CN101060856B

CN101060856B - 可溶、稳定的含胰岛素制剂

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Publication number: CN101060856B
Application number: CN2005800399383A
Authority: CN
Inventors: H·B·奥尔森; N·C·卡尔肖尔姆; P·巴尔施米特
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 2004-11-22
Filing date: 2005-11-21
Publication date: 2011-01-19
Anticipated expiration: 2025-11-21
Also published as: JP4874989B2; JP2008520628A; EP1817049B1; CN101060856A; US8263551B2; WO2006053906A1; ES2391776T3; US20110046049A1; TW200631592A; EP1817049A1

Abstract

本发明涉及包括胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或任何上述物质的组合以及精蛋白盐的药物制剂，制备所述制剂的方法以及所述制剂在疾病和病情治疗中的用途，包含于所述制剂中的胰岛素肽的使用适应于所述疾病和病情。本发明进一步涉及通过添加精蛋白盐至含胰岛素的制剂而提高胰岛素在小于7.0的pH时在含胰岛素制剂中的稳定性和/或溶解度。

Description

可溶、稳定的含胰岛素制剂

技术领域

本发明涉及包含胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或任何上述物质的组合以及精蛋白盐的药物制剂，制备所述制剂的方法以及所述制剂在疾病和病情治疗中的用途，包含于所述制剂中的胰岛素肽的使用适应于所述疾病和病情。本发明进一步涉及通过添加精蛋白盐至含胰岛素的制剂而提高胰岛素在小于7.0的pH时在含胰岛素制剂中的稳定性和/或溶解度。

背景技术

糖尿病为代谢性病症，其中或多或少完全失去利用葡萄糖的能力。总人口的约2％患有糖尿病。

由于1920年代胰岛素的发现，已经不断取得进步以改进糖尿病的治疗。为了避免过高的葡萄糖水平，糖尿病患者常常进行胰岛素替代疗法，由此通过注射施用胰岛素。

糖尿病的治疗中，建议并采用了多种胰岛素组合物，包括常规胰岛素、

胰岛素、低精蛋白锌胰岛素、胰岛素锌混悬液、精蛋白锌胰岛素和

胰岛素。通常糖尿病患者要用胰岛素治疗数十年，为了安全和生命质量，非常需要改进胰岛素组合物。一些可买到的胰岛素组合物的特征在于快速起作用，而其他组合物表现相对更慢起作用，但多少表现了延长的效应。速效胰岛素组合物通常是胰岛素溶液，而迟效胰岛素组合物可以是含通过仅加入锌盐或通过加入精蛋白或通过上述两者的结合而沉淀的晶体和/或非晶体胰岛素的悬浮液。此外，有些患者使用既速效又长效的组合物。所述组合物可以是其中悬浮了精蛋白胰岛素晶体的胰岛素溶液。有些患者自己将胰岛素溶液与悬浮组合物按所需比例混合制备最终组合物。

人胰岛素由两条肽链组成，即所谓的A链和B链，其分别含有21和30个氨基酸残基。A链和B链通过两个胱氨酸二硫键和A链内的第三个二硫键交联。来自大多数其他物种的胰岛素具有相似的组成，但在相应位置上可能不包含相同的氨基酸残基。

基因工程的发展使得能够很容易制备很多与人胰岛素类似的胰岛素化合物。这些胰岛素类似物中，一个或多个氨基酸残基已用可由核苷酸序列编码的其他氨基酸取代。如上所述，由于人胰岛素含有51个氨基酸残基，很明显可能有许多胰岛素类似物，而且已制备了许多具目的特性的类似物。在用作注射组合物的具有所需浓度的人胰岛素溶液中，胰岛素分子以六聚体的聚合形式存在[Brange等，DiabetesCarel3，(1990)，923-954]。人们认为在皮下注射后，血流吸收速率取决于分子大小，并已发现阻碍或抑制六聚体形成的具有氨基酸残基取代的胰岛素类似物有不寻常的快速起效作用(Brange等：Ibid)。对于糖尿病患者，这具有重要的治疗价值。

含有胰岛素的药物组合物的常规调查由Brange等人在Galenicsof Insulin，Springer-Verlag(Berlin，1987)中给出。

Scott和Fisher(1936)公开了含有1mM精蛋白硫酸盐和0.15mM胰岛素的pH7.2的胰岛素悬浮液。

基于人胰岛素类似物的药物组合物已例如由Heinemann等，Lutterman等和Wiefels等在“Frontiers in Insulin Pharmacology”International Symposium in Hamburg，1992中描述。

US 5 474 978(Eli Lilly)公开了一种速效肠胃外制剂，包含由六个单体胰岛素类似物、锌离子和至少三个分子的苯酚衍生物组成的人胰岛素类似物的六聚体复合物。

正常地，通过皮下注射施用胰岛素组合物。对于患者，重要的是胰岛素组合物的作用方式，即作为从注射起时间的函数的对葡萄糖代谢的胰岛素作用，包括胰岛素开始起作用的时间、作用的最大值和总持续时间。患者需要具有不同作用方式的各种胰岛素组合物。一个患者可能在同一天使用具有非常不同作用方式的胰岛素组合物。对任何给定患者在任何给定时间的所需作用方式取决于数个因素，例如当天的时间和患者所吃任何食物的量和成分。

然而对于患者来说，尤其是由于笔式注射装置如含药筒的装置(其中贮存胰岛素组合物直至整个药筒用空)的大量使用，胰岛素组合物的化学稳定性也同等重要。对于含1.5-3.0m l药筒的装置，在药筒内贮存的时间可能持续1-2周。贮存期间，胰岛素结构中出现共价化学变化。该变化可导致活性更低和潜在免疫原性分子的形成，如脱酰胺产物和更高分子量转化产物(二聚体，多聚体等)。对胰岛素的化学稳定性的全面研究由Jens Brange在“Stability ofInsulin”，Kluwer Academic Publishers，1994中给出。

包含胰岛素和胰岛素类似物的组合物通常利用不同的添加剂配制，例如磷酸钠(缓冲液)、Zn²⁺(稳定剂)、苯酚/间甲酚(防腐剂和稳定剂)、氯化钠(等渗剂和稳定剂)以及甘油/甘露糖醇(等渗剂)。

胰岛素产品的储存期限主要受可溶性聚集体(二聚体和多聚体)随时间形成的影响，尽管胰岛素通常在不超过约5℃的低温贮存，其与例如在室温下贮存相比显著提高储存期限。此外，胰岛素产品由于振荡(例如在患者口袋中携带或运输期间时)而经受不溶聚集体(纤丝)的形成。对胰岛素产品的性质来说必要的是由于化学或物理效应而形成所述可溶和不溶聚集体的趋势降低至绝对最小化。

Ac taPharmaceutica Nordica4(4)，1992，pp.149-158公开了具有0至250mM浓度氯化钠的胰岛素组合物。大部分组合物，包括另外含甘油的那些，含相当高含量的氯化钠，即大约对应于120mM浓度的0.7％。

美国专利No.5,866,538(Novo Nordisk)公开了具有提高的化学稳定性的胰岛素组合物，该组合物包含人胰岛素或其类似物或衍生物、甘油和/或甘露糖醇以及5-100mM卤化物，例如氯化钠。

美国专利No.6,174,856(Novo Nordisk)公开了稳定的水相组合物，包含人胰岛素或其类似物或衍生物，选自双甘氨肽、柠檬酸盐或TRIS的缓冲液以及金属离子，尤其是钙或镁离子。

美国专利No.6,451,762(Novo Nordisk)公开了长效的人胰岛素衍生物水溶性聚集体。

美国专利No.6,551,992(Eli Lilly)公开了稳定抗聚集作用的单体胰岛素类似物制剂，其中缓冲剂为TRIS或精氨酸。

美国专利No.5,747,642(Eli Lilly)公开了肠胃外药物制剂，其包含单体胰岛素类似物、锌、精蛋白和苯酚衍生物。

美国专利No.6,465,426(Eli Lilly)公开了不溶的组合物，包含酰化的胰岛素或酰化的胰岛素类似物，其与锌、精蛋白和酚化合物复合使得得到的微晶体类似于中性精蛋白Hagedorn(NPH)胰岛素结晶形态。

虽然含胰岛素组合物的化学和物理稳定性已取得进展，仍有对胰岛素或其类似物或衍生物或上述混合物的可溶、稳定制剂的需求，所述制剂在体内施予时呈现长效特点。

发明内容

本申请公开了包含一定浓度的某些精蛋白盐的制剂允许胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或上述混合物的可溶性稳定制剂在pH7.0以下配制。本制剂还在pH7.0以下是物理和化学稳定的并且呈现长效特点，因此使得其为储存-稳定的并且适于侵入性的(例如注射、皮下注射、肌内注射、静脉内注射或输液)以及非-侵入性的(例如鼻的、口腔的、肺的、透皮的或透过粘膜的例如颊的)给药方法。

本发明因此涉及包含胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或上述物质的混合物以及精蛋白盐的药物制剂，其中精蛋白盐以至少0.25mM的浓度存在并且制剂的pH小于约7.0。本发明的药物制剂可进一步包含至少一种下列组分：防腐剂、二价金属离子(如锌、钴、镁或钙或这些离子的组合)、等渗剂、缓冲剂和表面活性剂。

本发明进一步涉及利用本发明药物制剂的治疗方法，其中组合物以对抗疾病、病情或病症的有效量施予，制剂中包含的胰岛素肽的给药适应于所述疾病、病情或病症。在一个实施方案中，本发明的制剂可用于1型和2型糖尿病的治疗。

此外本发明还涉及提高含胰岛素制剂的物理和化学稳定性的方法，其中该方法包括添加至少0.25mM浓度的精蛋白盐。

本发明还涉及生产本发明药物制剂的方法。

在一个实施方案中，制备本发明制剂的方法包括：

a)通过将二价金属离子溶于水或缓冲液中而制备溶液；

b)通过将防腐剂溶于水或缓冲液中而制备溶液；

c)通过将等渗剂溶于水或缓冲液中而制备溶液；

d)通过将表面活性剂溶于水或缓冲液中而制备溶液；

e)通过将胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或上述物质的混合物溶于水或缓冲液中而制备溶液；

f)通过将精蛋白盐溶于缓冲液或水中而制备溶液；

g)混合溶液e)和一种或多种溶液a)、b)、c)和d)；

h)将溶液g)与溶液f)混合；以及

i)调节h)中混合物的pH至所需的小于7.0的pH。

附图说明

图1A和1B显示了无精蛋白乙酸盐的胰岛素制剂(图1A；0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，pH＝3.5、4.7和7.4)以及有精蛋白乙酸盐的胰岛素制剂(图1B；0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.6mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0和pH＝5.5)在不同pH时在37℃14天后脱酰胺产物(B3Asp、B3isoAsp、A21Asp)和疏水产物(主要为共价聚集体)相比开始时含量(总胰岛素含量的百分比)的增加。

图2A-C显示了不同浓度精蛋白盐和锌对人胰岛素制剂中胰岛素pH-依赖性溶解度的作用，其中所有三个图中(即图2A-2C)人胰岛素参照为0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油。

图2A显示了包含0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油和0.7mM精蛋白-硫酸盐(或0.7、1.2、1.6或2.0mM精蛋白-乙酸盐)的人胰岛素制剂的pH-依赖性；

图2B显示了包含0.6mM人胰岛素，30mM苯酚，1.6％甘油、1.2mM精蛋白-硫酸盐和0.3、0.4或0.6mM Zn²⁺的人胰岛素制剂的pH-依赖性；和

图2C显示了0.6mM人胰岛素，30mM苯酚，1.6％甘油、2.0mM精蛋白-乙酸盐和0.0、0.2、0.4和0.6mM Zn²⁺的人胰岛素制剂的pH-依赖性。

图3显示了下列人胰岛素制剂在0小时皮下注射后血浆葡萄糖水平(基线的％)(N只猪的平均值+/-SEM)的变化：0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)；和0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)。

图4显示了下列人胰岛素制剂在0小时皮下注射后血浆葡萄糖水平(基线的％)(N只猪的平均值+/-SEM)的变化：0.6mM人胰岛素，0.6mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)；和0.6mM人胰岛素，0.6mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝5)。

图5显示了精蛋白乙酸盐对人胰岛素制剂溶解度的作用。制剂为添加2.0mM精蛋白乙酸盐(“人胰岛素，2.0mM精蛋白乙酸盐”)或2.0mM精蛋白乙酸盐和0.4mM Zn²⁺(“人胰岛素，0.4mM Zn²⁺，2.0mM精蛋白乙酸盐”)的0.6mM人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油(“人胰岛素”)的制剂。

图6显示了精蛋白乙酸盐对人胰岛素制剂和B28D人胰岛素制剂溶解度的作用。制剂为添加0.3mM Zn²⁺(“人胰岛素”)的0.6mM人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂，或添加有1.6mM精蛋白乙酸盐(“B28D胰岛素，1.6mM精蛋白乙酸盐”)或1.6mM精蛋白乙酸盐和0.3mM Zn²⁺(“B28D胰岛素，0.3mM Zn²⁺，1.6mM精蛋白乙酸盐”)的0.6mMB28D人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂。

图7显示了精蛋白乙酸盐对人胰岛素和B28K、B29P人胰岛素制剂溶解度的作用。制剂为添加0.3mM Zn²⁺(“人胰岛素”)的0.6mM人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂，或添加有1.6mM精蛋白乙酸盐(“B28K，B29P胰岛素，1.6mM精蛋白乙酸盐”)或1.6mM精蛋白乙酸盐和0.3mM Zn²⁺(“B28K，B29P胰岛素，0.3mM Zn²⁺，1.6mM精蛋白乙酸盐”)的0.6mM B28K，B29P人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂。

图8显示了精蛋白乙酸盐对人胰岛素和B3K，B29E人胰岛素制剂溶解度的作用。制剂为添加0.3mM Zn²⁺(“人胰岛素”)的0.6mM人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂，或添加有1.6mM精蛋白乙酸盐(“B3K，B29E胰岛素，1.6mM精蛋白乙酸盐”)或1.6mM精蛋白乙酸盐和0.3mM Zn²⁺(“B3K，B29E胰岛素，0.3mM Zn²⁺，1.6mM精蛋白乙酸盐”)的0.6mM B3K，B29E人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂。

图9为来自图5-8数据的编辑，其显示精蛋白乙酸盐对人胰岛素、B28D人胰岛素、B28K，B29P人胰岛素和B3K，B29E人胰岛素溶解度的作用。制剂为添加有1.6mM精蛋白乙酸盐的0.6mM人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂(“人胰岛素”)；或0.6mM B28D人胰岛素、B28K，B29P人胰岛素或B3K，B29E人胰岛素、30mM苯酚和1.6％甘油的制剂。

图10显示了人胰岛素制剂在不同pH的溶解度，其中制剂包含100U胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油以及图中每一曲线显示的2.0mM特定的精蛋白盐。“参照”为具有上述组合物而不包含精蛋白盐的胰岛素制剂。

图11显示了人胰岛素制剂在不同pH的溶解度，其中制剂包含100U胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油以及图中每一曲线显示的2.0mM特定的精蛋白盐(对于己酸盐/乙酸盐混合物，其为0.5mM己酸盐和1.5mM乙酸盐)。“参照”为具有上述组合物而不包含精蛋白盐的胰岛素制剂。

图12显示了人胰岛素制剂在不同pH的溶解度，其中制剂包含100U胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油以及图中每一曲线显示的2.0mM特定的精蛋白盐。“参照”为具有上述组合物而不包含精蛋白盐的胰岛素制剂。

图13显示了0.6mM人胰岛素，1.6mM精蛋白乙酸盐，60mM苯酚，1.6％甘油的制剂在如图中所示温度和时间贮存后胰岛素相对于pH的溶解度。“参照”为在室温下存储4天的0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油的制剂。

图14显示了2.0mM人胰岛素，4.0mM精蛋白乙酸盐，60mM苯酚，1.6％甘油的制剂在如图中所示温度和时间间隔贮存后胰岛素相对于pH的溶解度。“参照”为在室温下存储4天的0.6mM人胰岛素，0.3mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油的制剂。

图15显示了0.6mM人胰岛素，2.0mM精蛋白乙酸盐，40mM苯酚，1.6％甘油的制剂在如图中所示温度和时间贮存后胰岛素相对于pH的溶解度。“参照”为在室温下存储4天的0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油的制剂。

图16显示了2.0mM人胰岛素，4.0mM精蛋白乙酸盐，25mM间甲酚，1.6％甘油的制剂在如图中所示温度和时间间隔贮存后胰岛素相对于pH的溶解度。“参照”为在室温下存储4天的0.6mM人胰岛素，0.3mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油的制剂。

图17显示了0.6mM人胰岛素，2.0mM精蛋白乙酸盐，60mM苯酚，1.6％甘油的制剂在如图例中所述温度和时间贮存后胰岛素相对于pH的溶解度。参照为在室温下存储4天的0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油的制剂。

图18显示了通过用216nmol常规的NPH(Insulatard)(7只猪，数据以灰色显示)或216nmol0.6mM人胰岛素，1.0mM精蛋白乙酸盐，30mM苯酚，1.6％甘油pH＝5.0的制剂皮下注射猪后的葡萄糖利用。葡萄糖液输注速率(GIR)表示为平均值±SE。

图19和20显示了B28D胰岛素在1.6mM至4.0mM浓度的精蛋白乙酸盐存在时的溶解度。每个图中呈现无精蛋白盐的B28D胰岛素曲线，表明pH～3.8和～6.5之间pH范围中B28D胰岛素的沉淀带。

图21-23显示在不同浓度的精蛋白乙酸盐存在时三种不同浓度人胰岛素的溶解度。样品在37℃温育14天后测量溶解度。

图24显示在1.0mM和2.0mM浓度的来自三种不同物种的精蛋白乙酸盐存在时人胰岛素的溶解度，所述物种为虹鳟(鲑精蛋白)，鲔鱼(鲔精蛋白)和大西洋鲱(鲱精蛋白)。用于图1-23中的精蛋白盐全部获自鲑鱼。

发明描述

本发明的药物制剂包含胰岛素和精蛋白盐，其中精蛋白盐以至少0.25mM的浓度存在并且制剂的pH小于约7.0。

本发明的药物制剂为化学稳定的并且在小于7.0的pH可溶。“在给定的pH可溶”指包含在本发明制剂中的胰岛素在该制剂的pH时完全溶解，其中用于测定包含于本发明制剂中的胰岛素是否溶解的方法在本领域已知。

在一个实施方案中，药物制剂可在30,000g离心20分钟随后可通过RP-HPLC测定上清中的胰岛素浓度。如果该浓度在实验误差范围内等于最初用于制备制剂的胰岛素浓度，则胰岛素完全溶于本发明的制剂中。

在另一实施方案中，本发明制剂中胰岛素肽的溶解度可通过目测其中包含制剂的容器进行检查而简单地确定。如果溶液看起来是澄清的并且无颗粒物质悬浮或沉淀在容器的边/底部上，胰岛素为溶解的。

当然，熟练技术人员应了解本发明制剂中胰岛素的溶解度不仅受制剂组成和其pH的影响而且受溶解度测量之前制剂存储的温度和时间的影响(参见实施例6)。例如，虽然本发明制剂在45℃的贮存可缩小观察溶解度的pH值范围，在45℃观察到来自本发明制剂的任何胰岛素沉淀可通过使制剂降温而逆转(参见，例如，图13和15)。因此，例如如果制剂在4℃在给定的pH5-6之间的pH为澄清液(即溶解的)但在45℃存储时开始沉淀，当制剂后来在4℃存储时该沉淀将为可溶解的。

本发明的制剂中，所将要包含的胰岛素可选自胰岛素，其中“胰岛素”理解为指人胰岛素，[其中“人胰岛素”指具有在DSHW Nicol和LF Smith：Nature，1960)4736：483-485(其在此通过引用引入)中呈现的氨基酸序列的胰岛素]，人胰岛素类似物，人胰岛素衍生物或其混合物。

在一个实施方案中胰岛素为人胰岛素。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的衍生物。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Asp、Glu、Lys、Leu、Val或Ala。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Asp、Glu或Lys。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Asp或Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Asp。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B29为Pro、Asp或Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B29为Pro或Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B29为Pro。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B29为Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B28为Asp或Lys，并且位点B29为Lys或Pro。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B9为Asp或Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B10为Asp或Glu或Gln。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B10为Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B10为Gln。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B1为Gly。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B3为Lys、Thr、Ser、Ala或Gln。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B3为Lys、Thr、Ser或Ala。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B3为Lys或Ala。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B3为Lys。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B3为Lys并且位点B29为Glu。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B25缺失。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B27缺失。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点B30缺失。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点A18为Gln。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点A21为Ala、Arg、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Phe、Ser、Thr、Trp、Tyr、Val或hSer。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点A21为Ala、Arg、Gln、Gly、Ile、Leu、Phe、Ser、Thr、Val或hSer。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点A21为A1a或Gly。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素的类似物，其中位点A21为Gly。

在另一实施方案中胰岛素为具有一个或多个亲脂性取代基的人胰岛素或其类似物的衍生物。

在另一实施方案中胰岛素为人胰岛素或其类似物的衍生物，其中位点B29Lys的N^ε-氨基通过用疏水部分(如脂肪酸衍生物或石胆酸(litocholic acid)衍生物)共价酰化而修饰。

在另一实施方案中胰岛素衍生物选自B29N^ε-十六烷二酰-γ-Glu去B30胰岛素，B29-N^ε-肉豆蔻酰-去(B30)人胰岛素，B29-N^ε-棕榈酰-去(B30)人胰岛素，B29-N^ε-肉豆蔻酰人胰岛素，B29-N^ε-棕榈酰人胰岛素，B28-N^ε-肉豆蔻酰Lys^B28Pro^B29人胰岛素，B28-N^ε-棕榈酰Lys^B28Pro^B29人胰岛素，B30-N^ε-肉豆蔻酰-Thr^B29Lys^B30人胰岛素，B30-N^ε-棕榈酰-Thr^B29Lys^B30人胰岛素，B29-N^ε-(N-棕榈酰-γ-谷氨酰基)-去(B30)人胰岛素，B29-N^ε-(N-石胆酰-γ-谷氨酰基)-去(B30)人胰岛素，B29-N^ε-(ω-羧基十七烷酰)-去(B30)人胰岛素和B29-N^ε-(ω-羧基十七烷酰)人胰岛素。

在另一实施方案中，人胰岛素的类似物包含另外的稳定取代基的任何组合。

在另一实施方案中，人胰岛素的类似物包含位点B1、B3、A18和A21的另外的稳定取代基的任何组合。

在另一实施方案中胰岛素为选自以下的人胰岛素类似物：

B28D

B25H

去B27

B28K、B29P

B3K、B29E

B29E

去B25

B9E/D

B10E/D/Q。

在另一实施方案中胰岛素为选自以下的人胰岛素类似物：

A21G

A21Q，

A21A，

A21T

A21R

所有以下组合也可以为A21Q/A/T/R：

A21G、B28K、B29P

A21G、B28D

A21G、B28E

A21G、B3K、B29E

A21G、去B27

A21G、B9E

A21G、B9D

A21G、B10E

A21G、去B25

A21G、B25H

A21G、去B30

A21G、B28K、B29P

A21G、B28K、B29P、去B30

A21G、B28D、去B30

A21G、B28E

A21G、B28E、去B30

A21G、B3K、B29E

A21G、B3K、B29E、去B30

A21G、去B27、去B30

A21G、B9E/D

A21G、B9E、去B30

A21G、B9D、去B30

A21G、B10E/D/Q

A21G、B10E、去B30

A21G，B10Q，去B30

A21G、去B25、去B30.

在另一实施方案中胰岛素为选自以下的人胰岛素类似物：

B1G、A21G

B1G、A21G、B28K、B29P

B1G、A21G、B28D

B1G、A21G、B28E

B1G、A21G、B3K、B29E

B1G、A21G、去B27

B1G、A21G、B9E

B1G、A21G、B9D

B1G、A21G、B10E

B1G、A21G、B10Q

B1G、A21G、去B25

B1G、A21G、B25H

B1G、A21G、去B30

B1G、A21G、B28K、B29P

B1G、A21G、B28K、B29P、去B30

B1G、A21G、B28D、去B30

B1G、A21G、B28E

B1G、A21G、B28E、去B30

B1G、A21G、B3K、B29E

B1G、A21G、B3K、B29E、去B30

B1G、A21G、去B27、去B30

B1G、A21G、B9E/D

B1G、A21G、B9E、去B30

B1G、A21G、B9D、去B30

B1G、A21G、B10E/D/Q

B1G、A21G、B10E、去B30

B1G、A21G、B10Q、去B30

B1G、A21G、去B25、去B30、

B1G、A21G、B25H、去B30

在另一实施方案中，胰岛素为来自以上三个列表的人胰岛素类似物并在位点B3和A18进一步修饰，例如B3T、B3S、B3Q和A18Q。

在另一实施方案中，胰岛素为来自上述三个列表并如下进一步修饰的人胰岛素类似物：

B3T、B28D

B3T、去B27。

在另一实施方案中，胰岛素为来自上述三个列表并通过B30的缺失进一步修饰的人胰岛素类似物。

在另一实施方案中，胰岛素类似物和衍生物选自EP0 792 290(Novo NordiskA/S)，EP0 214 826和EP0 705 275(Novo NordiskA/S)，US 5,504,188(Eli Lilly)，EP0368187(Aventis)，美国专利5,750,497和6,011,007，EP 375437和EP 383472中公开的那些，并且其中所述胰岛素可包括但不限于，Lys^B29(N^ε-肉豆蔻烷酰基)去(B30)人胰岛素，Lys^B29-(N^ε-(γ-谷氨酰基-N^α-石胆酰)去(B30)人胰岛素，N^εB29-辛酰胰岛素，甘精胰岛素(胰岛素glargine，亦称

，由于位点A21的氨基酸天冬酰胺由甘氨酸取代并且两个精氨酸添加至B-链C-末端而不同于人胰岛素)，谷赖胰岛素(胰岛素glulisine，亦称

，由于位点B3的氨基酸天冬酰胺由赖氨酸取代并且位点B29的赖氨酸由谷氨酸取代而不同于人胰岛素)Lys^B28Pro^B29人胰岛素(

)，Asp^B28人胰岛素或门冬胰岛素(

)。

在一个实施方案中，胰岛素为人胰岛素或人胰岛素类似物的衍生物，其中衍生物包含至少一个赖氨酸残基并且亲脂性取代基附着于赖氨酸残基的ε氨基。

在一个实施方案中，亲脂性取代基附着其上的赖氨酸残基存在于胰岛素肽的位点B28。

在另一实施方案中，亲脂性取代基附着其上的赖氨酸残基存在于胰岛素肽的位点B29。

又一个实施方案中，亲脂性取代基为具有对应于至少6个碳原子的羧酸的酰基基团。

在另一实施方案中，亲脂性取代基为酰基基团，分枝的或不分枝的，其相当于具有8至24个原子长的碳原子链的羧酸。

又一个实施方案中，亲脂性取代基为对应于具有至少6个碳原子的脂肪酸的酰基基团。

又一个实施方案中，亲脂性取代基为对应于具有6至24个碳原子的线性、饱和羧酸的酰基基团。

又一个实施方案中，亲脂性取代基为对应于具有8至12个碳原子的线性、饱和羧酸的酰基基团。

又一个实施方案中，亲脂性取代基为对应于具有10至16个碳原子的线性、饱和羧酸的酰基基团。

在另一实施方案中，亲脂性取代基为包含至多10个，优选至多5个氧乙烯基单元的寡聚氧乙烯基。

在另一实施方案中，亲脂性取代基为包含至多10个，优选至多5个氧丙烯基单元的寡聚氧丙烯基。

一个优选实施方案中，本发明涉及人胰岛素衍生物，其中B30氨基酸残基缺失或为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；A21和B3氨基酸残基独立的为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；Phe^B1可缺失；Lys^B29的ε-氨基具有包含至少6个碳原子的亲脂性取代基；以及2-4个Zn²⁺离子可结合至每个胰岛素六聚体，条件是当B30为Thr或A la并且A21和B3都为Asn，以及Phe^B1不缺失时，则2-4个Zn²⁺离子结合至每个胰岛素衍生物的六聚体。

在另一实施方案中，本发明涉及人胰岛素衍生物，其中B30氨基酸残基缺失或为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；A21和B3氨基酸残基独立的为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；条件是如果B30氨基酸残基为Ala或Thr，则残基A21和B3的至少一个不是Asn；Phe^B1可缺失；并且Lys^B29的ε-氨基具有包含至少6个碳原子的亲脂性取代基。

在另一实施方案中，本发明涉及人胰岛素衍生物，其中B30氨基酸残基缺失或为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；A21和B3氨基酸残基独立的为可通过除Lys、Arg和Cys以外的遗传密码编码的任何氨基酸残基；Phe^B1可缺失；Lys^B29的ε-氨基具有包含至少6个碳原子的亲脂性取代基；并且2-4个Zn²⁺离子结合至每个胰岛素六聚体。

在一个实施方案中，本发明的制剂包含约0.25mM至约5.0mM浓度的胰岛素。

在另一实施方案中，本发明的制剂包含约0.25mM至约4.0mM浓度的胰岛素。

在又一个实施方案中，本发明的制剂包含约0.25mM至约3.0mM浓度的胰岛素。

在又一个实施方案中，本发明的制剂包含约0.3mM至约1.5mM浓度的胰岛素。

在又一个实施方案中，本发明的制剂包含0.4mM、0.8mM或1.3mM浓度的胰岛素。

在本发明的制剂中，所包括的精蛋白盐为除精蛋白硫酸盐以外的精蛋白盐，其中所述盐包括但不限于，精蛋白的乙酸盐、溴化物、氯化物、己酸盐、三氟醋酸盐、HCO₃、丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐、硝酸盐、柠檬酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、酒石酸盐或高氯酸盐或任何两种精蛋白盐的混合物。如此处所用的“精蛋白”指以与核酸的盐-样结合存在于精细胞中的一组强碱性蛋白质的的类名。通常，与胰岛素一起使用的精蛋白获自例如鲑鱼(鲑精蛋白，salmine)，虹鳟(鲑精蛋白，iridine)，鲱鱼(鲱精蛋白)，鲟鱼(鲟精蛋白)或西班牙鲭或鲔鱼(鲔精蛋白)并且多种精蛋白盐为市场上可买到的。当然，可理解的是特定精蛋白的肽组成可随所获得鱼的家族、属或种而不同。精蛋白通常包含四个主要组分，即包含约30-32个残基、其中约21-22个为精氨酸的单链肽。四个主要组分的每个，N-末端为脯氨酸，并且由于序列中没有别的氨基存在，在本文中精蛋白通过特定盐的化学修饰预期为同质的。

在一个实施方案中，用于本发明的精蛋白盐来自鲑鱼。

在另一实施方案中，用于本发明的精蛋白盐来自鲱鱼。

在另一实施方案中，用于本发明的精蛋白盐来自虹鳟。

在另一实施方案中，用于本发明的精蛋白盐来自鲔鱼。

在另一实施方案中，精蛋白盐选自精蛋白的丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐、硝酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、己酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐。

在另一实施方案中，精蛋白盐选自精蛋白的丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐、硝酸盐和乙酸盐。

在另一实施方案中，精蛋白盐选自精蛋白的乙酸盐。

在进一步的实施方案中，当本发明制剂中所包括的精蛋白盐为两种不同盐的混合物时，一种盐为乙酸盐并且另一种盐选自精蛋白的丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐和硝酸盐。可理解的是当本发明制剂中所包括的精蛋白盐为两种不同盐的混合物时，两种不同盐之间的摩尔比可为0.1：1至1：1。

在一个实施方案中，本发明制剂中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至约100。

在另一实施方案中，本发明制剂中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至约10。

在另一实施方案中，本发明制剂中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至5。

在另一实施方案中，本发明制剂中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约1至3。

在本发明的另一实施方案中，制剂具有小于约7.0的pH，其中用于pH的术语“约”指从所述数字+或-0.1个pH单位。

本发明进一步的实施方案中，制剂具有约4.0至约6.5的pH。

本发明进一步的实施方案中，制剂具有约4.5至约6.0的pH。

本发明进一步的实施方案中，制剂具有约5.0至约6.0的pH。

本发明进一步的实施方案中，制剂具有约5.0至约5.6的pH。

已注意到由于随着时间仅观察到本发明制剂非常小的pH-位移发生(数据没有显示)并且这些变化通常为在测量制剂pH时正常观察到的pH计与pH计之间的变化，所以本发明制剂的pH相当稳定。

本发明的另一实施方案中，该制剂除胰岛素和精蛋白盐之外包含至少一种下列组分：防腐剂、二价金属离子如锌以及等渗剂。

本发明的另一实施方案中，该制剂除胰岛素和精蛋白盐之外包含至少两种下列组分：防腐剂、二价金属离子如锌以及等渗剂。

本发明的另一实施方案中，该制剂除胰岛素和精蛋白盐之外包含所有三种下列组分：防腐剂、二价金属离子如锌以及等渗剂。

本发明的另一实施方案中，该制剂不包含二价金属离子。

当在本发明制剂中包含药学可接受防腐剂时，该防腐剂选自苯酚、间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧乙醇、对羟基苯甲酸丁酯、2-苯乙醇、苯甲醇、氯丁醇、硫柳汞(thiomerosal)或其混合物。这些特定的防腐剂的每一种组成本发明的替代实施方案。本发明的优选的实施方案中防腐剂为苯酚或间甲酚。本发明的另一优选实施方案中防腐剂为苯酚。本发明的另一优选实施方案中防腐剂为间甲酚。

在本发明进一步的实施方案中防腐剂以约0.1mg/ml至约50mg/ml的浓度，更优选以约0.1mg/ml至约25mg/ml的浓度，并且最优选以约0.1mg/ml至约10mg/ml的浓度存在。

防腐剂在药物组合物中的用途为技术人员所熟知。为方便起见参考文献为Remington：The Science and Practice of Pharmacy，19^th版，1995。

当在本发明的制剂中包括二价金属离子时，该二价金属离子可以是钙、镁或锌或其结合。

在一个实施方案中，二价金属离子为锌。

在另一实施方案中，本发明制剂中锌的浓度小于每一胰岛素3个Z_n ²⁺的摩尔比。

在另一实施方案中，本发明制剂中锌的浓度小于每一胰岛素2个Z_n ²⁺的摩尔比。

在另一实施方案中，本发明制剂中锌的浓度小于每一胰岛素1个Z^N2+的摩尔比。

当在本发明的制剂中包括药学可接受等渗剂时，该等渗剂可选自甘油、甘露糖醇、丙二醇、二甲砜、甲基磺酰甲烷、海藻糖、蔗糖、山梨醇、saccarose和/或乳糖或其混合物。在本发明的优选的实施方案中等渗剂为甘油。

在本发明进一步的实施方案中等渗性剂以约0.5％至约3％的浓度，更优选以约1％至约2％的浓度，并且最优选以约1.6％的浓度存在。

等渗剂在药物组合物中的用途为技术人员所熟知。为方便起见参考文献为Remington：The Science and Practice of Pharmacy，19^th版，1995。

在本发明的另一实施方案中，本发明的制剂可包括缓冲剂。

当在本发明的制剂中包括缓冲剂时，缓冲剂选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟甲基)-氨基甲烷或其混合物。这些特定的缓冲剂的每一种组成本发明的替代实施方案。本发明优选的实施方案中缓冲剂为甘氨酰甘氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠或其混合物。当然，可理解的是当其中精蛋白乙酸盐为包括在本发明制剂中的精蛋白盐，则精蛋白乙酸盐可充当缓冲剂。例如，如果1.0mM精蛋白乙酸盐加至本发明的制剂，乙酸盐的浓度为约20mM。

在本发明进一步的实施方案中制剂可进一步包括选自高分子聚合物或低分子化合物的稳定剂，其中所述稳定剂包括但不限于，聚乙二醇(例如PEG3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、不同的盐(例如氯化钠)、L-甘氨酸、L-组氨酸、咪唑、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和其混合物。这些特定的稳定剂的每一种组成本发明的替代实施方案。本发明优选的实施方案中稳定剂选自L-组氨酸、咪唑和精氨酸。

本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以0.1mg/ml至50mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以0.1mg/ml至5mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以5mg/ml至10mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以0mg/ml至20mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以20mg/ml至30mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中高分子聚合物以30mg/ml至50mg/ml浓度存在。

在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以0.1mg/ml至50mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以0.1mg/ml至5mg/ml浓度存在。

在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以5mg/ml至10mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以10mg/ml至20mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以20mg/ml至30mg/ml浓度存在。在本发明进一步的实施方案中低分子量化合物以30mg/ml至50mg/ml浓度存在。

稳定剂在药物组合物中的用途为技术人员所熟知。为方便起见参考文献为Remington：The Science and Practice of Pharmacy，19^th版，1995。

在本发明进一步的实施方案中本发明的制剂可进一步包含表面活性剂，其中表面活性剂可选自去污剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化甘油酯、乙酰单酸甘油乙酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚山梨醇酯如聚山梨醇酯-20、嵌段共聚物如聚环氧乙烷/聚环氧丙烷嵌段共聚物如泊洛沙姆、泊洛沙姆188和泊洛沙姆407、

35、

56、

72、

76、

92V、

97、

58P、

EL、癸乙烯乙二醇单十二烷基醚、N-癸酰基-N-甲葡糖胺、n-十二烷酰基-N-甲葡糖酰胺、烷基-聚糖苷、乙氧基化蓖麻油、七乙二醇单癸基醚、七乙二醇单十二烷基醚、七乙二醇单十四烷基醚、六乙二醇单十二烷基醚、六乙二醇单十六烷基醚、六乙二醇单十八烷基醚、六乙二醇单十四烷基醚、IgepalCA-630、IgepalCA-630、甲基-6-O-(N-庚基氨基甲酰基)-β-D-吡喃葡糖苷、九乙二醇单十二烷基醚、N-壬酰-N-甲葡糖胺、N-壬酰-N-甲葡糖胺、八乙二醇单癸基醚、八乙二醇单十二烷基醚、八乙二醇单十六烷基醚、八乙二醇单十八烷基醚、八乙二醇单十四烷基醚、辛基-β-D-吡喃葡糖苷、五乙二醇单癸基醚、五乙二醇单十二烷基醚、五乙二醇单十六烷基醚、五乙二醇单己基醚、五乙二醇单十八烷基醚、五乙二醇单辛基醚、聚乙二醇二环氧甘油醚、聚乙二醇醚W-1、聚氧乙烯10十三烷基醚、聚氧乙烯100硬脂酸盐、聚氧乙烯20异十六烷基醚、聚氧乙烯20油烯基醚、聚氧乙烯40硬脂酸酯、聚氧乙烯50硬脂酸酯、聚氧乙烯8硬脂酸酯、聚氧乙烯双(咪唑基羰基)、聚

25丙二醇硬脂酸盐、来自皂树皮的皂角苷20、

40、60、

65、

80、85、Tergitol，15-S-12型、Tergitol，15-S-30型、Tergitol，15-S-5型、Tergitol，15-S-7型、Tergitol，15-S-9型、Tergitol，NP-10型、Tergitol，NP-4型、Tergitol，NP-40型、Tergitol，NP-7型、Tergitol，NP-9型、十四烷基-β-D-麦芽糖苷、四乙二醇单癸基醚、四乙二醇单十二烷基醚、四乙二醇单十四烷基醚、三乙二醇单癸基醚、三乙二醇单十二烷基醚、三乙二醇单十六烷基醚、三乙二醇单辛基醚、三乙二醇单十四烷基醚、TritonCF-21、Triton CF-32、Triton DF-12、Triton DF-16、TritonGR-5M、Triton QS-15、Triton QS-44、Triton X-100、Triton X-102、Triton X-15、Triton X-151、Triton X-200、Triton X-207、

X-100、

X-114、

X-165溶液、X-305溶液、

X-405、

X-45、

X-705-70、

20、

40、

60、

6、65、

80、

81、

85、泰洛沙泊、甘油、胆酸或其衍生物、卵磷脂、乙醇和磷脂、甘油磷脂(卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰丝氨酸)、甘油糖脂(吡喃乳糖苷)、神经磷脂(神经鞘磷脂)和神经糖脂(神经酰胺、神经节苷脂)、DSS(多库酯钠、多库酯钙、多库酯钾)、SDS(十二烷基磺酸钠或十二烷基硫酸钠)、二棕榈酰基磷脂酸、辛酸钠、胆汁酸和其盐以及甘氨酸或牛磺酸轭合物、熊脱氧胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠、N-十六烷基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙基磺酸酯、阴离子(烷基-芳基-磺酸盐)单价表面活性剂、棕榈酰溶血磷脂酰-L-丝氨酸、溶血磷脂(例如乙醇胺的1-酰基-sn-甘油基-3-磷酸酯、胆碱、丝氨酸或苏氨酸)、溶血磷脂酰和磷脂酰胆碱的烷基烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)-衍生物，例如溶血磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱的十二酰和豆蔻酰衍生物和极性头部基团即胆碱、乙醇胺、磷脂酸、丝氨酸、苏氨酸、甘油、肌醇的修饰体、以及带正电荷的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂酰丝氨酸和溶血磷脂酰苏氨酸、两性离子表面活性剂(例如N-烷基-N，N-二甲铵-1-丙烷磺酸盐、3-胆酰胺-1-丙基二甲基铵-1-丙基磺酸酯、十二烷磷酸胆碱、豆蔻酰溶血磷脂酰胆碱、卵溶血卵磷脂)、阳离子表面活性剂(四铵基)(例如十六烷基-三甲基铵溴化物、氯化十六烷吡啶)、非离子型表面活性剂、聚环氧乙烷/聚环氧丙烷嵌段共聚物(Pluronics/Tetronics、TritonX-100、十二烷基β-D-吡喃葡萄糖苷)或聚合物表面活性剂(

40、

80、Brij-35)、梭链孢酸衍生物-(例如牛磺-二氢梭链孢酸钠等等)、长-链脂肪酸和其C6-C12盐(例如油酸和辛酸)、酰基肉碱和衍生物，赖氨酸、精氨酸或组氨酸的N^α-酰化的衍生物，或赖氨酸或精氨酸的侧-链酰化的衍生物、包含赖氨酸、精氨酸或组氨酸以及中性或酸性氨基酸的任何组合的二肽的N^α-酰化衍生物、包含中性氨基酸和两种带电氨基酸的任何组合的三肽的N^α-酰化衍生物，或者表面活性剂可选自咪唑啉衍生物或其混合物。这些特定的表面活性剂的每一种组成本发明的替代实施方案。本发明优选的实施方案中表面活性剂为泊洛沙姆188或

20。本发明另一个优选的实施方案中表面活性剂为泊洛沙姆188。另一个本发明优选的实施方案中表面活性剂为

20。

本发明进一步的实施方案中表面活性剂以少于200ppm的量，更优选少于100ppm的量，并且最优选少于50ppm的量存在。

表面活性剂在药物组合物中的用途为技术人员所熟知。为方便起见参考文献为Remington：The Science and Practice of Pharmacy，19^th版，1995。

本发明的制剂可通过常规方法制备，例如如Remington′sPharmaceutical Sciences，1985中或Remington：The Science andPractice of Pharmacy，19^th版，1995中所述的方法，其中所述制药工业的常规方法包括根据情况溶解并且混合组分以产生所需的最终产物。

本发明还涉及制备本发明制剂的方法。

在一个实施方案中，制备本发明制剂的方法包括：

a)通过将二价金属离子溶于水或缓冲液中而制备溶液；

b)通过将防腐剂溶于水或缓冲液中而制备溶液；

c)通过将等渗剂溶于水和缓冲液中制备溶液或；

d)通过将表面活性剂溶于水或缓冲液中而制备溶液；

e)通过将胰岛素、胰岛素类似物、胰岛素衍生物或上述混合物溶于水或缓冲液中而制备溶液；

f)通过将精蛋白盐溶于缓冲液或水中而制备溶液；

g)混合溶液e)和一种或多种溶液a)、b)、c)和d)；

h)将溶液g)与溶液f)混合；以及

i)调节h)中混合物的pH至所需的小于7.0的pH。

在另一实施方案中，在约6.5至约7.5的pH，优选约中性pH的水或缓冲液中包含胰岛素、胰岛素类似物或胰岛素衍生物或其混合物以及选择性的防腐剂、等渗剂和/或二价金属离子的溶液可与精蛋白盐溶液混合，且随后可调节混合溶液的pH至所需的小于7.0的最终pH。

当本发明的制剂包含精蛋白盐的混合物例如图10中所示的己酸盐/乙酸盐混合物时，用于上述混合物的精蛋白盐溶液可通过将每种盐分别溶解且随后将溶液一起混合或通过将盐一起溶解于一体积的水或缓冲液中而制备。

当然，可理解的是除了以上所述之外最终制剂的组分可以依次一起混合，只要该最终制剂在混合结束时达到同样的平衡状态。

本发明进一步涉及利用本发明药物制剂的治疗方法，其中组合物以对抗疾病、病情或病症的有效量施予，制剂中包含的胰岛素肽的给药适应于所述疾病、病情或病症。

在一个实施方案中，本发明的制剂可用于1型和2型糖尿病的治疗。

本发明制剂每天的剂量、给药途径和给药次数将通过医师考虑所述因素如治疗目的、患者疾病的性质和病因、患者可能采用的其他药品或药物、患者的性别和体重、锻炼的水平和饮食习惯以及医师所知的其他因素而确定。

在宽范围中，本发明制剂中给予患者的胰岛素日剂量为约0.1单位胰岛素/kg体重至约1单位胰岛素/kg体重。

在另一实施方案中，本发明制剂中给予患者的胰岛素日剂量为约0.2单位胰岛素/kg体重至约0.6单位胰岛素/kg体重。当然，治疗糖尿病的普通技术医师将理解用于治疗糖尿病患者的胰岛素的浓度范围可根据例如所治疗的患者是否为患有1型糖尿病的儿童或患有强胰岛素耐受性2型糖尿病的成人而不同。治疗糖尿病的普通技术医师还可以选择对施予本发明制剂治疗最有利的方法。

在一个实施方案中，制剂可肠胃外给药，其中肠胃外给药的一般途径为皮下和肌内。在另一实施方案中，制剂可肠胃外给药，其中途径为皮下的。

在另一实施方案中，制剂可通过鼻、颊、肺或眼的途径给药。在另一实施方案中，制剂可通过鼻的途径给药。在另一实施方案中，制剂可通过肺的途径给药。

在一个实施方案中本发明的制剂与胰岛素泵联合使用。胰岛素泵可以是预装填的和一次性的，或者可从可移动的贮存器提供胰岛素制剂。胰岛素泵可以是皮肤-固定的或携带的，并且胰岛素制剂从泵贮存室至患者的途径可以是有点儿弯曲的。胰岛素泵的非-限制性实例在US5,957,895、US5,858,001、US4,468,221、US4,468，221、US5,957,895、US5,858,001、US6,074,369、US5,858,001、US5,527,288和US6,074,369中公开。

在另一实施方案中本发明的制剂与笔-式注射装置结合使用，其可以是预装填的和一次性的，或者可从可移动的贮存器提供胰岛素制剂。笔-式注射装置的非-限制性实例为

InDuo^TM、

在进一步的实施方案中，本发明的制剂与用于胰岛素水溶液制剂肺给药的装置结合使用，其非-限制性实例为

装置。

本发明进一步涉及治疗患者的方法，其中本发明的药物制剂与另一种治疗形式结合使用。

本发明的一个方面中，患者用本发明药物制剂的疗法与饮食和/或锻炼结合。

本发明的另一个方面中本发明的药物制剂与一种或多种另外的活性物质以任何合适的比例联合给药，其中与本发明的药物制剂和一种或多种另外的活性物质结合使用的“结合”指一种或多种另外的活性物质可以包括在本发明的制剂内或其可包含于来自本发明制剂的一种或多种分离制剂中。所述另外的活性物质可例如选自抗肥胖病药、抗糖尿病药、抗高血压药、用于由糖尿病引起或与糖尿病有关的并发症治疗的药剂以及用于由肥胖引起或与肥胖有关的并发症和病症治疗的药剂。

因此，在本发明进一步的方面中本发明的药物制剂可以与一种或多种抗肥胖病药或食欲调节剂联合给药。

所述药剂可以选自CART(可卡因苯丙胺调节的转录物)激动剂，NPY(神经肽Y)拮抗剂，MC4(变黑皮质素4)激动剂，MC3(变黑皮质素3)激动剂，orexin拮抗剂，TNF(肿瘤坏死因子)激动剂，CRF(促肾上腺皮质激素释放因子)激动剂，CRF BP(促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白)拮抗剂，urocortin激动剂，β3肾上腺素能激动剂如CL-316243，AJ-9677，GW-0604，LY362884，LY377267或AZ-40140，MSH(促黑素细胞激素)激动剂，MCH(黑素细胞-浓缩激素)拮抗剂，CCK(缩胆囊素)激动剂，5-羟色胺再摄取抑制剂如氟西汀，帕罗西汀或西酞普兰，5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂，混合的5-羟色胺和noradrenergic化合物，5HT(5-羟色胺)激动剂，铃蟾肽激动剂，促生长激素神经肽(galanin)拮抗剂，生长激素，生长因子如催乳素或胎盘催乳激素，生长激素释放化合物，TRH(促甲状腺激素释放激素)激动剂，UCP2或3(解偶联蛋白2或3)调节剂，勒帕茄碱(leptin)激动剂，DA激动剂(溴隐亭(bromocriptin，doprexin)，脂肪酶/淀粉酶抑制剂，PPAR(过氧物酶体增生剂-活化受体)调节剂，RXR(类视色素X受体)调节剂，TRβ激动剂，AGRP(Agouti相关蛋白质)抑制剂，H3组胺拮抗剂，阿片样物质拮抗剂(如纳曲酮，exendin-4，GLP-1，g1p-1类似物或衍生物和睫状神经营养因子。

在本发明的一个实施方案中，抗肥胖症剂是leptin。

在另一个实施方案中该抗肥胖症剂是右旋苯丙胺或苯丙胺。

在另一个实施方案中抗肥胖症剂是芬氟拉明或右芬氟拉明。

在再一个实施方案中抗肥胖症剂是西布曲明。

在又一个实施方案中该抗肥胖症剂是奥利司他(orlistat)。

在另一个实施方案中抗肥胖症剂是马吲哚或苯丁胺。

在再一个实施方案中该抗肥胖症剂是苯甲曲秦，安非拉酮，氟西汀，安非他酮，托吡酯或ecopipam。

口服活性的降血糖剂优选包括咪唑啉、磺酰脲、双胍、氯茴苯酸(meglitinides)、噁二唑烷二酮、噻唑烷二酮、胰岛素敏化剂、胰岛素促分泌剂如格列美脲、α-葡萄糖苷酶抑制剂、作用于β-细胞ATP依赖性钾通道的活性剂例如钾通道打开剂，如在W097/26265、WO99/03861和WO00/37474(Novo NordiskA/S)中公开的那些，这些文献引入本发明以作参考，或mitiglinide或钾通道阻断剂例如BTS-67582、那格列奈(nateglinide)、胰高血糖素拮抗剂如WO99/01423和WO00/39088(Novo NordiskA/S和AgouronPharmaceuticals，Inc.)中公开的，其在此通过引用引入、GLP-1激动剂如WO00/42026(Novo NordiskA/S和Agouron Pharmaceuticals，Inc.)中公开的那些，其在此通过引用引入，DPP-IV(二肽基肽酶-IV)抑制剂、PTP酶(蛋白质酪氨酸磷酸酶)抑制剂、涉及刺激糖异生和/或糖原分解的肝脏酶的抑制剂、葡萄糖摄取调节剂、GSK-3(糖原合酶激酶-3)抑制剂，调节脂质代谢的化合物例如抗脂血症剂，降低食物摄取的化合物，PPAR(过氧化物酶体增殖子激活受体)和RXR(类维生素A X受体)激动剂例如ALRT-268、LG-1268或LG-1069。

在本发明另一个实施方案中，本发明的药物制剂与磺酰脲例如甲苯磺丁脲、氯磺丙脲、甲磺吖庚脲、格列本脲、格列甲嗪、格列美脲、格列卡胺或优降糖联合给药。

在本发明另一个实施方案中，本发明的药物制剂与双胍例如二甲双胍联合给药。

在本发明又一个实施方案中，本发明的药物制剂与美格列奈类药物(meglitinide)例如瑞格列奈或纳格列奈联合给药。

在本发明再一个实施方案中，本发明的药物制剂与噻唑烷二酮类胰岛素敏化剂例如曲格列酮、环格列酮、吡格列酮、罗格列酮、isaglitazone、达格列酮、恩格列酮、CS-011/CI-1037或T174，或在WO97/41097、WO97/41119、WO97/41120、WO00/41121和WO98/45292(Dr.Reddy’s Research Foundation)中公开的化合物联合给药，其在此通过引用引入。

在本发明又一个实施方案中，本发明的药物制剂与胰岛素敏化剂例如GI262570、YM-440、MCC-555、JTT-501、AR-H039242、KRP-297、GW-409544、CRE-16336、AR-H049020、LY510929、MBX-102、CLX-0940、GW-501516或在WO99/19313、WO00/50414、WO00/63191、WO00/63192、WO00/63193(Dr.Reddy’s Research Foundation)和WO00/23425、WO00/23415、WO00/23451、WO00/23445、WO00/23417、WO00/23416、WO00/63153、WO00/63196、WO00/63209、WO00/63190和WO00/63189(Novo NordiskA/S)中公开的化合物联合给药，其在此通过引用引入。

在本发明另外的实施方案中，本发明的药物制剂与α-葡萄糖苷酶抑制剂例如伏格列波糖、乙格列酯、米格列醇或阿卡波糖联合给药。

在本发明另一实施方案中本发明的药物制剂与作用于β-细胞ATP-依赖性钾通道的活性剂例如甲苯磺丁脲、格列本脲、格列吡嗪、格列齐特、BTS-67582、瑞格列奈联合给药。

本发明又一个实施方案中本发明的药物制剂与纳格列奈联合给药。

在本发明再一个实施方案中，本发明的药物制剂与抗脂血症剂例如考来烯胺、考来替泊、氯贝特、吉非贝齐、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、丙丁酚(probucol)或右旋甲状腺素(dextrothyroxine)联合给药。

本发明的另一个方面中，本发明的药物制剂与一种以上的上述化合物联合给药，例如与二甲双胍和磺酰脲如优降糖；磺酰脲和阿卡波糖；纳格列奈和二甲双胍；阿卡波糖和二甲双胍；磺酰脲、二甲双胍和曲格列酮；二甲双胍和磺酰脲等等联合给药。

此外，本发明的药物制剂可以与一种或多种抗高血压药联合给药。抗高血压药实例有β-阻断剂，例如阿普洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔(timolol)、吲哚洛尔(pindolol)、普萘洛尔(propranolol)和美托洛尔(metoprolol)，ACE(血管紧张素转化酶)抑制剂例如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、喹那普利和雷米普利，钙通道阻断剂例如硝苯地平、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地尔硫革和维拉帕米，以及α-阻断剂例如多沙唑嗪、乌拉地尔、哌唑嗪和特拉唑嗪。本发明的药物制剂也可与NEP抑制剂如坎沙曲(candoxatril)联合。

其它参考文献可参见Remington：The Science and Practice ofPharmacy，19^th版，Gennaro，Ed.，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1995。

应当理解本发明化合物与饮食和/或锻炼、一种或多种上述化合物以及任选一种或多种其它活性物质的任意合适组合都在本发明范围内。

在此引用的所有科技出版物和专利明确引入作为参考。下列实施例举例说明了本发明的各个方面但决不试图限制本发明的范围。

实施例

实施例1

含精蛋白乙酸盐的胰岛素制剂的化学稳定性

通过37℃14天后脱酰胺产物(B3Asp，B3isoAsp，A21Asp)和疏水产物(主要为共价聚集体)与开始相比(37℃14天可与4℃2年相比)含量增加(总胰岛素含量的百分比)的测量评估无(图1A0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，pH＝3.5，4.7和7.4)或有(图1B0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.6mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0和pH＝5.5)精蛋白乙酸盐的人胰岛素制剂在不同pH的化学稳定性。通过在KromasilC4柱上，150×4.6mm ID，5微米粒径，在35℃以1ml/分钟洗脱的反相HPLC分析制剂。单体胰岛素化合物用pH3.4的磷酸盐缓冲液(包含硫酸钠和大约30％(v/v)的乙腈)等度洗脱，随后为提高乙腈浓度的梯度步骤，用于更疏水化合物的洗脱。

实施例2

含精蛋白乙酸盐的胰岛素制剂的平衡溶解度

对于pH-溶解度特征，制备包含0.0-0.6mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油和0.7mM精蛋白-硫酸盐或0.0-2.0mM精蛋白-乙酸盐的0.6mM人胰岛素原液并且调节pH至对应于pH-溶解度特征的碱性边界点的期望值。由此原液取出样品，pH调节至pH3-8范围的期望值，并且0.3ml样品在23℃温育至少4天。每种样品离心后(23℃20,000g20分钟)，测量pH并且通过与实施例1中所述相似的SEC HPLC分析对上清中胰岛素含量定量从而确定溶解度。

不同浓度的精蛋白盐和锌对各种胰岛素制剂中胰岛素溶解度的pH-依赖性的作用呈现在图2A-2C中。

图2A显示了包含0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油和0.7mM精蛋白-硫酸盐或0.7-2.0mM精蛋白-乙酸盐的各种人胰岛素制剂的pH-依赖性。图2B显示了包含0.6mM人胰岛素，30mM苯酚，1.6％甘油、1.2mM精蛋白-硫酸盐和0.3-0.6mM Zn²⁺的各种人胰岛素制剂的pH-依赖性。图2C显示了包含0.6mM人胰岛素，30mM苯酚，1.6％甘油、2.0mM精蛋白-硫酸盐和0.0-0.6mM Zn²⁺的各种人胰岛素制剂的pH-依赖性。图2A-2C中，人胰岛素参照为0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油。

实施例3

猪中含胰岛素的制剂的检验

对驯养的雌性猪，LYD杂交种，称重在55和110kg之间，利用下列胰岛素制剂进行药效(PD)研究：

1)0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0；

2)0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0；

3)0.6mM人胰岛素，0.6mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0；和

4)0.6mM人胰岛素，0.6mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0。

猪在研究开始的至少2天前通过耳静脉将导管插入颈静脉。胰岛素制剂注射的大约18小时之前研究开始前给动物最后进餐，并且该动物在整个禁食期间和检验期间自由进水。

0小时时将胰岛素制剂以0.2单位胰岛素/kg在颈外侧皮下给予。将血样以固定的时间间隔从导管取出并且加样于预涂有肝素的1.5ml玻璃试管。血样保持在冰水中直至血浆通过在4℃3000rpm离心10分钟而分离，其在第一个30分钟内完成。将血浆样品在4℃短时间(2-3小时)存储或在-18℃长期存储并且在COBAS MIRA上分析葡萄糖。血液中葡萄糖起始水平的测定在注射之前1时间，半小时，20分钟和马上采取的4个样品上进行。

图3显示了下列人胰岛素制剂在0小时的皮下注射后血浆葡萄糖水平的变化(基线％)(N只猪的平均值+/-SEM)：0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)，和0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)。

图4显示了下列人胰岛素制剂在0小时的皮下注射后血浆葡萄糖水平的变化(基线％)(N只猪的平均值+/-SEM)：0.6mM人胰岛素，0.6mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，1.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)，和0.6mM人胰岛素，0.6mMZn²⁺，30mM苯酚，1.6％甘油，2.0mM精蛋白-乙酸盐，pH＝5.0(N＝6)。

实施例4

检测商品化销售的胰岛素在精蛋白乙酸盐存在时溶解度相对于 DH的特征

图5-9显示了商品化销售的胰岛素(人胰岛素，B28D人胰岛素(Aspart)，B28K，B29P人胰岛素(LysPro)和B3K，B29E人胰岛素(Glulisine)在1.6mM精蛋白乙酸盐存在时的溶解度。每个图中呈现无精蛋白盐的人胰岛素的对照曲线，表明pH～4.5和～6.5之间pH范围中人胰岛素的沉淀带。图5-9的数据表明精蛋白乙酸盐以所检测胰岛素的最大程度溶解人胰岛素(图5)和LysPro胰岛素(图7)。

实施例5

检测人胰岛素在15种不同的精蛋白盐存在时溶解度相对于pH的特征

图10-12显示人胰岛素在不同的精蛋白盐存在时的溶解度。每个图中呈现无精蛋白盐的人胰岛素的对照曲线，表明pH～4.5和～6.5之间pH范围中人胰岛素的沉淀带。

已检测的盐，丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐、硝酸盐和乙酸盐在～4.5至～6.0的pH范围中产生最佳的人胰岛素溶解度。

实施例6

在不同pH下贮藏温度和时间对人胰岛素各个制剂溶解度的作用

图13-17表明提高贮藏温度使其中观察到胰岛素制剂溶解度的pH值范围变窄，但在更高温度时观察到的胰岛素的任何沉淀可通过降低制剂存储的温度而反转。

实施例7

人胰岛素制剂的葡萄糖利用

利用Kurtzhals&Ribel，Diabetes44，1381-1385，(1995)中所述的猪钳模式鉴定本发明胰岛素制剂皮下注射后的葡萄糖利用效果。

图18比较了在猪中用NPH胰岛素制剂或0.6mM人胰岛素，1.0mM精蛋白乙酸盐，30mM苯酚，1.6％甘油，pH＝5.0的制剂皮下注射后的葡萄糖利用并且表明在注射后一制剂时观察到提高的葡萄糖利用。

实施例8

通过硫酸钡沉淀制备精蛋白乙酸盐

通过在加热至60℃的1升蒸馏水中搅拌而溶解10克精蛋白硫酸盐。随后于此溶解4.8克乙酸钡并且得到的悬浮液在4℃用温和的搅拌保持16小时。悬浮液在4℃6000rpm离心20分钟并且通过0.22μm过滤器滤出上清液且冻干。产量：9.3克精蛋白乙酸盐。

实施例9

通过阴离子交换制备精蛋白乙酸盐

通过在加热至60℃的1升蒸馏水中搅拌而溶解10克精蛋白硫酸盐并且冷却至室温。组装并且用120ml蒸馏水冲洗AG1×8阴离子树脂交换器(100-200网孔，乙酸盐形式(Inc.，cat.no.140-1443)的1.6x20cm柱。随后使精蛋白硫酸盐溶液以每小时60ml的流量流过柱并且收集洗脱液。最后柱用100ml蒸馏水洗脱并且使收集的洗脱液滤过0.22μm过滤器且冻干。产量：9.4克精蛋白乙酸盐。

本领域普通技术人员可理解实施例8和9中所述的方法可用于通过利用合适的钡盐(实施例8)或阴离子交换树脂形式(实施例9)而将精蛋白硫酸盐转变成所选的任何盐形式。

实施例10

检测B28D胰岛素在更高浓度的精蛋白盐存在时溶解度相对于pH 的特征。

数据表明B28D胰岛素通过精蛋白乙酸盐在上至～5.3的pH范围中以高于在同样的pH范围中溶解人胰岛素或B28K，B29P胰岛素所需浓度的精蛋白乙酸盐浓度而溶解。

图19中制剂的组成为1.3mM B28D胰岛素，25mM间甲酚，1.6％甘油，40ppm

20，1.6-2.4-4.0mM浓度的精蛋白乙酸盐。B28D胰岛素参照为0.6mM B28D胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚。

图20中制剂的组成为0.6mM B28D胰岛素，30mM苯酚，1.6％甘油，40ppm，1.6mM精蛋白乙酸盐和0.6mMB28D胰岛素，25mM间甲酚，1.6％甘油，40ppm

实施例11

检测0.4/0.8/1.3mM人胰岛素在不同浓度的精蛋白乙酸盐存在时溶解度相对于pH的特征。

图21-23显示在不同浓度的精蛋白乙酸盐存在时三种不同浓度人胰岛素的溶解度。将样品在37℃温育14天后测量溶解度。

图21-23中制剂的组成为0.4-0.8-1.3mM人胰岛素，25mM间甲酚，1.6％甘油，40ppm20，指定的人胰岛素对精蛋白乙酸盐浓度的比率。

数据表明在介于～4.5和～6.0间的pH中溶解人胰岛素所需的精蛋白乙酸盐对人胰岛素的相对浓度取决于人胰岛素的绝对浓度。

实施例12

检测在夹自不同物种的精蛋白盐存在时人胰岛素溶解度相对于 pH的特征。

图24显示在1.0mM和2.0mM浓度的来自三种不同物种的精蛋白乙酸盐存在时人胰岛素的溶解度。

图24中制剂的组成为0.6mM人胰岛素，25mM间甲酚，1.6％甘油，1.0mM和2.0mM浓度的精蛋白乙酸盐。人胰岛素参照为0.6mM人胰岛素，0.3mM Zn²⁺，30mM苯酚。

数据表明除了源自鲑鱼的精蛋白的乙酸盐，源自虹鳟的精蛋白的乙酸盐(鲑精蛋白)，鲔鱼(鲔精蛋白)和大西洋鲱(鲱精蛋白)在介于～4.5和～6.0间的pH也溶解人胰岛素。

本发明某些方面的示例性实施方案和非-限制性描述

实施方案1.药物制剂，其为包含胰岛素，胰岛素类似物或胰岛素衍生物或其混合物以及精蛋白盐的溶液，其中所述精蛋白盐以大于0.25mM的浓度存在于所述制剂中并且其中所述制剂具有小于约7.0的pH。

实施方案2.根据实施方案1的制剂，其中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至约100。

实施方案3.根据实施方案1的制剂，其中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至约10。

实施方案4.根据实施方案1的制剂，其中精蛋白盐对胰岛素的摩尔比为约0.5至5。

实施方案5.根据实施方案1的制剂，其中所述制剂的pH为约4.0至约7。

实施方案6.根据实施方案1的制剂，其中所述制剂的pH为约4.0至约6.5。

实施方案7.根据实施方案1的制剂，其中所述制剂的pH为约4.5至约6.0。

实施方案8.根据实施方案1的制剂，进一步包含防腐剂。

实施方案9.根据实施方案1的制剂，进一步包含等渗剂。

实施方案10.根据实施方案1的制剂，进一步包含二价金属离子。

实施方案11.根据实施方案10的制剂，其中二价金属离子为锌。

实施方案12.根据实施方案1的制剂，进一步包含表面活性剂。

实施方案13.根据实施方案1的制剂，其中所述胰岛素为人胰岛素。

实施方案14.根据实施方案1的制剂，其中所述胰岛素为人胰岛素类似物。

实施方案15.根据实施方案1的制剂，其中所述胰岛素为人胰岛素衍生物。

实施方案16.治疗1型或2型糖尿病的方法，所述方法包括将有效量的实施方案1制剂给予需要此治疗的患者。

实施方案17.根据实施方案1的制剂，其中精蛋白盐选自精蛋白的丙酸盐、乳酸盐、甲酸盐、硝酸盐和乙酸盐。

实施方案18.根据实施方案17的制剂，其中精蛋白盐为精蛋白乙酸盐。

实施方案19.根据实施方案17的制剂，其中胰岛素为人胰岛素。

实施方案20.根据实施方案17的制剂，进一步包含二价金属离子。

实施方案21.根据实施方案17的制剂，进一步包含防腐剂。

实施方案22.根据实施方案17的制剂，进一步包含等渗剂。

实施方案23.根据实施方案17的制剂，进一步包含表面活性剂。

实施方案24.根据实施方案1的制剂，其中所述制剂在小于约7.0的pH为可溶的。

实施方案25.治疗1型或2型糖尿病的方法，所述方法包括将治疗有效量的实施方案17的制剂给予需要的治疗的患者。

实施方案26.任何实施方案1-15，17-24的制剂在用于制备治疗1型或2型糖尿病制剂中的用途。

Claims

1.药物制剂，其为包含人胰岛素以及精蛋白乙酸盐的溶液，其中所述精蛋白乙酸盐以大于0.25mM的浓度存在于所述制剂中并且其中所述制剂为pH为4.5至6.0。

2.根据权利要求1的制剂，其中精蛋白乙酸盐对胰岛素的摩尔比为0.5至100。

3.根据权利要求2的制剂，其中精蛋白乙酸盐对胰岛素的摩尔比为0.5至10。

4.根据权利要求3的制剂，其中精蛋白乙酸盐对胰岛素的摩尔比为0.5至5。

5.根据权利要求1-4任一项的制剂，进一步包含防腐剂。

6.根据权利要求5的制剂，其中防腐剂为间甲酚。

7.根据权利要求1-4任一项的制剂，进一步包含等渗剂。

8.根据权利要求7的制剂，其中等渗剂为甘油。

9.根据权利要求1-4任一项的制剂，进一步包含二价金属离子。

10.根据权利要求9的制剂，其中二价金属离子为锌。

11.根据权利要求1-4任一项的制剂，进一步包含表面活性剂。

12.根据权利要求11的制剂，其中表面活性剂为TWEEN20。