CZ303879B6 - Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití - Google Patents
Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303879B6 CZ303879B6 CZ20120136A CZ2012136A CZ303879B6 CZ 303879 B6 CZ303879 B6 CZ 303879B6 CZ 20120136 A CZ20120136 A CZ 20120136A CZ 2012136 A CZ2012136 A CZ 2012136A CZ 303879 B6 CZ303879 B6 CZ 303879B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- formula
- derivative
- hydrogels
- arom
- acid
- Prior art date
Links
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 29
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 22
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 title claims description 4
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 title description 25
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 title 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 claims abstract description 14
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N benzopyrrole Natural products C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 14
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 7
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical group OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 37
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 32
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-O tyraminium Chemical compound [NH3+]CCC1=CC=C(O)C=C1 DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- -1 aldehyde derivative of hyaluronic acid Chemical class 0.000 claims description 16
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 15
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 13
- DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N Tyramine Natural products NCCC1=CC=C(O)C=C1 DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229960003732 tyramine Drugs 0.000 claims description 11
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 10
- LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 5-hydroxy-L-tryptophan Chemical compound C1=C(O)C=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 7
- 229940000681 5-hydroxytryptophan Drugs 0.000 claims description 6
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N oxitriptan Natural products C1=C(O)C=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 LDCYZAJDBXYCGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 5
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 5
- KHUXNRRPPZOJPT-UHFFFAOYSA-N phenoxy radical Chemical compound O=C1C=C[CH]C=C1 KHUXNRRPPZOJPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 4
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 4
- 229940076279 serotonin Drugs 0.000 claims description 4
- UXBLSWOMIHTQPH-UHFFFAOYSA-N 4-acetamido-TEMPO Chemical compound CC(=O)NC1CC(C)(C)N([O])C(C)(C)C1 UXBLSWOMIHTQPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 3
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 claims description 2
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 2
- 206010060932 Postoperative adhesion Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 claims description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 claims description 2
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 2
- QHXLIQMGIGEHJP-UHFFFAOYSA-N picoline - borane complex Substances [B].CC1=CC=CC=N1 QHXLIQMGIGEHJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 2
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 claims description 2
- 206010061762 Chondropathy Diseases 0.000 claims 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 1
- 239000012304 carboxyl activating agent Substances 0.000 claims 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical class CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 abstract 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract 1
- 210000004728 ear cartilage Anatomy 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 description 34
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 34
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 24
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 description 24
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 23
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 19
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- LRQKBLKVPFOOQJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminohexanoic acid Chemical compound CCCCC(N)C(O)=O LRQKBLKVPFOOQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 12
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 12
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 12
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 12
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N Caprylic acid Natural products CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 8
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 8
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMASBEFBIXMNCP-UHFFFAOYSA-N borane;2-methylpyridine Chemical compound B.CC1=CC=CC=N1 ZMASBEFBIXMNCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 6
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 6
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 6
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 6
- GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N benzyl(trichloro)silane Chemical compound Cl[Si](Cl)(Cl)CC1=CC=CC=C1 GONOPSZTUGRENK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N n-hexanoic acid Natural products CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 5
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- RUFDYIJGNPVTAY-UHFFFAOYSA-N 6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCCCC(O)=O RUFDYIJGNPVTAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N alpha-ethylcaproic acid Natural products CCCCC(CC)C(O)=O OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 3
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 3
- WWOBEZLVHPIJHN-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-[2-(5-hydroxy-1h-indol-3-yl)ethyl]butanamide Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCNC(=O)CCCN)=CNC2=C1 WWOBEZLVHPIJHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JISHRFRBEWKWJK-UHFFFAOYSA-N 6-amino-n-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]hexanamide Chemical compound NCCCCCC(=O)NCCC1=CC=C(O)C=C1 JISHRFRBEWKWJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPFYBHTYMMAPCS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-n-[2-(5-hydroxy-1h-indol-3-yl)ethyl]hexanamide Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCNC(=O)CCCCCN)=CNC2=C1 KPFYBHTYMMAPCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PIFJWRRSZGXWCP-UHFFFAOYSA-N 8-amino-n-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]octanamide Chemical compound NCCCCCCCC(=O)NCCC1=CC=C(O)C=C1 PIFJWRRSZGXWCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical class NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031017 Hepatoma-derived growth factor-like protein 1 Human genes 0.000 description 2
- 101001083786 Homo sapiens Hepatoma-derived growth factor-like protein 1 Proteins 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GJYXVYVNWZGNMQ-UHFFFAOYSA-N NCCCCCC(=O)NC(C(=O)O)CC1=CNC2=CC=C(C=C12)O Chemical compound NCCCCCC(=O)NC(C(=O)O)CC1=CNC2=CC=C(C=C12)O GJYXVYVNWZGNMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MDIGAZPGKJFIAH-UHFFFAOYSA-N Serotonin hydrochloride Chemical compound Cl.C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 MDIGAZPGKJFIAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 2
- 150000004032 porphyrins Chemical group 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- HIDJWBGOQFTDLU-UHFFFAOYSA-N 4-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]butanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCC(O)=O HIDJWBGOQFTDLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UBWYJYPPTJZLQL-UHFFFAOYSA-N 4-amino-n-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]butanamide Chemical compound NCCCC(=O)NCCC1=CC=C(O)C=C1 UBWYJYPPTJZLQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPRZYWCRQHFPSX-UHFFFAOYSA-N 8-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]octanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCCCCCC(O)=O FPRZYWCRQHFPSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010665 Enzyme Interactions Effects 0.000 description 1
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- PCBOWMZAEDDKNH-HOTGVXAUSA-N [4-(trifluoromethoxy)phenyl]methyl (3as,6as)-2-(3-fluoro-4-sulfamoylbenzoyl)-1,3,3a,4,6,6a-hexahydropyrrolo[3,4-c]pyrrole-5-carboxylate Chemical compound C1=C(F)C(S(=O)(=O)N)=CC=C1C(=O)N1C[C@H]2CN(C(=O)OCC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C[C@@H]2C1 PCBOWMZAEDDKNH-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002490 anilino group Chemical group [H]N(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229910001882 dioxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004464 hydroxyphenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N n-(3,4,5,6-tetrahydroxy-1-oxohexan-2-yl)acetamide Chemical compound CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005473 octanoic acid group Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000006950 reactive oxygen species formation Effects 0.000 description 1
- 229920013730 reactive polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000518 rheometry Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/20—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/22—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
- A61L15/28—Polysaccharides or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
- A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
- A61L26/0023—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/04—Macromolecular materials
- A61L31/042—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/10—General cosmetic use
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/06—Materials or treatment for tissue regeneration for cartilage reconstruction, e.g. meniscus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
- A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Birds (AREA)
- Surgery (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Resení se týká derivátu hyaluronanu podle obecného vzorce (I), kde Ar je fenyl a R.sub.1.n. je ethylen, nebo Ar je indol a R.sub.1.n. je ethylen, nebo Ar je indol a R.sub.1.n. je karboxyethylen, a kde R.sub.2.n. je alkyl o poctu uhlíku 3 az 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500. Dále je popsán zpusob jeho prípravy, hydrogel na bázi tohoto derivátu, zpusob prípravy hydrogelu a pouzití hydrogelu ve tkánovém inzenýrství, kosmetice, medicíne nebo regenerativní medicíne, zejména ve forme scaffoldu pro lécbu defektu kloubní chrupavky nebo kostních tkání.
Description
Řešení se týká derivátu hyaluronanu podle obecného vzorce (1), kde Ar je fenyl a R, je ethylen, nebo Ar je indol a R] je ethylen, nebo Ar je indol aR, je karboxyethylen, a kde R2je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500. Dále je popsán způsob jeho přípravy, hydrogel na bázi tohoto derivátu, způsob přípravy hydrogelu a použití hydrogelu ve tkáňovém inženýrství, kosmetice, medicíně nebo regenerativní medicíně, zejména ve formě scaffoldů pro léčbu defektů kloubní chrupavky nebo kostních tkání.
'OH
Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvořit hydrogely, způsob jejich přípravy, hydrogely na bázi těchto derivátů, způsob jejich přípravy a použití
Oblast techniky
Vynález se týká nového derivátu hyaluronanu vhodného pro přípravu hydrogelů a způsobu jeho přípravy. Dále hydrogelů na bázi tohoto derivátu, jejich vlastností, využití a způsobu přípravy.
Dosavadní stav techniky
Hyaluronan je polysacharid, který se skládá z disacharidických jednotek složených z D-glukuronové kyseliny a D-ÝV-acetylglukosaminu vázaných alternujícími β—1,4 a β-1,3 glykosidickými vazbami. Hmotnostní průměr molekulové hmotnosti (pokud bude v dalším textu zmiňována molekulová hmotnost, bude se vždy jednat o hmotnostní průměr molekulové hmotnosti) in vivo bývá v rozsahu 3 kDa až 20 MDa. Jedná se o polysacharid, který je snadno rozpustný ve vodném prostředí, kde v závislosti na molekulové hmotnosti a koncentraci vytváří velmi viskózní roztoky.
Hydrogely jsou materiály, které jsou tvořeny ve vodě nerozpustnou sítí alespoň částečně hydrofilních polymerů1. Cest, kterými lze vytvořit nerozpustnou síť původně hydrofilního polymeruje několik. Jedná se o hydrofobizaci polymeru2 či využití ve vodě rozpustného derivátu polymeru nesoucího reaktivní funkční skupiny, které se mohou účastnit dalších chemických reakcí vedoucích ke vzniku trojrozměrné polymerní sítě3-5.
Příprava rozpustných derivátů hyaluronanu a jejich následné zesítění bylo popsáno řadou autorů3’6. Rovněž bylo v minulosti popsáno využití fenolického derivátu hyaluronanu pro síťovací reakce a přípravu hydrogelů. Calabro et al.4,1,9 popisují způsob přípravy fenolických derivátů hyaluronanu reakcí karboxylů, přítomných ve struktuře D-glukoronové kyseliny hyaluronanu, s aminoalkyl-deriváty fenolu. Produktem této reakce jsou amidy hyaluronanu. Pro popsaný průběh syntézy je klíčová aktivace karboxylu hyaluronanu, ke které je v tomto případě využita reakce s dehydratačními činidly typu karbodiimidů (např. EDC). Jako aminoalkylfenol je nejčastěji využíván tyramin6.
Obecně je zesítění fenolických derivátů hyaluronanu iniciováno přídavkem peroxidázy (např. křenové peroxidázy - HRP) a zředěného roztoku peroxidu vodíku. Křenová peroxidáza (Horseradish peroxidase, HRP, E.E. 1.11.1.7) je v současné době široce využívána jako katalyzátor organických a biotransformačních reakcí9 13. Vyznačuje se velmi širokou substrátovou specifitou, a je proto schopna oxidovat řadu organických a anorganických sloučenin13 15.
Jedná se o enzym obsahující jako prostetickou skupinu hem s obsahem železa. To se v neaktivovaném enzymu nachází v oxidačním stupni (III). Při reakci s peroxidy dochází ke vzniku intermediátu, který je označován jako HRP-I. Železo hernu Feíul) je oxidováno oxyferrylovou skupinou (Fe(IV)=O) a na porfyrinovém kruhu zároveň dochází ke vzniku katonického π-radikálu. Takto aktivovaný enzym je schopen vytvářet komplexy s molekulami substrátu, který během této interakce podléhá oxidaci14,16 18
Přeměna oxidované formy enzymu zpět do jeho výchozí podoby probíhá ve dvou stupních. V první fázi dochází k reakci mezi molekulou substrátu (S) a HRP-I za vzniku radikálu substrátu (R·) a částečně redukované formy enzymu HRP-II. HRP-Π si stále zachovává oxyferrylovou skupinu (Fe(IV-O), ale již neobsahuje porfyrinový π-radikál. Během přechodu tronu a porfyrinový radikál je zároveň protein přebrán jeden H+. HRP-Π opět podstupuje reakci se substrátem za vzniku R·. Oxyferrylová skupina (Fe(IV-O) je během této reakce redukována zpět na Fe(Ill). Tento proces je spojen s transferem 2 H+ na kyslík oxyferrylové skupiny. Jeden proton
- 1 CZ 303879 B6 pochází ze substrátu (nebo solventu), druhý z proteinu. Výsledkem je vznik molekuly vody (Rovnice I a Schéma I).
HRP + H2O2 -*
HRP-l + S HRP-II + S —
R.
HRP-I + H2O HRP-ll + RHRP + R-+ H2O R-R
Rovnice I: Základní popis mechanismu katalýzy oxidace substrátu pomocí HRP
Vzniklé radikály substrátu jsou v řadě případů schopné vzájemně reagovat za vzniku dimerů RR. Tento proces již není enzymaticky ovlivněn a souvisí se stabilitou a reaktivitou vzniklých radikálů.14·16 26.
V případě enzymatické síťovací reakce fenolického derivátu polysacharidu je tedy substrát (fenol - reaktivní ligand vázaný na polymer) přeměňován enzymem na reaktivní radikál. Tento radikál následně může reagovat s dalším fenolickým radikálem za vzniku dityraminu. Předpokládáme-li volnou pohyblivost molekul substrátu (ligandu) enzymatické reakce a průběh reakce přesně kopírující rovnici I, měl by enzym (je-li použito dostatečné množství peroxidu) postupně přeměnit všechny molekuly substrátu na reaktivní radikály a ty by, při dostatečně dlouhém reakčním čase, postupně všechny podlehly dimerizaci (např. oligomerizaci). V případě vazby substrátu (ligandu) na polymer, by stupeň zesítění polymeru měl vždy dosáhnout stejné hodnoty, i když doba dosažení této hodnosty by se lišila podle množství použitého enzymu. V praxi tomu tak však není. V literatuře27 jsou podrobněji popsány vztahy mezi očekávaným poměrem intramolekulárních a intermolekulámích zesítění a molekulovou hmotností polymemích segmentů mezi místy zesítění (hustot zesítění, délkou mezi uzly sítě), přičemž intramolekulámí interakce vedoucí k zesítění jsou, na rozdíl od intermolekulámích zesítění, uváděny jako elasticky neefektivní.
Dále je z literatury známo, že v případě využití fenolických derivátů HA množství enzymu ovlivňuje nejen rychlost síťovací reakce, ale výrazným způsobem ovlivňuje i výsledné mechanické vlastnosti hydrogelů4,6’7,28. Literatura uvádí, že reologickými měřeními bylo zjištěno, že modul pružnosti ve smyku (G‘) je vyšší, pokud je použita vyšší koncentrace enzymu. Autoři tento jev zdůvodňují vyšší hustotou zesítění hydrogelů. Pokud je nutno připravit maximálně tuhý hydrogel, musí síťovací reakce probíhat za relativně vysoké koncentrace peroxidázy a tedy i rychleji. Příliš rychlý průběh reakce pak ale může vést ke vzniku nehomogenně zesítěného hydrogelů. Ve vzorcích se tak mohou vyskytnout místa, která nejsou zesítěna vůbec. Příliš rychlý průběh reakce může také působit problémy při umísťování gelu do místa jeho finální aplikace apod.
Příčinou je malá vzdálenost reaktivního centra od základního řetězce polymeru. Malá pohyblivost ligandu snižuje pravděpodobnost efektivní srážky radikálů ligandů za vzniku dityraminu. Proto, je-li v systému malá koncentrace enzymu, vznikne za časovou jednotku malé množství reaktivních forem ligandu. Síťovací reakce tedy jednak probíhá pomalu a jednak je málo efektivní.
Park et. al.29 se pokusil zvýšit reaktivitu ligandů vázaných na polymeru vložením vhodného spaceru mezi reaktivní ligand a řetězec polymeru. Spis popisuje vložení hydrofilního řetězce mezi řetězec polysacharidu a fenolické či anilinové jádro za účelem zvýšení reaktivity těchto substituentů. Hlavním důvodem pro zavedení hydrofilního řetězce do struktury polymeru bylo zlepšení jeho rozpustnosti a zlepšení přístupnosti reaktivních center (fenolické či anilinové jádro). Snadnější prostorová přístupnost reakčních center zvyšuje pravděpodobnost reakce mezi ligandy. Tento krok vede nejčastěji, při zachování stejné aktivity enzymu, k vyššímu stupni substituce, vyšší koncentraci a lepší homogenitě zesítění hydrogelů. Díky zavedení tohoto hydrofilního
-2CZ 303879 B6 řetězce do struktury hydrogelu je navíc dle autora zvýšena jeho biostabilita a mechanické vlastnosti. Park et al. však jako „spacer“ používají hydrofilní polymer PEG o molekulové hmotnosti 3500 Da, a proto se ve výsledku spíše jedná o kopolymer. Takovým zásahem do struktury hydrogelu, i při malém stupni substituce, však dochází k zásadním změnám fyzikálních vlastností původního polymeru. Navíc v případě hyaluronanu vede sice vyšší koncentrace zesítění ke zvýšení tvrdosti hydrogelu, ale současně i ke zvýšení jeho křehkosti, což je pro zamýšlené použití ve tkáňovém inženýrství nežádoucí. U materiálu určeného pro scaffoldy, například, ale nejen pro scaffoldy do kloubní chrupavky, se klade velký důraz na to, aby byl dostatečně pevný a odolný, přičemž materiál, který je křehký, se při větším zatížení ihned nevratně deformuje a v případě io hydrogelů dochází i kjeho úplné destrukci.
Podstata vynálezu
Cílem vynálezu tedy je nalézt takový materiál, který by byl dostatečně pevný a současně i houževnatý a u něhož by nedošlo k nijak zásadním změnám biologických a fyzikálních vlastností oproti původnímu polymeru. Pevnost hydrogenu na bázi hyaluronanu lze obecně zvýšit zvýšením koncentrace zesítění, a to například zvýšením koncentrace polymeru v roztoku, z něhož se hydrogel tvoří, nebo zvýšením stupně substituce polymeru. Oba tyto způsoby však v dosavadním stavu techniky vedly v případě hyaluronanu i ke zvýšení křehkosti výsledného hydrogelu, což výrazně omezuje možnost použití hydrogelu.
Problém, který řeší tento vynález, spočívá v nalezení takových derivátů, které by vedly ke zvýšení reaktivity ligandů a zvýšení tuhosti hydrogelů, při zachování fyzikálních a biologických vlastností původního polymeru. Překvapivě bylo zjištěno, že zavedením poměrně krátkého spaceru (o molekulové hmotnosti přibližně 130 Da) podle vynálezu mezi reaktivní ligand a HA má za následek již při velmi nízkém stupni substituce výrazné zvýšení houževnatosti výsledného hydrogelu.
V jednom aspektu se tedy vynález týká derivátu HA nesoucího reaktivní ligandy vázané prostřednictvím hydrofobních spacerů, s cílem zvýšit pohyblivost ligandů a zvýšit tak pravděpodobnost jejich efektivní srážky a to i v případě, kdy je jich v systému malá koncentrace (nízký stupeň substituce a malá aktivita enzymu). Bylo zjištěno, že i přes velice nízké hmotnostní zastoupení spaceru v hydrogelu, tvoří např. pouhá 0,01 až 0,02 %, dochází k výraznému navýšení houževna35 tosti a pevnosti tohoto hydrogelu oproti hydrogelu z analogického HA derivátu bez vloženého spaceru (tzn. stejná koncentrace, moiámí hmotnost a stupeň substituce/zesítění). Vynález se tedy týká tohoto nového derivátu hyaluronanu vhodného pro přípravu hydrogelů a způsobu jeho přípravy. Dále se týká hydrogelů na bázi toho derivátu, jejich využití a postupu přípravy.
Hydrogel je připraven způsobem využívajícím zesítění řetězců modifikovaného hyaluronanu reakcí, která je katalyzována křenovou peroxidázou či jejími analogy. Vhodné deriváty hyaluronanu obsahují ve své struktuře fenolická či heteroarylfenolická jádra kovalentně vázaná k základnímu řetězci polysacharidu. Proces zesítění lze popsat jako kaskádu na sebe navazujících chemických reakcí, která začíná vznikem reaktivních forem kyslíku (ROS) v systému. Ty jsou ke směsi přidány nebo je jejich vznik umožněn přítomností chemických sloučenin, které slouží jako jejich „generátor“. ROS aktivují enzym peroxidázu, či její analoga, která následně katalyzují dimerizaci (popř. oligomerizaci) aromatických či heteroaromatických jader přítomných ve struktuře derivátu hyaluronanu. Tím dochází ke vzniku trojrozměrné polymemí sítě.
Dle tohoto vynálezu je k přípravě hydrogelu používán hyaluronan modifikovaný navázáním ligandů obsahujícího aminoalkylfenol či aminoalkylheteroarylfenol (např. tyramin, 5-hydroxytryptofan, serotonin). Deriváty hyaluronanu popisované v tomto vynálezu obsahují ligand, který je navázán na polysacharid prostřednictvím spaceru. Přítomnost tohoto spaceru ve struktuře derivátu HA vede díky jeho flexibilitě k navýšení elasticity a volnosti možností konformačních uspořádání zúčastněných segmentů polymeru a tím i možnosti disipace deformační energie.
-3 CZ 303879 B6
Zavedení spaceru také zvětšuje vzdálenost reaktivního aromatického centra (fenolu, heteroaryl fenolu) od základního řetězce polymeru, zlepšuje jeho přístupnost pro interakci s enzymem a zásadním způsobem ovlivňuje průběh síťovací reakce a vlastnosti vzniklého hydrogelu.
Ve svém prvním aspektu se vynález týká derivátu na bázi kyseliny hyaluronové podle obecného vzorce (I)
kde Ar je fenyl a R| je ethylen, nebo Ar je indol a Ri je ethylen, nebo Ar je indol a R] je karboxyethylen, a kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500. V dalším aspektu se vynález týká způsobu přípravy derivátu podle obecného vzorce (I), kde se nejprve připraví aldehydický derivát kyseliny hyaluronové podle vzorce (II),
(II), kde aldehydický derivát se připraví s použitím oxidačního systému 4-acetamidováTEMPO/NaClO v protickém prostředí a má stupeň substituce 5 až 15 % a molekulovou hmotnost v rozmezí 10 000 g/mol až 2 000 000 g/mol, dále se zvlášť připraví sloučenina obecného vzorce (ΙΠ) η2ν^ /Rix /0H OZ NH Ar (III), kde Ar je fenyl a R1 je ethylen, nebo Ar je indol a R] je ethylen, nebo Ar je indol a R] je karboxyethylen, a kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500, přičemž sloučenina obecného vzorce (III) se připraví reakcí prekurzoru spaceru podle vzorce (IV)
Z-N-R2-COOH (IV), kde Z je chránící skupina běžně používaná k ochraně primární aminoskupiny, s ligandem podle vzorce (V)
HOAr
NH2 (V),
-4CZ 303879 B6 v aprotickém prostředí při teplotě v rozmezí 40 °C až 150 °C po dobu 1 až 24 hodin v přítomnosti činidla aktivujícího karboxylové funkční skupiny, za vzniku sloučeniny obecného vzorce (VI)
Z-NH-R2-CO-NH-R,-Ar-OH (VI), ze které se sloučenina obecného vzorce (III) připraví odstraněním chránící skupiny Z, a pak se aldehydický derivát kyseliny hyaluronové podle vzorce (II) nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce (III) při pH v rozmezí 3 až 8 při laboratorní teplotě po dobu 1 až 72 hodin v přítomnosti pikolin-boranového komplexu za vzniku derivátu podle vzorce (I).
Derivát podle vynálezu tedy obsahuje ligand, schopný postupovat oligomerizaci působením vhodného činidla, a flexibilní spacer, který je vložen mezi řetězec hyaluronanu a ligand. Ligand dle obecného vzorce (V) podle vynálezu je s výhodou vybrán ze skupiny zahrnující tyramin, serotonin a 5-hydroxytryptofan. Sloučenina obecného vzorce (IV), tj. prekurzor spaceru, je s výhodou vy brána ze skupiny aminokyselin zahrnující deriváty ro-[(ter/-butoxykarbonyl)aminojkarboxylových kyselin, kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7.
Podle ještě dalšího výhodného provedení způsobu podle vynálezu probíhá reakce prekurzoru spaceru s ligandem v prostředí THF nebo DMF při teplotě 50 °C po dobu 2 až 6 hodin v přítomnosti 1,1 ‘-karbodiimidazolu.
Dále je výhodné, když se odstranění chránící skupiny Z provede prostřednictvím trifluoroctové nebo chlorovodíkové kyseliny.
Pro potřeby vynálezu jsou jako meziprodukt spacer-ligand označovány sloučeniny obecného vzorce:
HO-Ar-R,-NH-CO-R2-NH2.
S výhodou je jako spacer použita sloučenina obecného vzorce:
-CO-R2-NH2
- kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7.
Způsob přípravy derivátu podle vynálezu může být charakterizován schématem 1:
-5CZ 303879 B6
Boc \
nh-r2 ^=0 +
HO
spacer - ligand reduktivní amínace
Schéma 1Příklad možného způsobu přípravy derivátu HA-spacer-ligand dle vynálezu
Dále se vynález týká hydrogelu vzniklého zesítěním derivátu podle obecného vzorce (I) a způsob jeho přípravy. Tento způsob přípravy hydrogelu spočívá v tom že se na derivát podle obecného vzorce (I) působí generátorem reaktivních fenoxyradikálů, s výhodou systémem křenová peroxidáza a zdroj hydroxylových radikálů, kterým může být roztok peroxidu vodíku ve vodě, nebo systémem oxidáza-kyslík-substrát, např. galaktózooxidáza-galaktóza nebo glukózooxidázaglukóza, při pH v rozmezí 4 až 10.
K oligomerizaci reaktivních ligandů je tedy využíváno činidel, které jsou schopná vyvolat vznik fenoxyradikálů z aromatických jader ligandů. Dle tohoto vynálezu je s výhodou využíváno systému peroxid/křenová peroxidáza. Peroxid může být do systému přidáván ve formě ředěného roztoku, nebo je generován chemickou reakcí in šitu. Peroxid vodíku je možné ve směsi generovat pomocí různých druhů enzymů (oxidáz) z kyslíku, jako akceptoru elektronů a příslušného donoru elektronů v oxidačně - redukční reakci. S výhodou lze použít kombinaci galaktóza oxidáza nebo glukóza oxidáza a jejich substráty: galaktóza a glukóza. Jinými činidly, která jsou schopná vyvolat vznik fenoxyradikálů v přítomnosti molekulárního kyslíku, jsou enzymy tyrozináza, laktáza atd.
Vlastnosti těchto hydrogelů jsou, jak je obecně známo, ovlivňovány jak chemickou strukturou polymeru a jeho koncentrací, tak zvanými typy síťovacích činidel a jejich použitých množství. Fyzikálně-chemické vlastností polymeru (derivátu HA) jsou především ovlivňovány strukturou monomeru, konformací segmentů polymerního řetězce, stupněm zesítění a molámí hmotností. Tímto jsou také ovlivněny mechanické vlastnosti polymeru. Při mechanickém namáhání polymeru dochází kjeho deformaci, kdy se část absorbované deformační energie disipuje - spotřebuje na změnu konformací uzlů sítě a segmentů polymerního řetězce a část energie se nevratně přemění na teplo. Velikost disipované energie a tím i možnost zaujmutí různých konformačních uspořádání v rámci struktury polymeru souvisí s tuhostí makromolekulámích řetězců a odráží míru
-6CZ 303879 B6 elektrického odporu materiálu proti deformaci. Polymemí materiály složené z tuhých neohebných řetězců a jejich segmentů pak mohou vykazovat malou míru elastického odporu proti deformaci a křehkost.
Navýšení elasticity těchto polymerů se provede způsobem podle vynálezu, kde se zavedou flexibilní segmenty do struktury polymeru. Ty se vyznačují vyšší volností pohybu jednotlivých molekul kolem svých vazeb, a tím dosahují navýšení možností jejich konformačních uspořádání při působení deformační energie a možnosti její disipace. Zavedení vhodného flexibilního spaceru mezi ligand a základní řetězec hyaluronanu tak vede k dosažení vyšší elasticity, houževnatosti a pevnosti výsledného materiálu, což je velice přínosné např. u hydrogelů cílených pro scaffoldy v rámci léčby defektů některých tkání vystavených vyšším zátěžím, jako je např. kloubní chrupavka nebo kosti. Jak bylo popsáno výše, zavedení flexibilního spaceru mezi ligand a základní řetězec hyaluronanu může být s výhodou také použito v případě, kdy jsou mechanické vlastnosti hydrogelů závislé na koncentraci enzymu použitého jako katalyzátoru síťovací reakce. Zavedením flexibilního spaceru mezi ligand a základní řetězec hyaluronanu je u reaktivních skupin derivátu polymeru zajištěna, a to i po částečném zesítění polymeru, dostatečná sterická přístupnost reaktivních skupin pro vzájemnou dimerizaci.
Toto řešení má za následek zefektivnění síťovací reakce, což se projevuje dosažením vyšší homogenity připravených hydrogelů a vede tak k překonání technologických problémů spojených se zasítěním hyaluronanu modifikovaného hydroxyfenylem či heteroarylfenolem (tyraminem, serotoninem aj.) v případě, že síťovacími činidly jsou křenová peroxidáza a peroxid vodíku (či jiný typ generátoru fenoxyradikálů).
Překvapivě jsme ale navíc zjistili, že zavedení námi zvolených spacerů mezi ligand a základní řetězec hyaluronanu vede i při velice nízkém stupni substituce k výraznému navýšení hodnot elasticity, houževnatosti a pevnosti výsledného hydrogelů na bázi tohoto derivátu HA.
Dále se vynález týká využití hydrogelů na bázi derivátů podle vynálezu, a to především v oblasti tkáňového inženýrství, kosmetice, medicíně a regenerativní medicíně. Využití hydrogelů popisovaných v tomto vynálezu je cíleno zejména na základní materiál pro tvorbu scaffoldů ve tkáňovém inženýrství, především do oblasti léčby kloubních a kostních defektů, jako krytí pro hojení ran, jako biodegradabilní bariéra bránící vzniku pooperačních srůstů, k augmentaci měkkých tkání a výplně tkáňových defektů apod. Při použití hydrogelů jakožto materiálu pro scaffoldy se může jednat o scaffoldy oseté nebo neoseté. U osetých scaffoldů se typ buněk, které se zabudují do scaffoldů, volí dle cíleného místa aplikace.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 Znázorňuje deformaci vlastnosti („stress-strain“ křivky) získané v rámci měření deformace hydrogelů na bázi derivátů připravených dle příkladu VII, IX, XI a XII v kompresi.
Příklady provedení vynálezu
1. Příklad syntézy derivátů
Syntéza derivátů hyaluronanu probíhala v několika krocích (viz schéma 1). Prvním žních je příprava aldehydického derivátu hyaluronanu (příklad 1.7). Dalším krokem je syntéza různých meziproduktů spacer-ligand (příklady 1.1 až 1.6), které byly následně navázány na hyaluronan procesem reduktivní aminace (příklady 1.9 až 1.14).
-7CZ 303879 B6
Součástí příkladů je i syntéza derivátů hyaluronanu, ve kterých je ligand (tyramin, hydroxytryptofan) vázán přímo na polysacharid bez využití spaceru (příklady VIII). Tento derivát a z něj připraveného hydrogelu sloužily k porovnání vlastností s deriváty popisovanými v tomto vynálezu (deriváty HA-spacer-ligand- deriváty IX až XIV).
Příklad 1.1: Syntéza 6-amino-A-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]hexanamidu (meziprodukt spacerligand (I))
6-[(Zerí-butoxykarbonyl)amino]hexanová kyselina (1,00 g, 4,3 mmol) byla rozpuštěna v 50 ml tetrahydrofuranu (THF). K roztoku kyseliny byl přidán 1,1‘-karbodiimidazol (0,70 g, 4,3 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán tyramin (0,59 g, 4,3 mmol). Směs byla dále zahřívána další 2 hodiny. Poté byl destilací za sníženého tlaku odstraněn THF. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpouštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
m = 0,75 g (70 % teorie).
’H NMR (D2O, pm) δ: 1,17 (m, 2H, y-CH2-hexanové kyseliny); 1,48 (m, 2 H, [3-CH2-hexanové kyseliny); 1,58 (m, 2 H, 6-CH2-hexanové kyseliny); 2,17 (t, 2 H,-CH2-CO-); 2,73 (m, 2 H, -CH2-Ph); ,91 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3,42 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); 6,83 (d, 2 H, arom.); 7,13 (d, 2 H, arom.).
13C NMR (D2O, ppm) δ: 24 (γ-C-hexanové kyseliny); 26 (δ-C-hexanové kyseliny); 33 (β-Chexanové kyseliny); 35 (-C-CO-); 39 (C-NH2); 40 (C-Ph); 63 (-C-NH-CO-); 115 (C3 arom.); 126 (Cl AROM); 130 (C2 arom.); 153 (C4 arom.); 176 (-CO-).
Příklad 1.2: Syntéza 4-amino-2V-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]butanamidu (meziprodukt spacerligand (II))
4-[(fórt-butoxykarbonyl)amino]butonová kyselina (0,50 g, 2,5 mmol) byla rozpuštěna v 25 ml tetrahydrofuranu (THF). K roztoku kyseliny byl přidán 1,1‘-karbodiimidazol (0,40 g, 25 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán tyramin (0,34 g, 25 mmol). Směs byla dále zahřívána další 2 hodiny. Poté byl destilací za sníženého tlaku odstraněn THF. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpouštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
m = 0,44 g (80 % teorie)
-8CZ 303879 B6 *H NMR (D2O, ppm) δ: 1,75 (m, 2 H, p-CH2-butanové kyseliny); 2,16 (t, 2 H, -CH2-CO-); 2,59 (m, 2H, -CH2-In); 2,78 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3,20 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); 6,69 (d, 2 H, arom.); 6,99 (d, 2 H, arom.).
13C NMR (D2O, ppm) δ: 23 (β-C-butanové kyseliny); 25 (t, 2 H, -C-CO-); 32 (-C-NH2); 45 (CH2-Ar); 60 (-C-NH-CO-); 115 (C3 arom.); 117 (Cl arom.); 129 (C2 arom.); 155 (C4 arom.); 171 (-CO-).
Příklad 1.3: Syntéza 8-amino-A-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]oktanamidu (meziprodukt spacerligand (III))
8-[(/er/-butoxykarbonyl)amino]oktanová kyselina (0,50 g, 1,9 mmol) byla rozpouštěna v 25 ml tetrahydrofuranu (THF). K roztoku kyseliny byl přidán l,l‘-karbodiimidazol (0,31 g, 1,9 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán tyramin (0,26 g, 1,9 mmol). Směs byla dále zahřívána dalších 6 hodin. Poté byl destilací za sníženého tlaku odstraněn THF. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
m = 0,40 g (75 % teorie) 'H NMR (CDC13, ppm) δ: 1,16-1,34 (m, 6 H, C4 až C6 -CH2-oktanové kyseliny); 1,56-1,44 (m, 4 H, 3C a C7 oktanové kyseliny); 2,58 (m, 2 H, -CH2-Ar); 2,78 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3,19 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); 6,68 (d, 2 H, arom.); 6,98 (d, 2 H, arom.).
13C NMR (CDCI3, ppm) δ: 21 (C7 oktanové kyseliny); 24 (C4 oktanové kyseliny); 26 (C6oktanové kyseliny); 28 (C5-oktanové kyseliny); 33 (C3-oktanové kyseliny); 35 (-C-CO-); 39 (-C-NH2); 40 (C-Ph); 63 (-C-NH-CO-); 115 (C3 arom.); 126 (Cl arom.); 130 (C2 arom.); 153 (C4 arom.); 176 (-CO-).
Příklad 1.4: Syntéza 4-amino-V-[2-(5-hydroxy-l H-indol-3-yl)ethyl]butanamidu (meziprodukt spacer-ligand (IV))
4-[(/er/-butoxykarbonyl)amino]butanová kyselina (0,50 g, 2,5 mmol) byla rozpouštěna ve 25 ml VW-dimethylformamidu (DMF). K roztoku kyseliny byl přidán 1,1‘-karbodiimidazol (0,40 g, 2,5 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán roztok 5-hydroxytryptamin hydrochloridu (0,52 g, 2,5 mmol) a triethylaminu (0,68 ml; 4,9 mmol) ve 25 ml DMF. Směs byla dále zahřívána další 2 hodiny. Směs zředěna přídavkem ethylcetátu (100 ml). Vzniklý roztok byl promyt 300 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpouštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
-9CZ 303879 B6 m = 0,43 g (65 % teorie) 'M NHR: (DMSO, ppm) δ: 1,77 (m, 2 H, (3-CH2-butanové kyseliny); 2,20 (t, 2 H, -CH2-CO-); 2,73 (m, 2 H, -CH2-In); 2,81 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3,30 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); 6,60 (d, 1 H, C6-arom); 6,82 (s, 1 H, C4-arom); 7,03 (s, 1 H, C2-arom); 7,13 (d, 1 H, C7-arom).
13C NMR (DMSO, ppm) δ: 23 (β-C-butanové kyseliny); 25 (t, 2 H, -C-CO—); 32 (-C-NH2); 39 (CH2-In); 60 (-C-NH-CO-); 102 (C4 arom.); 110 (C6 arom.); 111 (C7 arom.); 111 (C3 arom.); 123 (C2 arom.); 127 (C7- C-NH-arom); 113 (C4-C-C3- arom.); 150 (C5 arom.); 171 (-CO-).
Příklad 1.5: Syntéza 6-amino-V-[2-(5-hydroxy-lH-indol-3-yl)ethyl]hexanamidu (meziprodukt spacer-ligand (V))
6-[(fór/-butoxykarbonyl)amino]hexanová kyselina (1,00 g, 4,3 mmol) byla rozpuštěna v 50 ml VV-dimethylformamidu (DMF). K roztoku kyseliny byl přidán 1,1‘-karbodiimidazol (0,70 g, 4,3 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán roztok 5-hydroxytryptamin hydrochloridu (0,91 g, 4,3 mmol) a triethylaminu (0,68 ml, 49 mmol) ve 25 ml DMF. Směs byla dále zahřívána dalších 6 hodin. Směs byla zředěna přídavkem ethylacetátu (100 ml). Vzniklý roztok byl promyt 300 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpouštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny. (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
m = 0,75 g (60 % teorie) ’H NMR: (DMSO, ppm) δ 1,17 (m, 2 H, y-CH2-hexanové kyseliny); 1,48 (m, 2 H, (3-CH2hexanové kyseliny); 1,58 (m, 2 H, ó-CH2-hexanové kyseliny); 2,17 (t, 2 H, -CH2-CO-); 2,73 (m, 2 H, -CH2-In); 2,91 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3.42 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); 6,60 (d, 1 H, C6arom); 6,82 (s, 1 H, C4-arom); 7,03 (s, 1 H, C2-arom); 7,13 (d, 1 H, C7-arom).
I3C NMR (DMSO, ppm) δ: 24 (γ-C-hexanové kyseliny); 26 (δ-C-hexanové kyseliny); 33 (β-Chexanové kyseliny); 35 (-C-CO-); 39 (-C-NH2); 40 (C-In); 63 (-C-NH-CO-); 102 (C4 arom.); 110 (C6 arom.); 111 (C7 arom.); 111 (C3 arom.); AS3 (C2 arom.); 127 (C7- C-NH-arom); 131 (C4-C-C3-arom); 150 (C5 arom.); 171 (-CO-).
Příklad 1.6: Příprava 2-[(6-aminohexanoyl)amino]-3-(5-hydroxy-l/7-indol-3-yl)-propanové kyseliny (meziprodukt spacer-ligand VI)
6-[(ter/-butoxykarbonyl)amino]hexanová kyselina (0,50 g, 2,2 mmol) byla rozpuštěna v 50 ml tetrahydrofuranu (THF). K roztoku kyseliny byl přidán 1,1‘-karbodiimidazol (0,35 g, 2,2 mmol). Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu šedesáti minut. Poté byla reakční nádoba promyta inertním plynem. K reakční směsi byl přidán 5-hydroxytryptofan (0,48 g, 2,2 mmol). Směs byla dále zahřívána dalších 6 hodin. Směs byla zředěna přídavkem ethylacetátu (100 ml). Vzniklý roztok byl promyt 300 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
-10CZ 303879 B6
Odparek byl rozpuštěn v 50 ml MeOH a k roztoku byly přidány 2 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Roztok byl zahříván 6 hodin pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo bylo odstraněno destilací za sníženého tlaku. Odparek byl rozpuštěn v 50 ml ethylacetátu. Roztok byl promyt 150 ml čištěné vody (rozděleno do tří dílů). Organická vrstva byla vysušena nad molekulovým sítem. Ethylacetát byl odstraněn destilací za sníženého tlaku.
m = 0,62 g (85 % teorie) 'HNMR: (DMSO, ppm) δ: 1,17 (m, 2 H, y-CH2-hexanové kyseliny); 1,48 (m, 2H, fi-CH2hexanové kyseliny); 1,58 (m, 2 H, 8-CH2-hexanové kyseliny); 2,19 (t, 2 H, -CH2-CO-); 2,51 (m, 2 H, -CH2-In); 2,90 (m, 2 H, -CH2-NH2); 3,81 (m, 2 H, -CH2-NH-CO-); (m, 2 H, -CH2-NHCO-); 6,61 (d, 1 H, C6-arom); 6,95 (s, 1 H, C4-arom); 7,02 (s, 1 H, C2-arom); 7,13 (d, 1 H, C7arom).
13C NMR (DMSO, ppm) δ: 24 (γ-C-hexanové kyseliny); 26(ó-C-hexanové kyseliny; 33 (β-Chexanové kyseliny); 35 (-C-CO-); 39 (-C-NH2); 40 (C-Ph); 55 (-C-NH-CO-); 102 (C4 arom.); 110 (C6 arom.); 111 (C7 arom.); 111 (C3 arom.); 123 (C2 arom.); 127 (C7 - C-NHarom.); 131 (C4-C-C3-arom.); 150 (C5 arom.); 171 (-CO-).
Příklad 1.7: Příprava aldehydického derivátu (HA-CHO) - obecný postup (VII)
Hylauronan (10,00 g, Mw = 2 MDa) byl rozpuštěn v 750 ml 2,5% (w/w) roztoku Na2HPO4. 12 H2O. Roztok byl vychlazen na 5 °C. K vzniklému roztoku bylo přidáno 2,60 g NaBr a 0,05 g 4acetamido-2,2,6,6-tetramethylpiperidin-l-oxylu. Po důkladné homogenizaci roztoku byly k reakční směsi přidány 3 ml roztoku NaClO (10-15 % dostupného Cl2). Reakce pokračovala za stálého míchání 15 minut. Reakce byla ukončena přídavkem 100 ml 40% roztoku propan-2-olu. Produkt byl přečištěn ultrafiltrací a izolován precipitací propan-2-olem.
IČ (KBr): 3417, 2886, 2152, 1659, 1620, 1550, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945, 893 cm'1 *H NMR (D2O) δ: 2,01 (s, 3 H, CH3-); 3,37 - 3,92 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, 1H, anomer.), 4,54 (s, 1H anomer., -O-CH(OH)-), 5,27 (geminální glykol-CH-(OH)2).
Příklad 1.8: Syntéza tyraminového derivátu (VIII)
Aldehydický derivát HA (VII) (5,00 g) byl rozpuštěn v 500 ml demineralizované vody. Pomocí kyseliny octové bylo pH roztoku upraveno na 3. Následně byl k reakční směsi přidán tyramin (1,70 g) ve formě roztoku ve 100 ml 40% propan-2-olu. Směs byla dále míchána po dobu 1 hodiny při laboratorní teplotě. Dále byl ke směsi přidán roztok pikolin-boran komplexu (0,50 g) v 50 ml 40% propan-2-olu. Reakční směs byla dále míchána 12 hodin při laboratorní teplotě. Nízkomolekulámí balastní látky byly z produktu odstraněny ultrafiltrací. Produkt byl získán precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3400, 2893, 2148, 1660, 1620, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945, 893 cm'1 ’H NMR (D2O) δ: 2,01 (s, 3 H, CH3,2,66-2,77 (m, 4 H, -CH2-CH2-NH~), 3,00 (s, 1H, H-CHNH-), 3,37-3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, 1H, anomer.), 4,54 (s, 1H anomer., -OCH(OH)-), 6,59 (d, 2H, arom.), 7,04 (d, 2H, arom.).
-11 CZ 303879 B6
Příklad 1.9: Příprava tyraminováného derivátu HA s C6 spacerem (IX)
Aldehydický derivát HA (VII) (5,00 g) byl rozpuštěn v 500 ml demineralizované vody. Pomocí kyseliny octové bylo pH roztoku upraveno na 3. K roztoku HA-CHO byl přidán 6-amino-V-[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]hexanamid (meziprodukt (I)) (0,625 g,
2,5 mmol). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl do reakční směsi přidán komplex pikolin-boran (0,270 g, 2,5 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt byl přečištěn ultrafiltrací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3425, 2893, 2148, 1660, 1620, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945,893 cm’1.
'Η NMR (D2O) δ 1,25 (t, 2 H, y-CH2-aminohexanové kyseliny), 1,48 (m, 2 Η, δ -CH2aminohexanové kyseliny) 1,51 (m, 2 H, f3-CH2-aminohexanové kyseliny), 2,01 (s, 3 H CH3-),
2,65 (m, 2H, Ph-CH2_), 2,73 (m, 2H, e-CH2-aminohexanové kyseliny), 3,37-3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, 1H, anomer.), 4,54 (s, 1H anomer., -O-CH(OH)-), 6,59 (D, 2H, arom.), 7,01 (d, 2H. arom.).
Příklad 1.10: Příprava derivátu HA s C4 spacerem a 5-hydroxytryptaminem (X)
Aldehydický derivát HA (VII) (3,00 g) a Na2HPO4. 12 H2O (7,50 g) byl rozpouštěn v 300 ml demiralizované vody. K roztoku Ha-CHO byl přidán 4-amino-A-[2-(5-hydroxy-l A-indol-3yl)ethyl]butanamid (0,40 g, 1,5 mmol) - (meziprodukt (IV)). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl do reakční směsi přidán komplex pikolin-boran (0,16 g, 1,5 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt byl přečištěn ultrafiltrací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3400, 2893, 2148, 1660, 1620, 1549, 1412, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945,893 cm'1.
'Η NMR (D2O) δ: 1,73 (m, 2H, β -CH2-aminobutanové kyseliny), 2,01 (s, 3 H, CH3), 2,60 (m, 2H, y-CH2-aminobutanové kyseliny), 2,93 (m, 2H, Ind-CH2-), 3,37-3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, 1H, anomer.), 4,54 (s, 1H anomer., -O-CH(OH)-), 6,85 (d, 1H, arom.), 7,09 (s, 1H. arom.), 7,21 (s, 1H. arom.), 7,40 (s, 1H. arom.).
Příklad 1.11: Příprava tyraminového derivátu HA s C4 spacerem (XI)
Aldehydický derivát HA (VII) (3,50 g) byl rozpuštěn v 350 ml demineralizované vody. Pomocí kyseliny octové bylo pH roztoku upraveno na 3. K roztoku HA-CHO byl přidán 4-amino-V-[2(4-hydroxyfenyl)ethyl]butanamid (0,40 g, 1,8 mmol) - (meziprodukt (II)). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl do reakční směsi přidán komplex pikolin-boran (0,19 g, 1,8 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt byl přečištěn ultrafiltací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3425, 2893, 2148, 1600, 1620, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945,893 cm'1.
- 12CZ 303879 Β6 *Η NMR (D2O) δ: 1,25 (t, 2 H, y-CH2-aminohexanové kyseliny), 1,48, (m, 2H, δ-Ο12aminohexanové kyseliny), 1,51 (m, 2 H, p-CH2-aminohexanové kyseliny), 2,01 (s, 3H, CH3-),
2,65 (m, 2H, pH-CH2-), 2,73 (m, 2H, s-CH2-aminohexanové kyseliny), 3,37 -3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, IH, anomer.), 4,54 (s, IH anomer., -O-CH(OH)-), 6,59 (d, 2H, arom.), 7,01 (d, 2H. arom.).
Příklad 1.12: Příprava tyraminovaného derivátu HA s C8 spacerem (XII)
Aldehydický derivát HA (VII) (2,90 g) byl rozpuštěn ve 300 ml demineralizované vody. Pomocí kyseliny octové bylo pH roztoku upraveno na 3. K roztoku HA-CHO byl přidán 8-amino-V-[2(4-hydroxyfenyl)ethyl]oktanamid (0,40 g, 1,4 mmol) - (meziprodukt (III)). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl do reakční směsi přidán komplex pikolin-boran (0,15 g, 1,4 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt byl přečištěn ultrafiltrací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr).. 3425, 2893,2148, 1660, 162é, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945, 893 cm'1 ’HNMR (D2O) δ: 1,16-1,34 (m, 6 H, C4 až C6 -CH2-oktanové kyseliny); 1,56-1,44 (m, 4H, C3 a C7 oktanové kyseliny); 2,01 (s, 3H, CH3-), 2,58 (m, 2H, -CH2-Ar); 2,78 (m, 2H -CH2-NH-), 3,37 -3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, IH, anomer.), 4,54 (s, IH, anomer., -O-CH(OH)-), 6,59 (d, 2H, arom.), 7,01 (d, 2H. arom.).
Příklad 1.13: Příprava derivátu HA s Có spacerem a 5-hydroxytryptaminem (XIII)
Aldehydický derivát HA (VII) (5,00 g) a Na2HPO4. 12 H2O (12,5 g) byl rozpuštěn v 500 ml demineralizované vody. K roztoku NA-CHO byl přidán 6-amino-V-[2-(5-hydroxy-l//-indol3-yl)ethyl]hexanamid (0,73 g, 2,5 mmol) - (meziprodukt (V)). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl do reakční směsi přidán komplex pikolin-boran (0,27 g, 2,5 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt byl přečištěn ultrafiltrací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 °C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3400, 2893, 2148, 1660, 1620, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945, 893 cm'1.
’H NMR (D2O) δ: 1,25 (t, 2 H, y-CH2-aminohexanové kyseliny), 1,48 (m, 2 Η, δ -CH2aminohexanové kyseliny) 1,51 (m, 2 H, 3-CH2-aminohexanové kyseliny), 2,01 (s, 3 H, CH3-),
2,65 (m, 2H, Ph-CH2-), 2,73 (m, 2H, a-CH2- aminohexanové kyseliny), 3,37-3,92 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, IH, anomer.), 4,54 (s, IH anomer., -O-CH(OH)-), 6,85 (d, IH, arom.), 7,09 (s, IH, arom.)., 7,21 (s, IH, arom.), 7,40 (s, IH, arom.).
Příklad 1.14: Příprava derivátu HA s C6 spacerem a 5-hydroxytryptofanem (XIV)
Aldehydický derivát HA (VII) (3,50 g) a Na2HPO4 . 12 H2O (8,75 g) byl rozpouštěn v 350 ml demineralizované vody. K roztoku HA-CHO byl přidán 2-[(6-aminohexanoyl)amino]-3-(5hydroxy-lH-indol-3-yl)propanové kyseliny (0,60 g, 1,8 mmol) - (meziprodukt (VI)). Směs byla míchána 2 hodiny při laboratorní teplotě. Poté byl po reakční směsi přidán komplex pikolinboran (0,19 g, 1,8 mmol). Směs byla míchána dalších 12 hodin při laboratorní teplotě. Produkt
-13CZ 303879 B6 byl přečištěn ultrafiltrací a izolován z retentátu precipitací propan-2-olem. Precipitát byl zbaven vlhkosti a zbytkového propan-2-olu sušením v horkovzdušné sušárně (40 C, 3 dny).
IČ (KBr):: 3400, 2893, 2148, 1660, 1620, 1549, 1412, 1378, 1323, 1236, 1204, 1154, 1078, 1038, 945,893 cm'1.
'H NMR (D2O) δ: 1,25 (t, 2H, y-CH2-aminohexanové kyseliny), 1,48 (m, 2H, 6-CH2-aminohexanové kyseliny) 1,51 (m, 2 H, (3-CH2-aminohexanové kyseliny), 2,01 (s, 3H, CH3-), 2,65 (m, 2H, Ph-CH2-), 2,73 (m, 2H, 8-CH2-aminohexanové kyseliny), 3,37-3,93 (m, skelet hyaluronanu), 4,46 (s, 1H, anomer.), 4,54 (s, 1H, anomer., -O-CH(OH)-), 6,85 (d, 1H, arom.), 7,09 (s, 1H. arom.), 7,21 (s, 1H. arom.). 7,40 (s, 1H, arom.)
Příklad 1.15: Obecný postup přípravy hydrogelu na bázi derivátu HA se spacerem a 5-hydroxytryptofanem a na bázi tyraminovaného derivátu
Vybraný derivát HA je rozpuštěn v 0,lM PBS pH 7,4. Množství derivátu je voleno dle požadované koncentrace. K roztoku derivátu je přidáno požadované množství enzymu. Po důkladné homogenizaci je přidán zředěný roztok peroxidu vodíku. Směs je opět homogenizována a dochází ke vzniku transparentního gelu.
Příklad 1.16: Příprava hydrogelu na bázi tyraminového derivátu až 60 mg (dle požadované koncentrace roztoku polymeru) derivátu HA připraveného dle příkladu 1.8 (VIII) je rozpouštěno ve 2 ml 0,lM PBS o Ph 7,4. K roztoku derivátu je přidáno 20 μΐ roztoku enzymu HRP (24 mg enzymu HRP rozpuštěné v 1 ml 0,1 M PBS o PH 7,4). Po důkladné homogenizaci je přidáno 100 μΐ roztok H2O2 (33 μΐ 30% H2O2 rozpuštěno v 10 ml 0,lM PBS o PH 7,4). Směs je zhomogenizována a dochází ke vzniku transparentního gelu
Příklad 1.17 Příprava hydrogelu na bázi tyraminového derivátu HA se spacerem až 60 mg (dle požadované koncentrace roztoku polymeru) derivátu HA připraveného dle příkladu 1.9 (IX), 1.11 (XI) nebo 1.12 (XII) je rozpuštěn v 2 ml 0,lM PBS o PH 7,4. K roztoku derivátu je přidáno 10μ1 roztoku enzymu HPR (2,4mg enzymu HRP rozpuštěné v lml 0,lM PBS o pH 7,4). Po důkladné homogenizaci je přidáno 100 μΐ roztoku H2O2 (33μ1 30% H2O2 rozpuštěno v 10 ml 0,lM PBS o pH 7,4). Směs je zhomogenizována a dochází ke vzniku transparentního gelu.
2. Rozdíly ve vlastnostech hydrogelů
Příklad 2.1: Rozdíl v mechanických vlastnostech hydrogelu v závislosti na typu použitého derivátu HA a množství přidaného enzymu
V závislosti na typu použitého derivátu byly dle příkladů 1.16 nebo 1.17 připraveny vzorky hydrogelů z derivátů VIII (tyraminový bez vložení spaceru), IX, XI a XII (s vloženým spacerem). Vzorky byly po důkladné homogenizaci ponechány po dobu 120 minut dozrát při laboratorní teplotě. Anology derivátů použité pro přípravu porovnávaných hydrogelů se vždy vyznačovaly srovnatelnou molekulovou hmotností a stupněm substituce. Všechny vzorky měly stejné rozměry a byly proměřovány za konstantních laboratorních podmínek (teplota, tlak, vlhkost).
- 14CZ 303879 B6
U vzorků byl stanovován Youngův modul pružnosti v kompresi, houževnatost, mez pevnosti v kompresi a odpovídající deformace vzorku; rámci viskoelastických vlastností vzorků potom modul pružnosti ve smyku a ztrátový úhel.
Ze získaných výsledků jasně vyplývá, že zavedení flexibilního spaceru mezi ligand a základní řetězec hyaluronanu vede k dosažení vyšší elasticity, houževnatosti a pevnosti hydrogelů na bázi těchto derivátů, oproti hydrogelům na bázi analogických derivátů hyaluronanu bez spaceru.
Tab. 1 Znázorňuje porovnání mechanických vlastností hydrogelu v závislosti na typu použitého derivátu pro jeho přípravu. Koncentrace (%) znamená koncentrace polymeru v roztoku, z nějž se hydrogel připravil, stupeň substituce (%) udává stupeň substituce reaktivním/síťovacím ligandem, tj. počet navázaných ligandů na 100 strukturních jednotek polymeru, kde v případě HA je strukturní jednotkou polymeru míněn disacharid (neboli dimer) glykosamin+kyselina glukuronová.
Tab. 1
| Typ použitého derivátu | Derivát HA dle příkladu vra | Derivát HA dle příkladu IX | Derivát HA dle příkladu vra | Derivát HA dle příkladu XI | Derivát HA dle příkladu XII |
| Mw (kDa) / koncentrace (%) | 320/3 | 250/3 | 280/2 | 280/2 | 285/2 |
| Stupeň substituce (%) | 3 | llliill! | 1 | 1 | |
| Youngův modul pružnosti v kompresi (kPa) | IliOlllli | 5,68 | 8,99 | 3,87 | 8,19 |
| Mez pevnosti (kPa) | 310 | 108 | 167 | 218 | |
| Deformace v mezi pevnosti (%) | 68 | 65 | 65 | ||
| Houževnatost (J/m3) | 9150 | 23460 | 8050 | 9670 | 13650 |
| Ztrátový úhel (°) | 0,12 | 0,18 | 0,19 | 0,96 | 0,43 |
| Modul pružnosti ve smyku (Pa) | 1861 | 1534 | lilflllllll | 504 | 1105 |
1. Slaughter, B.V.,; Khurshid, S.S.; Fisher, O.Z.; Khademhosseini, A.; Peppas, N.A., Hydrogels in Regenerative Medicine. Advanced Materials 2009,21 (32-33), 3307-3329.
2. Benedetti, F.; Cortivo, R.; Berti, T.; Berti, A.; Pea, F.; Mazzo, M.; Moras, M.; Abatangelo, G., Biocompatibility and biodegradation of different hyaluronan derivatives (Hyaff) implanted in rats. Biomaterials 1993,14 (15), 1154-1160.
3. Calabro, A.,; Gross, R.A.; Darr, A.B. Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof. 2004.
4. Calabro, A.; Akst, L.; Alam, D.; Chán, J.; Darr, A.B.; Fukamachi, K.; Gross, R.A.; Haynes, D.; Kamohara, K.; Knott, D.P.; Fewis, H.; Melamund, A.; Miniaci, A.; Strome, M. Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof. 2008 (W02006/010066).
- 15CZ 303879 B6
5. Tan, H.; Chu, C. R.; Payne, K.A.; Marra,K.G., Injectable in šitu forming biodegradable chitosan-hyaluronic acid based hydrogels for cartilage tissue engineering. Biomaterials 2009, 30 (13), 2499-2506.
6. Darr, A.; Calabro, A., Synthesis and characterization of tyramine-based hyaluronan hydrogels. Journal of Materials Science: Materials in Medicine 2009, 20 (1), 33-44.
7. Kurisawa, M.; Lee, F.; Chung, J.E. Formation of Hydrogel in the Presence of Peroxidase and Low Concentration of Hydrogen Peroxide 2009 (W02009/148405).
8. Lee, F.; Chung, J.E.; Kurisawa, M. An injectable enzymatically crosslinked hyaluronic acidtyramine hydrogel systém with independent tuníng of mechanical strength and gelation rate. Soft Matter 2008, 4, 880-887.
9. Akkara, J.A.; Senecal, K.J.; Kaplan, D.L., Synthesis and characterization of polymers produced by horseradish peroxidase in dioxane. Journal of Polymer Science Part A: Polymer Chemistry 1991, 29 (11), 1561-1574.
10. Shutava, T.; Zheng, Z.; John, V.; Lvov, Y., Micorcapsule modification with peroxidasecatalyzed phenol polymerízation. Biomacromolecules 2004, 5 (3), 914-21.
11. Ghan, R.; Shutava, T.; Patel, A.; John, V. T.; Lvov, Y.; Enzyme-Catalyzed Polymerízation of Phenols within Polyelectrolyte Microcapsule. Macromolecules 2004, 37 (12), 4519 4524.
12. Higashimura, H.; Kobayashi, S., Oxidative Polymerízation. John Wiley & Sons, lne.: 2002.
13. Veitch, N.C., Horseradish peroxidase: a modem view of a clasic enzyme. Phytochemistry 2004, 65 (3), 249-259.
14. Gilabert, M.A.; Fenoll, L.G.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Ruiz, P.A.; Tudela, J.; GarciaCanovas, F.; Rodriguez-Lopaz, J.N., Stereospecificity of horseradish peroxidase. Biol Chem 2004, 385 (12), 1177-84.
15. Uyama, H.; Kobayashi, S., Enzymatic Synthesis of Polyphenols. Current Organic Chemistry 2003, 7, 1387.
16. Gilabert, M.A.; Fenoll, L.G.; Garcia-Molina, F.; Tudela, J.; Garcia-Canovas, F.; Rodriguez-Lopez, J.N., Kinetic characterization of phenol and aniline derivates as substrates of peroxidase. Biol. Chem. 2004, 385 (9), 795-800.
17. Gilabert, M.A.; Hiner, A.N.; Garcia-Ruiz, P.A.; Tudela, J.; Garcia-Molina; F.; Acosta, M.; Garcia-Canovas, F.; Rodriguez-Lopez, J.N., Differential substráte behaviour of phenol and aniline derivatives during oxidation by horseradish peroxidase: kinetic evidence for a two-step mechanism. Biochim. BiophysTeto 2004,1699(1-2), 235-43.
18. Hewson, W.D.; Dunford, H.B., Oxidation of p-cresol by horseradish peroxidase compound
I. J. Biol Chem. 1976, 251 (19), 6036-42.
19. Burner, U.; Obinger, C., Transient-state and steady-state kinetics of the oxidation of aliphatic and aromatic thiols by horseradish peroxidase. FEBS Letters 1997, 411 (2-3), 269-274.
20. Patel. P.K.; Mondal, M.S.; Módi, S.; Behere, D.V., Kinetic studies on the oxidation of phenols by the horseradish peroxidase compound II. Biochim Biophys Acta 1997,1339 (1), 79-87.
-16CZ 303879 B6
21. Hewson, W.D.; Dunford, H.B., Stoichiometry ofthe reaction between horseradish peroxidase and p-cresol. J. Biol.Chem. 1976, 257 (19), 6043-52.
22. Job, D.; Dunford, H.B., Substituent effect on the oxidation of phenols and aromatic amines by horseradish peroxidase compound I. Eur JBiochem. 1976, 66 (3), 607-14.
23. Dunford, H.B.,; Cotton, M.L., Kinetics of the oxidation of p-aminobenzoic acid catalyzed by horseradish peroxidase compounds I and II. J. Biol Chem 1975, 250 (8), 2920-32.
ío 24. Kalyanaraman, B.; Felix, C.C.; Sealy, R.C., Peroxidatic oxidation of catecholamines. A kinetic electron spin resonance investigation using the spin stabilization approach. Journal of Biological Chemistry, 1984, 259 (12), 7584-7589.
25. Won, K.: Kim Y. H.; An, E.S.; Lee, Y.S.; Song, B.K., Horseradish Peroxidase Catalyzed
Polymerization of Cardanol in the Presence of Redox Mediators. Biomacromolecules 2003, 5(1), 1-4.
26: Xu, Y.-P.; Hung, G.-L.; Yu, Y.-T. Kinetics of phenolic polymerization catalyzed by peroxidase in organic media. Biotechnology and Bioengineering 1995, 47 (1), 117-119.
27. Tonelli, A. E., Effects of crosslink density and length on the number of intramolecular crosslinks (defects) introduced into a rubbery network. Polymer 1974, 75 (4), 194-196.
28. Jin, R.; Hiemstra, C.; Zhong, Z.; Feijen, J., Enzyme-mediated fast in šitu formation of hydrogels from dextran-tyramine conjugates. Biomaterials 2007, 28 (18), 2791-2800.
29. Park, K.-D.; Joung, Y.-K:; Park, K.-M. In šitu Forming Hydrogel and Biomedical Use Thereof2011 (WO2011/028031).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (12)
1. Derivát na bázi kyseliny hyaluronové podle obecného vzorce (I)
40 kde Ar je fenyl a Ri je ethylen, nebo Ar je indol a Ri je ethylen, nebo Ar je indol a R, je karboxyethylen, a kde R2 je alkyl o počtu uhlíku 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500.
2. Způsob přípravy derivátu podle obecného vzorce (I), vyznačující se tím, že se nejprve připraví aldehydický derivát kyseliny hyaluronové podle vzorce (II)
- 17CZ 303879 B6
Ac (II), kde aldehydický derivát se připraví s použitím oxidačního systému 4-acetamido-TEMPO/NaClO v protickém prostředí a má stupeň substituce 5 až 15 % a molekulovou hmotnost v rozmezí 10 000 g/mol až 2 000 000 g/mol, dále se zvlášť připraví sloučenina obecného vzorce (III)
R.
kde Ar je fenyl a R, je ethylen, nebo Ar je indol a Rj je ethylen, nebo Ar je indol a Ri je karboxyethylen, a kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500, přičemž sloučenina obecného vzorce (III) se připraví reakcí prekurzoru spaceru podle vzorce (IV)
Z-NH-R2-COOH (IV), kde Z je chránící skupina běžně používaná k ochraně primární aminoskupiny, s ligandem podle vzorce (V) v aprotickém prostředí při teplotě v rozmezí 40 °C až 150 °C po dobu 1 až 24 hodin v přítomnosti činidla aktivujícího karboxylové funkční skupiny, za vzniku sloučeniny obecného vzorce (VI)
Z-NH-R2-CO-NH-R,-Ar-OH (VI), ze které se sloučenina obecného vzorce (III) připraví odstraněním chránící skupiny Z, a pak se aldehydický derivát kyseliny hyaluronové podle vzorce (II) nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce (III) při pH v rozmezí 3 až 8 při laboratorní teplotě po dobu 1 až 72 hodin v přítomnosti pikolin-boranového komplexu za vzniku derivátu podle vzorce (I).
3. Způsob přípravy podle nároku 2, vyznačující se tím, že ligand dle obecného vzorce (V) je vybrán ze skupiny zahrnující tyramin, serotonin a 5-hydroxytryptofan.
4. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 2 až 3, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce (IV), tj. prekurzor spaceru, je vybrána ze skupiny aminokyselin zahrnující deriváty ft>-[(/év7-butoxykarbonyl)amino]karboxylových kyselin, kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7.
5. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 2 až 4, vyznačující se tím, že reakce prekurzoru spaceru s ligandem probíhá v prostředí THF nebo DMF při teplotě 50 °C po dobu 2 až 6 hodin v přítomnosti 1,1 ‘-karbodiimidazolu.
-18CZ 303879 B6
6. Způsob přípravy podle kteréhokoli z nároků 2 až 5, vyznačující se tím, že odstranění chránící skupiny Z se provede prostřednictvím trifluoroctové nebo chlorovodíkové kyseliny.
5
7. Hydrogel na bázi zesíťovaného derivátu podle obecného vzorce (I) kde Ar je fenyl a Ri je ethylen, nebo Ar je indol a Ri je ethylen, nebo Ar je indol a Ri je karboxyío ethylen, a kde R2 je alkyl o počtu uhlíků 3 až 7, a kde n je v rozmezí od 1 do 7500.
8. Způsob výroby hydrogelů definovaného v nároku 7, vyznačující se tím, že se na derivát podle obecného vzorce (I) působí generátorem reaktivních fenoxyradikálů při pH v rozmezí 4 až 10.
9. Způsob výroby podle nároku 8, vyznačující se tím, že generátor reaktivních fenoxyradikálů je vybrán ze skupiny zahrnující systém křenová peroxidáza a zdroj hydroxylových radikálů, kde zdrojem hydroxylových radikálů může být roztok peroxidu vodíku ve vodě, nebo systém oxidáza-kyslík-substrát, např. galaktózooxidáza-galaktóza nebo glukózooxidáza20 glukóza.
10. Použití hydrogelů definovaného v nároku 7 pro výrobu přípravků pro kosmetiku, medicínu, či regenerativní medicínu.
25
11. Použití podle nároku 10, kde přípravky zahrnují krytí pro hojení ran, biodegradabilní bariéiy bránící vzniku pooperačních srůstů, přípravky pro augmentaci měkkých tkání, výplně tkáňových defektů, scaffoldy pro tkáňové inženýrství.
12. Použití podle nároku 10, kde přípravky zahrnují oseté nebo neoseté scaffoldy pro léčbu
30 defektů kloubní chrupavky a kostních defektů.
1 výkres
-19CZ 303879 B6
Stress-strain křivky HA hydrogelů
Priority Applications (12)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20120136A CZ303879B6 (cs) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití |
| JP2014557995A JP6247645B2 (ja) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | ハイドロゲル形成可能なヒアルロン酸をベースとする誘導体，その調製法，前記誘導体をベースとするハイドロゲル，その調製法及び使用 |
| US14/381,091 US9492586B2 (en) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivatives of hyaluronic acid capable of forming hydrogels |
| PL13714185T PL2820051T3 (pl) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Pochodne na bazie kwasu hialuronowego, zdolne do tworzenia hydrożeli, sposób ich wytwarzania, hydrożele na bazie tych pochodnych, sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
| RU2014138544/13A RU2586931C2 (ru) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Производные на основе гиалуроновой кислоты, способные образовывать гидрогели, способ их получения, гидрогели на основе указанных производных, способ их получения и применения |
| PCT/CZ2013/000023 WO2013127374A1 (en) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivates based on hyaluronic acid, capable of forming hydrogels, method of preparation thereof, hydrogels based on said derivatives, method of preparation thereof and use |
| KR1020147023974A KR101953709B1 (ko) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | 하이드로겔을 형성할 수 있는 히알루론산계 유도체, 이의 제조 방법, 상기 유도체를 기재로 하는 하이드로겔, 이의 제조 방법 및 용도 |
| EP13714185.9A EP2820051B1 (en) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivates based on hyaluronic acid, capable of forming hydrogels, method of preparation thereof, hydrogels based on said derivatives, method of preparation thereof and use |
| ES13714185.9T ES2549668T3 (es) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivados basados en ácido hialurónico, capaces de formar hidrogeles, método de preparación de los mismos, hidrogeles basados en dicho derivados, método de preparación de los mismos y uso |
| BR112014020156-0A BR112014020156B1 (pt) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivado baseado em ácido hialurônico, método de preparação do derivado, hidrogel baseado no derivado de ligações cruzadas, método de produção do hidrogel e uso do hidrogel |
| HUE13714185A HUE028115T2 (en) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Hyaluronic acid-based derivatives for hydrogel formation, process for their preparation, hydrogels based on these derivatives, process for their preparation and application |
| DK13714185.9T DK2820051T3 (en) | 2012-02-28 | 2013-02-26 | Derivatives based on hyaluronic acid, capable of forming hydrogels, process for their preparation, hydrogels based on said derivatives, process for their preparation and use |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20120136A CZ303879B6 (cs) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2012136A3 CZ2012136A3 (cs) | 2013-06-05 |
| CZ303879B6 true CZ303879B6 (cs) | 2013-06-05 |
Family
ID=48047771
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20120136A CZ303879B6 (cs) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9492586B2 (cs) |
| EP (1) | EP2820051B1 (cs) |
| JP (1) | JP6247645B2 (cs) |
| KR (1) | KR101953709B1 (cs) |
| BR (1) | BR112014020156B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ303879B6 (cs) |
| DK (1) | DK2820051T3 (cs) |
| ES (1) | ES2549668T3 (cs) |
| HU (1) | HUE028115T2 (cs) |
| PL (1) | PL2820051T3 (cs) |
| RU (1) | RU2586931C2 (cs) |
| WO (1) | WO2013127374A1 (cs) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016202314A1 (en) | 2015-06-15 | 2016-12-22 | Contipro A.S. | Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups |
| US10414832B2 (en) | 2015-06-26 | 2019-09-17 | Contipro A.S | Derivatives of sulfated polysaccharides, method of preparation, modification and use thereof |
| US10617711B2 (en) | 2014-06-30 | 2020-04-14 | Contipro A.S. | Antitumor composition based on hyaluronic acid and inorganic nanoparticles, method of preparation thereof and use thereof |
| US10618984B2 (en) | 2016-06-27 | 2020-04-14 | Contipro A.S. | Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof |
| US10689464B2 (en) | 2015-03-09 | 2020-06-23 | Contipro A.S. | Self-supporting, biodegradable film based on hydrophobized hyaluronic acid, method of preparation and use thereof |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE4228331A1 (de) | 1992-08-26 | 1994-03-03 | Agie Ag Ind Elektronik | Elektroerosions-Schneidvorrichtung |
| CZ2014150A3 (cs) * | 2014-03-11 | 2015-05-20 | Contipro Biotech S.R.O. | Konjugáty oligomeru kyseliny hyaluronové nebo její soli, způsob jejich přípravy a použití |
| WO2016033337A1 (en) | 2014-08-27 | 2016-03-03 | The Cleveland Clinic Foundation | Biocompatible tissue graft |
| KR101772642B1 (ko) * | 2015-05-27 | 2017-08-29 | 광주과학기술원 | 하이브리드 중공 마이크로캡슐, 이를 포함하는 연조직용 스캐폴드, 및 이의 제조방법 |
| WO2018017657A1 (en) * | 2016-07-20 | 2018-01-25 | The Johns Hopkins University | Oxygen gradient hydrogel drug screening |
| MX2019008388A (es) | 2017-01-27 | 2019-12-02 | Univ Cornell | Polímeros e hidrogeles zwitteriónicamente modificados. |
| IT201800007186A1 (it) * | 2018-07-13 | 2020-01-13 | Composizione per l’uso nel trattamento della parodontite e dei suoi effetti | |
| JP7313370B2 (ja) * | 2018-09-28 | 2023-07-24 | Jsr株式会社 | 骨再生用組成物、骨再生用組成物キット、骨再生用部材および骨再生方法 |
| KR102308721B1 (ko) | 2019-03-14 | 2021-10-06 | 주식회사 세라트젠 | 세로토닌 수식 히알루론산을 포함하는 하이드로젤 및 이의 용도 |
| CZ2019360A3 (cs) * | 2019-06-10 | 2020-12-23 | Contipro A.S. | Sada pro přípravu hydrogelu na bázi hydroxyfenylového derivátu hyaluronanu, způsob přípravy hydrogelu a jeho použití |
| CA3145024A1 (en) * | 2019-07-03 | 2021-01-07 | Molly Sandra Shoichet | Hydrogel compositions and uses thereof |
| CN111135338A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-05-12 | 瑞希(重庆)生物科技有限公司 | 一种止血凝胶及其制备方法 |
| CZ2020263A3 (cs) * | 2020-05-12 | 2021-10-27 | Contipro A.S. | Sada gelotvorných roztoků určená pro přípravu hydrogelu na bázi kovalentně zesítěného hydroxyfenylového derivátu hyaluronanu k prevenci pooperačních komplikací souvisejících s vytvořením kolorektální anastomózy a její použití |
| EP4299083A4 (en) | 2021-03-31 | 2025-03-12 | Cellartgen Inc. | Phenol derivative-modified, tissue-derived extracellular matrix derivative for construction of artificial tissue |
| KR102760235B1 (ko) | 2021-04-09 | 2025-02-03 | 연세대학교 산학협력단 | 페놀 유도체로 수식된 셀룰로오스를 포함하는 하이드로젤 및 이의 용도 |
| CN115212345A (zh) * | 2022-06-07 | 2022-10-21 | 河南师范大学 | 一种多酚交联天然多糖基水凝胶敷料及其制备方法和应用 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070149441A1 (en) * | 1998-09-18 | 2007-06-28 | Orthogene Llc | Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same |
| WO2011028031A2 (en) * | 2009-09-04 | 2011-03-10 | Ajou University Industry-Academic Cooperation Foundation | In situ-forming hydrogel for tissue adhesives and biomedical use thereof |
| WO2011059326A2 (en) * | 2009-11-11 | 2011-05-19 | University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) | Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers |
| WO2011059325A2 (en) * | 2009-11-11 | 2011-05-19 | University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) | Dextran-hyaluronic acid based hydrogels |
| CZ302504B6 (cs) * | 2009-12-11 | 2011-06-22 | Contipro C A.S. | Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace |
| CZ302503B6 (cs) * | 2009-12-11 | 2011-06-22 | Contipro C A.S. | Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace |
Family Cites Families (117)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3720662A (en) | 1971-09-13 | 1973-03-13 | Nat Starch Chem Corp | Preparation of starch esters |
| US3728223A (en) | 1971-10-08 | 1973-04-17 | Amano Pharma Co Ltd | Production of hyaluronidase from a strain of streptomyces |
| CH628088A5 (en) | 1975-09-17 | 1982-02-15 | Dresden Arzneimittel | Process for obtaining streptococcal metabolic products |
| US4205025A (en) | 1975-12-22 | 1980-05-27 | Champion International Corporation | Synthetic polymeric fibrids, fibrid products and process for their production |
| JPS6033474B2 (ja) | 1978-05-11 | 1985-08-02 | 藤沢薬品工業株式会社 | 新規なヒアルロニダ−ゼｂｍｐ−８２３１およびその製造法 |
| US4716224A (en) | 1984-05-04 | 1987-12-29 | Seikagaku Kogyo Co. Ltd. | Crosslinked hyaluronic acid and its use |
| US4713448A (en) | 1985-03-12 | 1987-12-15 | Biomatrix, Inc. | Chemically modified hyaluronic acid preparation and method of recovery thereof from animal tissues |
| US4851521A (en) | 1985-07-08 | 1989-07-25 | Fidia, S.P.A. | Esters of hyaluronic acid |
| GB8519416D0 (en) | 1985-08-01 | 1985-09-04 | Unilever Plc | Oligosaccharides |
| JPS62104579A (ja) | 1985-10-30 | 1987-05-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | ヒアルロニダ−ゼの製造法 |
| JPH0751064B2 (ja) | 1986-08-13 | 1995-06-05 | 生化学工業株式会社 | 新規なヒアルロニダ−ゼｓｄ−６７８およびその製造法 |
| IT1219587B (it) | 1988-05-13 | 1990-05-18 | Fidia Farmaceutici | Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati |
| JPH0214019A (ja) | 1988-06-30 | 1990-01-18 | Tonen Corp | 繊維状成形物及びその製造方法 |
| US5824335A (en) | 1991-12-18 | 1998-10-20 | Dorigatti; Franco | Non-woven fabric material comprising auto-crosslinked hyaluronic acid derivatives |
| IT1254704B (it) | 1991-12-18 | 1995-10-09 | Mini Ricerca Scient Tecnolog | Tessuto non tessuto essenzialmente costituito da derivati dell'acido ialuronico |
| JP2855307B2 (ja) | 1992-02-05 | 1999-02-10 | 生化学工業株式会社 | 光反応性グリコサミノグリカン、架橋グリコサミノグリカン及びそれらの製造方法 |
| FR2689131B1 (fr) | 1992-03-30 | 1994-05-20 | Oreal | Procede de preparation de monoesters majoritairement en position 6' du d-maltose et leur utilisation dans les domaines cosmetique, bucco-dentaire, pharmaceutique et alimentaire. |
| JPH0625306A (ja) | 1992-04-21 | 1994-02-01 | Shiseido Co Ltd | 溶媒不溶化ヒアルロン酸及びその製造方法 |
| IT1263316B (it) | 1993-02-12 | 1996-08-05 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Tessuto non tessuto multistrato in cui uno degli strati e' costituito essenzialmente da esteri dell'acido ialuronico |
| NL9700003A (nl) | 1993-09-28 | 1997-07-01 | House Foods Corp | Werkwijze voor het inoculeren van Fistulina hepatica. |
| US5616568A (en) | 1993-11-30 | 1997-04-01 | The Research Foundation Of State University Of New York | Functionalized derivatives of hyaluronic acid |
| AU697739B2 (en) | 1994-03-14 | 1998-10-15 | Seikagaku Corporation | Material to be worn on the eyeball |
| US5455349A (en) | 1994-05-13 | 1995-10-03 | Polaroid Corporation | Vinylbenzyl thymine monomers |
| US6025444A (en) | 1994-11-17 | 2000-02-15 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Cinnamic acid derivative |
| JP3343181B2 (ja) * | 1995-09-20 | 2002-11-11 | 生化学工業株式会社 | 桂皮酸誘導体 |
| US5690961A (en) | 1994-12-22 | 1997-11-25 | Hercules Incorporated | Acidic polysaccharides crosslinked with polycarboxylic acids and their uses |
| ATE220691T1 (de) | 1995-03-07 | 2002-08-15 | Novartis Erfind Verwalt Gmbh | Fotochemisch vernetzte polysaccharidderivate zur chromatographischen trennung von enantiomeren |
| IL123500A (en) | 1995-08-29 | 2003-06-24 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Composite biomaterials for preventing post-surgical adhesions of tissues |
| US5789462A (en) | 1995-09-13 | 1998-08-04 | Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) | Photocured crosslinked-hyaluronic acid contact lens |
| DE19604706A1 (de) | 1996-02-09 | 1997-08-14 | Merck Patent Gmbh | Vernetzungsprodukte von Aminogruppen-haltigen Biopolymeren |
| DE19616010C2 (de) | 1996-04-23 | 1998-07-09 | Seitz Filter Werke | Verfahren und Vorrichtung zur Herstellung von Fibrets (Fibriden) aus Zellulosederivaten |
| US6632802B2 (en) | 1996-08-29 | 2003-10-14 | Fidia Advanced Biopolymers S.R.L. | Hyaluronic acid esters, threads and biomaterials containing them, and their use in surgery |
| IT1287698B1 (it) | 1996-08-29 | 1998-08-18 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Fili da sutura essenzialmente costituiti da derivati esterei dello acido ialuronico |
| JP4247846B2 (ja) | 1997-07-03 | 2009-04-02 | デュピュイ・スパイン・インコーポレーテッド | 架橋ポリサッカリド薬物キャリア |
| AU758575C (en) | 1998-04-30 | 2003-11-20 | Maruha Corporation | Compounds having glucuronic acid derivative and glucosamine derivative in structure thereof, method for producing the compounds, and uses of the compounds |
| HUP0101777A3 (en) | 1998-05-07 | 2003-04-28 | Tno | Process for selective oxidation of primary alcohols |
| IT1303735B1 (it) * | 1998-11-11 | 2001-02-23 | Falorni Italia Farmaceutici S | Acidi ialuronici reticolati e loro usi medici. |
| IT1302534B1 (it) | 1998-12-21 | 2000-09-05 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Composizioni iniettabili, biocompatibili e biodegradabili comprendentialmeno un derivato dell'acido ialuronico, cellule condrogeniche, per |
| ES2203230T3 (es) | 1998-12-23 | 2004-04-01 | Esparma Gmbh | Hialuronatoliasa como promotor de penetracion en agentes topicos. |
| DE19917614C2 (de) | 1999-04-19 | 2001-07-05 | Thueringisches Inst Textil | Verfahren zur Herstellung von cellulosischen Formkörpern mit hohem Adsorptionsvermögen |
| US6288043B1 (en) | 1999-06-18 | 2001-09-11 | Orquest, Inc. | Injectable hyaluronate-sulfated polysaccharide conjugates |
| US6592794B1 (en) | 1999-09-28 | 2003-07-15 | Organogenesis Inc. | Process of making bioengineered collagen fibrils |
| WO2001034657A1 (en) | 1999-11-08 | 2001-05-17 | Sca Hygiene Products Zeist B.V. | Process of oxidising primary alcohols |
| DE10003397A1 (de) | 2000-01-27 | 2001-08-09 | Hartmann Paul Ag | Polyelektrolyt-Feststoffsystem, Verfahren zur Herstellung desselben sowie Wundverband |
| IT1317358B1 (it) | 2000-08-31 | 2003-06-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico. |
| IT1317359B1 (it) | 2000-08-31 | 2003-06-16 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e |
| US6498269B1 (en) | 2000-10-17 | 2002-12-24 | The University Of Connecticut | Method for the oxidation of aldehydes, hemiacetals and primary alcohols |
| WO2002048197A1 (en) | 2000-12-13 | 2002-06-20 | Sca Hygiene Products Zeist B.V. | Process for oxidising primary alcohols |
| EP1217008B1 (en) | 2000-12-19 | 2006-03-01 | Seikagaku Corporation | Photocurable hyaluronic acid derivative and process for producing the same, and photocured crosslinked hyaluronic acid derivative and medical material using the same |
| FR2819808B1 (fr) | 2001-01-19 | 2003-04-18 | Simafex | Compositions stabilisees d'acide o-iodoxybenzoique et leur procede de preparation |
| CA2435491C (en) | 2001-01-31 | 2010-02-02 | Seikagaku Corporation | Crosslinked polysaccharide sponge |
| US6902548B1 (en) | 2001-03-19 | 2005-06-07 | Ed Schuler | Use of Streptomyces hyalurolyticus enzyme in ophthalmic treatments |
| US6673919B2 (en) | 2001-03-30 | 2004-01-06 | Chisso Cororation | Chemically modified hyaluronic acid or salts thereof, and a process for producing thereof |
| US6946284B2 (en) | 2001-11-16 | 2005-09-20 | University Of Massachusetts | Solubilizing cross-linked polymers with photolyase |
| US20060189516A1 (en) | 2002-02-19 | 2006-08-24 | Industrial Technology Research Institute | Method for producing cross-linked hyaluronic acid-protein bio-composites |
| JP3975267B2 (ja) | 2002-06-03 | 2007-09-12 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 多糖物質のアシル化方法 |
| US20040101546A1 (en) | 2002-11-26 | 2004-05-27 | Gorman Anne Jessica | Hemostatic wound dressing containing aldehyde-modified polysaccharide and hemostatic agents |
| US7550136B2 (en) | 2002-12-20 | 2009-06-23 | University Of Massachusetts | Photo-reactive polymers and devices for use in hair treatments |
| US6982298B2 (en) | 2003-01-10 | 2006-01-03 | The Cleveland Clinic Foundation | Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof |
| US7465766B2 (en) | 2004-01-08 | 2008-12-16 | The Cleveland Clinic Foundation | Hydroxyphenyl cross-linked macromolecular network and applications thereof |
| FR2852012B1 (fr) | 2003-03-04 | 2006-06-23 | Oreal | Procede de preparation de derives o-acyles du glucose |
| EP1607405B1 (en) | 2003-03-11 | 2011-05-04 | Seikagaku Corporation | Photocrosslinked polysaccharide composition and process for producing the same |
| DE10331342B4 (de) | 2003-07-11 | 2009-03-12 | Thüringisches Institut für Textil- und Kunststoff-Forschung e.V. | Thermostabile Form- oder Spinnmasse |
| CA2538793C (en) | 2003-09-19 | 2011-01-11 | Colorado State University Research Foundation (Csurf) | Hyaluronan (ha) esterification via acylation technique for moldable devices |
| GB2408741B (en) | 2003-12-04 | 2008-06-18 | Ind Tech Res Inst | Hyaluronic acid derivative with urethane linkage |
| US20100330143A1 (en) | 2003-12-04 | 2010-12-30 | University Of Utah Research Foundation | Modified macromolecules and methods of making and using thereof |
| US8313765B2 (en) | 2003-12-04 | 2012-11-20 | Industrial Technology Research Institute | Biodegradable hyaluronic acid derivative, biodegradable polymeric micelle composition and pharmaceutical or bioactive composition |
| JP2008505716A (ja) | 2004-07-09 | 2008-02-28 | ザ クリーヴランド クリニック ファウンデーション | ヒドロキシフェニル架橋高分子ネットワーク及びその用途 |
| US7323425B2 (en) | 2004-08-27 | 2008-01-29 | Stony Brook Technology And Applied Research | Crosslinking of hyaluronan solutions and nanofiberous membranes made therefrom |
| DK1817347T3 (en) | 2004-11-24 | 2017-08-14 | Albumedix As | Process for Crosslinking Hyaluronic Acid with Divinyl Sulfone |
| US7214759B2 (en) | 2004-11-24 | 2007-05-08 | Advanced Cardiovascular Systems, Inc. | Biologically absorbable coatings for implantable devices based on polyesters and methods for fabricating the same |
| US7680038B1 (en) | 2005-04-25 | 2010-03-16 | Electronic Arts, Inc. | Dynamic bandwidth detection and response for online games |
| GB0513552D0 (en) | 2005-07-01 | 2005-08-10 | Bristol Myers Squibb Co | Bandage |
| WO2007004675A1 (ja) | 2005-07-06 | 2007-01-11 | Seikagaku Corporation | 薬剤導入光架橋ヒアルロン酸誘導体ゲル |
| ITPD20050206A1 (it) | 2005-07-07 | 2007-01-08 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Biomateriali in forma di fibra da impiegarsi come dispositivi medici nel trattamento delle ferite e loro processi di produzione |
| ITMI20051415A1 (it) | 2005-07-22 | 2007-01-23 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Biomateriali a base di corbossimetilcellulosa salificata con zinco associata a derivati dell'acido ialuronico da impiegarsi come dispositivi medici con attivita' antimicrobica ed antifungina e loro processo di produzione |
| US7993678B2 (en) | 2005-09-26 | 2011-08-09 | Novozymes Biopolymer A/S | Hyaluronic acid derivatives |
| EP1968499A1 (en) | 2005-12-14 | 2008-09-17 | Anika Therapeutics Inc. | Bioabsorbable implant of hyaluronic acid derivative for treatment of osteochondral and chondral defects |
| EP1826274A1 (en) | 2006-02-24 | 2007-08-29 | Kikkoman Corporation | Enzyme composition, low molecular weight hyaluronan and process for preparing the same |
| JP4892679B2 (ja) | 2006-03-27 | 2012-03-07 | 国立大学法人弘前大学 | ゲル紡糸によるヒアルロン酸繊維およびその製造方法 |
| JP2007297360A (ja) * | 2006-05-08 | 2007-11-15 | Ihara Suisan Kk | ハイドロゲル、その製造方法およびその用途 |
| KR20070118730A (ko) | 2006-06-13 | 2007-12-18 | 주식회사 코오롱 | 보습성이 우수한 창상피복재 및 그의 제조방법 |
| US20080124395A1 (en) | 2006-06-22 | 2008-05-29 | Weiliam Chen | Formulations and devices for treatment or prevention of neural ischemic damage |
| US20080063617A1 (en) | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Abrahams John M | Cosmetics formulations |
| ITMI20061726A1 (it) | 2006-09-11 | 2008-03-12 | Fidia Farmaceutici | Derivati crosslinkati a base di acido ialuronico reticolato via click chemistry |
| CZ302856B6 (cs) | 2006-09-27 | 2011-12-14 | Cpn Spol. S R. O. | Zpusob prípravy derivátu polysacharidu |
| RU2432181C2 (ru) | 2006-12-22 | 2011-10-27 | Кромафарма Гезельшафт М.Б.Х. | Применение полимеров |
| KR20080062092A (ko) | 2006-12-29 | 2008-07-03 | 주식회사 핸슨바이오텍 | 세포전달체로서의 히알루론산 유도체 및 이의 제조 방법 |
| JP2008174510A (ja) * | 2007-01-19 | 2008-07-31 | Kyushu Univ | 多糖質微粒子及び多糖質微粒子の製造方法 |
| JP5329767B2 (ja) | 2007-02-26 | 2013-10-30 | 帝人株式会社 | 芳香族コポリアミド繊維の製造装置 |
| CZ2007299A3 (cs) | 2007-04-24 | 2009-02-04 | Cpn Spol. S R. O. | Príprava nanovláken z polysacharidu a jejich smesí s polyvinylalkoholem |
| JP5165281B2 (ja) | 2007-06-01 | 2013-03-21 | 株式会社バイオベルデ | ２反応剤型の医療用含水ゲル形成剤、及び、これより得られるヒアルロン酸ゲル |
| RU2471867C2 (ru) | 2007-06-19 | 2013-01-10 | Тамара П. Уваркина | Гиалуронидаза и способ ее применения |
| FR2921675B1 (fr) | 2007-09-28 | 2010-03-19 | Univ Claude Bernard Lyon | Filament a base d'acide hyaluronique et son procede d'obtention. |
| BRPI0908352A2 (pt) | 2008-02-11 | 2015-07-28 | Basf Se | Processo para produzir estruturas porosas, estrutura porosa, e, uso da mesma |
| WO2009108100A1 (en) | 2008-02-29 | 2009-09-03 | Ipr-Systems Sweden Ab | Composition for the formation of gels |
| JP5563563B2 (ja) * | 2008-06-05 | 2014-07-30 | エージェンシー フォー サイエンス， テクノロジー アンド リサーチ | ペルオキシダーゼおよび低濃度の過酸化水素の存在下でのヒドロゲルの形成方法 |
| FR2934999B1 (fr) * | 2008-08-13 | 2011-07-29 | Adocia | Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane |
| US9228027B2 (en) | 2008-09-02 | 2016-01-05 | Allergan Holdings France S.A.S. | Threads of Hyaluronic acid and/or derivatives thereof, methods of making thereof and uses thereof |
| CZ301555B6 (cs) | 2008-11-06 | 2010-04-14 | Cpn S. R. O. | Zpusob prípravy DTPA sítovaných derivátu kyseliny hyaluronové a jejich modifikace |
| ITRM20080636A1 (it) | 2008-11-28 | 2010-05-29 | Univ Palermo | Procedimento per la produzione di derivati funzionalizzati dell acido ialuronico e relativi idrogeli. |
| JP2010138276A (ja) | 2008-12-11 | 2010-06-24 | Nipro Corp | ヒアルロン酸単糸の製造方法 |
| AU2010215199B2 (en) | 2009-02-21 | 2015-01-15 | Sofradim Production | Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers |
| WO2010095049A1 (en) | 2009-02-21 | 2010-08-26 | Sofradim Production | Crosslinked fibers and method of making same by extrusion |
| US9273191B2 (en) | 2009-02-21 | 2016-03-01 | Sofradim Production | Medical devices with an activated coating |
| CZ2009168A3 (cs) | 2009-03-17 | 2010-07-21 | Contipro C, A.S. | Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové pomocí O-acyl-O´-alkylkarbonátu v prítomnosti substituovaného pyridinu |
| US8551378B2 (en) | 2009-03-24 | 2013-10-08 | North Carolina State University | Nanospinning of polymer fibers from sheared solutions |
| US20120219554A2 (en) | 2009-05-14 | 2012-08-30 | Fidia Farmaceutici S.P.A. | Extracellular yaluronidase from streptomyces koganeiensis |
| WO2010138074A1 (en) | 2009-05-29 | 2010-12-02 | Hilborn Joens | Hyaluronic acid based delivery systems |
| SG178146A1 (en) | 2009-07-30 | 2012-03-29 | Carbylan Biosurgery Inc | Modified hyaluronic acid polymer compositions and related methods |
| US8197849B2 (en) | 2010-02-12 | 2012-06-12 | National Health Research Institutes | Cross-linked oxidated hyaluronic acid for use as a vitreous substitute |
| CN101897976A (zh) | 2010-07-16 | 2010-12-01 | 沈阳药科大学 | 一种药物增溶载体及其制备方法和应用 |
| CZ302994B6 (cs) | 2010-12-31 | 2012-02-08 | Cpn S.R.O. | Hyaluronová vlákna, zpusob jejich prípravy a použití |
| CZ304072B6 (cs) | 2011-04-26 | 2013-09-25 | Contipro Biotech S.R.O. | Amfoterní materiál na bázi sítované kyseliny hyaluronové, zpusob jeho prípravy, materiály obsahující aktivní cinidla uzavrené v síti hyaluronanu, zpusob jejich prípravy a jejich pouzití |
| CN102154738B (zh) | 2011-05-10 | 2012-08-01 | 青岛大学 | 一种红藻琼胶纤维的制备方法 |
| BR112014009292B1 (pt) | 2011-10-18 | 2021-06-15 | Heiq Pty Ltd | Processo para a preparação de fibras |
| CZ304512B6 (cs) | 2012-08-08 | 2014-06-11 | Contipro Biotech S.R.O. | Derivát kyseliny hyaluronové, způsob jeho přípravy, způsob jeho modifikace a použití |
-
2012
- 2012-02-28 CZ CZ20120136A patent/CZ303879B6/cs unknown
-
2013
- 2013-02-26 RU RU2014138544/13A patent/RU2586931C2/ru active
- 2013-02-26 WO PCT/CZ2013/000023 patent/WO2013127374A1/en active Application Filing
- 2013-02-26 HU HUE13714185A patent/HUE028115T2/en unknown
- 2013-02-26 BR BR112014020156-0A patent/BR112014020156B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-02-26 PL PL13714185T patent/PL2820051T3/pl unknown
- 2013-02-26 JP JP2014557995A patent/JP6247645B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-26 KR KR1020147023974A patent/KR101953709B1/ko active Active
- 2013-02-26 EP EP13714185.9A patent/EP2820051B1/en active Active
- 2013-02-26 DK DK13714185.9T patent/DK2820051T3/en active
- 2013-02-26 ES ES13714185.9T patent/ES2549668T3/es active Active
- 2013-02-26 US US14/381,091 patent/US9492586B2/en active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070149441A1 (en) * | 1998-09-18 | 2007-06-28 | Orthogene Llc | Functionalized derivatives of hyaluronic acid, formation of hydrogels in situ using same, and methods for making and using same |
| WO2011028031A2 (en) * | 2009-09-04 | 2011-03-10 | Ajou University Industry-Academic Cooperation Foundation | In situ-forming hydrogel for tissue adhesives and biomedical use thereof |
| WO2011059326A2 (en) * | 2009-11-11 | 2011-05-19 | University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) | Hydrogels based on polymers of dextran tyramine and tyramine conjugates of natural polymers |
| WO2011059325A2 (en) * | 2009-11-11 | 2011-05-19 | University Of Twente, Institute For Biomedical Technology And Technical Medicine (Mira) | Dextran-hyaluronic acid based hydrogels |
| CZ302504B6 (cs) * | 2009-12-11 | 2011-06-22 | Contipro C A.S. | Derivát kyseliny hyaluronové oxidovaný v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd, zpusob jeho prípravy a zpusob jeho modifikace |
| CZ302503B6 (cs) * | 2009-12-11 | 2011-06-22 | Contipro C A.S. | Zpusob prípravy derivátu kyseliny hyaluronové oxidovaného v poloze 6 glukosaminové cásti polysacharidu selektivne na aldehyd a zpusob jeho modifikace |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Jason A. Burdick and Glenn D. Prestwich : Hyaluronic Acid Hydrogels for Biomedical Applications, Advenced Materials 2011, 23, H41-H56 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10617711B2 (en) | 2014-06-30 | 2020-04-14 | Contipro A.S. | Antitumor composition based on hyaluronic acid and inorganic nanoparticles, method of preparation thereof and use thereof |
| US10689464B2 (en) | 2015-03-09 | 2020-06-23 | Contipro A.S. | Self-supporting, biodegradable film based on hydrophobized hyaluronic acid, method of preparation and use thereof |
| WO2016202314A1 (en) | 2015-06-15 | 2016-12-22 | Contipro A.S. | Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups |
| US10759878B2 (en) | 2015-06-15 | 2020-09-01 | Contipro A.S. | Method of crosslinking of polysaccharides using photoremovable protecting groups |
| US10414832B2 (en) | 2015-06-26 | 2019-09-17 | Contipro A.S | Derivatives of sulfated polysaccharides, method of preparation, modification and use thereof |
| US10618984B2 (en) | 2016-06-27 | 2020-04-14 | Contipro A.S. | Unsaturated derivatives of polysaccharides, method of preparation thereof and use thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2586931C2 (ru) | 2016-06-10 |
| US20150000561A1 (en) | 2015-01-01 |
| US9492586B2 (en) | 2016-11-15 |
| KR101953709B1 (ko) | 2019-03-04 |
| PL2820051T3 (pl) | 2016-02-29 |
| JP2015508118A (ja) | 2015-03-16 |
| ES2549668T3 (es) | 2015-10-30 |
| KR20140127286A (ko) | 2014-11-03 |
| WO2013127374A1 (en) | 2013-09-06 |
| BR112014020156A8 (pt) | 2017-07-11 |
| HUE028115T2 (en) | 2016-11-28 |
| DK2820051T3 (en) | 2015-10-19 |
| BR112014020156B1 (pt) | 2020-12-15 |
| EP2820051A1 (en) | 2015-01-07 |
| RU2014138544A (ru) | 2016-04-20 |
| JP6247645B2 (ja) | 2017-12-13 |
| CZ2012136A3 (cs) | 2013-06-05 |
| BR112014020156A2 (cs) | 2017-06-20 |
| EP2820051B1 (en) | 2015-09-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ303879B6 (cs) | Deriváty na bázi kyseliny hyaluronové schopné tvorit hydrogely, zpusob jejich prípravy, hydrogely na bázi techto derivátu, zpusob jejich prípravy a pouzití | |
| Jin et al. | Enzymatically-crosslinked injectable hydrogels based on biomimetic dextran–hyaluronic acid conjugates for cartilage tissue engineering | |
| EP3524634B1 (en) | Biocompatible hydrogel and method for producing same | |
| Jin et al. | Injectable chitosan-based hydrogels for cartilage tissue engineering | |
| Wang et al. | Injectable dextran hydrogels fabricated by metal-free click chemistry for cartilage tissue engineering | |
| Jin et al. | Chondrogenesis in injectable enzymatically crosslinked heparin/dextran hydrogels | |
| Pouyani et al. | Novel hydrogels of hyaluronic acid: synthesis, surface morphology, and solid-state NMR | |
| Carvalho et al. | Production and characterization of a new dextrin based hydrogel | |
| Markstedt et al. | Synthesis of tunable hydrogels based on O-acetyl-galactoglucomannans from spruce | |
| TR201802761T4 (tr) | Yüksek molekül ağırlıklı heparosan polimerler ve bunların üretimine ve kullanımına yönelik metotlar. | |
| CN110078941A (zh) | 一种改性纳米羟基磷灰石超分子复合水凝胶及制备方法 | |
| KR101869988B1 (ko) | 점탄성 히알루론산 가교물 제조용 조성물, 및 이를 이용하여 얻은 히알루론산 가교물 | |
| Cheng et al. | An enzyme-mediated in situ hydrogel based on polyaspartamide derivatives for localized drug delivery and 3D scaffolds | |
| KR20180019658A (ko) | 광제거성 보호기를 이용한 다당류의 가교 방법 | |
| KR102315457B1 (ko) | 버크홀데리아 유래 티로시나아제를 이용하여 제조된 접착력을 가지는 가교 결합 물질, 그의 제조 방법 및 그의 응용 | |
| JP3893468B2 (ja) | 多糖ハイドロゲル及びその製造方法 | |
| WO2018139042A1 (ja) | 変性多糖およびその製造方法、ならびにその用途 | |
| CZ308598B6 (cs) | Sada pro přípravu hydrogelu na bázi hydroxyfenylového derivátu hyaluronanu, způsob přípravy hydrogelu a jeho použití | |
| Carvalho et al. | Implantable Patch of Oxidized Nanofibrillated Cellulose and Lysozyme Amyloid Nanofibrils for the Regeneration of Infarcted Myocardium Tissue and Local Delivery of RNA‐Loaded Nanoparticles | |
| JP2018123241A (ja) | 変性多糖およびその用途 | |
| JP5122436B2 (ja) | 新規なヘパリン代替材料およびその製造方法 | |
| Guaresti Larrea | Click chemistry: an efficient toolbox for the design of chitosand-based hydrogels for biomedicine | |
| Larrea | Click chemistry: an efficient toolbox for the design of chitosand-based hydrogels for biomedicine | |
| LISHAN | AN INJECTABLE HYDROGEL SYSTEM WITH UNIQUE TUNABLE STIFFNESS FOR TISSUE ENGINEERING |