SK281526B6

SK281526B6 - Semisyntetický taxán, spôsob jeho prípravy a medziprodukt, semisyntetický sekotaxán, spôsob jeho prípravy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Info

Publication number: SK281526B6
Application number: SK100-97A
Authority: SK
Inventors: Ezio Bombardelli; Paolo Bellis; Bruno Gabetta
Original assignee: Indena S. P. A.
Priority date: 1994-07-26
Filing date: 1995-07-21
Publication date: 2001-04-09
Also published as: BG101165A; US5756776A; NO970296D0; WO1996003394A1; RO116549B1; CN1308072A; RU2134688C1; DK0773938T3; CN1073105C; AU3164195A; FI970271A0; PL187579B1; EP0773938A1; ES2126919T3; HUT76829A; KR100220490B1; AU684218B2; HU222496B1; CA2195844A1; FI970271A

Abstract

Je opísaný semisyntetický taxán získaný oxidáciou a stereošpecifickou redukciou 10-deacetylbakatínu III a postupnou esterifikáciou substituovaným izoserínovým reťazcom pri príprave analógov taxolu. Produkty podľa vynálezu majú cytotoxické a antitumorózne účinky a pri vhodnej formulácii ich možno podávať injekčne a/alebo perorálne.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových derivátov získaných oxidáciou a stereošpecifickou redukciou 10-deacetylbakatínu III a postupnou esterifikáciou substituovaným izoserínovým reťazcom pri príprave analógov taxolu. Produkty podľa vynálezu majú cytotoxické a antitumorózne účinky a pri vhodnej formulácii ich možno podávať injekčné a/alebo perorálne.

Doterajší stav techniky

Diterpény s taxánovým skeletonom, najmä taxol, sú známe svojím antitumoróznym účinkom proti množstvu tumorov u ľudí. Ale použitie týchto liečiv, najmä taxolu, je spojené s určitými nedostatkami kvôli nežiaducim vedľajším účinkom. Z tohto dôvodu, ako aj preto, že takéto antitumorózne liečby rýchlo indukujú rezistenciu, venuje sa pozornosť vývoju nových molekúl, použitie ktorých znižuje problémy, ktoré sa objavujú pri klinickom použití.

WO 93/02067 (Nippon Steel) zo 4. februára 1993 objavuje napríklad 10-alfa-acetyl-taxol extrahovaný z tkanivovej kultúry albuménu druhu Taxus, ktorý má výraznú cytotoxickú aktivitu.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález sa týka nových derivátov s taxánovým skeletonom, ktoré sa získavajú semisyntézou a majú silný antitumorózny účinok. Deriváty podľa vynálezu majú nasledovný vzorec (1)

Možno ich rozdeliť do dvoch skupín:

a) deriváty taxánu obsahujúce dvojitú oleflnovú väzbu v pozícii 11,12- a hydroxy alebo acyloxy skupinu v pozícii 10a - (taxány vzorca (la))

(R³ = H; R⁴ = OH alebo acyloxy)

b) deriváty taxánu obsahujúce jednoduchú väzbu (medzi atómami uhlíka 11 a 12, s metylom na C12 v polohe a a hydroxy alebo acyloxy skupinou v polohe 10B (taxány vzorca (lb))

(R³ = OH alebo acyloxy; R⁴ = H)

Pri taxánoch všeobecného vzorca (1), R¹ a R², ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, sú Ci-C_s alkyl, C₂-C₈alkenyl, aryl (výhodne fenyl) alebo heteroarylová skupina. R² tiež môže byť terc.butoxy skupina.

Pri zlúčeninách vzorca (la), R³ je vodík a R⁴ je hydroxy alebo C₂-C₈ acyloxy skupina.

Pri zlúčeninách vzorca (lb) je R³ hydroxy alebo C₂-C₈acyloxy skupina a R⁴ je vodík.

Taxány vzorca (1) sa pripravujú esterifikáciou nových syntónov vzorca (2) v pozícii 13, s použitím vhodne aktivovaných izoserínových reťazcov ako acylačných činidiel, v súlade s postupom semisyntézy taxolu a jeho analógov uvedeným v literatúre (pozri napríklad EP-A-400971, 1992, Fr. Dem., 86, 10400; E. Didier et al., Tetrahedron Letters, 35,2349,1994; E. Didier et al., ibid., 35, 3063,1994).

Vo vzorci (2)

kde:

ak je prítomná dvojitá olefínová väzba v pozícii 11,12-, je R³ atóm vodíka, R⁴ a R⁵ sú hydroxy, C₂-C_g acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina;

ak dvojitá olefínová väzba nie je prítomná v pozíciách 11,12, metyl je v pozícii 12 orientovaný a, R⁴ je atóm vodíka, R³ a R⁵ sú hydroxy, C₂-C₈ acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina.

Pri syntéze nových taxánov vzorca (la) sa používajú najmä syntóny vzorca (2a). Na druhej strane, syntóny vzorca (2b) sa používajú pri syntéze nových taxánov vzorca

Pri syntónoch (2a) je prítomná dvojitá olefínová väzba v pozícii 11,12 a C₂-C₈ acyloxy skupina alebo voliteľne chránená hydroxy skupina sú prítomné v pozícii 10a. Preto pri syntónoch (2a) je R³ vodík, R⁴ a R⁵ sú hydroxy, acyloxy, alkylsiloxy (napríklad trietylsilyloxy, O-Tes) alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy (O-CO-O-CH₂CC1₃, O-TROC) skupiny.

Pri syntónoch (2b) sú atómy uhlíka v pozíciách 11-a 12- spojené jednoduchou väzbou, metyl v pozícii 12- je orientovaný a a acyloxy skupina alebo voliteľne chránená hydroxy skupina sú prítomné v pozícii 10a-. Preto pri syntónoch (2b) je R⁴ vodík, R³ a R^s sú hydroxy, acyloxy, alkylsiloxy (napríklad trietylsilyloxy, O-Tes) alebo 2,2,2-trichloretoxy-karbonyloxy (O-CO-O-CH₂CC1₃, O-TROC)

Po esterifikácii syntónov (2) v pozícii 13 izoserínovým reťazcom sú ochranné skupiny odstránené bežnými postupmi známymi v literatúre, čím sa získajú nové taxány vzorca (1).

10-Deacetylbakatín III3, ktorý možno izolovať z listov Taxus Baccata (G. Chauviere et al., C. R. Acad. Sci. Ser. 111,293; 591 (1981), a používa sa ako univerzálna východisková látka na prípravu syntónov (2a) a (2b).

Syntóny vzorca (2a), ktoré nie sú známe v literatúre sa získajú (schéma 1) zo zlúčeniny 3 oxidáciou octanom mednatým v polohe 10-, aby vznikol diketón 4 a následnou redukciou borhydridom sodným v prítomnosti solí céria (III).

Výsledný produkt (2a, R³ = H, R⁴ = R⁵ = OH), ktorý je epimérom v polohe 10- vzorca (3), je vhodne chránený v polohe 7- a 10- a používa sa pri syntéze taxánov la.

Schéma 1

CuíOíclj

a. <ä₃-h,

Sekotaxán 5 možno použiť na syntézu ďalších taxánov s potenciálnou antitumoróznou aktivitou.

Predkladaný vynález sa tiež týka nových derivátov sekotaxánového skeletónu pripravených semisyntézou a tieto deriváty majú silnú antitumoróznu aktivitu. Uvedené deriváty majú vzorec (5a)

R¹ a R², ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, sú Ci-C₂₀ alkyl, C₂-C₈ alkenyl, aryl (prednostne fenyl) alebo heteroarylové skupiny. R² tiež môže byť terc.butoxy skupina.

Taxány vzorca (5a) sa pripravujú esterifikáciou zlúčeniny vzorca (5) v pozícii 13, s použitím vhodne aktivovaných izoserínových reťazcov ako acylačných agensov, ako je uvedené v literatúre o semisyntéze taxolu a jeho analógov (pozri napríklad EP-A-400,971; E. Didier et al., Tetrahedron Letters 35, 2349, 1994; E. Didier et al., ibid., 35, 3063, 1994). Hydroxyskupiny zlúčeniny 5 môžu byť voliteľne chránené vhodnými ochrannými skupinami, podľa bežne používaných spôsobov.

Po esterifikácii zlúčeniny 5 v polohe 13- izoserínovým reťazcom sú ochranné skupiny odstránené bežnými spôsobmi, ktoré sú známe z literatúiy, čím sa získajú sekotaxány vzorca (5a).

Syntóny vzorca (2b), ktoré nie sú známe v literatúre, možno tiež získať z 10-deacetylbakatínu III vzorca (3) (schéma 2). Zistilo sa, že oxidáciou zlúčeniny 3 kyselinou m-chlórperbenzoovou (MCPBA) sa získa zodpovedajúci 13-ketoderivát vzorca (6). Po ochrane hydroxylu v polohe 7-trietylsilylchloridom (TESCI), redukciou bórhydridom sodným v prítomnosti solí céria vzorca (6) sa získa syntón 2b (R³ = OH, R⁴ = H, R⁵ = O-TES), ktorý môže byť použitý na syntézu taxánov vzorca (lb). α-Orientácia metylu syntónov v polohe 12- (vzorec (2b)) bola dedukovaná pomocou sledovaní s použitím nukleárnej magnetickej rezonancie.

Nový sekotaxán vzorca (5) sa získava ako vedľajší produkt reakčnej sekvencie uvedenej v schéme 1

Schéma 2

Produkty podľa predkladaného vynálezu boli testované na cytotoxický účinok na rôznych tumoróznych bunkových líniách, za porovnávania ich účinku s účinkom taxolu.

Tabuľka 1 vyjadruje hodnoty IC₅₀ zlúčenín 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.-butoxykarbonylaminopropanoyl]-10-epi-10-deacetylbakatínu III (la, R¹ = fenyl, R² = tBuO, R³ = H, R⁴ = OH), 13-[(2R,3S)-3-fenyI-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylamino-propanoyll-10-deacetyl-11,12-dihydrobakatinu III (5a, R - fenyl, R² = tBuO, R³ = = OH, R⁴ = H), 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylaminopropanoylj-C-seko-lO-deacetylbakatínu III (5a, R¹ = fenyl, R² = tBuO) a 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3 -kaproy laminopropanoyl] -C-seko-10-deacety 1bakatínu ( 5a, R¹ = izobutyl, R² =pcntyl) v porovnaní s IC_5I)taxolu.

Tab. 1 - IC₅₀ taxánov la (la, R’ = fenyl, R² = tBuO, R³ = = H, R⁴ = OH), lb (R¹ = fenyl, R² = tBuO, R³ = OH, R⁴ = = H) a taxolu na 6 bunkových líniách.

línie	čas expoz. (h)	Taxol	1a \| 1b (R¹ a íť sú uved, v tab.1)
L1210 (mytia leuk.)	48	57,013.0	46,012,1	32,010,1
A121 (humánna ovar.)	72	3,710,3	2,810,3	1,610,2
A549 (humánna NSCLC)	72	5,410,5	6,910,3	2.110,3
HT-29 (humánna črevná)	72	6,010,6	3,410,1	3,610,4
HCF7 (humánna prenlk.)	72	4,310,1	2,2102	0,810,2
HCF7-ADR (rezistentná)	72	395,016,7	130,012,2	128,0162

Štandardné podmienky: Substrát RPMI 1640 + 20mM HEPES + 2mM L-glutamínu

Tab. 1 - IC₅o taxánov 5a (R¹ = fenyl, R² = tBuO), 5a (R¹ = = izobutyl, R² = pentyl) a taxolu na 6 bunkových líniách.

línie	čas expoz. (h)	Taxol	=·	5b
(R¹ a R* síl u	ved.vtab.1)
Ľ1210 (mytia leuk.)	48	57,013,0	35,0112	26,011,3
A121 (humánna ovar.)	72	3,710,3	1,9102	1,310,1
A549 (humíňna NSCLC)	72	5,410,5	3,310,4	2,610,3
HT-29 (humánna črevná)	72	6,010,6	3,210,3	2,7*02
HCF7 (humánna prsník.)	72	4,310,1	1,5102	1,1102
HCF7-ADR (rezistentná)	72	395,018,7	31,314.2	25,413,7

Štandardné podmienky: Substrát RPMI 1640 + 20mM HEPES + 2mM L-glutamínu

Zlúčeniny s rozdielnymi substituentmi v izoserínovom reťazci sa správajú podobne. Zlúčeniny majú oproti taxolu na bunkových líniách rezistentných na iné antitumorózne látky, ako napríklad adriamycín a cis-platina, prekvapujúce výhody. Rozdiely medzi taxolom a týmito produktmi sú ešte výraznejšie v modeloch in vivo, ako sú napríklad atymické nahé myši s humánnym tumoróznym implantátom. Tiež sa zistilo, že zlúčeniny podľa vynálezu, pri ktorých R²je alkylová alebo alkenylová skupina, sú prekvapujúco bez kardiotoxického účinku, na rozdiel od taxolu a jeho známych derivátov, preto ich možno bez obáv použiť u pacietnov s kardiopatiami, ktorých nie je možné liečiť taxolom a jeho známymi derivátmi.

Zlúčeniny podľa vynálezu sú vhodné na použitie vo farmaceutických prípravkoch určených na parenterálne a perorálne podávanie. Na intravenózne podávanie sa používajú najmä zmesi polyetoxylovaného ricínového oleja a etanolu alebo lipozomálne prípravky pripravené s prirodzeným fosfatidylcholínom alebo zmesi prirodzených fosfolipidov v prítomnosti cholesterolu.

Ďalej uvedené príklady bližšie ilustrujú vynález.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava 10-dchydro-l 0-deacety lbakatínu III (4) g 10-deacetylbakatínu III (vzorec (3)) sa suspenduje v 350 ml metanolu, ku ktorému sa pridá 65 g Cu(OAc)₂. Suspenzia sa kontinuálne mieša 120 hodín pri izbovej teplote. Soli sa odfiltrujú a roztok sa chromatografuje na 100 g silikagélu za eluácie 6 : 4 zmesou hexán/etylacetát. Kryštalizáciou z ligroínu sa získa 9,5 g (4) M+ pri m/z 542.

Príklad 2

Príprava 10-deacetyl-10-epibakatínu III (2a, R³ = H, R⁴ = = R⁵ = OH) a C-seko-10-deacetylbakatínu III (5)

Roztok 300 mg (4) v 5 ml metanolu sa pridá k 1 ekvivalentu CeCl₃.3H₂O, mieša sa pri izbovej teplote 5 minút, potom sa pridá 80 mg NaBH₄. Roztok je opracovaný roztokom NH₄C1, je extrahovaný etylacetátom a chromatografovaný na silikagéli za eluácie 3 : 7 zmesou hexán/etylacetát. Získa sa 98 mg (2a) (M+ pri m/z 544) a 120 mg (5) (M+ pri m/z 546).

10-Deacetyl-10-epibakatín III má nasledovné 'H-NMR spektrum (CDC1³) : H2, d 5,68, J 6,8; H3, d 4,26, J 6,8; d 5,03, J 7,1; H7/13, m 4,76; H10, br s 5,20; 10 OH, br s 3,44; H16; s 1,14; H17, s 1,68; H18, s 2,22; H19, s 1,13; H20a, d 4,33; H20b, d 4,18; Ac, s 2,31; Bnz, br 8,12 J 8, br 17,60 J 8, br 117,49 J 8.

Príklad 3

Príprava lO-deacetyl-13-dehydrobakatlnu III (6) g kyseliny meta-chlórperbenzoovej a 1 g acetátu sodného sa pridá k suspenzii 1 g 10-deacetylbakatínu III (vzorca (3)) v 100 ml CH₂C1₂ Suspenzia sa bez prestania mieša 120 hodín pri izbovej teplote a potom sa zriedi 5 % vodným roztokom Na₂CO₃. Organická fáza sa premyje 5 % Na₂CO₃ a odparí sa do sucha. Zvyšok je purifikovaný na silikagéli eluáciou zmesou hexán/etylacetát 3 :7. Ziska sa 789 mg (6), pri m/z 542.

SK 281526 Β6

Príklad 4

Príprava 10-deacetyl-l l,12-dihydro-7-trietylsilylbakatínu III (2b, R³ = OH, R⁴ = H, R⁵ = 0-TES)

1,6 g (6) sa rozpustí v metylénchloride a pridá sa 370 mg 4-dimetylaminopyridínu a 2,5 ml trietylsilyichloridu. Po 2 hod. státia pri izbovej teplote sa reakčná zmes zriedi metylénchloridom a premyje sa vodou. Organická fáza sa skoncentruje do sucha. Získa sa 1,72 g zvyšku, ktorý sa rozpustí v 150 ml 95% etanolu, a opracuje sa 9 g NaBH4. Po 3 hodinách sa zmes zriedi roztokom NH4CI a produkt je extrahovaný etylacetátom. Po chromatografovaní na silikagéli s použitím zmesi hexán/etylacetát 7 : 3 sa získa 800 mg (2b) (R³=OH, R⁴=H, R⁵ = O-TES).

Príklad 5

Príprava ll,12-dihydro-7-TES-bakatínu III (2b, R³ = OH, R⁴ = H, R⁵ = 0-TES) a 11,12-dihydrobakatínu III (2b, R³=OAc,R⁴ = H,R⁵ = OH)

500 mg 10-deacetyl-l 1,12-dihydro-7-trietylsolylbakatínu III (2b, R³ = OH, R⁴ = H, R⁵ = O-TES) reaguje v bezvodom pyridíne s 3 ekvivalentmi acetylchloridu pri 0 °C počas 6 hodín. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa metylénchloridom. Po odparení rozpúšťadla zvyšok kryštalizuje z acetón/hexánu. Získa sa 510 mg ll,12-dihydro-7-TES-bakatínu III, M+ pri m/z 702 III. Produkt sa rozpustí v metanole a opracuje sa zriedenou HC1, až kým desilylácia nie je ukončená. Reakčná zmes sa zriedi vodou, extrahuje sa etylacetátom a kryštalizuje z roztoku metanolu. Získa sa 400 mg 11,12-dihydrobakatínu III, M+ pri m/z 588.

Príklad 6

Príprava 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylamino-propanoy 1] -11,12-dihydrobakatínu III (1 b, R¹ = fenyl, R² = tBuO, R³ = OAc, R⁴ = H)

500 mg 11,12-dihydrobakatínu III (2b, R³ = OAc, R⁴ = = H, R⁵ = O-TES) sa rozpustí v 20 ml toluénu s 0,45 g kyseliny (4S,5R)-N-terc.butoxykarbonyl-2,2-dimetylfenyl-5-oxazolidínkarboxylovej, s dicyklohexylkarbodiimidom (1,03 ekvivalentov) a N,N-dimetylaminopyridínom (0,2 ekvivalentu) pri 80 °C počas 2 hodín. Reakčná zmes sa premyje vodou, až kým sa neodstráni nadbytok činidiel, potom sa skoncentruje do sucha. Zvyšok sa ďalej opracuje metanolom s obsahom 1 % kyseliny mravčej počas 4 hodín pri izbovej teplote. Metanolický roztok sa zriedi vodou, neutralituje sa a extrahuje etylacetátom. Organická fáza je skoncentrovaná do sucha a zvyšok sa opracuje roztokom s obsahom 1,5 ekv. di-terc-butylkarbonátu a bikarbonátu sodného v 15 ml tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa zriedi vodou, extrahuje sa etylacetátom a heterooctová fáza sa skoncentruje do sucha. Zvyšok sa rozpustí metanolom 0kysleným pomocou kyseliny chlorovodíkovej, aby sa desilylácia ukončila. Roztok sa potom zriedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Zvyšok získaný odparením heterooctovej fázy je chromatografovaný na silikagéli za eluácie zmesou acetón/hexán 1 : 1, aby sa odstránili nečistoty vzniknuté počas reakcie. Získa sa 580 mg produktu, M+ pri m/z 851.

Príklad 7

Príprava 13-[(2R,3S)-3-benzoylamino-3-fenyl-2-hydroxypropanoyl]-ll,12-dihydrobakatínu III (lb, R¹ = R² = fenyl, R³ = OAc, R⁴ = H)

500 mg ll,12-dihydro-7-TES-bakatínu III (2b, R³ = = OAc, R⁴ = H, R⁵ = O-TES) sa rozpustí v 20 ml toluénu s

1,5 g kyseliny (4S,5R)-N-benzoyl-2,2-dimetyl-4-fenyl-5-oxazolydínkarboxylovej, s dicyklohexylkarbodiimidom (1,03 ekvivalentov) a Ν,Ν-dimetylaminopyridínom (0,2 ekvivalenty) pri 80 °C počas 2 hodín. Reakčná zmes sa premyje vodou, až kým sa neodstráni nadbytok činidiel, potom sa skoncentruje do sucha. Zvyšok sa ďalej opracuje metanolom s obsahom 1 % kyseliny mravčej počas 4 hodín pri izbovej teplote. Metanolický roztok sa zriedi vodou, neutralituje sa a extrahuje etylacetátom. Organická fáza je skoncentrovaná do sucha a zvyšok sa rozpustí v metanole okyslenom kyselinou chlorovodíkovou, aby sa ukončila desilylácia. Roztok sa zriedi vodou, extrahuje sa etylacetátom. Zvyšok získaný odparením heterooctovej fázy je chromatografovaný na silikagéli za eluácie zmesou acetón/hexán 1:1, aby sa odstránili nečistoty vzniknuté počas reakcie. Získa sa 530 mg produktu, M+ pri m/z 855.

Príklad 8

Príprava 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylamino-propanoyl]-10-epi-10-deacetylbakatínu III (la, R¹ = fenyl, R² = tBuO, R³ = H, R⁴ = OH)

500 mg 10-deacetyl-10-epi-bakatínu III (2a, R³ = H, R⁴ = R⁵ = OH) sa rozpustí v 15 ml bezvodého pyridínu a počas 5 minút sa pri 80 °C opracováva tromi ekvivalentmi trichloretoxykarbonylchloridu (TROCCl) a potom sa ochladí na izbovú teplotu. Pridá sa 1 ml metanolu, aby sa odstránil prebytok TROCCl. Roztok sa zriedi ľadovou vodou a extrahuje sa chloroformom, organická vrstva sa premýva zriedeným roztokom kyseliny chlorovodíkovej. Organická fáza sa odparí do sucha a zvyšok sa pri izbovej teplote opracúva 24 hodín roztokom toluénu s obsahom troch ekvivalentov kyseliny (4S,5R)-N-terc.butoxykarbonyl-2,2-dimetyl-4-fenyl-5-oxazolydínkarboxylovej, 3 ekvivalentov dicyklohexylkarbodiimidu a 0,2 ekvivalentu N,N-dimetylaminopyridínu. Reakčná zmes sa premyje vodou a organická fáza sa odparí do sucha vo vákuu. Zvyšok sa rozpustí v metanole a opracuje sa jedným ekvivalentom kyseliny p-toluénsulfónovej počas 48 hodín, potom sa zriedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa odparí vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v 200 ml zmesi kyselina octová/etylacetát 1:1a ďalšie 3 hodiny sa opracováva 11 ekvivalentmi práškového zinku pri 30 °Č. Tuhá látka sa odfiltruje a roztok sa zriedi vodou, extrahuje sa etylacetátom a chromatografuje na silikagéli za eluácie zmesou etylacetát/hexán 1 : 4. Získa sa 512 mg produktu (la), M+ pri m/z 807.

Príklad 9

Príprava 7,9-ditrietylsilyl-C-seko-10-deacetylbakatínu III

Roztok (5) (200 mg, 0,37 mmólu) v bezvodom dimetylformamide (DMF) (5 ml) sa pridá k imidazolu (75 mg,

1,1 mmólu) a trietylsilylchloridu (TES) (186 ml, 167,3 mg,

1,11 mmólu, 3 ekv. molu) a reakčná zmes sa mieša 10 minút pri izbovej teplote. Reakcia sa overuje TLC (3 : 7 hexán-etylacetát, Rf východiskovej látky 0,10, Rf produktu

SK 281526 Β6

0,80). Reakciaje zhášaná pridaním vody a Celitu^R a precipitát sa sfiltruje a premyje vodou, aby sa odstránil DMF, potom sa premyje CHCk₃, aby sa oddelil produkt. Po purifikácii stĺpcovou chromatografiou (9:1) hexán/etylacetát na eluáciu silanolu, potom 6 : 4 hexán/etylacetát na eluáciu produktu) sa získa 146 mg hlavnej zlúčeniny (51 %).

Príklad 10

Príprava 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylamino-propanoyl-C-seko-10-deacetylbakatínu III (5a, R¹ = fenyl, R² = tBuO)

Roztok produktu získaného v príklade 9 (126 mg, 0,16 mmolu) v bezvodom toluéne (5 ml) sa pridá k 67,5 mg dicyklohexylkarbodiimidu (0,327 mmolu, 2 mol ekvivalenty), 105 mg kyseliny (4S, 5R)-N-Boc-2(2-4-dimetoxyfenyl-4-fenyl5-oxazolidinkarboxylovej (0,327 mmol, 2 mol ekvivalenty) a 5 mg 4-dimetylaminopyridínu. Zmes sa 24 hodín zohrieva na 60 °C a zriedi sa nasýteným vodným roztokom NaHCO₃ a etylacetátom. Zvyšok sa purifikuje stĺpcovou chromatografiou (8 : 2 hexán-etylacetát), aby vzniklo 175 mg 13-esteru (95 %). Zvyšok sa rozpustí v 50 ml metanol/HCl (0,01 %) a reakčná zmes sa nechá stáť pri izbovej teplote 1 hodinu. Roztok sa alkalizuje na pH 5 a skoncentruje sa do sucha vo vákuu. Zvyšok sa chromatografuje na stĺpci silikagélu za eluácie zmesou 98 : 2 metylénchlorid-metanolu. Po kryštalizácii z etylacetátu sa získa 85 mg hlavnej zlúčeniny.

Príklad 11

Príprava 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3-kaproylaminopropanoyl-C-seko-10-deacetylbakatínu III (5a, R¹ = fenyl, R² = pentyl)

Roztok produktu získaného v príklade 9 (126 mg, 0,16 mmolu) v bezvodom toluéne (5 ml) sa pridá k 67,5 mg dicyklohexylkarbodiimidu (0,327 mmolu, 2 mol ekvivalenty), 140 mg kyseliny (4S,5R)-N-kaproyl-2(2)-4-dimetoxyfenyl-4-izobutyl-5-oxazolidínkarboxylovej (0,327 mmol, 2 mol ekvivalenty) a 5 mg 4-dimetylaminopyridínu. Zmes sa 24 hodín zohrieva na 60 °C a zriedi sa nasýteným vodným roztokom NaHCO₃ a etylacetátom. Zvyšok sa purifikuje stĺpcovou chromatografiou (8 : 2 hexán-etylacetát), aby vzniklo 175 mg 13-esteru (95 %). Zvyšok sa rozpustí v 50 ml metanol/HCl (0,01 %) a reakčná zmes sa nechá stáť pri izbovej teplote 1 hodinu. Roztok sa alkalizuje na pH 5 a skoncentruje sa do sucha vo vákuu. Zvyšok sa chromatografuje na stĺpci silikagélu za eluácie zmesou 98 : 2 metylénchlorid-metanolu. Po kryštalizácii z etylacetátu sa získa 88 mg hlavnej zlúčeniny.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Semisyntetický taxán 3-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3 -terc, -butoxykarbony 1 aminopropanoyl] -11 -epi-10-deacetylbakatin III vzorca (la) kde R¹ = fenyl, R² = terc.butoxy, R³ = H, R⁴ = OH.
2. Semisyntetický taxán 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylaminopropanoyl]-ll,12-dihydrobakatín III vzorca (lb) kde R¹ = fenyl, R² = terc.butoxy, R³ = acetoxy a R⁴ = H.
3. Spôsob prípravy zlúčenín podľa nároku 1 a 2, vyznačujúci sa tým, že syntóny vzorca (2), kde ak je v pozícii 11, 12 prítomná dvojitá olefmová väzba, R³je vodík, R⁴ a R⁵ sú hydroxy, C₂-C₈-acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina;

ak dvojitá olefmová väzba v pozíciách 11 a 12 nie je prítomná, metyl v pozícii 12 má α-orientáciu, R⁴ je vodík, R³a R⁵ sú hydroxy, C₂-C_s-acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina;

sú podrobené esterifikácii s vhodne aktivovanými a/alebo chránenými derivátmi izoserínu, so zavedením acylovej skupiny do pozície 13 kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1 a 2, a následne sa odstránia ochranné skupiny.
4. Medziprodukt na výrobu zlúčeniny vzorca (la) a (lb), ktorým je zlúčenina vzorca (2)

SK 281526 Β6 kde ak je v pozícii 11, 12 prítomná dvojitá oleflnová väzba, R³je vodík, R⁴ a R⁵ sú hydroxy, C₂-C₈-acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina;

ak dvojitá oleflnová väzba v pozíciách 11 a 12 nie je prítomná, metyl v pozícii 12 má α-orientáciu, R⁴ je vodík, R³a R⁵ sú hydroxy, C₂-C₈-acyloxy, alkylsiloxy alebo 2,2,2-trichloretoxykarbonyloxy skupina.
5. Medziprodukt na výrobu zlúčeniny vzorca (la) a (lb), ktorým je zlúčenina vzorca (5) panoyl-C-seko-10-deacetylbakatín III vzorca (5a), kde R¹ = = izobutyl, R² = pentyl.

9. Spôsob prípravy zlúčenín podľa nároku
6, v y z n a č u j ú c i sa tým,že zlúčenina vzorca (5) sa cstcrifikuje derivátmi vhodne aktivovanými a/alebo chránenými na reťazci izoserínu, so zavedením acylovej skupiny do pozície 13

R¹ kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 7, a následne sa odstránia ochranné skupiny.

10. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje taxány podľa nárokov 1 až 2 a 6 až 8.

11. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 10, vyzná č u j ú C i sa tým, že majú antitumoróznu aktivitu.

12. Použitie taxánov podľa nárokov 1 až 2 a 6 až 8 na prípravu liečiv vhodných pri liečbe rakoviny.

13. Použitie taxánov podľa nároku 6, kde R² je alkylová alebo alkenylová skupina, na prípravu liečiv vhodných na liečenie rakoviny u pacientov s kardiopatiami.

R¹ a R², ktoré môžu byť rovnaké alebo rozdielne, sú C]-C₂₀alkyl, C₂-C₈ alkenyl, aryl alebo heteroarylová skupina, R²tiež môže byť terc.butoxy skupina.
7. Semisyntetický sekotaxán podľa nároku 6, ktorým je 13-[(2R,3S)-3-fenyl-2-hydroxy-3-terc.butoxykarbonylaminopropanoyl-C-seko-10-deacetylbakatín III vzorca (5a)

Koniec dokumentu kde R¹ = fenyl, R² = terc.butoxy.
8. Semisyntetický sekotaxán podľa nároku 6, ktorým je 13-[(2R,3S)-3-izobutyl-2-hydroxy-3-kaproylaminopro7