DE2612726B2 - Stabilisierte Urease - Google Patents

Stabilisierte Urease

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Description

Die Erfindung betrifft eine gegen Aktivitätsverlust stabilisierte Urease.
Das Enzym Urease spaltet Harnstoff unter Bildung von Kohlensäure und Ammoniak. Es ist in relativ niedrig gereinigter Form im Handel erhältlich. In rohem Zustand ist: die Urease ausreichend lagerstabil, in gereinigtem Zustand nimmt die Stabilität stark ab und bereits bei einer spezifischen Aktivität von ca. 25 bis U/mg wird die Stabilität unbefriedigend. Obwohl ein Bedarf an einem höher gereinigten Enzym besteht, insbesondere für für die klinische Harnstoffbestimmung, konnte dies bisher infolge der ungenügenden Stabilität nicht als stabiles Handelspräparat herausgebracht werden. Handelsübliche Urease mit einer spezifischen Aktivität von ca. 100 U/mg verliert bei halbjähriger Lagerung im Kühlraum bereits ca. 50% ihrer Aktivität Lagerung bei Zimmertemperatur oder in gelöster Form führt zu einem noch sehr viel rascheren Aktivitätsverlust.
Es wurde bereits versucht, die Stabilität des gereinigten Enzyms durch Variation des Puffer-pH-Wertes, eier Ionenstärke und der Art des Puffers (Maleat, Citrat, EDTA, Phosphat) oder durch Zusatz von sulfhydrylgruppenhaltigen Verbindungen wie Cystein s und Mercaptoäthanol zu erhöhen. Alle diese Versuche waren erfolglos.
Lediglich mit 2fach kristallisiertem Rinderplasmaalbumin konnte eine gewisse Verlängerung der Halbwertzeit des gereinigten Enzyms erzielt werden, die jedoch ίο unzureichend war (vgl. K. L. Lynn, Biochim. Bisphys. Acta,146[1967]216).
Aufgabe der Erfindung ist es, diese Schwierigkeit zu beseitigen und eine stabilisierte Urease zu schaffen, die auch in hochgereinigter Form ausreichend lagerstabil ist, um handelsfähig zu sein.
Gelöst wird diese Aufgabe erfindungsgemäß durch
eine stabilisierte Urease, die dadurch gekennzeichnet ist, daß sie als Stabilisierungsmittel ein Gemisch von Glutathion, Äthylendiamintetraessigsäure (EDTA) und Citrat enthält.
Überraschenderweise ist das Gemisch der genannten
drei Substanzen in der Lage, auch hochgereinigte Urease sehr gut zu stabilisieren, obwohl es bekannt ist, daß die Einzelbestandteile dieses Gemisches keine Stabilisierungswirkung entfalten.
Vorzugsweise enthält erfindungsgemäß stabilisierte Urease die Bestandteile Urease, Glutathion, EDTA und Citrat im Gewichtsverhältnis
1 :0,5-5:0,5-3:0,5-3.
Präparate in diesem bevorzugten Zusammensetzungsbereich weisen insbesondere im bevorzugten Aktivitätsbereich von ca. 50 bis 300 U/mg hervorragende Stabilität auf und besitzen beispielsweise nach Lyophili-
:>5 sation und 12wöchiger Lagerung bei 33° C noch 100% der Ausgangsaktivität vor Lyophilisierung. Ohne Stabilisierungsmittel tritt bereits bei der Lyophilisierung ein Aktivitätsverlust zwischen 30 und 80% auf.
Auch mit erfindungsgemäß stabilisierten Ureasepräparaten außerhalb des bevorzugten Bereiches lassen sich noch sehr gute Stabilisierungseffekte erzielen.
Vorzugsweise enthält das erfindungsgemäß stabilisierte Enzympräparat eine Urease, die zur Reinigung vor Zusatz der Stabilisatormischung mit einem Dextran behandelt wurde. Bei dieser Dextranbehandlung gelingt es, die Aktivität des Enzyms etwa zu verdoppeln. Gleichzeitig scheint eine instabilisierende Verunreinigung durch Dextranbehandlung entfernt zu werden, so daß Ureasepräparate, die der Dextranbehandlung zuvor unterworfen wurden, sich durch besonders hohe Stabilität nach Zusatz des Stabilisatorgemisches auszeichnen. Die Behandlung mit dem Dextran kann durch einfaches Einführen des Dextrans in eine Enzymiösung oder aber nach den Methoden der Säulenchromatographie erfolgen. Besonders günstig wird als Dextran ein vernetztes Produkt mit Molekularsiebeigenschaften verwendet, da hier gleichzeitig eine Entsalzung der Urease neben der Anreicherung und Entfernung einer störenden Verunreinigung erreicht wird. Geeignete vernetzte oder unvernetzte Dextranpräparate sind handelsüblich.
Erfindungsgemäß stabilisierte Urease eignet sich besonders zur Verwendung beim Nachweis von Harnstoff. Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist daher ein Reagenz zum Nachweis von Harnstoff, welche durch einen Gehalt einer erfindungsgemäß stabilisierten Urease zusammen mit einem System zum Nachweis von Ammoniak gekennzeichnet ist.
Es sind zahlreiche Systeme zum Nachweis von Ammoniak bekannt und diese können für das erfindungsgemäße Reagenz verwendet werden, soweit sie keine Bestandteile enthalten, welche die durch die Urease katalysierte Reaktion oder die Urease selbst stören. Ein derartiges System zum Nachweis von Ammoniak kann aus einer pH-Indikatorsubstanz, wie z. B. Bromthymolblau bestehen, die den bei der Ammoniakbildung ansteigenden pH-Wert durch Farbänderung oder dergl. anzeigt. Ein derartiges System eignet sich beispielsweise für Testpapiere bzw. Testfilme zum Nachweis von Harnstoff im Blut oder Serum. Erfindungsgemäß stabilisierte Urease ist so beständig, daß sie sich zur Imprägnierung von Papier, Film oder ähnlichem Trägermaterial oder zur Herstellung von reaktionsfähigen Schichten zusammen mit einem Bindemittel auf derartigen Trägern eignet. Wenn ein derartiger Träger oder eine derartige Schicht zusätzlich den pH-Indikator enthält, so läßt sich durch einfachen Farbumschlag Harnstoff bestimmen.
Ein anderes bevorzugtes System zur Ammoniakbestimmung im Rahmen des erfindungsgemäßen Reagenz besteht aus Glutamatdehydrogenase (GIDH), NADH und Puffer sowie gegebenenfalls Stabilisierungsmitteln für GlDH oder/und NADH. Beispiele für derartige Stabilisierungsmittel sind organische Sulfhydrylverbindungen bzw. ADP.
Ein anderes geeignetes Nachweissystem bedient sich der Indolphenolreaktion nach B e r t h e 1 ο t. Das System besteht aus Phenol oder Salicylsäure zusammen mit Nitroprussid-Natrium und Natriumhypochlorit.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung weiter:
Beispiel 1
Eine handelsübliche Urease mit einer spezifischen Aktivität von ca. 100 U/mg wurde in Wasser gelöst, über vernetztes Dextrangel gegeben und anschließend lyophilisiert. Das lyophilisierte Präparat wurde dann einem Stabilitätsversuch durch Lagerung bei 330C unterworfen.
In einem zweiten Ansatz wurde der oben beschriebene Versuch wiederholt, dem mit dem vernetzten Dextran behandelten Enzym wurden jedoch Glutathion, Citrat und EDTA im Gewichtsverhältnis 1:1:1:1 zugesetzt. Dann wurde die Lyophilisierung und Lagerung wie im ersten Versuch wiederholt.
Beim ersten Versuch ohne Stabilisierungsmittelzusatz betrug die Aktivitätsausbeute nach der Lyophilisation 20%. Nach 6wöchiger Lagerung bei 33° C betrug die gemessene Restaktivität weniger als 1 %.
Im zweiten Versuch mit erfindungsgemäßem Stabilisierungsmittel betrug die Aktivität nach der Lyophilisation 100%, nach 6wöchiger Lagerung bei 33° C immer noch 100%. Bei Fortsetzung der Lagerung unter den angegebenen Bedingungen auf 3 Monate wurden erneut 100% der Ausgangsaktivität vor der Lyophilisation gemessen.
Beispiel 2
Handelsübliche Urease mit einer spezifischen Aktivität von ca. 100 U/mg wurde in Wasser gelöst, mit Glutathion, Citrat und EDTA im Gewichtsverhältnis 1:1:1:1 versetzt und ohne Dextranbehandlung lyophilisiert. Im Lyophilisat wurden 100% der Ausgangsaktivität gefunden. Das Lyophilisat wurde dann einer Lagerung bei 33°C unterzogen. Nach 6wöchiger ίο Lagerung betrug die Aktivität noch 95% des Ausgangswertes.
Beispiel 3
Aus Aus handelsüblicher käuflicher Urease wurde durch mehrfache Kristallisation und Behandlung mit Dextran eine Urease mit einer spezifischen Aktivität von ca. 1500 U/mg gewonnen. Das erhaltene Präparat wurde mit Glutathion, Citrat und EDTA im Gewichtsverhältnis 1 :3 :3 :3 versetzt. Die Beständigkeit bei der Lagerung bei 33° C entsprach der der Urease von 100 U/mg.
Beispiel 4
Testfilm zum Nachweis von Harnstoff im Blut bzw. Serum Bestandteil:
Polyvinylacetatpropionatdispersion
(Propiofan 7Ü D) 45,0 g
l,93%ige Lösung von Natriumalginat
in in Wasser 10,0 g
Dioctylnatriumsulfosuccinat 0,5 g
Stabilisierte Urease gelöst in
10 ml Wasser 10 000 U
Bromthymolblau, gelöst in
J5 5 ml Methanol *) 0,25 g
5 ml Wasser
Dinatriumhydrogenphosphat 0,9 g
*) Stabilisiert mit Glutathion, Citrat u. EDTA 1:1:1:1.
Die Bestandteile werden gut gemischt und mit 1 n-HCI auf pH 6,0 eingestellt. Die Masse wird in einer Schichtdicke von 250 μ auf PVC-Folie ausgestrichen und 60 min bei 60° C getrocknet. Auftropfen von hamstoffhaltigem Blut bzw. Serum und Abwischen desselben nach 90 see. liefert folgende Reaktionsfarben:
20 mg% Harnstoff — gelb
60 mg% Harnstoff — gelbgrün
100 mg% Harnstoff — grün
200 mg% Harnstoff - dunkelgrün
Nach 3tägiger Belastung bei 60° reagiert dieser Testfilm praktisch unverändert.
Ein Testfilm gleicher Zusammensetzung und Herstellung, der aber anstelle der erfindungsgemäß stabilisierten Urease eine unstabilisierte Urease gleicher Aktivität enthält, zeigt anfänglich praktisch die gleichen Reaktionsfarben, reagiert jedoch nach 3tägiger Belastung bei 60° nicht mehr ausreichend.

Claims (9)

  1. Patentansprüche:
    t. Stabilisierte Urease, dadurch gekennzeichnet, daß sie a.'s Stabilisierungsmittel ein Gemisch von Glutathion, Äthylendiamintetraessigsäure und Citrat enthält.
  2. 2. Urease nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie Urease, Glutathion, Äthylendiamintetraessigsäure und Citrat im Gewichtsverhältnis
    1 :0,5-5: 0,5-3:0,5-3
    enthält
  3. 3. Urease nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie vor Zusatz der Stabilisatormischung mit einem Dextran behandelt wurde.
  4. 4. Urease nach einem der Ansprüche 1—3 als lyophilisiertes Präparat oder Lösung in Glycerin/ Wasser-Gemisch.
  5. 5. Reagenz zum Nachweis von Harnstoff, dadurch gekennzeichnet, daß es. stabilisierte Urease nach Anspruch 1 bis 4 und ein System zum Nachweis von Ammoniak, gegebenenfalls zusammen mit Bindemittel, Träger, Puffersubstanzen oder/und Stabilisator für das Ammoniaknachweissystem enthält.
  6. 6. Reagenz nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß es aus einem Trägerpapier oder Trägerfilm besteht, welcher mit der stabilisierten Urease und dem System zum Nachweis von Ammoniak imprägniert oder in Form einer Bindemittel enthaltenden Schicht überzogen ist.
  7. 7. Reagenz nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von Harnstoff aus einem oder mehreren Indikatoren und gegebenenfalls Netzmittel und Puffer enthält.
  8. 8. Reagenz nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von Ammoniak aus Glutaminsäuredehydrogenase, Alphaketoglutarat, NADH, ADP und Puffer besteht.
  9. 9. Reagenz nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von Ammoniak aus Phenol oder Salicylsäure, Nitroprussidnatrium und Natriumhypochlorit besteht.
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AT05477A AT349651B (de) 1976-03-25 1977-01-07 Stabilisiertes ureasepraeparat
AR266169A AR210632A1 (es) 1976-03-25 1977-01-12 Ureasa estabilizada y reactivo que la contiene
CA270,368A CA1086615A (en) 1976-03-25 1977-01-24 Stabilised urease
IT19581/77A IT1076016B (it) 1976-03-25 1977-01-24 Ureasi stabilizzata
NLAANVRAGE7700686,A NL188169C (nl) 1976-03-25 1977-01-24 Werkwijze ter bereiding van gestabiliseerde urease, werkwijze ter bereiding of vervaardiging van een reagens voor het aantonen van ureum, alsmede proefpapier of -film.
FI770294A FI56536C (fi) 1976-03-25 1977-01-28 Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat
SU772453752A SU743600A3 (ru) 1976-03-25 1977-02-15 Стабилизированный состав дл определени мочевины, содержащий уреазу
SE7703206A SE428475B (sv) 1976-03-25 1977-03-21 Stabiliserad ureas
FR7708519A FR2345460A1 (fr) 1976-03-25 1977-03-22 Urease stabilisee
GB11994/77A GB1517146A (en) 1976-03-25 1977-03-22 Stabilised urease
BR7701770A BR7701770A (pt) 1976-03-25 1977-03-23 Urease estabilizada e reagente para a determinacao de ureia
CH369777A CH629535A5 (de) 1976-03-25 1977-03-23 Stabilisierte urease.
AU23562/77A AU509593B2 (en) 1976-03-25 1977-03-23 Stabilised urease
BE176043A BE852791A (fr) 1976-03-25 1977-03-23 Urease stabilisee
DD7700198026A DD129692A5 (de) 1976-03-25 1977-03-23 Stabilisierte urease
JP52032754A JPS6027516B2 (ja) 1976-03-25 1977-03-24 安定化ウレア−ゼ
HU77BO1657A HU179124B (en) 1976-03-25 1977-03-24 Stabilized urethane compositionand reagent for detecting urea
US05/781,222 US4188465A (en) 1976-03-25 1977-03-25 Stabilized urease composition

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DE2612726A1 DE2612726A1 (de) 1977-10-06
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SU (1) SU743600A3 (de)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4378430A (en) * 1979-09-11 1983-03-29 Modrovich Ivan Endre Method of forming stabilized urease solutions
US4282316A (en) * 1979-09-11 1981-08-04 Modrovich Ivan Endre Stabilized enzymic solutions for determining urea
US4465770A (en) * 1979-09-11 1984-08-14 Modrovich Ivan Endre Stabilized enzymic solutions for determining urea
US4350659A (en) * 1981-07-30 1982-09-21 Corning Glass Works Stabilization of sensitive biologically active intermediate metabolites such as folic acid derivatives
JPS62502653A (ja) * 1985-02-11 1987-10-15 トラベノ−ル‐ジエネンテツク、ダイアグノスチクス 安定化された酵素基質溶液
US7422903B2 (en) * 2002-12-11 2008-09-09 Instrumentation Laboratory Company Multi-analyte reference solutions
US20040256227A1 (en) * 2003-02-11 2004-12-23 Jungwon Shin Electrochemical urea sensors and methods of making the same
US20040154933A1 (en) * 2003-02-11 2004-08-12 Instrumentation Laboratory Company Polymeric membranes for use in electrochemical sensors
US20050176650A1 (en) * 2004-02-09 2005-08-11 Xanodyne Pharmacal, Inc. Stable parenteral formulation of levomepromazine and a method for stabilizing said formulation
WO2008076407A2 (en) 2006-12-15 2008-06-26 Lifebond Ltd. Gelatin-transglutaminase hemostatic dressings and sealants
AU2009261559B2 (en) 2008-06-18 2014-01-16 Lifebond Ltd Improved cross-linked compositions
WO2009153751A2 (en) * 2008-06-18 2009-12-23 Lifebond Ltd A method for enzymatic cross-linking of a protein
US20110112573A1 (en) * 2008-06-18 2011-05-12 Orahn Preiss Bloom Methods and devices for use with sealants
DE102009057050A1 (de) * 2009-12-04 2011-06-09 Torsten Beel Urin-Indikator-Mittel
ES2551388T3 (es) 2009-12-22 2015-11-18 Lifebond Ltd Modificación de agentes de entrecruzamiento enzimáticos para controlar las propiedades de las matrices entrecruzadas
AU2011287215B2 (en) 2010-08-05 2015-09-10 Lifebond Ltd. Dry composition wound dressings and adhesives
BR112013003957B1 (pt) * 2010-08-20 2020-10-27 Promethera Biosciences Sa Método para o isolamento de ureia durante remoção de co2 indesejável
US11998654B2 (en) 2018-07-12 2024-06-04 Bard Shannon Limited Securing implants and medical devices

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1321659A (fr) * 1961-03-20 1963-03-22 Albert L Chaney Chemical Lab Méthode de dosage de l'azote dans les fluides biologiques
USRE26125E (en) * 1962-05-08 1966-12-13 Reagents and analysis of nitrogen
US3527674A (en) * 1966-06-30 1970-09-08 Calbiochem Reagent material and method for urea assay
US3542649A (en) * 1967-04-07 1970-11-24 Hoffmann La Roche Color developing composition consisting of an enzyme,a salicylate and a hypochlorite donor
DE1758581C3 (de) * 1968-06-29 1974-01-10 Demag Ag, 4100 Duisburg Stützvorrichtung für ein metallurgisches Gefäß, insbesondere für einen Stahlwerkskonverter
ZA733611B (en) * 1972-10-11 1974-04-24 Merck Patent Gmbh Indicator for the determination of urea
DE2329174C2 (de) * 1973-06-07 1975-07-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Blutammoniak

Also Published As

Publication number Publication date
AT349651B (de) 1979-04-25
FI56536C (fi) 1980-02-11
NL188169B (nl) 1991-11-18
IT1076016B (it) 1985-04-22
FR2345460A1 (fr) 1977-10-21
JPS52117488A (en) 1977-10-01
ATA5477A (de) 1978-09-15
AU509593B2 (en) 1980-05-15
JPS6027516B2 (ja) 1985-06-29
GB1517146A (en) 1978-07-12
HU179124B (en) 1982-08-28
SE7703206L (sv) 1977-09-26
DE2612726C3 (de) 1979-03-15
SU743600A3 (ru) 1980-06-25
BE852791A (fr) 1977-09-23
FI56536B (fi) 1979-10-31
CA1086615A (en) 1980-09-30
AU2356277A (en) 1978-09-28
SE428475B (sv) 1983-07-04
FI770294A (de) 1977-09-26
US4188465A (en) 1980-02-12
FR2345460B1 (de) 1982-12-17
BR7701770A (pt) 1978-01-17
DE2612726A1 (de) 1977-10-06
CH629535A5 (de) 1982-04-30
NL188169C (nl) 1992-04-16
AR210632A1 (es) 1977-08-31
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NL7700686A (nl) 1977-09-27

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