DE2751392A1

DE2751392A1 - Verfahren zur isolierung von cholesterin aus eiern

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Publication number: DE2751392A1
Application number: DE19772751392
Authority: DE
Inventors: Alexander Graham Fallis
Original assignee: FALLIS
Current assignee: FALLIS
Priority date: 1976-11-19
Filing date: 1977-11-17
Publication date: 1978-05-24
Also published as: JPS5366469A; GB1571257A; JPS5653978B2; CA1064907A; US4104286A

Description

PATENTANWÄLTE

DR. WALTER KRAUS DIPLOMCHEMIKER - DRING. ANNEKÄTE WEISERT DIPL ING. FACHRICHTUNG CHEMIE IRMGARDSTRASSE 15 · D-8OOO MÜNCHEN 71 · TELEFON O89/797O77-797O78 · TELEX O5-212156 kpatd

TELEGRAMM KRAUSPATENT

1697 WK/li

1. Alexander Graham FALLIS )

2. June Gertrude WINTER ) St. John's (Kanada)

3. John Marshall William SCOTT)

Verfahren zur Isolierung von Cholesterin aus Eiern

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Beschreibung *■ ' ^ '

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Isolierung von Cholesterin aus Eiern. Die Erfindung betrifft insbesondere ein Verfahren zur Isolierung von Cholesterin aus getrockneten gesamten Eiern und getrocknetem Eidotter bzw. Eigelb von Haushennen. Auf diese Weise wird nicht nur freies Cholesterin zur Verfügung gestellt, sondern auch ein genießbares Gesamtei-und genießbares Eidotterpulver, welches einen verminderten Cholesteringehalt hat.

Cholesterin ist ein geeigneter Vorläufer für in neuerer Zeit entwickelte Synthesen für chemische Substanzen, die zur oralen Geburtenkontrolle verwendet werden, sowie für Synthesen von Substanzen, die zur Herstellung von Vitamin D verwendet werden können und zur Herstellung von Derivaten, die in Flüssigkristallvorrichtungen verwendet werden können. Es sind daher schon viele Verfahrensweisen entwickelt worden, um Cholesterin aus Materialien zu isolieren, welche Cholesterin enthalten. Bei den meisten dieser Methoden ist bislang ein Lösungsmittel verwendet worden, um das Cholesterin bei spezifizierten Bedingungen aus dem Rohmaterial zu extrahieren. So wird z.B. in der US-PS 2 371 467 ein Verfahren zum Isolieren von Cholesterin aus tierischem Nervengewebe beschrieben, bei dem man das Cholesterin mit Äthylendichlorid extrahiert. Bei vielen der oben beschriebenen Verfahrensweisen wird jedoch rohes Cholesterin anstelle eines im wesentlich reinen Produkts erhalten. In der CA-PS 498 384 wird ein verbessertes Verfahren dieser Art beschrieben, bei dem man rohes Chole sterin behandelt, indem man das Cholesterin in einer Alkalimetallhydroxidlösung, die 85 % Alkohol enthält, auflöst, Cholesterin aus der Lösung kristallisiert und schließlich das kristallisierte Cholesterin wäscht.

Diese Verfahrensweise hat jedoch den Nachteil, daß sie im allgemeinen nicht dazu anwendbar ist, Cholesterin direkt aus dem rohen, cholesterinhaltigen Material herzustellen,

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und daß die Nebenprodukte, aus denen das Cholesterin entfernt worden ist, im allgemeinen nicht verwertbar sind.

Es ist seit langem bekannt, daß Eier ein sehr gutes Nahrungsmittel für menschliche Ernährungszwecke sind. Nachteiligerweise ist aber gerade das Gelbe des Eis eine der reichsten Quellen von Nahrungsmittel-Cholesterin. Cholesterin aus Eigelb enthaltenden Nahrungsmitteln trägt zu erhöhten Serumcholesterinspiegeln bei, die oftmals mit Herz- und Kreislaufkrankheiten einhergehen. Dazu kommt noch, daß im Eifett das Verhältnis von polyungesättigten Fettsäuren zu gesättigten Fettsäuren niedrig ist. In den letzten Jahren ist es betont worden, daß es zweckmäßig ist, die Cholesterinaufnähme mit der Nahrung zu verringern und die Menge der gesättigteren Fette zu vermindern und diese durch polyungesättigte Fette zu ersetzen. Ein Trockeneiprodukt,aus dem freies Cholesterin praktisch eliminiert worden ist, wird daher als günstig für die Ernährung von Personen mit cardiovascularen Krankheiten angesehen. In der CA-PSen 898 056 und 903 552 werden daher Verfahren zur Entfernung von Cholesterin beschrieben, bei denen Trockenei-Eidotterfeststoffe mit einem nichtpolaren Lösungsmittel, z.B. η-Hexan, extrahiert werden, um das leicht extrahierbare Cholesterin zu entfernen.

Ein Hauptnachteil dieses Verfahrensweise liegt darin, daß das entfettete Eidottermaterial 150 ppm oder mehr restliches Lösungsmittel enthalten kann. Ein solches Lösungsmittel wie η-Hexan ist aber naturgemäß kein geeigneter Bestandteil eines Nahrungsmittelprodukte, so daß das entfettete Eidottermaterial keine optimalen Ernährungseigenschaften hat.

Aufgabe der Erfindung ist es daher, ein Verfahren zur Verfügung zu stellen, freies Cholesterin aus Eidotter- bzw. Eigelbprodukten zu erhalten.

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-y-

Durch die Erfindung soll weiterhin ein Verfahren zur Herstellung eines genießbaren Trockeneiprodukts,aus dem das Cholesterin praktisch eliminiert worden ist, zur Verfügung gestellt werden.

Weiterhin soll durch die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von Nebenprodukten aus Eidotter, welche für die Seifenherstellung geeignet sind, zur Verfügung gestellt werden.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Isolierung von Cholesterin aus Eiern, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man (a) 1) Trockeneipulver mit einer wässrigen Äthanollösung kontaktiert, wodurch 2) ein genießbares, festes Eimaterial, aus dem ein wesentlicher Teil des freien Cholesterins entfernt worden ist, und eine wässrige äthanolische Lösung, die Eifette und Cholesterin enthält, erhalten wird, und 3) diesen Feststoff gewinnt; (b) 1) die wässrige äthanolische Lösung verseift, um eine freies Cholesterin enthaltende Lösung und eine verseifte Fettsäure zu erhalten, und 2) diese Fettsäure gewinnt, und (c) 1) die Cholesterin enthaltende Lösung in einem organischen Lösungsmittel konzentriert und danach 2) kristallisiertes, freies Cholesterin aus der Lösung in dem Kohlenwasserstofflösungsmittel gewinnt.

Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren werden daher drei Produkte gewonnen, nämlich im wesentlichen von Cholesterin freies, genießbares Eipulver, Fettsäure und freies Cholesterin.

Gemäß einer Ausführungsform ist das getrocknete Eipulver Gesamteipulver, während gemäß einer weiteren Ausführungsform das Eipulver pulverisierter Eidotter bzw. pulverisiertes Eigelb ist.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform ist die wässrige Äthanollösung wässriges, 95%iges Äthanol.

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Gemäß einer weiteren Ausführungsform wird die Verseifung in der Weise durchgeführt, daß man in einer wässrigen äthanolischen Lösung von Caliumhydroxid erhitzt.

Gemäß einer weiteren Ausführungsform wird die verseifte Fettsäure als Fettsäuresalz gewonnen.

Bei einer Variierung davon wird die das Cholesterin und die verseifte Fettsäure enthaltende Lösung mit einem Salz,einem Kohlenwasserstofflösungsmittel und einer wässrigen äthanolischen Lösung behandelt, wodurch das Cholesterin in Lösung in dem organischen Lösungsmittel entfernt wird und wodurch die Fettsäure als Fettsäuresalzniederschlag gewonnen wird.

Bei einer weiteren Variierung wird die verseifte Cholesterinlösung mit Petroläther extrahiert.

Bei einer weiteren Variierung wird das Cholesterin mit Methanol gereinigt.

Eier von Haushennen (nachstehend der Einfachheit halber als "Eier" bezeichnet) bestehen aus Wasser, Protein, Fett (mit Einschluß von Cholesterin), Kohlenhydraten, Mineralien und Vitaminen. Die durchschnittliche Zusammensetzung der Eier ist in Tabelle I zusammengestellt.

Tabelle I

Beatandteil	Ungefähre	Zusammensetzung (g pro
	100 g Gesi	untrohei)
Wasser		74
Protein		13
Fett (Cholesterin)		11 (0,76)
Kohlenhydrate		0,7
Mineralien		4
Vitamine		I

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Durch die Erfindung werden nun Verfahren zur Extraktion von freiem, kristallinen Cholesterin (C₂^H.gO) aus Produkten zur Verfügung gestellt, welche sich von Gesamteiern ableiten, wie z.B. getrocknete Gesamteier und getrockneter Eidotter bzw. getrocknetes Eigelb.

In der beigefügten Zeichnung wird ein schematisches Fließschema einer Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens angegeben.

Bei diesem Verfahren wird, wie in dem Fließschema dargestellt ist, Eipulver 10, nämlich entweder Eidotterpulver oder Gesamteipulver,mit 95%igem Äthanol bei 11 vermischt und bei 12 filtriert, wodurch ein festes Material 13 und ein Filtrat 14 erhalten wird.

Der Feststoff 13 wird mit 95%igem Äthanol bei 15 vermischt und filtriert, wodurch Trockeneipulver 16 und ein Filtrat, das zu dem Filtrat 14 gegeben wird, erhalten wird.

Das Äthanol wird aus dem Filtrat 14 bei Unterdruck bei 17 entfernt, wodurch ein Rest 18 erhalten wird. Der Rest wird mit 95%igem Äthanol bei 19, KOH bei 20 und Wasser bei 21 vermischt und 2 Stunden bei 60⁰C bis 70⁰C erhitzt, wodurch eine Lösung 22 erhalten wird.

Die Lösung 22 wird abgekühlt, wodurch eine Lösung 23 erhalten wird, die mit NaCl bei 24, Petroläther bei 25 und Äthanol bei 26 extrahiert und gerührt wird. Nach dem Absetzen wird eine Dreiphasenlösung 27 erhalten. Die unteren Phasen 28 werden erneut mit Petroläther bei 29 extrahiert. Die obere Phase wird zu der ersten oberen Phase 30 gegeben, wodurch eine vereinigte Petrolätherphase 31 erhalten wird. Die unteren Phasen 32 ergeben Fettsäuresalze 33. Das Lösungsmittel wird aus den vereinigten Petrolätherphasen 31 entfernt, in-

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dem unter vermindertem Druck erhitzt wird. Freies Cholesterin 34 wird erhalten.

Die Erfindung wird in den Beispielen erläutert. Beispiel 1

a) Eipulver (50 g) wurde mit 95%igem Äthanol (600 ml) vermischt und das Gemisch wurde 2 Std. bei Raumtemperatur (25-30⁰C) gerührt. Das Gemisch wurde filtriert und das Eipulver wurde mit weiterem 95%igen Äthanol gewaschen, wodurch ein Filtrat von 600 ml und Eifeststoffe, die nach dem Trocknen an der Luft ein Gewicht von 35 g hatten, erhalten wurden. Eine Portion des Filtrats (10 %) wurde für die Analyse genommen .

Das Lösungsmittel wurde bei vermindertem Druck von dem zurückbleibenden Filtrat entfernt. Der zurückbleibende Rückstand wurde mit 95%igem Äthanol (65 ml), Caliumhydroxid (45 g) und Wasser (65 ml) vermengt und das resultierende Gemisch wurde 2 Std. bei 60-70⁰C gerührt. Die Lösung wurde abgekühlt und mit 5%iger Natriumchloridlösung (330 ml), Petroläther Kp. 60-80° (700 ml) und 95%iger Äthanollösung (150 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 2-3 Hin. gerührt.Nach dem Absetzen erschienen drei Schichten. Die unteren drei Schichten wurden abgetrennt und die Petrolätherschicht wurde gesammelt. Die zwei Bodenschichten wurden mit Petroläther extrahiert (3 mal mit jeweils 200 ml) und die Extrakte wurden vereinigt, wodurch 1400 ml eines Endextrakts erhalten wurden. Die vereinigten Extrakte wurden getrocknet (MgSO_-.) und filtriert. Eine bekannte Fraktion des Gesamtfiltrats wurde zur Analyse verwendet.

Das Lösungsmittel wurde aus dem Rest des Extrakts entfernt, wodurch ein gelblicher, fester Rückstand erhalten wurde,der

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aus Methanol umkristallisiert wurde, wodurch zwei Nadeln erhalten wurden. Es wurden gewöhnlich zwei Ausbeutemengen gewonnen.

Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt.

b) Getrocknete Gesamteier (50 g) wurden mit 95 % Äthanol (300 ml) bei Raumtemperatur 4 Std. lang gerührt. Das Gemisch wurde filtriert und das Eipulver wurde mit zwei 50 ml-Portionen 95%igem Äthanol gewaschen. Eine Probe dieses Filtrats wurde für die Analyse abgenommen, das Lösungsmittel wurde aus dem zurückgebliebenen FiItrat entfernt. Der resultierende ölige Rückstand wurde mit 95%igem Äthanol (25 ml), Caliumhydroxid (28 g) und Wasser (40 ml) vermischt
rührt.

mischt. Das erhaltene Gemisch wurde 2 Std. bei 60-70⁰C ge-

Nach dem Abkühlen wurden 5%ige wässrige Natriumchloridlösung (1000 ml), Petroläther Kp. 60-80⁰C (300 ml) und 95%-iges Äthanol (50 ml) kombiniert, wobei die Petrolätherschicht die oberste Schicht bildete. Die zwei obersten Schichten wurden gesammelt und sodann aufgetrennt. Die wässrige Schicht wurde weiter mit Portionen von Petroläther (2 χ 200 ml) extrahiert und die vereinigten Petrolätherextrakte wurden getrocknet (MgSO₄) und sodann filtriert. Eine Probe wurde zur Analyse entnommen. Das Lösungsmittel wurde aus dem Rest des Petrolätherextrakts entfernt. Der zurückgebliebene Rückstand wurde aus Methanol umkristallisiert.

Die mittlere Schicht der Extraktion wurde eingeengt, wobei ein öliger Rückstand erhalten wurde. Die versuchte Kristallisation aus Methanol ergab keine Kristalle. Nach dem Abdampfen des Methanols blieb jedoch ein seifenartiges gallertiges Material zurück, aus dem kein Cholesterin erhalten wurde.

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Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt. Beispiel 2

a) Trockeneidotter (50 g) wurde bei Raumtemperatur 2 Std. lang mit 95%igem Äthanol (600 ml) gerührt. Das Gemisch wurde filtriert und der Feststoff wurde mit Äthanol gewaschen, wodurch 700 ml Extrakt und 36 g zurückgebliebener Eidotterfeststoff erhalten wurden. Eine Probe des Extrakts wurde zur Analyse abgenommen .

Das Lösungsmittel wurde im Vakuum vom Rest des Extrakts entfernt. Der Rückstand wurde hydrolysiert, indem er 2 Std.lang bei 60-70⁰C mit 95%igem Äthanol (40 ml), Caliumhydroxid (45 g) und Wasser (65 ml) gerührt wurde. Das Gemisch wurde abgekühlt und mit 5%iger wässriger Natriumchloridlösung (330 ml) und Petroläther Kp. 60-80⁰C (700 ml) versetzt. Das Gemisch wurde 2 bis 3 Min. gerührt. Von den drei Schichten wurde die obere Petrolätherschicht gesammelt. Die zwei anderen Schichten wurden mit Portionen von Petroläther (3 χ 200 ml) extrahiert. Die Petrolätherextrakte wurden vereinigt und getrocknet (MgSO₄) und eine Probe wurde zur Analyse abgenommen. Das Lösungsmittel wurde von den zurückgebliebenen Extrakten entfernt. Der feste Rückstand wurde aus Methanol umkristallisiert, wodurch In der ersten Ausbeutemenge weiße Nadeln und in der zweiten Ausbeutemenge gelbliche Nadeln erhalten wurden.

Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt.

b) Eidotterpulver (50 g) wurde bei Raumtemperatur 4 Std. lang mit 95%igem Äthanol (300 ml) gerührt. Das Gemisch wurde filtriert und das Eipulver wurde mit etwas 95%igem Äthanol gewaschen. Eine Probe des Extrakts wurde zur Analyse abgenommen.

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Das Lösungsmittel wurde von dem zurückgebliebenen Extrakt entfernt und der Rückstand wurde 2 Std. bei 60-70⁰C mit 95%igem Äthanol (25 ml), Caliumhydroxid (28 g) und Wasser (40 ml) erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde 5%ige wässrige Natriumchloridlösung (350 ml) und Petroläther Kp. 60-80⁰C (300 ml) zugesetzt und das Gemisch wurde geschüttelt. Es schieden sich drei Schichten ab. Die oberen zwei Schichten wurden gesammelt. Äthanol (25 ml) wurde zu den zwei oberen Schichten gegeben, um eine klare Trennung zu bewirken. Die zwei Schichten wurden abgetrennt und aufbewahrt. Die wässrige Schicht wurde erneut mit Portionen von Petroläther Kp. 60-80⁰C (2 χ 200 ml) extrahiert. Die oberen zwei Schichten wurden aufbewahrt und getrennt. Die Petrolätherschicht wurde getrocknet (MgSO*) und filtriert. Eine Probe wurde zur Analyse abgenommen. Das Lösungsmittel wurde vom Rest der Schicht entfernt und der feste Rückstand wurde aus Methanol umkristallisiert, wodurch weiße Nadeln erhalten wurden.

Die Mittelschicht wurde mit Portionen von Petroläther (2 χ 100 ml) extrahiert und die Extrakte wurden, wie oben beschrieben, behandelt und auf Cholesterin analysiert.

Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt. Beispiel 3

Bei einem der Extraktionsversuche (Reihe a, Tabelle II) wurde die zurückbleibende wässrige Schicht weiter extrahiert, um festtustellen, ob mehr Cholesterin entfernt werden konnte. Die wässrige Schicht wurde mit Portionen von Petroläther (2 χ 100 ml) weiter extrahiert. Die zwei Portionen wurden kombiniert und getrocknet (MgSO₄). Nach dem Filtrieren wurde das Lösungsmittel entfernt und der Rückstand wurde in Äthylacetat aufgelöst, wodurch 10 ml Lösung erhalten wurden. Die Lösung wurde analysiert.

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Test A Massenspektren_von_kristallinem_Cholesterin

Die Massenspektren von Cholesterinproben, isoliert bei den Versuchsreihen a und e (Tabelle II), waren im Fragmentmuster mit dem Massenspektrum einer Standardprobe handelsüblicher Herkunft, die 2 mal aus Methanol/Wasser und einmal aus Methanol umkristallisiert worden war, identisch.

Test B AnalYse_auf_Cholesterin

Die Analyse wurde durch Gasflüssigkeitschromatographie durchgeführt, wobei Stigmasterin als Standard verwendet wurde. Das Stigmasterin (C₂₉H₄₈O) war eine handelsübliche Probe und es war 3 mal aus 1,2-Dichloräthan (Fp. 170-172⁰C; Lit 170⁰C) umkristallisiert worden. Das für die Standardisierungskurve verwendete Cholesterin war ebenfalls eine handelsübliche Probe, die 2 mal aus Methanol/Wasser und einmal aus Methanol umkristallisiert worden war (Fp. 148-149°C; Lit 148,5°C).

Ein Flammenionisationschromatograph (Varian 2700) mit einer OV 101-Säule ergab bei geeigneten Bedingungen eine gute Trennung der Peaks, die Cholesterin und Stigmasterin entsprachen. Es wurde ein Standarddiagramm der Massenverhältnisse zu den Flächenverhältnissen aufgestellt, wobei Standardlösungen von Cholesterin und Stigmasterin in Äthylacetat verwendet wurden. Die Cholesterinkonzentrationen in den Bestimmungsproben wurden bestimmt, indem bekannte Mengen dieser Lösungen mit bekannten Mengen von Standardstigmasterinlösungen kombiniert wurden. Die Werte der Peakflache wurden auf übliche Weise analysiert.

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Test C

Das Gefriertrocknen von 12 Eidottern und Gesamteiern ergab eine Information hinsichtlich der durchschnittlichen Masse eines nassen, großen Eis und eines trockenen, großen Eis und der Eidotter. Für ein Ei wurden die folgenden Werte erhalten:

Masse des Gesamteis vor dem Trocknen 49,65 g

Masse des Gesamteis nach dem Trocknen 13,26 g

Masse des Eidotters vor dem Trocknen 18,76 g

Masse des Eidotters nach dem Trocknen 8,56 g

Diese Werte gestatteten einen ungefähren Vergleich zwischen verschiedenen Werten des Cholesteringehalts gemäß der Literatur unter Verwendung einer Vielzahl von Einheiten.

In Tabelle II sind Analysenwerte von Extrakten aus Gesamte!- und Eidotterpulver zusammengestellt (Cholesterin in 100 g nassen Eidotters; die in Klammern angegebenen Werte sind g/50 g des Gesamtei- oder Eidotterpulvers). Die Ergebnisse in Beispiel 1(a) sind in den Reihen a und b der Tabelle II gezeigt, die typische Werte für die Analyse des Cholesterins in den jeweiligen Extrakten vor und nach der Verseifung sowie die Mengen des in kristalliner Form gewonnenen Cholesterins angibt. Die Ergebnisse des Beispiels 1(b) sind in Reihe c der Tabelle II gezeigt. Diese gibt Analysenwerte für die Extraktion vor und nach der Verseifung sowie der Menge des in kristalliner Form gewonnenen Cholesterins. Die Ergebnisse des Beispiels 2(a) sind in den Reihen d und e der Tabelle II, die die Werte für die Cholesterinanalyse und -gewinnung angibt, gezeigt. Die Werte für die Analyse und die Kristallgewinnung in Beispiel 2(b) für das Cholesterin sind in Reihe f der Tabelle II angegeben.

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Tabelle II

Beispl.	Gepulv. Elprod.	Cholesterin durch Analyse Gewinnung des kri- . --..-.· , . stallinen Produkts	nach der Ver seifung	Nasse	Ausbeute menge	Fp. ⁰C (Lit. 148,5)
Κ«) a b	gesamt gesamt	vor der Ver seifung	790mg (0,56 g) ♦35mg²(0,025g) 1000mg(0,69 g)	730mg(0,52g) 60mg(0,04g) 770mg(0,53g)	1 2 1	147- 149 148- 149
Kb) c³	gesamt	960mg (0,68 g) ♦19mg¹(0,013g) 1080mg(0,74 g)	800mg (0,6 g)	400mg(0,3 g) 400mg(0,3 g)	1 2	146,5-147 130
II (a) d e	Dotter Dotter	800mg (0,6 g)	980mg (1,07 g) 990mg (1,08 g)	580mg(0,64g) 250mg (0,27g) 880mg (0,96g)	1 2 1	149- 150 140- 145 147- 148
ii(b)f³	Dotter	980mg (1,07 g) ♦62mg¹(0,068g) 960mg (1,05 g)	600mg (0,62 g) ♦ 133mg⁴(0,15 g)	450mg(0,49g) 50mg(0,05g)	1 2	147- 148,5 147- 148
900mg (0,075g)

Bei der ReextraJttion des Eipulvers extrahiertes Cholesterin

² Bei der Reextraktion der wässrigen Schicht nach der Verseifung extrahiertes Cholesterin

³ Im allgemeinen wurden geringe Mengen von Lösungsmitteln und Reagenzien zur Extraktion und Verseifung verwendet

* Cholesterin von der Extraktion in der mittleren Schicht

co co ro

- ri -

A<o

Die Ergebnisse der obigen Tabelle zeigen die Wirksamkeit des erfindungsgemäßen Cholesterinextraktionsverfahrens und die Reinheit des extrahierten Cholesterins.

Test D

Verwendung von Eipulver mit niedrigem Cholesteringehalt beim Backen

Das nach der Extraktion gesammelte Eipulver wurde in Schraubverschlußflaschen in einem Kühlschrank gelagert.

Das bei einer der Extraktionen von Cholesterin aus Gesamteiern gesammelte Pulver wurde zur Herstellung eines Rosinenteegebäcks (mit untenstehendem Ansatz) verwendet. Das gleiche Gebäck wurde auch unter ähnlichen Bedingungen aus frischen Gesamteiern hergestellt. 11 Personen versuchten das Gebäck der zwei verschiedenen Ansätze und gaben ihre Bevorzugung wieder, ohne daß sie wußten, welches Gebäck aus dem Eiprodukt mit niedrigem Cholesteringehalt hergestellt worden war. Fünf der Personen konnten keinen Unterschied feststellen. Drei Personen bevorzugten das Teegebäck mit niedrigem Cholesteringehalt und drei Personen bevorzugten das Teegebäck, das mit frischen Eiern hergestellt worden war.

Ansatz

Rosinenteegebäck

3 ecm Mehl 1/3 ecm Margarine

3/4 Teelöffer Salz 1/3 ecm Streckmittel 1 Teelöffel Backpulver 1 ecm Rosinen

3/4 ecm Zucker 1 geschlagenes Ei (oder Gesamteipul-

ver + die entsprechende Menge Wasser*)

Milch

Bei der Herstellung dieses Gebäcks wird Mehl, Salz, Backpulver und Zucker in einen Mischbecher eingesiebt. Die Margarine und

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das Streckmittel werden zugesetzt. Dann werden die Rosinen zugegeben. Zu den geschlagenen Eiern wird genügend Milch zugegeben, daß eine Tasse erhalten wird. Das MiIchgemisch wird zu dem Mehlgemisch gegeben. Es wird leicht gerührt, um einen weichen Teig herzustellen. Der Teig wird zu einer Dicke von 1,27 cm auf einem mehlbedeckten Brett ausgebreitet. Der ausgebreitete Teig wird geschnitten und auf ein gefettetes Backblech gebracht. Es wird 15 Min. bei 218°C gebacken.

* Das Äquivalent zu einem Ei wurde als ungefähr 13 g (2 Eßlöffel) Gesamteipulver mit einem reduzierten Cholesteringehalt + 15 ml Wasser genommen. Dieses Äquivalent war grob auf den angegebenen Werten von handelsüblichem Gesamte! von 9 Eiern entsprechend 0,11 kg Eipulver + 0,34 kg Wasser genommen.

Ende der Beschreibung.

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Claims

KRAUS & WEISERT --

PATENTANWÄLTE 4/0 \

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1697 WK/li Patentansprüche

1/ Verfahren zur Isolierung von Cholesterin aus Eiern, dadurch

ekennzeichnet, daß man (a).1) Trockeneipulver mit einer wässrigen Äthanollösung kontaktiert, wodurch 2) ein genießbares, festes Eimaterial, aus dem ein wesentlicher Teil des freien Cholesterins entfernt worden 1st, und eine wässrige äthanolische Lösung, die E!fette und Cholesterin enthält, erhalten wird, und 3) diesen Feststoff gewinnt; (b) 1) die wässrige äthanolIsche Lösung verseift, um eine freies Cholesterin enthaltende Lösung und eine verselfte Fettsäure zu erhalten, und 2) diese Fettsäure gewinnt, und (c) 1) die Cholesterin enthaltende Lösung in einem organischen Lösungsmittel konzentriert und danach 2) kristallisiertes, freies Cholesterin aus der Lösung in dem Kohlenwasserstofflösungsmittel gewinnt .
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Trockeneipulver Gesamteipulver verwendet.
3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als Trockeneipulver gepulverten Eidotter bzw. gepulvertes Eigelb verwendet.
4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man als wässrige Äthanollösung wässriges 95%iges Äthanol verwendet.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man die Verseifung in der Weise durchführt, daß man in einer wässrigen äthanolischen Lösung von Kaliumhydroxid erhitzt.

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6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man die verseifte Fettsäure als Fettsäuresalz gewinnt.
7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß man die Lösung, die das freie Cholesterin und die verseifte Fettsäure enthält, mit einem Salz, einem Kohlenwasserstofflösungsmittel und einer wässrigen äthanolischen Lösung behandelt, wodurch das freie Cholesterin in der Lösung in das organische Lösungsmittel überführt wird und wobei die Fettsäure als Fettsäuresalz-Niederschlag gewonnen wird.
8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß man als Kohlenwasserstofflösungsmittel Petroläther verwendet.
9. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß man die verseifte Cholesterinlösung mit Petroläther extrahiert.
10. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß man das Cholesterin mit Methanol reinigt.

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