CZ293076B6

CZ293076B6 - Polosyntetické taxany, způsob jejich výroby, farmaceutické prostředky s jejich obsahem a meziprodukty pro jejich výrobu

Info

Publication number: CZ293076B6
Application number: CZ1997199A
Authority: CZ
Inventors: Ezio Bombardelli; Bellis Paolo De; Bruno Gabetta
Original assignee: Indena S. P. A.
Priority date: 1994-07-26
Filing date: 1995-07-21
Publication date: 2004-02-18
Also published as: BG62851B1; KR100220490B1; NO315116B1; CA2195844A1; HU222496B1; CN1073105C; HUT76829A; CN1308073A; CN1128795C; AU684218B2; EP0773938B1; ES2126919T3; RO115875B1; RO116549B1; RU2134688C1; PL187579B1; CA2195844C; JP2986550B2; SI9520078A; CN1120161C

Abstract

Vynález se týká nových derivátů, získaných oxidací a stereospecifickou redukcí 10-deacetylbaccatinu III, po nichž následuje esterifikace různě substituovaným izoserinovým řetězcem k přípravě taxolových analogů. Produkty podle vynálezu mají cytotoxické a protinádorové účinky a pokud jsou vhodně upraveny, mohou být podávány injekčně nebo perorálně.ŕ

Description

Polosyntetické taxany, způsob jejich výroby, farmaceutické prostředky s jejich obsahem a meziprodukty pro jejich výrobu

Oblast techniky

Vynález se týká nových derivátů, získaných oxidací a stereospecifickou redukcí 10-deacetylbaccatinu III a následnou esterifikací různě substituovaným řetězcem izoserinu k přípravě taxolových analogů. Látky podle vynálezu mají cytotoxický a protinádorový účinek.

Dosavadní stav techniky

O diterpenech se strukturou taxanů, a zejména taxolu, je známo, že vykazují protinádorové působení vůči mnoha lidským nádorům. Ovšem použití těchto léků (drog) a zvláště taxolu má i některé nevýhody, a to nežádoucí vedlejší účinky. Z tohoto důvodu, a také vzhledem k rychlému indukování odolnosti při podobné protinádorové léčbě, je žádoucí vyvinutí nových molekul, které by zmírnily obtíže, pozorované při klinickém použití.

WO 93/02067 (Nippon Steel) ze 4. 2. 1993 předkládá například 10-alfa-acetyltaxol, extrahovaný z tkáňové kultury bílkoviny rodu Taxus, mající výraznou cytotoxickou aktivitu.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se týká nových derivátů staxanovou kostrou, získaných polosynteticky a vykazujících silný protinádorový účinek.

Deriváty podle vynálezu mohou být rozděleny do dvou skupin:

a) Taxanové deriváty, obsahující dvojitou olefmovou vazbu v polohách 11, 12 a hydroxynebo acyloxyskupinu v poloze 10a (taxany o vzorci la

(la) (R₃ = H; R» = OH či acyloxyskupina, Ph = fenyl, Ac = acetyl)

b) taxanové deriváty, obsahující jednoduchou vazbu mezi uhlíkovými atomy v poloze 11 a 12, methylovou skupinu v poloze 12 v orientaci a, a hydroxy- či acyloxyskupinu, s výhodou acetoxyskupinu, poloze β (taxany o vzorci 1b)

(lb) (R₃ = OH či acyloxy-, s výhodou pak acetoxyskupina; R4 = H, Ph = fenyl, Ac = acetyl)

U taxanů obecného vzorce la a lb jsou Ri a R₂, buď stejné, nebo odlišné, a značí arylovou (s výhodou fenylovou) skupinu. R₂ může být také terciární butoxyskupinou.

U sloučenin o vzorci la R₃ je vodík a R» je hydroxylová skupina nebo C₂-C₈ acyloxyskupina.

U sloučenin o vzorci lb je R₃ hydroxylová skupina nebo C₂-C₈ acyloxyskupina, svýhodou acetoxyskupina, a R4 je vodík.

Taxany o vzorci la a lb jsou vyráběny esterifikací polohy 13 nových syntonů o vzorci 2 za použití vhodně aktivovaných izoserinových řetězců acylačních činidel, a to podle popisu v literatuře pro polosyntézu taxolů a jejich analogů (viz např. EP-A-400971. 1992, Fr. Dem. 86, 10400; E. Didier se spol., Tetrahedron Letters 35. 2349, 1994, E. Didier se spol., Tetrahedron Letters 35. 3063, 1994).

(2), platí pokud je přítomna dvojná olefinová vazba v poloze 11,12, je R₃ vodíkový atom a R4 a R₅ jsou hydroxylové skupiny, Cr-C₈ acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny; a

-2CZ 293076 B6 pokud není přítomna dvojná olefínová vazba v poloze 11, 12, má methyl v poloze 12 orientaci a, R4 je atom vodíku a R3 a R4 jsou hydroxylové skupiny, C₂-C_g acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny.

Konkrétně syntony o vzorci 2a jsou používány pro syntézu nových taxanů o vzorci la. Na druhou stranu, syntony o vzorci 2b jsou používány pro syntézu nových taxanů o vzorci lb.

(2a)

U syntonů 2a je dvojná olefínová vazba přítomna v poloze 11, 12 a Cr-Cg axcyloxyskupina anebo volitelně chráněná hydroxyskupina jsou přítomné v poloze 10a. U syntonů 2a je tedy R₃ vodík a R4 a R₅ jsou hydroxyskupiny, acyloxyskupiny, alkylsilyioxyskupiny (jako triethylsilyloxyskupina, O-TES) nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny (O-CO-O-CH2CCI3, O-TROC).

(2b)

U syntonů 2b jsou uhlíkové atomy v polohách 11 a 12 vázány jednoduchou vazbou, methyl v poloze 12 má orientaci a, a acyloxyskupina nebo volitelně chráněná hydroxyskupina jsou přítomné v poloze 10a. U syntonů 2b je tedy R4 vodík a R3 a R₅ jsou hydroxyskupiny, acyloxyskupiny, alkylsilyioxyskupiny (jako triethylsilyloxyskupina, O-TES) nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny (O-CO-O-CH2CCI3, O-TROC).

Po esterifikaci syntonů 2 v poloze 13 izoserinovým řetězcem jsou k získání nových taxanů o vzorci 1 chránící skupiny odstraněny běžnými metodami, známými z literatury.

-3CZ 293076 B6

10-deacetylbaccatin III 3, který lze izolovat z listů Taxus Baccata (G. Chauvičre se spol., C.R. Acad. Sc. Ser. III, 293. 591. 1981), je používán jako výhradní výchozí produkt pro výrobu syntonů 2a a 2b.

Syntony o vzorci 2a, které nejsou z literatury známé, jsou získávány (viz Schéma 1) z látky 3 oxidací octanem měďnatým v poloze 10 za vzniku diketonu o vzorci 4 a následnou redukcí borohydridem sodným v přítomnosti ceritých solí.

Výsledný produkt (2a, R₃ - H, R4 = R₅ = OH), který je epimerem v poloze 10 látky 3, je vhodně 10 chráněn v polohách 7 a 10 a použit k synteze taxanů la.

Schéma 1

Jako vedlejší produkt reakčního kroku, znázorněného na schématu 1, je získán nový sekotaxan 5

-4CZ 293076 B6 (5)

Sekotaxan 5 může být použit pro syntézu dalších taxanů s možnou protinádorovou aktivitou.

Předkládaný vynález se rovněž týká nových derivátů se sekotaxanovou kostrou, připravovaných 5 polosynteticky a majících silnou protinádorovou aktivitu, takové deriváty mají vzorec lc

kde:

Ri a R₂, stejné nebo odlišné, jsou Ci-C₂₀ alkylové nebo arylové (s výhodou fenylové) skupiny. R₂ío může být také terciární butoxyskupina.

Taxany o vzorci lc jsou připravovány esterifikací sloučeniny 5 v poloze 13, za použití vhodně aktivovaných izoserinových řetězců jako acylačních činidel, jak je popsáno v literatuře, zabývající se polosyntézou taxolu a jeho analogů (viz např. EP-A-400971; E. Didier se spol., 15 Tetrahedron Letters 35, 2349,1994; E. Didier se spol., Tetrahedron Letters 35, 3063,1994).

Hydroxyskupiny sloučeniny 5 mohou být volitelně chráněny vhodnými chránícími skupinami podle běžných metod.

Po esterifikací sloučeniny 5 v poloze 13 izoserinovým řetězcem jsou k získání sekotaxanů 20 o vzorci lc chránící skupiny odstraněny obvyklými postupy, známými z literatury.

Syntony o vzorci 2b, které nejsou z literatury známé, se rovněž získávají z 10-deacetylbaccatinu III3, viz schéma 2. Bylo zjištěno, že oxidací látky 3 kyselinou m-chloroperbenzoovou (MCPBA) se získá odpovídající 13-ketoderivát6. Po ochraně hydroxylu v poloze 7 triethylsilyl25 chloridem (TESCI) poskytuje látkaó při redukci borohydridem sodným v přítomnosti ceritých

-5CZ 293076 B6 solí synton 2b (R₃ = OH, Rt = H, R₅ = O-TES), který může být vhodný pro syntézu taxanů o vzorci (lb). Orientace a methylu v poloze 12 u syntonů 2b byla vyvozena na základě důkladných studií za použití nukleární magnetické resonance.

Schéma 2

/CeCl

MCPBA

2b (RýOH, R₄»H, R_s=O'TES)

Produkty podle tohoto vynálezu byly testovány vzhledem kjejich cytotoxickému působení na různé nádorové buněčné linie a jejich účinek byl srovnáván a taxolem. tabulkal ukazuje hodnoty 10 IC₅₀, ve srovnání se stejným údajem pro taxol, sloučenin 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-Zbutoxykarbonylaminopropanoyl]-10-epi-10-deacetylbaccatinu III (la, R, = Ph, R₂ = tBuO, R₃ = H, R4 = OH), 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-r-butoxykarbonylaminopropanoyl]-10~ deacetyl-ll,12-dihydrobaccatinu III (lb, Ri = Ph, R₂ = tBuO, R₃ = OH, R4 = H), 13-[(2R,3S)3-fenyl-2-hydroxy-3-t-butoxykarbonylaminopropanoyl]-C-seko-10-deacetylbaccatinu III 15 (lc, R|=Ph, R₂ = tBuO) a 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3-kaproylaminopropanoyl]-Cseko-10-deacetylbaccatinu (lc, R_t = izobutyl, R₂ = pentyl).

-6CZ 293076 B6

Tabulka 1: IC₅o taxanů la (R| = Ph, R₂ = tBuO, R₃ = H, Rj = OH), b (Ri = Ph, R₂ = tBuO, R₃ = OH, Rf = H), a taxolu, měřeno u 6 buněčných linií

buněčná linie	doba expozice (h)	taxol	la(Ri=Ph, R₂=tBuO, R₃=H, R4=OH)	lb(R,=Ph, R₂=tBuO, R₃=OH, R4=H)
LI210 (myší leukémie)	48	57,0 ±3,0	46,0 + 2,1	32,0 ±0,1
A121 (lidské ovarium)	72	3,7 ± 0,3	2,8 ±0,3	1,6 ±0,2
A549 (lidské NSCLC)	72	5,4 ± 0,5	6,9 ± 0,3	2,1 ±0,3
HT-29 (lidské střevo)	72	6,0 ± 0,6	3,4 ±0,1	3,6 ± 0,4
HCF7 (lidský prs)	72	4,3 ± 0,1	2,2 ± 0,2	0,8 ± 0,2
HCF7-ADR (odolné)	72	395,0 ± 8,7	130,0 ±2,2	128,0 ±6,2

NSCLC = buňky plicního karcinomu, odlišného od „karcinomu malých buněk“ (non-small-cell lung cancer)

Standardní podmínky: substrát RPMI 1640 (suspenzní médium pro imunofenotypové druhy buněk firmy Sigma) + 20 mM HEPES (kyselina N-[2-hydroxyethyl]piperazin-N'-[2-ethansulfonová) + 2 mM L-glutamin

Tabulka 1: IC₅o taxanů lc (Ri = Ph, R₂ = tBuO), lc (Ri = izobutyl, R₂ = pentyl), a taxolu, měřeno u 6 buněčných linií

buněčná linie	doba expozice (h)	taxol	lc(R]=Ph, R₂=tBuO)	lc (Ri=izobutyl, R₂=pentyl)
L1210 (myší leukémie)	48	57,0 ± 3,0	35,0 ± 1,2	26,0 ± 1,3
A121 (lidské ovarium)	72	3,7 ± 0,3	1,9 ±0,2	1,3 ±0,1
A549 (lidské NSCLC)	72	5,4 ±0,5	3,3 ± 0,4	2,6 ± 0,3
HT-29 (lidské střevo)	72	6,0 ± 0,6	3,2 ± 0,3	2,7 ± 0,2
HCF7 (lidský prs)	72	4,3 ±0,1	1,5 ±0,2	1,1 ±0,2
HCF7-ADR (odolné)	72	395,0 ± 8,7	31,3 ±4,2	25,4 ± 3,7

Standardní podmínky: substrát RPMI 1640 + 20 mM HEPES + 2 mM L-glutamin

Sloučeniny s různými substituenty v řetězci izoserinu se chovají podobně. Sloučeniny vykazují překvapivé výhody ve srovnané s taxolem v působení na buněčné linie, odolné vůči jiným protinádorově působícím látkám, jako je adriamycin a cis-platina. Rozdíly mezi taxolem a těmito produkty jsou ještě zřejmější u modelů in vivo, jako jsou atymické nahé myši s implantovaným lidským tumorem.

Sloučeniny podle vynálezu se hodí pro začlenění do vhodných farmaceutických prostředků pro parenterální a perorální podávání. Pro intravenosní podávání se hlavně používají směsi polyethoxylovaného ricínového oleje a ethanolu, nebo liposomální přípravky, připravené s přírodním fosfatidylcholinem, či směsi přírodních fosfolipidů v přítomnosti cholesterolu.

Níže uvedené příklady dále dokreslují vynález.

-7CZ 293076 B6

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava 10-dehydro-10-deacetylbaccatinu III 4 g 10-deacetylbaccatinu III3 bylo suspendováno v 350 ml methanolu, do něhož bylo přidáno 65 g Cu(OAc)₂. Suspenze byla nepřetržitě míchána 120 hodin při laboratorní teplotě. Sole byly odfiltrovány a roztok byl chromatografován na 100 g silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu (6:4). Krystalizaci z ligroinu bylo získáno 9,5 g látky (4), M⁺ při m/z 542.

Příklad 2

Příprava 10-deacetyl-lO-epibaccatinu III (2a, R₃ = H, R4 = R₅ = OH) a C-seko-10-deacetylbaccatinu III 5

Roztok 300 mg látky (4) v 5 ml methanolu byl doplněn jedním ekvivalentem CeCl₃.3H₂O, míchán 5 minut při laboratorní teplotě a poté doplněn 80 mg NaBH₄. Roztok byl ovlivněn roztokem NH₄C1, extrahován ethylacetátem a chromatografován na silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu (3:7). Získáno bylo 98 mg látky 2a (M⁺při m/z 544) a 120 mg látky 5 (NT při m/z 546).

10-deacetyl-10-epibaccatin III měl následující ’Η-NMR spektrum (CDC1³): H2, d 5,68 J 6,8; H3, d 4,26 J 6,8; H5, d 5,03 J 7,1; H7/13, m 4,76; H10, br s 5,20; 10 OH, Br s 3,44; H 16, s 1,14; H17, s 1,68; H18, s2,22; H19, s 1,13; H20a, d4,33; H20b, d 4,18; Ac, s2,31; Bnz, br8,12 J8, br 17,60 J 8, br 117,49 J 8.

Příklad 3

Příprava 10-deacetyl-13-dehydrobaccatinu III 6

K suspenzi lg 10-deacetylbaccatinu III3 ve 100 ml CH₂C1₂ byly přidány 3g kyseliny meta-chlorperbanzoová a 1 g acetátu sodného. Suspenze byla nepřetržitě míchána 120 hodin při laboraomí teplotě a pak byla naředěna roztokem uhličitanu sodného. Organická fáze byla promyta 5% vodným roztokem uhličitanu sodného a vysušena do sucha. Zbytek byl vyčištěn na silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu (3:7). Získáno bylo 789 mg látky 6, M⁺při m/z 542.

Příklad 4

Příprava 10-deacetyl-l l,12-dihydro-7-triethylsilyl-baccatinu III (2b, R₃ = OH, R» = H, R₅ = O-TES)

1,6 látkyó bylo rozpuštěno v methylenchloridu a doplněno 370 mg 4-dimethylaminopyridinu a 2,5 ml triethylsilylchloridu. Po 2 hodinách při laboratorní teplotě byla reakční směs naředěna methylencghloridem a promyta vodou. Organická fáze byla zahuštěna do sucha. Získalo se tak 1,72 g zbytku, který byl spojen se 150 ml 95% ethanolu a ovlivněn působením 9 gNaBH|. Po 3 hodinách byla směs naředěna roztokem NH4CI a produkt byl extrahován ethylacetátem. Následnou chromatografií na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu (7:3) bylo získáno 800 g látky 2b (R₃ = OH, R| = H, R_s = O-TES).

-8CZ 293076 B6

Příklad 5

Příprava 1 l,12-dihydro-7-TES-baccatinu III (2b, R₃ = OH, Ri = H, R₅ = O-TES) a 11,12—dihydrobaccatinu III (2b, R₃ = OH, R4 = H, R₅ = O-TES)

500 mg 10-deacetyl-l l,12-dihydro-7-triethylsilylbaccatinu III 2b, R₃ = OH, R4 = H, R₅ = O-TES) bylo ponecháno reagovat v bezvodém pyridinu se 3ekvivalenty acetyíchloridu po dobu 6 hodin při teplotě 0 °C. Reakční směs byla zředěna vodou a extrahována methylenchloridem. Po odpaření rozpouštědla byl zbytek krystalizován ze směsi acetonu a hexanu. Získalo se tak 510 mg 1 l,12-dihydro-7-TES-baccatinu III, M⁺při m/z 702 III (TES= triethylsilyl). Produkt byl rozpuštěn v methanolu a upravován zředěnou HC1 až do úplné desilylace. Reakční směs byla zředěna vodou, extrahována ethylacetátem a krystalizována z vodného methanolu. Získalo se tak 400 mg 11,12-dihydrobaccatinu III, M⁺ při m/z 588.

Příklad 6

Příprava 13-[(2R,2S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-r-butoxykarbonylaminopropanol]-l 1,12-dihydrobaccatinu III (lb, Ri = Ph, R₂ = terciární butoxyskupina, tj. t-BuO, R₃ = OAc, R4 = H)

500 mg 11,12-dihydrobaccatinu III (2b, R₃ = OAc, Ri = H, R₅ = O-TES) bylo rozpuštěno ve 20 ml toluenu spolu s 0,45 g (4S,5R)-N-/-butoxykarbonyl-2,2-dimethylfenyl-5-oxozolydinkarboxylové kyseliny, dicyklohexylkarbodiimidem (1,03 ekviv.) a N,N-dimethylamido-pyridinem (0,2 ekviv.) 2 hodiny při 80 °C. Reakční směs byla promývána vodou až do odstranění přebytku reagencií a poté zahuštěna do sucha. Zbytek byl upraven působením methanolu, obsahujícího 1% kyselinu mravenčí, po dobu 4 hodin při laboratorní teplotě. Methanolový roztok byl naředěn vodou, neutralizován a extrahován ethylacetátem. Organická fáze byla zahuštěna do sucha a zbytek byl upraven roztokem, obsahujícím 1,5 ekvivalent uhličitanu di-í-butylnatého a kyselého uhličitanu sodného v 15 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs byla naředěna vodou, extrahována ethylacetátem a heteroacetátová fáze byla zahuštěna do sucha. Zbytek byl k dokončení desilylace rozpuštěn v methanolu, okyseleném kyselinou chlorovodíkovou. Pak byl roztok naředěn vodou a extrahován ethylacetátem. Zbytek, získaný odpařením fáze heteroacetátu, byl chromatografován na silikagelu za eluce směsí acetonu a hexanu (1:1) k odstranění reakčních nečistot. Získalo se tak 580 mg produktu o M⁺ při m/z 851.

Příklad 7

Příprava 13-[(2R,2S)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-hydroxypropanoyl]-l 1,12-dihydrobaccatinu III (lb, Ri = R₂ = Ph, R₃ = OAc, R4 = H)

500 mg 1 l,12-dihydro-7-TES-baccatinu III (2b, R₃ = OAc, R4 = H, R₅ = O-TES) bylo rozpuštěno ve 20 ml toluenu spolu s 1,5 g (4S,5R)-N-benzoyl-2,2-dimethyl-4-fenyl-5-oxazolydinkarboxylové kyseliny, s dicyklohexylkarbodiimidem (1,03 ekviv.) a N,N-dimethylamido-pyridinem (0,2 ekviv.) 2 hodiny při 80 °C. Reakční směs byla promývána vodou až do odstranění přebytku reagujících látek a poté zahuštěna do sucha. Zbytek byl upraven působením methanolu, obsahujícího 1% kyselinu mravenčí, po 4 hodiny při laboratorní teplotě. Methanolový roztok byl naředěn vodou, neutralizován a extrahován ethylacetátem. organická fáze byla zahuštěna do sucha a zbytek byl spojen s methanolem, okyseleným kyselinou chlorovodíkovou, k dokončení desilylace. Poté byl roztok naředěn vodou a extrahován ethylacetátem. Zbytek získaný odpařením a fáze heteroacetátu byly chromatografovány na silikagelu za eluce směsí acetonu a hexanu (1:1) k odstranění reakčních nečistot. Získalo se tak 530 mg produktu, M⁺ při m/z 855.

-9CZ 293076 B6

Příklad 8

Příprava 13-[(2R,2S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-L-butoxykarbonylaminopropanoyl]-l 0-epi-l 0-deacetylbaccatinu III (la, Rj = Ph, R₂ = t-BuO, R₃ = H, R, = OH)

500 mg 10-deacetyl-10-epibaccatinu III (2a, R₃ = H, Rj = OH) bylo rozpuštěno v 15 ml bezvodého pyridinu, upraveno působením 3 ekvivalentů trichlorethoxykarbonylchloridu (TROC-CI) po dobu 5 minut při 80 °C a poté ochlazeno na laboratorní teplotu. K rozpadu nadbytku látky TROC-CI byl přidán 1 ml methanolu. Roztok byl naředěn ledovou vodou a extrahován chloroformem za promytí organické fáze zředěným roztokem kyseliny chlorovodíkové. Organická fáze byla odpařena do sucha a na zbytek bylo při laboratorní teplotě působeno 24 hodin roztokem toluenu, obsahujícího 3 ekvivalenty (4S,5R)-N-t-butoxykarbonyl-2,2-dimethyl—4-fenyl-5-oxazolidinkarboxylové kyseliny, 3 ekvivalenty dicyklohexylkarbodiimidu a 0,2 ekvivalentu Ν,Ν-dimethylaminopyridinu. Reakční směs byla promyta vodou a organická fáze byla ve vakuu odpařena do sucha. Zbytek byl převeden do methanolu a upraven působením 1 ekvivalent kyseliny p-toluensulfonové po dobu 48 hodin, poté byl naředěn vodou a extrahován ethylacetátem. Organická fáze byla odpařena ve vakuu, zbytek byl převeden do 200 ml směsi kyseliny octové a ethylacetátu (1:1) a 3 hodiny byl vystaven působení 11 ekvivalent práškového zinku při teplotě 30 °C. Pevný materiál byl odfiltrován a roztok byl naředěn vodou, extrahován ethylacetátem a chromatografován na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu (1:4). Získalo se tak 512 mg produktu (la), M⁺ při m/z 807.

Příklad 9

Příprava 7,9-di-triethylsilyl-C-seko-10-deacetylbaccatinu III

Roztok látky 5 (200 mg, 0,37 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (DMF, 5 ml) byl přidán k imidazolu (75 mg, 1,11 mmol, 3 ekv. mol.) a triethylsilylchloridu (TES, 186 ml, 1,11 mmol, 3 ekv. mol.) a reakční směs byla míchána 10 minut při laboratorní teplotě. Reakce byla ověřována pomocí tenkovrstevné chromatografie (TLC) ve směsi hexanu a ethylacetátu (3:7). Rf výchozí látky bylo 0,10; Rf produktu 0,80. Reakce pak byla zastavena přídavkem vody a Celitu®, a sraženina byla zfiltrována a promyta vodou k odstranění DMF a poté CHC1₃ k vydělení produktu. Po vyčištění kolonovou chromatografii (za použití směsi hexanu a ethylacetátu 9:1 keluci silanolu a poté směsi hexanu a ethylacetátu 6:4 keluci produktu) bylo získáno 146 mg v nadpisu uvedeného produktu (51%).

Příklad 10

Příprava 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-t-butoxykarbonylaminopropanoyl]-C-seko-10deacetylbaccatinu III (lc, Ri = Ph, R₂ = Z-BuO)

Roztok produktu, získaného v Příkladu 9 (126 mg, 0,16 mmol) v bezvodém toluenu (5 ml), byl doplněn 67,5 mg dicyklohexylkarbodiimidu (0,327 mmol. 2 mol. ekv.), 105 mg (4S,5R)-N-Boc2-(2,4-dimethoxyfenyl)-4-fenyl-5-oxazolidinkarboxylové kyseliny (0,327 mmol, 2 mol. ekv.) a 5 mg 4-dimethylaminopyridinu. Směs byla zahřívána 24 hodin na 60 °C a zředěna nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a ethylacetátu. Zbytek byl vyčištěn kolonovou chromatografii (hexan/ethylacetát, 8:2) za vzniku 175 mg 13-esteru (95 %). Zbytek byl převeden do 50 ml směsi methanol/HCl (0,01%) a reakční směs byla ponechána l hodinu při laboratorní teplotě. Roztok byl alkalizován na pH 5 a ve vakuu zahuštěn do sucha. Vzniklý zbytek byl chromatografován na koloně silikagelu za eluce směsí methylenchloridu a methanolu (98:2). Po krystalizaci z ethylacetátu bylo získáno 85 mg v nadpisu uvedené sloučeniny.

-10CZ 293076 B6

Příklad 11

Příprava 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3-kaproylaminopropanoyl]-C-seko-10-deacetylbaccatinu III (lc, Ri = Ph, R₂ = pentyl)

Roztok produktu, získaného v Příkladu 9 (126 mg, 0,16 mmol), v bezvodém toluenu (5 ml) byl přidán k 67,5 mg dicyklohexylkarbodiimidu (0,327 mmol, 2 mol. ekv.), 140 mg kyseliny (4S,5R)-N-kaproyl-2-(2,4-dimethoxyfenyl)-4-izobutyI-5-oxazoIidinkarboxylové (0,327 mmol, 2 mol. ekv.) a 5 mg 4-dimethylaminopyridinu. Směs byla zahřívána 24 hodin na 60 °C a zředěna nasyceným vodným roztokem NaHCO₃ a ethylacetátu. Vzniklý zbytek byl vyčištěn kolonovou chromatografií (hexan/ethylacetát, 8:2) za vzniku 175 mg 13-esteru (95 %). Zbytek byl převeden do 50 ml směsi methanoI/HCl (0,01 %) a reakční směs byla ponechána 1 hodinu při laboratorní teplotě. Roztok byl alkalizován na pH 5 a ve vakuu zahuštěn do sucha. Vzniklý zbytek byl chromatografován na koloně silikagelu za eluce směsí methylenchloridu a methanolu (98:2). Po krystalizací z ethylacetátu bylo získáno 88 mg v nadpisu uvedené sloučeniny.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Polosyntetický taxan se systematickým názvem 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-tercbutoxykarbonylaminopropanoyl]-10-epi-10-deacetylbaccatin III obecného vzorce la (1a), kde

Ri je fenyl, R₂ je terciární butoxyskupina, R₃ je atom vodíku a R4 je hydroxyskupina; Ph = fenyl, Ac = acetyl.
2. Polosyntetický taxan se systematickým názvem 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-tercbutoxykarbonylaminopropanoyij-11,12-dihydrobaccatin III obecného vzorce lb

-11 CZ 293076 B6 (1b), kde

Ri je fenyl, R₂ je terciární butoxyskupina, R₃ je acetoxyskupina a R4 je atom vodíku; Ph = fenyl, Ac = acetyl.
3. Způsob výroby polosyntetických taxanů 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc-butoxykarbonylaminopropanoyl]-10-epi-10-deacetylbaccatinu III, obecného vzorce la podle nároku 1 a 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-karboxy-3-terc-butoxykarbonylaminopropanoyl]-l 1,12-dihydrobaccatinuIII, obecného vzorce lb podle nároku 2, vyznačující se tím, že syntony obecného vzorce 2 (2), kde pokud je přítomna dvojná olefinová vazba v poloze 11,12, R₃ je vodíkový atom a R4 a R₅ jsou hydroxylové skupiny, C₂-C₈ acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny; a pokud není přítomna dvojná olefinová vazba v poloze 11, 12, má methyl v poloze 12 orientaci a, R» je atom vodíku a R₃ a R₅ jsou hydroxylové skupiny, C₂-C_g acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny; přičemž Ph fenyl a Ac = acetyl;

se podrobí příslušné esterifikaci reakcí s vhodně aktivovanými a/nebo chráněnými izoserinovými deriváty k zavedení acylové skupiny

- 12CZ 293076 B6 kde Ri a R₂ mají stejný význam jako v nároku 1 či 2, do polohy 13, a chránící skupiny se následně odstraní podle známých postupů.
4. Sloučenina obecného vzorce 2 (2), kde: pokud je přítomna dvojná olefinová vazba v poloze 11,12, R₃ je vodíkový atom a R4 a R$ jsou hydroxylové skupiny, C₂-C₈ acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny; a pokud není přítomna dvojná olefinová vazba v poloze 11,12, má methyl v poloze 12 orientaci a, R4 je atom vodíku a R₃ a R4 jsou hydroxylové skupiny, Cr-C₈ acyloxyskupiny, alkylsilyloxyskupiny nebo 2,2,2-trichlorethoxykarbonyloxyskupiny; přičemž Ph = fenyl a Ac = acetyl;

jako meziprodukt pro přípravu sloučeni podle nároku 1 obecného vzorce la či nároku 2 obecného vzorce lb.

(Ic),

-13 CZ 293076 B6 kde

Ri a R₂, které mohou být stejné nebo odlišné, jsou Ci-C₂₀ alkylové nebo arylové skupiny a R₂může být také terciární butoxyskupina; Ph = fenyl a Ac = acetyl.
6. Polosyntetický taxan podle nároku 5 se systematickým názvem 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2hydroxy-3-íerc-butoxykarbony laminopropanoy l]-C-seko-10-deacety lbaccatin III, obecného vzorce lc (lc), ve kterém R₁ je fenyl a R₂ je terciární butoxyskupina; Ph = fenyl a Ac = acetyl.
7. Polosyntetický taxan podle nároku 5 se systematickým názvem 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2hydroxy-3-kaproylaminopropanoyl]-C-seko-10-deacetylbaccatin III obecného vzorce lc (lc), ve kterém Ri je izobutyl a R₂ je pentyl; Ph = fenyl a Ac = acetyl.
8. Způsob výroby polosyntetických taxanů 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-Zerc-butoxykarbonylaminopropanoyl]-C-seko-10-deacetylbaccatinu III obecného vzorce lc podle nároku 6 a 13-[(2R,3 S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3-kaproylaminopropanoyl]-C-seko-l O-deacetylbaccatinu lil obecného vzorce lc podle nároku 7, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce 5

- 14CZ 293076 B6 kde Ph = fenyl a Ac = acetyl, se podrobí příslušné esterifikaci reakcí s deriváty, vhodně aktivovanými a/nebo chráněnými v místě izoserinového řetězce, k zavedení acylové skupiny kde R] a R₂ mají stejný význam jako v nároku 5, do polohy 13, a chránící skupiny se následně odstraní podle známých postupů.
9. Sloučenina obecného vzorce 5 (5), kde Ph = fenyl a Ac = acetyl, jako meziprodukt pro přípravu sloučenin obecného vzorce lc podle nároku 5.
10. Farmaceutické prostředky, vyznačující se tím, že obsahují taxany podle nároků 1 a 2 a 5 až 7.
11. Farmaceutické prostředky podle nároku 10, mající protinádorový účinek.
12. Použití taxanů podle nároků 1 a 2 a 5 až 7 k výrobě léčiv, vhodných pro léčení rakoviny.

-15CZ 293076 B6
13. Použití taxanů podle nároku 5 vzorce lc, kde R₂ je alkylová skupina, k výrobě léčiv, vhodných pro léčení rakoviny u kardiopatických pacientů.