CZ467799A3

CZ467799A3 - Mikročástice obsahující zemědělsky aktivní složky

Info

Publication number: CZ467799A3
Application number: CZ19994677A
Authority: CZ
Inventors: Francis M. Botts; Frank C. Kohn; Maria L. Miller
Original assignee: Monsanto Company
Priority date: 1997-06-30
Filing date: 1998-06-26
Publication date: 2000-06-14
Also published as: CZ299866B6; EP0994650A2; AR013151A1; WO1999000013A3; EP0994650B1; PL342112A1; CA2294332C; AU8172798A; AU751267B2; CA2294332A1; US7070795B1; US7452546B2; DE69821940T2; WO1999000013A2; DE69821940D1; PL195763B1; IN1998CH01442A; US20060193882A1

Description

Mikročástice obsahující zemědělsky aktivní složky

Oblast techniky

Vynález se týká kompozic a způsobů pro kontrolované uvolňování zemědělských chemikálií.

Dosavadní stav techniky

Většina zemědělských chemikálií jako biocidy, chemická hybridizující činidla nebo regulátory růstu rostlin se aplikují na rostliny, semena, na zeminu při počátku růstové sezóny a musí si udržet účinnost během období růstu rostlin, které může trvat více měsíců. Avšak chemikálie se mohou degradovat chemickými nebo biologickými procesy a odstraňují se větrem nebo vodou z místa aplikace. Výsledkem toho je, že je nutné aplikovat vysoké dávky, aby se udržel během doby žádaný účinek, nebo je nutné aplikovat chemikálie opakovaně během období růstu. Avšak vysoké dávky jistých zemědělských chemikálií mohou být pro plodiny toxické. Mnohé fungicidy, zvláště triazolové fungicidy mohou být fytotoxické, když se aplikují v množstvích, která jsou nutná pro zabezpečení adekvátní kontroly chorob.

Patenty a publikované patentové přihlášky popisující různé formulace s kontrolovaným uvolňováním zahrnují US patenty čísel 4,172,119, 4,915,947, 5,225,278, 5,277,979 a 5,725,869, evropské patentové publikace 0 004 758-A2, 0 018 119-A1 a 0 763 510-A1 a PCT přihlášku WO 88/08300.

Zůstává potřeba formulací s kontrolovaným uvolňováním, kterými by se zemědělská chemikálie mohla dodávat plodině během celé růstové sezóny v dávkách, které by byly zemědělsky účinné, a při tom se snížila nebo odstranila fytotoxicita chemikálie pro plodinu nebo semena. Takové formulace by výhodně obsahovaly aktivní složku v minimálním množství potřebném pro dosažení žádaného účinku, aby se snížily vlivy na životní prostředí a snížily náklady.

Podstata vynálezu

Proto byly vyvinuty formulace s kontrolovaným uvolňováním pro zemědělské chemikálie, které obsahují mikročástice, v nichž jedna či více zemědělsky aktivních složek je dispergována nebo rozptýlena v polymerní matrici. Takové formulace s kontrolovaným uvolňováním jsou bezpečné, když se aplikují na semena nebo rostliny, i když obsahují vysoké hladiny aktivních složek, které by byly fytotoxické, pokud by se aplikovaly na semena nebo rostliny ve standardních formulacích s rychlým uvolňováním. Mikročástice podle vynálezu mohou

···· ·· uvolňovat aktivní složku(y) v blahodárných hladinách během růstové sezóny běžných plodin, (například alespoň po dva až dvanáct týdnů či více) a tedy mohou snížit potřebu následných aplikací zemědělské chemikálie. Rychlost uvolňování zemědělských chemikálií a období, v kterém se mohou uvolňovat účinná množství takových chemikálií lze upravit podle přání. Takové kompozice s kontrolovaným uvolňováním prodlužují období, po které zemědělské chemikálie je účinná, snižují počáteční toxicitu chemikálie pro semena nebo zemědělské rostliny, ' rozšiřují rozsah sloučenin, které se mohou používat pro zemědělské aplikace a snižují dopad chemického ošetření na životní prostředí.

. Podle jednoho provedení vynálezu kompozice s kontrolovaným uvolňováním zemědělské chemikálie na rostliny obsahuje mikročástice mající průměrný průměr asi 0,2 mikrometry až asi 200 mikrometrů. Každá mikročástice obsahuje polymerní matrici a alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v matrici. Mikročástice obsahují asi 1 do asi 50 % hmotnostních zemědělské chemikálie a asi 50 do asi 99 % hmotnostních polymerní matrice.

Podle jiného provedení vynálezu takové kompozice zahrnují například suspenze mikročástic ve vodném mediu, smáčitelné prášky, smáčitelné granule, suché granule a povlaky semen. Podle alespoň jednoho provedení vynálezu mikročástice ulpívají na povrchu semene nebo rostliny.

Podle jiného provedení vynálezu takové kompozice snižují ťytotoxicitu zemědělské chemikálie alespoň dvakrát (ve srovnání s konvenčními formulacemi s rychlým uvolňováním chemikálie. Například v případě kompozic podle vynálezu pro pokrytí semene, kompozice může | obsahovat množství zemědělské chemikálie, které by bylo podstatně fytotoxické, pokud by se * aplikovalo na povrch semene jako formulace zemědělské chemikálie s rychlým uvolňováním.

* Podle jednoho aspektu vynálezu je zemědělskou chemikálií biocid (například triazolový fungicid, jako je cyproconazol, epoxiconazol a tebuconazol), regulátor růstu rostlin, chemické hybridizující činidlo, výživa rostlin nebo jejich kombinace.

Podle jiného aspektu vynálezu je polymer vybraný ze skupiny tvořené poly(methylmethakrylát)em, polymléčnou kyselinou, kopolymery polymléčná kyselina- kyselina glykolová, butyrátem acetátu celulózy, polystyrenem, kopolymery hydroxymáselná kyselinakyselina hydroxyvalerová, kopolymery styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, poly(methylvinyl ether-kyselina maleinová), poly(kaprolakton)em, poly(n-amylmethakrylát)em, dřevěnou pryskyřicí, polyanhydridy, polyortoestery, poly(kyanoakrylát)y, poly(dioxanon)em, ethyl celulózou, polymery ethylvinyl acetátu, poly(ethylenglykolol)em, poly(vinylpyrolidin)em, acetylovanými mono-, di- a triglyceridy, poly(fosfazen)em, chlorovanou přírodní pryží,

0« • 000 00 0 0000 000 00 0 0000 • 000 00 0 000 00 0 T 0 000000000

000000 00 00 0 0 ·· polymery vinylu, polyvinylchloridem, hydroxyalkylcelulózou, polybutadienem, polyuretanem, polymery vinyliden chloridu, kopolymery styren-butadien, kopolymery styren- kyselina akrylová, polymery alkylvinyletheru, ftaláty acetocelulózy, ethylvinylftaláty, triacetáty celulózy, polyanhydridy, polyglutamáty, polyhydroxybutyráty, polyvinyl acetátem, kopolymery vinyl acetát-ethylen, kopolymery vinyl acetát-vinylpyrolidin, akrylátovými kopolymery, alkyl akrylátovými kopolymery, aryl akrylátovými kopolymery, aryl methakrylátovými kopolymery, poly(kaprolaktam)y, epoxidovými pryskyřicemi, polyamin epoxidovými pryskyřicemi, polyamidy, polymery polyvinyl alkoholu, polyalkydovými pryskyřicemi, fenolickými pryskyřicemi, silikony, polyestery a kopolymery ajejich kombinacemi.

Podle jiného aspektu vynálezu jsou zabezpečeny způsoby dodání zemědělské chemikálie k rostlině zahrnující zabezpečení rostliny kompozicí, jak se popisovala shora, například aplikací kompozice na zeminu, aplikací kompozice na listoví rostliny a pokrytí semene před klíčením semene, aby vznikla rostlina. Když se například aplikuje na zeminu nebo na listoví, kompozice se může aplikovat v takovém množství, že se aplikuje asi 1 g do asi 10 kg zemědělské chemikálie na hektar. Když se aplikuje jako pokrytí semene, kompozice se může aplikovat v takovém množství, že se aplikuje asi 1 gram do asi 500 gramů na 100 kg semen.

Podle jiného aspektu vynálezu jsou zabezpečeny způsoby přípravy kompozic popsaných shora. Tyto způsoby zahrnují kroky: (a) rozpuštění alespoň jedné zemědělské chemikálie a polymeru v organickém rozpouštědle, aby vznikl hydrofobní roztok, (b) míchání hydrofobního roztoku a vodného media při střihu a době dostatečné pro vznik emulze mající kapičky hydrofobního roztoku dispergované ve vodném mediu, a (c) odpaření organického rozpouštědla z emulze, aby vznikla množina mikročástic mající průměrný průměr asi 0,2 mikrometry až asi 200 mikrometrů a obsahující alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v polymerní matrici.

Jiné aspekty vynálezu budou zřejmé odborníkům po prostudování popisu a přiložených nároků.

Formulace matricových mikročástic podle vynálezu jsou užitečné v zemědělství pro řadu účelů, včetně například kontroly pathogenů ze semen a ze zeminy, jakož i chorob působících na nadzemní části rostlin (stéblo, listy, květy, plody), pro dodání živin, chemických hybridizujících činidel, regulátorů růstu rostlin atd. Také je prospěšné, že takové formulace mají řadu nezemědělských použití, jako je dodání farmatik lidem nebo zvířatům pro terapeutické nebo profylaktické účely, pro kontrolované uvolňování chemikálií při úpravě vody nebo kondicionaci, akvakultuře a podobně.

44

4 • φ ····

44

9 4 4

4 4 4 ··

Formulace pro kontrolované uvolňování podle vynálezu podstatně snižují fytotoxicitu zemědělské chemikálie pro semena nebo plodinu ve srovnání se standardní formulací s rychlým uvolňováním chemikálie (například mající rychlost uvolňování, která je podstatně podobná neformulované chemikálii). Tím takové formulace s kontrolovaným uvolňováním zvyšují bezpečnost (nebo zabezpečují) zemědělskou chemikálii. Tedy pro danou úroveň íytotoxicity se může aplikovat více chemikálie na semena nebo rostliny ve formě formulace pro kontrolované uvolňování podle vynálezu než ve standardní formulaci s rychlým uvolňováním. Formulace pro kontrolované uvolňování podle vynálezu výhodně zabezpečují danou chemikálii alespoň dvakrát, výhodněji alespoň pětkrát, ale ještě výhodněji alespoň desetkrát, a nejvýhodněji alespoň pětadvacetkrát. Ve skutečnosti jsme aplikovali více než stonásobek množství standardních formulací jistých fytotoxických chemikálií pouze s malým poškozením rostlin. Jak se ukazuje v příkladech níže, zabezpečení různých zemědělských chemikálií, jako jsou triazolové fungicidy umožňuje jejich použití jako ošetření semen při úrovních, které by jinak zabránily nebo zpomalily klíčení nebo by blokovaly růst rostlin, které klíčí ze semen, což zvyšuje účinnost takových fungicidů proti různým pathogenům a škůdcům.

Matricové mikročástice podle vynálezu se mohou použít podle jakékoliv konvenční formulace, včetně ne však omezeně suspenze nebo břečky matricových mikročástic ve vodném mediu (například vodě), smáčitelných prášků, smáěitelných granulí (tekoucí za sucha) a suchých granulí. Pokud se formuluje pohodlná formulace pro skladování a dopravu jako suspenze nebo břečka, koncentrace aktivní složky ve formulaci je výhodně asi 0,5 % do asi 50 % hmotnostních výhodně asi 5 % do asi 40 %. Tato koncentrace se může upravit výše nebo níže v závislosti na relativním podílu matricových mikročástic a nosného media (pevného nebo kapalného.

Matricové mikročástice. Výraz matrice je definován jako okolní materiál, ve kterém je jiný materiál zachycen, zakotven, rozpuštěn nebo dispergován. Mikročástice podle vynálezu obsahují matrici obsahující jednu či více aktivních složek, které jsou rozptýleny v matrici. Mikročástice mohou také obsahovat jednu či více neaktivních složek nebo aditiv (jako jsou například disperganty). Mikročástice podle vynálezu se liší od mikrokapslí, ve kterých polymerní obal obklopuje pevné nebo kapalné jádro, které obsahuje aktivní složku. V alespoň jednom provedení mikročástic podle vynálezu konečný produkt se jeví v elektronových mikrofotografíích zlomů za mrazu jako pevné, celkově sférické částice, které se jeví zcela pevné, což naznačuje, že aktivní složka(y) je rozdělena nebo dispergována po molekulách podstatně jednotně v materiálu matrice. Avšak je možné alespoň v jednom provedení, že aktivní složka je rozdělena v matrici makromolekulárně, například že většina částic aktivní složky je dispergována v matrici.

·· ·· • · · · • · > • ··· • · ·*·· ·· ftft ftftft · • · » • ·· « ·· ·· ·· ··

Zemědělsky aktivní složka(y) tvoří alespoň 1,0 % do 50 % hmotnostních, výhodně alespoň 15 % hmotnostních mikročástic podle vynálezu. Matrice tvoří od asi 50 % do asi 99 % hmotnostních mikročástic, výhodně asi 50 % do asi 90 % hmotnostních. Nejekonomičtější je, pokud mikročástice obsahují vysoký podíl aktivní složky (složek). Pokud podíl matricových složek k zachyceným aktivním složkám je příliš veliký, rychlost uvolňování zachyceného materiálu je obecně příliš pomalá, aby byla účinná a množství aktivní složky (složek) ve formulaci je snížené, což zvyšuje cenu účinného množství konečného produktu. Pokud podíl matricové složky k zachycenému materiálu je příliš malý, rychlost uvolňování bude obecně příliš vysoká, což povede k zvýšení fytotoxicity a zkrácení období účinnosti aktivní složky. Když se koncentrace aktivní složky v mikročástici zvyšuje, zvyšují se také obecně rychlosti uvolňování.

Průměrná hmotnost matriční složky, jako procento celkové hmotnosti matricové mikročástice (kombinovaná hmotnost matrice, aktivní složky (složek) a jakýchkoliv neaktivních složek, které jsou rozptýleny v matrici, se mohou určit z množství složek v kompozici pro přípravu produktu, předpokládaje, že složky se smíchají homogenně a úplně.

Přípravky mikročástic podle vynálezu výhodně mají průměrnou velikost částic od asi 0,2 mikrometry do asi 200 mikrometrů v průměru, výhodněji mezi asi 1 mikrometrem a asi 50 mikrometry v průměru, ještě výhodněji mezi asi 3 mikrometry a asi 50 mikrometry v průměru. Menší průměrné velikosti částic obecně mají vyšší rychlost uvolňování a plochu pokrytí aktivní složkou, spolu s vyšší aktivitou a fytotoxicitou aktivní složky. Obráceně, větší průměrné velikosti částic jsou spojeny s malou plochou pokrytí a sníženou fytotoxicitou. Mimo to malá velikost mikročástic podle vynálezu dovoluje takovým mikročásticím, aby byly pohlceny rostlinou spolu s vodou a transportovány rostlinou, což znamená systémové dodání aktivních složek. Velikost matricových mikročástic se kontroluje během procesu zachycení použitím prostředků pro smíchání, míchání nebo třepání (včetně homogenizátorů a sonifikátorů) při vhodné rychlosti, aby se tvořily kapičky složek, které se mají zakotvit.

Velikost částic matricových mikročástic podle vynálezu se měří s použitím mikroskopu s kalibrovanou mřížkou a visuálně určováním průměrné velikosti částic. Alternativně se velikost může určit elektronickými prostředky s použitím čítače Coulter LS nebo rozptylem laserového světla. Mikroskopické stanovení je obecně mezi +/-5 mikrometrů velikosti měřené čítačem Coulter. Z rozdělení velikosti mikročástic se stanoví hodnoty djg, Ů5Q a dg4 a vynesou se na grafu log pravděpodobnosti. Hodnota djg představuje velikost (průměr v mikrometrech), při které 16 procent hmotnostních kapslí ve vzorkuje rovno nebo větší než djg, d5Q představuje velikost (průměr v mikrometrech), při které 50 procent hmotnostních kapslí ve vzorku je rovno • « ·· 99 ·· ·· • · · · • · · • ··· • · ···· ··

99

9 9 9

99 nebo větší než Ú5Q a dg4 představuje velikost (průměr v mikrometrech), při které 84 procent hmotnostních kapslí ve vzorkuje rovno nebo větší než dgzj..

Matricové mikročástice podle vynálezu výhodně ulpívají na povrchu semene a rostlin. Aniž bychom se omezovali teorií, domníváme se, že matricové mikročástice se zachycují na mikrovláscích nebo škvírách na semenech nebo površích rostlin. Adheze mikročástic k semenům a rostlinám lze zvýraznit použitím konvenčních lepidel nebo jiných sloučenin, které se používaly pro aplikaci různých povlaků na semena.

Mikročástice mohou ovlivnit pohyblivost aktivní složky v zemině, protože vazba matricového materiálu k částicím zeminy může být podstatně odlišná než vazba samotné aktivní složky. Výsledkem toho je, že podle vybraných matricových materiálů, kompozice podle vynálezu mohou zvýšit účinnost zemědělských chemikálií, které by byly méně účinné pro svou pevnou vazbu k částicím zeminy.

Do vynálezu jsou též zahrnuty mikročástice podle vynálezu, které jsou zapouzdřeny nebo pokryty s použitím konvenčních způsobů a materiálů, aby se získala další kontrola uvolňování aktivních složek, přidávají další aktivní a neaktivní složky, nebo dodávají konečnému produktu žádané vlastnosti.

Polymery. Výraz polymer nebo polymerní materiál, jak se používá v tomto vynálezu, má znamenat buď jediný polymer nebo kopolymer nebo kombinaci různých polymerů nebo kopolymerů.

Matricový materiál se vybere tak, aby rychlost uvolňování aktivní složky zajistila zemědělsky účinné množství aktivní složky k semenu nebo rostlině, například v množství aktivní složky, které je účinné k dosažení potřebné ochrany plodin nebo jiné žádané zemědělské aktivity charakteristicky spojené se zemědělskou chemikálií. Tedy pro biocid zemědělsky účinné množství je množství, které je dostatečné k zajištění komerčně přijatelné kontroly pathogenu nebo škůdce, pro regulátory růstu rostlin množství, které je dostatečné k podstatné změně růstu nebo vývoje rostliny způsobem charakteristickým pro regulátor růstu rostlin, pro výživu rostlin množství, které je dostatečné k zajištění alespoň minimálního množství živiny potřebné pro normální růst a vývoj rostliny, atd. Aktivní složka se výhodně uvolňuje rychlostí, která nepůsobí podstatnou fytotoxicitu, například nesnižuje růst nebo sílu rostliny na komerčně nepřijatelné úrovně nebo nepůsobí jiné typy nepřijatelného poškození rostliny. Aktivní složka se výhodně uvolňuje na blahodárné úrovni po dobu klíčení, vzcházení anebo pozdějších vývojových stadií plodiny nebo rostliny a nejvýhodněji po dobu celého růstu rostliny. Aktivní složka se může uvolňovat difusí z matrice nebo degradací či rozpouštěním matrice v rostlině, zemině nebo okolí *· ·«·· ·· «*· · r • 4 · • 91 • · · • 9 9 9

99

11 1

19 1

9 9 9 9 • · · · ·· ·· listoví. Mimo to polymer a jeho rozpadové produkty, pokud existují, by neměly rušit účinnost aktivní složky (nebo jiných složek, jako jsou dispergační činidla) nebo by neměly být podstatně fytotoxické pro semena, sazenice nebo rostlinu. Příklady vhodných polymerů pro provozování vynálezu zahrnují, nejsou však omezeny na následující nevyčerpávající seznam polymerů (a kopolymerů a jejich směsí):

poly(methylmethakrylát), poly(mléčná kyselina) (Chronopols 50, 95 a 100) a kopolymery jako kopolymery (mléčná kyselina- kyselina glykolová) (Lactel BP-400) a kombinace s polystyrenem, například butyrát acetocelulózy, poly(styren), kopolymery hydroxymáselná kyselina- kyselina hydroxyvalerová (Biopol D400G), kopolymery styrenu s anhydridem kyseliny maleinové (SMA 1440 A pryskyřice, Sartomer

Co.), poly(methylvinyl ether-kyselina maleinová), poly(kaprolakton), poly(n-amylmethakrylát), dřevěná pryskyřice, polyanhydridy, například poly(anhydrid kyseliny sebakové), poly(anhydrid kyseliny valerové), poly(trimethylen karbonát) atd. a kopolymery jako poly(karboxyfenoxypropankyselina sebaková), poly(kyselina fumarová-kyselina sebaková), atd., polyortoestery, poly(kyanoakrylát)y, poly(dioxanon), ethylcelulóza, polymery a kopolymery ethyl vinyl acetátu, poly(ethylen glykolol), poly(vinylpyrolidin), acetylované mono-, di- a triglyceridy, poly(fosfazen), chlorovaná přírodní pryž, polymery a kopolymery vinylu,

• · ···· ·· · · • · · · ♦ · ♦ · · · · · ·

4 9 4 4 4 4 4 4 • 4 · 4 · · · ·

4 4 44 4 4 polyvinyl chlorid, hydroxyalkylcelulózy, polybutadien, polyuretan, polymery a kopolymery vinyliden chloridu, kopolymery styren-butadien, kopolymery styren-akrylové, polymery a kopolymery vinyl acetátu (například kopolymery vinyl acetát-ethylen (Vinumuls) a kopolymery vinyl acetát-vinylpyrolidin, polymery a kopolymery alkylvinyl etheru, ftaláty acetocelulózy, ethyl vinyl ftaláty, triacetáty celulózy, polyanhydridy, polyglutamáty, polyhydroxy butyráty, akrylátové polymery (Rhodoplexy), alkyl akrylátové polymery a kopolymery, aryl akrylátové polymery a kopolymery, aryl methakrylátové polymery a kopolymery, poly(kaprolaktam)y (například paralely kaprolaktonů obsahující dusík), epoxy/polyamin epoxy/polyamidy, polymery a kopolymery polyvinyl alkoholu, silikony, polyestery (pro přístupy založené na oleji, včetně alkydů), fenoláty (polymery a kopolymery s vysychavými oleji).

Výhodné polymery zahrnují: poly(methylmethakrylát), tt · ♦ ·· ···· « · · · · · · • · · · » 9 poly(mléčná kyselina) (Chronopols 50, 95 a 100) a kombinace s polystyrenem, kopolymery (mléčná kyselina- kyselina glykolová) (Lactel BP-400), poly(styren).

Nyní se dává přednost poly(methylmethakrylát)u nebo kopolymerů poly(styren anhydrid kyseliny maleinové) pro použití triazolovými fungicidy, jako jsou například tebuconazol, cyproconazol a epoxiconazol.

Také se zamýšlí, že by také byly vhodné pro provozování vynálezu jisté pryskyřice, jako jsou polyalkydové pryskyřice, fenolické pryskyřice, pryskyřice kyseliny abietové a epoxidové pryskyřice. Do vynálezu jsou také zahrnuty systémy plněných polymerů a kopolymerů, například s použitím uhličitanu vápenatého, siliky, zeminy atd.

Aktivních složky. Mikročástice podle vynálezu mohou obsahovat jedinou zemědělsky aktivní složku zachycenou v polymerní matrici nebo četné zemědělsky aktivní složky mající podobné nebo různé aktivity (například různé biocidy, jako jsou fungicidy a insekticidy). Aktivní složky zahrnují, nejsou však omezeny, jakékoliv různé konvenční biocidy, včetně fungicidů (například triazoly, imidazoly, methoxyakryláty, fungicidy v morfolinové sérii, jako je fenpropimorph, atd.), herbicidy (například glyfosát, fosfinotricin, Triallat, Alachlor, atd.), insekticidy (například organofosforové sloučeniny, imidacloprid, pyretroidy, atd.), nematicidy (například Tribute), askaricidy, moluscidy, nematicidy, rodenticidy, baktericidy a termiticidy, chemická hybridizující činidla (například Genesis), zabezpečovadla herbicidů, chemická indukovadla nebo povzbuzovadla (například aktivátory proteinů), regulátory růstu rostlin (například auxiny, cytokiny, gibbeleriny, atd.), povzbuzovadla, živiny jako hnojivá, minerály atd.).

Triazolové fungicidy pro provozování vynálezu jsou například cyproconazol, epoxiconazol a tebuconazol. Dává se přednost cyproconazolu. Úplná diskuse vlastností všech těchto fungicidů se může nalézt v US patentu číslo 4,664,696, EPA 196038 a US patentu číslo 4,723,984.

Reprezentativní fungicidy, herbicidy, insekticidy a regulátory růstu rostlin, které jsou užitečné v souvislosti s vynálezem jsou uvedeny níže:

Fungicidy

Benomyl,

Benzothiazoly, • ·

« · • ·

Captan,

Chlorothalonil,

Cyproconazol,

Cyprodinil,

Epoxiconazol,

Fenarimol,

Fenpropimorph,

Fludioxonil,

Flutolanil,

Fosetyl-Al,

Kresoxim-Methyl,

Mancozeb,

Metalaxyl,

Procloraz,

Triticonazol,

Tebuconazol,

Vinclozolin.

Herbicidy kyselina 2,4-dichlorfenoxyoctová, Acetochlor,

Alachlor,

Atrazin,

Bensulfid,

Bromacil

Bromoxynil,

Butachlor,

Chlorsulfuron, • · « · • 0

Clomazon,

Dicamba,

Dinoseb,

Diuron,

Doclofobmethyl, Flumetsulam, Flumiclorac pentyl, Glyfosát,

Halosulfuron,

Imazaquin,

Isoxaflutole,

Lactofen,

Mecoprop,

Metolachlor,

Metribuzin, Norflurazon, Oxadiazon,

Propachlor,

Propanil,

Quinclorac,

Sethoxydim,

Sulcotrione,

Sulfentrazone,

Sulfosulfuron,

Thíobencarb,

Triallate,

Triclopyr,

Trifluralin, • ·'

4 «φ ·· · · · ·

4 4 4 ·· 4 · « 4 « * 4 · 4 4 4 4 4 4 4 • 4 4 4 ft 4 4 4 ♦ 4 4 · · · 4 4444.444 ^1Ζ< 4444 44 ·· #4 4 4 ··

Věrno lat.

Insekticidy/Nematicidy

Aldicarb,

Azinpho s-methy 1,

Carbaryl,

Carbofuran,

Chlorpyrifos,

Cyfluthrin,

Diazinon,

Dicofol,

Disulfoton,

Endosulfan,

Fenaminphos

Fenvalerate,

Imidachloprid,

Lindanc,

Malathion,

Methyl parathion,

Monocrotophos,

Oftamol,

Oxamyl,

Parathion,

Propoxur,

Pyrethriny.

Regulátory růstu rostlin

6-benzyladenin, alfa-naftyloctová kyselina, ··· 4 · • · · 9 ·· it 4 * ·« 99

Ancomidol,

Chlorpropham,

Daminozide,

Endothull,

Ethepon, kyselina gibberelová, hydrazin kyseliny maleinové,

Paclobutrazol.

Chemická hybridizující činidla

Clofenset (draselná sůl).

Vedle aktivních složek mikročástice mohou také obsahovat neaktivní složky, jako jsou rozpouštědla, disperganty, adjuvanty nebo plastifikátory a mohou se formulovat jako suspenze, granule, povlaky semen, atd. spolu s jinými aktivními a neaktivními složkami.

Uvolňování aktivních složek z mikročástic. Mikročástice podle vynálezu uvolňují zemědělsky aktivní složku kontrolovaným způsobem difusí (například v případě poly(methylmethakrylát)u nebo kopolymerů poly(styren anhydrid kyseliny maleinové) nebo desintegrací matrice (například v případě polymerů polymléčné kyseliny), v závislosti na použitých polymerech matrice. Rychlosti uvolňování se také mění s velikostí mikročástic (ovlivňuje jejich poměr plocha povrchu/ objem). Materiál matrice se vybere, aby měl vlastnosti vhodné pro přiměřené uvolňování a působení zemědělsky aktivní složky v prostoru a čase. Formulace se také mohou připravit tak, aby se koncentrace aktivní složky měnila od vnějšího povrchu matricové mikročástice k jejímu jádru, což dává programované” rychlosti a hladiny aktivního uvolňování během období klíčení semen a následujících periodách růstu.

Rychlosti uvolňování aktivní složky z mikročástice podle vynálezu je závislá na polymeru, velikosti mikročástic, náloži aktivní složky a případném použitém dispergačním činidle. Způsob, jakým se aktivní složka uvolňuje z mikročástice, je závislý na tom, zda naložený materiál je v matrici suspendován nebo rozpuštěn. Potřebné kroky, když aktivní složka je v materiálu matrice rozpuštěna, jsou: difuse aktivní složky k povrchu matrice, dělení aktivní složky mezi matrici a okolí nebo eluční medium (například vodu v zemině, povlak semene nebo povrch listoví) a transport od povrchu mikročástice. Mimo to, pokud aktivní složka je • · • *

99

9 9 «

9 9 « • » · · • · · ♦

99 dispergovaná (jako makromolekulám! částice v mikročástici), aktivní složka se musí rozpustit v materiálu matrice před difusí k povrchu.

Jiným způsobem uvolňování aktivní složky je biodegradací nebo erozí materiálu matrice, jehož rychlost je například ovlivněna hydrofobností nebo hydrofilností polymeru a morfologií mikročástice. Mimo to se aktivní složka může uvolňovat bobtnáním polymerní matrice po ponoření do kapaliny, jako je voda. V soustavách kontrolovaných difusí se předpokládá, že matrice není bobtnáním ovlivněna, ale v soustavách kontrolovaných bobtnáním polymerní matrice prochází přechodem ze sklovitého stavu do gelovitého stavu po interakci s pronikajícím rozpouštědlem. Rychlost uvolňování je určena procesem přechodu ze skla do gelu.

Jiným faktorem ovlivňující rychlost uvolňování je osmotický tlak, který může vzniknout v mikročástici, pokud aktivní složka nebo polymer má afinitu k vodě. Aktivní složka se uvolňuje, když osmotický tlak přesahuje maximální sílu, kterou matrice mikročástice může snést.

Matematické modely pro tyto mechanismy uvolňování se popisují v U. Pothakamury a G. Barbosa-Canovas, Trends in Food Science @ Technology 6:397-406, 1995 a R. Langer a N. Peppas, JMS-Rev. Macromol. Chem. Phys. C(23):61-126, 1983.

Formulace včetně mikročástic. Konvenční neaktivní nebo inertní složky lze zabudovat do matricové mikročástice nebo do různých medií, jako jsou vodné medium, používaná k přípravě suspenzí a jiných formulací matricových mikročástic podle vynálezu. Takové neaktivní složky zahrnují, ale nejsou na ně omezeny: přilnavá činidla, dispergační činidla, jako jsou methylcelulóza (Methocel® A15LV nebo Methocel® A15C například slouží jako kombinovaná dispergační/přilnavá činidla pro použití při ošetření semen), polyvinyl alkohol (například Elvanol® 51-05), lethicin (například Yelkinol® P a polymerní dispergační činidla (například PVP/VA S-630), zahušťovadla (například hlinková zahušťovadla jako Van Gel® B k zlepšení viskozity a snížení usazování suspenzí mikročástic), stabilizátory emulzí, surfaktanty, sloučeniny proti zamrzání (například močovina), barvy a barviva, atd.

Jakékoliv konvenční aktivní nebo inertní materiál se může použít pro povlak semen podle vynálezu, jako jsou konvenční materiály pro povlaky filmem včetně, ale ne omezeně materiálů pro povlaky filmem na vodné bázi, jako jsou Sepiret a Opacoat.

Formulovaný produkt, když se používá jako suspenze ve vodném nosiči, výhodně obsahuje dispergační činidlo, aby se umožnilo vytvoření relativně jednotné či homogenní směsi.

Dispergační činidlo také výhodně dodává formulaci mikročástic stupeň přilnavosti nebo lepivosti, aby formulace přilnula k ošetřeným semenům nebo jiným povrchům listů. Vhodná • » * to to * · • ♦ ·· ♦ · • •to· to t • · · to *· ·· • «to to • ·* » • ·· · • *· · • to at dispergační činidla zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, vodný 0,25-1,0% polyvinyl alkohol, jako jeElvanol® 51-05 (DuPont) aMethocel® A15LV.

Způsoby přípravy matricových mikročástic. Matricové mikročástice podle vynálezu lze vyrábět jakýmkoliv procesem, který vede k polymerní matrici, v které jsou podstatně jednotně rozděleny aktivní složky včetně, ale ne omezeně, odpaření rozpouštědla, dělení rozpouštědla, mikrozapouzdření z horké taveniny a sušení rozprašováním.

Výhodný způsob pro zachycení zemědělsky aktivní složky v souladu s tímto vynálezem zahrnuje kroky:

(A) Příprava hydrofobního roztoku (olejová fáze) zapojením aktivní složky a polymeru v organickém rozpouštědle.

(B) Příprava hydrofilního roztoku (vodná fáze) rozpuštěním dispergačního činidla ve vodě (nebo ve vodném či alkoholickém roztoku).

(C) Vytvoření emulze spojením hydrofobního roztoku s hydrofilním roztokem mícháním, homogenizací nebo sonifikací.

(D) Míchání emulze vytvořené v (C) dokud se neodpaří všechno organické rozpouštědlo z (A). Organické rozpouštědlo se také může odstranit za sníženého tlaku s použitím rotační odparky.

(E) Případně isolace matricových mikročástic umožněním emulzi vytvořené v (D), aby se usadila, dekantováním supernatantu od matricových mikročástic, pak promytím, filtrací a sušením mikročástic na vzduchu. Mikročástice se mohou resuspendovat ve vodné nosičové soustavě obsahující vodu a například dispergační činidlo barvy nebo barviva, atd., nebo se mohou mikročástice použít bez isolace.

Podrobněji, proces zachycení matricových mikročástic se provádí rozpuštěním zemědělsky aktivní složky a polymeru v dostatečném množství organického rozpouštědla, aby se vytvořil hydrofobní roztok. Rozpuštění se provádí při teplotě místnosti nebo teplotách ne vyšších než 50 °C s mechanickým mícháním. Pro mikrozapouzdření aktivních složek podle tohoto obecného způsobu je aktivní složka přednostně rozpustná v hydrofobní fázi spíše než v hydrofílní fázi a je výhodně podstatně nerozpustná ve vodné fázi (podstatně nerozpustná se míní rozpustnost ve vodě při 25 °C menší než 1 % hmotnostní). Dispergační činidlo se pak rozpustí v dostatečném množství deionizované vody, aby se vytvořil hydrofílní roztok. Toto rozpuštění se provádí při teplotě místnosti za mechanického míchání. Hydrofobní roztok se pak vlije za intenzivního míchání, homogenizace nebo sonifikace do hydrofilního roztoku, aby se

4 4 4 • · · · 4 * * * 4

4 4

4 4 ·

4

4444 44

4 4

4«

4 4 · · 4 4

4 <4 • 4 · » • 4 4 · • 4 4 4 • 4 4 ·

4* 44 vytvořila emulze, nebo jakýmkoliv jiným způsobem, který se v oboru konvenčně používá. Emulze se skládá z mikrokapiček hydrofobního roztoku rovnoměrně dispergovaných a suspendovaných v hydrofilním roztoku. Velikost kapiček a konečný rozměr matricových mikročástic se kontroluje velikostí střihu a stupněm míchání, teplotou, objemovým poměrem dispergované hydrofobní fáze ke kontinuální vodné fázi a typem případně použitého dispergačního činidla. Míchání emulze pokračuje, dokud se neodpaří všechno organické rozpouštědlo. Jakmile se organické rozpouštědlo odpaří, supernatant se dekantuje a matricové mikročástice se promyjí, zfiltrují a suší, nebo se použijí jak jsou.

Při procesu naznačenému výše použité organické rozpouštědlo by mělo být schopné pro spolu-rozpuštění potřebných množství aktivní látky a polymeru, aby se vytvořil hydrofobní (nemísitelný s vodou) roztok. Organické rozpouštědlo by jinak nemělo ovlivňovat nebo měnit zamyšlené funkce aktivní látky nebo polymeru ve vytvořených matricových mikročásticích. Organické rozpouštědlo by také mělo mít vhodnou těkavost při teplotě místnosti (dostatečně nízkou teplotu varu při okolním tlaku), aby se z emulze odpařovalo rozumnou rychlostí. Příkladem organického rozpouštědla vhodného pro provozování podle vynálezu je dichlormethan. Jiná vhodná organická rozpouštědla zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, ethyl acetát, chloroform a chlorid uhličitý. Množství použitého organického rozpouštědla při tvorbě hydrofobního roztoku je v rozsahu od asi dvakrát do asi osmkrát, a výhodně asi třikrát hmotnosti polymeru (nebo spojené hmotnosti polymeru a aktivní látky).

Obecně nejsou potřebné během přípravy matricových mikročástic žádné úpravy pH soustavy, aby se docílil vyhovující výkon a produkce zachyceného materiálu.

V současné době výhodný způsob přípravy matricových mikročástic podle vynálezu užívá odpaření rozpouštědla. V krátkosti, technika odpařování rozpouštědla vyžaduje smíchání hydrofobního kapalného media a hydrofilního kapalného media, aby vznikla emulze. Emulze lze připravit s hydrofobní fází v hydrofilní fázi nebo s hydrofilní fází v hydrofobní fázi, v současné době se dává přednost prvému způsobu. Mimo to se dává přednost přípravě emulze, ve které objem hydrofilní fáze významně převyšuje objem hydrofobní fáze. Přidá se aktivní složka, která se přednostně rozpouští v hydrofobní fázi, a výhodně je podstatně nerozpustná v hydrofilní fázi. Velikost střihu a doba pro smíchání hydrofobní a hydrofilní fáze se vyberou tak, aby daly jednotně dispergované hydrofobní kapičky mající průměrné průměry v rozmezí od asi 0,2 mikrometru do 200 mikrometrů a výhodně od asi 1 do 200 mikrometrů. Pak se odpaří rozpouštědlo z hydrofobní fáze, což dá matricové mikročástice podle vynálezu.

«4 · · * « « * • « · 9 • · · 9 • 4 · • · ·· * « » · · · »·

Při technice rozpouštědlového rozdělování (R. Langer aj., Polymer 31:547-555, 1990, Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical Technology, čtvrté vydání, svazek 16, Curt Thies), se aktivní složka rozpustí nebo disperguje v těkavém organickém rozpouštědle. Vzniklý roztok se suspenduje jako jemná disperze v organickém oleji, do kterého se organické rozpouštědlo extrahuje, aby se vytvořily mikročástice. Tuto techniku lze provádět při teplotě místnosti a nevyžaduje vodu. Jako jeden příklad, polymer se rozpustí v dichlormethanu, přidá se potřebné množství aktivní složky (například fungicidu) a směs se suspenduje v silikonovém oleji obsahujícím neionický emulgátor, jako je Spán 85 a další dichlormethan. Po přidání roztoku polymeru do silikonového oleje se přidá petrol ether a směs se míchá dokud matricové mikročástice neztvrdnou. Mikročástice se vyjmou filtrací nebo odstředěním, promyjí se petroletherem a suší se pod vakuem.

Při mikrozapouzdření z horké taveniny (E. Mathiowitz a R. Langer, J. Contr. Rel. 5:13-22, 1987, Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy, ed. M. Donbrow, CRC Press, 1992, strany 105-107), se tavenina polymeru smíchá s aktivní složkou, která se v ní může suspendovat nebo rozpustit. Vzniklá směs se suspenduje v nemísitelném rozpouštědle (například silikonovém oleji nebo olivovém oleji), který se zahřeje asi 5 °C nad teplotu tání polymeru za neustálého míchání. Po vytvoření a stabilizaci emulze se chladí, dokud mikročástice neztuhnou. Po ochlazení se mikročástice promyjí dekantaci s petroletherem, aby se vytvořil volně tekoucí prášek. Obvykle mají vzniklé mikročástice průměr menší než asi 50 mikrometrů.

Použití matricových mikročástic na zeminu, semena nebo na rostliny. Formulace s kontrolovaným uvolňováním podle vynálezu se mohou aplikovat na zeminu, kde se uvolňují a případně účinkuje na cílové škůdce buď přímo nebo napřímo, například tak, že jsou napřed přijaty rostlinou, jejíž část je pohlcována škůdcem.

Formulace matricových mikročástic se mohou aplikovat jakýmkoliv konvenčním způsobem včetně, ale ne omezeně: (1) přímé vstřikování formulací (například vodné suspenze mikročástic) do půdy okolo semen nebo do oblasti kořenů rozvíjejících se rostlin (například vstřikování do hloubky 2 cm a v poloměru 3 cm od koruny rostliny, (2) aplikace jako mořidlo zeminy (například do místa, kde zemina je při kapacitě pole), (3) aplikace jako postřik listoví, výhodně v dostatečném objemu, aby se listoví důkladně zvlhčilo, a (4) aplikace přímo na semena jako pokrytí semene. Uvolňování aktivní složky z mikročástic zajišťuje žádaný biologický účinek v zóně aplikace nebo po přijetí aktivní složky rostlinou.

φ · · φ • φ · · φ φ • φ · φ · φ φφφφφ φ φ φφφ •ΦΦΦ φφ φφ φφ φφφφ φφ φφ • φφφφ φ φφφφ φφφ φ φ φ φ φ φφφφ «φ φ φ · φ

Matricové mikročástice a jejich formulace se mohou aplikovat na semena jakoukoliv standardní metodikou pro ošetření semen a materiálem pro pokrytí semene (například s použitím Hege 11 kapalný upravovač semen), mícháním v nádobě (například v lahvi nebo pytli) atd.

Matricové mikročástice podle vynálezu se mohou aplikovat v kombinaci s jinými aktivními složkami, které se dodávají jako formulace s rychlým a pomalým uvolňováním. Matricové mikročástice s pomalým uvolňováním podle podle vynálezu se také mohou aplikovat spolu s formulacemi s rychlým uvolňováním se stejnými nebo odlišnými aktivními složkami (nebo s mikročásticemi obsahujícími stejné aktivní složky), aby se dosáhl například chemický aplikační režim s počáteční vysokou rychlostí uvolňování následovanou pomalejší rychlostí uvolňování po delší časové období.

Krátký popis obrázků

Obr. 1 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 7 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 11 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky kontrol.

Obr. 2 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 8 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 3 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 9 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 4 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 10 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 11 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obrázky 5 a 6 ukazují účinek formulací matricových mikročástic příkladu 11a Alto®

005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na

100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) (Obr. 5) nebo 9 dnů po vysetí (DAP) (Obr. 6) jako procento výšky neošetřených kontrol.

«« «φ • · · 9 9

9 9 9 9

999 · 9 9

9 9 9

9 99 9 9 ·· 9 9 99

9 9 9 « · 9 ♦

9 9 9 9

9» 99 *

9 9 9 9 9

Obr. 7 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 12, NBP 5881012C, NBP 589098A a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 9 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 8 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 12, NBP 589083A, NBP 5890983B a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 9 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 13, NBP 589083C, NBP 5890983D a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 10 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 13, NBP 5890977D a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 11 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 14 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 12 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 15 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 13 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 16 a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g cyproconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 14 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladů 17 a 18, MON 38410 a MON 38411 a Raxil® , když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g tebuconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 11 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

♦· ·· • · « * • · · · • 9 9 9 · 9 9 • 9 9 9 ·· ·· • * · · • · · • · 99 · • · ···· «· • · · * 9 9 « ·· t·

Obr. 15 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladů 19 a 20, MON 24530 a MON 24540 a Opus® , když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých dávkách (g epoxiconazolu na 100 kg semene) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 11 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 16 ukazuje účinek formulací matricových mikročástic příkladu 21 při aplikační dávce 16 g cyproconazolu na 100 kg semene a Alto® 005LS, když se použijí jako ošetření semen pšenice) vyjádřené jako výška klíčící pšenice 8 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 17 ukazuje účinek NBP 6273923C (fenpropimorph (matrice)) a Corbel® (fenpropimorph), když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých aplikačních dávkách vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 18 ukazuje účinek NBP 6248096B (MON46100(matrice)) a neformulovaného MON46100 (MON46100(aceton/voda), když se použijí jako ošetření semen pšenice při různých aplikačních dávkách vyjádřené jako výška klíčící pšenice 10 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol.

Obr. 19 ukazuje účinek aplikací na list MON 38412 a MON 24555, Raxil® a Opus® , na sílu rostlin sóji pět dnů po ošetření (na stupnici 1-5, neošetřené kontrolní rostliny = 5).

Obr. 20 ukazuje účinek MON 24555, Opus® , MON 38412 a Raxil® , když se použijí jako ošetření semen sóji při různých aplikačních dávkách vyjádřené jako procento neošetřených kontrol 9 dnů po vysetí.

Obr. 21 ukazuje účinek proti práškové hnilobě pšenice ošetření semen s použitím MON 38414 (30, 45 a 60 g tebuconazolu na 100 kg semene) a Raxil® (30 g tebuconazolu na 100 kg semene) 42 dnů po vysetí.

Obr. 22 ukazuje účinek proti práškové hnilobě pšenice ošetření semen s použitím MON 38414 a MON 38416 (45 a 60 g aktivní složky na 100 kg semene) a Raxil® (30 g tebuconazolu na 100 kg semene) 44 dnů po vysetí.

Obr. 23 ukazuje kontrolu hnědé rzi pšenice (druhý list) povlakem semen obsahujícími formulace matricových mikročástic 5932839A, MON 24682, MON 24647 (všechny při 32 g cyproconazolu na 100 kg semene) a Alto® 005LS (1 g cyproconazolu na 100 kg semene).

Rostliny se očkovaly 20 dnů po vysetí. Závažnost choroby neošetřených rostlin byla 61,3 %.

• · 4 • 9

9 9 • · ·

• 4 44 4 4 • 44 99 99 • 9 9 9 9

9 9 9 9

4» 9 · 4 * 4 · · « *4 «4 44

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Cyproconazol 3,72 g (96,3% čistota, Sandoz Agro, Ltd., Basilej, Švýcarsko) a 14,3 g polymléčné kyseliny (Chronopol® 95, Chronopol Golden, CO) se rozpustilo ve sklenici za třepání v 156 g dichlormethanu, aby vznikl hydrofobní roztok.

Póly vinyl alkohol 7,5 g (Elvanol® 51-05, Du Pont, Wilmington, DE) se rozpustil za míchání v deionizované vodě za vzniku 1500 g hydrofilního roztoku.

Hydrofobní roztok se přidal do hydrofilního roztoku a směs se intenzivně míchala za vzniku emulze. Míchání pokračovalo jednu hodinu. Mikroskopická prohlídka vzhledu a velikost kapiček oleje v emulzi ukázala, že průměrná velikost kapiček oleje byla v rozmezí 30-50 mikrometrů.

Emulze se pak přenesla do 2 litrové baňky s kulatým dnem a připojila se k rotační odparce, aby se odstranil dichlormethan za sníženého tlaku. Konečný zbytek dichlormethanu se odstranil zahříváním baňky v horké vodní lázni na 40 °C na odparce.

Vzniklá suspenze mikročástic se zfiltrovala na Búchnerově nálevce a filtrační koláč se promyl třemi dávkami deionizované vody, aby se odstranily poslední zbytky ve vodném filtrátu. Filtrační koláč se pak sušil rozprostřením produktu na listu čistého papíru.

Vodný nosný roztok se připravil rozpuštěním močoviny (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) a Methocel® A15LV (Dow Chemical Co., Midland, MI) za míchání ve vodě. Močovina se přidala jako prostředek proti mrazu a Methocel® A15LV jako kombinovaný dispergant a nefytotoxické lepivé činidlo pro použití při ošetření semen. (Hlinková zahušťovadla jako Van Gel® B (R. T. Vanderbilt Co., Inc., Norvalk, CT) se případně přidávají do vodného nosiče, aby se zlepšila viskozita a snížilo se usazování). Suché mikrokapsle se zamíchaly do vodného nosného roztoku, aby se připravila homogenní suspenze.

Složení konečné formulace (NBP 5881024C) je ukázáno níže.

NBP 5881024C
Složení	% hmotn.	Hmotnost (g)	Aktivní složka (“a. i.”)
Cyproconazol @19,88%	17,72	37,32	7,42 g
Močovina	4,49	9,46
Methocel® A15LV	0,05	1,05
Voda, deionizovaná	77,29	162,79	% a.i. (hmotn.) - 3,52

*♦ 9 94· «ft ftft ftft · ftft ft • ftftft * * » ftftft· ftft ftft ft ftftft • · ft • » ♦ ft ft · ftft ftft ftft • ftft ft• ftft ft • ft ftft · • ftft · ·« ftft

	100,00%	210,62	% polymer (hmotn.) =
			14,2

Příklad 2

1,56 g Cyproconazolu (96,3% čistota) a 13,44 g polymeru butyrátu acetát celulózy (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) se rozpustilo ve sklenici za třepání v 82,22 g dichlormethanu, aby vznikl hydrofobní roztok. 1,00 g of Methocel® A15LV and 20 g močoviny se rozpustilo v 64 g deionizované vody, aby se vytvořilo 85 g hydrofilního roztoku.

Hydrofobní roztok se přidal do hydrofilního roztoku a směs se intenzivně míchala, aby se vytvořila emulze. Emulze se míchala 5 minut, aby se vyrovnala. Aby se dále zmenšila velikost částic, emulze se sonifikovala 5,5 minut sonickým dismembrátorem (Model 550 (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) s použitím proměnného rozsahu příkonu. Ochlazení se zajistilo ledovou lázní, aby se teplota udržovala pod 30 °C. Mikroskopická prohlídka ukázala částic v rozmezí 4-5 mikrometrů.

Emulze se přenesla do rotační odparky dichlormethan se vymyl, jak se popisuje v příkladu 1. Vzniklý produkt prošel sítem s 325 oky, aby se odstranily cizí částice a testovala se velikost částic, hustota (při teplotě místnosti) a % aktivní složky.

Vlastnosti matricových mikročástic byly, jak následuje (NBP 5932858):

Vlastnosti (NBP 5932858) % aktivní složky 1,72

Hustota g/ml 1,11

Velikost částic mikrometry 4,4.

Příklad 3

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené níže. U NBP 5932866 se dichlormethan odpařil za atmosférického tlaku. U NBP 5932869, NBP 5932889A, NBP 5932889B a NBP 5932893 se dichlormethan odpařil na rotační odparce za sníženého tlaku. U NBP 5932893 se přidal Van Gel® B jako součást vodného nosného media. Poly(methylmethakrylát) (PMM) a polystyren (molekulová hmotnost 50000) se získaly od Polysciences lne. (Warrington, PA)

44 ·4 4444 44 44 •4 4 4 4 4 · φ φ 4 * • · · · · · 4 4 9 ·

449 49 4 409 94 4 ♦ · · Φ * Φ 4 4 4 Φ ······ «· 4 4 4 9 0 4

	% hmotn.
Složky	5932866	5932869	5932889 A	5932889 B	5932893
Cyproconazo*	1,50	1,50	3,00	3,00	3,00
Chronopol® 95	13,50	13,50	-	-	-
PMM	-	-	6,00	12,00	6,00
Polystyren	-	-	6,00	-	6,00
Methocel® A15LV	1,00	1,00	1,06	1,06	-
Močovina	20,00	20,00	-	-	-
Van Gel® B	-	-	-	-	3,40
Voda	64,00	64,00	83,94	83,94	81,60
	100,00%	100,00%	100,00%	100,00%	100,00%

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru Suspenze matricových mikročástic měla následující vlastnosti:

Vlastnosti	5932866 5932869 5932889A 5932889B 5932893

Hustota R.T..g/mL	1,10	1,12	1,02	1,04	1,02
Prům. vel. částic, μ	1,18	2,52	1,84	1,13	138,50
Viskozita*. R.T. mPa.s (cps)	vřeteno #18	vřeteno # 18	vřeteno #18	vřeteno #18	vřeteno #31
R.P.M. - 60	11,30	27,90	9,52	16,70	185
30	12,40	28,60	9,92	17,00	329
12	15,50	32,60	11,00	17,00	765
6	22,00	36,10	13,50	21,00	1520

* Viskozita v centipoa (cps) se stanovila pomocí viskozimetru Brookfield (model LVT, Brookfield Engineering Laboratories, Stoughton, MA) podle instrukcí výrobce a odpovídá jednotkám mPa.s.

Příklad 4

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené níže:

9 9

0 0

999 99 9

9 9 9

9999 99 99 ·· ····

99 • * 9 9 9 • 9 · 0 ·

9 9 9 9 9

9 9 9 9 · 9 9 9 9

Složky	% hmotn.
	NBP 5932889A	NBP 5932898	NBP 6061401
Cyproconazol*	3,00	3,00	3,00
Chronopol® 95	-	-	6,00
PMM	6,00	6,00	-
Polystyren	6,00	6,00	6,00
Methocel® A15LV	1,06	1,00	1,00
Van Gel® B	-	2,06	2,06
Voda	83,94	81,94	83,94
	100,00%	100,00%	100,00%

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze matricových mikročástic se analyzovaly na následující vlastnosti:

Vlastnosti	5932889A	5932898	6061401
Hustota. R.T.. g/mL	1,02	1,04	1,04
Prům. vel. Částic, μ	1,84	2,06	6,15
Viskozita. R.T. mPa.s (cps)	vřeteno # 18	vřeteno #18	vřeteno #18
R. P. M.*-60	9,52	22,70	21,70
30	9,92	26,20	22,90
12	11,00	34,60	25,40
6	13,50	41,60	27,00

* Otáček za minutu.

Příklad 5

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené níže. Hydrofilní a hydrofobní roztoky se sonifikovaly, aby se vytvořila emulze pro přípravu NBP 593298 a homogenizovaly se s Silverson L4R laboratorním homogenizérem (Silverson Machines, Inc.,East Longmeadow, MA), aby se vytvořila emulze pro přípravu NBP 6061406 a NBP 60614069.

Složky	% hmotn.
	5932898	6061406	6061409
Cyproconazol*	3,00	3,00	3,00
PMM	6,00	6,00	6,00
Polystyren	6,00	6,00	6,00

···<

• · · · »·· · · · · • · · « · • · * · v · ·· ·· * · · ♦ • · · · • · · · • * ♦ * *· ♦♦

Methocel® A15LV	1,00	1,00	1,00
Van Gel B	2,06	2,06	3,00
Voda	81,94	81,94	81,00
	100,00%	100,00%	100,00%

100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze matricových mikročástic měly následující vlastnosti:

Vlastnosti	5932898 6061406 6061409
Hustota, R.T., g/ml	1,04	1,04	1,05
Prům. vel. částic, μ	2,06	3,55	3,20
Viskozita, R.T., mPa.s (cps)	vřeteno #18	vřeteno #18	vřeteno #31
R.P.M. - 60	22,70	47,40	192
30	26,20	52,40	265
12	34,60	61,80	446
6	41,60	74,60	685

* Struktura gelu.

Příklad 6

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené v tabulce níže. Hydrofilní a hydrofobní roztoky se homogenizovaly v chladící lázni při přípravě NBP 6061413 a NBP 6061415, nikoliv při přípravě NBP 6061406 a NBP 6061411.

Složky	% hmotn.
	6061406	6061411	6061413	6061415
Cyproconazol*	3,00	3,00	3,00	3,00
PMM	6,00	6,00	6,00	6,00
Polystyren	6,00	6,00	6,00	6,00
Methocel® A15 C	-	0,75	1,75	0,75
Methocel® A15LV	1,00	-	-	-
Van Gel® B	2,06	-	-	-
Voda	81,94	84,25	83,25	84,25
	100,00%	100,00%	100,00%	100,00%

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

·· ·· ♦· φ φ · · · · • · · · · • ··· · · · • · φ · • φ φ φ φφ ·· • ·· · ·· ·· • · · · · φ · · · φ • · · · · « φ · φ φ · · φφ *φ φφ

VLASTNOSTI	6061406 6061411 6061413 6061415
Hustota, R.T., g/mL	1,04	1,02	1,02	1,03
Prům. vel. částic, μ	3,55	69,51	11,00	55,56
Viskozita, R.T. mPa.s (cps)	vřeteno # 18	vřeteno # 31	vřeteno # 34	vřeteno #31
R.P.M- 60	47,40	97,70	980	82,70
30	52,40	101,00	1020	86,80
12	61,80	105,00	1060	87,70
6	74,60	125,00	1150	95,20

Příklad 7

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené níže. V tabulce níže pokusy označené (a) využívaly preparace mikročástic, které se nefiltrovaly, nepromyly a nesušily na vzduchu, pokusy označené (b) využívaly preparace mikročástic, které se filtrovaly, promyl a sušily na vzduchu, jak se popisuje v příkladu 1.

Složky	% hmotn.
	(b)	(a)	(b)	(a)	(b)
	MON 24682	NBP 6061422	NBP 6061426	NBP 6061430	NBP 6061436B
Cyproconazol*	3,52	3,52	3,52	3,52	3,52
Polymer**	14,22 (1)	13,56 (2)	13,62 (2)	13,56 (3)	14,70 (3)
Močovina	4,49	4,50	4,46	4,50	4,46
Methocel® A15LV	0,50	0,50	0,47	0,50	0,49
Voda	77,29	77,92	77,93	77,92	76,83
	100,00%	100,00%	100,00%	100,00%	100,00%

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

** (1) Cronopol® 95, (2) butyrát acetát celulózy, (3) póly (methy lmethakrylát). Suspenze matricových mikročástic se analyzovaly na následující vlastnosti:

00 • 0 0 0 • · · · • · 0 0 * 0 0 0

0· 00

000 · 0 • 0 0 • · • · 0000 00

0·· 0 ♦ <

»· 00

Vlastnosti	MON 24682 6061436B	6061422	6061426	6061430
% aktivní složky	3,19	3,62	3,47	4,41	3,53
Prům. vel. částic, μ	40,00	193,00	75,00	22,80	70,00

Formulace připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici. Semena pšenice se odvážila do 50 g porcí pro každé ošetření. Zásobní roztoky se připravily odvážením formulací a přidáním deionizované vody, aby se připravily zásobní roztoky vysoké dávky pro každou formulaci, pak se z těchto zásobních roztoků připravily ředění, aby se zabezpečily různé aplikační dávky.

Pro ošetření semen se použil laboratorní roto statický ošetřovač semen Hege lis 200 g malou kapacitou válce pro ošetření semen.

Před každým ošetřením se vzorková dávka semen ošetřila formulací nebo čistým rozpouštědlem, aby se smočil/znečistil válec, jak výrobce doporučuje. Tento vzorek semen se pak vyhodil. Ošetření se pak natáhlo do injekční stříkačky a pomalu se aplikovalo na novou 50 g dávku semen v ošetřovací semen. Jakmile se semena zdála být suchá (obvykle po 30-45 sekundách), dala se do 1 litrového plastické kádinky a pak se přenesla do 125 ml skleněné nádoby pro skladování. Víčko nádoby se nechalo po několik hodin volné, aby se zajistilo, že semena úplně vyschnou. Ošetření se aplikovala v pořadí od nejnižší dávky k nejvyšší dávce pro každou formulaci. Po nejvyšší dávce každé formulace se ošetřovač semen pečlivě vytřel absolutním ethanolem na papírovém ubrousku, aby se zabránilo kontaminaci příští formulace. Injekční stříkačka, nálevka a kádinka se také opláchly ethanolem. Tento postup se opakoval u každé testované formulace.

Na konci všech ošetření anebo když se měnily aktivní složky během průměru stejné studie, použili jsme také další čisticí krok s roztokem mýdla ve vodě a další vytření ethanolem.

Aby se zjistila bezpečnost formulací, semena pšenice, která byla předem ošetřena testovanými formulacemi, se vysela do standardních 4 palcových čtvercových květináčů obsahujících sterilizovanými Dupo plavenou hliněnou zeminou. Vysévání se provádělo dávkou 12-25 semen na květináč, se čtyřmi duplikátními květináči na každou dávku ošetření. Semena se pokryla asi 2 cm stejné zeminy a inkubovaly se s 12. hodinovou fotoperiodou, při 50% relativní vlhkosti při 18 °C. Osm až 12 dnů po vysetí (DAP) se každý duplikátní květináč vyhodnotil na *

• · 4 · « ·

·· 44 * 4« « « 4 4 4

4 4 4

44 počet vzešlých sazenic a určila se průměrná výška vzešlých sazenic. Hlavním ukazatelem účinku formulace byla míra výšky sazenic relativně k výšce kontrolních rostlin (neošetřené = 100%).

Obr. 1 ukazuje bezpečnost těchto ošetření vyjádřené jako výška klíčící pšenice 11 dnů po vysetí (DAP) jako procento výšky neošetřených kontrol. Pro srovnání se zahrnul Alto® 005LS (Sandoz Agro, Ltd., Basilej, Švýcarsko) jako standardní nematricová formulace s rychlým uvolňováním pro kapalinové ošetření semen cyproconazolem.

Příklad 8

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající složení uvedené níže. Butyrát acetátu celulózy se získal od (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). SMA® 1440A pryskyřice, kopolymer styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, se získal od Sartomer Co. (West Chester, PA). Poly(methylvinyl ether-kyselina maleinová) se získal od (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Dřevěná pryskyřice se získala od Westvaco (Charleston Heights, NC).

Složky	% hmotn,
	NBP 59328 75A	NBP 59328 75B	NBP 59328 78A	NBP 59328 84	NBP 59328 86
Cyproconazol*	1,50	1,50	1,50	1,50	1,50
Butyrát acetátu celulózy	6,75	-	-	6,75	-
SMA® 1440A Resin	6,75	13,50		—	—
Dřevěná pryskyřice	-	-	13,50	-	-
Poly(methylvinyl ether/maleinová kyselina				6,75
PMM	-	-	-	-	13,50
Methocel® A15C	1,00	1,00	1,00	1,00	1 00
Voda	84,00	84,00	84,00	84,00	84,00
	100,00	100,00	100,00	100,00	100,00

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 2 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s

Alto 005LS.

9999

9

Příklad 9

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení. Lactel® BP-400 se získal od (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO).

·» 99 • 9 9 9

9 9 • ftftft • · ···· ·· • · ft

9 9

9 9 ft · · · ftft ftft ” w v w ft ftft · • · · · · • ·· · • ft ftft

Složky	% hmotn.
	NBP 5932814A	NBP 932814B
Cyproconazole *	3,0	3,0
Lactel® BP-400	-	12,0
Butyrát acetátu celulózy	12,0	-
Methocel® A15LV	1,0	1,0
Voda	84,0	84,0
	100,0	100,0

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 3 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 10

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení.

Složky	% hmotn.
	932801A-2 (5932805-3)	932801B-2 (5932805-3)
Cyproconazole *	3,00	3,00
Chronopol® 95	10,92	6,12
Polystyren	1,20	6,00
Methocel® A15LV	1,56	1,61
Voda	83,32	83,27
	100,00	100,00

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

·» • · · · • · · • ··· • · ···· ··

1191

9 • 99

1 » • 9 1 1

99 ·« • · 1 1

9 1

19 9

9 9 1 •1 99

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 4 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 11 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 11

Složky	% hmotn.
	5881012C	5890935G
Cyproconazol*	20,1	3,04
Chronopol® 95	79,9	10,41
Methocel® A15LV	-	1,27
Voda	-	85,28
	100,0	100,0

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 5 a 6 ukazují bezpečnost NBP 58881012C 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 12

Složky	% hmotn.
	5881012C	5890983A	5890983B
Cyproconazol*	20	22,3	30
Chronopol® 95	80	77,7	70
	100	100,0	100

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 8 ukazuje bezpečnost NBP 5890983A a NBP 5890983 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

· »4 • 4 · · 4»

4 4 4 4

44444 4

4 4 4

4444 44 44 • 4 444«

4

4 4 4 4

4 4 4 4 4 ·· 4 4 4 4 • 4 44 44

Příklad 13

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily s použitím složek uvedených níže suspenze matricových mikročástic mající následující složení. Biopol® D400G se získal od Monsanto Company (St. Louis, MO). Kopolymer vinylpyrolidin-vinyl acetát (PVP/VA S-630), který se použil jako dispergant, se získal od GAF Chemicals Corp. (Wayne, NJ).

Složky	% hmotn.
	5890983C	5890983D	5890977D
Cyproconazol*	10	22,3	22,3
Biopol D400G	-	77,7	-
Chronopol® 95 + inertní látky	90		77,7**
	100	100,0	100,0

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru a inertních látek.

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 9 ukazuje bezpečnost NBP 5890983A a NBP 5890983D 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS. Obr. 10 ukazuje bezpečnost NBP 5890977A 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 14

Složky	% hmotn.
	5881009B	5890935D	5890935E
Cyproconazol	*3,17	*3,01	*3,01
Elvanol® 51-05	1,64	1,26	1,26
Methocel® A15LV	-	-	-
Chronopol® 50	11,06	-	-
Chronopol® 95	-	10,43	-
Chronopol® 100	-	-	10,43
Voda	84,13	85,30	85,30
	100,00	100,00	100,00

·· * »4 • · «

··»* ·· ··· · ·« ·* ···· ·· • · • · * · • · · t· ·· ·· • · « · • · · · • · · · • · · · tt 99

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 11 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 15

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily s použitím složek uvedených níže suspenze matricových mikročástic mající následující složení.

Složky	% hmotn.
	5890935F	5890935G	5890935H
Cyproconazole	*3,05	*3,04	*3,04
Elvanol® 51-05	-	-
Methocel® A15LV	1,25	1,27	1,27
Chronopol® 50	10,40
Chronopol® 95	-	10,41
Chronopol® 100	-	-	10,41
Voda	85,30	85,28	85,28
	100,00	100,00	100,00

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 12 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

Příklad 16

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení. Lucite® číslo 29 se získal od Polysciences (Warrington, PA).

Složky	%, hmotn.
	5932844A0)	5932839A
Cyproconazol	2,95*	1,48*
Lučit® #29	11,80	-
Butyrát acetátu celulózy		13,27
Methocel® A15LV	1,00	1,00
Voda	84,25	84,25
	100,00	100,00

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

i

Suspenze připravené v tomto příkladě se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 13 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s Alto 005LS.

• 4 4 4 • 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4

44444 ·

4 4 4 4

4444 44 «4 9 9

Příklad 17

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení a vlastnosti. Tebuconazol se získal od Bayer (Leverkusen, Německo).

Složky (MON 38410)	% hmotn.
Tebuconazole	*3,52
Chronopol® 95	14,35
Močovina	4,49
Methocel® A15LV	0,50
Voda	77,14
	100,0

Vlastnost
% Tebuconazol	3,37
Hustota, g/cm³, 24 °C	1,05
Průměrná velikost částic, μ	41

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Příklad 18

Podle obecného postupu příkladu 1 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení a vlastnosti.

Složky (MON 38411)	% hmotn.
Tebuconazole	*2,95
Lučit® č. 29	11,80
Methocel® A15LV	1,00
Voda	84,25
	100,0

• · · · » · · 4 » toto 1 » · · 4

Vlastnost
% Tebuconazol	3,34
Hustota, g/cm³, 24°C	1,03
Průměrná velikost částic, μ	1,9

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Mon 38410 a Mon 38411 se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 14 ukazuje bezpečnost těchto ošetření 10 dnů po vysetí v srovnání s Raxil® (Bayer, Leverkusen, Německo), komerční formulace s rychlým uvolňováním tebuconazolu.

Příklad 19

Podle obecného postupu příkladu 2 se připravily suspenze matricových mikročástic mající následující složení a vlastnosti.

Složky (MON 38411)	% hmotn,
Tebuconazol	*2,95
Lucite® # 29	11,80
Methocel® A15LV	1,00
Voda	84,25
	100,0

Vlastnost
% Tebuconazole	3,34
Hustota, g/cm³, 24°C	1,03
Průměrná velikost částic, μ	1,9

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Příklad 20

•· ·· «· * · · · · » • · · · · · • ··· · · · • 4 4 · · *··· ·· ·· ·· ··

Složky (MON 24540)	% hmotn.
Epoxiconazol	*2,95
Lučit® # 29	11,80
Methocel® A15LV	1,00
Voda	84,25
	100,00
Vlastnost
% Epoxiconazol	3,18
Hustota, g/cm³, 24°C	-
Průměrná velikost částic, μ	-

* 100 % báze aktivní složky. Kompenzace na čistotu polymeru.

Mon 38410 a Mon 38411 se aplikovaly na pšenici s použitím postupu uvedeného v příkladě 7. Obr. 15 ukazuje účinnost těchto suspenzí ve srovnání s Opus® (Bayer, Leverkusen, Německo), komerční formulace s rychlým uvolňováním epoxiconazolu. Maximální bezpečná aplikační dávka Opusu pro ošetření semen je asi 1 g/100 kg semen.

Příklad 21

Semena pšenice se pokryla vodnou suspenzí matricových mikročástic podle vynálezu s použitím následujícího postupu.

Použily se následující koncentráty tvořící film založené na vodě: Blue Opacoat-AG (Colorcon, West Point, PA), Sepiret 8127 Rouge (Seppie, Paris, Francie) a Sepiret 2020 A Rouge, (Seppie, Paris, Francie). Formulace Sepiret a Opacoat barevné kompozice tvořící film navržené pro aplikaci tenkých filmů biodegradovatelných polymerů, obvykle derivátů celulózy přírodního původu.

Pro nanesení přesného povlaku specifického množství na semeno se použil povlakový systém (Coating Machinery Systems (CMS) PSC-5, Ames, IA). Koncentráty tvořící film založené na vodě se obvykle zředily před aplikací na 15 % hmotnostních pevných látek vodou. Formulace matricových mikročástic se obvykle zředily na 0,12 % hmotnostních aktivní složky a nanesly se na semena jako oddělený nános (s použitím postupu příkladu 7) nebo v kombinaci s nánosy filmu založeného na vodě. Sušicí teploty byly obvykle přívod/odvod při 37,78 θΟ/32,22 θϋ s průtokem 8,49 nP/minuta. Přidaná hmotnost nánosů se obvykle vypočítala při 2 % hmotnostních, což dává jednotný nános. Po pokrytí se jednotlivé pokryté dávky semen analyzovaly na obsah cyproconazolu (nalezeno aktivní složky (a.i.)).

• · · · · · · · · · ···· ·· ·· ·· ··

Formulace:	5890993	5890996 C	5932801 A2	5932801B2
Ošetření:	5932805-1	5932805-2	5932805-3	5932805-4
Semeno pšenice	Q.S.	Q.S.	Q.S.	Q.S.
Cyproconazol @ 100%	176, 88, 44,	176, 88, 44,	176, 88, 44,	176, 88, 44,
(ppm)	11	11	11	11
Nalezeno a.i. (ppm)	139, 63, 29,-	120, 50, 18, -

Formulace:	5872190	Alto 005LS
Ošetření:	5932806-1
Semeno pšenice	Q.S.	Q.S.	Q.S.
Cyproconazole @100%	176, 88, 44, 11 ppm	176, 88, 44, 22, 11 ppm	176, 88, 44, 22,11 ppm
Nalezeno a.i., ppm (2)	156, 77, 36, -	127, 71, 32, 16, 8	129, 52, 27, 14,-

Q.S. = Množství dostatečné k zředění na požadovanou koncentraci.

Formulace:	5881012C	5881012C	581012C	5890996B
Ošetření:	5932803-1	5932803-2	5932803-3	5932803-4
Semeno pšenice	Q.S.	Q.S.	Q.S.	Q.S.
Methocel® A15LV	110 ppm	-		100 ppm
Močovina	-	890 ppm	-	-
Sulfát amonný	-	-	890 ppm
Cyproconazol @100% (ppm)	88, 44, 22, 11	88, 44, 22, 11	88, 44, 22, 11	88, 44, 22, 11
Nalezeno a.i., ppm (1)	43,25, 15,-			51, 17, 10, -

• · · · ·

• · 9 4 ·4 4 « 4 9 9 * * * ř

4 9 *

44

Formulace:	5890935G
Ošetření:	5932803-5
Semeno pšenice	Q.S.
Methocel® A15LV	-
Cyproconazole @ 100% (ppm)	88, 44, 22, 11
Nalezeno a.i., ppm (1)	33, 25, 9, -

Obr. 16 ukazuje bezpečnost těchto suspenzí při aplikační dávce 16 g aktivní složky na 100 kg semen ve srovnání s Alto 005LS. Rozdíly v bezpečnosti mezi formulacemi matricových mikročástic při nižších aplikačních dávkách byly méně výrazné.

Příklad 22

V tomto příkladě použité polymery byly poly(methylmethakrylát) (350000 molekulová hmotnost, Polysciences lne., Warrington, PA) nebo poly(styren/malein anhydrid) (75 % styrenu, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Organickým rozpouštědlem byl dichlormethan (analytická čistota Americké Chemické Společnosti).

Použitá dispergační činidla byly Methocel A15LV (methyl celulóza, Dow Chemical, Midland, MI); Elvanol 51-05 (polyvinyl alkohol, DuPont, Wilmington, DE); nebo Yelkinol P (lecithin, Archer Daniels Midland Company, Decatur IL). Použité aktivní složky byly epoxiconazol (technická čistota @ 96,2 %, BASF) nebo tebuconazol (technická čistota @ 98,6 %, Bayer).

Všechny formulace se připravily způsobem odpaření emulze/rozpouštědlo olej ve vodě (O/V). V krátkosti, polymer a aktivní složka se rozpustily v dichlormethanu, aby vznikl hydrofobní roztok (15 % pevných látek). Hydrofobní fáze (olej, O) se přidala k ochlazenému (pod 5 °C) 0,5 - 3,0 % vodnému roztoku dispergačního činidla (voda, V) a střihalo se na Silverson Model L4R homogenizéru (síto s velkými dírami, 1,5 cm) po 5 minut při nastavení číslo 5, aby vznikla emulze. Organické rozpouštědlo se pak odpařilo za míchání při teplotě místnosti v digestoři. Vzniklé preparace mikročástic normálně prošly sítem s 60 oky, aby se odstranily velké částice. Tyto mikročástice se mikroskopicky prohlédly mikroskopem Leitz Dialux 20EB, aby se ověřila morfologie krystalů a mikročástic a testovala se velikost částic s • · · · použitím analyzátoru velikosti částic Coulter LS-130, aby se stanovila průměrná velikost částic a počet modů v distribuci.

Pro ověření rychlosti uvolňování aktivní složky z formulací mikročástic se podíl formulace dal do sklenice při koncentraci, při které se očekávalo, že uvolňování aktivní složky bude menší než 1/2 hladiny rozpustnosti ve vodě. Pak se přidalo rozpouštědlo (voda nebo 10 % aceton). V různých intervalech se sklenice třepaly (200 krát v čase 0, 20 krát v jiných intervalech). Podíl se vyňal, centrifugo val se 15 minut při 2700 otáčkách za minutu a filtroval se přes 0,45 mikrometrový PTFE filtr (po vyhození prvých 2 ml). Testy na epoxiconazol a tebuconazol se prováděly HPLC. Připravily se suspenze mikročástic mající následující složení;

Formulace matricových mikročástic obsahující epoxiconazol

Kompozice (%, hmotn.)

Složky	6239153A	6239162	6151653C
Epoxiconazol	3,00	3,00	3,00
(100% báze a. i.)
Polymer	27,00 (a)	12,00 (b)	12,00 (b)
Methocel® A15LV	-	-	2,00
Elvanol® 51-05	4,00	-	-
Yelkinol® P	-	1,50	-
Voda	83.50	83.50	83,00
	100,00	100,00	100,00
Vyhodnocení
Nálož a.i.	10%	20%	20%
(% hmotn.)
Poměr O/V v emulzi	1/5	3/2	3/2
Prům. vel. částic,	11,35 μ, trimodální	1,37 μ, bimodální	3,04 μ, bimodální
mod:
Init. % a.i. /	3,57/0,18	3,44/1,00	3,94 / 0,2
% REA*

· · 0 * • · · · · · • · · 0 · • «00 0 » · « 0 0 0 •000 0· 0 0

0· 0 0 • 0 0 0 « • 0 0 0 «

0»0 » · » *0 0 0 0« * 0 · · · 0 * (a) Poly(methylmethakrylát), (b) Poly(styren/ anhydrid kyseliny maleinové).

Formulace matricových mikročástic obsahující tebuconazol

Složky	6248014A	Kompozice (%, hmotn.) 6248014B	6248014C
Tebuconazole	3,00	4,50	6,00
(100 % báze a.i.)
Polymer*	12,00 (a)	10,50 (a)	9,00 (a)
Methocel® A15LV	1,00	1,00	1,00
Voda	84,00	84.00	84,00
	100,00	100,00	100,00
Vyhodnocení
Nálož a.i., %	20	30	40
Poměr O/V v emulzi	3/2	3/2	3/2
Průměrná velikost	9,14 μ, bimodální 7,36 μ, bimodální	13,48 μ, trimodální
částic, μ
Poč. % a.i. / %	3,25 / 0,68	4,92/2,01	5,75 / 2,21

REA:

* (a) Poly(methylmethakrylát), (b) Poly(styren/ anhydrid kyseliny maleinové).

Mimo to se stanovila fytotoxicita formulací pro pšenici a rychlosti uvolňování do vody a do 10 % acetonu. Tato informace je shrnuta níže.

Formulace matricových mikročástic obsahující epoxiconazol Fytotoxicita a rychlosti uvolňování

Formulace	6239153A	6239162	6151653C
% uvolnění, 269
hodin:
- Voda:	0,9	6,56	1,63
- 10 % Aceton:	9,71	46,7	26,6
Bezpečnost semene -25 g/l00 kg	96,9% (25,4 g)	66,4% (12,4 g)	92,2% (28,6 g)
semene
-50 g/l 00 kg	91,8% (46,4 g)	20,0% (42,2 g)	75,4% (53,3 g)

• · φ* « · · · · · • · · · · • «· · · · · • · · · • ··· ·· « * • · 9 9 • · 9 · • · · · • ♦ · » * η · · • ♦ · · semene

Opus®, 8 g/100 kg 22,5% (6,4 g)

Kontrola (0 g/100 100% (Og) kg) * procento výšky neošetřených kontrol. Čísla v závorkách jsou gramy aktivní složky nalezené testem na 100 kg ošetřených semen.

Formulace matricových mikročástic obsahující tebuconazol

Fytotoxicita a rychlosti uvolňování	6248014C
Formulace	6248014A	6248014B
% uvolnění, 269 hodin - Voda:	2,53	3,79	14,5
-10 % Aceton:	24,9	46,2	60,0
* Bezpečnost semene - 50 g/100 kg	89,7% (47 g)	78,4% (45 g)	70,3% (49 g)
semene - 75 g/100 kg	83,8% (70 g)	77,3% (72 g)	68,7% (78 g)
semene - 100 g/100 kg	78,4% (95 g)	74,1% (92 g)	60,8% (99 g)
semene Raxil®, 25 g/100 kg Kontrola (0 g/100	40,3% (26 g) 100% (Og)

kg) * procento výšky neošetřených kontrol. Čísla v závorkách jsou gramy aktivní složky nalezené testem na 100 kg ošetřených semen.

Mikročástice mající stejnou nálož polymeru a aktivní složky (6239162 versus 6151653C), ale rozdílné dispergační činidlo, měly mnohem rozdílnější rychlosti uvolňování a odpovídající rozdíly při zabezpečení pšenice. Vysoká rychlost uvolňování a vyšší počáteční % REA u

6239162 dává produkt mající špatné zabezpečení pšenice. Avšak stejná nálož ve stejném polymeru dává předpis s nižší rychlostí uvolňování a snadno extrahovatelnou aktivní složkou • φφφ φ

«

I I » * (REA) a vyšším zabezpečením pšenice. Mimo to rychlosti uvolňování aktivních složek jsou vyšší (a zabezpečení pšenice se podle toho snižuje), když se nálož mikročástic zvýšila.

Tato studie ukazuje, že rychlosti uvolňování se mohou měnit zpracováním a náloží aktivní složky (koncentrace) v matricové mikročástici. Když se nálož mikročástic zvýšila, rychlosti uvolňování se zvýšila podobně. Nižší rychlosti uvolňování mají tendenci k vyššímu zabezpečení pšenice. Když se použijí různá dispergačního činidla pro přípravu emulzí, je ovlivněna kvalita emulzí a rychlosti uvolňování ze vzniklých mikročástic.

Poly(methylmethakrylát) a poly(styren-/malein anhydrid) jsou užitečné polymery pro produkci mikročástic, které zvyšují zabezpečení pšenice epoxiconazolem a tebuconazolem.

Příklad 23

Polymer použitý v tomto příkladě byl poly(styren-/malein anhydrid) (75% styren, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Všechna organická rozpouštědla měla analytickou čistotu Americké Chemické Společnosti). Použité dispergačni činidlo byl Methocel® A15LV (methyl celulóza, Dow Chemical, Midland, MI). Použité aktivní složky byly triazolový fungicid triticonazole (technický @ 91.8 %, Rhóne-Poulenc Ag Co., Research Triangle Park, NC), herbicid triallate (technický MON 46100 (technický @ 95 %; Monsanto Company, St. Louis, MO), herbicidní zabezpečovač furilazole (MON 13900, technický @ 95 %; Monsanto Company, St. Louis, MO); insekticid chlorpyrifos (s vysokou čistotou morfolinového typu fenpropimorph (použitý jako je ve formě formulace 750 g/1 Corbel® , BASF AG, Limburgerhof, Germany); fungicid karbamoyl imidazolového typu prochloraz (s vysokou čistotou Formulace matricových mikročástic se připravily způsobem odpaření emulze/rozpouštědlo olej ve vodě (O/V). V krátkosti, polymer a aktivní složka se rozpustily v dichlormethanu při teplotě místnosti, aby vznikl hydrofobní roztok (15 % pevných látek). Tato olejová fáze se přidala k ochlazenému (pod 5 °C) 0,5 - 3,0% vodnému roztoku dispergačního činidla (voda, V) a střihalo se na Silverson Modl L4R homogenizéru (síto s velkými dírami, 1,5 cm) po 5 minut při nastavení číslo 5, aby vznikla emulze. Organické rozpouštědlo se pak odpařilo za míchání při teplotě místnosti v digestoři. Vzniklé formulace normálně prošly sítem s 60 oky, aby se odstranily velké částice, a pak se vyhodnotily. Mikročástice se mikroskopicky prohlédly mikroskopem Leitz Dialux 20EB, aby se ověřila morfologie krystalů a mikročástic a testovala se velikost částic s použitím analyzátoru velikosti částic Coulter LS-130, aby se stanovila průměrná velikost částic a počet modů v distribuci.

Připravily se testované komposice a vyhodnotily se jejich fyzikální vlastnosti. Dva použité předpisy jsou popsány níže. Předpis A byl nezbytný pro triticonazol, protože dochází k růstu • · * · · « ft ft · · ft ··♦··· ft··» · ft··· ftft·· ··*· ·· ftft «« ·· ft* mnoha krystalů, když se použije předpis . Předpis A dává 20% nálož aktivní složky pro mikročástice a předpis A dává 5% nálož.

Předpis (%, hmotn.) ft · ft ·

Složkv	Předpis A
Aktivní složka	3,00
Poly( styren/maleino v	12,00
ý anhydrid) 75:25
Methocel® A15LV	2,00
Voda	83,00
	100,00

Předpis B

0,75

14,25

2,00

83,00

100,00

Předpis Reference
Aktivní složka	Reference	Předpis prům. velikost tu)
Triticonazol	NBP 6256301	B	~ 5
MON 46100	NBP 6248096B	A	5.4
Fenpropimorf	NBP 6273923C	A	2.7
Furilazole	NBP 6237196-4	A	~5
Triallate	NBP 6237196-3	A	~5
Chlorpyrifos	NBP 6237196-2	A	~5
Prochloraz	NBP 6237101	A	4.8

Analýza velikosti částic se prováděla u MON 46100 a formulací fenpropimorphu, pro jiné formulace se použily odhady z fotografií.

Obr. 17 ukazuje účinek NBP 6273923C (fenpropimorph (matrice)) 10 dnů po vysetí, když se použije jako ošetření semen pšenice při dávkách 50-200 g a.i./100 kg semene ve srovnání s Corbel® komerční formulace s rychlým uvolňováním fenpropimorphu.

ftft ftft • · · • · · ft · · · • · ftftft ftft • · ’ i :

ft ft • ftft ♦ ft ftft ft ·» ftftft#

Obr. 18 ukazuje účinek NBP 6248096B [MON 46100 (matrice)] 10 dnů po vysetí, když se použije jako ošetření semen pšenice při dávkách 50-200 g a.i./100 kg semene ve srovnání s neformulováným MON 46100 [MON 46100 (Aceton/H2O)].

Příklad 24

Polymery použité v tomto příkladě byly póly (methy lmethakrylát) (350000 molekulová hmotnost, Polysciences lne., Warrington, PA) a poly(styren-/malein anhydrid) (75% styren, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Všechna organická rozpouštědla měla analytickou čistotu Americké Chemické Společnosti). Použité dispergační činidlo byl Methocel® A15LV (methyl celulóza, Dow Chemical, Midland, MI).

Mikročástice se připravily způsobem odpaření emulze/rozpouštědlo olej ve vodě (O/V). V krátkosti, polymer a aktivní složka se rozpustily v dichlormethanu při teplotě místnosti, aby vznikl hydrofobní roztok s 15 % pevných látek (olejová fáze, O). Tato olejová fáze se přidala k ochlazenému (pod 5 °C) 0,5 - 3,0% vodnému roztoku dispergačního činidla (vodný roztok, V) a střihalo se na Silverson Modl L4R homogenizéru (síto s velkými dírami, 1,5 cm) po 5 minut při nastavení číslo 3, aby vznikla emulze. Rozpouštědlo se pak odpařilo za míchání při teplotě místnosti v digestoři. Provedly se testy koncentrace aktivní složky a další odpařování vody se provádělo, aby se dostala vypočtená konečná koncentrace. Vzniklé mikročástice prošly sítem s 60 oky, aby se odstranily velké částice, a pak se vyhodnotily. Provedla se řada vyhodnocení, včetně mikroskopické prohlídky mikroskopem Leitz Dialux 20EB, pH, hustoty, viskozity a distribuce velikosti částic analyzátorem velikosti částic Coulter LS-130.

Formulace pro ošetření semen, jejich fyzikální vlastnosti a údaje o fyto toxicitě ze skleníkových testů se popisují níže. Použitá dispergační činidlo pro v3echny formulace bylo Methocel® A15LV s vyj9mkou MON 24531. Tato formulace ukazovala lepší zpracování s Elvanol 51-05 jako dispergantem.

Formulace pro ošetření semen

% (hmotn.) Složkv	MON 24531	MON 24532	MON 24533	MON 24534	MON 38413	MON 38414	MON 38415	MON 38416
Epoxiconazol	3,00*	3,00*	3,00*	3,00*	-	-	-	-
Tebuconazol	-	-	-	-
					10,00*	10,00*	10,00*	10,00*
Polymer

27,00 12,00 27,00 12,00 40,00 15,00 40,00 15,00 • « « φ • * · · « * · ♦ ♦ » · · (1) (2) (2)

Meth.

celulóza 1,86 1,00

Polyviny

Alkohol 3,85 Voda

66,15 83,14 69,00

100,00 100,00 100,00 * 100 % báze aktivní složky.

(1)	(2)	(2)	(1)	(1)
1,50	1,40	1,70	1,40	1,58

83,50	48,60	73,30	48,60	73,42
100,00	100,00	100,00	100,00	100,0C

Polymery: (1) poly(methylmethakrylát); (2) kopolymer poly(styren-anhydrid kyseliny maleinové) poměr 75:25.

Tabulka níže dává informaci o fyzikálních vlastnostech preparací mikročástic.

Fyzikální vlastnosti

CER-9802-	8638-F	8637-F	8640-F	8652-F	8651-F	8641-F	8644-F
Vlastnost	MON	MON	MON	MON	MON	MON	MON
	24531	24532	24533	24534	38413	38414	38415
% a. i.	2,94	3,01	2,96	2,93	9,39	10,13	9,89
% REA	0,27	0,19	0,03	0,55	0,08	1,19	0,24
t° (C.) při
měření	23,7	23,7	24,2	23,0	23,3	23,2	22,9
Hustota,	1,07	1,03	1,05	1,03	1,08	1,05	1,10
g/cm³ Viskozita, 60 otáček za	3,61	2,04	3,34	1,97	19,0	4,46	25,9
minutu, mPa.s (cps) PH	7,07	4,02	3,36	6,82	3,31	3,77	6,25

··· ·

Fytotoxicita tebuconazolových formulací

[% výšky kontroly]
CER-9802-	-F	-F	-F	-F	Ref	Ref.
g a.i./	MON	MON	MON	MON	MON
100 kg	38413	38414	38415	38416	38412	RAXIL
semene
16	-	-	-	-	-	76,3
25	-	-	-	-	95,5	-
50	82,1	69,8	89,7	70,3	89,6	-
75	84,5	64,4	83,8	68,7	-	-
100	-	-	78,4	60,8	-	-

LSD(,05) = 19,14

Fytotoxicita tebuconazolových formulací [% výšky kontroly]

CER-9802-	8638-F	8637-F	8640-F	8652-F	978221 Ref	Ref.
gal/		MON	MON	MON	MON	MON	OPUS
100	-kg	24531	24532	24533	24534	24555
semene	5						32,5
	25	93,8	91,2	93,8	83,0	96,2	8,6
	50	83,4	73,3	98,0	43,3	90,5	-
	75	77,9	61,4	86,8	24,3	87,9	-

Formulace obsahující epoxiconazol ukázaly mnohem menší fytotoxicitu než komerční reference Opus®. Podobně formulace obsahující tebuconazol ukázaly mnohem menší fytotoxicitu než komerční reference Raxil® .

MON 38412 a MON 24555 se také testovaly jako ošetření aplikací na list sóji. Při dávkách 50 and 250 ppm aktivní složky rostliny sóji ošetřené MON 38412 • to

• ••to • to ·<

* *· » • toto to • to· · • to* · • · · · a MON 24555 aplikací na list vykazovaly podstatně větší sílu než rostliny ošetřené s Foliculur® a Opus® , zvláště při vyšší aplikační dávce.

Obr. 20 ukazuje účinek MON 24555, Opus® , MON 38412 a Raxil® 9 dnů po vysetí, když se použijí jako ošetření semen sóji při různých aplikačních dávkách.

Aby se zjistila účinnost ošetření semen s použitím formulací mikročástic při kontrole přirozeně se vyskytující práškové hnilobě pšenice, provedly se polní testy. Provedly se čtyři opakování každého ošetření. Obr. 21 ukazuje účinek ošetření semen s použitím MON 38414 (30, 45 a 60 g tebuconazolu na 100 kg semene) a Raxil® (30 g tebuconazolu na 100 kg semene) při kontrole závažnosti práškové hniloby 42 dnů po vysetí na kultivaru pšenice Artisan. Obr. 22 ukazuje účinek ošetření semen s použitím MON 38414 a MON 38416 (45 a 60 g aktivní složky na 100 kg semene) a Raxil® (30 g tebuconazolu na 100 kg semene) při kontrole závažnosti práškové hniloby 42 dnů po vysetí na kultivaru pšenice Minaret.

Tabulka níže ukazuje bezpečnost MON 24555, Opus® , MON 38412, a Raxil® 16 po vysetí, když se použije jako ošetření semen fazole (Pisum sativuni) při různých dávkách.

Síla

Neošetřené= 100 16DAP

Dávka (g ai/100 kg)

Ošetření

MON 24555	0,25	0
MON 24555	1	0,75
MON 24555	5	0
MON 24555	10	0,5
OPUS	0,25	0,75
OPUS	1	1,5
OPUS	5	4
OPUS	10	5
MON 38412	0,25	0,5
MON 38412	1	0,5

4· « 4 4 4 4 • 4 4 4

44444

4 4

44 4 4 4 * 4 · 4

44 ♦ *4 4

4 4 4

4 4 4 ♦ 4 4 # • 4 4«

MON 38412	10	0,5
RAXIL	0,25	1,25
RAXIL	1	0,75
RAXIL	5	1,5
RAXIL	10	1

Tabulka níže ukazuje bezpečnost NBP 6237101 a Sportak® komerční formy prochlorazu s rychlým uvolňováním, když se použijí jako ošetření semen pšenice (kultivar Ritmo) při různých dávkách. Tyto výsledky ukazují, že NBP 623 6237101 významně zvýšila celkový počet germinantů 11 dnů po vysetí a průměrnou výšku germinantů.

	Aplikační dávka	# Rostlin	Výška (cm)
Ošetření fe a.i./l 00 ke semen) 5 DAP	8 DAP	11 DAP	12 DAP
6237101	50	72,3	95,0	92,2	40,5
6237101	100	86,3	92,2	100,3	34,1
6237101	200	72,2	92,5	95,0	34,3
Sportak®	50	39,6	73,3	75,8	44,9
Sportak®	100	5,3	51,4	64,5	32,0
Sportak®	200	0,0	29,7	46,1	17,3
LSD (0.5)				16,6	9,6

Příklad 25

Vyhodnotili jsme formulace mikročástic obsahující cyproconazol na účinnost a trvání kontroly hnědé rzi pšenice (působené Puccinia recondita) v skleníkových pokusech. Semena pšenice (kultivar Fortuna) se ošetřily testovanými ošetřeními (5932839A, MON 24682 nebo MON 24647, všechny při 32 g cyproconazolu na 100 kg semen) a Alto® 005LS (při 1 g cyproconazolu na 100 kg semen) a vysely se do standardních 4 palcových čtvercových květináčů obsahujících sterilizovanými Dupo plavenou hliněnou zeminou. Vysévání se provádělo dávkou 1 semeno na květináč, se čtyřmi duplikátními květináči na každou dávku ošetření. Semena se pokryla asi 2 cm stejné zeminy a inkubovaly se s 12. hodinovou fotoperiodou při 50% relativní vlhkosti. Teplota v místnosti růstu se udržovala při 16 °C během 12. hodinové periody světla a při 12 °C během 12. hodinové periody tmy. Dvacet dnů po vysetí se vzešlé rostliny očkovaly • 4 •4 ·4·>

• 9 4 4

4 9 .· ··;

• 444 94 • 4 44

4 4 4 4 4 4 • · · 9 4 4 4 • 9 4 449 44 9 • 44 4 4 44 4

44 44 44 urediosporami P. recondita. Očkované rostliny se inkubovaly 24 hodin v mlžném stanu při 20 °C, aby se umožnila infekce chorobou. Závažnost choroby se určila 8-10 dnů po očkování.

Obr. 23 ukazuje kontrolu hnědé rzi pšenice povlakem semen obsahujícími formulace matricových mikročástic 5932839A, MON 24682, MON 24647 (všechny při 32 g cyproconazolu na 100 kg semene) a Alto® 005LS (1 g cyproconazolu na 100 kg semene) (stav druhého listu). Závažnost choroby neošetřených rostlin byla 61,3 %.

Pozorovali jsme účinnost a trvání kontroly choroby formulacemi matricových mikročástic, které dovolily ošetření rostlin při vyšší dávce aktivní složky, než by byla snášena, pokud by se rostliny ošetřily standardní formulací Alto® 005LS.

Odborníkům vdané oblasti bude po prostudování podloh přihlášky vynálezu patrné mnoho změn a modifikací vynálezu. Všechny takové změny a modifikace, které jsou v duchu podle vynálezu jsou zahrnuty v nárocích stávající přihlášky.

Claims

1. Kompozice s kontrolovaným uvolňováním zemědělské chemikálie na rostliny, vyznačující se tím, že obsahuje mikročástice mající průměrný průměr asi 0,2 mikrometry až asi 200 mikrometrů, každá mikročástice obsahuje polymerní matrici a alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v polymerní matrici.

2. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikročástice obsahují asi 1 až asi 50 hmotn. % zemědělské chemikálie.

3. Kompozice podle nároku 2, vyznačující se tím, že mikročástice obsahují asi 15 až asi 50 hmotn. % zemědělské chemikálie.

4. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikročástice obsahují asi 50 až asi 99 hmotn. % polymerní matrice.

5. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikročástice obsahují asi 50 až asi 85 hmotn. % polymerní matrice.

6. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikročástice mají průměrný průměr asi jednoho mikrometru až asi padesát mikrometrů.

7. Kompozice podle nároku 6, vyznačující se tím, že mikročástice mají průměrný průměr asi tří mikrometrů až asi padesát mikrometrů.

8. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že mikročástice ulpívají na povrchu semene nebo rostliny.

• · 4 4 4

9. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že je vybraná ze skupiny sestávající ze suspenze mikročástic ve vodném mediu, smáčitelného prášku, smáčitelných granulí, suchých granulí a povlaků semen.

4 4

4444 44

44 *444 44 44 • 4 «444 • · 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 • 44 4 4 44 4

4444 44 44

10. Kompozice podle nároku 9, vyznačující se tím, že zahrnuje suspenzi mikročástic ve vodném mediu.

11. Kompozice podle nároku 10, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje asi 5 až asi 25 hmotn.% zemědělské chemikálie.

12. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje množství zemědělské chemikálie a uvolňující zemědělskou chemikálii takovou rychlostí, že kompozice dodává zemědělsky účinné množství zemědělské chemikálie k plodině po dobu alespoň asi dvou až asi dvanáct týdnů.

13. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že fytotoxicita zemědělské chemikálie je snížena alespoň dvakrát.

14. Kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že fytotoxicita zemědělské chemikálie je snížena alespoň pětkrát.

15. Kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že fytotoxicita zemědělské chemikálie je snížena alespoň desetkrát.

16. Kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že fytotoxicita zemědělské chemikálie je snížena alespoň dvacetkrát.

17. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje množství zemědělské chemikálie, které je podstatně fytotoxické, pokud se aplikuje na povrch semene jako formulace zemědělské chemikálie s rychlým uvolňováním.

11 11

1 11 1 • 11 1

1 9 1 1 • · 1 1

11 11

18. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že se sestává v podstatě z povlaku semen obsahujícím mikročástice.

* · · · · • · φ · • 999 1 9

1 11

1119 11

1 1

I 9

II 1 1 1

19. Kompozice podle nároku 1, , vyznačující se tím, že zemědělská chemikálie je vybraná ze skupiny sestávající z biocidu, regulátoru růstu rostlin, chemického hybridizuj ícího činidla, výživy rostlin nebo jejich kombinací.

20. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že zemědělskou chemikálií je triazolový fungicid.

21. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že zemědělská chemikálie je vybraná ze skupiny sestávající z cyproconazolu, epoxiconazolu a tebuconazolu.

22. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že polymer je vybraný ze skupiny sestávající z z poly(methylmethakrylátu), polymléčné kyseliny, kopolymerů polymléčné kyseliny- kyseliny glykolové, butyrátacetátcelulózy, polystyrenu, kopolymerů hydroxymáselné kyseliny- kyseliny hydroxyvalerové, kopolymerů styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, poly(methylvinyletherkyseliny maleinové), poly(kaprolaktonu), poly(n-amylmethakrylátu), dřevěné pryskyřice, polyanhydridů, polyortoesterů, poly(kyanoakrylátů), poly(dioxanonu), ethylcelulózy, polymerů ethylvinyl acetátu, poly(ethylenglykololu), poly(vinylpyrolidinu), acetylovaných mono-, di- a triglyceridů, poly(fosfazenu), chlorované přírodní pryže, polymerů vinylu, polyvinylchloridu, hydroxyalkylcelulózy, polybutadienu, polyurethanu, polymerů vinylidenchloridu, kopolymerů styren-butadienu, kopolymerů styren-kyseliny akrylové, polymerů alkylvinyletheru, ftalátů acetátu celulózy, ethylvinylftalátů, triacetátu celulózy, polyanhydridů, polyglutamátů, polyhydroxybutyrátů, polyvinylacetátu, kopolymerů vinylacetátu-ethylenu, kopolymerů vinyl acetátu-vinylpyrolidinu, akrylátových kopolymerů, alkylakrylátových kopolymerů, aryl akrylátových kopolymerů, arylmethakrylátových kopolymerů, poly(kaprolaktamů), epoxidových pryskyřic, polyaminepoxidových pryskyřic, polyamidů, polymerů polyvinylalkoholu, polyalkydových pryskyřic, fenolických pryskyřic, pryskyřic abietové kyseliny, silikonů, polyesterů a kopolymerů a jejich kombinací.

Φ φ • · · · · · φ φ φ φ · « ··· · · φ • · · · ···· ·· ·« •Φ ·φ«· • · ·♦ • · · · • φ φ φ • · · · φ · φ φ φφ ··

23. Kompozice podle nároku 22, , vyznačující se tím, že polymer je vybraný ze skupiny sestávající z poly(methylmethakrylátu), poly(styrenu), kopolymeru styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, polymléčné kyseliny, kombinací poly(mléčné kyseliny) s poly(styren)em a butyrátem acetátu celulózy.

24. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále obsahuje dispergační činidlo.

25. Kompozice podle nároku 24, vyznačující se tím, že dispergační činidlo je vybrané ze skupiny sestávající z methylcelulózy, polyvinylalkoholu, lethicinu a jejich kombinací.

26. Kompozice s kontrolovaným uvolňováním pro dodání zemědělské chemikálie na rostliny, vyznačující se tím, že obsahuje mikročástice mající střední průměr asi 3 mikrometry až asi 50 mikrometrů a obsahuje polymerní matrici a alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v matrici, kde tato alespoň jedna zemědělská chemikálie tvoří mezi asi 15 až asi 50 hmotn. % této mikročástice.

27. Kompozice podle nároku 26, vyznačující se tím, že mikročástice obsahují množství zemědělské chemikálie a uvolňují zemědělskou chemikálii takovou rychlostí, že kompozice dodává zemědělsky účinné množství zemědělské chemikálie k plodině po dobu alespoň asi dvou až asi dvanáct týdnů.

28. Semena obsahující povlak obsahující kompozici podle nároku 1.

29. Způsob dodání zemědělské chemikálie k rostlině, vyznačující se tím, že rostlině zabezpečuje dodání kompozice obsahující mikročástice mající průměrný průměr asi 0,2 mikrometry až asi

200 mikrometrů a obsahující alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v polymerní matrici.

• ·

30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že rostlině zabezpečuje dodání kompozice způsobem vybraným ze skupiny složené z aplikace kompozice na zeminu, aplikace kompozice na listoví rostliny a pokrytí semene před klíčením semene, aby vznikla rostlina.

• · · · • · ···· ·· ·· ····

31. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci množství kompozice na zeminu nebo na listoví rostliny tak, že se aplikuje asi 1 g do asi 10 kg zemědělské chemikálie na hektar.

32. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že zahrnuje pokrytí semene kompozicí v takovém množství, že se aplikuje asi 1 gram až asi 500 gramů zemědělské chemikálie na 100 kg semen.

33. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že zahrnuje pokrytí semene rostliny kompozicí, kdy po klíčení semene, aby vznikla rostlina, kompozice uvolňuje zemědělsky účinné množství zemědělské chemikálie k plodině po dobu alespoň asi dvou až asi dvanáct týdnů po klíčení.

34. Způsob přípravy kompozice obsahující mikročástice s kontrolovaným uvolňováním zemědělské chemikálie, vyznačující se tím, že zahrnuje kroky:

(a) rozpuštění alespoň jedné zemědělské chemikálie a polymeru v organickém rozpouštědle za vzniku hydrofobního roztoku, (b) míchání hydrofobního roztoku a vodného media při střihu a době dostatečné pro vznik emulze mající kapičky hydrofobního roztoku dispergované ve vodném mediu, (c) odpaření organického rozpouštědla z emulze za vzniku mikročástic mající střední průměr asi 0,2 mikrometry až asi 200 mikrometrů a obsahující alespoň jednu zemědělskou chemikálii rozptýlenou v polymerní matrici.

35. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že zahrnuje rozpuštění této alespoň jedné zemědělské chemikálie tak, že mikročástice obsahují asi 15 až asi 50 hmotn. % zemědělské chemikálie.

• · · · • « · • ··« • · ···· ·· • · • · • · · · • · ··

36. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že zahrnuje smíchání hydrofobního roztoku a hydrofilního roztoku a odpaření rozpouštědla za vzniku mikročástic majících průměrný průměr od asi jednoho mikrometru do asi padesát mikrometrů po odpaření organického rozpouštědla z emulze.

·· ··· · • · · • · · • · · · ·· ··

37. Způsob podle nároku 36 , vyznačující se tím, že zahrnuje smíchání hydrofobního roztoku a hydrofilního roztoku a odpaření rozpouštědla za vzniku mikročástic majících střední průměr od asi tří mikrometrů do asi padesát mikrometrů po odpaření organického rozpouštědla z emulze.

38. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tůn, že dále zahrnuje suspendaci mikročástic ve vodném mediu.

39. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že alespoň jedna zemědělská chemikálie je vybraná ze skupiny sestávahící z biocidu, regulátoru růstu rostlin, chemického hybridizuj ícího činidla, výživy rostlin nebo jejich kombinací.

40. Způsob podle nároku 39, vyznačující se tím, že alespoň jedna zemědělská chemikálie je triazolový fungicid.

41. Způsob podle nároku 40, vyznačující se tím, že alespoň jedna zemědělská chemikálie je vybraná ze skupiny sestávající z cyproconazolu, epoxiconazolu a tebuconazolu.

42. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že polymer je vybraný ze skupiny sestávající z z poly(methylmethakrylátu), polymléčné kyseliny, kopolymerů polymléčné kyseliny- kyseliny glykolové, butyrátacetátcelulózy, polystyrenu, kopolymerů hydroxymáselné kyseliny- kyseliny hydroxyvalerové, kopolymerů styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, poly(methylvinyletherkyseliny maleinové), poly(kaprolaktonu), poly(n-amylmethakrylátu), dřevěné pryskyřice, polyanhydridů, polyortoesterů, poly(kyanoakrylátů), poly(dioxanonu), ethylcelulózy, polymerů ethylvinyl acetátu, poly(ethylenglykololu), poly(vinylpyrolidinu), acetylovaných mono-, di- a triglyceridů, poly(fosfazenu), chlorované přírodní pryže, polymerů vinylu, polyvinylchloridu, hydroxyalkylcelulózy, polybutadienu, polyurethanu, polymerů vinylidenchloridu, kopolymerů ·» ·* ·**· ·· ·«» • · • · ··· · ·· • · · • · * • · * • · · · *· »« ·♦ • · « · • · · · • · · · • · · · ·· ·· styren-butadienu, kopolymerů styren-kyseliny akrylové, polymerů alkylvinyletheru, ftalátů acetátu celulózy, ethylvinylftalátů, triacetátu celulózy, polyanhydridů, polyglutamátů, polyhydroxybutyrátů, polyvinylacetátu, kopolymerů vinylacetátu-ethylenu, kopolymerů vinyl acetátu-vinylpyrolidinu, akrylátových kopolymerů, alkylakrylátových kopolymerů, aryl akrylátových kopolymerů, arylmethakrylátových kopolymerů, poly(kaprolaktamů), epoxidových pryskyřic, polyaminepoxidových pryskyřic, polyamidů, polymerů polyvinylalkoholu, polyalkydových pryskyřic, fenolických pryskyřic, pryskyřic abietové kyseliny, silikonů, < polyesterů a kopolymerů a jejich kombinací.

43. Způsob podle nároku 42, vyznačující se tím, že polymer je vybraný ze skupiny sestávající z poly(methylmethakrylátu), poly(styrenu), kopolymerů styrenu s anhydridem kyseliny maleinové, polymléčné kyseliny, kombinací poly(mléčné kyseliny) s poly(styren)em a butyrát acetátu celulózy.

44. Způsob podle nároku 34, vyznačující se tím, že zahrnuje krok rozpuštění dispergačního činidla ve vodném roztoku za vzniku hydro filního roztoku.

45. Způsob podle nároku 44, vyznačující se tím, že kde dispergační činidlo je vybrané ze skupiny sestávající z methylcelulózy, polyvinylalkoholu, lethicinu a jejich kombinací.