CZ294556B6 - Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulinu a způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulinu a protaminu - Google Patents
Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulinu a způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulinu a protaminu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ294556B6 CZ294556B6 CZ19951543A CZ154395A CZ294556B6 CZ 294556 B6 CZ294556 B6 CZ 294556B6 CZ 19951543 A CZ19951543 A CZ 19951543A CZ 154395 A CZ154395 A CZ 154395A CZ 294556 B6 CZ294556 B6 CZ 294556B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- insulin
- protamine
- lys
- human insulin
- pro
- Prior art date
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical class N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 139
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 title claims abstract description 102
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 60
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title abstract description 27
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 claims abstract description 89
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 claims abstract description 89
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 78
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 claims abstract description 62
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 claims abstract description 41
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims abstract description 40
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims abstract description 38
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 47
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 40
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 27
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 10
- 239000012458 free base Substances 0.000 claims description 9
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 241001202975 Isophanes Species 0.000 claims description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 64
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 30
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 20
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 12
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 11
- LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N caninsulin Chemical compound [Zn].C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC3N=CN=C3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1C=NC=N1 LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N 0.000 description 11
- 229940061607 dibasic sodium phosphate Drugs 0.000 description 11
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 7
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 6
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 108010081368 Isophane Insulin Proteins 0.000 description 4
- 102000005237 Isophane Insulin Human genes 0.000 description 4
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 3
- AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N Lys-Pro Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O AIXUQKMMBQJZCU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 3
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940006445 isophane insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 2
- -1 phenol compound Chemical class 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000265913 Crataegus laevigata Species 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000005561 Human Isophane Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108010084048 Human Isophane Insulin Proteins 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010054805 Macroangiopathy Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017442 Retinal disease Diseases 0.000 description 1
- 206010038923 Retinopathy Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108010061168 Ultralente Insulin Proteins 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000011833 dog model Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229940084776 humulin n Drugs 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002933 immunoreactive insulin Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 206010062198 microangiopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Je popsán parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulinu, který obsahuje monomerní analog inzulinu, protamin, zinek a fenolickou sloučeninu, přičemž monomerním analogem inzulinu je lidský inzulin, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulin nebo des(B27)-lidský inzulin. Je také popsán způsob přípravy krystalů Lys.sup.B28.n.Pro.sup.B29.n.-lidského inzulinu a protaminu, při kterém se uvede do styku přesně definovaný vodný roztok Lys.sup.B28.n.Pro.sup.B29.n.-lidského inzulinu v hexamerním asociovaném stavu s přesně definovaným protaminovým roztokem při teplotě 8 až 17 .degree.C za vzniku krystalů.ŕ
Description
Oblast techniky
Tento vynález se týká parenterálního farmaceutického prostředku na bázi analogu inzulínu, který obsahuje monomemí analog inzulínu, protamin, zinek a fenolickou sloučeninu, a také způsobu přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulínu a protaminu tím, že se uvede do styku vodný roztok LysB28ProB29-lidského inzulínu v hexamemím asociovaném stavu s protaminovým roztokem.
Dosavadní stav techniky
Od zavedení inzulínu v 20. letech minulého století se dosahuje trvalých pokroků ve zlepšení při léčení diabetes mellitus. Hlavního pokroku se dosáhlo v čistotě a dostupnosti inzulínu s vývojem rekombinantní DNA technologie. Byly rovněž vyvinuty různé farmaceutické prostředky s různou časovou aktivací. V současné době je obecně dostupno sedm druhů obchodních inzulínových prostředků: regulérní inzulín, inzulín semilente, globinový inzulín, izofanový inzulín, zinkinzulinová suspenze, protamin-zink-inzulin a inzulín ultralente.
Přes řadu dostupných farmaceutických prostředků je terapie subkutánního vstřikování injekcemi stále neuspokojivá pro jedince, potřebujícího regulaci a normalizované řízení glykemické hladiny. Časté vybočení z normální glykemické hladiny u pacienta vede k hyperglykemii nebo k hypoglykemii a k dlouhodobým komplikacím včetně retinopatie, neuropatie, nefropatie, mikroangiopatie a makroangiopatie.
Aby se pomohlo vyhnout extrémním glykemickým hladinám, diabetici často praktikují terapii opakovaného vstřikování, přičemž inzulín se podává při každém jídle. Tato terapie však dosud není optimalizována. Nejrychleji působící, obchodně dostupný inzulín vykazuje vrchol příliš pozdě po vstříknutí a trvá příliš dlouho, než se dosáhne optimálního seřízení hladin glukózy. Nejnověji se věnuje velké úsilí vývoji inzulínových prostředků a inzulínových analogových prostředků, které by měly jinou kinetiku procesu subkutánní absorpce.
Jelikož všechny obchodní farmaceutické prostředky inzulínu obsahují inzulín ve spontánně asociovaném stavu a převážně v zinkové hexamerní formě, je domněnka, že stupněm, limitujícím rychlost absorpce inzulínu z místa subkutánního vstřiku do krevního oběhu, je disociace spontánně agregovaného inzulínového hexameru (Brange a kol., Diabetes Care 13, str. 923 až 954, 1990).
V poslední době byly vyvinuty monomemí inzulínové analogy, které jsou méně náchylné k asociaci na tvary s vyšší molekulovou hmotností, než má lidský inzulín. Tento nedostatek spontánní asociace je způsoben modifikací v aminokyselinové sekvenci lidského inzulínu, která snižuje asociaci primárně přerušováním tvorby dimerů (například Brems a kol., Protein Engineering 4:5, str. 527 až 533, 1992 a Brange a kol. Nátuře 333, str. 679 až 682, 1988). Podle toho mají monomemí inzulínové analogy poměrně rychlejší nástup aktivity při uchování biologické aktivity nativního lidského inzulínu. Tyto inzulínové analogy zajišťují rychlou absorpci v čase injekce a vrcholný účinek inzulínu v těsné blízkosti uvolňování glukózy po jídle, spojeného s odezvou na pokrm.
Fyzikální vlastnosti a charakteristiky monomemích analogů nejsou obdobné jako u inzulínu. Například Brems a kol. zjistili, že různé monomemí analogy mají malou zinkem vyvolanou asociaci, pokud vůbec vykazují asociace. Jedinou pozorovanou asociací je vytváření mnohonásobně větší molekulové hmotnosti. To se dramaticky odlišuje od inzulínu, který je téměř
- 1 CZ 294556 B6 výhradně v uspořádané hexamerové konfiguraci v přítomnosti zinku (Brange a kol., Diabetes Care 13, str. 923 až 954, 1990). Nedostatek asociace se přičítá rychle působícím charakteristikám analogů. Jelikož mají analogy menší sklon k asociování, je dosti překvapivé, že se dá formulovat monomerní inzulínový analog k zajištění přechodné doby („intermediate duration“) působení.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulínu, jehož podstata spočívá vtom, že obsahuje monomerní analog inzulínu, protamin, zinek a fenolickou sloučeninu, přičemž monomemím analogem inzulínu je lidský inzulin, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulin nebo des(B27)-lidský inzulin.
Výhodným provedením tohoto vynálezu je prostředek, kde koncentrace protaminu je od 0,2 do 1,5 mg na 100 MJ analogu inzulínu, vztaženo na volnou bázi.
Ve výhodném provedení prostředku podle tohoto vynálezu koncentrace zinku je od 0,35 do 0,9 % hmotnostního. Přitom účelně fenolickou sloučeninou je fenol nebo m-kresol.
Výhodné provedení tohoto vynálezu spočívá v parenterálním farmaceutickém prostředku, který obsahuje monomerní analog inzulínu a protaminu v izofanovém poměru, 0,35 až 0,9 % hmotnostního zinku a fenolickou sloučeninu, kde monomemím analogem inzulínu je lidský inzulin, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulin nebo des(B27)-lidský inzulin.
V jiném výhodném provedení tohoto vynálezu parenterální farmaceutický prostředek obsahuje LysB28ProB29-lidský inzulin, 0,27 až 0,32 mg protaminu na 100 MJ analogu inzulínu, 0,35 až 0,9 % hmotnostního zinku a fenolickou sloučeninu. Je výhodné, pokud LysB28ProB29-lidský inzulin a protamin jsou krystalické. Zvláště výhodné je, pokud parenterální farmaceutický prostředek obsahuje dále izotonické činidlo a popřípadě obsahuje dále fyziologicky přijatelný pufr. Je rovněž zvláště výhodné, pokud koncentrace protaminu je 0,30 mg protaminu na 100 MJ LysB28ProB29-lidského inzulínu a popřípadě též koncentrace zinkuje 0,7 % hmotnostního.
Podle jiného výhodného provedení tohoto vynálezu v parenterálním farmaceutickém prostředku analogem inzulínu je LysB28ProB29-lidský inzulin, des(B27)-lidský inzulin nebo des(B28-B30)lidský inzulin.
Předmětem tohoto vynálezu je také způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulínu a protaminu, jehož podstata spočívá v tom, že se uvede do styku vodný roztok LysB28ProB29-lidského inzulínu v hexamemím asociovaném stavu a protaminový roztok při teplotě 8 až 17 °C za vzniku krystalů, přičemž uvedený vodný roztok obsahuje 0,35 až 0,9 % hmotnostního zinku, vztaženo na hmotnost přítomného analogu inzulínu, LysB28ProB29-lidský inzulin a fenolickou sloučeninu vybranou ze souboru, zahrnujícího m-kresol, fenol nebo směs m-kresolu a fenolu, při hodnotě pH 7,1 až 7,6, a uvedený protaminový roztok obsahuje protamin při hodnotě pH7,l až 7,6, takže konečná koncentrace protaminu je 0,27 až 0,32 mg protaminu na 100 MJ analogu inzulínu, za předpokladu, že způsob se provádí v přítomnosti méně než 4 mg/ml chloridu sodného.
Při výhodném provedení tohoto způsobuje teplota od 13 do 17 °C.
-2CZ 294556 B6
Při jiném výhodném provedení tohoto způsobuje koncentrace zinku 0,7 % hmotnostního, vztaženo na hmotnost přítomného analogu inzulínu.
Předmětem tohoto vynálezu je též parenterální farmaceutický prostředek, který obsahuje směs rozpustného monomemího analogu lidského inzulínu a krystalů analogu inzulínu ve vodném ředidle, kde objemový poměr rozpustného monomemího analogu lidského inzulínu a krystalů analogu inzulínu je od 1 : 99 do 99 : 1, přičemž rozpustným monomemím analogem inzulínu je lidský inzulín, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulín nebo des(B27)-lidský inzulín.
Při výhodném provedení tohoto parenterálního farmaceutického prostředku podle předmětného vynálezu směsí jsou krystaly komplexu LysB28ProB29-lidského inzulínu sprotaminem a LysB28ProB29-lidský inzulin. Je účelné, pokud přitom jejich hmotnostní poměr je 75 :25 až 25 : 75, obzvláště výhodně 50 : 50.
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 je grafické znázornění profilu působení LysB28-ProB29hI-NPD a lidského inzulinuNPH. Na obrázku je vyneseno pJ/ml v závislosti na čase infuze. Obrázek objasňuje přednosti tohoto vynálezu. Na ose xje vynesena doba infuze v minutách, na ose y je vyneseno pj/mlnepřerušovaná čára se týká pJ/ml (NPD), přerušovaná čára se týká pJ/ml (NPH).
Na obr. 2 jsou krystaly AspB28protamin-lidského inzulínu a protaminu podle tohoto vynálezu. Snímek je pořízen s rozdílným fázovým kontrastem při 1000-násobném zvětšení.
Na obr. 3 jsou krystaly LysB28-ProB28hI-protaminu podle tohoto vynálezu. Snímek je pořízen s rozdílným fázovým kontrastem při 1000-násobném zvětšení.
Dále se uvádí podrobnější popis tohoto vynálezu v širších souvislostech.
Jak je shora uvedeno, vynález poskytuje různé prostředky monomemího inzulínového analogu. Používaným výrazem „monomemí inzulínový analog“ nebo „inzulínový analog“ se zde vždy míní rychle působící inzulínový analog, kteiý je méně náchylný na dimerizaci a ke spontánní asociaci. Monomerním inzulínovým analogem je lidský inzulin, kde Pro v poloze B28 je substituován Asp, Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je lysin nebo prolin; des(B28-B30)lidský inzulin; nebo des(B27)-lidský inzulin. Monomemí inzulínové analogy popsal Chance a kol. v evropském patentu EP 0 383 472 a Brange a kol. v evropském patentu EP 0 214 826. Tyto publikace jsou zde zahrnuty v celém svém obsahu.
Výraz „substituovat“, jak je zde použit výše, je ekvivalentní s výrazem „nahradit“.
Odborníkovi v oboru je zřejmé, že jsou možné ještě jiné modifikace monomemího inzulínového analogu. Tyto modifikace jsou v oboru široce akceptovány a zahrnují náhradu histidinového zbytku v poloze BIO kyselinou asparagovou; náhradu fenylalaninového zbytku v poloze B1 kyselinou asparagovou; náhradu threoninového zbytku v poloze B30 alaninem; náhradu serinového zbytku v poloze B9 kyselinou asparagovou; vypuštění aminokyselin v poloze B1 samotné nebo v kombinaci s vypuštěním v poloze B2; a vypuštění threoninu z polohy B30.
Všechny zde používané zkratky aminokyselin odpovídají zkratkám, přijatým úřadem United States Patent & Trademark Office, uvedeným v 37 C.F.R. § 1 822(b) (2). Obzvlášť výhodnými inzulínovými analogy jsou LysB28ProB29-lidský inzulin (B28 je Lys; B29 je Pro) a AspB28 je lidský inzulin (B28 je Asp).
-3 CZ 294556 B6
Výrazem „monomemí inzulínový analog -NPD“ a „inzulínový analog-NPD“ se zde vždy míní suspenze krystalického inzulínového analogu a protaminu ve formulaci. NPD znamená Neutrál Protamine formulaci podle DeFelippise. Kompozice se připravuje popsaným způsobem podle vynálezu. Odvozené pojmy „krystaly inzulínového analogu-NPD“, „krystalický inzulínový analog-NPD“, nebo „Lys Pro -lidské inzulin-protaminové-NPD krystaly“ se týkají inzulín analog-protaminových krystalů ve formulaci NPD.
Výrazem „ošetřování“ se zde vždy míní zacházení s nemocným a péče o nemocné za účelem boje proti nemoci, stavu nebo poruše a zahrnuje podávání sloučeniny podle vynálezu k předcházení nástupu symptomů nebo komplikací, snižování symptomů nebo komplikací nebo eliminaci onemocnění, chorobných stavů nebo poruch.
Výrazem „izotonické činidlo“ se zde vždy míní činidlo fyziologicky snášené a zahrnuje vhodnou tonicitu k vytváření nebo k prevenci toku vody přes buněčnou membránu. Pro tyto účely se používají sloučeniny jako glycerin v koncentracích o sobě známých.
Výrazem „fenolická sloučenina“ nebo „fenolický derivát“ se zde vždy míní m-kresol, fenol, nebo směsi m-kresolu a fenolu.
Výrazem „vztaženo na volnou zásadu“ se zde vždy míní množství protaminu ve formulaci. V případě volné zásady se provádí oprava na obsah vody a soli v obchodně dostupných protaminových solích, používaných běžně v parenterálních farmaceutických prostředcích. Vhodným protaminem, protaminsulfátem je přibližně 80% protamin.
Výrazem „IJ“ nebo „JU“ se míní mezinárodní jednotka.
Výrazem „izofanový poměr“ se rozumí rovnovážné množství protaminu, potřebné k vytvoření komplexu s analogem, jak popisuje Krayenbůhl a Rosenberg (Stěno Memoriál Hospital Report (Copenhagen) 1, str. 60 (1946). Izolovaný poměr se určuje titrací známým způsobem, který popsal u Krayenbůhl a kol.
Vynález se týká farmaceutického prostředku na bázi inzulínového analogu a protaminu, který obsahuje: monomemí inzulínový analog, protamin, zinek a fenolickou sloučeninu. Koncentrace protaminu je s výhodou přibližně 0,2 až přibližně 1,5 mg protaminu na 100 jednotek inzulínového analogu, vztaženo na volnou zásadu. Nejvýhodněji je obsah protaminu přibližně 0,27 až přibližně 0,35mg/100J. Hmotnostní koncentrace zinku je přibližně 0,35 až přibližně 0,9%. S výhodou je koncentrace zinku přibližně 0,7 %.
Fenolickou sloučeninou je m-krezol, fenol, nebo směs m-krezolu a fenolu. S výhodou je fenolickou sloučeninou m-krezol a fenol. Koncentrace fenolické sloučeniny je pracovníkům v oboru známa. Koncentrace musí být dostatečná k udržení ochranné účinnosti, to je zpomalování mikrobálního růstu. Obecně je koncentrace fenolu například 1,0 až 6,0 mg/ml; s výhodou je vyšší než přibližně 2,5 mg/ml. Nejvýhodnější koncentrace je přibližně 3 mg/ml. Přítomnost fenolické sloučeniny má rozhodující význam, jelikož komplexotvomě působí na analog, protamin a zinek a dostatečně slouží jako ochrana. Má se však zato, že pouze jedna molekula fenolu na molekulu inzulínového analogu se váže do struktury krystalu.
S výhodou se přidává do formulace izotonické činidlo. Výhodným izotonickým činidlem je glycerin. Koncentrace izotonického činidla je například 14 až 18 mg/ml, s výhodou přibližně 16 mg/ml.
Hodnota pH formulace může být pufrována fyziologicky snášenlivým pufrem, s výhodou fosfátovým pufrem, jako je dibazický fosfát sodný. Mezi jiné fyziologicky snášenlivé pufry patří TRIS, acetát sodný, nebo citrát sodný. Volba a koncentrace pufru je v oboru známá. Obecně je koncentrace například přibližně 1,5 až 5,0 mg/ml, s výhodou 3,87 mg/ml.
-4CZ 294556 B6
Vynález se rovněž týká specifických podmínek, za kterých inzulínový analog-protamin existuje jako stabilní krystal. Formulace těchto krystalů jsou definovány jako inzulínový analog-NPD. Inzulínový analog-NPD je formulovanou suspenzí krystalů inzulínového analogu-NPD a podle použití poskytuje přechodné trvání účinku. Profil aktivity inzulínového analogu-NPD je dosti překvapivý vzhledem k chybějící spontánní asociaci monomemího analogu.
Schopnost vytvářet přechodně působící formulaci s monomemím analogem dokládá obr. 1. Na obr. 1 je grafické znázornění profilu LysB28ProB29-hI-NPD a lidského inzulinu-NPH. Profil NPD je podobný inzulinu-NPH. Doby účinku formulace NPD a formulace inzulínu NPH jsou přibližně stejné. Avšak nejvýraznější je, že působení formulace podle vynálezu vzrůstá rychleji a zůstává stále po delší časové období než u inzulinu-NPH. Tento rozdíl je zcela neočekávaný vzhledem k rychle působícímu profilu monomemího analogu.
Obzvlášť výhodná formulace inzulínový analog-protamin, LysB28ProB29-lidský inzulin-NPD obsahuje: LysB28ProB29-lidský inzulín, přibližně 0,27 až přibližně 0,32 mg protaminu/100 J inzulínového analogu, hmotnostně přibližně 0,35 až přibližně 0,9 % zinku a fenolickou sloučeninu. Koncentrace protaminu je s výhodou 0,3 mg/100 J, vztaženo na volnou zásadu.
Způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidský inzulín - protamin podle vynálezu spočívá v tom, že se mísí vodný roztok LysB28ProB29-lidského inzulínu v hexamemím asociovaném stavu a protaminový roztok při teplotě přibližně 8 až přibližně 22 °C, přičemž uvedený vodný roztok obsahuje hmotnostně přibližně 0,35 až přibližně 0,9 % zinku, LysB28ProB29-lidský inzulín a fenolickou sloučeninu při hodnotě pH přibližně 7,1 až přibližně 7,6, přičemž uvedený protaminový obsahuje protamin při hodnotě pH přibližně 7,1 až přibližně 7,6, takže konečná koncentrace protaminu je přibližně 0,27 až přibližně 0,32 mg protaminu/100 J inzulínového analogu.
V době vynálezu bylo známo, že monomemí inzulínové analogy mají menší sklon k asociování a k vytváření hexamerů. Podmínky nutné k tomu, aby došli k asociaci monomerních inzulínových analogů s protaminem k vytvoření krystalů nebyly v oboru dříve známy. Dřívější studie se týkaly inzulínu. Poznatky týkající se přípravy inzulinu-NPH (neutrální protaminová formulace podle Hagedorna) nebo izofanových inzulínových formulací podle Krayenbůhla a Rosenberga (Stěno Memoriál Hospital Report (Copenhagen), 1, str. 60, 1946) nejsou relevantní se zřetelem na odlišné vlastnosti monomerních inzulínových analogů. Ve skutečnosti průmyslový způsob výroby Humulinu-N™ (inzulin-NPH), kyselo-neutrální proces, nevytváří krystalický inzulínový analog-NPD.
Nej významnější je nový poznatek, že parametry tohoto způsobu - zvláště teplota krystalizace a vytváření hexamerového komplexu inzulínového analogu, zinku a fenolové sloučeniny jsou rozhodujícím vymezením vytváření stabilních krystalů Lys Pro -hl-NPD.
Teplota krystalizace musí být přibližně 8 °C až přibližně 22 °C, s výhodou 13 °C až 17 °C. Je-li teplota mimo toto rozmezí, jsou výsledkem z velké části amorfní formulace inzulínový analogprotamin.
Je také rozhodující, aby se inzulínový analog transformoval na hexamerový stav před krystalizací. Výsledkem krystalizace je amorfní produkt, jestliže se proces provádí se stavem monomemí asociace. Krystaly se tvoří bez míchání v čase 5 až 36 hodin. Krystaly dobré kvality se vytvářejí obvykle za 24 hodin.
-5 CZ 294556 B6
Rozpustný monomemí inzulínový analog se komplexuje na stav hexamerové asociace suspendováním pevného monomemího analogu v ředidle, obsahujícím fenolickou sloučeninu, a přidáváním zinku až do hmotnostní koncentrace přibližně 0,35 až přibližně 0,9 %. Zinek se výhodou přidává v podobě soli. Mezi reprezentativní soli zinku patří acetát, bromid, chlorid, fluorid, jodid a síran zinečnatý. Zkušeným pracovníkům v oboru je zřejmé, že by bylo možno použít při způsobu podle vynálezu také mnoha jiných solí zinku. S výhodou se však používá acetátu nebo chloridu zinečnatého.
Rozpouštění inzulínového analogu v ředidle lze napomoci tak zvaným kyselým rozpouštěním. Při kyselém rozpouštění se hodnota pH snižuje na přibližně 3,0 až 3,5 fyziologicky vhodnou kyselinou, s výhodou kyselinou chlorovodíkovou, ke zvýšení rozpustnosti analogu. Jinými fyziologicky vhodnými kyselinami jsou kyselina octová, citrónová a fosforečná. Hodnota pH se pak nastaví fyziologicky vhodnou zásadou, s výhodou hydroxidem sodným na přibližně 7,1 až 7,6 pro krystalizaci. Jinými fyziologicky vhodnými zásadami jsou hydroxid draselný a hydroxid amonný.
Nejvýznamněji je způsob přípravy komplexu LysB28ProB29-hI-NPD citlivý na koncentraci chloridu sodného. Překročí-li tato koncentrace přibližně 4 mg/ml, mísí se krystaly inzulínový analogNPD s amorfním produktem. Proto je výhodné rozpouštět monomemí analog při neutrální hodnotě pH k zabránění tvorbě iontů soli. Nebo může být analog rozpouštěn v ředidle při kyselé hodnotě pH před přidáním pufru. Tím se snižuje koncentrace solí, vytvářených vlivem nastavení hodnoty pH. Avšak pořadí, v jakém jsou složky přidávány, není rozhodující pro tvorbu hexameru nebo amorfní formulace.
Jak shora uvedeno, může se do formulací podle vynálezu přidávat izotonické činidlo. Lze je přidávat do roztoku analogu, do protaminového roztoku nebo do konečné formulace analog inzulinu-NPD. Podobně lze přidávat fyziologicky vhodný pufr do roztoku analogu, do protaminového roztoku nebo do konečné formulace analog inzulinu-NPD. Je však výhodné, aby jak roztok analogu, tak protaminový roztok obsahovaly izotonické činidlo a pufr před smísením vodného roztoku a protaminu. Jelikož chlorid sodný ovlivňuje způsob výroby krystalického produktu analog inzulinu-NPD, je glycerin výhodným izotonickým činidlem.
Vynález se také týká formulací inzulínového analogu, které sestávají ze směsí analog inzulinuNPD v krystalické pevné formě a z rozpustného inzulínového analogu. Tyto směsi se připravují v objemovém poměru přibližně 1 :99 až 99 : 1 suspendovaného analogu inzulin-NPD a rozpustného analogu inzulínu. Rozpustným analogem inzulínu je monomemí analog inzulínu, rozpuštěný ve vodném ředidle, obsahujícím zinek, fenolickou sloučeninu, izotonické činidlo a pufr. Koncentrace v ředidle jsou tytéž jak shora uvedeno. S výhodou je poměr analogu inzulinuNPD k rozpustnému analogu inzulínu 25 : 75 až 75 : 25 a výhodněji 50 : 50. Směsi se připravují snadno smísením jednotlivých složek.
Smíšené formulace podle vynálezu jsou obzvlášť vhodné k ošetřování diabetes mellitus vzhledem ke kombinaci rychlého náběhu účinku a prodlouženého působení. Tyto směsi dovolují Jemné řízení“ měřením množství každé jednotlivé složky podle potřeb, diety a fyzické aktivity pacienta. Směsi suspendovaný analog inzulinu-NPD a rozpustného analogu inzulínu jsou rovněž výhodné, jelikož jsou homogenní, to je každá výměna rovnováhy mezi suspendovanými krystaly a rozpustným analogem inzulínu je průhledná.
Analogy inzulínu podle vynálezu se mohou připravovat kterýmkoli uznávaným způsobem peptidové syntézy včetně klasické (roztokové), pevné, polopevné a nověji rekombinantními DNA způsoby. Přípravu různých monomerních analogů popsal například Chance a kol. (evropský patentový spis EP 383 472) a Brange a kol. (evropský patentový spis EP 214 826).
Následující příklady praktického provedení způsob přípravy inzulínových analogů podle vynálezu toliko objasňují, přičemž není jejich záměrem nějak vynález omezovat.
-6CZ 294556 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava LysB28ProB29-hI-NPD
Připraví se roztok LysB28ProB29-lidského inzulínu (LysB28ProB29-hI) o koncentraci 200 IJ/ml (J200) rozpuštěním krystalů LysB28ProB29-hI, obsahujících zinek, v systému konzervační přísada/pufr, obsahujícím: 1,6 mg/ml m-kresolu, 0,73 mg/ml fenolu (ekvivalent 0,65 mg/ml fenolu vypočtený jako 89 %), 16 mg/ml glycerinu a 3,78 mg/ml dibazického natriumfosfátového pufru. Endogenní hladina zinku v krystalech se doplní přísadou přiměřeného objemu kyselého roztoku oxidu zinečnatého (10 mg/ml) k dosažení konečné koncentrace 0,025 mg/100 IJ (0,7 %). LysB28ProB29-hI se rozpustí při teplotě místnosti při snížení hodnoty pH na přibližně 3 mikrolitrovými objemy 5M kyseliny chlorovodíkové. Když se roztok vyčeří, znova se upraví hodnota pH na 7,5 mikrolitrovými objemy 5M roztoku hydroxidu sodného.
Protaminový roztok se připraví rozpuštěním dostatečného množství pevného protaminsulfátu v roztoku konzervačního činidla a pufru k dosažení konečné koncentrace 0,6 mg/100 IJ, přepočteno na volnou zásadu. Hodnota pH tohoto roztoku se nastaví na 7,5 a vyváží se při teplotě 15 °C.
Oba roztoky se zředí na konečnou koncentraci vodou k injektování a zfíltrují se. 5 ml podíly subsekce LysB28ProB29-hI se plní do jednotlivých čistých skleněných ampulí a vzorky se inkubují ve vodní lázni při teplotě 15 °C. Po přiměřené době k navození rovnovážného stavu (15 minut) se vyvolá srážení rychlým přidáním 5 ml protaminového roztoku do vzorků Lys Pro -hl. Krystalizace se nechá probíhat po dobu přibližně 24 hodin při teplotě 15 °C.
Příklad 2
Příprava LysB28ProB29-hI-NPD
Postupuje se stejně jako podle příkladu 1, s tou výjimkou, že rozpouštění Lys Pro -hl probíhá při neutrální hodnotě pH. Postup se provede tak, že konečnou hodnotou pH je 7,4.
Příklad 3
Příprava LysB28ProB29-hI-NPD
Obdobným způsobem jako podle příkladu 1 se připraví analog inzulinu-NPD, avšak kyselé rozpouštění LysB28ProB29-hI se provede v přítomnosti všech excipientů s výjimkou dibazického fosfátového pufru. Když se hodnota pH roztoku analogu inzulínu znova upraví na 7,4, přidá se pevný dibazický fosfát sodný. Přísadou dibazického fosfátu sodného se roztok vyčeří.
Příklad 4
Příprava formulací směsi analog inzulinu-NPD
Směsi přechodně a rychle působících formulací LysB28ProB29-hI se připraví následujícím způsobem. Přechodně působící suspenze se připraví způsobem podle příkladu 3 a slouží jako πλο D7Q přechodně působící sekce směsi. Oddělený roztok Lys Pro -hl(lOOIJ) se připraví rozpuštěním krystalů LysB28ProB29-hI, obsahujících zinek, při teplotě okolí v ředidle, popsaném v příkladu 1. Endogenní hladina zinku LysB28ProB29-hI v tomto roztoku se doplní přísadou kyselého roztoku oxidu zinečnatého k dosažení hladiny vsuspenzní sekci (to je 0,025 mg/100 IJ [0,7 %]). Vody pro vstřikování se použije k ředění roztoku na konečnou koncentraci po nastavení hodnoty pH na 7,4 10% roztokem kyseliny chlorovodíkové a/nebo hydroxidu sodného. Tento roztok je rychle působící sekcí ve směsích. Konečná směs se připraví smísením vhodných objemů přechodně a rychle působících subsekcí k dosažení žádoucího poměru. Směs 50/50 se připraví smícháním 1 dílu přechodně působící sekce s 1 objemovým dílem rychle působící sekce.
Příklad 5
Vliv iontové pevnosti na krystalizaci LysB28ProB29-hI protaminu
Vliv iontové pevnosti na krystalizaci se vyhodnocuje přidáváním chloridu sodného do sekce LysB28ProB29-hI před smísením s protaminem. Chlorid sodný se přidává tak, že celková koncentrace je 20, 30 a 40 mM (1,2; 1,8; a 2,3 mg/ml). Když se koncentrace chloridu sodného zvyšuje, vykazuje objemová velikost částic multimodální chování (dostatečné vrcholy při malých velikostech částic). S rostoucí koncentrací chloridu sodného klesá objemová střední velikost částic, což značí nárůst amorfního materiálu. Výsledky závislosti velikosti částic na koncentraci chloridu sodného jsou uvedeny v tabulce:
| Chlorid sodný | Objemová střední velikost částic (μιη) |
| 13 mM | 3,9 |
| 20 mM | 3,5 |
| 30 mM | 3,3 |
| 40 mM | 3,2 |
Mikroskopická analýza potvrzuje, že všechny vzorky obsahují směs amorfního a krystalického materiálu. Vzorek s obsahem 40 mM chloridu sodného sestává z většiny amorfního materiálu a jen velmi mála krystalů.
Příklad 6
Komparativní dynamiky LysB28ProB29-hI-NPD a lidského inzulinu-DPH
Tato studie se provádí na živém psím modelu. Před začátkem studie se odeberou tři základní vzorky. Iniciuje se infuze somatostatinu (0,3 pg/kgmin). Po 10 minutách se podá subkutánně injekce NPD nebo NPH. Začne se se sledováním glukózy v plazmě a přidávají se různé infuze (20%) glukózy k udržení glykemie blízké normálu. Průběžně se odebírají vzorky a analyzují se na imunoreaktivní inzulín (protilátka Lineo) a glukózu. Výsledky jsou znázorněny na obr. 1.
Příklad 7
Příprava krystalů analogu Asp(B28)-protamin
Rozpuštěním lyofilizované dávky (95% čistoty) se připraví subsekce Asp(B28)-hI o koncentraci 200IJ/ml (J200) v systému konzervační přísada/pufr obsahujícím: 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,73 mg/ml fenolu (ekvivalent 0,65 mg/ml fenolu přepočteno na 89%), 16 mg/ml glycerinu a 3,78 mg/ml dibazického natriumfosfátu. Zinek se přidá do systému pomocí příslušného objemu kyselého roztoku oxidu zinečnatého (10 mg/ml) k získání konečné koncentrace 0,025 mg/100 IJ.
-8CZ 294556 B6
Rozpuštění Asp(B28) se dosáhne při teplotě okolí a neutrální hodnotě pH. Konečná hodnota pH sekce je 7,4.
Krystalizace proběhne jako v příkladě 2. Zkoumají se konečné koncentrace protaminu 0,3 mg/lOOJ, 0,35 mg/lOOJ a 0,4 mg/lOOJ. Tyto koncentrace protaminu odpovídají hmotnostně 2,9 %, 9,3 % a 10,8 %. Inkubační teplota je 5 °C (pouze u 0,3 mg/lOOJ), 15 °C a 22 °C. Po 24 hodinách na těchto teplotách se vzorky zkoumají z hlediska vytváření krystalů. Výsledky, stanovené mikroskopicky, dokládají směs několika krystalů a amorfního produktu.
Příklad 8
Příprava krystalů analog Asp(B28)-protamin
Krystalizace Asp(B28) protaminu se provádí jako podle příkladu 7 s tou výjimkou, že protein se napřed rozpustí v rozpouštědle prostém pufru. Přísada zásobního oxidu zinečnatého stačí k okyselení vzorku na hodnotu pH 2,0 až 2,5. Po vyčeření roztoku se hodnota pH nastaví na přibližně pH 7 mikrolitrovými objemy 5N roztoku hydroxidu sodného. Pomocí koncentrovaného zásobního roztoku o koncentraci 47,25 mg/ml se přidá dibazický fosfát sodný k dosažení konečné koncentrace 3,78 mg/ml. Subsekce se nastaví na hodnotu pH 7,4 pomocí mikrolitrových množství kyseliny chlorovodíkové.
Krystalizace se iniciuje sloučením sekcí Asp(B28) a protaminu, jak popsáno v předchozích příkladech. Zkoumají se konečné koncentrace protaminu 0,3 mg/lOOJ, 0,35 mg/lOOJ a 0,4 mg/lOOJ. Inkubační teploty jsou 15 °C a 22 °C. Po 24 hodinách na těchto teplotách se vzorky zkoumají z hlediska vytváření krystalů. Výsledky, stanovené mikroskopicky, dokládají směs krystalů a amorfního produktu.
Příklad 9
Příprava krystalů analogu Leu(B28)Pro(B29)-protamin
Způsobem popsaným v příkladu 8 se připraví subsekce Leu(B28)Pro(B29) (čistota 93 %) o koncentraci 200IJ/ml (J200) za použití kyselého rozpouštění a následně se nastavení hodnoty pH na 7,4. Krystalizace probíhá jak shora popsáno. Zkoumají se konečné koncentrace protaminu 0,3 mg/lOOJ, 0,35 mg/lOOJ a 0,4 mg/lOOJ. Inkubační teploty jsou 5 °C a 22 °C. Po 24 hodinách na těchto teplotách obsahují všechny vzorky něco krystalů, avšak při mikroskopickém zkoumání jsou především amorfní.
Příklad 10
Krystaly Des(B27)hI-protamin
Způsobem popsaným v příkladu 8 se připraví subsekce DesThr(B27) (čistota 97,37 %) při koncentraci 200IJ/ml (J200) za použití kyselého rozpouštění s následným nastavením hodnoty pH na 7,4. Krystalizace probíhá jak popsáno v příkladu 8. Zkoumají se konečné koncentrace protaminu 0,3 mg/lOOJ, 0,35 mg/lOOJ a 0,4 mg/lOOJ. Inkubační teploty jsou 15 °C a 22 °C. Po 24 hodinách na těchto teplotách jsou všechny vzorky při mikroskopickém zkoumání amorfní.
-9CZ 294556 B6
Příklad 11
Des(B28-B3 0)hl-protamin
Způsobem podle příkladu 8 se připraví subsekce Des(28-30) (čistota 96,3 %) o koncentraci 200IJ/ml (J200) za použití kyselého rozpouštění s následným nastavením hodnoty pH na 7,4 5N roztokem hydroxidu sodného. Krystalizace se zkouší pomocí způsobu neutrální/neutrální shora popsaným způsobem. Zkoumají se konečné koncentrace protaminu 0,3 mg/lOOJ, 0,35 mg/lOOJ a 0,4 mg/lOOJ. Inkubační teploty jsou 15 °C a 22 °C. Po 24 hodinách na těchto teplotách jsou všechny vzorky podle mikroskopického zkoumání hlavně amorfní. Kvalitativně jsou krystalky pozorovány a jsou dobře definované.
Příklad 12
Analog Asp(B28)-protamin
Připraví se roztok analogu Asp(B28) lidského inzulínu rozpuštěním 16,6 mg proteinu v 1 ml roztoku, obsahujícího 3,2 mg/ml m-kresolu, 1,3 mg/ml fenolu a 32 mg mg/ml glycerinu. Přidá se 14,4 μΐ kyselého zinečnatého zásobního roztoku (10 mg/ml vZn2+ připraveného rozpuštěním 0,311 g oxidu zinečnatého v 5 ml 10% kyseliny chlorovodíkové a zředěním na 25 ml vodou). Hodnota pH roztoku je 2,3, což umožňuje úplné rozpuštění proteinu. K nastavení hodnoty pH na 7,06 se přidá 10 μΐ 10% roztoku hydroxidu sodného. Do roztoku se přidá 100 μΐ 0,28M dibazického natriumfosfátu s hodnotou pH 7,0, čímž se zvýší hodnota pH roztoku na 7,27. Do roztoku se přidá 870 μΐ vody k injektování. Pak se přidá další 10% kyselina chlorovodíková (1 μΐ) a roztok hydroxidu sodného (0,7 μΐ) a konečný objem roztoku se doplní na 2 ml vodou k injektování, čímž se dosáhne konečné hodnoty pH 7,26. Před použitím se roztok zfiltruje filtrem 0,2 μιη SuporR AcrodiscR 13, (Gelman Sciences).
Připraví se zásobní protaminové roztoky rozpuštěním protaminsulfátu v roztoku, obsahujícím 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,65 mg/ml fenolu, 16 mg/ml glycerinu a 14 mM dibazického sodiumfosfátu. Konečná hodnota pH roztoku se nastaví na 7,3. Konečná koncentrace protaminu je 0,60 mg/lOOJ, vztaženo k volné zásadě. Oba roztoky se před použitím zfiltrují filtrem 0,22 pm (Millipore Sterivex™-GVj.
Krystalizace se dosáhne smísením roztoku Asp(B28) lidského inzulínu v poměru 1:1 při řízené teplotě, jak udáno v tabulce I. Podmínky konečné směsi jsou 3,94 mg/ml Asp(B28) lidského inzulínu, 0,0359 mg/ml (0,9 %) zinečnatých iontů, 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,65 mg/ml fenolu, 16 mg/ml glycerinu, 14 mM dibazického natriumsulfátu a 0,30 mg/lOOJ protaminu a hodnota pH 7,3. Podíly po 50 až 200 μΐ roztoku AspB28 lidského inzulínu se vpraví do skleněných ampulí a vzorky se nechají ustálit při teplotě 4, 8, 15 nebo 23 (teplota okolí) °C. Podíly obou protaminových roztoků se rovněž ustálí při těchto teplotách. Po 15 až 20 minutách se pipetou přikape ekvivalentní objem každého protaminového roztoku do vzorků Asp(B28)lidského inzulínu. Směs se mírně promíchá, uzavře a pak se nechá v klidu při řízené teplotě v krystalizačním období. Všechny vzorky se prozkoumají mikroskopicky po 24 hodinách a zjistí se, že jsou převážně amorfní. Po 48 hodinách vykazuje vzorek, obsahující 0,30 mg/lOOJ protaminu a inkubovaný při 15 °C, rozsáhlá množství jehlicovitých krystalků a něco amorfního materiálu.
Příklad 13
Připraví se roztok inzulínu Asp(B28) analogu lidského inzulínu rozpuštěním 10,62 mg proteinu v 0,71 ml roztoku, obsahujícího 3,2 mg/ml m-kresolu, 1,3 mg/ml fenolu a 32 mg/ml glycerinu. Přidá se 10,2 μΐ kyselého zinečnatého zásobního roztoku (10 mg/ml vZn2+, připraveného
-10CZ 294556 B6 rozpuštěním 0,311 g oxidu zinečnatého v 5 ml 10% kyseliny chlorovodíkové a zředěním na 25 ml vodou). Hodnota pH roztoku je 2,3, což umožňuje úplné rozpuštění proteinu. K nastavení hodnoty pH na 7,06 se přidá 10 μΐ 10% roztoku hydroxidu sodného. Přidá se 6,5 μΐ 10% roztoku hydroxidu sodného k nastavení hodnoty pH na 7,00. Do roztoku se přidá 71 μΐ 0,28M dibazického natriumfosfátu s hodnotou pH 7,0, čímž se zvýší hodnota pH roztoku na 7,26. Do roztoku se přidá 620 μΐ vody k injektování. Pak se přidá další 10% kyselina chlorovodíková (0,2 μΐ) a roztok hydroxidu sodného (0,6 μΐ) a konečný objem roztoku se doplní na 1,42 ml vodou k injektování, čímž se dosáhne konečné hodnoty pH 7,42. Před použitím se roztok zfiltruje filtrem 0,2 μιη SuporR AcrodiscR 13, (Gelman Sciences).
Připraví se zásobní protaminový roztok rozpuštěním protaminsulfátu v roztoku, obsahujícím 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,65 mg/ml fenolu, 16 mg/ml glycerinu a 14 mM dibazického natriumfosfátu. Konečná hodnota pH roztoku se nastaví na 7,4. Konečná koncentrace protaminu je 0,60 mg/lOOJ, vztaženo k volné zásadě. Oba roztoky se před použitím zfiltrují filtrem 0,22 pm (Millipore Sterivex™-GV).
Krystalizace se dosáhne smísením roztoku Asp(B28)-lidského inzulínu v poměru 1:1 sprotaminovým roztokem způsobem podle příkladu 12, při řízené teplotě 13 °C, 15 °C, 17 °C, a 23 °C. Výsledky jsou uvedeny v tabulce I.
Podmínky konečné směsi je 3,74 mg/ml Asp(B28) lidského inzulínu, 0,0359 mg/ml (0,9 %) zinečnatých iontů, 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,65 mg/ml fenolu, 16 mg/ml glycerinu, 14 mM dibazického natriumsulfátu a 0,30 mg/lOOJ protaminu při hodnotě pH 7,4. Vyhodnotí se čtyři různé teploty krystalizace. Smísí se 1 ml AspB28-lidského inzulínu, ustáleného při teplotě 15 °C s 1 ml protaminového roztoku nastaveného na tutéž teplotu. Po mírném promíchání se nechá v klidu při teplotě 15 °C. Jiný vzorek se připraví ustálením 100 μΐ roztoku Asp(B28)-lidského inzulínu na teplotě 13 °C a pak se smísí se 100 μΐ protaminového roztoku nastaveného na tutéž teplotu. Konečná směs se inkubuje při teplotě 13 °C. Třetí vzorek se připraví podobným způsobem s tou výjimkou, že se ustálí dva 100 μΐ podíly, smísí se a pak se inkubují při teplotě 17 °C. Konečný roztok se připraví smísením 80 podílů roztoku μΐ Asp(B28)-lidského inzulínu a protaminového roztoku, ustálených při teplotě okolí a inkubuje se při teplotě okolí (23 °C). Všechny vzorky se vyhodnotí mikroskopicky po 24 hodinách a po dalších časových obdobích, jak je uvedeno v tabulce I.
Tabulka I
Krystalizační podmínky3 a výsledky mikroskopického vyhodnocení
| [Asp028] (mg/ml) | [Protamin] (mg/lOOJ) | Teplota (°C) | Čas (hodiny) | Mikroskopický výsledek0 |
| 3,94 | 0,30 | 15 | 24 48 72 96 120 | amorfní krystalický krystalický krystalický krystalický |
| 3,94 | 0,30 | 23 | 24 48 72 | amorfní amorfní amorfní |
| 3,74 | 0,30 | 13 | 24 40 48 69 | amorfní krystalický/amorfní krystalický/amorfní krystalický/amorfní |
-11 CZ 294556 B6
Tabulka I - pokračování
| [Asp028] (mg/ml) | [Protamin] (mg/lOOJ) | Teplota (°C) | Čas (hodiny) | Mikroskopický výsledek5 |
| 3,74 | 0,30 | 15 | 24 40 48 69 | amorfní/krystalický krystalický krystalický krystalický |
| 3,74 | 0,30 | 17 | 24 40 48 69 | amorfní/málo krystalů krystalický/amorfní krystalický/amorfní krystalický/amorfní |
| 3,74 | 0,30 | 23 | 24 40 48 69 | amorfní amorfní/málo krystalů amorfní/málo krystalů amorfní/málo krystalů |
aVšechny roztoky obsahují také 0,9% zinečnatých iontů, 1,6 mg/ml m-krezolu, 0,65 mg/ml fenolu, 16 mg/ml glycerinu a 14 mM dibazického natriumfosfátu, hodnota pH je 7,4.
b Výsledky krystalizace se vyhodnocují mikroskopicky při zvětšení 600-násobném (mikroskop Nikon Optiphot 55) nebo 1000-násobném (mikroskop Zeiss Axioplan smezifázovým kontrastem). Oba mikroskopy jsou vybaveny zařízením k fotografování.
Krystaly připravené v uvedených příkladech jsou zobrazeny na obr. 2 a 3.
Průmyslová využitelnost
Parenterální farmaceutické prostředky, obsahující monomemí inzulínový analog, zinek, protamin a fenolickou sloučeninu, vykazují rychlý nástup prodlouženého působení.
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (19)
1. Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulínu, vyznačující se tím, že obsahuje monomemí analog inzulínu, protamin, zinek a fenolickou sloučeninu, kde monomemím analogem inzulínu je lidský inzulín, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulín nebo des(B27)-lidský inzulín.
2. Prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že koncentrace protaminu je od 0,2 do 1,5 mg na 100 MJ analogu inzulínu, vztaženo na volnou bázi.
3. Prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že koncentrace zinku je od 0,35 do 0,9 % hmotnostního.
4. Prostředek podle nároku 3, vyznačující se tím, že fenolickou sloučeninou je fenol nebo m-kresol.
5. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároků laž4, vyznačující se tím, že obsahuje monomemí analog inzulínu a protaminu v izofanovém poměru, 0,35 až 0,9 %
- 12CZ 294556 B6 hmotnostního zinku a fenolickou sloučeninu, kde monomemím analogem inzulínu je lidský inzulín, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulín nebo des(B27)-lidský inzulín.
6. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároků laž5, vyznačující se tím, že obsahuje LysB28ProB29-lidský inzulín, 0,27 až 0,32 mg protaminu na 100 MJ analogu inzulínu, 0,35 až 0,9 % hmotnostního zinku a fenolickou sloučeninu.
7. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že LysB28ProB29-lidský inzulín a protamin jsou krystalické.
8. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že obsahuje dále izotonické činidlo.
9. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že obsahuje dále fyziologicky přijatelný pufr.
10. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 9, vyznačující se tím, že koncentrace protaminu je 0,30 mg protaminu na 100 MJ LysB28ProB29-lidského inzulínu.
11. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že koncentrace zinkuje 0,7 % hmotnostního.
12. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že analogem inzulínu je LysB28ProB29-lidský inzulín, des(B27)-lidský inzulin nebo des(B28-B30)lidský inzulin.
13. Způsob přípravy parenterálního farmaceutického prostředku podle nároku 7, vyznačující se tím, že se uvede do styku vodný roztok LysB28ProB29-lidského inzulínu v hexamemím asociovaném stavu a protaminový roztok při teplotě 8 až 17 °C za vzniku krystalů, přičemž uvedený vodný roztok obsahuje 0,35 až 0,9 % hmotnostního zinku, vztaženo na hmotnost přítomného analogu inzulínu, LysB28ProB29-lidský inzulin a fenolickou sloučeninu, vybranou ze souboru, zahrnujícího m-kresol, fenol nebo směs m-kresolu a fenolu, při hodnotě pH 7,1 až 7,6, a uvedený protaminový roztok obsahuje protamin při hodnotě pH7,l až 7,6, takže konečná koncentrace protaminu je 0,27 až 0,32 mg protaminu na 100 MJ analogu inzulínu, za předpokladu, že způsob se provádí v přítomnosti méně než 4 mg/ml chloridu sodného.
14. Způsob podle nároku 13, vy z n a č uj í c í se t í m , že teplota je od 13 do 17 °C.
15. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že koncentrace zinku je 0,7 % hmotnostního, vztaženo na hmotnost přítomného analogu inzulínu.
16. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje směs rozpustného monomemího analogu lidského inzulínu a krystalů analogu inzulínu ve vodném ředidle, kde objemový poměr rozpustného monomemího analogu lidského inzulínu a krystalů analogu inzulínu je od 1 : 99 do 99 : 1, přičemž rozpustným monomemím analogem inzulínu je lidský inzulin, kde Pro v poloze B28 je substituován Lys, Leu, Val nebo Ala a Lys v poloze B29 je Lys nebo Pro, des(B28-B30)-lidský inzulin nebo des(B27)-lidský inzulin.
-13 CZ 294556 B6
17. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 16, vyznačující směsí jsou krystaly komplexu LysB28ProB -lidského inzulínu s protaminem lidský inzulín.
5
18. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 17, vyznačující hmotnostní poměr je 75 : 25 až 25 : 75.
19. Parenterální farmaceutický prostředek podle nároku 18, vyznačující hmotnostní poměr je 50 : 50.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/260,633 US5461031A (en) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | Monomeric insulin analog formulations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ154395A3 CZ154395A3 (en) | 1996-02-14 |
| CZ294556B6 true CZ294556B6 (cs) | 2005-02-16 |
Family
ID=22989963
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19951543A CZ294556B6 (cs) | 1994-06-16 | 1995-06-14 | Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulinu a způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulinu a protaminu |
Country Status (37)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5461031A (cs) |
| JP (1) | JP3812962B2 (cs) |
| KR (1) | KR100386038B1 (cs) |
| CN (1) | CN1145641C (cs) |
| AT (1) | AT408611B (cs) |
| BE (1) | BE1009409A5 (cs) |
| BR (1) | BR9502797A (cs) |
| CA (1) | CA2151564C (cs) |
| CH (2) | CH693019A5 (cs) |
| CO (1) | CO4410204A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ294556B6 (cs) |
| DE (1) | DE19521753B4 (cs) |
| DK (1) | DK176213B1 (cs) |
| ES (1) | ES2091728B1 (cs) |
| FI (1) | FI118208B (cs) |
| FR (1) | FR2721215B1 (cs) |
| GB (1) | GB2290294B (cs) |
| GR (1) | GR1002494B (cs) |
| HU (1) | HU218943B (cs) |
| IE (1) | IE68852B1 (cs) |
| IL (1) | IL114153A (cs) |
| IT (1) | IT1276722B1 (cs) |
| LU (1) | LU88627A1 (cs) |
| MY (1) | MY116831A (cs) |
| NL (2) | NL1000565C2 (cs) |
| NO (1) | NO320808B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ272360A (cs) |
| PE (1) | PE34496A1 (cs) |
| PL (1) | PL183284B1 (cs) |
| PT (1) | PT101723B (cs) |
| RO (1) | RO115124B1 (cs) |
| SE (1) | SE509295C2 (cs) |
| SI (1) | SI9500199A (cs) |
| TW (1) | TW347334B (cs) |
| UA (1) | UA34468C2 (cs) |
| YU (1) | YU39795A (cs) |
| ZA (1) | ZA954941B (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ299637B6 (cs) * | 1997-06-13 | 2008-10-01 | Eli Lilly And Company | Stabilní inzulinové prostredky |
Families Citing this family (97)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1607086A1 (en) * | 1993-01-29 | 2005-12-21 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
| US6024090A (en) * | 1993-01-29 | 2000-02-15 | Aradigm Corporation | Method of treating a diabetic patient by aerosolized administration of insulin lispro |
| US5888477A (en) * | 1993-01-29 | 1999-03-30 | Aradigm Corporation | Use of monomeric insulin as a means for improving the bioavailability of inhaled insulin |
| US6131567A (en) * | 1993-01-29 | 2000-10-17 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
| DK72793D0 (da) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | Nyt produkt |
| US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
| US5547929A (en) * | 1994-09-12 | 1996-08-20 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
| AR002976A1 (es) * | 1995-03-31 | 1998-05-27 | Lilly Co Eli | Formulaciones farmaceuticas parenterales de efecto prolongado de insulina; cristales de dichos analogos aplicables en dichas formulaciones yprocedimiento de las formulaciones mencionadas |
| US6274549B1 (en) * | 1995-06-30 | 2001-08-14 | Novo Nordisk A/S | Treatment of type 1 diabetes |
| JP4404380B2 (ja) * | 1996-06-20 | 2010-01-27 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | ＮａＣｌ含有インスリン製剤 |
| US5898067A (en) * | 1997-02-07 | 1999-04-27 | Novo Nordisk A/S | Crystallization of proteins |
| JP3343129B2 (ja) * | 1997-02-07 | 2002-11-11 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | タンパク質の結晶化 |
| SI0884053T1 (en) * | 1997-06-13 | 2003-02-28 | Eli Lilly And Company | Stable insulin formulations |
| ID24890A (id) * | 1997-10-24 | 2000-08-31 | Lilly Co Eli | Komposisi-komposisi insulin yang tidak dapat larut |
| CO4970787A1 (es) | 1997-12-23 | 2000-11-07 | Lilly Co Eli | Composiciones insolubles de insulina y derivados de insulina que controlan la glucosa sanguinea |
| US20010007853A1 (en) * | 1998-01-08 | 2001-07-12 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering monomeric insulin analogs |
| US20040214747A1 (en) * | 1999-01-06 | 2004-10-28 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering monomeric insulin |
| US6624141B1 (en) | 1999-03-17 | 2003-09-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Protamine fragment compositions and methods of use |
| US7169889B1 (en) * | 1999-06-19 | 2007-01-30 | Biocon Limited | Insulin prodrugs hydrolyzable in vivo to yield peglylated insulin |
| US7678364B2 (en) | 1999-08-25 | 2010-03-16 | Alkermes, Inc. | Particles for inhalation having sustained release properties |
| US20030054015A1 (en) * | 2000-12-25 | 2003-03-20 | Shinichiro Haze | Sympathetic-activating perfume composition |
| DK1358209T3 (da) * | 2001-02-09 | 2007-05-07 | Genentech Inc | Krystallisering af IGF-1 |
| US6867183B2 (en) | 2001-02-15 | 2005-03-15 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US7060675B2 (en) | 2001-02-15 | 2006-06-13 | Nobex Corporation | Methods of treating diabetes mellitus |
| US6858580B2 (en) * | 2001-06-04 | 2005-02-22 | Nobex Corporation | Mixtures of drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6828297B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of insulin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6713452B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-03-30 | Nobex Corporation | Mixtures of calcitonin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US6835802B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-12-28 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing substantially monodispersed mixtures of polymers having polyethylene glycol moieties |
| US6828305B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of growth hormone drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
| US7713932B2 (en) | 2001-06-04 | 2010-05-11 | Biocon Limited | Calcitonin drug-oligomer conjugates, and uses thereof |
| JP2005508895A (ja) * | 2001-08-28 | 2005-04-07 | イーライ・リリー・アンド・カンパニー | Ｇｌｐ−１および基礎インスリンの予備混合物 |
| US7166571B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-01-23 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US7030082B2 (en) * | 2001-09-07 | 2006-04-18 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of drug-oligomer conjugates and methods of treating disease therewith |
| US7196059B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-03-27 | Biocon Limited | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US6770625B2 (en) | 2001-09-07 | 2004-08-03 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of calcitonin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
| US6913903B2 (en) | 2001-09-07 | 2005-07-05 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing insulin polypeptide-oligomer conjugates, and proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US7312192B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-12-25 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
| US20030068361A1 (en) * | 2001-10-09 | 2003-04-10 | Rimona Margalit | Liposome-encapsulated insulin formulations |
| MXPA04003569A (es) * | 2001-10-19 | 2004-07-23 | Lilly Co Eli | Mezclas bifasicas de glp-1 e insulina. |
| WO2003053460A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-03 | Eli Lilly And Company | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| WO2003105768A2 (en) * | 2002-06-13 | 2003-12-24 | Nobex Corporation | Methods of reducing hypoglycemic episodes in the treatment of diabetes mellitus |
| US20060258561A1 (en) * | 2003-03-13 | 2006-11-16 | Novo Nordisk A/S | Novel NPH insulin preparations |
| MXPA05013723A (es) | 2003-06-17 | 2006-03-13 | Sembiosys Genetics Inc | Metodos para loa produccion de insulina en plantas. |
| US20050054818A1 (en) * | 2003-07-02 | 2005-03-10 | Brader Mark Laurence | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| US20060241019A1 (en) * | 2003-07-25 | 2006-10-26 | Bridon Dominique P | Long lasting insulin derivatives and methods thereof |
| JP4601627B2 (ja) * | 2004-01-16 | 2010-12-22 | バイオデル， インコーポレイテッド | 舌下薬物送達デバイス |
| JP5022213B2 (ja) * | 2004-03-12 | 2012-09-12 | バイオデル， インコーポレイテッド | 迅速に作用する薬物送達組成物 |
| US20080090753A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-17 | Biodel, Inc. | Rapid Acting Injectable Insulin Compositions |
| US20080085298A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-10 | Biodel, Inc. | Rapid Mucosal Gel or Film Insulin Compositions |
| US20080096800A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-24 | Biodel, Inc. | Rapid mucosal gel or film insulin compositions |
| PL2626368T3 (pl) | 2004-07-19 | 2017-06-30 | Biocon Limited | Koniugaty insulina-oligomer, ich formulacje i zastosowania |
| KR20070085227A (ko) * | 2004-08-09 | 2007-08-27 | 앨리오스 바이오파마 인크. | 합성 초글리코실화, 프로테아제 저항성 폴리펩티드 변이체,경구 제제 및 이를 이용한 방법 |
| US7597884B2 (en) * | 2004-08-09 | 2009-10-06 | Alios Biopharma, Inc. | Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use |
| EP2918286B1 (en) | 2004-10-05 | 2020-03-18 | Novo Nordisk A/S | Pharmaceutical preparation containing insulin in crystalline as well as in solubilized form |
| WO2006053906A1 (en) | 2004-11-22 | 2006-05-26 | Novo Nordisk A/S | Soluble, stable insulin-containing formulations with a protamine salt |
| US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
| US7713929B2 (en) * | 2006-04-12 | 2010-05-11 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| US8084420B2 (en) * | 2005-09-29 | 2011-12-27 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| CN100371346C (zh) * | 2005-12-14 | 2008-02-27 | 浙江大学 | 人工合成胰岛素模拟肽及其应用 |
| WO2007096431A1 (en) * | 2006-02-27 | 2007-08-30 | Novo Nordisk A/S | Insulin derivatives |
| US8927015B2 (en) | 2006-04-12 | 2015-01-06 | Emisphere Technologies, Inc. | Formulations for delivering insulin |
| CA2649109A1 (en) * | 2006-04-12 | 2007-10-25 | Biodel, Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
| CN101062948B (zh) * | 2006-04-29 | 2010-05-12 | 上海生物泰生命科学研究有限公司 | 单体速效胰岛素及其制法和用途 |
| WO2008124522A2 (en) * | 2007-04-04 | 2008-10-16 | Biodel, Inc. | Amylin formulations |
| US20080260820A1 (en) * | 2007-04-19 | 2008-10-23 | Gilles Borrelly | Oral dosage formulations of protease-resistant polypeptides |
| ES2664822T3 (es) | 2007-10-16 | 2018-04-23 | Biocon Limited | Una composición farmacéutica sólida administrable por vía oral y un proceso de la misma |
| CA2711561A1 (en) * | 2008-01-04 | 2009-07-16 | Biodel, Inc. | Insulin formulations for insulin release as a function of tissue glucose levels |
| ES2477552T3 (es) | 2008-09-08 | 2014-07-17 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Moduladores de la actividad de la aldehidodeshidrogenasa y métodos de uso de los mismos |
| WO2010062308A1 (en) | 2008-10-28 | 2010-06-03 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Modulators of aldehyde dehydrogenase and methods of use thereof |
| US8940690B2 (en) | 2009-01-28 | 2015-01-27 | National Institutes Of Health (Nih) | Synthetic conjugates and uses thereof |
| CA2750262C (en) * | 2009-01-28 | 2016-08-09 | Smartcells, Inc. | Conjugate based systems for controlled drug delivery |
| BRPI1008415A2 (pt) | 2009-02-12 | 2018-02-27 | Proyecto De Biomedicina Cima S.L. | uso de cardiotrofina-1 para o tratamento de doenças metabólicas |
| US9060927B2 (en) * | 2009-03-03 | 2015-06-23 | Biodel Inc. | Insulin formulations for rapid uptake |
| CA2754950A1 (en) | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Smartcells, Inc. | Terminally-functionalized conjugates and uses thereof |
| HUP0900482A2 (en) * | 2009-08-03 | 2011-03-28 | Cera Med Kft | Pharmaceutical formulation for oral administration |
| AU2011282988A1 (en) | 2010-07-28 | 2013-01-31 | Smartcells, Inc. | Recombinantly expressed insulin polypeptides and uses thereof |
| EP2643009A4 (en) * | 2010-11-24 | 2015-04-01 | Durect Corp | COMPOSITION FOR THE RELEASE OF BIODEGRADABLE ACTIVE SUBSTANCES |
| PH12013501495A1 (en) | 2011-01-20 | 2013-09-16 | Zealand Pharma As | Combination of acylated glucagon analogues with insulin analogues |
| WO2012149106A1 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Compositions and methods for increasing proliferation of adult salivary stem cells |
| JP6735561B2 (ja) | 2012-12-03 | 2020-08-05 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． | Ｏ−グリコシル化カルボキシ末端部分（ｃｔｐ）ペプチド系のインスリンおよびインスリン類似体 |
| JP6410790B2 (ja) | 2013-03-14 | 2018-10-24 | ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー | ミトコンドリアアルデヒドデヒドロゲナーゼ−２調節因子およびその使用方法 |
| US9427475B2 (en) | 2013-10-04 | 2016-08-30 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Glucose-responsive insulin conjugates |
| JP6564369B2 (ja) | 2013-12-09 | 2019-08-21 | デュレクト コーポレイション | 薬学的活性剤複合体、ポリマー複合体、ならびにこれらを伴う組成物及び方法 |
| CN105899191B (zh) * | 2014-01-09 | 2020-06-16 | 赛诺菲 | 胰岛素类似物和/或胰岛素衍生物的稳定化不含甘油的药物制剂 |
| EP3094343A4 (en) * | 2014-01-13 | 2017-10-18 | Thermalin Diabetes, LLC | Rapid action insulin formulations and pharmaceutical delivery systems |
| AR099569A1 (es) | 2014-02-28 | 2016-08-03 | Novo Nordisk As | Derivados de insulina y los usos médicos de estos |
| EP3006045B3 (en) | 2014-10-07 | 2021-03-17 | Cyprumed GmbH | Pharmaceutical formulations for the oral delivery of peptide or protein drugs |
| WO2017163159A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Wockhardt Limited | Biphasic pharmaceutical composition of insulin human |
| RS65380B1 (sr) | 2017-08-24 | 2024-04-30 | Novo Nordisk As | Glp-1 kompozicije i njihova upotreba |
| US11110063B2 (en) | 2017-08-25 | 2021-09-07 | MAIA Pharmaceuticals, Inc. | Storage stable sincalide formulations |
| US11820805B2 (en) | 2017-12-18 | 2023-11-21 | Merck Sharp & Dohme Llc | Conjugate based systems for controlled insulin delivery |
| EP3740212A4 (en) | 2017-12-18 | 2021-10-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | CONJUGATE-BASED SYSTEMS FOR CONTROLLED INSULIN DELIVERY |
| CN110063932A (zh) * | 2019-04-12 | 2019-07-30 | 浙江大学 | 一种多肽蛋白类药物的缓释组合物制剂及其制备方法 |
| IL294520A (en) | 2020-02-18 | 2022-09-01 | Novo Nordisk As | Pharmaceutical formulations |
| CR20220555A (es) | 2020-03-31 | 2023-01-23 | Protomer Tech Inc | Conjugados para reactividad selectiva a dioles vecinales |
| KR20230110505A (ko) | 2020-11-19 | 2023-07-24 | 프로토머 테크놀로지스 인크. | 방향족 붕소-함유 화합물 및 인슐린 유사체 |
| IL317049A (en) | 2022-05-18 | 2025-01-01 | Protomer Tech Inc | Aromatic boron-containing compounds and related insulin analogs |
Family Cites Families (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2538018A (en) * | 1944-04-04 | 1951-01-16 | Nordisk Insulinlab | Crystalline product of insulin and alkaline protein and process of making it |
| US2801953A (en) * | 1952-02-28 | 1957-08-06 | Hoechst Ag | Process of preparing crystallized insulin preparations |
| US2849370A (en) * | 1953-06-04 | 1958-08-26 | Novo Terapeutisk Labortorium A | Injectable insulin preparations with protracted effect and process of producing same |
| US3060093A (en) * | 1957-07-18 | 1962-10-23 | Nordisk Insulinlab | Slowly acting insulin preparation in crystalline form and method of preparation |
| US3868358A (en) * | 1971-04-30 | 1975-02-25 | Lilly Co Eli | Protamine-insulin product |
| DE3326473A1 (de) * | 1983-07-22 | 1985-01-31 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Pharmazeutisches mittel zur behandlung des diabetes mellitus |
| DE3327709A1 (de) * | 1983-07-29 | 1985-02-07 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Insulin-derivat-kristallsuspensionen, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung |
| DK119785D0 (da) * | 1985-03-15 | 1985-03-15 | Nordisk Gentofte | Insulinpraeparat |
| PH25772A (en) * | 1985-08-30 | 1991-10-18 | Novo Industri As | Insulin analogues, process for their preparation |
| JP2606915B2 (ja) * | 1987-02-25 | 1997-05-07 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 新規インシュリン誘導体 |
| DE3717370A1 (de) * | 1987-05-22 | 1988-12-01 | Hoechst Ag | Mischkristalle aus insulin und insulinderivaten, verfahren zur herstellung dieser mischkristalle, diese mischkristalle enthaltende pharmazeutische mittel und ihre verwendung zur behandlung von diabetes mellitus |
| EP0425482B1 (en) * | 1988-07-20 | 1993-08-18 | Novo Nordisk A/S | Human insulin analogs and preparations containing them |
| HUT56857A (en) * | 1988-12-23 | 1991-10-28 | Novo Nordisk As | Human insulin analogues |
| US5514646A (en) * | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
| NZ232375A (en) * | 1989-02-09 | 1992-04-28 | Lilly Co Eli | Insulin analogues modified at b29 |
| JP2837956B2 (ja) * | 1993-06-21 | 1998-12-16 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | Ａｓｐ▲上Ｂ２８▼インスリン結晶 |
| DK72793D0 (da) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | Nyt produkt |
| US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
| US5474978A (en) * | 1994-06-16 | 1995-12-12 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
-
1994
- 1994-06-16 US US08/260,633 patent/US5461031A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-24 TW TW083105766A patent/TW347334B/zh not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-01 US US08/458,150 patent/US5650486A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-01 US US08/458,151 patent/US5747642A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-12 CA CA002151564A patent/CA2151564C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-13 YU YU39795A patent/YU39795A/sh unknown
- 1995-06-13 HU HU9501717A patent/HU218943B/hu unknown
- 1995-06-14 IE IE950435A patent/IE68852B1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 IT IT95MI001277A patent/IT1276722B1/it active IP Right Grant
- 1995-06-14 ZA ZA954941A patent/ZA954941B/xx unknown
- 1995-06-14 JP JP14729695A patent/JP3812962B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 AT AT0101795A patent/AT408611B/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 RO RO95-01141A patent/RO115124B1/ro unknown
- 1995-06-14 SE SE9502168A patent/SE509295C2/sv not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CH CH02083/99A patent/CH693019A5/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CH CH01764/95A patent/CH689934A5/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 NO NO19952356A patent/NO320808B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 FI FI952932A patent/FI118208B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 NL NL1000565A patent/NL1000565C2/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 PL PL95309100A patent/PL183284B1/pl unknown
- 1995-06-14 ES ES09501196A patent/ES2091728B1/es not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-14 IL IL11415395A patent/IL114153A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 BR BR9502797A patent/BR9502797A/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 KR KR1019950015781A patent/KR100386038B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 PE PE1995271265A patent/PE34496A1/es not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CN CNB95106567XA patent/CN1145641C/zh not_active Ceased
- 1995-06-14 GB GB9512105A patent/GB2290294B/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 UA UA95062796A patent/UA34468C2/uk unknown
- 1995-06-14 MY MYPI95001592A patent/MY116831A/en unknown
- 1995-06-14 SI SI9500199A patent/SI9500199A/sl not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CO CO95026236A patent/CO4410204A1/es unknown
- 1995-06-14 FR FR9507095A patent/FR2721215B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 CZ CZ19951543A patent/CZ294556B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 BE BE9500527A patent/BE1009409A5/fr active
- 1995-06-14 DE DE19521753A patent/DE19521753B4/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 NZ NZ272360A patent/NZ272360A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 LU LU88627A patent/LU88627A1/fr unknown
- 1995-06-14 GR GR950100228A patent/GR1002494B/el not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 PT PT101723A patent/PT101723B/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 DK DK199500676A patent/DK176213B1/da not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-11-29 NL NL1004643A patent/NL1004643C2/nl not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ299637B6 (cs) * | 1997-06-13 | 2008-10-01 | Eli Lilly And Company | Stabilní inzulinové prostredky |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ294556B6 (cs) | Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu inzulinu a způsob přípravy krystalů LysB28ProB29-lidského inzulinu a protaminu | |
| US5948751A (en) | X14-mannitol | |
| US5547929A (en) | Insulin analog formulations | |
| US5840680A (en) | ASPB28 insulin crystals | |
| EP0910402B1 (en) | Insulin preparations containing mannitol | |
| CZ305297A3 (cs) | Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu monomerního inzulínu | |
| PL177002B1 (pl) | Preparat insuliny ludzkiej i sposób wytwarzania preparatu insuliny ludzkiej | |
| CZ299637B6 (cs) | Stabilní inzulinové prostredky | |
| AU711428B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
| RU2154494C2 (ru) | Комплекс аналога инсулина и протамина, способ получения, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета | |
| AU738101B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
| GB2327424A (en) | Insulin analog protamine complexes | |
| HK1013952A (en) | Insulin analog formulations | |
| IL127365A (en) | Insulin preparations containing carbohydrates |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20150614 |