DE2360946A1

DE2360946A1 - Antibiotische derivate

Info

Publication number: DE2360946A1
Application number: DE2360946A
Authority: DE
Inventors: Takayuki Naito; Susumu Nakagawa; Masahisa Oka
Original assignee: Bristol Myers Co
Current assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1972-12-06
Filing date: 1973-12-06
Publication date: 1974-06-20
Also published as: FR2209546B1; JPS4992044A; GB1456674A; FR2209546A1; JPS5719120B2

Description

PATENTANWÄLTE PROF. DR. DR. J. REITSTÖTTER DR.-ING. WOLFRAM BUNTE DR. KARL. GEORG LÖSCH

D-SOOO MÜNCHEN AO, BAUERSTRASSE 22 · FERNRUF (OBS) 37 68 83 ■ TELEX Q2IS2O8 ISAR D POSTANSCHRIFT:'D-8000 MÜNCHEN 43, POSTFACH 7βΟ

PATENTANMELDUNG

■München, den 6..Dezember 1973 M/12901

BRISTOL-MYERS COMPAIiY, 345 Park Avenue,

New. York, New York 10022/USA

Antibiotische Derivate

Die Erfindung betrifft halb synthe ti sehe, in 1-Stellung substituierte Derivate von Neomycin B oder C, wobei diese Verbindungen durch Acylieren der 1-Amino-Funktion von Neomycin B oder C mit einer γ-Amino-a-hydroxybutyryl-Einheit hergestellt werden.

Die Neomycine sind bekannte Antibiotika und sind im Merck Index, 8th Edition, S. 723-724, beschrieben. Die Verbindungen werden als Komplex fermentiert, woraus Neomycin A, B und C isoliert werden.

- 1 -■ 409825/1123

M/12901

Neomycin B ist eine Verbindung der Formel ' ! ·. ₆i ... -

" -HO

CH₂NH₂

Ia ·■■-·-■

Neomycin C ist eine Verbindung der Formel

HO-^ °h^m2

. HO

- 2 -40 9 825/1123

M/12901

Die Erfindung betrifft somit halbsynthetische Derivate von Neomycin B und G, wobei diese Verbindungen als 1-[!■-(-)-γ-Amino-a-hydroxybutyryl]-neomycin B oder G bezeichnet werden und der Formel -

JH.

NH-R

IV

entsprechen, worin entweder der Substituerit R oder der Sub-

stituent R die Bedeutung -CH^NH₂ besitzen und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet und R die.Bedeutung L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl -besitzt j - oder nicht-toxische, pharmazeutisch verträgliche Säüreadditionssalze davon.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung bedeutet der Begriff "nicht-toxisches, pharmazeutisch verträgliches Säureadditionssalz" ein Mono-, Di-, Tri-, Tetra-, Penta- oder Hexasalz, das durch Reaktion von einem Mol Verbindung IV mit 1 bis 6 Mol einer.nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Säure gebildet wird. Unter diesen Säuren sind zu nennen: Essigsäure, Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Maleinsäure, Phosphorsäure, Salpetersäure, Bromwasserstoffsäure, Ascorbinsäure, Apfelsäure und Zitronensäure jund die anderen Säuren, die im allgemeinen zur Herstellung von SaI-

£09825/1123

M/12901

zen aminenthaltender Pharjnazeutika verwendet werden.

Die erfindimgsgemäßen Verbindungen werden gemäß dem fol- · genden allgemeinen Schema hergestellt:

1) Neomycin B

oder
Neomycin C

2 N-(Benzyloxycarbonyloxy)-

-succinimid

LH

C₆H₅-CH₂-O-C-N-H₂C HO

lic

oder

- 4 409825/ 1 12.3

M/12901

ο·

. CH₂-NH-C-O-CH₂-C₆H₅

HO

2) ,Verbindung

lib oder Hc N- Hydroxy s uc c inimi de s t e r von L-(-)-γ-BenzyloxycarbonyI-amino-cc-hydroxybutters äure .

^098257 1123

23-6Π946

M/12901

CH₂-NH-C-O-CH₂-C₆H₅

O CH,

• 05H₅-CH₂-O-C-IiH IHc

oder

CH₂NH-C-O-CH₂-C₆H₅

NH₂.

C=O

.C₆H₅-CH₂-O-C-NH IHb

40982 5/1123

M/12901

3) Verbindung

IIIb oder IHc H₂/Pd/C

CH₉NH₀

NH-C-CH-CHp-CHp-NH₉

^: 1

: oh .

IVc

oder

NH₂

NH-C-CH-CH₂-CH₂-NH₂ OH . ■

IVb

Λ098 25/ 1 123

M/12901

Bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfin-. dung sind die Verbindungen der Formeln

NH-R

oder . .

NH-R

. Vb

409825/1123

M/12901

3 4 worin beide Substituenten R^ und R Wasserstoff oder

CgHc-CH₂-O-C-, R Wasserstoff,-L-(-)-γ-Amino-a-hydroxybutyryl "oder L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeuten und entwedern die beiden Substituenten

* 4
R·^ und R gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Sub-

—.-. . 34

stituent R Wasserstoff ist, wobei jedoch nicht R , R und R gleichzeitig Wasserstoff sein könnenjoder Säureadditionssalze davon. * .

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform sind die Verbindungen der Formel

MH-R

worin beide Substituenten R und R Wasserstoff oder

C₆H₅-CH₂-O-C-, R Wasserstoff, L-(-)-Y-Amino-<x-hydroxybutyryl oder L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeuten und entweder die beiden Substituenten

3 4

R und R gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Sübstituent R Wasserstoff ist, wobei jedoch nicht R⁵, R und R gleichzeitig Wasserstoff sein können; oder Säureadditionssalze davon.

. - 9 - -■■■'■'

40982

123

Eine bevorzugtere Aus führungsform ist die Verbindung der Formel Vc, worin R 'und R die Bedeutung

C₆H₅-CH₂-O-C-

besitzen und R Wasserstoff bedeutet oder Säureadditionssalze davon.

Eine bevorzugtere Ausführungsform ist die Verbindung der

3 4
Formel Vc, worin R und R die Bedeutung

0
C₆H₅-CH₂-O-C-

besitzen und R L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeutet, oder Säureadditionssalze davon.

Eine besonders bevorzugte Ausführungsform ist die Verbindung der Formel Vc, worin R und R die Bedeutung Wasserstoff besitzenundR L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl bedeutet, oder nicht-toxische pharmazeutisch verträgliche
Salze davon.

Die bevorzugteste Ausführungsform ist die Verbindung der Formel Vc, worin R und R die Bedeutung Wasserstoff besitzenundR ~L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl bedeutet, oder das Mono- oder Disulfatsalz davon.

Weitere bevorzugte"Äusf ührungsformen sind die Verbindungen der Formel . .

- 10 Λ09825/112 3-

Μ/12901 ,

NH-R-

• 5 4 ■worin beide Substituenten R- .und .R Wasserstoff oder >

. . .. Q". . , ■ ■ ■ . ..."..." .,;. CgH₅-CH₂-O-C-, R Wasserstoff, L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl

oder L-C-J-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl be-

'- " ^: ■-■-■" ' " ■ ' -■■---' 3 ■ ■ 4 deuten und entweder die beiden Substituenten R und R gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Substituent R

■54

Wasserstoff ist, wobei Jedoch nicht R ,R und R gleichzeitig Wasserstoff sein können, oder Säureadditionssalze davon. . . -"■■--..·..

Sine bevorzugtere Ausf uhrungsform ist die Verbindung der Formel Vb, worin R^ und R die Bedeutung

0 ■■-..-. ■·■.-:■

C₆H₅-CH₂-O-C-

besitzen und R Wasserstoff bedeutet, oder Säureadditionssalze davon. ^;

Eine bevorzugtere Ausführungsform ist die Verbindung der Formel Vb, worin R"^ und R die Bedeutung ,

It

C₆H₅-CH₂-O-C-

- 11 -

123

Eine besonders bevorzugte Ausführungsform ist die Verbindung der Formel Vb, worin Fr und R die Bedeutung Wasserstoff besitzen und.R. L-(-)-γ-Amino-α-hydroxybutyryl bedeutet, oder nicht-toxische pharmazeutisch verträgliche Salze davon.

Die bevorzugteste Ausführungsform ist die Verbindung der Formel Vb, worin Br und R die Bedeutung Wasserstoff besitzen undR". L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl bedeutet, oder das Mono- oder Disulfatsalz davon.

Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind die Mono- und Polyhydrate der Verbindungen Vb und Vc oder Salze davon.

Weitere bevorzugte Ausführungsformen sind die Hydrochlorid-, Acetat-, Maleat-, Citrat-, Ascorbat-, Nitrat- öder Phosphatsalze der Verbindungen Vb und Vc.

Die Ziele der vorliegenden Erfindung werden durch die erfindungsgemäße Schaffung eines Verfahrens zur Herstellung der Verbindungen der Formel

- 12 -

409825/1123

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h 4

MH-R

erreicht, worin entweder der Substituent R oder der Substituent R die Bedeutung -CH₂NH₂ besitzt und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet und R die Bedeutung L-(-)-y-Amino-a-hydroxybutyryl besitzt; oder nicht-toxischer pharmazeutisch verträglicher Salze davon, dadurch gekennzeichnet, daß man in aufeinanderfolgenden Stufen

A) Neomycin B oder Neomycin C mit einem Acyl ierungsmi ttel ausgewählt unter den Verbindungen der Formeln

CH₂-O-C-X,

CH, 1 -

Il

CH^-C-O-C-N, CH,

N-C-O-C-f

- 13 -

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M/12901

ti

X-CH₂-C-X, X-CH₂-C-OH

(oder einem/Carbodiimid davon) oder (oder einem Carbodiimid davon), ·

-C-CH₂-CH₂-CO₂H

worin R und R', die gleich oder verschieden sein können, jeweils H, F, Cl, Br, NO₂, OH, Niedrigalkyl oder Niedrigalkoxy, X Chlor, Brom oder Jod bedeuten, oder einem funktioneilen Äquivalent als Acylierungsmittel in einem Verhältnis von zwei Mol oder weniger Acylierungsmittel pro Mol Neomycin B oder C in einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt unter Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Tetrahydrofuran, Dioxan, 1,2-Dimethoxyäthan, Methanol, Äthanol, Wasser, Aceton, Pyridin, N-Niedrigalkyl-piperidin, oder Mischungen davon, jedoch vorzugsweise 1:1 Wasser/Tetrahydrofuran bei einer Temperatur Unterhalb 50⁰C und vorzugsweise unterhalb 25⁰C, acyliert, wobei die Verbindungen der Formel

- 14 -

2-5/1123

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2380946

MI

. - ... - - . ■ . .. 1 entstehen, worin entweder der Substituent R oder der

Substituent R² die Bedeutung -CH₂-NH-Y besitzt und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet, worin Y einen Rest der Formeln

.. ■ Τ .

CH₂-O-C- V

GH,

⁵ !

₅ CH,

0'

O₂N

Ii

■ ., X-CH₂-C- , oder

0 0

I Il

C-CH₂-CH₂-C-;

- 15 -

409825/

M/12901

6 7

worin R und Ft/ die obigen Bedeutungen besitzen, darstellt,

B) Verbindung II mit einem Acylierungsmittel der Formel

OH 0

I I!

W-NH-CH₂-CH₂-CH-C-M (VIl)

worin ¥ ein Rest ist, ausgewählt unter

R¹

• ^; H

CH₂-O-C- ,

CHv-C-O-C-

CH,

¹¹ O₂H-

. X-CH₂-C- _Ä oder

P 0

Ii ■·. Il

C-CH₂-CH₂-C-S

Jedoch vorzugsweise
«β

R'

0 CH₂-O-C-

M ein Rest ist, ausgewählt unter

-0-N
0

■Να

- 16 -

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M/12901

Al·

XJ

» jedoch vorzugsweise -0-N

^kN·

6 y
worin R und R die obigen Bedeutungen besitzen, in einem Verhältnis von mindestens 0,5 Mol Verbindung VIT pro Mol Verbindlang II, jedoch bevorzugt in einem Verhältnis von etwa 0,5 bis etwa 1,4 und besonders bevorzugt in einem Verhältnis von etwa 0,8 bis etwa 1,1 in einem Lösungsmittel, vorzugsweise ausgewählt unter Mischung von Wasser und Äthylenglykol-dimethyläther, Dioxan, Dirnethylacetamid, Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Propylenglykol-dimethyläther oder dergleichen, jedoch vorzugsweise 1:1 Wasser/Tetrahydrofuran, acyliert, wobei Verbindungen der Formel

,NH-Y

NH₂

III

- 17 -

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M/12901 ^

entstehen, worin entweder der Substituent R oder der Substituent R die Bedeutung -CH₂-NH-Y besitzen und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet und Y und ¥ die obigen Bedeutungen besitzen und

C) die Blockierungsgruppen ¥ und Y aus Verbindung III durch an sich bekannte Methoden entfernt, und wenn ¥ und Y Reste der Formel -

■ ο

CH₂-O-C-

darstellen, bevorzugt durch Hydrieren der Verbindung III mit ¥asserstoff in Gegenwart eines Metallkatalysators, vorzugsweise ausgewählt unter Palladium, Platin, Raney-Nickel, Rhodium, Ruthenium und Nickel, jedoch bevorzugt Palladium und besonders bevorzugt Palladium-auf-Aktivkohle^ in einem aus ¥asser und einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel bestehenden Lösungsmittelsystem, vorzugsweise ausgewählt unter Wasser und Dioxan, Tetrahydrofuran, Äthylenglykol-dimethyläther, Propylenglykol-dimethyläther oder dergleichen, jedoch bevorzugt 1:1 Wasser/Tetrahydrofuran, wobei die Verbindungen der Formel V ent- -stehen.

Es ist für den Fachmann offensichtlich, daß man in dem obigen Verfahren zur Acylierung der Aminfunktionen der erfindungsgemäßen Zwischenverbindungen andere Mittel verwenden kann. Diese Veröffentlichung schließt alle solchenAcylierungsmittel ein, die zu labilen amino-blockierenden Gruppen führen, wobei diese labilen Blockierungsgruppen allgemein bei der Synthese von Peptiden eingesetzt werden. Die labilen Blockierungsgruppen müssen durch an sich bekannte Methoden

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leicht entfernbar sein. Beispiele für solche labilen Blockierungsgruppen und ihre Entfernung sind in der Übersicht von A.Kapoor, J. Pharm. Sciences59, Seiten 1-27 (1970) zu finden. Funktionelle Äquivalente als Acylierungsmittel für primäre Aminogruppen schließen entsprechende Säurechlor!de, -bromide, Säureanhydride, einschließlich gemischter Anhydride^und insbesondere die aus stärkeren Säuren, wie der niedrigaliphatischen Monoester der Kohlensäure, der Alkyl- und Arylsulfonsäuren und die der sterisch gehinderteren Säuren, wie Diphenylessigsäure, hergestellten, gemischten Anhydride ein. Ausserdem kann ein Säureazid oder ein aktiver Ester oder Thioester.(beispielsweise, mit p-Nitrophenol, 2,4-Dinitrophenolj Thiophenol, Thioessigsäure) verwendet werden oder die freie Säure selbst kann mit dem_; Neomycinderivat.(II) nach zuerst erfolgter Reaktion dieser freien Säure mit NjN'-Dimethylchlorforminium-chlorid [GB-PS 1 008 170 und Novak und Weichet, Exrperientia XXl/6, 360 (1965)] gekuppelt werden, oder unter Verwendung von Enzymen oder eines N,N^!-Carbonyldiimidazols oder eines Ν,Ν'-Carbonylditriazols [sheehan und Hess, J. Amer.Chem.Soc.,77, 1067 (1955)] oder eines AlkenylamineReagenzes(R.Buioile und H.G.Viehe, Angew.Chem., International Edition 3, 582 (1964)) oder eines Ketenimin-Reagenzes-[CL. Stevens und M,E.Monk, J.Amer.Chem.Soc. 80, 4065 (1958)] oder eines Isoxazoliumsalz-Reagenzes [R.B. lioodward, R.A.Ölofson und H.Mayer,' j.Amer.Chem.Soc, 83, 1010 (1961)]. Ein weiteres Äquivalent des Säurechlorids ist ein korrespondierendes Azolid, d.h. ein Amid der entsprechenden Säure, deren Amidstickstoff das Glied eines quasi-aromatischen 5-Rings ist, der mindestens zwei Stickstoffatome enthält, d.h. Imidazol, Pyrazol, die Triazole, Benzimidazole, Benzotriazole und ihre substituierten Derivate. Als Beispiel für die allgemeine Methode zur Herstellung eines Azolids wird Ν,Ν'-Cafbonyldiimidazol mit einer Carbonsäure in äquimolareh Verhältnissen bei Raumtemperatur in Tetrahydr.ofuran, Chloroform,

- 19 - -■"..

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methylformamid oder einem ähnlichen inerten Lösungsmittel umgesetzt, v/obei unter Freisetzung von Kohlendioxyd und einem Mol Imidazol das Carbonsäureimidazolid in praktisch quantitativer Ausbeute anfällt. Dicarbonsäuren liefern. Diimidazolide. Das Nebenprodukt Imidazol fällt aus und kann abgetrennt werden und das Imidazolid kann isoliert werden, jedoch ist- dies nicht wesentlich. Diese Reaktionen sind aus dem Stand der Technik wohl bekannt (US-PSen 3 079 315, 3 117 126 und 3 129 224 sowie die GB-PSen 932 644, 957 570 und 959 054).

Die Verbindungen IVb und IVc, l-[L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyrylj-neomycin B (BB-K77) und 1-[]>(-)-γ-Amino-ahydroxybutyryl !-neomycin C (BB-K88) besitzen eine ausgezeichnete antibakterielle Aktivität gegen ein weites Spektrum von Mikroorganismen, die mit ihren zugrundeliegenden Verbindungen, Neomycin B und C vergleichbar oder' diesen gar überlegen sind. Tabelle I zeigt den Vergleich ihrer antibiotisehen Aktivität.

- 20 -

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TABELLE I

Antimikrobielle in vitro Aktivitäten von L-HABA-Derivaten von Neomycin B und C

Minimale Hemmkonzenträtion BB-K77 Neomycin BB-K88 Neomycin (MIC) (γ/ml) B C

E. coil NIHJ

Juhl

A15119

A15169

KM-R* A2O363

A9844

KM-R* A20365

K-12

A9632

π

KM-R* A2O664

" " KM-R* A2O665

" W677

A2O684

JR/W677
A2O683

K. pneumoniae D-Il Typ 22

A2O68O

Ser. marcescens 6,3 3,1 6,3 3,1

A2OO19

Ps. aeruginosa D-15 3,1 25 12,5 50 " H9 D-II3 KM-R* >100 »100 750 >50

¹¹ 12,5 100 50 >50

A9923

1,6 1,6 3,1 50 A993O .

" - 100 100 >50 >50

AI515O

- 21 - _■■·■
409825/1123.

3,1	1,6	6,3	3,1
3,1	1,6	6,3	3,1
3,1	1,6	6,3	3,1
3,1	. 100	' 12,5	>50
5.1	1,6	6,3	3,1
0,8	12,5	1,6	>50
1,6		■ 5.1-.	3,1
1,6	0,8	12,5	6,3
1,6	25	3,1 '	>50
1,6	0,8	6,3	3,1
50	100	>50	>50
0,4	0,4	0,8	0,4
100	100	>50	>50

TABELLE I (Fortsetzung)

Minimale Hemmkonzentration BB-K77 Neomycin BB-K88 Neomycin (MIC) (γ/ml) B C

Ps.	aeruginosa A15194	GM-R** A2O717	A99OO	Mycob. 607	ti	KM-R* A20239	12,5	100	25	>50
Il		GM-R** · A2O718	A9553	It	Il		50	100	50	>50
ti		NM-R****	A2OO31	ti	phlei	KM-R*.	100	100	50	*50 .
It	H6 D-114	A9436	aureus Smith AI5167	It	ranae	12,5	100	12,5	>50
Pr.	vulgaris	A9526	2O9P SM-R***	H	1,6	0,8	3,1	3,1
Il		mirabilis A9554		1,6	0,4	3,1	3,1
Pr.		3,1	3,1	12,5	6,3
Il	morganii	3,1	Ζ 1,6	12,5	3,1
Pr.		■ 3,1	1,6	6,3	3,1
Il	6,3	1,6	12,5	6,3
S.	0,8	0,2	0,8	0,8
Il	3,1	1,6	12,5	• 3,1
Il	3,1	50	12,5	>50
1,6	0,8	1,6	3,1
>100	>100	>50	>50
KM, SM-R***>1OO	>100	>50	»50
	0,4	0,8	1,6
	"0,8	1,6	3,1
0,4
0,8

KM-R* ist ein kanamycin-A-resistenter Organismus GM-R** ist ein geiitamicin-resistenter Organismus

SM-R*** ist ein streptomycin-resistenter Organismus NM-R**** ist ein neo'mycin-resistenter Organismus L-HABA bedeutet L-Hydroxyaminöbuttersäure.

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Die Verbindungen IV sind -wertvoll als ahtibäkterielle Mittel, als Beifüttermittel bei Tierfutter» als therapeutische Mittel bei Geflügel und bei Tieren sowie dem Menschen und sind insbesondere wertvoll bei der Behandlung infektiöser Erkrankungen, die durch gram-positive und gram-negative Bakterien verursacht sind.

Bei oraler Verabreichung sind die Verbindungen IV brauchbar als Zusatzbehandlung zur präoperativen Sterilisation des Darms. Sowohl die aerobe als auch die anaerobe Flora, die gegenüber diesen Mitteln empfindlich sind, werden im Dickdarm reduziert. In Verbindung mit angemessener mechanischer Reinigung sind sie brauchbar bei der Vorbereitung von Darmoperationen. . ·

Die Verbindungen IV sind bei der Behandlung systemischer bakterieller Infektionen bei einer parenteralen Verabreichung im Dosierungsbereich von etwa 250 mg bis etwa 3000 mg pro Tag in aufgeteilten Dosen drei- oder viermal täglich wirksam. Im allgemeinen sind die Verbindungen wirksam, wenn man sie in einer Dosierung von etwa 5*0 bis 7,5 mg/kg Körpergewicht alle 12 Std. verabreicht. ·

Neomycin B und C besitzen beide sechs Aminoeinheiten, die beim Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen acyliert werden können. Insofern ist es_ nichtjxa.-_ gewöhnlich, andere Neomycin B- und C-Derivate als BB-K77 und BB-K88 durch das Herstellungsverfahren zu erhalten (Beispiele 4 und 6). - . - .

Herstellung von Neomycin B undC :

Die Neomycine B und C werden durch Säulenchromatograpnie des rohen Neomycin-Komplexes unter Verwendung von Dowex 1-X2 ge-

:■ - 23 - ·

409825/1123 ' "

maß dem Verfahren von H.Maeher und C.P.Schaffner, Anal.Chem., 36,105 (1964) isoliert.

Dowex 1-X2 ist ein Harz, das aus einem Polystyrol-"backbone'j an das Benzyltrimethylammoniumchlorid und 2 % zugesetztes Divinylbenzol als Vernetzungsmittel während der Polymerisation des Polystyrols angeknüpft sind, besteht. Es wird in Form von Kügelchen geliefert.

Beispiel 1

Herstellung von L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybuttersäure. (Vl)

7,4 g (0,062 Mol) L-(-)-y-Amino-a-hydroxybuttersäure werden zu einer Lösung von 5,2 g (0,13 Mol) Natriumhydroxyd in 50 ml Wasser zugegeben. Zu der gerührten Lösung werden bei 0 bis 5⁰C im Verlauf von 0,5 Std. tropfenweise' 11,7 g (0,068 Mol) Carbobenzoxychlorid zugegeben und die Mischung wird bei derselben Temperatur noch 1 Std. gerührt. Die Reaktionsmischung wird mit 50 ml Äther gewaschen, mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 eingestellt und mit vier 80 ml-Portionen Äther extrahiert. Die Ätherextrakte werden vereinigt, mit einer kleinen Menge gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wird im Vakuum eingedampft und der erhaltene Rückstand wird aus Benzol kristallisiert, wobei 11,6 g (74 %) farbloser Platten vom Schmelzpunkt 78,5 bis 79,5⁰C erhalten werden. [a]_D = -4,5° (c = 2, CH₃OH).

Infrarot-Spektroskopie (IR) [KBr]: IR(KBr)^ c=o 1740, 1690 cm~¹

Kernmagnetische Resonanz (NMR) (Aceton-dg) cf(in ppm von TMS) 2,0 (2H, m), 3,29 (2H, d-d, J=6,7 und 12 Hz), 4,16 (1H, d-d,

- 24 -409825/11.23'

J=4,5 und 8 Hz), 4,99 (2H, s), 6,2 (2H, breit), 7,21 (5H,s).

Analyse C^₂H₁cNOc: ·

CHN

ber.: ■ 56,91 5,97 \ 5,53 % . ' gef.: 56,66 5,97 5,47%

Beispiel 2.·

N-Hydroxysuccinimidester von L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylaminoa-hydroxybuttersäure (VII)

Eine Lösung von 10,6 g (0,042 Mol) Verbindung VI und 4,8 g (0,042 Mol) N-Hydroxysuccinimid (G.W. Anderson et al.j J. Am.Chem.Soc, 86, 1839 (1964)) in 200 ml Äthylacetat wird "auf O⁰C gekühlt und anschließend gibt man 8,6 g (0,042 Mol) Dicycohexylcarbodiimid zu. Man läßt die Mi-' schung über Nacht in einem Kühlschrank stehen. Der ausgefallene Dicyclonexylharnstoff wird abfiltriert und das Filtrat wird unter vermindertem Druck auf etwa 50 ml konzentriert, wobei farblose Kristalle von Verbindung VII entstehen, die abfiltriert werden; 6,4 g, Schmelzpunkt 121 bis 122,5⁰C. Das Filtrat wird im Vakuum zur Trockene eingedampft und der kristalline Rückstand wird mit 20 ml einer Benzol-/ n-Hexan-Mischung gewaschen, wobei zusätzliche Verbindung VII gewonnen wird. Die Gesamtausbeute beträgt 13,4g (92 %), [a]_D 1,5° (c=2, CHCl₃)

IR(KBr) "ί c=o 1810, 1755, 1740, 1680 cm"¹,

Ni-IR (Aceton-dg) cf(in ppm von TMS) 2,0 (2H,m), 2,83 (4H, s), 3,37 (2H, d-d, J=6,5 und 12,5 Hz), 4,56(1H> m), 4,99 (2H, s), 6,3 (IH, breit), 7,23 (5H, s). . -

Analyse C^gH₁3N₂O₇:

C-H N

ber.: 54,85 5,18 8,00%

gef.: 54,79 5,21 8,14 %

54,70 5,20 8,12 %

- 25 -

409825/1123 '■ . . .

Beispiel

Herstellung von 6',6"'-Dibenzyloxycarbonylneomycin B (lib)

Zu einer gerührten Lösung von 4,0 g (6,5 mMol) Neomycin B-in 200 ml 50 tigern wäßrigem Tetrahydrofuran (THF) werden 2,74 g (11 mMol) N-Benzyloxycarbonyloxysuccinimid bei 5 bis 10⁰C zugegeben. Die Reaktionsmischung wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und im Vakuum eingedampft, um das organische Lösungsmittel zu entfernen. Die wäßrige Lösung wird mit 100 ml Wasser verdünnt, mit zwei 50 ml-Portionen n-Bu0H gewaschen und mit 10 ml CG-50 (NH^-Form) 2 Std. gerührt. Das Harz wird abfiltriert, mit entionisiertem Wasser gewaschen und auf eine Säule CG-50 Ionenaustauscher Form, 80 ml) aufgegeben, die nacheinander mit 0,05n NH₄OH, 0,1n NH₄OH, 0,2n NH₄OH und 0,3n NH₄OH. eluiert wird. Das Eluat wird in 20 ml-Fraktionen gesammelt und mit dem Ninhydrintest und Dünnschichtchromatographie (TLC) auf SiIikagelplatte (Lösungsmittelsystem: MeOAc-n-PrOH-konzentriertes NH₄OH=45:1O5:6O) überwacht. Die Fraktionen 125 bis 136^ die einen Ninhydrin-Spot mit einem Rf-Wert 0,49 zeigen, werden vereinigt, im Vakuum konzentriert und gefriergetrocknet, wobei 550 mg (10 %) des gewünschten Produkts erhalten werden. Schmelzpunkt= I56 bis 158⁰C.

Infrarotspektrum IR (KBr.) 3360, I700, 1530 cm"¹;

Kernmagnetische Resonanzspektren (NMR) (DMSO-dg + DpO) 4,70-(m, 1H), 4,97 (s, 4H), 5,05 (m, 2H), 7,22 (s, 1o"_hL";

- 26 -

409825/1123

Beispiel 4

Herstellung von l-[L-(-)-Y-Amino»a-hydroxy'butyryl]-neomycin B

Zu einer gerührten Lösung von 500 mg (0,566 mMol) 6.» ,6"'-DibenzyloxycarbonylneOmycin B in 20 ml 50 %igem wäßrigem Tetrahydrofuran werden in einer Portion 180 mg (0,566 mMol) N-Hydroxysuccinimidester von L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybuttersäure zugegeben. Die Reaktionsmischung wird über, Nachtbei Raumtemperatur gerührt und mit 1 g 10 % Palladium-auf-Aktivkonle 3 Std. bei 5,52 kg/cm² (50 ρsi) hydriert. Nach Entfernung des Katalysators wird das Eiltrat im Vakuum konzentriert, um das organische Lösungsmittel zu entfernen und das Konzentrat wird mit 1 ml CG-50 Ionenaustauscherharz (NH^. -Form) 20 Min. behandelt. Das Harz wird filtriert, mit Wasser gewaschen und auf eine CG-50 Säule (NHr ⁺ , .15 ml) aufgegeben. Die Säule wird nacheinander mit jeweils 500 ml 0,1n, 0,3n, 0,4n und 0,5n NH^OH-eluiert. Das Eluat wird in 10 ml-Fraktionen gesammelt und auf der Grundlage des Ninhydrintests, Scheibentests und Dünnschichtchromatographie auf Silikagelplatte (Lösungsmittelsystem: CHC1,-MeOH-konzentriertes IiH₄OH-H₂O = 1:4:2:1) in die folgenden Schnitte zerlegt. Jeder Schnitt wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand wird lyophiiisiert.

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'409825/1123

M/12901

Schnitt Fraktion Eluiert mit Gew. isoliert Verbindung

Nr.

1 130-135 . 0,4n NH₄OH

2 191-205 0,5n NH₂₁OH

3 223-232 0,5n NH₄OH

4 240-260 0,5n NH₄OH

20 mg	Neomycin B
15	BB-K77
■ 11	BB-K78 ^:
16	BB-K79

Code Nr. Fp. (Zers.) Rf* γο=ο (KBr)

BB-K77	181 - l84°C	,19	1640 cm"¹
BB-K78	23Ο	,19	I63Ö .
BB-K79	222	,19	1620

*TLC: Silikagel-Platte, CHCl₃-Me OH-28 %■NH₄OH-H₂O (1:4:2:1)

Die Fraktion BB-K77 wird als l-[L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl]-neomycin B, das gewünschte Produkt (IVb) identifiziert.

- 28 -

409826/1123

Beispiel Herstellung von 6',6"'-Dibenzyloxycarbonylneomycin C (lic)

Zu einer gerührten Lösung von 3,7 g (6·,03 mMol) Neomycin C in 100 ml 50 %igem wäßrigem Tetrahydrofuran werden 2,9 g (12 mMol) N-Benzyloxycarbonyloxysuceinimid bei 5 bis 10⁰C zugegeben. Die Reaktionsmischung wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und im Vakuum eingedampft, um das organische Lösungsmittel zu entfernen. Die wäßrige Lösung wird mit 100 ml Wasser, verdünnt und mit zwei 50 ml-Portionen n-rBuOH gewaschen und mit 7 ml CG-50 (NHr⁺-Form) 2 Std. behandelt. Das Harz wird abfiltriert, ■ mit entionisiertem Wasser gewaschen und auf eine CG-50 Säule (NH^-Form, 80 ml) aufgegeben, die nacheinander mit Jeweils 500ml 0,1η und 0,2n ΝΗλΟΗ eluiert wird. Das Eluat wird' in 10 ml-Fraktionen ge-~ sammeljfc und durch den Ninhydrin-Test und Dünnschichtchromatographieauf Silikagel-Platte (Lösungsmittelsystem: MeOAc-n-PrOH-28 % NH₄OH = 45:105:60) überwacht. Die Fraktionen 74 bis 79i die einen Ninhydrin-Spot bei Rf 0,49 zeigen, werden vereinigt, im Vakuum konzentriert und lyophilisiert, wobei 210 mg (4 %) des gewünschten Produkts erhalten werden. Schmelzpunkt = 141 bis 145⁰C. IR (KBr) 3350, I705, 1450 cm"¹. . . ;

Beispiel 6

Herstellung von l-[L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl!-neomycin C (IVc) ·

Zu einer gerührten Lösung von 200 mg (0,22 mMol) 6^f,6"^!-Dibenzyloxycarbonylneomycin C in 20 ml 50 %igem wäßrigem Tetrahydrofuran werden 77 mg (0,22 mMol)·N-Hydroxysuccinimidester von L-(-)-Y-Amino-a-hydrc)xybuttersäure zugegeben.

- 29 -409825/1123

M/12901 ' 3D

Die Reaktionsmischung wird über Nacht_; gerührt, mit 100 mg 10 % Palladium-auf-Aktivkohle 6 Std. bei Atmosphärendruck hydriert und filtriert. Das Piltrat wird im Vakuum konzentriert, um das organische Lösungsmittel zu entfernen und die erhaltene wäßrige Lösung wird mit 1 ml CG-50 (NH^-Form) behandelt. Das Harz wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und auf eine CG-50 Säule (NH^-Form, 4 ml) aufgegeben. Die Säule wird nacheinander mit 200 ml 0,1 η NH^OH und 300 ml 0*3n NHaOH eluiert. Das Eluat wird in 5 ml-Fraktionen gesammelt und durch Dünnschichtchromatographie auf Silikagel-Platte und Scheibentest (Testorganismus: E.coli Α2Ό665) überwacht. Die Fraktionen 58 bis 60 (ein Ninhydrin-Spot bei Rf 0,37) werden vereinigt, im Vakuum eingedampft und lyophilisiert, wobei 7 mg Neomycin C erhalten werden. Die Fraktionen 86 bis 89 (ein Ninhydrin-Spot bei Rf 0,15) ergeben 2 mg des gewünschten Produkts, BB-K88,vom Schmelzpunkt 190 bis 191°C (Zers.). - - IR (KBr) 3450, I6I7, 1580, 1015 cm"¹.

Amberlite CG-50 ist die Handelsbezeichnung für die chromatographische Qualität eines schwach-sauren Kationenaustauscherharzes eines Carbonsäure-Polymethacrylsäuretyps.

Beispiel 7 Herstellung von N-(Benzyloxycarbonyloxy)-succinlmid

23 g (0,2 Mol) N-Hydroxysuccinimid (G.W. Anderson et al., J. Am. Chem. Soc, 86, 1839 (1964)) werden in einer Lösung von 9 g (0,22 Mol) Natriumhydroxydin 200 ml Wasser gelöst. Man gibt zur gerührten Lösung tropfenweise 34 g (0,2 Mol) Carbobenzoxychlorid unter Wasserkühlung zu und rührt dann die Mischung^" bei Raumtemperatur über Nacht, wobei sich das

409825/1123

Carbobehzoxyderivat "abscheidet und abfiltriert, mit Wasser gewaschen und an'der Luft getrocknet -wird.- Ausbeute 41,1 g (82 %)....Umkristallisation aus Benzol/n-Hexan (10:1) ergibt farblose Prismen mit Schmelzpunkt 78 bis 79⁰Cv

B e i s ρ ie 1 8 -. -^

Herstellung von L-'(-)'rY-Amino-a-hydroxybuttersäure aus Ambutyrosin A oder B oder Mischungen davon

5,0 g Ambutyrosin A [U.S.-Patentschrift 3 541 078] werden mit 160. ml 0,5h'Nätriumhydroxyd 1 Std. unter Rückfluß gehalten. Das Hydrolysat wird mit 6n HCl neutralisiert und auf einer Säule CG-50 (NH^⁺-TyP) chromatographiert. Die gewünschte L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybuttersäurev7ird isoliert, indem man die Säule mit Wasser entwickelt und das Wasser . durch Gefriertrocknung entfernt. Die L-(-)-Y-Amino-ahydroxybuttersäure v;ird als kristallines Material mit Schmelzpunkt 212,5 bis 214,5°C [Spalte 2, Zeilen 31-38, US-PS 3 541 078] charakterisiert*

Be i s ρ i e 1

Herstellung von L-(-)-Y-Aminö-a-hydroxybuttersäure aus DL-a-Hydroxy-Y-phthalimidobuttersäure

A) Dehydroabietylammonium-L-a-hydroxy-Y-phthalimidobutyrat: ■ ■ V^s -.

Zu einer Lösung von.25 g (0,1 Mol) 2-Hydroxy-Y-phthalimidobuttersäure (Y.Saito et al., Tetrahedron Letters, 1970, 4863) in 200 ml Äthanol wird eine.Lösung von 29 g (0,1 Mol) Dehydroabietylamin in 130 ml Äthanol zügegeben. Die Lösung wird heftig 1 Min. geschüttelt und 5 Std.

> 31 A09825/1 123

M/12901

bei Raumtemperatur stehengelassen, wobei feine Nadeln auskristallisieren. Die Kristalle werden abfiltriert, mit 50 ml Äthanol gewaschen und an der Luft getrocknet, wobei 30,1 g (56 %) eines Diastereomeren des Dehydroabietylaminsalzes·vom Schmelzpunkt 93 bis 94⁰C erhalten werden.

[a]ß⁴ +15° (C 2,5, MeOH).

Umkristallisation aus 300 ml Äthanol ergibt" 23,2 g (43 %) des reinen Produkts. Schmelzpunkt = 94 bis 95°C [a]^⁴ +10,8° (C. 2,5, MeOH).

Weitere Umkristallisation ändert weder den Schmelzpunkt noch die spezifische Drehung.

Analyse C,2^H^2^N2°5*^H2^0:

C H N

ber.: 69,54 8,02 5,07 % gef.: 69,58 8,08 5,07 %

B) L-(-)-y-Amino-a-hydroxybuttersäure:

Zu einer Lösung von 1,5 g (0,014 Mol) Natriumcarbonat in 40 ml Wasser v/erden 5,3 g (0,01 Mol) Dehydroabietylammonium-L-a-hydroxy-Y-phthalimidobutyrat und 60 ml Äther zugegeben. Die Mischung wird heftig geschüttelt, bis alle Feststoffe gelöst sind. Die Ätherschicht wird abgetrennt. Die wäßrige Lösung wird zweimal mit 20 ml-Portionen Äther gewaschen und unter vermindertem Druck auf 15 ml eingedampft. Zum Konzentrat werden 10 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure zugegeben und die Mischung wird 10 Std. unter Rückfluß gehalten. Nach dem Abkühlen wird.abgeschiedenePhthalsäure abfiltriert* Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und die Lösung wird zur Trockene eingedampft..Diese Operation wird

- 32 -

409825/1123

zweimal wiederholt, um überschüssige Chlorwasserstoffsaure zu entfernen. Der zurückgebliebene Sirup wird in 10 ml Wasser gelöst und filtriert, um eine kleine Menge unlösliche Phthalsäure zu entfernen. Das Filtrat wird auf einer Säule mit IR-I20 (H⁺, 1 cm χ 35 cm) adsorbiert, die Säule wird mit 300 ml Wasser gewaschen und mit ·1η Ammoniumhydroxydlösung eluiert. Das Eluat wird in 15 ml-Fraktionen gesammelt. Die n'inhydrinpositiven Fraktionen 10 bis 16 werden vereinigt und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei ein Sirup erhalten wird, der. allmählich kristallisiert". Die Kristalle werden mit Äthanol verrieben, filtriert und in einem Vakuum-Exsikkator getrocknet, wobei 0,78 g (66 5$ L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybuttersäure. vom Schmelzpunkt 206 bis 207°C erhalten werden.

[a]^⁴ -29° (C. 2,5, H₂O).

Das IR-Spektrum ist identisch mit dem einer authentischen Probe, die aus Ambutyrosin erhalten wurde.

Beispiel 10 ,

Herstellung des Monosulfatsalzes von l-[L-(-)-Y-Amino-ahydroxybutyryl]-neomycin B oder C . -

Ein Mol 1- [L- (-)-γ-Amino-α-hydroxybutyryl ]-neomycin B oder C wird in 1 bis 3 Ltr. Wasser gelöst. Die Lösung wird filtriert, um ungelöste Feststoffe zu entfernen. Man gibt zu der gekühlten und gerührten Lösung 1 Mol Schwefelsäure, gelöst in 500 ml Wasser zu. Die Mischung wird 30 Min. gerührt, worauf man kaltes Äthanol zu der Mischung zusetzt, bis ein Niederschlag auftritt. Die Feststoffe werden abfiltriert und als das gewünschte Monosulsulfatsalz bestimmt.

40 9825/1123

Beispiel 11

Herstellung des Disulfatsalzes von l-[L-(-)-Y-Amino-ahydroxybutyrylj-neomycin B oder C

Ein Mol l-[L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl]-neomycin B oder C wird in 1 bis 3 Ltr. Wasser gelöst. Die Lösung wird filtriert, um ungelöste Feststoffe zu entfernen. Man gibt zur gekühlten und gerührten Lösung 2 Mol Schwefelsäure, gelöst in 100 ml Wasser, zu. Die Mischung wird 30 Min. gerührt,worauf man kaltes Äthanol zu der Mischung zugibt, bis ein Niederschlag auftritt. Die Feststoffe werden abfiltriert und als das gewünschte Disulfatsalz bestimmt.

- 34 409825/1123

Claims

M/12901

P A T ENTAN S P R Ü C HE

i. Verbindungen der Formeln

NH₂"

NH-R

■ '-■■■'. Vc

oder

409825/1123

M/12901

HH-R

CH₂NH-R

3 4

worin beide Substituenten R und R Wasserstoff oder • 0

!I

CgHc-CI^-O-C-, R Wasserstoff, L-.(-) -γ-Amino-a-hydroxybutyryl oder L- ( - )-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeuten und entweder die'beiden Substituenten

3 4
R^ und R gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Substituent R Wasserstoff ist, wobei jedoch nicht R , R und R gleichzeitig Wasserstoff sein können; oder Säureadditionssalze davon.
2. Verbindungen gemäß Anspruch 1 der Formel

- 36 -

409825/1123

M/12901

UH-R

Vc .

worin beide Substituenten R und R Wasserstoff oder

O .

CgH₅-CH₂-O-C-, ^R Wasserstoff, L-(-)-Y-AminQ-a-hydroxybutyryl oder L-C-J-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeuten und entweder die beiden Substituenten R und R -gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Substituent R Wasserstoff ist, wobei jedoch.nicht R , R und R gleichzeitig Wasserstoff sein können; oder Säureadditionssalze davon»

Verbindung gemäß Anspruch 2, worin R^ Und R die Bedeutung

C₆H₅-CH₂-O-C-

besitzen und R Wasserstoff bedeutet; oder Säureadditionssalze davon.

Verbindung gemäß Anspruch 2, worin R und R die Bedeutung -

.; ■ 0 . C₆H₅-CH₂-O-C-

- 37 -

409825/1123

M/12901 . 3?

besitzen und R die Bedeutung-L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl besitzt, oder Säureadditionssalze davon.

5. Verbindung gemäß Anspruch 2, worin B? und R^ die Bedeutung Wasserstoff besitzen,und_:R die Bedeutung ['_'_ L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl besitzt, oder nichttoxische pharmazeutisch verträgliche Salze davon.

6. Das Mono sulfats al ζ der Verbindung gemäß Anspruch 5;

7. Das Disulfatsalz der Verbindung gemäß Anspruch ·$.

8. Verbindungen gemäß Anspruch 1 der Formel

IiH-R

worin beide Substituenten R^ und R Wasserstoff oder

CgH^-CH₂-O-C-, R Wasserstoff, L-(-)-Y-Amino-a-hydroxybutyryl oder L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl bedeuten und entweder die beiden Substituenten

- 38 -

40 98 2 5 / 1 12 3

R^ und R gleichzeitig Wasserstoff bedeuten oder der Substituent R Wasserstoff ist, wobei jedoch nicht Rr, R und R gleichzeitig Wasserstoff sein können; oder Säureadditionssalze davon.

3 4 9. Verbindung gemäß Anspruch- 8, worin Rr und R die Bedeutung

Il

CgH₅-CH₂-O-C-

• besitzen und R Wasserstoff bedeutet; oder Säureadditionssaize davon._: . ,.· ^l · < -^; " '

10. Verbindung gemäß. Anspruch 8* worin R und R die Bedeutung

= 0
CgH₅-CH₂-O-C-.

besitzen und R die Bedeutung L-(-)-Y-Benzyloxycarbonylamino-a-hydroxybutyryl besitzt, oder Säureadditionssalze davon.

11. Verbindung gemäß-Anspruch 8, worin R und R die Bedeutung Wasserstoff besitzen und R die Bedeutung L-(-)-Y-Aminoa-hydroxybutyryl besitzt, oder nicht-toxische pharmazeutisch verträgliche Salze davon.

12. Das Monosulfatsalz der'Verbindung gemäß Anspruch 11.

13. Das Disulfatsalz der Verbindung gemäß Anspruch 11.

14. -Die Mono- und Polyhydrate der-Verbindungen gemäß Anspruch 5.

15. Die Mono- und Polyhydrate der „Verbindungen gemäß Anspruch 6. '

- 39 - ... 409825/1123

if/12901 ■'

16· Mf Mono- und I^lyhydr^te.der VerbindiMgeh gemäß Spruch_; ■£.,,;. ... , ·-.■..--.-.

17. IMe Mono- und Solyhydrateder Verbindungen geraaB An 1-1. - .-' '.-'-''

18* Bie Mono-' und" Pölyi^rdrate' der VerMndimgen-'gemäß An sprucli ,12.

# Me. Eiöiio·- ■ und; Pölyiiydrate der Ver"bindimgen gemäß- i eh 13. ' _:. ·.

20. Verfahren zur Herstellung-von Verbindungen der Formel

KH-R

■worin" entweder derSubstituent R oder der Substituent R die Bedeutung -CH2N% besitzen und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet und E die'Bedeutung 3>(-)-Y-Amino-ahydroxybutyryl besitzt, und pharmazeutisch verträglicher Salze davon, dadurch gekennzeichnet, daß man in aufeinäriäerfölgendeh Stufen

0-9 8 2.S./t.1.2 3.

M/12901

2360 9 4%

A) "Neomycin B' öäer Neomycin C mi¥ einem AcyliBriingsmittel, ausgewählt unter Verbindungen der Fbrmdlh

■> R

6-

W S

W-CH₂-O-C-O-N

OH, O

z^C-O^Crlfe. y

CB

^Ljz

O CH, N-C-O-C-CH₃ , CH,

it

X-CH₂-C-OH (oder

n-.

1!

C—X , . X-CH₂-C-X ,

Carbodiimid .dayon) oder

(oder einem Carbodiimid davon)

worin R und R , die gleich oder verschieden sein können jeweils H, F, Cl, Br, NO₂,.0H, Niedrigalkyl oder Niedrigalkoxy und X Chlor, Brom oder Jod bedeuten, oder mit seinem funktioneilen Äquivalent.als Acylierungsmittel in einem Verhältnis von 2 Mol oder

2^57 112 3

M/12901

weniger Acylierungsmittel pro. Mol Neomycin B oder C in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur unterhalb 5O°C,^: acyliert, wobei die Verbindungen der Formel

HO

r-MH₂

. ' II

entstehen, worin entweder der Substituent R oder

2
der Subntituont R dio Bedeutung -CH₂-NH-Y boaitzon und dor middr« .'Jubntittionh Wnur.nvu tot£ bodoutot, v;orin Y oinen Reat der Formeln

II. X-CH₂-C-

oder

- 42 -

409825/1123

ir

0 ti

4 ■^: ■

ale Veinsitidviiigen dei* äer Forniel

-CK-C-M

f%-

ist, MsgewaKLt

CE

It,.

M ein Rest ist,ausgewählt unter

> -0 "NO₂ , .^6

825^4^2

M/12901

worin R und R' die obigen Bedeutungen besitzen, oder mit seinem funktioneilen Äquivalent als Acylierungsmittel für ein primäres Amin in einem Verhältnis von mindestens 0,5 Mol Verbindung VII pro Mol Verbindung II in einem Lösungsmittel acyliert, wobei eine Verbindung der Formel

ί ■.·:■·."

.Ill

entsteht, worm entweder der Substituent R oder

2
der Substituent R die Bedeutung -CKU-NH-Y besitzen und der andere Substituent Wasserstoff bedeutet und Y und ¥ die obigen Bedeutungen besitzen, und

- 44 -·...·. 40 98 25/112 3 .,.-,?, ,

C)- die Blockierungsgruppen W und Y durchs an. .sich "bekannte Methoden entfernt, wobei die Verbindungen der Formel IV entstehen und, gegebenenfalls, durch an sich bekannte Methoden das Produkt in ein nichttoxisches pharmazeutisch verträgliches Säureaddi-' tionssalz davon überführt.

- 45 -

409 8 25/1123