DE2355348A1 - Antibiotische derivate und verfahren zu ihrer herstellung - Google Patents
Antibiotische derivate und verfahren zu ihrer herstellungInfo
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Description
PROF. DR. DR. J. REITSTÖTTFR DR.-ING. V/OL.FRAW BUNTE
DR. KARL GEORG -.ÖSCH 2355348
D-8OOO MÜNCHEN 4O. BAUERSTRASSE 22 · FERNRUF (OBO) 37 65 83 · TELEX B2132O8 ISAR D
POSTANSCHRIFT: D-8O00 MÜNCHEN 43. POSTFACH 78O
M/12886 München, den 6. November 1973
Bristol-Myers Company
34-5 Park Avenue
Antibiotische Derivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
Die Erfindung betrifft neue Derivate von Gentamicin CL , die als antibakterielle Mittel brauchbar sind. Insbesondere betrifft
diese Erfindung halbsynthetische, in 1-Stellung substituierte
Derivate von Gentamicin CL , wobei diese Deriva—'
te durch Acylierung der 1-Aminofunktion von Gentamicin G^
mit einer γ-Amino-ct-hydroxybutyryleinheit hergestellt werden.
■
A. Gentamicin (;Gentamycin) und die Fermentation davon ist Gegenstand der US-Patentschriften 3 091 572 (erteilt am
28. Mai 1963) und 3 136 704 (erteilt am 9. Juni 1964). Die
Patentschriften beschreiben die Fermentation von Gentamicinkomplexen
aus Micromonospora purpurea, NNRL 2953 und Micromonospora
echino'spora, NNRL 2985* Es wurden auch Varianten
davon in der Stammkultursamralung des United States Department of Agriculture, Northern Utilization Research and
Development Division, Peoria, Illinois-als M. echinospora
- 1 409821/1133
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var. ferruginea, NNRL 2995 und M, echinospora'var. pallida,
NNBL 2996 hinterlegt.
B. Gentamicin wird weiterhin im Merck-Index, 8th Edition,
Seite 4-85 beschrieben. Die zwei Hauptkomponenten, Gentamicin
CL und Co werden darin beschrieben.
Gentamicin C wird als Komplex von drei nahe verwandten Komponenten,
die als "C1", "C2" und "C^a" bezeichnet werden,
fermentiert. Die vorliegende Anmeldung betrifft nur Gentamicin Gy. , das Ausgangsmaterial der erfindungsgemäßen Verbindung
der Formel:
Die Erfindung betrifft ein halbsynthetisches Derivat von Gentamicin 0Λ , wobei diese Verbindung als 1-[L-(-)-7-aminooC-hydroxybutyryl]
-gentamicin C. die J^ormel
1a
bekannt ist und
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besitzt, worin R die Bedeutung L-(-).-Ύ-amino-ot-hydroxybutyryl
besitzt, oder ein nichttoxiscb.es, pharmazeutisch . verträgliches Säureadditionssalz davon.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung bedeutet der Begriff
"nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz11
ein Mono-, Di-, Tri-, Tetra- oder Penta-Salz, das durch
Einwirken eines Mols Verbindung IV auf 1 bis 5 Mol einer
nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Säure entsteht. Unter diesen Säuren sind zu nennen Essigsäure, Chlorwasserstoff
säure, Schwefelsäure, Maleinsäure,- Phosphorsäure, Salpetersäure, Bromwasserstoffsäure, Ascorbinsäure, Apfelsäure,
Mandelsäure und Zitronensäure und all die anderen Säuren, die zur Herstellung von Salzen Amin enthaltender Pharmazeutika
allgemein verwendet werden.
Die erfindungsgemäße Verbindung kann gemäß dem folgenden typischen erläuternden Schema hergestellt v/erden: ■ '
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1.) Gentamicin C (D
la
N- (Benzyloxycarbonyloxy)-
„ ■ι , ^-
succinimid
CH2-NH-C-O-CH2-CeH5 ■
NH2
II
2.) Verbindung II N-Hydroxysuccinimidester
' . von L- (-^) -γ-Benzyloxycarbonyl
amino-a-hydroxybuttersäure
CH2-NH-C-O-CH2-C6H5 .
CH^-NH-C-O-CH2-C6H
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M/12886 · - ' ' 5*
2 .)Verbindung ΠΙ H2/Pd/C^
Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist die pharmazeutisch v/irksame Verbindung der Formel
CH2-NH2
NH-R
HO
worin R die Bedeutung L-(-)-J -amino- od-hydroxybutyryl besitzt
· oder ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Saureadditionssalz davon.
Andere bevorzugte Ausführungsformen, die als Zwischenpro—
dukte zur Herstellung der wirksamen, erfindungsgemäßen Ver-
— 5 —
«09821/1133
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bindungen brauchbar sind, sind die Verbindungen der Formel
CH2-NH-R1
IiH,
HO
Il
■NH-R
worm R die Bedeutung CgHc-CHg-O-C- besitzt und R Wasserstoff
oder L-(-)-^-benzyloxycarbonyl-amino-ot-hydroxybutyryl
bedeutet.
Andere am meisten bevorzugte Ausführungsformen sind die Sulfat-, Hydrochlorid-, Acetat-, Maleat-, Citrat-, Ascorbat-,
Nitrat- oder Phosphat-Salze der Verbindung IV.
Weitere, am meisten bevorzugte Ausführungsforcien sind die
Mono- oder Polyhydrate der Verbindungen· der Formel IV, insbesondere
die Mono- oder Polyhydrate der Monosulfat- oder Disulfatsalze der Verbindung.der Formel IV.
Die der Erfindung zugrunde liegenden Aufgaben werden dadurch gelöst, daß man erfindungsgemäß das Verfahren zur Herstellung
der Verbindung der Formel
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CH2-NH2
NH-R
IV
schafft, worin R die Bedeutung L-(-)-Y-amino-o<—-hydroxybutyryl
besitzt; oder eines nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzes davon, dadurch gekennzeichnet,
daß man in aufeinanderfolgenden Stufen
A. die an dem 6'-Kohlenstoffatom von Gentamicin C^a befindliche
Aminogruppe mit einer gebräuchlichen Aminoschutzgruppe
X blockiert, wobei eine Verbindung der Formel
CH2-NK-Y
NH2
HO
II
entsteht5
B. die an der "!-Position der Verbindung der Formel II befindliche
Aminogruppe mit dem L-(-)-Isomeren eines Acylie-
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rungsmittels der Formel
d.
worin W eine gebräuchliche Aminoschutzgruppe darstellt, oder
mit seinem funktioneilen Äquivalent als Acylierungsmittel füi
ein primäres Arnin acyliert, wobei5 eine Verbindung der Formel
CH2-NH-Y
III
entsteht, worin Y und V/ die obigen Bedeutungen besitzen; und
G. durch an sich bekannte Methoden die Aminoschutzgruppen "V/ und Y entfernt, wobei die Verbindung der Formel IV entsteht,
und gegebenenfalls anschließend das obige Produkt durch an sich bekannte Methoden in ein nichttoxisches, pharmazeutisch
verträgliches Säureadditionssalz davon überführt.
Eine bevorzugte Ausführungsform ist das Verfahren zur Herstel·
lung einer Verbindung der Formel IV, worin R die Bedeutung Ii-(—)-γ —amino— oC-hydroxybutyryl besitzt oder eines nichttoxischen,
pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzes
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davon, dadurch gekennzeichnet,- daß man in aufeinanderfolgenden
Stufen .
A. Gentamicin C- mit einem Acylierungsmittel, ausgewählt
unter
Q 0
R-
CH2-O-C-X
CH, 0
CHn-C-i
// \© a .</ NN-C-C
CE
CH
X-CH2-C-OH ,- (oder einem Carbodiimid davon) oder
C-CH2-CH2-CO2H (oder einem Carbodiimiddavon),
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4-- 5
'worin R und R , die gleich, oder verschieden sein können, H, F, Cl, Br, NO2, OH, Niedrigalkyl oder Niedrigalkoxy, X Chlor, Brom oder Jod bedeuten, oder mit einem funktionellen Äquivalent als Äcylierungsmittel in einem Verhältnis von einem Mol oder weniger Äcylierungsmittel pro Mol Gentamicin C-,. in einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt unler Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2-Dimethoxyäthan, Methanol, Äthanol, Wasser, Aceton, Pyridin, N-Niedrigalkylpiperidin.oder Mischungen davon, jedoch vorzugsweise Dimethylformamid,bei einer Temperatur unterhalb 50°C^und vorzugsweise unterhalb 25°C,acyliert, wobei die Verbindung der Formel
'worin R und R , die gleich, oder verschieden sein können, H, F, Cl, Br, NO2, OH, Niedrigalkyl oder Niedrigalkoxy, X Chlor, Brom oder Jod bedeuten, oder mit einem funktionellen Äquivalent als Äcylierungsmittel in einem Verhältnis von einem Mol oder weniger Äcylierungsmittel pro Mol Gentamicin C-,. in einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt unler Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2-Dimethoxyäthan, Methanol, Äthanol, Wasser, Aceton, Pyridin, N-Niedrigalkylpiperidin.oder Mischungen davon, jedoch vorzugsweise Dimethylformamid,bei einer Temperatur unterhalb 50°C^und vorzugsweise unterhalb 25°C,acyliert, wobei die Verbindung der Formel
CH2-NH-Y " ·
II
worin Y einen Hest der Formeln
CH2-O-C- , CH5-C-O-C- ,
X-CH2-C- , oder
CH2-CH2-C-;
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worin R und R^ die obigen Bedeutungen besitzen, bedeutet,
entsteht;
B. Verbindung II mit einem Acylierungsmittel der Formel
OH 0 W-NH-CH2-CH2-GH-C-M
VII
worin W einen Rest, ausgewählt unter
O CH, O
CH2-O-C- , CHg-C-O-C- , O2
CH,
X-CH2-C
jedoch vorzugsweise
CH2
0 -0-C-
„/ ^
C-CH2-CH2-C-;
4-5
worin R und R-^ die obigen Bedeutungen besitzen, bedeutet,
worin R und R-^ die obigen Bedeutungen besitzen, bedeutet,
und ,
M einen Rest, ausgewählt unter
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Vl
-O-N
*y—
-0-N
N
N
, jedoch, vorzugsweise
bedeutet, in einem Verhältnis von mindestens 0,5 Mol von Verbindung
VII pro Mol Verbindung II, vorzugsweise in einem Verhältnis von etwa 0,5 bis etwa 1,4- und besonders bevorzugt in
einem Verhältnis von etwa 0,8 bis etwa 1,1 in einem Lösungsmittel, das vorzugsweise ausgewählt ist, unter Mischungen von
V/asser und Ithylenglycoldimethyläther, Dioxan, Dimethy!acetamid,
Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Propylenglycoldi—
methyläther ode-r dergleichen, jedoch bevorzugt 1:1 Wasser/
Äthylenßlycoldimethylüther, acyliort, wobei eine Verbindung
der Formol
methyläther ode-r dergleichen, jedoch bevorzugt 1:1 Wasser/
Äthylenßlycoldimethylüther, acyliort, wobei eine Verbindung
der Formol
CH-NH-Y
III
- 12 -
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entsteht, in der Y und W die obigen Bedeutungen besitzen; und
C. die Blockierungsgruppen Y und V/ von der Verbindung III durch an sich bekannte Methoden entfernt, und wenn W und Y
Reste der Formel
' rVa 1
C. VcH2-O-O- '
bedeuten, durch Hydrierung der Verbindung III mit Wasserstoff
vorzugsweise
in Gegenwart eines Metallkatalysators,νausgewählt unter Palladium,
Platin, Raney-ITickel, Rhodium, Ruthenium und Nickel, jedoch
bevorzugt Palladium und besonders bevorzugt Palladium-auf-Aktivkohle,
in einem aus Wasser und einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel bestehenden Lösungsmittelsystem, vorzugsweise
ausgewählt unter Wasser und Dioxan, Tetrahydrofuran, Äthylenglycoldimethyläther,
Propylenglycoldimethyläther oder dergleichen, jedoch vorzugsweise 1r1 Wasser/Dioxan und vorzugsweise
in Gegenwart einer katalytischen Menge Eisessig,'entfernt,
wobei die Verbindung der Formel IV entsteht.
Es ist für den Fachmann offensichtlich, daß man in dem obigen Verfahren zur Acylierung der Aminfunktionen der erfinduhgsgemäßen
Zwischenyerbindungen andere Mittel verwenden kann.
Diese Veröffentlichung schließt alle solcheAcylierungsmittel
ein, die zu labilen amino-blockierenden Gruppen führen,
wobei diese labilen Blοckierungsgruppen allgemein bei der
Synthese von Peptiden eingesetzt v/erden. Die labilen Blockierungsgruppen müssen durch an sich bekannte Methoden leicht
entfernbar sein. Beispiele für solche labilen Blockierungs-
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4»
gruppen und ihre Entfernung sind in der Übersicht von
A. Kapoor, J. Pharm. Sciences _59, S. 1-27 (1970) au finden.
Funktionelle Äquivalente als Acylierungsmittel für primäre Aminogruppen schließen die entsprechenden Garbonsäure—
chloride, -bromide, Säureanhydride, einschließlich gemischter Anhydride und insbesondere der aus stärkeren Säuren, wie
der niedrigaliphatischen Monoester der Kohlensäure, der Alkyl und Arylsulfonsäuren und der der sterisch gehinderteren Säuren,
wie Diphenylessigsäure, hergestellten gemischten Anhydride ein. Außerdem kann ein Säureazid oder ein aktiver Ester
oder Thioester (beispielsweise mit p-Nitrophenol, 2,4-Dinitrophenol,
Thiophenol, Thioessigsäure) verwendet v/erden
oder die freie Säure selbst kann mit dem Gentamicin-C^Derivat
nach zuerst erfolgter -Reaktion dieser freien Säure .mit
NjN'-Dimethylchloroforminium-chlorid [vergl. GB-PS 1 008
und Novak und V/eichet, Experientia XXI/6, 360 (1965)] gekuppelt
werden, oder das Derivat eines Alkinylamin-Eeagenzes
{vergl. S. Buijile und H.G.Viehe, Angew.Chem., International
Edition 3, 582 (1964)] oder eines Ketenirnin-Reagenzes [vergl.
CL. Stevens und M.E. Munk, J. Ame.r. Chem. Soc. 80, 4065
(1958)J oder eines Isoxazoliumsalz-Reagenzes [vergl. R.B. Woodward, R.A. Olofson und H. Kayer, J. Aiuer. Chem. Soc,
83, 1010 (1961)3· Ein weiteres Äquivalent des Säurechlorids
ist ein korrespondierendes Azolid, d.h. ein Amid der entsprechenden Säure, deren Amidstickstoff das Glied eines
quasi-aromatisehen 5-Rings ist, der mindestens zwei Stickstoffatome
enthält, d.h. Imidazol,«Pyrazol, die Triazole, Benzimidazole, Benzotriazole und ihre substituierten Derivate.
Als Beispiel für die allgemeine Methode zur Herstellung eines Azolids wird Ν,Ν'-Carbonyldiimida'zol mit einer
Garbonsäure in äquimolaren Verhältnissen bei Raumtemperatur in Tetrahydrofuran, Chloroform, Dimethylformamid oder
- 14 -
409821/113
einem ähnlichen inerten Lösungsmittel umgesetzt, wobei unter
Freisetzung von Kohlendioxyd und einem Mol Imidazol das Carbons äureimidazolid in praktisch quantitativer Ausbeute anfällt.
Dicarbonsäuren liefern Diimidazolide. Das Nebenprodukt Imidazol fällt aus und kann abgetrennt werden und das
Imidazolid kann isoliert werden, je'doch ist dies nicht wesentlich.
Diese Reaktionen sind aus dem Stand der Technik wohlbekannt [vergl. US-PSen 3 079 314, 3 117 126 und
3 129 224 sowie die GB-PSen 932 644, 957 570 und 959 054].
Bei der Herstellung des Gentamicins G^ in Stufe A, dessen
in 6'-Stellung befindliche Aminogruppe blockiert ist, werden
bevorzugt die molaren Verhältnisse der Reaktionspartner so eingestellt, daß ein Mol oder weniger Acylierungsmittel
pro Mol Gentamicin CL verwendet wird. Eine Erhöhung des
I 3.
Verhältnisses an Acylierungsmittel kann in geringeren Ausbeuten des gewünschten Zwischenprodukts resultieren, da
konkurrierende Nebenreaktionen zunehmen, die zu Verunreinigungen
durch PolyacylderivatCe) führen können./"
Wie bei den meisten chemischen Reaktionen können höhere oder niedrigere Temperaturen, als die, die hierin besonders beschrieben
sind, verwendet werden. In Stufe A können jedoch
Temperaturen, die wesentlich höher als die bevorzugte obere Grenze von 50° C liegen, zu verminderten Ausbeuten aufgrund
eines größeren Ante'ils' an Nebenreaktionen führen.
Die Verbindung IV, 1-[L-(-)-T-amino- oC-hydroxybutyryl] Gentamicin
C^, besitzt eine ausgezeichnete antibakterielle
Aktivität. Im folgenden ist eine Tabelle aufgeführt, die die minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von Gentamicin Gy, ,
Verbindung IV (BB-K92) und von zwei weiteren, verwandten
mono— und diacylierten Derivaten von Gentamicin C1 gegen
409821/113 3'
M/12886
235 53 A 8
eine Vielzahl grampositiver und gramnegativer Bakterien,
bestimmt durch die zweifache Agarverdunnungsmethode, aufzeigt.
TABELLE I | KM-R+ | K-12 | . aeruginosa D15 | AI5II9 | 3^ a-Derivaten | 50 | BB-K92 | von | 3 | Genta | |
coli K-12 KM-R+ | H9 D-113 KM-R+ | AI5I69 | 100 | 0,8 | 5 | micin | |||||
In vitro antimikrobiell Aktivität | KM-R+ | 11 KM-R+ | A2O363 | 100 | 0,4 | 5 | 0Ia | ||||
Gentamicin ( | W677 | A9844 | BB-K91 | 12,5 | 0,8 | 0,8 | |||||
JR/W677 | A2O365 | 1,6 | 100 | 0,8 | 0,4 | ||||||
pneumoniae D-11 | A9632 | 1,6 | 0,4 | 0,8 | |||||||
E. | MIG (γ/ml) | Type 22 | A20664 | 1,6 | 0,1 | 1 | 0,8 | ||||
Il | coli NIHJ | Ser. marcescens | A2O665 | 0,8 | 0,4 | 0,4 | |||||
Il | Juhl | Ps, | .A2Q684 | 1,6 | 0,2 | 0,2 | |||||
Il | It | A20683 | 0,8 | 0,4 | BB-K93 | 0,4 | |||||
It | It | 1,6 | 0,4 | 25 | 0,4 | ||||||
Il | η | A20680 | 1,6 | 0,2 | 25 | 0,4 | |||||
It | Il | 3,1 | 0,1 | 25 | 0,4 | ||||||
E. | 3,1 | . 0,4 | 25 | 6,3 | |||||||
Il | 6,3 | 1,6 | 25 | 0,1 | |||||||
Il | 0,2 | 6,3 | 6, | 12,5 | |||||||
It | 12,5 | 12,5 | 12, | 1,6 | |||||||
K. | A 20019 3,1 | 12,5 | 12, | 3,1 | |||||||
Il | 0,4 | 25 | 12,5 | ||||||||
12,5 | 25 | 6,3 | |||||||||
A9923 | 25 | 0,4 | |||||||||
A993O | 3, | 12,5 | |||||||||
AI5150 | 50 | ||||||||||
50 | |||||||||||
>1OO | |||||||||||
>100 | |||||||||||
>100 | |||||||||||
25 | |||||||||||
>100 | |||||||||||
- 16 -
409821/1133
M/12886
MIC (γ/ml) | " KM+, SM-R++ .: | BB-K91 | BB-K92 | > | 0,4 | BB-K93 | Genta | |
. aeruginosa A15194 | phlei | 100 | 6,3 | 50 ■ | > 100 | micin C1a |
||
Ps. | GM-R+++ A20717 | ranae | >100 | 50 | 50 | >100 | 6,3 | |
Il | GM-R+++ A20718 | >100 | 50 | 0,4 | > 100 | 100 | ||
«ι- | H6 D-114 HMrE++++ | 50 | 3,1 | 0,4 | 100 | 100 | ||
Il | . vulgaris A9436 | 0,4 | 0,4 | 12,5 | 6,3 | |||
Pr. | A9526 | 0,8 | 0,4 | 25 | 0,2 | |||
Il | . mirabilis A9554 | 3,1 | 3,1 | 50 | 0,2 | |||
Pr, | A99OO | 3,1. | 1,6 | 50 | 0,4 | |||
Il | , morganii A9553 | 0,8 | 0,8 | 50 | 0,4 | |||
Pr. | A20031 | 1,6 | 1,6 | 100 | 0,4 | |||
Il | . rettgeri A15167 | 0,8 | ||||||
Pr. | aureus Smith A15167 | 0,4 | 0,4 | 6,3 | ||||
S. | 209P SM-R+"1" | 6,3 | 1,6 | 50 | 0,2 | |||
Il | KM-R+ A20239 | 1,6 | 0,8 | 50 · | 0,8 | |||
Il | Subtilis PcI-219 - | 0,8 | ||||||
B.. | Mycob. 607 | 3,1 | 12,5 | |||||
Mycob. 607 KM-R+ : | ^100 | >100 | 0,8 | |||||
Il | >100 | > 100 | 100 | |||||
ti | 1,6 | 6,-3 | 100 | |||||
It | 3,1 | 12,5 | 0,4 | |||||
0,8 |
KI-I-R ist kanamycin-re si stent. SM-R++ ist streptomycin-resistent.
GM-R+++ ist gentamicin-resistent.
IiM-R++++ ist neomycin-»resistent. .
40982T/1133
m/12886 2355 3 Λ 8
Da Gentamicin C1 eine in der 6* -Position an d-en Methylenkohlenstoff
gebundene primäre Aminogruppe besitzt, v/ird das Blockieren der Aminogruppe mit einer Benzyloxycarbony!gruppe
ausgeführt, bevor man L— (—)— Y-Aaiino— oo-hydroxybuttersäure
(HABA) in die 1-Aminogruppe der Desoxystreptamineinheit gemäß
dem folgenden gekürzten Schema einführt: »
Gentamicin (L·
Gbz-NOS vl/
Π5» -N-Cbz-Gentamicin C^ "Ί
ObZ-MCE2CH2(JHCO^-NOS
OH
I H2 (Pd/C)
iCG-50 Säulenchromatographie
BB-K91 + BB-K92 + BB-K93
(Monoacyl- (das gev/ünsch-. (Diacylderivat)
derivat)" jbe 1-Acylderi-
vat)
Es ist zu sehen, daß das obige Verfahren drei verschiedene HABA-substituierte Gentamicin C^a~Derivate liefert, die hier
als BB-K91, BB-K92 und BB-K93 bezeichnet werden. BB-K92 ist
als 1 - [l-(-) - γ -amino- oc-hydroxybu-tyrylj -gentamicin O^
(Verbindung IV) identifiziert worden. Die Verbindung besitzt eine Aktivität, die mit der von Gentamicin C^, vergleichbar
ist unä. ist als solche brauchbar als antibiotisches Mittel.
ΕΒ-Κ9Ί ist ein monoacyliertes Derivat, dessen Acylierungsstelle
noch- nicht herausgefunden vmrde. BB-K93 ist ein diacyliertes
Derivat, dessen Acylierungsstellen noch nicht herausgefunden worden sind.
- 18 409821/1133
Durch Dünnschichtchromatographie (TLC) ist bestätigt worden,
daß alle Produkte, BB-K91 bis BB-K93 durch einstündiges Erhitzen
in. 0,5 N Natriumhydroxidlösung Gentamicin C1 und
oL-Hydroxy-γ-aminobuttersäure (HABA) wieder freisetzen.
Diese Tatsache zeigt ebenso wie die Anwesenheit einer Amido carbonylbande in den Infrarotspektren, daß alle Produkte
Gentamicin C1 -Derivate sind,.die mit L-HABA acyliert sind.
Die Verbindung IV ist wertvoll als antibakterielles Mittel, als Beifuttermittel bei Tierfutter, als therapeutisches Mittel
bei Geflügel und Tieren, sowie dem Menschen, und ist insbesondere wertvoll bei der Behandlung von durch grampositive
und gramnegative Bakterien verursachten infektiösen Erkrankungen.
Die Verbindung IV ist-brauchbar als Zusatzbehandlung zur
präoperativen Sterilisation des Darms, wenn sie oral verab—·
reicht wird. Sowohl die aerobe als auch die anaerobe Flora, die gegenüber diesem Mittel empfindlich ist, wird im Dickdarm
vermindert. In Verbindung mit angemessener mechanischer Reinigung ist sie bei der Vorbereitung von Darmoperationen
wertvoll. ■
Die Verbindung IV ist bei der Behandlung bakterieller Systemerkrankungen
bei einer parenteralen Verabreichung in einem Dosierungsbereich von etwa 250 mg. bis etwa 3000 mg pro Tag
in aufgeteilten Dosen drei- oder viermal täglich wirksam..
Im allgemeinen ist die Verbindung wirksam, wenn sie in einer Dosierung von etwa 5>0 bis 7,5 mg/kg Körpergewicht,
alle. 12 Stunden verabreicht wird.
- 19 -
409821/1133
Gentamicin C ist ein Komplex von mindestens drei Hauptkomponenten,
die sich nur durch den an der 5'—Position der Didesoxy-Zuckereinheit
des Gentamicinkerns befindlichen Substituen-
■χ
ten Rr unterscheiden, wie im folgenden gezeigt wird.
ten Rr unterscheiden, wie im folgenden gezeigt wird.
CH^
CIL-NH
Gentamicin C2 ;. -CH-NH2
Gentamicin Cla
Gentamicin G* wird aus dem Komplex durch das folgende Verfahren
erhalten.
g des Gentamicin-C—Komplexes in Form, der freien Base
wird unter Verwendung eines präparativen Gegenstromvertei— lungsapparates (CCD) (100 ml χ 50 Röhren) mit einem Lösungsmittelsystem
von CHCl5-Me0H-17 % wäßriges NH^OH (2:1:1)
fraktioniert, wobei die unten aufgeführten Fraktionen erhalten
werden.
- 20 -
409821/1133
M/12386
Identifizierung
Menge Dünnschicht-Fraktion Röhre Nr. wiedergewonnen Chromatographie (TLC )
I | 25-33 | 1,46 g | C1 haup tsächlich |
II | 32-42 | 0,72 | C1 * C2 |
III | 43-47 | 1,20 | C2+ C1a |
IV | 48-50 | . 0,87 | C1 hauptsächlich |
+ Zellulose-Dünnschichtplatte, Lösungsmittelsystem: untere
Schicht aus CHCl5-MeOH-I7 % NH^OH (2:2:1), Rf: Gentamicin
C1 (0,69), C2 (0,39), C1Z1 (0,23).
Die Fraktionen I und II werden vereinigt und durch dasselbe CCD-System wie oben wiederum verteilt, wobei 1,94 g der Gentami
CXn-C1—Komponente erhalten werden, die durch Dowex 1 X2—
Säulenchromatographie weiter gereinigt wird, wobei 1,70 g im wesentlichen reines Gentamicin C1 erhalten v/erden.
eese ee« ■ee.. ko
den in gleicher Vfeise durch CCD und Dowex 1 X2-Chromatographie
gereinigt, wobei 1,13 g Gentamicin C2 und 0,62 g
Gentamicin C1 anfallen...
Dowex 1-X2 ist ein Harz, das aus einem Polystyrol-"backbone"
besteht, an das· Benzyltrimethylammoniumchlorid gebunden ist,
sowie aus 2 %"Divinylbenzol, die wahrend der Polymerisation
als Vernetzungsmittel zugesetzt sind. Es wird in Form von Kügelchen geliefert.
- 21 -
409821/1133
Beispiel 1
Herstellung von L-(-)-y-Benzyloxycarbonylamino-o£-hydroxybuttersäure (VI)
7 ,4 S (0,062 Mol) L-(—)— γ -amino— oC-hydroxybuttersäure werden
zu einer Lösung von 5,2 g (0,13 Mol) Natriumhydroxid in
50 ml Wasser zugegeben. Zu der gerührten Lösung v/erden bei
0 bis 5°C während 0,5 Stunden tropfenweise 11,7 S (0,068
Mol) Carbobenzoxychlorid zugegeben,und die Mischung wird
bei derselben Temperatur noch 1 Stunde gerührt. Die Reaktionsmischung wird mit 50 ml Äther gewaschen, mit verdünnter
Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 eingestellt und mit vier
80 ml-Portionen Äther extrahiert. Die Ätherextrakte v/erden
vereinigt, mit einer kleinen Menge gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet
und filtriert. Das Piltrat wird im Vakuum eingedampft,und
der erhaltene Rückstand wird aus Benzol kristallisiert, wobei 11,6 g (74 <fi) farblose Platten vom Schmelzpunkt 78,5
bis 79.50C erhalten werden, föcl ·* 4,5*|"(c = 2, CH5OH).
KBrJ: NJc=O 172W, 1690 cm . Kernmagnetische
Resonanz (KMR) (Aceton-d^) ζ (in ppm von TMS) 2,0
(2H,m), 3,29 (2H,d-d, J=6,7 und 12 Hz), 4,16 (1H,d-d,
J=4,5 und 8 Hz), 4,99 (2H,s), 6,2'(2H, breit), 7,21 (5H,s).
Analyse C^^ cNO,-:
H N
ber.: | 56 | ,91 | 5 | ,97 | 5 | ,53 |
gef.: | 56 | ,66 | 5 | ,97 | 5 | ,4-7 |
- 22. -
409821/1133
Beispiel 2 ,
N-Hydroxysuccinimidester von L-(-)-"y-Benzyloxycarbonyl-
amiiio— oj— hydroxybuttersäure (VII)
Eine Lösung von 10,6 g (0,04-2 Mol) Verbindung VI und 4-,8 g
1
(0,042 Mol) N-Hydroxysuccinimid in 200 ml Äthylacetat wird auf 0°C gekühlt und anschließend werden 8,6 g (0,04-2 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid zugesetzt. Man laßt die Mischung über Nacht iii einem Kühlschrank stehen. Der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert und das Filtrat wird unter vermindertem Druck auf etwa 50 ml eingeengt, wobei farblose Kristalle von Verbindung VII erhalten v/erden, die man abfiltriert; 6,Ag, Schmelzpunkt 121 bis 122,5°C. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der kristalline Rückstand, \tfird mit 20 ml einer Benzol-n-Hexan— mischung gewaschen, wobei zusätzliche Verbindung VII erhalten wird. Die Gesämtausbeute beträgt 13*4- g (92 #). ΓοίΓ] -η 1,5° (c=2, CHOI,) IR (KBr) ^c=O 1810, 1755, 174-0, 1680 cm"'1.' NMR (Aceton-d6)S(in ppm von [I1MS) 2,0, (2H, m), 2,83 $H, s), 3,37 (2H, d-d, J=6,5 und 12,5 Hz), 4-,56 (1H, m), 4-,99 (2H, s), 6,3 (2H, breit), 7,23 (5H, s).
(0,042 Mol) N-Hydroxysuccinimid in 200 ml Äthylacetat wird auf 0°C gekühlt und anschließend werden 8,6 g (0,04-2 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid zugesetzt. Man laßt die Mischung über Nacht iii einem Kühlschrank stehen. Der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert und das Filtrat wird unter vermindertem Druck auf etwa 50 ml eingeengt, wobei farblose Kristalle von Verbindung VII erhalten v/erden, die man abfiltriert; 6,Ag, Schmelzpunkt 121 bis 122,5°C. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockne eingedampft und der kristalline Rückstand, \tfird mit 20 ml einer Benzol-n-Hexan— mischung gewaschen, wobei zusätzliche Verbindung VII erhalten wird. Die Gesämtausbeute beträgt 13*4- g (92 #). ΓοίΓ] -η 1,5° (c=2, CHOI,) IR (KBr) ^c=O 1810, 1755, 174-0, 1680 cm"'1.' NMR (Aceton-d6)S(in ppm von [I1MS) 2,0, (2H, m), 2,83 $H, s), 3,37 (2H, d-d, J=6,5 und 12,5 Hz), 4-,56 (1H, m), 4-,99 (2H, s), 6,3 (2H, breit), 7,23 (5H, s).
Analyse C^ ^QN2Qr7: ■ :
" ... C HN
ber. r | 54- | ,85 | 5 | ,18 | 8 | ,00 |
gef.: | 54- | ,79/ | 5 | ,21/ | 8 | ,1V |
54- | ,70 | 5 | ,20 | 8 | ,12 |
1. G.W. Anderson et al., J. Am. Chem. Soc, 86", 1839 (1964-)
- 23 -409821/1133
Herstellung von 1-[£-(-)-γ-amino-o£-hydroxybutyryIJ gentamicin
C^ (IV)
Zu einer Lösung von 379 mg (0,84 Millimol) Gentamicin (L·
in 20 ml Wasser-THF (Tetrahydrofuran) Ql :i] werden 210 mg
(0,84- Millimol) N-Benzyloxycarbonyloxysuccinimid zugegeben,
und die Mischung wird bei Raumtemperatur 4 Stunden gerührt. Man gibt zur Reaktionsmischung 87,3 mg (0,84 Millimol) Natriumcarbonat
und 297 mg (0,84 Millimol) N-Hydroxysuccinimidester
von L-(-)- ν-benzyloxycarbonylamino—o6-hydroxy—
buttersäure. Fach vierstündigem Rühren wird die Mischung 15 Stunden in Gegenwart von 300 mg 10 % Palladium-auf-Aktivkohle
hydriert. Der Katalysator v/ird abfiltriert und
die.Lösung wird im Vakuum eingedampft, um das organische Lösungsmittel zu entfernen. Das erhaltene wäßrige Konzentrat
wird auf eine Säule mit Amberlite—CG—50—Ionenaustauscher
(KH^+ Form, 25 ml) aufgegeben, die mit 100 ml Wasser
gewaschen und nacheinander mit 670 ml" 0,1 Ή HELOH, 610 ml
0,2 N RH4OH, 640 ml 0,3 N MI^OH, 530 ml 0,5 N NH^OE und
300 ml 1 N ΝΗψΟΕ eluiert wird. Das Eluat wird in 10 ml
Fraktionen aufgefangen. Die Fraktionen .werden durch den Ninhydrinspot-Test, den Scheiben-Test und Dünnschichtchromatographie
(TLC) auf -Silicagelplatte überprüft.
Die Fraktionen 145 bis 195 werden vereint, im Vakuum eingedampft und lyophilisiert, wobei 46| mg rohes BB-E91 erhalten
werden, das auf einer Säule mit CG-50 (NH^+, 8 ml) nochmals
Chromatograph!ert v/ird, wobei 32 mg BB-K91 erhalten v/erden.
Die Fraktionen 196 bis 220 werden wie oben beschrieben aufgearbeitet.
Nochmaliges Chromatographieren mit CG-50 ergibt
- 24 -
40982 1/1133
33 mg BE-K92 (IV). Die Aufarbeitung der Fraktionen 287
bis 317 liefert 10 mg BB-K93.
Bezeich- Schmelz—
nung punkt (Zers.) Rf Bemerkungen
BB-K91 167-170 0,55 Monoacylderivat
BB-K92 183-187 0,40 das erwünschte
1-Acylderivat
BB-K93 200-205 0,17 Diacylderivat
+ Dünnschichtchromatographie (TLC): Silicagelplatte,
CHCl5-Me0H-28 % M4OH-H2O (1:4:2:1).
Amberlite CG-50 ist der Handelsname für die chromatographische
Qualität eines schwach sauren kationischen Austauscherharzes des Carbonsäure-Polymethacryltyps.
Herstellung von L-(-)-y-amino-oL-xhydroxybuttersäure aus
Ambutyrosin A oder B oder Mischungen davon
5,0 g Ambutyrosin Ä"jjJS-Patentschrift 3" 541 078, erteilt
am 17. November 197O] werden mit 160 ml 0,5 N Natriumhydroxid
1 Stunde unter Rückfluß gehalten. Das Hydrolysat wird mit 6N HCl neutralisiert und über eine Säule mit CG-50 (HH4 + Typ)
chromatographiert. Die erwünschte L-(-)- γ-Amino- οί,-hydroxy-'
buttersäure wird isoliert, indem man die Säule mit Wasser entwickelt und das Wasser durch Gefriertrocknung entfernt.
Die L-(-)-y-Amino-oC-hydroxybuttersaure wird als kristallines
Material mit einem Schmelzpunkt von 212,5 bis 214,5 C charakterisiert [Üs-Patentschrift 3 541 078, Spalte 2, Zeilen
31 bis 5Ö\ .
- 25 409821/1133
Herstellung von L-(-)-Y-Amino-oc-hydroxybuttersäure aus
DL- cc -Hydroxy- y -phthalimidobuttersäure
A. Dehydroabietylammonium-L-oC-hydroxy- y-phthalimido—
butyrat;
Zu einer Lösung von 25 g (0,1 Mol) 2-Hydroxy- γ-phthalimido-
1
buttersäure in 200 ml Äthanol wird eine Lösung von 29 g (0,1 Mol) Dehydroabietylamin in 130 ml Äthanol zugegeben. Die Lösung wird 1 Minute heftig geschüttelt und 5 Stunden bei Raumtemperatur stehen gelassen, wobei feine Nadeln auskristallisieren. Die Kristalle werden abfiltriert, mit 50 ml Äthanol gewaschen und an der Luft getrocknet, wobei 30,1 g (56 %)■ eines Diastereomeren des Dehydroabietylaminsalzes erhalten werden. Schmelzpunkt 93 bis 940C. Gp^JtT" + (C. 2,5, MeOH). Umkristallisation aus 300 ml Äthanol liefert 23,2 g (43 /Q des reinen Produkts vom Schmelzpunkt 94 bis 95°C. GK] ]f* +10,8° (C. 2,5, MeOH). Weiteres Umkristallisieren ändert weder den Schmelzpunkt noch die spezifische Drehung.
buttersäure in 200 ml Äthanol wird eine Lösung von 29 g (0,1 Mol) Dehydroabietylamin in 130 ml Äthanol zugegeben. Die Lösung wird 1 Minute heftig geschüttelt und 5 Stunden bei Raumtemperatur stehen gelassen, wobei feine Nadeln auskristallisieren. Die Kristalle werden abfiltriert, mit 50 ml Äthanol gewaschen und an der Luft getrocknet, wobei 30,1 g (56 %)■ eines Diastereomeren des Dehydroabietylaminsalzes erhalten werden. Schmelzpunkt 93 bis 940C. Gp^JtT" + (C. 2,5, MeOH). Umkristallisation aus 300 ml Äthanol liefert 23,2 g (43 /Q des reinen Produkts vom Schmelzpunkt 94 bis 95°C. GK] ]f* +10,8° (C. 2,5, MeOH). Weiteres Umkristallisieren ändert weder den Schmelzpunkt noch die spezifische Drehung.
C HN
ber.: 69,54 8,02 5,07 % gef.': " 69,58 8,03 5,07 %
1. Y. Saito et al., Tetrahedron Letters, 1970, 4863.
B* Ii-(—) — V -Amino— o6 -hydr oxybutt er säure:
Zu einer Lösung von 1,5 S (0,014 Mol) Natriumcarbonat in 40 ril Wasser werden 5,3 g (0,01 Mol) Dehydroabietylamnioniuin-L—
<X-hydroxy-γ-phthalijnidobutyrat und 60 ml· Äther gegeben.
- 26 409821/1133
Die Mischung wird heftig geschüttelt, bis sich der gesamte
Feststoff gelöst hat. Die Ätherschicht wird abgetrennt. Man wäscht die wäßrige Lösung zweimal mit 20 ml Portionen Äther
und dampft unter vermindertem Druck auf 15 ml ein. Zum Konzentrat
werden 10 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure zugesetzt
und die Mischung wird anschließend 10 Stunden unter Rückfluß gehalten. Nach dem Abkühlen wird ausgefallene Phthalsäure
abfiltriert. Das Piltrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und
die Lösung wird zur Trockne eingedampft. Diese Operation wird zweimal wiederholt, um überschüssige Chlorwasserstoff—
säure zu entfernen. Der zurückgebliebene Sirup" wird in 10 ml Wasser gelöst und filtriert, um eine kleine Menge unlösliche
Phthalsäure zu entfernen. Das Piltrat wird auf einer Säule mit IR-120 (H+, 1 cm χ 35 cm) adsorbiert, die Säule wird mit
$00 ml V/asser gewaschen und mit 1 N Amraoniumhydroxxdlosung
eluiert. Das Eluat wird in 15 ml Fraktionen aufgefangen. Die
ninhyd'rinpositiven Fraktionen 10 bis 16 werden vereinigt und
unter vermindertem Druck eingedampft, wobei ein Sirup erhalten wird, der allmählich kristallisiert. Die Kristalle werden
mit Äthanol verrieben, filtriert und in einem Vakuumexsikkator getrocknet, wobei 0,78 g (66 %) L-(*-)-γ -Amino-oL-hydroxybuttersäure
vom Schmelzpunkt 206 bis 2O7°C erhalten werden. .
-29° (C. 2,5, H2O). Das Infrarotspektrum ist mit dem
einer aus Ambutyrosin.erhaltenen authentischen Probe identisch.
Amberlite IR-120 ist die Handelsbezeichnung für ein hochdichtes Kern-Sulfonsäure-Typ-Kationenaustauscherharz, das
entweder in Wasserstoff- oder Natriumform in Form von Kü—
gelchen mit 16 bis 50 Mesh ( 1,16 mm bis 0,29 mm Maschenweite)
geliefert wird.
• - 27 -
409821/1133
M/12886 235 53 A
Herstellung des Monosulfatsalzes von 1 — [L-(—)-γ hydroxybutyryl]
-gentamicin £*
Ein Hol 1-£l-(-)-γ-Amino-öl-hydroxybutyryl]-gentamicin C^
(IV)'wird in 1 bis 3 Liter Wasser gelöst. Zu der gekühlten
und gerührten Lösung wird ein Mol Schwefelsäure, gelöst in 500 ml V/asser, zugegeben. Die Mischung wird 30 Minuten gerührt,
worauf kaltes Äthanol zur Mischung zugegeben wird, bis ein Niederschlag auftritt. Die Feststoffe v/erden abfiltriert
und als das gewünschte Monosulfat identifiziert.
Beispie]. 7
Herstellung des Disulfatsalzes von 1-|l-(~)—/ -Amino-oC-hydroxybutyryl]-gentamicin
(L·
Ein Hol 1-[ΐ,-(-)-γ -Amino-oL-hydroxybutyry IJ-gentamicin C^a
wird in 1 bis 3 Liter Wasser gelöst. Die Lösung wird filtriert, um ungelöste Feststoffe zu entfernen. Zur gekühlten
und gerührten Lösung werden 2»Mol Schwefelsäure, gelöst
in 100 ml Wasser, zugesetzt. Man rührt die Mischung 30 Minuten
und gibt anschließend kaltes Äthanol zur Mischung zu, bis ein Niederschlag auftritt. Die Feststoffe werden abfil—
triert und als das gewünschte Disulfatsalz identifiziert.
- 28 409821/1133
Claims (1)
- Patentansprüche1.] Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der FormelCH2-NH2.NH-RIVworin R die Bedeutung L-C-)-^-amino-oC-hydroxybutyryl besitzt oder eines pharmazeutisch verträglichen Säureadditionssalzes davon, dadurch gekennzeichnet, daß man in aufeinanderfolgenden Stufen »A. die an dem 6*-Kohlenstoffatom von Gentamicin CL- befindliche Aminogruppe mit einer gebräuchlichen Aminoschutzgruppe Υ blockiert, wobei"-eine Verbindung der Formel .409 821/113 3M/12886CIU-NH-Y■KK2II ·entsteht;B. die an der 1-Position der Verbindung der Formel II be· findliche Aminogruppe mit dem L-(-)-Isomeren eines Acylierungsmittels der FormelOH Ό
I \W-IiH-CH2-CH2-CH-^-COOHworin W eine gebräuchliche Aminoschutzgruppe darstellt, oder mit seinem funktioneilen Äquivalent als Acylierungsmittel für ein primäres Amin-acyliert, wobei eine Verbindung der Formel409821/1133M/12886GH2-KH-YIIIentsteht, worin Y und W die obigen Bedeutungen besitzen; undC-. durch an sich bekannte Methoden die Amino schutz gruppe η W und X entfernt, wobei die Verbindung der Formel IV entsteht und gegebenenfalls anschließend das obige Produkt durch an sich bekannte Methoden in ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz davon überführt.2. Verfahren gemäß Anspruch 1 zur Herstellung von 1—[L-(—)— γ -Amino-cC-hydroxybutyryl]-gentamicin C^ oder eines.nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Saureadditionssalzes davon, dadurch gekennzeichnet, daß man in aufeinanderfolgenden StufenA-. GentamicinC| mit einem Acylierungsmittel, ausgewählt unter4 0 9 8 217113 3M/12886Q O^CH2-O-C-O-CH, 0CH^-C-O-C-N,<rH3CHCH2-O-C-XVc-X , X-CH2-C-XJ-X-CH0-C-OH , (oder einem Carbodiimid davon) oder-CH-CH-CO2H (oder einem Carbodiimid davon),4- 5
worin R und R^ gleich oder verschieden sein können und H, i1, Cl, Br, NO2, OH, Niedrigalkyl oder Niedrigalkoxy, X Chlor, Brom oder Jod bedeuten, oder mit einem funktionellen Äquivalent als Acylierungsmittel in einem Verhältnis von einem Mol oder weniger Acylierungsmittel pro Mol Gentamicin C^ in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur unterhalb 500C acyliert, wobei die Verbindung der Formel409821/1133.M/12886CH2-NH-YIIentsteht, worin Y ein Rest der FormelnO CH-*» ι ·? IlCH2-O-C- , CH5-C-O-C- , O2NIl X-CH2-C-oderIl-CH2-CH2-C-;Zl 5ist, worin R und R die obigen Bedeutun'gen besitzen;B. Verbindung II mit dem L-(-)-Isomeren eines Acylierungs* mittels der Formel-33 -409821/1M/12886OH VZ-NH-CH2-CH2-CH-C-MVIIworin. W ein Rest, ausgewählt unterίΗ3CH2-O-C- ,IlX-CH2-C-oderTO-ο οIl ■ IlC-CH2-CH2-C-;- 4- S
ist, worin E. und Ir die obigen Bedeutungen besitzen undM einen Rest der Formeln-O-N 0■NO» , ·-oder^ ι - 1Mbedeutet, "in einem Verhältnis von mindestens 0,5 KoI Verbindung VII pro Mol Verbindung II in. einem Lösungsmittel acyliert, wobei eine Verbindung der Formel- 34. -409821/1133M/12886CH2-NH-YIIIentsteht, worin Y und W die obigen Bedeutungen besitzen; und-C. die Blockierungsgruppen Y und V/ durch, an sich bekannte Methoden aus der Verbindung III entfernt, wobei die Verbindung der lOrmel IV entsteht und gegebenenfalls anschließend das Produkt durch an sich, bekannte Methoden in ein nichttoxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz davon überführt.;>. Verfahren gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man(1) in Stufe A Gentamicin CL mit einem Acylierungsmittel der FormelH2-O-C-O-409821/1133worin R und R^ die in Anspruch 2 aufgeführten Bedeutungen besitzen, in einem Lösungsmittel ausgewählt unter Dimethylformamid, Dirnethylacetamid, Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2— Dimethoxyäthan, Methanol, Äthanol, Wasser, Aceton, Pyridin, N-Niedrigalkylpiperidin oder Mischungen davon umsetzt, und(2) in Stufe B ein Acylierungsmittel der FormelO OH η'CH2-O-A-NH-CH2-CH2-CH-C-O-N'worin R und Ή? die in Anspruch 2 aufgezeigten Bedeutungen besitzen, mit Verbindung II in einem Verhältnis von etwa 0,5 bis etwa 1,4· Mol Acylierdungsmittel pro Mol Verbindung II in einem Lösungsmittel, ausgewählt unter Mischungen von Was-ser und Äthylenglycoldimethyläther, Dioxan, Dimethylaeetamid, Dimethylformamid, Tetrahydrofuran oder Propylenglycoldimethyläther umsetzt.4·. Verfahren gemäß Anspruch 3» dadurch gekennzeichnet, daß'(1) Stufe A in Dimethylformamid als Lösungsmittel bei einer Temperatur unterhalb 25°.Q durchgeführt wird, und(2) die Acylierungsreaktion von Stufe B in 1:1 Wasser/Äthylenglycoldimethyläther als Lösungsmittel in einem Verhältnis von etwa 0,8 bis 1,1 Mol Acylierungsmittel pro Mol Verbindung II 'durchgeführt wird.5. Verfahren gemäß Ansprüchen 3 oder 4, dadurch gekennzeictmet, daß die Blockierungsgruppen W und Y in Stufe C durch Hydrierung von Verbindung III mit Wasserstoff in Gegenwart eines Metallkatalysators in einem aus Wasser und- 36 409821/1133M/12S86einem pit Wasser mischbaren Losungsmittel "bestehenden Lösungsmittelsystem entfernt werden.6:. Verfahren gemäß·Anspruch 5> dadurch gekennzeichnet, daß die BloelEierungsgruppen W und Y durch Hydrierung von Verbindung III mit Wasserstoff in Gegenwart von Palladium,, Platin, Raney-liieteel f Bhodium?: Buthenium oder Hickel in einem Lösungsmittel system,, ausgewählt UÄter Wasser und Dioxan, tetrahydro— furanr Ithylenglycoldimethylather oder Propylenglycoldimethyläther entfernt werden. -Verbindung der Formelm.worin K die Bedeutung L·-C^)~7ί~9ffl;:i·1:ϊO"-oέ!,-hydroxybutyryl besitzt oder· ein nichttoxisehes^ phariaaaeutisch verträgliches Saureadditionssalz davon« . *8-, las Eonosulfätsalz der Verbindung gemäß Anspruch 7· 9» Das Disiilfaftsalz der Verbindung gemäß Anspruch 7·T/1133M/12886"10. Die Mono- oder Polyhydrate der Verbindung gemäß Anspruch 7.11. Die Mono— oder Polyhydrate der Verbindung gemäß Anspruch 8.12. Die Mono- oder Polyhydrate der Verbindung gemäß Anspruch 9.13. Verbindung der FormelCH2-NH-R1-KH-RHOworin R die Bedeutung CgHrCH2OC- besitzt und R Wasserstoff oder L-(— )-Y-benzyloxycarbonylamino— o(j-hydroxybutyicyl bedeutet.- 38,-409821/1133
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US30374172A | 1972-11-06 | 1972-11-06 |
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---|---|
DE2355348A1 true DE2355348A1 (de) | 1974-05-22 |
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