FI56536C - Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat - Google Patents

Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat Download PDF

Info

Publication number
FI56536C
FI56536C FI770294A FI770294A FI56536C FI 56536 C FI56536 C FI 56536C FI 770294 A FI770294 A FI 770294A FI 770294 A FI770294 A FI 770294A FI 56536 C FI56536 C FI 56536C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
urease
activity
stabilized
mot
ureaspreparat
Prior art date
Application number
FI770294A
Other languages
English (en)
Other versions
FI770294A (fi
FI56536B (fi
Inventor
Walter Schneider
Albert Roeder
Hans Moellering
Ingeborg Gutmann
Original Assignee
Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Mannheim Gmbh filed Critical Boehringer Mannheim Gmbh
Publication of FI770294A publication Critical patent/FI770294A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI56536B publication Critical patent/FI56536B/fi
Publication of FI56536C publication Critical patent/FI56536C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/58Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving urea or urease
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14Hydrolases (3)
    • C12N9/78Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
    • C12N9/80Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5) acting on amide bonds in linear amides (3.5.1)
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/96Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates

Description

- I gw- Τ·'Ι rRi KUULUTUSJULKAISU C C C 0 C
[B] (11) UTLAGGN I NGSSKRI FT ^ ® ® C(45) Patentti syön.- tty II ..2 1930 Patent «eddelnt T (51) Kv.lk.Vlnt.CI.* C 07 G 7/02 G 01 N 31/14 SUOMI —FINLAND (21) Ρκ·η«ΙΙι·Ιί·π«* — PaMntM*knln( 77°29« (22) Hik«ml«pilvi —Am8knln(«laf 2Ö.01.T7 ^ ^ (23) Alkupilvi — Glltighttsdag 28.01.77 (41) Tullut JulklMkil — Bllvlt offwitllg 26.09.77 _ * , . (441 NlhtivUulpanon Ja kuuL|ulkalsun pvm. — _ , ., „ „„
Patent- och registerstyrelsen . Aniölcan utlajd och utl.*krift«n publkerwi 31-10.79 (32)(33)(31) Pyydetty ttuolkaut—Btfird prlorltct 25-03-76
Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) P 2612726.U
(71) Boehringer Mannheim GmbH., Sandhofer Strasse 112-132, D-6800 Mannheim-Waldhof, Saksan Liittotasavalta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (72) Walter Schneider, Weilheim, Albert Röder, Seeshaupt, Hans Mollering,
Tut zing, Ingeborg Gutmann, Percha/iiber Stamberg, Saksan Liittotasaval-ta-Förbundsrepubliken Tyskland(DE) (7I+) Berggreri Oy Ab (5I+) Aktiivisuuden menettämistä vastaan stabiloitu ureaasipreparaatti -Mot aktivitetsförlust stabiliserat ureaspreparat
Keksintö koskee aktiivisuuden menettämistä vastaan stabiloitua ureaasia.
Ureaasi-entsyymi hajottaa virtsa-ainetta siten, että muodostuu hiili-happoa ja ammoniakkia. Ureaasia on saatavana kaupasta epäpuhtaana tuotteena. Raakana ureaasi kestää riittävän hyvin varastointia, puhtaana stabiilisuus heikkenee nopeasti ja jo ominaisaktiivisuuden ollessa noin 0,417 - 1,667 kat/kg stabiilisuus on epätyydyttävä. Vaikkakin tarvetta esiintyy pitemmälle puhdistetusta entsyymistä, etenkin kliinisen virtsa-aineen määritystä varten, sellaista ei toistaiseksi ole riittämättömän stabiilisuuden vuoksi ollut saatavissa säilyvänä preparaattina. Kaupan oleva ureaasi, jonka spesifinen aktiivisuus on noin 1,667 kat/kg, menettää puoli vuotta jäähdytyshuonees-sa varastoituna jo noin 50 % aktiivisuudestaan. Varastointi huoneen lämpötilassa tai liuoksen muodossa johtaa vieläkin paljon nopeampaan aktiivisuuden menetykseen.
Puhdistetun entsyymin stabiilisuutta on jo yritetty parantaa vaihtelemalla puskurin pH:ta, puskurin ioniväkevyyttä ja laatua (maleaatti, sitraatti, EDTA, fosfaatti) tai lisäämällä sulfhydryyliryhmäpitoisia 2 56536 yhdisteitä kuten kysteiiniä ja merkaptoetanolia. Kaikki nämä yritykset ovat olleet tuloksettomia. Vain kahdesti kiteytetyn naudan-plasma-albumiinin kanssa puhdistetun entsyymin puoliutumisaikaa on voitu jonkin verran pidentää, mikä kuitenkin on ollut riittämätöntä (vrt. K.R. Lynn, Biochim.Biophys.Acta, 146 (1967) 216) .
Keksinnön tarkoituksena on tämän vaikeuden poistaminen ja stabiloidun markkinakelpoisen ureaasin aikaansaaminen, joka erittäin puhtaanakin kestää riittävän hyvin varastointia.
Tämä tehtävä voidaan ratkaista keksinnön mukaisesti aktiivisuuden menettämistä vastaan stabiloidun ureaasipreparaatin avulla, jossa ureaasin puhtausaste on vähintään 0,418 kat/kg ja joka on tunnettu siitä, että kuivaseoksena oleva preparaatti sisältää stabilointiaineena glutationin, etyleenidiamiinitetraetikkahapon (EDTA) ja alkali-tai maa-alkalisitraatin seosta, joka 1 paino-osaa ureaasia kohti sisältää 0,5 - 5 paino-osaa glutationia, 0,5 - 3 paino-osaa etyleeni-diamiinitetraetikkahappoa ja 0,5 - 3 paino-osaa sitraattia, ja vesi-liuoksena olevan preparaatin pH on 5 - 9, sopivimmin 6-7.
Mainittujen kolmen aineen seos pystyy yllättäen erittäin hyvin stabiloimaan myös hyvin puhdasta ureaasia, vaikkakin on tunnettua, että tämän seoksen yksityisillä jäsenillä ei ole mitään stabiloivaa vaikutusta .
Keksinnön mukaisesti stabiloidut ureaasipreparaatit osoittautuvat erityisesti ensisijaisessa aktiivisuusalueessa, noin 0,333 - 5,0 kat/kg huomattavan pysyviksi ja niiden aktiivisuus on esimerkiksi lyofilisoinnin ja 12-viikkoisen 33°C:ssa tapahtuneen varastoinnin jälkeen vielä 100 % ennen lyofilisointia todetusta lähtöaktiivisuu-desta laskien. Stabilointiainetta käyttämättä jo lyofilisoitaessa aktiivisuuden menetys on 30 - 80 %.
Myös ensisijaisen alueen ulkopuolellakin olevilla keksinnön mukaisesti stabiloiduilla ureaasipreparaateilla saavutetaan vielä erittäin hyviä stabiloitumisvaikutuksia.
Keksinnön mukaisesti stabiloitu entsyymipreparaatti sisältää ureaasia, jota on ennen stabilointiseoksen lisäämistä puhdistamista varten käsitelty dekstraanilla. Tämän dekstraanikäsittelyn avulla entsyymin aktiivisuus saadaan suunnilleen kaksinkertaistettua. Nävttää siltä.
56536 3 että dekstraanikäsittelyn avulla saadaan poistetuksi samanaikaisesti stabilointia haittaavia epäpuhtauksia siinä määrin, että ureaasipre-paraattien, joille on ensin suoritettu dekstraanikäsittely, stabiilisuus stabilisaattorilisäyksen jälkeen on erittäin hyvä. Dekstraanikäsittely voidaan suorittaa yksinkertaisesti sekoittamalla dekstraa-nia entsyymiliuokseen tai myös pylväskromatograafisin menetelmin. Dekstraanina on erittäin edullista käyttää molekyyliseulaominaisuuk-sia omaavaa verkkoutettua tuotetta, koska ureaasista saadaan tällöin samanaikaisesti poistetuksi suola ja häiritsevä epäpuhtaus rikastetuksi ja poistetuksi. Sopivia verkkoutettuja ja verkkouttamat-tomia dekstraanipreparaatteja on kaupan.
Keksinnön mukaisesti stabiloitu ureaasi soveltuu erityisesti käytettäväksi virtsa-aineen osoittamiseen.
Tunnetaan lukuisia seoksia, joita käytetään ammoniakin osoittamiseen ja niitä voidaan käyttää reagenssin valmistamiseen, mikäli ne eivät sisällä aineosia, jotka häiritsevät ureaasin katalysoimaa reaktiota tai itse ureaasia. Tämän tapaisen systeemin ammoniakin osoittamiseksi voi muodostaa pH-indikaattori-aines, kuten esim. bromitymoli-sininen, joka ilmaisee ammoniakin vapautumisen johdosta muuttuvan pH-arvon värinmuutoksena tai vastaavana ilmiönä. Tämän tapainen systeemi soveltuu käytettäväksi esimerkiksi koepapereissa tai -kalvoissa virtsa-aineen osoittamiseksi veressä tai seerumissa. Keksinnön mukainen stabiloitu ureaasi on niin pysyvä, että se soveltuu paperin, kalvon tai vastaavanlaisen kantajamateriaalin impregnoin-tiin tai yhdessä sideaineen kanssa reaktiokykyisten kerrosten muodostamiseen vastaavanlaisille kantajille. Jos sellainen kantaja tai sellainen kerros sisältää lisäksi pH- indikaattoria, virtsa-aine on määritettävissä yksinkertaisen värinmuutoksen perusteella.
Seuraavat esimerkit selventävät keksintöä:
Esimerkki 1
Kaupan olevaa ureaasia, jonka spesifinen aktiivisuus oli noin 1,667 kat/kg liuotettiin veteen, kaadettiin verkkoutetulle dekstraanigee-lille ja sen jälkeen lyofilisoitiin. Lyofilisoitu preparaatti varastoitiin sitten 33°C:ssa stabiilisuuden toteamiseksi.
................J
4 56536
Edellä selostettu koe uusittiin toisella erällä, mutta verkkoute-tulla dekstraanilla käsiteltyyn entsyymiin lisättiin glutationia, alkalisitraattia ja EDTA:ta painosuhteessa 1:1:1:1. Sen jälkeen toistettiin lyofilisointi ja varastointi kuten ensimmäisessä kokeessa .
Ensimmäisessä kokeessa, jossa ei ollut stabilointiainelisäystä, aktiivisuussaanto oli lyofilisoinnin jälkeen 20 %. 6-viikkoisen 33°C:ssa tapahtuneen varastoinnin jälkeen mitattu jäännösaktiivisuus oli alle 1 %.
Toisessa kokeessa, jossa oli keksinnön mukaista stabilointiainetta, aktiivisuus oli lyofilisoinnin jälkeen 100 %, 6-viikkoisen 33°C:ssa tapahtuneen varastoinnin jälkeen yhä vielä 100 %. Jatkettaessa varastointia mainituissa olosuhteissa 3 kuukautta, aktiivisuudeksi saatiin taas 100 % lähtöaktiivisuudesta ennen lyofilisointia.
Esimerkki 2
Kaupan olevaa ureaasia, jonka spesifinen aktiivisuus oli noin 1.667 kat/kg, liuotettiin veteen, lisättiin glutationia, sitraattia ja EDTA:ta painosuhteessa 1:1:1:1 ja lyofilisoitiin ilman dekstraani-käsittelyä. Lyofilisaatissa todettiin 100 % lähtöaktiivisuudesta.
Sen jälkeen lyofilisaattia varastoitiin 33°C:ssa 6-viikkoisen varastoinnin jälkeen aktiivisuus oli vielä 95 % lähtöarvosta.
Esimerkki 3
Kaupan olevasta teknillisestä ureaasista saatiin usean kiteytyksen ja dekstraanikäsittelyn avulla ureaasia, jonka spesifinen aktiivisuus oli noin 25 kat/kg. Saatuun preparaattiin lisättiin glutationia, alkalisitraattia ja EDTA:ta painosuhteessa 1:3:3:3. Säilyvyys 33°C:ssa varastoitaessa vastasi ureaasin säilyvyyttä, jonka aktiivisuus on 1.667 kat/kg.
Koekalvo virtsa-aineen osoittamiseksi veressä tai seerumissa keksinnön mukaista ureaasia käyttäen voidaan valmistaa seuraavasti: L. _______________________ 5 56536
Aineosat:
Polyvinyyliasetaattipropropionaattidispersio 45,0 g (Propiofan 70 D) 1,93 %:nen natriumalginaatin vesiliuos 10,0 g
Dioktyylinatriumsulfosukkinaatti 0,5 g x «4
Stabiloitu ureaasi liuotettu 10 ml:aan vettä 1,667*10 kat
Bromitymolisininen, liuotettu 5 ml:aan metanolia + 5 ml:aan vettä 0,25 g
Dinatriumvetyforfaatti 0,9 g
Xstabiloitu glutationilla, alkalisitraatilla ja EDTA:lla 1:1:1:1.
Aineosat sekoitetaan hyvin keskenään ja pH säädetään 1-n HCl:lla 6,0:ksi. Massa levitetään PVC-kalvolle 250 ^u:n paksuiseksi kerrokseksi ja kuivataan 60 min. 60°C:ssa. Tiputettaessa sille virtsa-ainepitoista verta tai seerumia ja huuhtomalla tämä pois 90 sekunnin kuluttua, syntyy seuraavia reaktiovärejä: 20 mg % virtsa-ainetta - keltainen 60 mg % virtsa-ainetta - keltaisenvihreä 100 mg % virtsa-ainetta - vihreä 200 mg % virtsa-ainetta - tummanvihreä 3-vuorokautisen 60°C:ssa varastoinnin jälkeen tämä koekalvo reagoi käytännöllisesti katsoen muuttumattomana.
Koekalvo, jonka koostumus ja valmistustapa olivat samat, mutta jossa keksinnön mukaisesti stabiloidun ureaasin asemesta oli saman aktiivisuuden omaavaa stabiloimatonta ureaasia, antaa aluksi käytännöllisesti katsoen samat reaktiovärit, mutta ei kuitenkaan reagoi 3-vuorokautisen 60°C:ssa tapahtuneen varastoinnin jälkeen enää riittävän hyvin.
FI770294A 1976-03-25 1977-01-28 Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat FI56536C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE2612726A DE2612726C3 (de) 1976-03-25 1976-03-25 Stabilisierte Urease
DE2612726 1976-03-25

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI770294A FI770294A (fi) 1977-09-26
FI56536B FI56536B (fi) 1979-10-31
FI56536C true FI56536C (fi) 1980-02-11

Family

ID=5973424

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI770294A FI56536C (fi) 1976-03-25 1977-01-28 Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat

Country Status (19)

Country Link
US (1) US4188465A (fi)
JP (1) JPS6027516B2 (fi)
AR (1) AR210632A1 (fi)
AT (1) AT349651B (fi)
AU (1) AU509593B2 (fi)
BE (1) BE852791A (fi)
BR (1) BR7701770A (fi)
CA (1) CA1086615A (fi)
CH (1) CH629535A5 (fi)
DD (1) DD129692A5 (fi)
DE (1) DE2612726C3 (fi)
FI (1) FI56536C (fi)
FR (1) FR2345460A1 (fi)
GB (1) GB1517146A (fi)
HU (1) HU179124B (fi)
IT (1) IT1076016B (fi)
NL (1) NL188169C (fi)
SE (1) SE428475B (fi)
SU (1) SU743600A3 (fi)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4282316A (en) * 1979-09-11 1981-08-04 Modrovich Ivan Endre Stabilized enzymic solutions for determining urea
US4465770A (en) * 1979-09-11 1984-08-14 Modrovich Ivan Endre Stabilized enzymic solutions for determining urea
US4378430A (en) * 1979-09-11 1983-03-29 Modrovich Ivan Endre Method of forming stabilized urease solutions
US4350659A (en) * 1981-07-30 1982-09-21 Corning Glass Works Stabilization of sensitive biologically active intermediate metabolites such as folic acid derivatives
EP0213156A1 (en) * 1985-02-11 1987-03-11 Travenol-Genentech Diagnostics Stabilized enzyme substrate solutions
US7422903B2 (en) * 2002-12-11 2008-09-09 Instrumentation Laboratory Company Multi-analyte reference solutions
US20040256227A1 (en) * 2003-02-11 2004-12-23 Jungwon Shin Electrochemical urea sensors and methods of making the same
US20040154933A1 (en) * 2003-02-11 2004-08-12 Instrumentation Laboratory Company Polymeric membranes for use in electrochemical sensors
US20050176650A1 (en) * 2004-02-09 2005-08-11 Xanodyne Pharmacal, Inc. Stable parenteral formulation of levomepromazine and a method for stabilizing said formulation
KR101428122B1 (ko) 2006-12-15 2014-08-07 라이프본드 엘티디. 젤라틴-트랜스글루타미나아제 지혈 드레싱 및 실란트
WO2009153751A2 (en) * 2008-06-18 2009-12-23 Lifebond Ltd A method for enzymatic cross-linking of a protein
CN102124058B (zh) 2008-06-18 2014-05-28 生命连结有限公司 改进的交联组合物
CA2728186A1 (en) * 2008-06-18 2009-12-23 Lifebond Ltd Methods and devices for use with sealants
DE102009057050A1 (de) * 2009-12-04 2011-06-09 Torsten Beel Urin-Indikator-Mittel
AU2010334412B2 (en) 2009-12-22 2016-02-04 Lifebond Ltd Modification of enzymatic crosslinkers for controlling properties of crosslinked matrices
CN103118713B (zh) 2010-08-05 2016-06-01 生命连结有限公司 干组合物伤口敷料及粘合剂
CA2808760C (en) 2010-08-20 2019-10-29 Cytonet Gmbh & Co. Kg Method for isolating urea while removing undesirable co2

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1321659A (fr) * 1961-03-20 1963-03-22 Albert L Chaney Chemical Lab Méthode de dosage de l'azote dans les fluides biologiques
USRE26125E (en) * 1962-05-08 1966-12-13 Reagents and analysis of nitrogen
US3527674A (en) * 1966-06-30 1970-09-08 Calbiochem Reagent material and method for urea assay
US3542649A (en) * 1967-04-07 1970-11-24 Hoffmann La Roche Color developing composition consisting of an enzyme,a salicylate and a hypochlorite donor
DE1758581C3 (de) * 1968-06-29 1974-01-10 Demag Ag, 4100 Duisburg Stützvorrichtung für ein metallurgisches Gefäß, insbesondere für einen Stahlwerkskonverter
ZA733611B (en) * 1972-10-11 1974-04-24 Merck Patent Gmbh Indicator for the determination of urea
DE2329174C2 (de) * 1973-06-07 1975-07-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur quantitativen Bestimmung von Blutammoniak

Also Published As

Publication number Publication date
BR7701770A (pt) 1978-01-17
GB1517146A (en) 1978-07-12
DD129692A5 (de) 1978-02-01
FI770294A (fi) 1977-09-26
HU179124B (en) 1982-08-28
FR2345460A1 (fr) 1977-10-21
NL7700686A (nl) 1977-09-27
DE2612726A1 (de) 1977-10-06
NL188169B (nl) 1991-11-18
AU509593B2 (en) 1980-05-15
SU743600A3 (ru) 1980-06-25
CA1086615A (en) 1980-09-30
DE2612726B2 (de) 1978-07-06
DE2612726C3 (de) 1979-03-15
AR210632A1 (es) 1977-08-31
IT1076016B (it) 1985-04-22
CH629535A5 (de) 1982-04-30
NL188169C (nl) 1992-04-16
SE428475B (sv) 1983-07-04
FI56536B (fi) 1979-10-31
US4188465A (en) 1980-02-12
JPS52117488A (en) 1977-10-01
BE852791A (fr) 1977-09-23
JPS6027516B2 (ja) 1985-06-29
ATA5477A (de) 1978-09-15
AU2356277A (en) 1978-09-28
FR2345460B1 (fi) 1982-12-17
AT349651B (de) 1979-04-25
SE7703206L (sv) 1977-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI56536C (fi) Mot aktivitetsfoerlust stabiliserat ureaspreparat
Semeriva et al. Pancreatic lipase and colipase. An example of heterogeneous biocatalysis
Björk et al. Acceleration of the Reaction between, Thrombin and Antithrombin III by Non‐stoichiometric Amounts of Heparin
Sanger The terminal peptides of insulin
Shipolini et al. Phospholipase A from bee venom
Deluca et al. [1] Purification and properties of firefly luciferase
FI109764B (fi) Kudostekijään perustuva protrombiiniaikareagenssi
Waite Mussel glue from Mytilus californianus Conrad: a comparative study
FI93494B (fi) Menetelmä veren hyytymistekijöiden stabiloimiseksi
Lockhart et al. The amino acid sequence in bacitracin A
FI120099B (fi) Ristisidottuja entsyymikiteitä ja niiden käyttö uutena entsyymien immobilisointimuotona
IE921897A1 (en) Synthetic pulmonary surfactant peptides
FR2701954A1 (fr) Composition stabilisée de troponine pour immunoessais et procédé de stabilisation de troponine pour immunoessais.
CN112972662B (zh) 一种蛋白酶k的冻干保护剂及制备方法和应用
Poillon Noncovalent inhibitors of sickle hemoglobin gelation: Effects of aryl-substituted alanines
Wiener et al. Effect of the vesicular stomatitis virus matrix protein on the lateral organization of lipid bilayers containing phosphatidylglycerol: use of fluorescent phospholipid analogs
Tsuboi et al. Sugar hydrolases of the infant rat intestine and their arrangement on the brush border membrane
Walker The purification and some properties of a protein causing gelling in phloem sieve tube exudate from Cucurbita pepo
Subramanian et al. The major alkaline proteinase of Aspergillus oryzae, Aspergillopeptidase B. II. Partial specific volume, molecular weight, and amino acid composition
JPS6269988A (ja) デキストラナーゼを安定に固定化したハイドロキシアパタイトの調整法
EP0085667B1 (fr) Procédé enzymatique pour la détermination d'antibiotiques à noyau bêta-lactame
Katiyar et al. Differential interaction of fatty acids and fatty acyl CoA esters with the purified/reconstituted brown adipose tissue mitochondrial uncoupling protein
CA1053661A (en) Protease-free proteins, and methods of manufacturing and using the same
JPH01108997A (ja) 血液又は血液から導出した試料中の血清のフルクトスアミン含量を特異的に測定する方法及び試薬、及び非特異的還元作用を有するか、又は/及び溷濁を惹起する試料成分を除去する方法
Adachi et al. Study on the reduced pyridine nucleotide dehydrogenase of bovine erythrocytes: I. Crystallization and properties of the reduced pyridine nucleotide dehydrogenase of bovine erythrocytes

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH