmittel) 60 mg

Mikrokristalline Zellulose (Gleitmittel u. Sprengmittel 10 mg

Polyvinylpyrrolidon (Bindemittel) 3% Na-Laury1sulphat (Netzmittel) 3mg eine oder mehrere Tabletten oder Kapseln je nach Körpergewicht, Alter und Geschlecht des Patienten, zur oralen Applikation zwei Stunden vor der Bestrahlung.

ZS

TABELLE_Y2 Henmung der ep i dermalen DNS-Synthese bei Mäusen "in vivo"nach oraJer Verabreichung der Verbindung (250 mg/Kg) und UV-ABestrahlung ( 9 J/cm ) (a).

FUROCUMARIN

% Hemmung + Abw.

angelicin (b) 8-MOP (b) 6-methylangelicin 6,4-dimethylangelicin 6,4,5'-trimethylangelicin 6,4,4'-triraethylangelicin 6,5,5'-trimethylangelicin 6,5-dimethylangelicin 6,4'-dimethylangelicin 6,5'-dimethylangelicin

28.0 + 2

39.1 + 3.7 19.65 + 9.2 58.4 + 13.0 36.8 + 8.5 67.72 + 8.2 60.6 +14.1 50.12 + 19 49.23 + 8.0 22.48 + 12.0

a) bestimmt gemäß Bordin u.a. ( vgl. Il Farmaco, Ed. Sc, 36, 506, 1981 ).

b) Referenzverbindungen

Claims

1. y Verfahren zur Herstellung von psoralenfreien Alky1ange1ieinen der Formel (1)

(D

wobei R ein Alkyl ist, R,, R~, R^, R₁. unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl sind, R. Was-

serstoff, Alkyl, Hydroxymethy 1, Acetoxymethy1, Methoxymethy1, sowie Aninomethyl, Alky1 aminomethyl, Dialkylaminomethyl ist oder einp Gruppe mit der Formel .,·*,

wobei R-, und R. gleicnzeitig Wasserstoff, Methyl oder Ethyl sind, frei oder als Salz, gekennzeichnet dadurch, daß ein 6-Alkylumbel1iferon-O-derivat der Formel (2)

wobei R, R,, R^, R^ die obengenannte Bedeutung haben und R. ein Acyl rest mit der Funnel

- CO - R₉

ist, wobei R_g ein Alkyl ist,

oder

ein Al IyI rest ist, mit der Formel

p. - CH = CHR, ,

wobei R_1n und R,, unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl sind, die nach Fries oder Claisen umgelagert werden, wobei man die Verbindungen

(3)

oder

(4)

erhält, dann, im Falle der Verbindung (3), mit Bromessigester kondensiert, anschlieBend zur Säure hydrolysiert und dann durch A etanhydrid und Natriumscetat cyklisiert wird, wodurch man ein 6-Alkylangelic in mit der Formel (1) erhält, wobei R₁- Wasserstoff und R, eine Alkylgruppe ist, während, im Falle der Verbindung (4), es acetyliert, bromiert und in alkalischem Medium zyklisiert wird, wodurch man ein 6-Alkylangelicin der Formei (1) erhält, wobei R,- Alkyl und R, Wasserstoff oder Alkyl ist, oder nachdem es erst ozonisiert und mittels Wasserstoff und Katalysator zu Uu. -Alkyl (8-c.umariniI)acetaldehyd reduziert worden ist, in saurem Medium cyklisiert wird, wodurch man 6-AlkyI angel ic ine der Formel (1) erhält, wobei R₅ Wasserstoff ist, und, wenn R^ der Verbindung (1) Wasserstoff ist, die Verbindung (4) durch eine Behandlung mit Chlormethylmethylaether in das entsprechende 4 ' -Ch 1 ormethy 1 ange 1 i ein überführt wird, was daraufhin in die entsprechenden 4 ' -Hydroxynethy 1 -, 4 ' -Acetoxymethy 1 - , 4 '-Aminomethyl - , 4 ' -Alky1 ami name thy 1 -, 4'-Dialkylaminomethyl- oder 4¹-aminoethoxynethyl- oder Dimethylaminoethoxymethyl oder

4'-Diethylaminoethoxymethyl-Derivate überführt wird und schließlich, um wasserlösliche Verbindungen zu erhalten, die Derivate, substituiert oder nicht, welche die Aminogruppe enthalten, in die entsprechenden Hydrochloride überführt werden.

2. Alkylangelic in, das anhand des in Anspruch 1) beschriebenen Verfahrens gewonnen wird und durch die allgemeine Formel

gekennzeichnet ist, wobei R Alkyl ist, R., R₂, R, und R₅ unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl sind, R, Wasserstoff, Alkyl, Hydroxymethy1, Acetoxymethy1 , Methoxymethy 1 sowie Ami normet hy 1 , Alky laminomethyl, Di alkyl ami norme thy 1 oder eine Gruppe mit der Formel

- CH₂ - ο - (CM.,,., _ „/*'

ist,

wobei R₇ und R„ gleichzeitig Wasserstoff, Methyl oder Ethyl sind«, frei oder als Salz.

3. Alkylangelicin gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6-Methylangelicin (XlX).

4. Alkylangelicin gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6-Dimethylangelic in wobei das zweite Methyl in der 3-, 4-, 5-, 4'- oder 5'- Stellung ist.

5. Alkylangelicin gemäß Ansprüchen 2 und 4 bestehend aus 6,5-Dimethylangelic in (XX).

6. Alkylangelic in gemäß Ansprüchen 2 und 4 bestehend aus 6,5'-Dimethylangelic in (XVI).

7. Alkylangelicin gemäß Ansprüchen 2 und 4 bestehend aus 6,4-Dimethylangelicin (XXI).

8. Alkylangelic in gemäß Ansprüchen 2 und 4 bestehend aus 6,4 '-Dimethylangelicin (XXXIV).

9. Alkylangelicin gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6,5,5'-Trime thy lange lic in (XVII).

10. Alkyl angelicin gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6,4,5■-Trimethy 1 angelicin (XVIII).

11. Alkylangelicin gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6,5,4'-Trimethylangelicin (XXXV).

12. Alky1ange1 iciη gemäß Anspruch 2 bestehend aus 6,4,4'-Trimethylangelicin (XXXVI).

13. Verwendung der Alkylangelic ine gemäß einem oder mehreren der Ansprüche 2 bis 12 für die Herstellung von Arzneimitteln zu Verwendung bei der Photochemotherapie von Psoriasis und von anderen Hauterkrankungen, die durch zelluläre Hyperproliferation gekennzeichnet sind, sowie von

. Vitiligo und Alopecia aerata.

14. Verwendung der nach dem Verfahren gemäß Anspruch 1 hergestellten psoralenfreien Alkylangelicine für die Herstellung von Arzneimitteln zur Verwendung bei der Photochemotherapie von Psoriasis und von anderen Hauterkrankungen, die durch zelluläre Hyperproliferation gekennzeichnet sind, sowie von Vitiligo und Alopecia aerata.