DE136103C

DE136103C -

Info

Publication number: DE136103C
Application number: DE1902136103D
Authority: DE
Filing date: 1902-04-14
Anticipated expiration: 1922-04-15

Description

KAISERLICHES

PATENTAMT.

- M 136103 KLASSE 30 Ji.

Der die Gerinnung des Blutes aufhebende Bestandteil des Blutegels war bisher nur in Form wässeriger Auszüge bekannt, welche aus den Egelköpfen hergestellt wurden. Ein solcher ist zuerst durch Extraction der zwei Tage mit Alkohol gehärteten und mit Glas zerriebenen Köpfe mit destillirtem Wasser oder der frischen zerkleinerten Köpfe mit 0,6 proc. Kochsalzlösung und Abfiltriren der Lösungen von den Gewebstheilen von Hay er a ft 1884 hergestellt und im Archiv f. experim. Patholog. u. Pharmakologie Bd. XVIII, S. 20g, beschrieben worden. Später hat J. C. Bock eine schnellere Herstellung angewendet und 1898 in dem genannten Archiv Bd. XLI, S. 160, mitgetheilt. Er zerrieb die frischen Köpfe mit Sand, zog sie zwei Stunden mit 0,7 proc. C/ iVa-Lösung aus (1 ecm p. Kopf) und trennte die Flüssigkeit durch Centrifugiren von den unlöslichen Bestandteilen.

Die so gewonnenen Lösungen waren an sich nur sehr kurze Zeit haltbar und mufsten deshalb für die Verwendung stets frisch hergestellt werden, was für die praktische Anwendung ein erhebliches Hindernifs bildete. Neuerdings sind solche Lösungen in haltbarer Form durch die Firma Merck in den Handel gebracht worden.

Hinsichtlich der Gewinnung des wirksamen Bestandtheiles in fester, haltbarer Form haben die diesseitigen Untersuchungen nun ergeben, dafs sich die betreffende Substanz in den durch Präparation isolirbaren Schlundtheilen des Kopfes findet, sich aus solchen präparirten Schlundringen in gleicher Menge wie aus ganzen: Köpfen des Egels nach den Vorschriften von Haycraft oder Bock extrahiren läfst, und die so dargestellten Lösungen sich, mit einem Thymolkrystall eingeschmolzen, Monate lang unverändert wirksam erhalten.

Aus solchen frischen oder conservirten Lösungen lassen sich dann die Albumine durch Fällung bei schnell ansteigendem Erwärmen auf ioo° der allmählich neutral, endlich mit Essigsäure ganz schwach sauer gemachten Lösung entfernen, und zwar sofern nur kurze Einwirkung der höheren Temperaturen und sauren Reaction stattfindet, ohne erheblichen Verlust an wirksamer Substanz.

Die dann nach Abtrennen des Niederschlags gewonnene, wasserklare, schwach gelblich-grünliche Lösung läfst sich durch schnelles Dialysiren ebenfalls ohne wesentliche Verluste an wirksamer Substanz von den Salzen befreien und hinterläfst beim Eindunsten unter Vermeidung höherer Temperaturen, am besten im Vacuum, zum Schlufs über Schwefelsäure, bei nicht über 40⁰ C. gehender Temperatur, einen spröden, eiweifsähnlichen Firnifs, der, je nachdem präparirte Schlundringe oder ganze Köpfe extrahirt wurden, einen hellgelben oder bräunlichen Farbenton besitzt und sich gut zu einem feinen Pulver zerreiben läfst. Es läfst sich die Substanz aber auch aus der eingeengten wässerigen Lösung durch Fällen mit Alkohol als feines gelbliches bis weifses Pulver gewinnen. Die Ausbeute beträgt etwa 6 bis 9 mg pro Kopf. .

Die so gewonnene Substanz ist in Wasser leicht löslich, kaum dialysefähig, wird aus Wasser durch Alkohol in wieder löslicher Form gefällt, durch Salpetersäure, wenn sie ganz rein

ist, nicht gefällt, giebt deshalb auch nicht die Heller'sehe Ringprobe oder nur andeutungsweise, mit Kupfermannitlösung Biuretreaction, mit Millon 'schein Reagens zwar röthlichen, aber nicht so dunkel purpurrothen Niederschlag oder Flocken, wie das Albumin, sondern einen mehr gelbliche Töne zeigenden; wird durch Kochsalz in gesättigter Lösung nicht oder nur spurenweise (Verunreinigungen) gefällt, dagegen durch gesättigte Ammonsulfatlösung niedergeschlagen, giebt mit Essigsäure und Ferrocyankalium nur Trübung, die beim Erwärmen verschwindet. Es tritt Fällung ein bei Zusatz von Kaliumquecksilberjodid, Phosphorwolfram , Phosphormolybdänsäure und Sublimat.

Die Substanz zeigt somit ~ Eigenschaften, welche in ihr eine Albumose, und zwar, wie es scheint, eine Deuteroalbumose (Kühne) vermuthen lassen.

Das die Substanz vor allem Charakterisirende ist, dafs sie, zu ι bis 2 mg in 0,2 ecm physiologischer Kochsalzlösung gelöst, bei Zusatz frisch, unter den entsprechenden Cautelen aus der Arterie entnommenen Blutes mindestens 5 ecm Kaninchenblut dauernd ungerinnbar erhält. Ist das Präparat völlig rein, so genügen unter sonst günstigen Bedingungen (Zustand des Thieres) selbst 0,8 mg, um die Ungerinnbarkeit der genannten Blutmenge zu bewirken.

Claims

Patent-Anspruch:

Verfahren zur Darstellung des die Gerinnung des Blutes aufhebenden Bestandteiles des Blutegels, darin bestehend, dafs fein zerkleinerte frische oder durch Alkohol gehärtete Egelköpfe oder deren Schlundtheile mit Wasser oder physiologischer Kochsalzlösung in bekannter Weise extrahirt werden, dann die gewonnenen Auszüge durch Fällung des Eiweifses mittels kurzer Erwärmung zur Siedetemperatur bei neutraler, zum Schlufs ganz schwachsaurer Reaction gereinigt, durch Dialyse von den Salzen befreit werden und schliefslich die wirksame Substanz unter Vermeidung höherer Temperaturen durch Einengung der Lösung zur Trockne bezw. Ausfällung mittels Alkohols aus der eingeengten Lösung in fester Form gewonnen wird.