CZ289233B6 - Indol-2-karboxamidy a farmaceutické prostředky na jejich bázi - Google Patents

Indol-2-karboxamidy a farmaceutické prostředky na jejich bázi Download PDF

Info

Publication number
CZ289233B6
CZ289233B6 CZ19961627A CZ162796A CZ289233B6 CZ 289233 B6 CZ289233 B6 CZ 289233B6 CZ 19961627 A CZ19961627 A CZ 19961627A CZ 162796 A CZ162796 A CZ 162796A CZ 289233 B6 CZ289233 B6 CZ 289233B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
carbon atoms
alkyl
hydrogen
hydroxy
indole
Prior art date
Application number
CZ19961627A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ162796A3 (en
Inventor
Bernard Hulin
Judith Lee Treadway
William Holt Martin
Dennis Jay Hoover
Original Assignee
Pfizer Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer Inc. filed Critical Pfizer Inc.
Publication of CZ162796A3 publication Critical patent/CZ162796A3/cs
Publication of CZ289233B6 publication Critical patent/CZ289233B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4178—1,3-Diazoles not condensed 1,3-diazoles and containing further heterocyclic rings, e.g. pilocarpine, nitrofurantoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/422—Oxazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Indol-2-karboxamidy obecn ho vzorce I, kde jednotliv obecn symboly maj v²znam uveden² v n roc ch, jsou inhibitory glykogen fosforyl zy, a proto jich lze pou t jako l iv pro l en chorob nebo stav z visl²ch na glykogen fosforyl ze. Farmaceutick prost°edky na b zi indol-2-karboxamid obecn ho vzorce I pro l en chorob z visl²ch na glykogen fosforyl ze u savc .\

Description

Indol-2-karboxamidy a farmaceutické prostředky na jejich bázi
Oblast techniky
Vynález se týká určitých indol-2-karboxamidů a farmaceutických prostředků na jejich bázi. Tyto sloučeniny jsou inhibitory glykogen fosforylázy a lze jich použít pro léčení diabetes, hyperglykemie, hypercholesterolemie, hypertenze, hyperinzulinemií, hyperlipidemie, aterosklerózy a ischemie myokardu u savců.
Dosavadní stav techniky
Přes časný objev inzulínu a jeho následné rozsáhlé používání při léčení diabetes a přes pozdější objev a používání sulfonylmočovin [jako je například Chlorpropamide(R) (Pfizer), Tolbutamide(R) (Upjohn), Acetohexamide^ (E.I. Lilly), Tolazamide(R) (Upjohn)] a biguanidů [jako je například Phenformin(R) (Ciba geigy), Metformin<R) (G. D. Searle)], jakožto orálních hypoglykemických činidel, není léčení diabetes stále ještě dostatečně úspěšné. Inzulín, kterého je zapotřebí přibližně u asi 10% pacientů postižených diabetes, u nichž nejsou syntetická hypoglykemická činidla účinná (diabetes typu I, inzulín dependentní diabetes mellitus), je třeba podávat několikrát denně, přičemž injekční podávání si obvykle zajišťuje pacient sám. Stanovení správného dávkování inzulínu vyžaduje časté určování obsahu cukru v moči nebo krvi. Když se inzulín podává v nadbytku, vyvolává hypoglykemii, která má za následek široký obsah abnormalit od mírných směn obsahu glukózy v krvi až do koma nebo dokonce smrti. Léčení diabetes mellitus noninzulin dependentního typu (diabetes typu II, NIDDM) obvykle zahrnuje kombinaci diety, cvičené, podávání orálních činidel, například sulfonylmočovin, a v závažnějších případech, inzulínu. Klinicky dostupná hypoglykemika však mohou mít vedlejší účinky, omezující jejich použití. Vždy platí, že je-li v individuálním případě některé z těchto činidel neúspěšné, jiné může být úspěšné. Zjevně tedy přetrvává potřeba hypoglykemických činidel zatížených menším počtem vedlejších účinků nebo vykazujících účinnost v případech, kdy jiná hypoglykemická činidla selhávají.
Ateroskleróza, což je choroba artérií, je považována za hlavní příčinu úmrtí v USA a Západní Evropě. Patologická sekvence vedoucí k ateroskleróze a okluzivní srdeční chorobě, je dobře známa. V nejčasnějším stádiu této sekvence vznikající v karotidové, koronární a cerebrální artérii, jakož i v aortě „tukové proužky“. Tyto léze mají žlutou barvu díky přítomnosti lipidových úsad, které jsou obsaženy zejména v buňkách hladkého svalstva a v makrofázích vrstvy intima artérií a aorty. Předpokládá se, že z většího cholesterolu obsaženého v těchto tukových proužcích vznikají fibrózní plaky, které se skládají z akumulovaných intimálních buněk hladkého svalu proložených lipidem a obklopených extracelulámím lipidem, kolagenem, elastinem a proteolykany. Buňky vytvářejí s matricí vláknitý kryt překrývající hlubší úsady buněčných zbytků a dalšího extracelulámího lipidu. Lipidem je převážně volný a esterifikovaný cholesterol. Fibrózní plaky vznikají pomalu a časem u nich dochází ke kalcifíkaci a nekrotizaci, což vede ke vzniku komplikovaných lézí majících za následek okluzi artérií a sklon kmurální trombóze a arteriálním svalovým spasmům, které jsou charakteristické pro pokročilou aterosklerózu.
Epidemiologické důkazy pevně potvrdily předpoklad, že hyperlipidemie je hlavním rizikovým faktorem pro vznik kardiovaskulární choroby (CVD) v důsledku aterosklerózy. V nedávných letech položily čelní lékaři nový důkaz na snižování hladiny cholesterolu v plazmě, zejména nízkohustotního lipoproteinového cholesterolu, jakožto důležitý krok při prevenci CVD. Je známo, že horní hranice normálního stavu je v současné době podstatně nižší než dříve. V důsledku toho jsou velké části populace západního světa nyní považovány za ohrožené. Takové nezávislé rizikové faktory zahrnují glukózovou intoleranci, levou ventrikulámí hypertrofii, hypertenzi a příslušnost k mužskému pohlaví. Kardiovaskulární choroby se vyskytují u pacientů postižených diabetes, přinejmenším u jejich části, poněvadž u této části populace je
-1CZ 289233 B6 přítomen větší počet nezávislých rizikových faktorů. Úspěšné léčení hyperlipidemie v celé populaci a zejména u populace postižené diabetes má tedy výjimečnou lékařskou důležitost.
Hypertenze (či vysoký krevní tlak) je stav, který se v lidské populaci vyskytuje jako sekundární symptom různých jiných poruch, jako je stenosa renální arterie, pheochromocytom nebo endokrinní poruchy. Hypertenze se však vyskytuje také u mnoha pacientů, u nichž je kauzativní činidlo či porucha neznáma. „Esenciální“ hypertenze je sice často spojována s poruchami, jako je obezita, diabetes a hypertriglyceridemie, vztah mezi těmito poruchami však dosud nebyl objasněn. Kromě toho, mnoho pacientů vykazuje symptomy vysokého krevního tlaku, přestože se u nich jinak nevyskytují žádné další známky choroby nebo poruchy.
Je známo, že hypertenze může přímo vést k srdečnímu selhání, renálnímu selhání a mrtvici (mozkovému krvácení). Ty mohou u pacienta v krátké době vyvolat smrt. Hypertenze může také přispívat k vývoji aterosklerózy a koronární choroby. Takové stavy postupně oslabují pacienta a mohou mít za delší dobu za následek také smrt.
Přesná příčina esenciální hypertenze není známa, přestože je známa řada faktorů, o nichž se předpokládá, že iniciují tuto chorobu. Z těchto faktorů je možno uvést stres, nekontrolované emoce, neregulované uvolňování hormonů, reninu, angiotensinu, aldosteronového systému. Nadměrné zadržování soli a vody v důsledku špatné funkce ledvin, ztlušťování stěn a hypertrofie vaskulatury vedoucí ke konstrikci cév, a dále též genetické faktory.
K léčení esenciální hypertenze se přistupuje s tím, že se všechny tyto faktory berou v úvahu. Jako antihypertenziva byla tedy vyvinuta a na trh uvedena široká škála β-blokátorů, vasokonstriktorů, inhibitorů enzymu konvertujícího angiotensin apod. Léčení hypertenze za použití těchto sloučenin se ukázalo být prospěšné při prevenci smrti hrozící v krátké době, jako při prevenci srdečního selhání, ledvinového selhání a mozkového krvácení. Stále však přetrvává problém postupného dlouhodobého vývinu aterosklerózy nebo srdeční choroby v důsledku hypertenze. Přestože se tedy snižuje vysoký krevní tlak, základní příčina esenciální hypertenze na takové léčení nereaguje.
Hypertenze se spojuje se zvýšenou hladinou inzulínu v krvi, což je stav označovaný názvem hyperinzulinemie. Inzulín je peptidový hormon, jehož hlavním účinkem je zajišťování utilizace glukózy, syntézy proteinů a tvorby a ukládání neutrálních lipidů. Inzulín mj. také podporuje růst vaskulámích buněk a zvyšuje retenci sodíku v ledvinách. Posledně uvedených funkcí je možno dosáhnout bez ovlivnění hladiny glukózy a jedná se o známé příčiny hypertenze. Tak například růst periferní vaskulatury může mít za následek konstrikci periferních kapilár a retence sodíku zvyšuje objem krve. Snížení hladiny inzulínu může tedy u hyperinzulinemiků zabránit abnormálnímu vaskulámímu růstu a renální retenci sodíku, jež jsou způsobeny vysokou hladinou inzulínu, a tím snížit hypertenzi.
Srdeční hypertrofie je významným rizikovým faktorem vedoucím k náhlému úmrtí, infarktu myokardu a městnavému srdečnímu selhání. Tyto srdeční příhody jsou přinejmenším zčásti vyvolány zvýšenou susceptibilitou k poškození myokardu po ischemii a reperfuzi a může k ní dojít jak u ambulantních pacientů, tak u perioperačních případů. Snaha zabránit nebo minimalizovat nepříznivé perioperační účinky na myokard, zejména zabránit perioperačnímu infarktu myokardu nebo minimalizovat jeho rozsah, nebyla dosud v plné míře úspěšná. Jak nesrdeční, tak srdeční chirurgie je spojena s podstatným ohrožením infarktem myokardu nebo smrtí. Předpokládá se, že je ohroženo asi 7 milionů pacientů, kteří se podrobují nesrdečnímu chirurgickému zásahu, přičemž u některých typů operací dosahuje výskyt perioperační smrti a vážných srdečních komplikací až 20 až 25 %. Každý rok se kromě toho podrobí asi 400 tisíc pacientů koronárnímu chirurgickému zákroku by-pass a u této populace se výskyt perioperačního infarktu myokardu odhaduje na 5 % a četnost úmrtí na 1 až 2 %. V současné době není k dispozici žádná farmakoterapie snižující poškození srdeční tkáně perioperační ischemii myokardu nebo zvyšující srdeční rezistenci vůči ischemickým epizodám. Předpokládá se, že
-2CZ 289233 B6 taková terapie by mohla zabránit lidské životy a snížit hospitalizaci, zvýšit kvalitu života a snížit celkové náklady na zdravotní péči u vysoce ohrožených pacientů.
Produkce glukózy v játrech je prvek, který je důležitý pro zaměření terapie NIDDM. Játra jsou hlavním regulátorem hladiny glukózy v plazmě v post-absorptivním stavu (nalačno) a rychlost produkce glukózy v játrech u NIDDM pacientů je podstatně vyšší ve srovnání s normální populací. Podobně v postprandiálním stavu (po jídle), kdy mají játra úměrně menší vliv na celkový obsah glukózy v plazmě, je produkce glukózy v játrech u NIDDM pacientů abnormálně vysoká.
Glykogenolýza je důležitým cílem, na který se zaměřuje snaha přerušit produkci glukózy v játrech. Játra produkují glukózu glykogenolýzou (rozkladem glykogenu, který představuje polymer glukózy) a glukoneogenezí (syntézou glukózy z 2- a 3-uhlíkových prekurzorů). Několik sérií důkazů ukazuje, že glykogenolýza může představovat důležitý příspěvek k produkci glukózy v játrech v případě léčení NIDDM. Předně, u normálního postabsorptivního člověka vzniká podle odhadu asi 75 % glukózy v játrech glykogenolýzou. Kromě toho, pacienti postižení chorobami nerušujícími ukládání glykogenu v játrech, jako jsou pacienti postižení Hersovou chorobou (deficiencí glykogen fosforylázy), vykazují epizody hypoglykemie. Tato pozorování podporují předpoklad, že glykogenolýza může představovat významný způsob produkce glukózy v játrech.
Glykogenolýza je katalyzována v játrech, svalstvu a mozku tkáňové specifickými isoformami enzymu glykogen fosforylásy. Tento enzym štěpí glykogenovou makromolekulu tak, že uvolňuje glukóza-l-fosfát a novou zkrácenou glykogenovou makromolekulu. Až dosud byly oznámeny dva typy inhibitorů glykogen fosforylázy: glukóza a analogy glukózy [Martin J. L. et al., Biochemistry, 1991, 30, 10101] a kofein a jiné purinové analogy [Kasvinsky P. J. et al., J. Biol. Chem. 1978, 253, 3343 až 3351 a 9102 až 9106]. Tyto sloučeniny a inhibitory glykogen fosforylázy obecně jsou považovány za látky potenciálně použitelné při léčení NIDDM snižováním produkce glukózy v játrech a snižování glykemie [Blundell, T. B. et al., Diabetologia 199,35, Supi. 2, 569 až 576 a Martin et al., Biochemistry 1991, 30,10101].
Mechanismus nebo mechanismy, které jsou zodpovědné za poškození myokardu pozorované při ischemii a reperfuzi, nejsou plně objasněny. Bylo oznámeno [M. F. Allard et aL, Am. J. Physiol. 267, H66-H74, 1994], že „preischemická redukce glykogenu... je spojena se zlepšeným postischemickým funkčním zotavením levého ventrikula u hypertrofizovaného krysího srdce“.
Přestože tedy existuje celá řada druhů léčení hyperglykemie, hypercholesterolemie, hypertenze, hyperlipidemie, aterosklerózy a ischemie myokardu, pokračuje snaha vyvinout alternativní druhy léčení.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce I, která jsou inhibitory glykogen fosforylázy. Tyto sloučeniny jsou užitečné pro léčení diabetes, hyperglykemie, hypercholesterolemie, hypertenze, hyperinzulinemie, hyperlipidemie, aterosklerózy a ischemie myokardu.
Konkrétně jsou předmětem vynálezu indol-2-karboxamidy obecného vzorce I
-3CZ 289233 B6 (I)
kde přerušovaná čára představuje případnou vazbu;
A představuje skupinu obecného vzorce -C(H)=, -C(alkyl)= s 1 a 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -C(halogen)=, když přerušovaná čára představuje vazbu; nebo A představuje methylenskupinu nebo skupinu obecného vzorce -CH(alkyl)- s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, když přerušovaná čára nepředstavuje vazbu;
Ri, Rio a Rn představuje nezávisle vždy atom vodíku, atom halogenu, 4-, 6- nebo 7nitroskupinu, kyanoskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fluormethylskupinu, difluormethylskupinu nebo trifluormethylskupinu;
R2 představuje atom vodíku;
R3 představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku;
R4 představuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu, n-propylskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenylhydroxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkoxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2- nebo -3-ylaIkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-2- nebo -3ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž kruh obsažený v R4 je popřípadě substituován na uhlíku jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje pyrid-2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4— nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové Části, isoxazol-3-, -4— nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, isothiazol-3-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyridazin-3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrimidin-2-, -4-, -5- nebo -6-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazin-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo l,3,5-triazin-2-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický kruh obsažený ve zbytku R4 je popřípadě
-4CZ 289233 B6 substituován na uhlíku jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-Nnebo di-N,N-alkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylalkoxyskupinu se 2 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy uhlíku ve druhé alkoxylové části, benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo karbonyloxyskupinu, přičemž tato karbonyloxyskupinu je prostřednictvím vazby uhlík-uhlík připojena kfenylovému, thiazolylovému, imidazolylovému, ΙΗ-indolylovému, furylovému, pyrrolylovému, oxazolylovému, pyrazolylovému, isoxazolylovému, isothiazolylovému, pyridazinylovému, pyrimidinylovému, pyrazinylovému nebo 1,3,5-triazinylovému kruhu a přičemž kruh obsažený ve zbytku Rs je popřípadě substituován na atomu uhlíku jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu a trifluormethylskupinu;
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku; nebo
R5 a R7 dohromady popřípadě představují oxoskupinu;
Ré představuje karboxyskupinu, alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo skupinu vzorce C(O)NRgR9 nebo C(O)R]2, kde
Rg představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; a
R9 představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, methylen-perfluorovanou alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkylové části, fenylskupinu, pyridylskupinu, thienylskupinu, furylskupinu, pyrrolylskupinu, pyrrolidinylskupinu, oxazolylskupinu, thiazolylskupinu, imidazolylskupinu, pyrazolylskupinu, pyrazolylskupinu, pyrazolidinylskupinu, isoxazolylskupinu, isothiazolylskupinu, pyranylskupinu, piperidylskupinu, morfolinylskupinu, pyridazinylskupinu, pyrimidinylskupinu, pyrazinylskupinu, pyperazinylskupinu nebo 1,3,5-triazinylskupinu, přičemž kruh obsažený v R9 je připojen prostřednictvím vazby uhlík-dusík; nebo
R9 představuje alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, která je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových částí; nebo
R9 představuje alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, která je substituována jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího fenylskupinu, pyridylskupinu, furylskupinu, pyrrolylskupinu, pyrrolidinylskupinu, oxazolylskupinu, thiazolylskupinu, imidazolylskupinu, pyrazolylskupinu, pyrazolinylskupinu, pyrazolidinylskupinu, isoxazolylskupinu, isothiazolylskupinu, pyrazonylskupinu, pyridylskupinu, piperidylskupinu, morfolinylskupinu, pyridazinylskupinu, pyrimidinylskupinu, pyrazinylskupinu, piperazinylskupinu nebo 1,3,5-triazinylskupinu, přičemž nearomatický kruh obsahující atom dusíku, který je součástí R9, je popřípadě na atomu dusíku substituován jednou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylskupinou, benzoylskupinou nebo alkoxykarbonylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části a přičemž dále kruh obsažený v R9 je popřípadě na atomu uhlíku substituován jedním
-5CZ 289233 B6 substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu a mono-N- a di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, s tou podmínkou, že nezahrnuje kvatemizovaný atom dusíku a žádnou vazbu dusík-kyslík, dusík-dusík nebo dusík-halogen;
Ri2 představuje piperazin-l-ylskupinu, 4-alkylpiperazin-l-ylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, 4-formylpiperazin-l-ylskupinu, morfolinoskupinu, thiomorfolinoskupinu, 1-oxothiomorfolinoskupinu, thiomorfolinoskupinu, 1-oxothiomorfolinoskupinu, 1,1dioxothiomorfolinoskupinu, thiazolidin-3-ylskupinu, l-oxothiazolidin-3-ylskupinu, 1,1— dioxothiazolidin-3-ylskupinu, 2-alkoxykarbonylpyrrolidin-l-ylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, oxazolidin-3-ylskupinu nebo 2(R)-hydroxymethylpyrrolidin-lylskupinu; nebo
Ru představuje 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou oxazetidin-2-ylskupinu, 2-, 4— a/mono 5-mono- nebo -disubstituovanou oxazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mononebo -disubstituovanou thiazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l-oxothiazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l,l-dioxothiazolidin-3-ylskupinu, 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou pyrrolidin1-ylskupinu, 3-, 4- a/nebo 5-mono-, -di- nebo -trisubstituovanou piperidin-l-ylskupinu, 3-, 4- a/nebo 5-mono-, di- nebo -trisubstituovanou piperazin-l-ylskupinu, 3substituovanou azetidin-l-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou 1,2— oxazinan-2-yl-skupinu, 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou pyrazolidin-1ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubsitutovanou isoxazolidin-2-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- a/nebo -disubstituovanou isothiazolidin-2-ylskupinu, přičemž každý ze substituentů je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu,. mono-N- s di-N,Nalkylaminoskupinu $ 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, formylskupinu, oxoskupinu, hydroxyiminoskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, kařboxyskupinu, karbamoylskupinu, mono- N- a di-N,N-alkylkarbamoylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, alkoxyiminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, karboxyalkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylové části a hydroxyalkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku;
přičemž však pokud R4 představuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu nebo n-propylskupinu, potom R5 představuje hydroxyskupinu a/nebo pokud R5 a R7 představují atomy vodíku, potom R4 nepředstavuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu, n-propylskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části a Re představuje skupinu C(O)NRsR9 nebo C(O)Ri2 nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva zvolená ze souboru zahrnujícího
a) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je volný atom vodíku v karboxyskupině ve významu R$ nebo v karboxyskupině obsažené ve zbytku Rg, R nebo Rn nahrazen alkylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkanoyloxymethylskupinou se 2 až 12 atomy uhlíku v alkanoylové části, l-(alkanoyloxy)ethylskupínou se 4 až 9 atomy uhlíku, l-methyl-l-(alkanoyloxy)ethylskupinou s 5 až 10 atomy uhlíku, alkoxykarbonyloxymethylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku, 1(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou se 4 až 7 atomy uhlíku, l-methyl-l-(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou s 5 až 8 atomy uhlíku, N-(alkoxykarbonyl)aminomethylskupinou se 3 až 9 atomy
-6CZ 289233 B6 uhlíku, l-(N-(alkoxykarbonyl)amino)ethylskupinou se 4 až 10 atomy uhlíku, 3-ftalidylskupinou, 4-krotonolaktonylskupinou, gamma-butyrolakton-4-ylskupinou, di-N,N-alkylaminoalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z prvních dvou alkylových částí a 2 až 3 atomy uhlíku ve druhé alkylové části, jako je β-dimethylaminoethylskupina, karbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, Ν,Ν-dialkyIkarbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, piperidinoskupinou, pyrrolidinoskupinou nebo morfolinoalkylskupinou se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;
b) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je volný atom vodíku v hydroxyskupině ve významu R5 nahrazen alkanoyloxymethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, 1(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, 1-methyl-l(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, alkoxykarbonyloxymethylskupinou s 1 a 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, N-alkoxykarbonylaminomethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, sukcinoylskupinou, alkanoylskupinou s 1 až atomy uhlíku, α-aminoalkanoylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, arylactylskupinou a aaminoacylskupinou nebo α-aminoacyl-a-aminoacylskupinou, kde každý a-aminoacylový zbytek je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího zbytky přírodních L-aminokyselin vyskytující se v proteinech, P(O)(OH)2, -P(O)(Oalkyl)2 s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí a glykosylskupinu, což je zbytek vzniklý odstraněním hydroxyskupiny z poloacetalu sacharidu;
c) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je atom vodíku ve významu R2 nahrazen skupinou R-karbonyl, RO-karbonyl, NRR'-karbonyl, kde každý ze symbolů R a R' je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až atomy uhlíku a benzylskupinu nebo kde seskupení R-karbonyl představuje přírodní aaminoacylskupinu nebo α-aminoacyl-a-aminoacylskupinu, v níž oba a- aminoacylové zbytky jsou přírodní, skupinu vzorce -C(OH)-C(O)OY, kde Y představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, skupinu vzorce C(OYo)Yi, kde Yo představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a Yi představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, aminoalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každém z alkylových substituentů aminoskupiny, skupinu vzorce -C(Y2)Y3, kde Y2 představuje atom vodíku nebo methylskupinu a Y3 představuje mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, morfolinoskupinu, piperidin-l-ylskupinu nebo pyrrolidin-l-ylskupinu;
d) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je atom vodíku ve významu R3 nahrazen 1hydroxyalkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo 1-hydroxy-l-fenylmethylskupinou;
e) deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde R2 a R3 představují společně atom uhlíku, což má za následek vznik pětičlenného kruhu, přičemž připojovací atom uhlíku je popřípadě jednou nebo dvakrát nezávisle substituován atomem vodíku, alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku nebo fenylskupinou;
deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde R3 a R5 jsou spojeny za vzniku oxazolidinového kruhu a 2-uhlík oxazolidinového kruhu je popřípadě jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku a fenylskupinu; a deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde R5 je spojen s Rg nebo R9 za vzniku oxazolidin-4onového kruhu, přičemž 2-uhlík tohoto kruhu je popřípadě jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, fenylskupinu a oxoskupinu.
Předmětem vynálezu je dále také farmaceutický prostředek, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství indol-2-karboxamidu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli nebo proléčiva definovaného výše a farmaceuticky vhodný nosič.
První skupinu přednostních sloučenin tvoří sloučeniny obecného vzorce I, kde
Ri představuje skupinu 5-H, 5-halogen, 5-methyl nebo 5-kyano;
Rio a Rn představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atomem halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-alylkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1- -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v R4 je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje hydroxyskupinu;
Ré představuje skupinu vzorce C(O)NR8R9 nebo C(O)R]2; a
R7 představuje atom vodíku.
Z výše uvedené první skupiny přednostních sloučenin se dává větší přednost sloučeninám, které spadají do první skupiny zvláště přednostních sloučenin obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii; atom uhlíku b má (R) stereochemii;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž každý z výše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a fluoru;
Ré představuje skupinu C(O)NRgR9;
-8CZ 289233 B6
Rg představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až atomy uhlíku; a
R9 představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, pyridylskupinu, morfolinylskupinu, piperazinylskupinu, pyrrolidinylskupinu, piperidylskupinu, imidazolylskupinu a thiazolylskupinu.
Z první skupiny zvláště přednostních sloučenin se dává přednost konkrétním sloučeninám zvoleným ze souboru zahrnujícího:
[(lS)-((R)-hydroxydimethylkarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny, { (1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethyIkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5,6-dichlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny, {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-l H-indol2-karboxylové kyseliny, ((1S)—{(R)-hydroxy-[(2-hydroxyethyl)methylkarbamoyl]methyl }-2-fenylethyl)amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny, { (1 S)-[(R)-hydroxy(methy lpyridin-2-ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny, a ((1S)—{(R)-hydroxy-[(methyl(2-pyridin-2-ylethyl)karbamoyl]methyl }-2-fenylethyl)amid 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny.
Do první skupiny zvláště přednostních sloučenin spadají sloučeniny obecného vzorce I, kde
a) R] představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methylskupinu;
b) R] představuje 5-chlorskupinu, Rn představuje atom vodíku, Rio představuje 6-chlorskupinu, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methoxyskupinu;
c) Ri představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představuje atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methoxyskupinu;
d) Ri představuje 5-chlorskupinu, R]0 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje 2-(hydroxy)ethylskupiriu;
e) Ri představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje pyridin-2-yl-skupinu; a
f) Ri představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje 2-(pyridin-2-yl)ethylskupinu.
Z výše uvedené první skupiny přednostních sloučenin se také dává větší přednost sloučeninám, které spadají do druhé skupiny zvláště přednostních sloučenin obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii;
atom uhlíku b má (R) stereochemii;
-9CZ 289233 B6
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fiir-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž každý z výše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a fluoru;
Re představuje skupinu C(O)R]2; a
R12 představuje morfolinoskupinu, 4-alkylpiperazinyl-l-ylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, 3-substituovanou azetidin-l-ylskupinu, 3- a/nebo 4- mono- nebo -disubstituovanou pyrrolidin-l-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou isoxazolidin-2-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l,2-oxazinan-2ylskupinu, přičemž každý ze substituentů je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, aminoskupinu, mono-N- a di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, oxoskupinu, hydroxyiminoskupinu a alkoxyskupinu.
Zvýše uvedené druhé skupiny zvláště přednostních sloučenin se dává přednost konkrétním sloučeninám zvoleným ze souboru zahrnujícího:
hydrochlorid [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-methylpiperazin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny, [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(3-hydroxyazetidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny, ((1 S)-benzyl—(2R)-hydroxy-3-isoxazolidin-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indoI-2karboxylové kyseliny, ((lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-[l,2]oxazinan-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny, [(lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-((3S)-hydroxypyrrolidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny, [(1 S)-benzyl-3-((3 S,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny, [(1 S)-benzyl-3-((3R,4S>-dihydroxypyrrolidin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny a ((1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-morfolin-4-yI-3-oxopropyl)amid-5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny.
Do druhé skupiny zvláště přednostních sloučenin spadají sloučeniny obecného vzorce I, kde
a) Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Ři2 představuje 4-methylpiperazin-l-ylskupinu;
b) R] představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R, představuje benzylskupinu a Ři2 představuje 3-hydroxyazitidin-l-ylskupinu;
-10CZ 289233 B6
c) Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje isoxazolidin-2-yiskupinu;
d) Ri představuje 5-chlorskupinu, R)0 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Ř12 představuje (l,2)-oxazinan-2-ylskupinu;
e) Ri představuje 5-chlorskupinu, Rj0 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje 3(S)-hydroxypyrrolidin-l-ylskupinu;
f) Ri představuje 5-chlorskupinu, R]0 a Ru představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje (3S,4S)-dihydroxypynOlidin-l-ylskupinu;
g) Ri představuje R-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje (3R,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-ylskupinu; a
h) Ri představuje 5-chlorskupinu, Ri0 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R]2 představuje morfolinoskupinu.
Druhou skupinu přednostních sloučenin tvoří sloučeniny obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
R10 a Rn představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třeba substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu nebo kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v R4 je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje hydroxyskupinu;
R« představuje karboxyskupinu nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxylové části; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
-11GZ 289233 B6
Zvýše uvedené druhé skupiny přednostních sloučenin se dává větší přednost sloučeninám obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii; atom uhlíku b má (R) stereochemii;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku valkylové části, přičemž každý zvýše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku nebo fluoru;
Rio a Rn představují atomy vodíku;
Re představuje karboxyskupinu; a
R7 představuje atom vodíku.
Z bezprostředně předcházející skupiny se dává přednost sloučeninám obecného vzorce I, kde
Ri představuje 5-chlorskupinu;
Rio a Rn představují atomy vodíku; a
R4 představuje benzylskupinu.
Třetí skupinu přednostních sloučenin tvoří sloučeniny obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
R10 a Ri 1 představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-yl-alkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený vRj je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu,
-12CZ 289233 B6 trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
Rs představuje atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy ve druhé alkoxylové části nebo benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
Ré představuje karboxyskupinu nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxylové části; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
Čtvrtou skupinu přednostních sloučenin tvoří sloučeniny obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
R10 a R11 představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid-2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v Ř4 je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-N- nebo di-N,N-alkoylaminalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy uhlíku ve druhé alkoxylové části nebo benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
-13CZ 289233 B6
Ré představuje skupinu vzorce C(O)NReR9 nebo C(O)Ri2; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení chorob nebo stavů závislých na glykogen fosforyláze u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení hyperglykemie u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jsou léčiva pro léčení diabetes u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení hypercholesterolemie u savců.
Pod označením „léčení diabetes“ se zde rozumí také prevence nebo atenutace dlouhodobých komplikací, jako neuropatie, nefropatie, retinopatie nebo kataraktu.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení aterosklerózy u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky hodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení hyperinzulinemie u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení hypertenze u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro léčení hyperlipidemie u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou indol-2-karboxamidy obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva pro použití jako léčiva pro prevenci perioperačního ischemického poškození myokardu u savců.
Dalším aspektem tohoto vynálezu jsou inhibitory glykogen fosforylázy pro použití jako léčiva pro prevenci perioperačního ischemického poškození myokardu u savců.
Ještě dalším aspektem tohoto vynálezu je farmaceutický prostředek, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství indol-2-karboxamidu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli nebo proléčiva a farmaceuticky vhodný nosič.
V přednostním provedení se jedná o farmaceutický prostředek pro léčení chorob nebo stavů závislých na glykogen fosforyláze u savců, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje indol-2karboxamid obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodnou sůl nebo proléčivo v množství účinném pro léčení chorob nebo stavů závislých na glykogen fosforyláze a farmaceuticky vhodný nosič.
Dalším aspektem tohoto vynálezu je farmaceutický prostředek pro léčení diabetes, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství inhibitoru glykogen fosforylázy;
jedno nebo více antidiabetických činidel, jako jsou inzulín a analogy inzulínu, například LysPro inzulín; gLP-1 (7-37) (inzulinotropin) a gLP-1 (7-36)-NH2; sulfonylmočoviny a jejich analogy:
-14CZ 289233 B6 chlorpropamide, glibenclamide, tolbutamide, tolazamide, acetohexamide, glypizide(R), glimepiride, repaglinide, maglitinide; biguanidy: metformin, phenformin, buformin; a2antagonisty a imidazoliny: midaglizole, isaglidole, deriglidole, idazoxan, efaroxan, fluparoxan; jiné sekretatogy inzulínu: linogliride, A-4166; glitazony: ciglitazone, pioglitazone, englitazone, troglitazone, darglitazone, BLR49653; inhibitory oxidace mastných kyselin: clomoxir, etomoxir; inhibitory α-glukosidasy: acarbose, miglitol, emiglitate, voglibose, MDL-25,637, camiglibose, MDL-73,945; β-agonisty: BRL 35135, BRL 37344, Ro 16-8714, ICI D7114, CL 316,243; inhibitory fosfodiesterázy: L 386,398, Činidla snižující hladinu lipidů: benfluorex; antoobezitní činidla: fenfluramine; vanadátové a vanadové komplexy (například naglivan(R)) a paroxovanadové komplexy; antagonisty amylinu; antagonisty glukogonu; inhibotory glukoneogenese; analogy samotostatinu; antilipolytická činidla; kyselina nikotinová, acipimox; WAG 994; a popřípadě farmaceuticky vhodný nosič.
Přednostními farmaceutickými prostředky spadajícími do souboru bezprostředně definovaného výše jsou prostředky, které jsou inhibitor glykogen fosforylázy obsahující indol-2-karboxamid obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodnou sůl nebo proléčivo.
Dalším aspektem tohoto vynálezu je výše definovaný kombinovaný farmaceutický prostředek jako léčivo pro léčení diabetes u savců.
Pod označením „choroby nebo stavy závislé na glykogen fosforyláze“ se rozumějí poruchy, které jsou zprostředkovány, iniciovány nebo zachovávány úplně nebo zčásti prostřednictvím štěpení glykogenové makromolekuly enzymem glykogen fosforylázou za vzniku glukóza-1fosfátu a nové zkrácené glykogenové molekuly. U těchto poruch, pro něž je charakteristické zvýšení aktivity glykogen fosforylázy, je možno dosáhnout zlepšení snížením této aktivity. Jako příklady je možno uvést diabetes, hyperglykemii, hepercholesterolemii, hypertenzi, hyperinzulinemii, hyperlipidemii, aterosklerózu a ischemii myokardu.
Pod označením „inhibitor glykogen fosforylázy“ se rozumí jakákoliv látka nebo činidlo nebo jakákoliv kombinace látek a/nebo činidel, která snižuje, retarduje nebo odstraňuje enzymatické působení glykogen fosforylázy. V současné době známý enzymatický účinek glykogen fosforylázy spočívá v degradaci glykogenu katalýzou reverzibilní reakce glykogenové makromolekuly a anorganického fosfátu za vzniku glukóza-1-fosfátu a glykogenové makromolekuly, která je o jeden glukosylový zbytek kratší než původní makromolekula glykogenu (při reakci probíhající ve směru glykogenolýzy).
Pod označením „léčení“ se zde rozumí také preventivní (tj. profylaktické) a palliativní ošetření.
Pod označením „halogen“ se rozumí chlor, brom, jod nebo fluor.
Pod označením „alkylskupina“ se rozumí nasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Jako příklady vhodných alkyskupin (které berou v úvahu také vyznačenou délku řetězců) je možno uvést methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sek. butyl, terc.butyl, pentyl, isopentyl, hexyl a isohexyl.
Pod označením „alkoxyskupina“ se rozumějí nasycené přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny připojené prostřednictvím oxylového zbytku. Jako příklady vhodných alkoxyskupin (které berou v úvahu také značenou délku řetězců) je možno uvést methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, terc.butoxy, pentoxy, isopentoxy, hexoxy a isohexoxy.
Pod označením „farmaceuticky vhodné aniontové soli“ se rozumějí netoxické aniontové soli, které jako anionty obsahují například chloridové, bromidové, jodidové, sulfátové, hydrogensulfátové, fosfátové, acetátové, maleátové, fumarátové, oxalátové, laktátové, tartrátové,
-15CZ 289233 B6 citrátové, glukonátové, methansulfonátové a 4-toluensulfonátové anionty. Na výše uvedený výčet se vhodné anionty neomezují.
Pod označením „farmaceuticky vhodné kationtové soli“ se rozumějí netoxické kationtové soli, jako jsou soli sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, amoniové soli, soli protonovaného benzathinu (Ν,Ν'-dibenzylethylendiaminu), cholinu, ethanolaminu, diethanolaminu, ethylendiaminu, meglaminu (N-methylglukaminu), benethaminu (N-benzylfenethylaminu), piperazinu nebo tromethaminu (2-amino-2-hydroxymethyl-l ,3-propandiolu).
Pod označením „proléčiva“ se rozumějí sloučeniny, které jsou prekurzory léčiv, jež po podání uvolní léčivo in vivo prostřednictvím některého chemického nebo fyziologického procesu (proléčivo se například může při uvedení na fyziologickou hodnotu pH převést na požadovanou léčivovou formu). Proléčiva mohou například štěpením uvolnit odpovídající volnou kyselinu a jako neomezující příklady takových hydrolyzovatelných esterotvomých zbytků ve sloučeninách obecného vzorce podle vynálezu je možno uvést substituenty karboxylové kyseliny (například v případech, že Re představuje karboxyskupinu, nebo že R«, R nebo Ru obsahuje karboxyskupinu), přičemž volný atom vodíku je v této karboxyskupině nahrazen alkylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkanoyloxymethylskupinou se 2 až 12 atomy uhlíku v alkanoylové části, 1(alkanoyloxy)ethylskupinou se 4 až 9 atomy uhlíku, 1 -methyl-1 -<alkanoyloxy)ethylskupinou s5až 10 atomy uhlíku, alkoxykarbonyloxymethylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku, 1(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou se 4 až 7 atomy uhlíku, l-methyl-l-(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou s 5 až 8 atomy uhlíku, N-(alkoxykarbonyl)aminomethylskupinou se 3 až 9 atomy uhlíku, l-(N-(alkoxykarbonyl)amino)ethylskupinou se 4 až 10 atomy uhlíku, 3ftalidylskupinou, 4-krotonolaktonylskupinou, gamma-butyrolakton-4-ylskupinou, di-N,Nalkylaminoalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z prvních dvou alkylových částí a 2 až 3 atomy uhlíku ve druhé alkylové části (jako je β-dimethylaminoethylskupina), karbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, Ν,Ν-dialkylkarbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, piperidinoskupinou, pyrrolidinoskupinou nebo morfolinoalkylskupinou se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylové části.
Jako další příklady proléčiv je možno uvést sloučeniny uvolňující alkohol obecného vzorce I. V takových proléčivech je volný atom vodíku hydroxylového substituentu (například ve sloučeninách, kde R5 představuje hydroxyskupinu) nahrazen alkanoyloxymethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, l-(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, l-methyl-l-(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, alkoxykarbonyloxymethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, Nalkoxykarbonylaminomethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, sukcinoylskupinou, alkanoylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, α-aminoalkanoylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, arylactylskupinou a α-aminoacylskupinou nebo a-aminoacyl-a-aminoacylskupinou, kde každý α-amionoacylový zbytek je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího zbytky přírodních L-aminokyselin vyskytující se v proteinech, P(O)(OH)2, -P(O)(Oalkyl)2 s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí a glykosylskupinu (tj. zbytek vzniklý odstraněním hydroxyskupiny z poloacetalu sacharidu).
Jako další neomezující příklady proléčiv je možno uvést deriváty obecného vzorce I, v nichž je vodík ve významu R2 nahrazen skupinou R-karbonyl, RO-karbonyl, NRR'-karbonyl, kde každý ze symbolů R a R' je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku a benzylskupinu nebo kde seskupení Rkarbonyl představuje přírodní α-aminoacylskupinu nebo α-aminoacy-a-aminoacylskupinu (kde oba α-aminoacylové zbytky jsou přírodní, skupinu vzorce -C(OH)C(O)OY, kde Y představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo benzylskupinu, skupinu vzorce C(OY)oYi, kde Yo představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a Yi představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku karboxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, aminoalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku
-16CZ 289233 B6 v každém z alkylových substituentů aminoskupiny, skupinu vzorce -C(Y2)Y3, kde Y2 představuje atom vodíku nebo methylskupinu a Y3 představuje mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, morfolinoskupinu, piperidin-l-ylskupinu nebo pyrrolidin-l-ylskupinu.
Jako další neomezující příklad proléčiv je možno uvést deriváty obecného vzorce I nesoucí v poloze R3 hydrolyzovatelný zbytek, které při hydrolýze uvolní sloučeniny obecného vzorce I, kde R3 představuje volný atom vodíku. Jako hydrolyzovatelné zbytky v poloze R3 je možno uvést 1-hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a 1-hydroxy-l-fenylmethylskupinu.
Jako další neomezující příklady proléčiv je možno uvést cyklické struktury, jako jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde R2 a R3 představují společně atom uhlíku, což má za následek vznik pětičlenného kruhu. Připojovací atom uhlíku může být jednou nebo dvakrát nezávisle substituován atomem vodíku, alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku nebo fenylskupinou. Alternativně mohou být R3 a R5 spojeny za vzniku oxazolidinového kruhu a 2-uhlík oxazolidinového kruhu může být jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku a fenylskupinu. Alternativně mohou proléčiva sloučenin obecného vzorce I zahrnovat sloučeniny, kde R5 je spojen s Rg nebo R9 za vzniku oxazolidin-4-onového kruhu, přičemž 2-uhlík tohoto kruhu může být jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, fenylskupinu a oxoskupinu.
Pod označením „rozpouštědlo, které je inertní vůči reakci“ nebo „inertní rozpouštědlo“ se rozumí rozpouštědlo, které neinterferuje s výchozími látkami, reakčními činidly, meziprodukty nebo produkty s následným nepříznivým ovlivněním výtěžků požadovaného produktu.
Odborníkům v tomto oboru je zřejmé, že některé sloučeniny podle vynálezu budou obsahovat jeden nebo více atomů, které se mohou vyskytovat v určité specifické stereochemické nebo geometrické konfiguraci, což povede ke vzniku stereoizomerů a konfiguračních izomerů. Všechny tyto izomery a jejich směsi spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Kromě toho spadají do rozsahu tohoto vynálezu také hydráty sloučenin podle vynálezu.
Odborníkům v tomto oboru je dále také zřejmé, že určité kombinace substituentů obsahujících heteroatom, které jsou zahrnuty v definici sloučenin podle vynálezu, charakterizují sloučeniny, které budou za fyziologických podmínek méně stálé (například sloučeniny obsahující acetalové nebo aminalové vazby). Takovým sloučeninám se přirozeně dává menší přednost.
V mono-N- nebo di-N,N-alkylových seskupeních, kde alkylové části obsahují specifikovaný počet atomů uhlíku, jsou jednotlivé alkylové části na sobě nezávislé.
Další znaky a výhody vynálezu jsou zřejmé z dále uvedeného podrobného popisu a nároků.
Sloučeniny obecného vzorce I je možno vyrobit způsoby, které jsou o sobě známé. Objasnění těchto způsobů je uvedeno dále v reakčních schématech.
-17CZ 289233 B6
Reakční schéma I
-18CZ 289233 B6
Reakční schéma II
hydrolytické podmínky
COOH
KiQ Rn
-19CZ 289233 B6
Reakční schéma III
-20CZ 289233 B6
Reakční schéma IV
Ri2H
R8R9NH
P
-21CZ 289233 B6
Reakční schéma V
XXX
TX
es tec
r3
XXXII
> r3 / XX
CH2OH
I r3
XXXIII
-22CZ 289233 B6
Reakční schéma VI
COOH
XLII
1. PhCHO, redukce , .. - — — »
2. NaCNBH3/R3CH0 . vyčerpávající hydroge- Ř3 naceHg, Pd^C
COOH
XXX
-23CZ 289233 B6
-24CZ 289233 B6
Reakční schéma VIII
-25CZ 289233 B6
Reakční schéma IX
LXVHl
Reakční schéma X
I r3
LXX
LX IV
LXXIII
Podle reakčního schématu I se mohou sloučeniny obecného vzorce I, kde Rb Rw, Rn, A, R2, R3, R4, R5, Re, R7 mají výše uvedený význam, připravovat kteiýmkoliv ze dvou dále uvedených obecných postupů. Při prvním postupu se sloučenina obecného vzorce I může vyrobit kopulací příslušné indol-2-karboxylové kyseliny nebo indolin-2-karboxylové kyseliny obecného vzorce I s příslušným aminem obecného vzorce III (tj. acylací aminu obecného vzorce III). Při druhém
-26CZ 289233 B6 z těchto postupů se sloučenina obecného vzorce I může připravit kopulací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV (tj. sloučeniny obecného vzorce I, kde Ré představuje karboxyskupinu) s příslušným alkoholem obecného vzorce RgR9NH nebo aminem nebo alkoholem obecného vzorce R12H, kde Rs, R9 a RI2 mají výše uvedený význam (tj. acylací tohoto aminu nebo alkoholu).
Obvykle se přitom postupuje tak, že se sloučenina vzorce II smíchá se sloučeninou vzorce III (nebo se sloučenina vzorce IV smíchá s příslušným aminem nebo alkoholem (například vzorce Ri2H nebo RgR9NH) za přítomnosti vhodného kopulačního činidla. Vhodným kopulačním činidlem je činidlo, které převádí karboxylovou kyselinu na reaktivní látku, která je schopna reakcí s aminem nebo alkoholem vytvořit amidovou nebo esterovou vazbu.
Kopulačním činidlem může být reakční činidlo, které je schopno při smísení karboxylové kyseliny s aminem nebo alkoholem vyvolat jednostupňovou kondenzaci těchto látek. Pokud se má kyselina kondenzovat s alkoholem, přednostně se jako reakčního rozpouštědla používá velkého nadbytku tohoto alkoholu, popřípadě za přidání 1,0 až 1,5 ekvivalentu přidaného dimethylaminopyridinu. Jako příklady kopulačních činidel je možno uvést kombinaci 1—(3— dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu s hydroxybenzothiazolem (DEC/HBT), karbonyldiimidazol, kombinaci dicyklohexylkarbodiimidu s hydroxybenzotriazolem (HBT), a 2ethoxy-l-ethoxykarbonyl-l,2-dihydrochinolin (EEDQ), kombinaci karbonyldiimidazolu a HBT a diethylfosforylkyanid. Kopulace se provádí v inertním rozpouštědle, přednostně v aprotickém rozpouštědle, při teplotě asi -20 do asi 50 °C, po dobu od asi 1 do asi 48 hodin. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést acetonitril, dichlormethan, dimethylformamid a chloroform. Jako příklad vhodného kopulačního postupu je možno uvést postup A vedený v tomto popisu těsně před příklady provedení.
Jako kopulačního činidla se také může použít činidla převádějícího karboxylovou kyselinu na aktivovaný meziprodukt, který se izoluje a/nebo který se vytvoří v prvním stupni, a potom se tento meziprodukt nechá reagovat ve druhém stupni s příslušným aminem nebo alkoholem. Jako příklady takových kondenzačních činidel je možno uvést thionylchlorid a oxalylchlorid (těmito činidly se karboxylová kyselina převádí na chlorid kyseliny), fluorid kyseliny kyanurové (tímto činidlem se karboxylová kyselina převádí na fluorid kyseliny) nebo alkylchlorformiát, jako je isobutyl- nebo isopropenylchlorformiát (za přítomnosti terciární aminové báze) (tímto činidlem se karboxylová kyseliny převádí na směsný anhydrid karboxylové kyseliny). Pokud se jako kopulačního činidla používá oxalylchloridu, s výhodou se jako pomocného rozpouštědla, které se přidává k jinému rozpouštědlu (jako je například dichlormethan), spolupoužívá malého množství dimethylformamidu za účelem katalýzy tvorby chloridu kyseliny. Používání těchto kopulačních činidel a vhodná volba rozpouštědel a teplot leží v rozsahu zkušeností odborníků v tomto oboru a lze je také snadno určit na základě literárních údajů. Tyto a jiné příkladné podmínky, které jsou vhodné pro kopulace karboxylových kyselin, jsou popsány v publikaci Houben-Weyl, sv. XV, část Π, E. Winsch, Ed., g. Thieme Verlag, 174, Stuttgart a M. Bodansky, Principles of Peptide Synthesis, and Biology (ed. E. gross a J. Meienhofer), sv. 1 až 5 (Academie Press, NY, USA, 1979 až 1983).
Sloučeniny obecného vzorce IV, kde R,, R10, R11, A, R2, R3, R4, R5 a R7 mají výše uvedený význam, je možno připravit z odpovídajícího esteru vzorce V (tj. sloučeniny obecného vzorce I, kde Re představuje alkoxykarbonylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo benzyloxykarbonylskupinu) hydrolýzou vodnou alkálií při teplotě asi -20 °C do asi 100 °C, obvykle při teplotě asi 20 °C, po dobu od asi 30 minut do asi 24 hodin.
Alternativně se sloučeniny obecného vzorce IV připravují tak, že se indolkarboxylová kyselina obecného vzorce II aktivuje kopulačním činidlem (popsaným výše) a vzniklý aktivovaný meziprodukt (jako je chlorid kyseliny fluorid kyseliny nebo směsný anhydrid) se potom nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce III, kde R3, Ř4, R5 a R7 mají význam uvedený výše a Ró představuje karboxyskupinu, ve vhodném rozpouštědle za přítomnosti vodné báze. Jako vhodná
-27CZ 289233 B6 rozpouštědla je možno uvést vodu, methanol a jejich směsi, společně s pomocným rozpouštědlem, jako je dichlormethan, tetrahydrofuran nebo dioxan. Z vhodných bází je možno uvést hydroxid sodný, draselný nebo lithný, hydrogenuhličitan sodný nebo draselný, uhličitan sodný nebo draselný nebo uhličitan draselný spolu s tetrabutylamoniumbromidem (1 ekvivalent) v dostatečném množství pro spotřebování kyseliny uvolněné při reakci (obvykle v takovém množství aby se hodnota pH reakční směsi udržela nad 8). Báze se může přidávat po částech spolu s aktivovaným meziproduktem, aby se zajistila vhodná regulace pH reakční směsi. Reakce se obvykle provádí při teplotě v rozmezí od 20 do 50 °C. Izolační postupy může odborník v tomto oboru individuálně navrhnout tak, aby se odstranily nečistoty. Obvykle se přitom odstraňují s vodou mísitelná pomocná rozpouštědla odpařováním, nečistoty se extrahují organickými rozpouštědly při vysoké hodnotě pH, pomoc se provede okyselení na nízkou hodnotu pH (1 až 2) a požadovaný produkt se odfiltruje nebo extrahuje pomocí vhodného rozpouštědla, jako je ethylacetát nebo dichlormethan.
Sloučeninu obecného vzorce V je možno připravit kopulací vhodné sloučeniny obecného vzorce III, kde Rý představuje alkoxykarbonylskupinu s vhodnou sloučeninou obecného vzorce Π za použití postupu, který je analogický výše popsanému postupu (například za použití postupu A).
Alternativně se mohou sloučeniny obecného vzorce I obsahující atom síry v oxidačním stavu sulfoxidu nebo sulfonu připravovat zodpovídajících sloučenin obecného vzorce I obsahujících atom síry v neoxidované formě působením vhodného oxidačního činidla, jako například mchlorperoxobenzoové kyseliny v dichlormethanu při teplotě od asi 0 do asi 25 °C po dobu od asi 1 do asi 48 hodin (pro konverzi na sulfoxidový oxidační stav je třeba použít asi 1 až asi 1,3 ekvivalentu kyseliny m-chlorperoxobenzoové a pro konverzi na sulfonový oxidační stav je zapotřebí použít této látky v množství vyšším než jsou asi 2 ekvivalenty.
Sloučeniny obecného vzorce I, které jsou v aminoalkoxyskupině ve zbytku R5 mono- nebo dialkylovány, je možno alternativně připravit z odpovídajících sloučenin obecného vzorce I, kde Rj představuje aminoalkoxyskupinu, monoalkylací nebo dialkylací aminoskupiny ve zbytku R5 za vzniku požadovaných sloučenin obecného vzorce I. Taková mono- nebo dialkylace se může provádět tak, že se na Rs-aminoalkoxysloučeninu působí jedním ekvivalentem vhodné karbonylové sloučeniny (v případě monoalkylace) nebo více než dvěma ekvivalenty vhodné karbonylové sloučeniny (v případě dialkylace) a vhodným redukčním činidlem ve vhodném rozpouštědle. Vhodné redukční podmínky zahrnují použití natriumkyanoborhydridu nebo tetrahydroboritanu sodného v methanolu nebo ethanolu nebo použití vodíku za přítomnosti hydrogenačního katalyzátoru (jako je palladium na uhlíku) v polárním rozpouštědle, jako je voda, methanol nebo ethanol, při teplotě od asi 0 do asi 60 °C po dobu 1 až 48 hodin.
Sloučeniny obecného vzorce I, kde R5 představuje alkanoyloxyskupinu (RCOO-), je možno alternativně získat O-acylací příslušné sloučeniny obecného vzorce I vhodným chloridem kyseliny nebo jiným aktivovaným derivátem kyseliny, popřípadě za přítomnosti vhodné báze (například terciární aminové báze, jako je trialkylamin nebo pyridin), přednostně v aprotickém rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran nebo dichlormethan, při teplotě od asi 0 do asi 50 °C po dobu od asi 0,5 do asi 48 hodin.
Sloučeniny obecného vzorce I, kde R5 a R7 dohromady představují oxoskupinu, je možno alternativně vyrobit oxidací odpovídající sloučeniny obecného vzorce I, například sloučeniny, kde R5 představuje hydroxyskupinu a R7 představuje atom vodíku, působením vhodného oxidačního činidla. Jako příklady vhodných oxidačních činidel je možno uvést Dess-Martinovo činidlo v dichlormethanu, karbodiimid a dimethylsulfoxid a kyselý katalyzátor (PfitznerMoffttovy podmínky nebo jejich modifikace, jako je použití vodorozpustného kabodiimidu) nebo reakce Swemova typu (například za použití směsi oxalylchloridu, dimethylsulfoxidu a triethylaminu). Sloučeniny obecného vzorce I obsahující jiné funkční skupiny citlivé k oxidaci je přitom možno chránit vhodnými chránícími skupinami, které se později odštěpí.
-28CZ 289233 B6
Některé preparativní metody uvedené v tomto popisu mohou vyžadovat chránění vzdálených funkčních skupin (tj. primárních a sekundárních aminoskupin a dále též karboxyskupin) vprekurzorech sloučenin obecného vzorce I. Potřeba takového chránění se může měnit v závislosti na druhu vzdálené funkční skupiny a podmínkách použitých při přípravě. Potřebu takového chránění může odborník v tomto oboru snadno určit. Používání metod zavádění/odštěpování chránících skupin leží v rozsahu zkušeností běžného odborníka. Obecný popis chránících skupin a jejich používání je možno nalézt v publikaci T. W. greene, Protective groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, USA, 1991.
Tak například některé ze sloučenin obecného vzorce I v reakčním schématu I obsahují primární a sekundární aminoskupiny a karboxyskupiny v části molekuly derfmované symboly R5 nebo R^. Tyto skupiny mohou interferovat se zamýšlenou kopulační reakcí znázorněnou v reakčním schématu I, pokud se meziprodukt obecného vzorce III nebo amin obecného vzorce R^H nebo R8R9NH ponechá bez ochrany. Během kopulační reakce znázorněné v reakčním schématu I může být tedy primární nebo sekundární aminová funkční skupina chráněna vhodnou chránící skupinou, pokud je přítomna ve zbytcích Rs nebo R« meziprodukt obecného vzorce ΙΠ nebo v aminu (vzorce RgRgNH nebo R12H). Jako produkt takové kopulační reakce se získá sloučenina obecného vzorce I obsahující chránící skupinu. Přítomná chránící skupina se může odštěpit v následném stupni za vzniku sloučeniny obecného vzorce I. Vhodné chránící skupiny pro chránění aminoskupiny a karboxyskupiny zahrnují chránící skupiny, kterých se běžně používá při syntéze peptidů (jako je N-terc.butoxykarbonylskupina, N-benzyloxykarbonylskupina a 9fluorenylmethylenoxykarbonylskupina, v případě aminů a nižší alkylesterová skupina nebo benzylesterová skupina, v případě karboxylových kyselin) a které nejsou chemicky reaktivní za výše popsaných kopulačních podmínek (tyto podmínky jsou také uvedeny v postupu A, který bezprostředně předchází příkladové části) a které lze odstranit bez chemického pozměnění jiných funkčních skupin ve sloučenině obecného vzorce I.
Výchozí indol-2-karboxylové kyseliny a indolin-2-karboxylové kyseliny, kterých se používá při reakci znázorněné v reakčním schématu I, jsou buď obchodně dostupné, nebo známé z dosavadního stavu techniky (dosavadní stav techniky je v rozsáhlé míře publikován) nebo jsou dostupné běžnými syntetickými metodami. Tak například podle reakčního schématu II je možno indolester obecného vzorce VII vyrobit ze sloučeniny obecného vzorce VI (kde Q se volí tak, aby se získal zbytek A definovaný výše) Fischerovou syntézou indolů (viz The Fisher Indole Synthesis, Robinson B (Wiley, New York, USA, 1982), po níž se provede zmýdelnění výsledného indolesteru obecného vzorce VII za vzniku odpovídající kyseliny obecného vzorce VIII. Výchozí arylhydrazon je možno připravit kondenzací snadno dostupného hydrazinu s příslušným karbonylovým derivátem nebo Japp-Klingemanovou reakcí (viz Organic Reactions, Philips R. R., 1959,10,143).
Indol-2-karboxylová kyselina obecného vzorce VIIIA se může připravit kondenzací 0methylnitrosloučeniny obecného vzorce IX s esterem kyseliny šťavelové, načež se vzniklý indolester obecného vzorce X redukuje na nitroskupině a vzniklý produkt se hydrolyzuje.
Tento třístupňový postup je znám jako Reissertova syntéza indolů (Reissert, Chemische Berichte 1897, 30, 1030). Podmínky vhodné pro provedení této sekvence a příslušné odkazy na další literaturu jsou uvedeny v Kermack, et al., J. Chem. Soc. 1921, 119, 1602; Cannon et al., J. Med. Chem. 1981, 24, 238; Julian et al., Heterocyclic Compounds, sv. 3 (Wiley, New York, USA, 1962, R. C. Elderfield, ed.) str. 18. Příklad specifického provedení této sekvence je uveden v příkladech 10A až 10C uvedených dále.
3-Halogen-5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny je také možno vyrobit halogenací 5chlor-lH-indol-2-karboxylových kyselin.
Alternativně (vzhledem k reakčnímu schématu II) je možno substituované indoliny obecného vzorce XIV připravit redukcí odpovídajících indolů obecného vzorce XV redukčním činidlem,
-29CZ 289233 B6 jako je hořčík v methanolu, při teplotě od asi 25 do asi 65 °C během asi 1 až asi 48 hodin (viz reakční schéma III).
Indolinkarboxylové kyseliny obecného vzorce XVI se připravují zmýdelnění odpovídajícího esteru obecného vzorce XVII (viz reakční schéma III). Sloučeniny obecného vzorce XVII se připravují redukcí odpovídajících indolesterů obecného vzorce VII redukčním činidlem, jako je hořčík v methanolu, způsobem popsaným výše v souvislosti s konverzí sloučenin obecného vzorce XV na sloučeniny obecného vzorce XTV.
V následujících odstavcích je popsána příprava různých aminů, kterých se používá při reakcích znázorněných ve výše uvedených reakčních schématech.
Podle reakčního schématu IV se sloučeniny obecného vzorce XXII (aminy obecného vzorce III z reakčního schématu I, kde R5 představuje hydroxyskupinu, R7 představuje atom vodíku a R« představuje esterovou skupinu) nebo sloučeniny obecného vzorce XXVI (R« představuje skupinu vzorce C(O)NR«R9 nebo C(O)Ri2) připravují z N-chráněného (chránění je znázorněno skupinou Pt) aldehydu obecného vzorce XX. Na aldehyd vzorce XX nebo na adukt aldehydu vzorce XX s hydrogensiřičitanem sodným se působí kyanidem draselným nebo kyanidem sodným ve vodném roztoku za přítomnosti pomocného rozpouštědla, jako je dioxan nebo ethylacetát, při teplotě od asi 0 do asi 50 °C, za vzniku kyanhydridu obecného vzorce XXI. Na tento kyanhydrid se působí alkoholem (například alkanolem s 1 až 6 atomy uhlíku, jako methanolem) a silně kyselým katalyzátorem, jako je chlorovodík, při teplotě od asi 0 do asi 50 °C a potom se k reakční směsi popřípadě přidá voda. Je-li stále ještě přítomna chránící skupina PT, odštěpí se vhodnou deprotekční metodou, a tak se získá sloučenina obecného vzorce XXII. Je-li například N-chránicí skupinou Pt ve sloučenině vzorce XX terc.butoxykarbonylskupina (t-Boc) vznikne sloučenina vzorce XXIII přímo ze sloučeniny vzorce XXI a přídavek vody není nutný. Sloučenina vzorce XXII může být na dusíku chráněna vhodnou chránící skupinou, čímž vznikne sloučenina vzorce XXIII. Potom se může provést hydrolýza esteru vodnou alkálií při teplotě od 0 do asi 50 °C v rozpouštědle, které je inertní vůči této reakci, a tak se získá odpovídající hydroxykyselina obecného vzorce XXIV. Sloučenina vzorce XXIV se kopuluje (analogickým postupem vzhledem ke kopulačnímu postupu popsanému v reakčním schématu I) s příslušnou aminosloučeninou obecného vzorce RgR9NH nebo Ri2H. Sloučenina obecného vzorce XXV, která vznikne při této reakci, se potom zbaví chránící skupiny za vzniku sloučeniny obecného vzorce XXVI (tj. sloučeniny obecného vzorce III, kde R5 představuje hydroxyskupinu, R7 představuje atom vodíku a R^ představuje skupinu vzorce C(O)Ri2 nebo C(O)NR8R9. Příklad konverze kyanhydridu obecného vzorce XXI na odpovídající methylester obecného vzorce ΧΧΠ s odštěpením chránící skupiny t-Boc, je uveden v příkladu la PCT publikace WO/9325574. Jiné příklady reakcí, při nichž se kyanhydrid převádí na nižší alkylestery obecného vzorce XXIII, je možno nalézt v US patentu č. 4 814 342 a EP 0 438 233.
Některé sloučeniny obecného vzorce I jsou stereoizomerické díky stereochemické konfiguraci na atomech uhlíku označených písmeny a a b. Odborník v tomto oboru může vyrobit meziprodukty obecného vzorce XXIII a XXVI s požadovanou stereochemií podle reakčního schématu IV. Pak například aldehyd vzorce XX je dostupný v obou enantiomerických formách (stereochemie na a) postupy popsanými v literatuře, které jsou uvedeny dále (viz reakční schéma V). Kyanhydrid obecného vzorce XXI je možno připravit ze sloučeniny obecného vzorce XX působením kyanidu sodného nebo draselného, jak je to popsáno výše za současného zachování stereochemie na atomu uhlíku a. Tak se získá směs stereoizomerů na atomu uhlíku b.
Pro oddělení izomerů nebo čištění jednoho z izomerů je v této fázi možno použít krystalizace.
Příprava sloučeniny vzorce XXI, kde PT představuje BOC, R3 představuje atom vodíku, R4 představuje benzylskupinu, stereochemie na atomu uhlíku a je (S) a na atomu uhlíku b (R) za použití výše uvedeného postupu, jakož i čištění překiystalováním, jsou popsány v Biochemistry 1992,31,8125 až 8141.
-30CZ 289233 B6
Separace izomerů se alternativně může provádět chromatografickými nebo rekrystalizačními technikami po převedení sloučeniny obecného vzorce XXI (směsi izomerů) na sloučeninu obecného vzorce XXII, ΧΧΙΠ, XXIV, XXV, XXVI, V, IV nebo I postupy a/nebo sekvencemi postupů, které jsou charakterizovány v tomto popisu. Meziprodukty obecného vzorce XXI se specifickou stereochemii na atomech uhlíku a a b je možno převést na meziprodukty obecného vzorce XXVI za současného zachování této stereochemie reakcí s alkoholem a silně kyselým katalyzátorem a následným případným přidáním vody, jak to bylo popsáno výše.
Požadovaný izomer sloučeniny obecného vzorce XXI je alternativně možno získat také derivatizací meziproduktu obecného vzorce XXI a chromatografickou separací diastereomemích derivátů (například za použití trimethylsilylchloridu (TMS) nebo terc.butyldimethylsilylchloridu (TBDMS), přičemž se získají O-TMS nebo O-TBDMS deriváty). Separace diastereomerických derivátů obecného vzorce XXI je například popsány v příkladu 24D uvedeném dále. Silylový derivát meziproduktu obecného vzorce XXI s jedinou stereoizomemí formou na atomech uhlíku a a a b se za zachování stereochemie převede na meziprodukt obecného vzorce ΧΧΠ (pokud se silylskupina neodštěpí v tomto stupni, odštěpí se dodatečně vhodnou metodou, jako například působením tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu) způsobem popsaným výše v souvislosti s konverzí sloučenin obecného vzorce XXI na sloučeniny obecného vzorce XXII (viz příklad 24C v tomto popisu, kde je ilustrována konverze silylového derivátu sloučeniny obecného vzorce XXI na jediný izomer sloučeniny obecného vzorce XXII za současného odštěpení silylové skupiny).
Podle reakčního schématu V se aldehydy obecného vzorce XX (výchozí látky pro postup znázorněný v reakčním schématu IV) připraví z odpovídajících aminokyselin obecného vzorce XXX. Aminokyselina vzorce XXX se přitom chrání na dusíku chránící skupinou Pt, jako například skupinou BOC. Chráněná sloučenina se esterifikuje alkoholem a převede na ester, přednostně methyl- nebo ethylester sloučeniny obecného vzorce XXXI. To se může provést reakcí sloučeniny vzorce XXX s methyl- nebo ethyljodidem za přítomnosti vhodné báze (například uhličitanu draselného v polárním rozpouštědlem, jako je dimethylformamid. Sloučenina vzorce XXXI se redukuje, například diisobutylaluminiumhydridem v hexanu nebo toluenu nebo jejich směsi, při teplotě od asi -79 do asi -50 °C s následným rozložením reakční směsi methanolem při -78 °C, jak je to popsáno v J. Med. Chem., 1985, 28, 1779 až 1790, za vzniku aldehydu obecného vzorce XX. Alternativně (není znázorněno v reakčním schématu V) je možno analogické N-methoxymethylamidy (odpovídající sloučenině obecného vzorce XXXI, přičemž však alkoholový substituent esteru je nahrazen skupinou N(OMe)Me) připravit ze sloučeniny obecného vzorce XXXI, Ν,Ο-dimethylhydroxylaminu a vhodného kopulačního činidla (například l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu (DEC) tak, jako při postupu A. Výsledná sloučenina se redukuje, například lithiumaluminiumhydridem v rozpouštědle, které je inertní vůči této reakci, jako je ether nebo tetrahydrofuran, při teplotě asi od 0 do asi 25 °C, a tak se získá aldehyd vzorce XX. Tato dvoustupňová metoda je obecně použitelná pro konverzi N-chráněných α-aminokyselin na aldehydy obecného vzorce XX (Fehrentz a Castro, Synthesis 1983,676 až 678).
Alternativně lze aldehydy obecného vzorce XX připravit oxidací chráněných aminoalkoholů obecného vzorce XXXIII, například za použití komplexu pyridin/oxid sírový, při teplotě od asi -10 do asi 40 °C v rozpouštědle, které je inertní vůči této reakci, jako je s výhodou dimethylsulfoxid. Chráněné aminoalkoholy obecného vzorce ΧΧΧΠΙ jsou buď obecně dostupné, neboje lze vyrobit chráněním aminoalkoholů obecného vzorce XXXII. Aminoalkoholy vzorce XXXII se připravují redukcí aminokyselin vzorce XXX. Tato redukce se provádí tak, že se na sloučeniny vzorce XXX působí lithiumaluminiumhydridem způsobem popsaným v Dickman et al., Organic Syntheses; Wiley, New York, 1990; kolekt. sv. VII, str. 530 nebo působením směsi kyseliny sírové a tetrahydroboritanu sodného způsobem popsaným v Abiko a Masamune, Tetrahedron Lett. 1992, 233, 5517 až 5518 nebo také působením směsi tetrahydroboritanu sodného a jodu způsobem popsaným v McKennon a Meyers, J. Org. Chem. 1993, 58, 3568 až 3571. V posledně
-31CZ 289233 B6 uvedené citaci je také uveden přehled jiných vhodných postupů pro konverzi aminokyselin vzorce XXX na aminoalkoholy vzorce XXXII.
Sloučeniny obecného vzorce XXX, kterých se používá při postupu znázorněném vreakčním schématu V, je možno vyrobit podle reakčního schématu VI následujícím způsobem. Nejprve se připraví aminokyseliny obecného vzorce XLI N-alkylací chráněných (PT) aminokyselin obecného vzorce XL za použit vhodné báze a alkylačního činidla. Specifické postupy vhodné pro tuto alkylaci jsou uvedeny v publikaci Benoiton, Can. J. Chem. 1977, 55, 906 až 910 a Hansen, J. Org. Chem. 1985, 50, 945 až 950. Pokud R3 představuje methylskupinu, může se například použít natriumhydridu a methyljodidu v tetrahydrofuranu. Sloučenina vzorce XXX se potom získá odštěpením chránící skupiny za sloučeniny vzorce XLI.
Alternativně je možno aminokyselinu obecného vzorce XLII N-alkylovat třístupňovým postupem, který zahrnuje reduktivní benzylaci (například za použití hydrogenace katalyzované palladiem na uhlíku, která se provádí za přítomnosti benzaldehydu). Získaný mono-Nbenzylderivát se potom reduktivně aminuje vhodnou acylsloučeninou (například formaldehydem a natriumkyanborhydridem, za účelem zavedení methyslkupiny ve významu R3) za vzniku Nbenzyl-N-R3-substituované aminokyseliny. Chrániči N-benzylskupina se snadno odštěpí (například hydrogenací za přítomnosti vhodného katalyzátoru), a tak se získá sloučenina obecného vzorce XXX. Specifické podmínky vhodné pro tento třístupňový alkylační postup jsou uvedeny v publikaci Reinhold et al., J. Med. Chem. 1968,11,258 až 260.
Preparativního postupu popsaného bezprostředně výše je také možno použít pro zavedení skupiny R3 do meziproduktu obecného vzorce XLIV za vzniku meziproduktu obecného vzorce XLV (což je meziprodukt vzorce III, kde R7 představuje hydroxyskupinu). Preparativního postupu popsaného bezprostředně výše je také možno použít pro zavedení skupiny R3 do meziproduktu obecného vzorce lila (což je meziprodukt vzorce III, kde R3 představuje atom vodíku).
Aminokyseliny použité ve schématech znázorněných v tomto popisu (například sloučeniny obecného vzorce XL a XLII) jsou buď obchodně dostupné, známo z literatury, nebo je lze připravit různými metodami známými odborníkům v tomto oboru. Může se například použít Streckerovy syntézy a jejich obměn. Aldehyd obecného vzorce R4CHO se tedy může nechat reagovat s kyanidem sodným nebo draselným a chloridem amonným za vzniku odpovídajícího aminonitrilu. Tento aminonitril se hydrolyzuje minerální kyselinou za vzniku požadované aminokyseliny vzorce XLII (R4C(NH2)COOH). Alternativně se může použít Bucherer-Bergovy metody, při níž se připravuje hydantoin zahříváním aldehydu vzorce R4CHO s uhličitanem amonným a kyanidem draselným a ten se posléze hydrolyzuje (například hydroxidem bamatým v refluxujícím dioxanu) působením kyseliny nebo báze za vzniku požadované aminokyseliny vzorce XLII (R4C(NH2)COOH).
V literatuře jsou popsány i jiné způsoby syntézy α-aminokyselin umožňující odborníkovi v tomto oboru přípravu požadovaných intermediálních aminokyselin vzorce XLII (R4C(NH2)COOH), který je zapotřebí pro syntézu sloučenin obecného vzorce I.
Vhodné způsoby syntézy a štěpení na izomery sloučenin vzorce XLII je možno nalézt v přehledech uvedených vDuthaler, Tetrahdedron 1994, 50, 1539 až 1650 nebo Williams R. M. Synthesis of Optically Active Amino Acids, Pergamon, Oxford, Velká Británie, 1989.
Jako specifickou metodu syntézy meziproduktu vzorce XLII v kterékoliv z enantiomemích forem zodpovídajícího meziproduktu obecného vzorce R4X, kde X představuje atom chloru, bromu nebo jodu, je možno uvést postup podle Pirrunga a Krishnamurthyho (J. Org. Chem. 1993, 58, 957 až 958) nebo postup podle 0'Donella et al. (J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 2353 až 2355). Požadované meziprodukty vzorce R»X se snadno připraví mnoha metodami, které jsou známo odborníkům v tomto oboru. Sloučeniny, v nichž R4X představuje skupinu ArCH2X, je například
-32CZ 289233 B6 možno připravit radikálovou halogenaci sloučeniny vzorce ARCH3 nebo formylací arénu vzorce
Ar-H a konverzí alkoholu na bromid.
Jinou specifickou metodou syntézy meziproduktů obecného vzorce XLII v libovolné enantiomemí formě je metoda podle Coreyho a Linka (J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 1906 až 1908). Přitom se meziprodukt vzorce R4COCI3 enantiospecificky redukuje na meziprodukt vzorce R4CH(OH)CC13, který se působením azidu a báze převede na meziprodukt vzorce R4CH(N3)COOH a posledně uvedená sloučenina se katalyticky hydrogenuje na požadovanou sloučeninu vzorce XLII. Potřebný trichlormethylketon (R4COCC13) s získá reakcí aldehydu vzorce R4CHO s trichlormethidovým aniontem a následující oxidací (Gallina agiordano, Synthesis, 1989,466 až 468).
Intermediální aminy obecného vzorce III (používané v reakčním schématu I), kde R5 a R7 představuje vždy atom vodíku, je možno připravit způsobem znázorněným v reakčním schématu 7. Aminokyselina vzorce L (účelně chráněná chránící skupinou Pí) se aktivuje převedením na chlorid kyseliny, fluorid kyseliny nebo směsný anhydrid (například za použití isobutylchlorformiátu a triethylaminu v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofúran nebo dioxan, při teplotě od asi -0 do asi -40 °C) a aktivovaný meziprodukt se potom nechá reagovat s diazomethanem za vzniku diazoketonu obecného vzorce LI. Na diazoketon vzorce LI se působí alkoholem vzorce ROH (například alkanolem s 1 až 6 atomy uhlíku), jako methanolem) a vhodným katalyzátorem, jako je teplo, oxid stříbrný nebo benzoát stříbrný, za vzniku esteru vzorce Lil. Ester vzorce Lil se zbaví chránící skupiny, a tak se získá sloučenina vzorce ΠΙΑ (Wolffovým přesmykem). Alternativně se může ester vzorce LII hydrolyzovat, například alkálií a kondenzovat s vhodným aminem vzorce RpH nebo HNR8R9, a tak se získá sloučenina vzorce IIIB, podobně jako to bylo popsáno výše.
Intermediální aminy obecného vzorce III, kde R5 představuje substituent vázaný přes atom kyslíku (například alkoxyskupinu) (používané v reakčním schématu I) je možno připravit způsobem znázorněným v reakčním schématu VIII takto: sloučenina vzorce LXI se alkyluje na kyslíku působením vhodného alkylačního činidla (například alkyljodidu, alkylbromidu, alkylchloridu nebo alkyltoluensulfonátu) a dostatečného množství báze, aby vznikl alkoxid (natrium nebo kaliumhydridu) ve vhodném polárním aprotickém rozpouštědle (například dimethylformamidu nebo tetrahydrofuranu) při teplotě od asi 0 do asi 150 °C, přičemž se získá sloučenina vzorce LXII. Požadovaný aminový meziprodukt se získá odštěpením chránící skupiny ze sloučeniny vzorce LXII.
Intermediální aminy obecného vzorce III, kde R5 představuje alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v první alkoxylové části (používané v reakčním schématu I) je možno připravit takto: sloučenina vzorce LXI se alkyluje esterem halogenalkanové kyseliny za vzniku sloučeniny vzorce LXIII, která se deprotekcí převede na požadovaný amin. Odpovídající kyselinu je možno připravit hydrolýzou tohoto esteru za použití vodné alkálie ve vhodném rozpouštědle. Aminy obecného vzorce III, v nichž Rý obsahuje esterovou skupinu a R5 obsahuje karboxyskupinu, je možno připravit z aminu vzorce LXIII (vyrobeného postupem uvedeným v předchozím odstavci), kde R5 obsahuje funkční skupinu karboxylové skupiny, chráněnou v podobě terc.butylesteru, působením bezvodé kyseliny, za vzniku odpovídající kyseliny v R5 bez hydrolýzy esteru v poloze ReSloučeniny vzorce LXVI (intermediámí aminy vzorce ΠΙ, kde R5 představuje chráněnou aminoalkoxyskupinu) je možno připravit ze sloučeniny vzorce LXI. Sloučenina vzorce LXI se alkyluje halogenalkannitrilem za vzniku sloučeniny vzorce LXIV. Sloučenina vzorce LXIV se redukuje na primární amin působením vodíku za přítomnosti vhodného katalyzátoru (například rhodia na uhlíku) a za přítomnosti amoniaku, přednostně v polárním protickém rozpouštědle, jako je voda, methanol nebo ethanol, za vzniku primárního aminu vzorce LXV. Sloučenina vzorce LXV se chrání na dusíku chránící skupinou PTi, která je orthogonální vzhledem kjiné chránící skupina PT a potom se odštěpí chránící skupina PT za vzniku požadované sloučeniny vzorce III.
-33CZ 289233 B6
Chráněná sloučenina obecného vzorce III se kopuluje s příslušnou sloučeninou obecného vzorce
II a výsledná chráněná sloučenina obecného vzorce I se zbaví chránicí skupiny.
Sloučeniny obecného vzorce LXIII a LXIV, kde n představuje číslo 2, se přednostně připravují tak, že se na sloučeninu vzorce XI působí nadbytkem esteru akrylové kyseliny nebo akrylonitrilu za přítomnosti vhodné báze, jako je hydroxid draselný nebo sodný, ve vhodném rozpouštědle, přednostně polárním protickém rozpouštědle.
Podle reakčního schématu IX se sloučeniny obecného vzorce LXVII a LXIX (sloučeniny obecného vzorce III, kde R5 představuje atom fluoru, nebo R5 a R7 představuje vždy atom fluoru) mohou připravit ze sloučeniny vzorce LXI. Na sloučeninu vzorce LXI se působí vhodným fluoračním činidlem, jako diethylaminosulfurtrífluoridem v rozpouštědle, které je inertní vůči této reakci, jako je aprotické rozpouštědlo, přednostně dichlormethan, za vzniku sloučeniny obecného vzorce LXVII. Sloučenina obecného vzorce LXVII se účelně zbaví chránicí skupiny.
Sloučenina vzorce LXI se oxiduje na sloučeninu vzorce LXVIII za použití podmínek popsaných výše pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde R5 a R7 dohromady tvoří oxoskupinu. Sloučenina vzorce LXVIII se difluoruje za vhodných podmínek (například působením diethylaminosulfurtrifluoridu v dichlormethanu).
Podle reakčního schématu X se sloučenina vzorce LXXIII nebo LXTV, kde R7 představuje alkylskupinu (tj. sloučenina obecného vzorce III, kde R7 představuje alkylskupinu) připravuje ze sloučeniny vzorce LXX (analogická příprava aminu je také popsána v reakčním schématu V). Na sloučeninu vzorce LXX se působí organokovovým činidlem vzorce R7M a výsledný sekundární alkohol se oxiduje tak, jako je to popsáno v předchozím odstavci, na sloučeninu vzorce LXXI. Sloučenina vzorce LXXI se převede přes kyanhydrid vzorce LXXII na sloučeninu vzorce LXXIII za použití stejných podmínek, jakých se používá pro konverzi sloučeniny vzorce XXI na sloučeninu vzorce XXII (viz reakční schéma IV).
Alternativně se sloučenina vzorce LXXII převede na sloučeninu vzorce LXIV způsobem popsaným v souvislosti s konverzí kyanového meziproduktu na amin podle reakčního schématu V.
Sloučenina vzorce RgNH2 nebo R9NH2 se monoalkyluje karbonylovou sloučeninou odpovídající významu Rg nebo R9 za vhodných podmínek reduktivní aminace, a tak se získá amin obecného vzorce RgR9NH. Pro zabránění dialkylaci může být vhodné chránit aminy (vzorce RgNH2 nebo R9NH2) vhodnou chránicí skupinou PT za vzniku chráněných aminů vzorce Rg(P7)NH nebo R9(Pt)NH, například reakční s benzaldehydem a redukčním činidlem. Chráněné aminy se monoalkylují karbonylovou sloučeninou odpovídající významu Rg nebo R9 za vhodných podmínek reduktivní aminace, a tak se získá amin obecného vzorce RgR9NH. Pro zabránění dialkylaci může být vhodné chránit aminy (vzorce RgNH2 nebo R9NH2) vhodnou chránicí skupinou PT za vzniku chráněných aminů vzorce Rg(PT)NH nebo R9(Pt)NH, například reakční s benzaldehydem a redukčním činidlem. Chráněné aminy se monoalkylují karbonylovou sloučeninou odpovídající významu Rg nebo R9 za vhodných podmínek reduktivní aminace, a tak se získá amin obecného vzorce RgR9N(Pi). Chránicí skupina Ργ se odštěpí (například vyčerpávající katalytickou hydrogenací, pokud PT představuje benzylskupinu), a tak se získá sloučenina vzorce RgR9NH. Vhodné podmínky reduktivní aminace může odborník snadno určit na základě literárních údajů. Tyto podmínky zahrnují podmínky uvedené v Borch et al., J. Am. Chem. Sod., 1971, 2897 až 2904 a v Emerson, Organic Reactions, Wiley: New York, 1948 (14), 174, Hutchins et al., Org. Prep. Proced. Int. 1979 (11), 20 a Lané et al., Synthesis 1975, 135. Podmínky reduktivní aminace favorizují N-monoalkylaci jsou například popsány v publikaci Morales et al., Synthetic Communications 1984, 1213 až 1220 a Verardo et al., Synthesis, 1992, 121 až 125. Aminy vzorce RgNH2 nebo R9NH2 je také možno monoalkylovat příslušnou sloučeninu vzorce R9X nebo RgX, kde X představuje chloridový, bromidový, tosylátový nebo mesylátový zbytek. Alternativně se může meziprodukt vzorce Rg(Pj)NH nebo R9(Pj)NH
-34CZ 289233 B6 alkylovat příslušnou sloučeninou vzorce R9X nebo RgX a chránící skupina se může odštěpit za vzniku sloučeniny vzorce R8R9NH.
Pro přípravu aminů obecného vzorce R8R9NH, kde skupina Rg-NH nebo R9-NH je vázána vazbou kyslík-dusík, je možno použít dalších metod. Tak lze snadno dostupnou sloučeninu vzorce alkoxykarbonyl-NHOH (s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části) nebo NH2CONHOH dialkylovat na dusíku a kyslíku působením báze a nadbytku vhodného alkylačního činidla vzorce R-X za vzniku odpovídající sloučeniny vzorce alkoxykarbonyl-N(R)OR (s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části), která se potom hydrolyzuje za vzniku sloučeniny vzorce RgR9NH (kde Rg = R9 = R). Vhodné podmínky, báze a alkylační Činidla jsou například uvedeny v publikacích goel a Krolls, Org. Prep. Proced. Int. 1987,19, 75 až 78 a Major a Fleck, J. Am. Chem. Soc. 1928, 50, 1479. Alatemativně se může amin vzorce NH2CONH(OH) alkylovat postupně, nejprve na kyslíku, za vzniku sloučeniny vzorce NH2CONH(OR') a potom na dusíku, za vzniku sloučeniny vzorce NH2NOC(R'')(OR') postupným zpracováním alkylačním činidlem vzorce R'X a RX za přítomnosti vhodné báze. Vhodné báze a alkylační činidla jsou uvedeny v publikacích Kreuzkamp a Messinger, Chem. Ber. 100, 3463 až 3465 (1967) a Danen et al. (J. Am. Chem. Soc. 1973, 95, 5716 až 5724). Hydrolýzou těchto alkylových derivátů hydroxymočoviny se získají aminy vzorce RONH2 a RONHR, které odpovídají určitým aminům vzorce R8R9NH. Odborníci v tomto oboru mohou přizpůsobit postupy popsané v tomto odstavci tak, aby bylo možno použít jiných alkylačních činidel R, R' a R-X pro výrobu jiných aminů obecného vzorce RgR9NH, kde zbytky Rg-N nebo Rg-N jsou připojeny vazbou kyslík-dusík. Uno et al. (SynLett 1991, 559 až 560) popisují adici organokovového činidla vzorce R-Li na O-alkyloxim vzorce R'CH=N-OR, která je katalyzována fluoridem boritým, za vzniku sloučenin obecného vzorce R'RCH-NH(OR). Tohoto způsobuje také možno použít pro získání sloučenin obecného vzorce RgR9NZ, kde jeden ze zbytků vzorce Rg-NH a Rg-NH je připojen vazbou kyslík-dusík.
Proléčiva podle vynálezu, v nichž je karboxylová skupina karboxylové kyseliny obecného vzorce I nahrazena esterovou skupinou, je možno připravit tak, že se na karboxylovou skupinu působí vhodným alkylhalogenidem za přítomnosti báze, jako je uhličitan draselný, v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě od asi 0 do asi 100 °C, v průběhu asi 1 až asi 24 hodin. Alternativně se může kyselina smíchat s příslušným alkoholem, jako rozpouštědlem, za přítomnosti katalytického množství kyseliny, jako je koncentrovaná kyselina sírová, při teplotě v rozmezí od asi 20 do asi 120 °C, přednostně při teplotě zpětného toku, přičemž reakční doba leží přibližně v rozmezí od 1 do 24 hodin. Další způsob provedení této reakce spočívá ve smíchání kyseliny se stechiometrickým množstvím alkoholu za přítomnosti katalytického množství kyseliny v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, přičemž voda vzniklá při reakci se průběžně odstraňuje fyzikálním způsobem (například za použití Dean-Starkova odlučovače) nebo chemickým způsobem (například za použití molekulového síta).
Proléčiva podle vynálezu, v nichž je funkční skupina alkoholu derivatizována za vzniku etheru, je možno připravit tak, že se alkohol smíchá s vhodným alkylbromidem nebo alkyljodidem za přítomnosti báze, jako je uhličitan draselný, v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, a reakce se nechá probíhat při teplotě v rozmezí od asi 0 do asi 100 °C po dobu asi 1 až asi 24 hodin. Alkanoylaminomethylethery je možno získat reakcí alkoholu s bis(alkanoylamino)methanem za přítomnosti katalytického množství kyseliny v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, způsobem popsaným v US 4 997 984. Alternativně je možno tyto sloučeniny připravit způsoby popsanými v Hoffman et al., J. Org. Chem. 1994, 59,3530.
Dialkylfosfátové estery je možno připravit reakcí alkoholu s dialkylchlorfosfátem za přítomnosti báze v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran. Dihydrogenfosfáty je možno připravit reakcí alkoholu s diaryl- nebo dibenzylchlorfosfátem způsobem popsaným výše s následnou hydrolýzou nebo hydrogenací za přítomnosti katalyzátoru na bázi ušlechtilého kovu.
-35CZ 289233 B6
Glykosidy je možno připravit reakcí alkoholu se sacharidem v inertním rozpouštědle, jako je toluen, za přítomnosti kyseliny. Voda vzniklá při reakci se obvykle průběžně odstraňuje výše popsaným způsobem. Alternativní provedení reakce spočívá v působení vhodně chráněného glykosylhalogenidu na alkohol za přítomnosti báze a následujícím odštěpením chránící skupiny.
N-(l-hydroxyalkyl)amidy, N-(l-hydroxy-l-(alkoxykarbonyl)methyl)amidy nebo sloučeniny, kde zbytek R2 je nahrazen zbytkem vzorce C(OH)C(O)OY, je možno připravit reakcí rodičovského amidu nebo indolu s příslušným aldehydem za neutrálních nebo bazických podmínek, například za přítomnosti ethoxidu sodného v ethanolu) při teplotě v rozmezí od 25 do 70 °C. N-Alkoxymethylindoly nebo N-l-(alkoxy)alkylindoly je možno připravit reakcí Nnesubstituovaného indolu s požadovaným alkylhalogenidem za přítomnosti báze v inertním rozpouštědle. 1-(N,N-Dialkylaminomethyl)indoly, l-(l-(N,N-dialkylamino)ethyl)indoly a Ν,Ν-dialkylaminomethylamidy (například sloučeniny, v nichž R3 představuje dimethylaminomethylskupinu) je možno připravit reakcí rodičovské NH-sloučeniny s příslušným aldehydem a aminem v alkoholickém rozpouštědle při 25 až 70 °C.
Výše uvedená cyklická proléčiva (například proléčiva podle vynálezu, v nichž R2 a R3 představují společný atom uhlíku, je možno připravit reakcí rodičovské sloučeniny (léčiva) s aldehydem nebo ketonem nebo jeho dimethylacetalem v inertním rozpouštědle za přítomnosti katalytického množství kyseliny a za současného odstraňování vody nebo methanolu. Alternativně je možno tyto sloučeniny připravit reakcí aminoalkoholu nebo hydroxyamidu s gem-dibromalkanem za přítomnosti báze (například uhličitanu draselného) v inertním rozpouštědle (například dimethylformamidu).
Výchozí látky, reakční činidla pro výše popsaná reakční schémata (například aminy, substituované indolkarboxylové kyseliny, substituované indolinkarboxylové kyseliny a aminokyseliny) jsou také snadno dostupné, nebo je lze snadno syntetizovat běžnými metodami organické syntézy známými odborníkům v tomto oboru. Ostatně, příprava většiny těchto látek je popsána výše. Tak například mnohé meziprodukty používané při výše popsaných postupech pro výrobu sloučenin obecného vzorce I jsou příbuzné přírodním aminokyselinám nebo se jedná o jejich deriváty. Na látky tohoto typu se upírá značný vědecký zájem a existuje po nich značná obchodní poptávka, a v důsledku toho jsou mnohé z těchto meziproduktů obchodně dostupné nebo jsou popsány v literatuře nebo jsou snadno připravitelné z jiných běžně dostupných látek metodami citovanými v literatuře. Takové meziprodukty zahrnují například sloučeniny obecného vzorce XX, XXX, XXXI a XXXII.
Sloučeniny obecného vzorce I obsahují asymetrické atomy uhlíku, a proto se vyskytují ve formě enantiomerů nebo diastereomerů. Diasterometrické směsi je možno dělit na individuální diastereomery na základě jejich fyzikálně chemických odlišností o sobě známými metodami, například chromatografií a/nebo frakční krystalizací. Enantiomery (například sloučenin obecného vzorce III, VIII nebo IX) je možno dělit tak, že se enantiomerická směs převede na diasteromerickou směs reakcí s vhodnou opticky aktivní sloučeninou (například alkoholem), potom se oddělí diastereomery a jednotlivé diastereomery se převedou (například hydrolýzou) na odpovídající čisté enantiomery. Do rozsahu vynálezu spadají všechny takové izomery, včetně diastereomerů a enantiomerů, jakož i jejich směsi.
Přestože mnohé ze sloučenin podle vynálezu nejsou ionizovatelné za fyziologických podmínek, některé ze sloučenin podle vynálezu naopak ionizovatelné za fyziologických podmínek jsou. Tak například některé ze sloučenin podle vynálezu jsou kyselé a mohou tvořit soli s farmaceuticky vhodnými kationty. Všechny takové soli spadají do rozsahu tohoto vynálezu a je možno je připravovat konvenčními metodami. Tak například je možno je připravit jednoduše tak, že se kyselé a zásadité části smíchají, obvykle ve stechiometrickém poměru, ve vodném, nevodném nebo zčásti vodném prostředí, podle toho, jak je to vhodné. Soli se izolují buď filtrací nebo
-36CZ 289233 B6 srážením nerozpouštědlem s následující filtrací, nebo odpařením rozpouštědla nebo v případě vodných roztoků také lyofilizací.
Některé ze sloučenin podle vynálezu jsou bazické a mohou tvořit soli s farmaceuticky vhodným aniontem. Všechny takové soli spadají do rozsahu tohoto vynálezu a je možno je připravovat konvenčními metodami. Tak například je možno je připravit jednoduše tak, že se kyselé a zásadité části smíchají, obvykle ve stechiometrickém poměru, ve vodném, nevodném nebo zčásti vodném prostředí, podle toho, jak je to vhodné. Soli se izolují buď filtrací nebo srážením nerozpouštědlem s následující filtrací, nebo odpařením rozpouštědla nebo v případě vodných roztoků také lyofilizací. Některé ze sloučenin podle vynálezu také tvoří hydráty nebo solváty a také tyto formy spadají do rozsahu vynálezu.
Užitečnost sloučenin podle vynálezu jako léčiv vhodných pro léčení metabolických chorob (jako jsou choroby podrobněji specifikované dále) u savců (například člověka) je možno dokumentovat pomocí účinnosti sloučenin podle vynálezu při konvenčních zkouškách a při zkouškách účinnosti in vitro a in vivo popsaných dále. Tyto zkoušky představují rovněž prostředek umožňující porovnání účinnosti sloučenin podle vynálezu s účinnostmi jiných známých sloučenin. Výsledky těchto srovnávacích zkoušek jsou užitečné při určení hladiny dávkování u savců, včetně člověka, při léčení takových chorob.
Purifikovaná humánní glykogen fosforyláza z jater (HLGPa) se získá následujícím postupem:
Exprese a fermentace
HLGP cDNA se exprimuje z plazmidů pKK233-2 (Pharmacia Biotech. Inc. Piscataway, New Jersey, USA) vE. coli kmene XL-1 Blue (Stratagene Cloning Systems, LaJolla, Kalifornie, USA). Tímto kmenem se inokuluje LB médium (které se skládá z 10 g tryptonu, 5 g kvasinkového extraktu, 5 g chloridu sodného a 1 ml IN hydroxidu sodného, vztaženo na 1 litr média) s přísadou lOOmg/litr ampicilinu, lOOmg/litr pyridoxinu a 600mg/litr chloridu manganatého. Buňky se nechají růst při 37 °C do optické density OD550 = 1,0. Potom se buňky indukují lmM isopropyl-l-thio-|3-D-galaktosidem (IPTG). Tři hodiny po indukci se buňky sklidí centrifugací a buněčná peleta se zmrazí při -70 °C. V tomto stavu se skladuje až do následné purifikace.
Purifikace glykogen fosforylázy
Buňky z pelety popsané výše se resuspedují ve 25mM β-glycerofosfátu (pH 7,0) s přísadou DTT (0,2mM), chloridu hořečnatého (lmM) a následujících inhibitorů proteázy:
pepstatin A 0,7 pg/ml leupeptin 0,5 pg/ml fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) 0,2mM
EDTA 0,5mM
Provede se lyže buněk předběžným zpracováním 200 pg/ml lysozymu a 3 pg/ml DNAasy s následným zpracováním ultrazvukem na ledu (vždy 5 x 1,5 minuty za použití 250ml várky) za použití ultrazvukového zařízení pro rozbíjení buněk Branson Model 450 (Branson Sonic Power Co., Danbury, CT, USA). Lyzáty se vyčeří centrifugací při 35 000 x g po dobu 1 hodiny a potom se přefiltrují přes filtry s průměrem otvorů 0,45 pm. HLGP s rozpustné frakci lyzátu (odhadem se jedná o množství pod 1 % celkového proteinu) se purifikuje monitováním enzymatické aktivity (jakje to popsáno v části „Zkoušení aktivity HLGPa“ uvedené dále ve vzorcích získaných sérií chromatografických stupňů, která je podrobně popsána dále.
-37CZ 289233 B6
Imobilizovaná kovová afínitní chromatografíe (IMAC)
Tento stupeň je založen na metodě Luonga et al. (Luong et al., Joumal of Chromatography (1992) 584, 77 až 84). 500 ml přefiltrované rozpustné frakce buněčného lyzátu (připravené přibližně ze 160 g původní buněčné pelety) se nanese na 130ml sloupec IMAC ChelatingSepharose (Pharmacia LKB Biotechnology, Piscataway, New Jersey, USA), který byl předběžně upraven ekvilibračním pufrem o pH 7 s obsahem chloridu měďnatého (50mM), β-glycerofosfátu (25mM), chloridu sodného (250mM) a imidazolu (lmM). Sloupec se promývá ekvilibračním pufrem tak dlouho, dokud se hodnota A2so nevrátí na základní linii. Potom se vzorek eluuje ze sloupce stejným pufrem, který však obsahuje imidazol v lOOmM koncentraci, aby se odstranil vázaný HLGP a jiné vázané proteiny. Frakce obsahující aktivitu HLGP se shromáždí (přibližně 600 ml) a přidá se k ní ethylendiamintetraoctová kyselina do 0,2mM koncentrace, fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) do 0,2mM koncentrace, fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) do 0,2mM koncentrace, leupeptid do 0,5 pg/ml a pepstatin A do 0,7 μ/ml. Spojená HLGP frakce se odsolí na sloupci Sephadexg-25 (Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri) ekvilibrovaném pufrem A (pufr A: 25mM Tris-HCl (pH 7,3), 3mM DTT), aby se odstranil imidazol. Takto zpracovaná frakce se až do provedení druhého chromatografíckého stupně skladuje na ledu.
Chromatografíe na 5'-AMP-Sepharose
Odsolený shromážděný vzorek HLGP (přibližně 600ml) se potom smísí se 70ml 5-AMP Sepharose (Pharmacie LKB Biotechnology, Piscataway, New Jersey, USA), která byla ekvilibrována s pufrem A (viz výše). Směs se 1 hodinu jemně míchá při 22 °C a potom se uloží do kolony. Kolona se promývá pufrem A tak dlouho, dokud se hodnota A28o nevrátí na základní linii. HLGP a jiné proteiny se ze sloupce eluují pufrem B (pufr B: 25mM Tris-HCl, 0,2mM DTT a lOmM adenosin-5'-monofosfát (AMP), pH 7,3). Frakce obsahující HLGP se spojí po jejich identifikaci stanovením aktivity enzymu (viz dále) a vizualizuje se M, přibližně 97kDa HLGP proteinový pás elektroforézou na polyakrylamidovém gelu s natriumdodecylsulfátem (SDSpage) a následným obarvením stříbrem (2D-silver Stain II „Daiichi Kit“, Daiichi Pure Chemicals Company, Ltd., Tokyo, Japonsko a HLGP se shromáždí. Shromážděný HLGP se dialyzuje do pufru C (pufr C: 25mM β-glycerofosfát, 0,2mM DTT, 0,3mM EDTA, 200mM chlorid sodný, pH 7,0) a potom skladuje na ledu až do následujícího použití.
Stanovení enzymatické aktivity HLGP
A) Aktivace HLGP: konverze HLGPb na HLGPa
Před stanovením enzymatické aktivity HLGP se enzymem převede z inaktivní formy, v níž je exprimován E. coli kmene XL-1 (tato forma se označuje zkratkou HLGPb) (Stratagene Cloning Systems, LaJolla, Kalifornie, USA) na aktivní formu (tato forma se označuje zkratkou HLGPa) fosforylací HLGP za použití fosforyláza kinázy následujícím způsobem:
Reakce HLGPb s imobilizovanou fosforyláza kinázou
Fosforyláza kináza (Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, USA) se imobilizuje na afinitnímgelu Affi-Gel 10 (BioRad Corp. Melvile, New York, USA) podle instrukcí výrobce. V krátkosti lze použití postup popsat takto: Enzym fosforyláza kináza (10 mg) se indukuje s promytými perlami Affí-Gelu (1 ml) ve 2,5 ml lOOmM HEPES a 80mM chloridu vápenatého o pH 7,4 4 hodiny při 4 °C. Potom se perly Affí-Gelu jednou promyjí stejným pufrem, načež následuje blokování jednohodinovým působením 50mM HEPES a lmM methylesteru glycinu o pH 8,0 při teplotě místnosti. Blokovací pufr se odstraní a nahradí se 50mM HEPES (pH 7,4), lmM β-merkaptoethanolem a 0,2% azidem sodným pro skladování. Před použitím na konverzi HLGPb na HLGPa se fosfory lázakináza imobilizovaná na perlách Affí-Gelu ekvilibruje
-38CZ 289233 B6 probýváním pufrem použitým pro provedení reakce s kinázou, který obsahuje β-glycerofosfát (25mM), DTT (0,3mM) a EDTA (0,3mM) a má pH 7,8 (pufr pro stanovení kinázy).
Zčásti purifikovaný inaktivní HLGPb získaný při výše uvedené chromatografíi na 5'-AMPSepharose se zředí v poměru 1:10 pufrem pro stanovení kinázy a potom smísí s výše popsaným enzymem fosforyláza kinázou, který je imobilizován na perlách Affi-Gelu. Ke směsi se přidá NaSTP (do 5mM koncentrace) a chlorid hořečnatý (do 6mM koncentrace). Vzniklá směs se 30 až 60 minut jemně míchá při 25 °C. Vzorek se oddělí od perel a stanoví se aktivace (v %) spočívající v konverzi HLGPb na HLGPa. Stupeň aktivace se odhaduje na základě stanovení aktivity enzymu HLGP za přítomnosti a nepřítomnosti 3,3mM AMP. Procentická aktivita celkového HLGP, tj. aktivita enzymu HLGPa (aktivita nezávislá na AMP) se potom vypočítá pomocí následujícího vzorce:
Aktivita HLGP - AMP
Podíl HLPGa v HLGP (%) =-----------------Aktivita HLGP + AMP
B) Stanovení aktivity HLGPa
Hypoglykemickou účinnost (a také jiné kurativní a profylatické účinnosti proti ostatním chorobám nebo chorobným stavům popsaným dále) sloučeniny podle vynálezu je možno nepřímo stanovit zjištěním účinku sloučenin podle vynálezu na aktivitu aktivované formy glykogen fosforylázy (GPa) za použití jedné ze dvou dále uvedených metod. Buď se aktivita glykogen fosforylázy měří při reakci probíhající ve směsi tvorby glukóza-l-fosfátu z glykogenu (štěpná reakce) na základě sledování obsahu glukóza-l-fosfátu, nebo se měří při reverzní reakci (syntetická reakce), při níž se syntetizuje glykogen z glukóza-l-fosfátu, na základě sledování uvolňování anorganického fosfátu. Všechny reakce se provádějí se třemi replikacemi v 96jamkových mikrotitrových miskách a měří se změna absorbance díky tvorbě reakčního produktu při vlnové délce uvedené dále za použití čtecího zařízení MCC/340 ΜΚΠ Elisa Reader (Lab Systems, Finsko) připojeného k zařízení Titertech Microplate Stacker (ICN Biomedical Co., Huntsville, Alabama, USA).
Pro měření aktivity enzymu HLGPa při reakci probíhající ve směsi štěpení se sleduje tvorba glukóza-l-fosfátu z glykogenu multienzymovým spojeným obecným postupem, který popsali Pesce et al. (Pesce M. A., Bodourian S. H., Harris R. C. a Nicholson J. F. (1977) Clinical Chemistry 23, 1711 až 1717), který je modifikován takto: 1 až 100 pg fosforylázy a, 10 jednotek fosfoglukomutázy a 15 jednotek glukóza-6-fosfát dehydrogenázy (Boehringer Mannheim Biochemicals, Indianapolis, IN, USA) se zředí na 1 ml pufrem A (pufr A: pH 7,2, 50mM HEPES, lOOmM chlorid draselný, 2,5mM ethylenglykoltetraoctová kyselina (EGTA), 2,5mM chlorid hořečnatý, 3,5mM dihydrogenfosforečnan draselný a 0,5mM dithiothreitol). 20 μΐ zásobního vzorku se přidá k 80 μΐ pufru A s obsahem 0,47 mg/ml glykogenu, 9,4mM glukózou a 0,63mM oxidovanou formou nikotinaidadenindinukleotid fosfátu (NADP+). Zkoušená sloučenina se přidá vždy v podobě 5 μΐ roztoku v 14% dimethylsulfoxidu před přidáním enzymu. Základní hodnota aktivity enzymu HLGPa za nepřítomnosti inhibitorů se stanoví za použití přídavku 5 μΐ 14% dimethylsulfoxidu a plně inhibovaná hodnota aktivity enzymu HLGPa se stanoví za použití přídavku 20 μΐ 50mM roztoku pozitivní kontrolní zkušební látky, kofeinu. Reakce se sleduje při teplotě místnosti měřením konverze oxidovaného NADP+ na redukovaný NADPH při 340 nM.
Při měření aktivity enzymu HLGPa při reverzní reakci (tj. syntetické reakci), při níž z glukózal-fosfátu vzniklá glykogen a anorganický fosfát, se používá obecného způsobu, který popsali Engers et al. (Engers H. D., Shechosky, S. a Madsen N. B. (1970) Can. J. Biochem. 48, 746 až 754), který je modifikován takto: 1 až 100 pg HLGPa se zředí na 1 ml pufrem B (pufr B: pH 7,2, 50mM HEPES, lOOmM chlorid draselný, 2,5mM ethylenglykoltetraoctová kyselina (EGTA), 2,5mM chlorid hořečnatý a 0,5mM dithiothreitol). 20 μΐ zásobního vzorku se přidá k 80 μΐ pufru
-39CZ 289233 B6
B s obsahem 1,25 mg/ml glykogenu, 9,4mM glukózou a 0,63mM glukóza-l-fosfátem. Zkoušená sloučenina se přidá vždy v podobě 5 μΐ roztoku v 14% dimethylsulfoxidu před přidáním enzymu. Základní hodnota aktivity enzymu HLGPa za nepřítomnosti přidaných inhibitorů se stanoví za použití přídavku 5 μΐ 14% dimethylsulfoxidu a plně inhibovaná hodnota aktivita enzymu HLGPa 5 se stanoví za použití přídavku 20 μΐ 50mM roztoku kofeinu. Směs se inkubuje 1 hodinu při teplotě místnosti a analogickým fosfátem uvolněný z glukóza-l-fosfátu se měří obecným postupem, který popsali Lanzetta et al. (Lanzetta P. A., Alvarez L. J., Reinach P. S. a Candia O. A. (1979) Anal. Biochem. 100, 95 až 97), který je modifikován takto: ke 100 μΓsměsi obsahující enzym se přidá 150 μΐ roztoku molybdenanu amonného o koncentraci 10 mg/ml a 10 malachitová zeleň (0,38 mg/ml) v IN kyselině chlorovodíkové. Vzniklá směs se 20 minut inkubuje při teplotě místnosti a měří se absorbance při 620 nm.
Sloučeniny podle vynálezu je možno snadno upravit na hypoglykemická činidla vhodná pro klinické použití. Hypoglykemickou účinnost sloučenin podle vynálezu je možno určit na základě 15 množství zkoušené sloučeniny snižující hladinu glukózy vzhledem ke vehikulu bez zkoušené sloučeniny u samců myši ob/ob. Tato zkouška také umožňuje stanovení přibližně minimální účinné dávky (MED) pro in vivo snížení hladiny koncentrace glukózy vnáší plazmě pomocí těchto zkoušených sloučenin.
Vzhledem k tomu, že koncentrace glukózy v krvi je blízce spjata s vývojem diabetických poruch, sloučeniny podle vynálezu prostřednictvím svého hypoglykemického účinku zabraňují, zastavují a/nebo odstraňují diabetické poruchy.
Pětitýdenní až osmitýdenní samci myši C57 BL/6J-ob/ob (od Jackson Laboratory, Bar Harbor, 25 Maine, USA) se po pěti umístí do klecí, kde se ošetřují standardními způsoby. Po jednotýdenním aklimatizačním období se zvířata zváží a před jakýmkoliv ošetřením se jim z retroorbitálního sinu odebere 25 μΐ krve. Krevní vzorek se ihned zředí v poměru 1 :5 fyziologickým roztokem chloridu sodného, který obsahuje 0,025 % sodné soli heparinu. Získaný vzorek se až do analýzy na metabolit uchovává na ledu. Zvířata se přidělí do ošetřovaných skupin tak, aby každá skupina 30 vykazovala podobnou střední hodnotu koncentrace glukózy v plazmě. Po přidělení do skupin se zvířatům po dobu celkem 5 dnů orálně podává každý den vehikulum sestávající z buď 1) roztoku methylcelulózy ve vodě o koncentraci 2,5 g/litr bez úpravy pH, nebo 2) 0,1% roztoku prostředku Pluronic(R) P105 (bloková kopolymemí povrchově aktivní látka, výrobek firmy BASF Corp. Parsippany, New Jersey, USA) v 0,1% fyziologickém roztoku chloridu sodného bez úpravy pH. 35 Pátý den se zvířata znovu zváží a orální cestou se jim podá zkoušená sloučenina nebo samotné vehikulum. Všechny léčiva se podávají ve vehikulu sestávající zbuď 1) roztoku methylcelulózy ve vodě o koncentraci 2,5 g/litr bez úpravy pH, nebo 2) 10% dimethylsulfoxidu/0,1% roztoku prostředku Pluronic(R) P105 (BASF Corp., Parsippany, New Jersey, USA) v 0,1% fyziologickém roztoku chloridu sodného bez úpravy pH. Po dalších 3 hodinách se zvířatům z retroorbitálního 40 sinu odebere krev pro stanovení hladiny metabolitu v krvi. Čerstvě odebrané vzorky se 2 minuty odstřeďují při 10 000 xga teplotě místnosti. Supematant se analyzuje na glukózu, například za použití zařízení Abbott VP^ (Abbot Laboratories, Diagnostics Division, Irving, TX, USA) a VP Super System(R) Autoanalyzer (Abbto Laboratorie, Diagnostics Division, Irving, TX, USA). Při tom se používá systému reakčních činidel A-Gent(R) glucose-US Test (Abbot Laboratories, 45 Diagnostics Division, Irving, TX, USA) (jedná se o modifikaci metody popsané v Richterrich aDuawalder, Schweizerische Medizinische Wochenschrift, 101, 860 (1971)). Při této hexokinázové metodě se používá standardů o koncentraci 100 mg/100 ml. Hladina glukózy v plazmě
se potom vypočítá podle rovnice:
50 Glukóza Hodnota Hodnota
v plazmě = naměřená x5x 1,784 = naměřená x 8,92
(mg/100 ml) ve vzorku ve vzorku
-40CZ 289233 B6 kde číslo 5 představuje faktor ředění a číslo 1,784 představuje hodnotu přizpůsobení plazmového hematokritu (za předpokladu, že hematokrit je 44%).
U zvířat, kterým se podává pouze vehikulum se udržuje hyperglykemická hladina glukózy (například 250 mg/100 ml nebo vyšší) v podstatě beze změny, zatímco zvířata ošetřená zkoušenými sloučeninami ve vhodných dávkách vykazují podstatně sníženou hladinu glukózy. Hypoglykemická účinnost zkoušených sloučenin se určuje statistickou analýzou (nepárový t-test) za použití střední hodnoty koncentrace glukózy v plazmě u skupiny, jíž byla podávána zkoušená sloučenina a skupiny, jíž bylo podáváno pouze vehikulum v den 5. Výše uvedená zkouška prováděná s určitým rozmezím dávek zkoušených sloučenin umožňuje stanovení přibližné minimální účinné dávky (MED) pro in vivo snížení koncentrace glukózy v plazmě.
Sloučeniny podle vynálezu lze snadno zpracovat na činidla vyvolávající reverzi hyperinzolinemie, činidla snižující hladinu triglyceridů a hypocholesterolemická činidla vhodná pro klinické použití. Výše uvedené typy účinnosti lze dokumentovat na základě množství zkoušené sloučeniny snižující hladinu inzulínu, triglyceridů nebo cholesterolu vzhledem ke kontrolní skupině myších samců ob/ob, kterým bylo podáváno samotné vehikulum bez zkoušené sloučeniny. Vzhledem ktomu, že koncentrace cholesterolu v krvi má úzký vztah k vývoji kardiovaskulární, cerebrálních vaskulámích poruch, sloučeniny podle vynálezu díky svému hypocholesterolemickému účinku zabraňují vzniku aterosklerózy nebo její průběh zastavují a/nebo potlačují.
Vzhledem k tomu, že koncentrace inzulínu v krvi má úzký vztah ke zvyšování růstu vaskulámích buněk a zvýšenému zadržování sodíku v ledvinách (kromě jiných účinků, jako je například zvyšování utilizace glukózy) a vzhledem k tomu, že je známo, že tyto funkce vyvolávají hypertenzi, sloučeniny podle vynálezu díky svému hypoisulinemickému účinku zabraňují vzniku hypertenze nebo hypertenzi zastavují a/nebo potlačují.
Vzhledem k tomu, že koncentrace triglyceridů v krvi přispívá k celkové hladině lipidů v krvi, sloučeniny podle vynálezu prostřednictvím své účinnosti na snižování hladiny triglyceridů zabraňují vzniku hyperlipidemie nebo její průběh zastavují a/nebo potlačují.
Pětitýdenní až osmitýdenní samci myši C57 BL/6J-ob/bo (od Jackson Laboratory, Bar Harbor, Maine, USA) se po pěti umístí do klecí, kde se ošetřují standardními způsoby a podává se jim standardní krmivo pro hlodavce od libitum. Po jednotýdenním aklimatizačním období se zvířata zváží a před jakýmkoliv ošetřením se jim z retroorbitálního sinu odebere 25 μΐ krve. Krevní vzorek se ihned zředí v poměru 1 : 5 fyziologickým roztokem chloridu sodného, který obsahuje 0,025 % sodné soli heparinu. Získaný vzorek se až do analýzy glukózy v plazmě uchovává na ledu. Zvířata se přidělí do ošetřovaných skupin tak, aby každá skupina vykazovala podobnou střední hodnotu koncentrace glukózy v plazmě. Zkoušená sloučenina se zvířatům podávání orální sondou ve formě roztoku o koncentraci asi 0,2 až 20 g/litr buď 1) v 10% DMSÓ/0,1% roztoku prostředku Pluronic(R) P105 (bloková kopolymemí povrchově aktivní látka, výrobek firmy BASF Corp. Parsippany, New Jersey, USA) v 0,1% fyziologickém roztoku chloridu sodného bez úpravy pH nebo 2) v roztoku methylcelulózy ve vodě o koncentraci 2,5 g/litr, bez úpravy pH. dávkování se provádí jednou denně (s.i.d.) nebo dvakrát denně (b.i.d.) po dobu celkem 1 až 15 dnů. Kontrolní myši dostávají pouze 10% DMSO/0,1% Pluronic^ P105 v 0,1% fyziologickém roztoku chloridu sodného bez úpravy pH nebo roztok methylcelulózy ve vodě o koncentraci
2,5 g/litr, bez úpravy pH.
Tři hodiny po poslední podané dávce se zvířata usmrtí dekapitací a krev se zachytí do 0,5ml zkumavek pro separaci séra obsahujících vždy 3,6 mg směsi fluoridu sodného a šťavelanu draselného v hmotnostním poměru 1 : 1 Čerstvě odebrané krevní vzorky se 2 minuty centrifúgují při 10 000 x g při teplotě místnosti a sérový supematant se oddělí a zředí v objemovém poměru 1 : 1 roztokem aprotininu (lTIU/ml) v 0,1% roztoku chloridu sodného bez úpravy pH.
-41CZ 289233 B6
Zředěné vzorky séra se až do analýzy uchovávají při -80 °C. Po roztáni se zředěné vzorky séra analyzují na inzulín, triglaceridy a cholesterol. Koncentrace inzulínu v séru se stanoví za použití soupravy Equate(R) RIA INSULIN (metoda se dvěma protilátkami; podle návodu výrobce) zakoupené od firmy Binax, South Portland, ME, USA. Mezizkouškový koeficient variace je nižší nebo rovný 10 %. Hladina triglyceridů v séru se stanoví na použití Abbott VP^ a VP Super System(R) Autoanalyzer (Abbot Laboratories, Diagnostics Division, Irving, TX, USA). Při tom se používá systému reakčních činidel A-Gent(R) Triglycerides Test (Abbot Laboratories, Diagnostics Division, Irving, TX, USA) enzymatická metoda spojená s použitím lipázy; modifikace metody popsané v Sampson et al, Clinical Chemistry 21, 1983 (1975)). Celková hladina cholesterolu v séru se stanoví za použití Abbott VP09 a VP Super System(R) Autoanalyzer (Abbot Laboratories, Diagnostics Division, Irving, TX, USA). Při tom se používá systému reakčních činidel A-Gent(R) Cholesterol Test (Abbot Laboratories, Diagnostics Division, Irving, TX, USA) (enzymatická metoda spojená s použitím cholesterol esterázy; modifikace metody popsané vAllain et al., Clinical Chemistry 20, 470 (1974)) za použití standardů o koncentraci 100 a 300mg/100 ml. Hladina inzulínu, triglyceridů a cholesterolu celkem v séru se vypočítá z dále uvedených rovnic.
Inzulín v séru (pU/ml) = Hodnota ve vzorce x 2
Triglyceridy v séru (mg/100 ml) = Hodnota ve vzorku x 2 Cholesterol celkem v séru (mg/100 ml) = Hodnota ve vzorku x 2 kde číslo 2 představuje faktor ředění.
U zvířat, kterým se podává pouze vehikulum, se udržuje zvýšená hladina inzulínu v séru (například 225 pU/ml), triglyceridů v séru (například 225 mg/100 ml) a cholesterolu celkem v séru (například 160 mg/100 ml) v podstatě beze změny, zatímco zvířata ošetřená zkoušenými sloučeninami podle vynálezu obecně vykazují sníženou hladinu inzulínu, triglyceridů a cholesterolu celkem v séru. Účinnost zkoušených sloučenin na snižování hladiny inzulínu, triglyceridů a cholesterolu celkem v séru se určuje statistickou analýzou (nepárový t-test) za použití střední hodnoty koncentrace inzulínu, triglyceridů a cholesterolu celkem v séru u skupiny, jíž byla podávána zkoušená sloučenina a kontrolní skupiny, jíž bylo podáváno pouze vehikulum.
Účinnost sloučeniny podle vynálezu spočívající v ochraně srdeční tkáně před poškozením je možno demonstrovat in vitro za použití postupu popsaného v Butwell et al., Am. J. Physiol., 264, H1884 až H1889, 1993 a Allard et al., Am. J. Physiol, 1994, 267, H66 až H74. Pokusy se provádějí za použití isovolumetrického přípravku z izolovaného krysího srdce v podstatě způsobem popsaným ve výše uvedeném článku. Normálním krysím samcům Spraque-Dawley, krysím samcům Spraque-Dawley, u nichž byla vyvolána srdeční hypertrofie podvázáním aorty, akutně diabetickým krysím samcům BB/W a nediabetickým krysím samcům BB/W (kontrola) se nejprve podá heparin (intraperitoneálně 1000 jednotek) a potom pentobarbital (intraperitoneálně 65 mg/kg). Po dosažení hluboké anestezie, což je zjistí vymezením refluxu na tlapce, se zvířatům tychle vyřízne srdce a umístí se lidem vychlazeného fyziologického roztoku chloridu sodného. Srdce se podrobí retrográdní perfuzi aortou (během 2 minut). Frekvence srdečního tepu a ventrikulámí tlak se stanoví pomocí latexového balónku v levém ventrikulu za použití vysokotlaké trubky připojené k měřiči tlaku. Pro perfuzi srdce se použije roztoku obsahujícího chlorid sodný (118mM), chlorid draselný (4,7mM), chlorid vápenatý (l,2mM), chlorid hořečnatý (l,lmM), hydrogenuhličitan sodný (25mM) a glukózu (llmM). Zařízení pro perfuzi je dobře termostatováno na teplotu srdce 37 °C za použití termostatických lázní pro perfuzát a vodního duplíkátorového pláště okolo perfuzní trubky. Oxygenace perfuzátu se provádí pomocí pediatrického oxygenačního zařízení s dutými vlákny (Capiax, Terumo Corp. Tokyo, Japonsko) bezprostředně u srdce. Srdce se exponuje působení perfuzního roztoku se zkoušenou sloučeninou nebo bez ní, po dobu asi 10 minut nebo déle a potom následuje 20 minut globální ischemie a 60 minut reperfuze za nepřítomnosti zkoušené sloučeniny. V období po ischemii se porovnání frekvence srdečního tepu u kontrolních vzorků se vzorky za použití zkoušené sloučeniny. V tomto období se porovnává tlak v levém ventrikulu u kontrolního srdce s tlakem ve ventrikulu
-42CZ 289233 B6 u srdce ošetřeného zkoušeného sloučeninou. Na konci pokusu se při perfuzi také provede barvení, aby se zjistil podíl plochy infarktu z celé ohrožené plochy (% IA/AAR), způsobem popsaným dále.
Terapeutické účinky sloučenin podle vynálezu při prevenci poškození srdeční tkáně, k němuž by jinak došlo ischemickým napadením, je také možno demonstrovat in vivo způsobem popsaným v publikace Liu et al., Circualtion, sv. 84, č. 1 (červen 1991), jak je to konkrétně uvedeno v tomto popisu. Při zkoušení in vivo se zjišťuje ochrana srdce zkoušenou sloučeninou vzhledem ke kontrolní skupině, jíž se podává pouze solné vehikulum. Pro vysvětlení je třeba uvést, že bylo zjištěno, že krátká období ischemie myokardu, po nichž následuje reperfuze koronární arterie, chrání srdce před následující prudkou ischemií myokardu (Murry et al., Circulation 74: 1124 až 1136, 1986). Srdeční ochranu, kterou dokumentuje snížení rozsahu infarktu myokardu, je možno farmakologicky indukovat za použití intravenózně podaných antagonistů receptoru adenosinu intaktním anestetizovaným králíkům studovaným jako in šitu model předběžného ošetření ischemie myokardu (Liu et al., Circulation 84: 350 až 356, 1991). Při zkoušení in vivo se zjišťuje, zda jsou zkoušené sloučeniny schopny farmakologicky indukovat srdeční ochranu, tj. zabezpečit snížení velikosti infarktu myokardu při parenterálním podání intaktním anestetizovaným králíkům. Účinky sloučenin podle toho vynálezu je možno porovnat s ischemickým předběžným ošetřením za použití agonisty Al adenosinu, N6-(fenyl-2R-isopropyl)adenosinu (PIA), o němž je známo, že farmakologicky indukuje srdeční ochranu u intaktních anestetizovaných králíků (studie in šitu) (Liu et al., Circulation 84: 350 až 356, 1991). Přesná metodologie je popsána dále.
Chirurgické ošetření
Samci novozélandského bílého králíka (3 až 4 kg) se anestetizují sodnou solí pentobarbitalu (30 mg/kg i.v). Prostřednictvím ventrální centrální cervikální iscise se provede trachoetomie a ventilace králíků se provádí tlakovým ventilátorem pomocí 100% kyslíku. Katetry pro podávání léčiva se vloží do levé jugulámí vény, zatímco katetry pro měření tlaku se vloží do levé karotidové arterie. Srdce se exponuje levou throrakotomií a okolo prominentní větve levé koronární arterie se umístí smyčka (00 hedvábí). Ischemie se vyvolá těsným zatažením smyčky ajejím upevněním pomocí svorky. Při uvolnění smyčky se umožní reprefuze postižené plochy. Ischemií myokardu dokumentuje místní cyanosa. Důkazem reperfuze je reaktivní hyperemie.
Protokol
Pokud se zahájí po přinejmenším 30 minutách ustáleného arteriálního tlaku a frekvence srdečního tepu. Ischemické předběžné ošetření se vyvolá dvojnásobnou okluzí koronární arterie, vždy na dobu 5 minut, po nichž následuje 10-minutová reperfuze. Farmakologické předběžné ošetření se indukuje dvojnásobnou infuzi zkoušení sloučeniny, například vždy po dobu 5 minut, přičemž před další intervencí se nechá uplynout 10 minut, nebo infuzi agonisty adenostinu, PIA (0,25 mg/kg). Po ischemickém předběžném ošetření se provede farmakologické předběžné ošetření nebo se neprovede žádné předběžné ošetření (předběžné ošetření vehikulem pro kontrolu), načež následuje 30minutová okluze arterie a potom dvouhodinová reprefuze pro indukci infarktu myokardu. Zkoušená sloučenina a PIA se rozpustí v roztoku chloridu sodného nebo jiném vhodném vehikulu a podává v množství od 1 do 5 mg/kg.
Barvení
Barvení se provádí způsobem popsaným v Liu et al., Circulation 84: 350 až 356,1991. Na konci dvouhodinového reperfuzního období se srdce rychle vyjme, zavěsí do langendorffova zařízení a 1 minutu proplachuje normálním fyziologickým roztokem chloridu sodného zahřátým na tělesnou teplotu (37 °C). Šicí hedvábí použité pro vytvoření smyčky se potom těsně zatáhne, aby se vyvolala reokluze arterie a s perfuzátem se infuzi podá 0,5% suspenze fluorescentních částic (1 až 10 gm), aby se vybarvil celý myokard s výjimkou ohrožené plochy (nefluorescenční ventrikulum). Srdce se rychle zmrazí a přes noc uloží v prostoru o teplotě -20 °C. Následující
-43CZ 289233 B6 den se srdce nařeže na 2mm řezy, které se obarví 1% trifenyltetrazoliumchloridem (TTC). Jelikož TTC reaguje s živou tkání, je možno obarvením odlišit živou (červeně zbarvenou tkáň) od mrtvé (nevybarvené infarktové) tkáně. U každého řezu levého ventrikula se za použití předběžně kalibrovaného obrazového analyzátoru vypočítá infarktová plocha (neobarvená) a ohrožená plocha (bez fluorescentních částic). Pro normalizaci ischemického poškození s ohledem na rozdíly v ohrožené ploše mezi srdci se data vyjádří jako poměr infarktové plochy a ohrožené plochy (% IA/AAR). Všechna data se vyjádří jako střední hodnoty ± směrodatná odchylka a provede se statistické porovnání za použití jednofaktorového testu ANOVA nebo nezdvojeného t-testu. Signifikace je uvažována při hodnotě p < 0,05.
Sloučeniny podle vynálezu se mohou podávat jakoukoliv metodou, pomocí které je možno je přednostně dodat do jatemí a/nebo srdeční tkáně. Tyto metody zahrnují orální parenterální, interduodenální cestu atd. Sloučeniny podle vynálezu se obvykle podávají v jediné dávce, například jednou denně, nebo v několika dávkách.
Množství a doba podávání sloučeniny nebo sloučenin podle vynálezu budou samozřejmě závislé na konkrétní chorobě nebo stavu, který má být léčen, léčeném pacientovi, na závažnosti postižení, způsobu podávání a úsudku ošetřujícího lékaře. S ohledem na značnou variabilitu pacientů je třeba považovat dále uvedené dávkování pouze za vodítko, přičemž lékař může dávku léčiva upravit tak, aby dosáhl účinnosti (například účinnosti spočívající ve snižování hladiny glukózy), kterou považuje pro pacienta za vhodnou. Při úvahách o požadovaném stupni účinku, jehož se má dosáhnout, musí lékař zvážit nejrůznější faktory, jako je výchozí stav, jiné rizikové (kardiovaskulární) faktory, prodělané choroby, věk pacienta a jeho motivaci.
Obecně leží účinná dávka sloučenin podle vynálezu vhodná pro dosažení požadované účinnosti, například pro snížení hladiny glukózy, triglyceridů a cholesterolu a pro reverzní účinek na hyperinzulinemii v rozsahu od 0,005 do 50 mg/kg/den, přednostně na hyperinzulinemii v rozmezí od 0,005 do 50 mg/kg/den, přednostně od 0,01 do 25 mg/kg/den a nejvýhodněji od 0,1 do 15 mg/kg/den.
Sloučeniny podle vynálezu se obvykle podávají orálně, ale možné je i parenterální podávání (například intravenózní, intramuskulámí, subkutánní nebo intramedulámí podávání), kterého se účelně používá například v případech, kdy je orální podávání pro konkrétní zacílení nevhodné nebo kdy pacient není schopen léčivo požít. Také se může indikovat topické podávání, například když pacient trpí gastrointestinálními poruchami nebo když lékař dojde k závěru, že nejvhodnější způsob aplikace léčívaje napovrch tkáně nebo orgánu.
Sloučeniny podle vynálezu se obvykle podávají v podobě farmaceutických prostředků obsahujících přinejmenším jednu sloučeninu podle vynálezu a dále též farmaceuticky vhodné vehikulum nebo ředidlo. Sloučeniny podle vynálezu je tedy možno podávat jednotlivě nebo v kombinacích v jakýchkoliv vhodných orálních parenterálních nebo transdermálních dávkovačích formách.
V případě orálního podávání se může používat farmaceutických prostředků v podobě roztoků, suspenzí, tablet, pilulí, kapslí, prášků apod. Tablet obsahujících různé excipienty, jako je citrát sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý se používá spolu s různými bubřidly, jako je škrob, přednostně bramborový nebo tapiokový škrob a určité komplexní silikáty a různými pojivý, jako je polyvinylpyrrolidon, sacharóza, želatina a klovatina. Pro tabletovací účely se dále také hodí lubrikanty, jako je stearan hořečnatý, natriumlaurylsulfát a mastek. Podobných prostředků se také může používat jako náplní pro měkké a tvrdé želatinové kapsle. Přednostní prostředky tohoto typu obsahují také laktózu a vysokomolekulámí polyethylenglykoly. Má-li se pro orální podávání použít vodných suspenzí a/nebo elixírů, mohou se sloučeniny podle vynálezu mísit s různými sladidly, ochucovadly, barvicími činidly, emulgátory a/nebo suspenzními činidly, jakož i jinými ředidly, jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerol a jejich různé kombinace.
-44CZ 289233 B6
Pro účely parenterálního podáváni se může použít roztoků v sezamovém nebo arašídovém oleji nebo ve vodném propylenglykolu, jakož i sterilních vodných roztoků odpovídajících vodorozpustných solí. Takové vodné roztoky mohou být účelně pufřovány a kapalné ředidlo je předem isotonizováno dostatečným množstvím roztoku chloridu sodného nebo glukózy. Takové vodné roztoky se zvláště hodí pro intravenózní, intramuskulámí, subkutánní a intraperitoneální injekční podávání. Sterilní vodná média vhodná pro tyto aplikace je možno snadno vyrobit standardními technologiemi, které jsou dobře známé odborníkům v tomto oboru.
Pro účely transdermáiního (například topického) podávání se může použít zředěných sterilních vodných nebo zčásti vodných roztoků (obvykle o přibližné koncentraci 0,1 až 5 % hmotnostních). Jinak jsou tyto roztoky podobné výše uvedeným parenterálním roztokům.
Způsoby výroby různých farmaceutických prostředků s určeným množstvím účinné přísady jsou známé nebo jsou zřejmé odborníkům v tomto oboru na základě tohoto popisu. Jako vhodné vodítko lze použít standardní farmaceutické příručky, jako je Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, PA, USA. 15. vydání, z roku 1975.
Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou obsahovat 0,1 až 95 %, přednostně 1 až 70 % sloučeniny nebo sloučenin podle vynálezu. V každém případě je vhodné zajistit, aby podávaný prostředek obsahoval sloučeninu nebo sloučeniny podle vynálezu v množství postačujícím pro léčení choroby nebo chorobného stavu pacienta, tj. choroby nebo stavu závislého na glykogen fosforyláze.
Použité měřicí techniky
NMR spektra se pořizují na spektrometru VARIN XL 300 (Varian Co., Palo Alto, Kalifornie, USA), nebo Bruke AM-300 (Bruker Co., Billerica, Massachusetts, USA), při teplotě asi 23 °C a frekvence 300 MHz v případě protonů a 75,4 mHz v případě uhlíkových jader. Chemický posun se vyjadřuje v hodnotách díly na milion dílů směrem dolů od trimethylsilanu. Rezonance označené jako zaměnitelné se neukázaly v separátním NMR pokusu, když byl vzorek protřepán s několika kapkami D2O ve stejném rozpouštědle. Spektra FAB-MS jsou získána na spektrometru VG70-2505 (V4 analytical Ltd., Wythanshaw, Manchester, Velká Británie) za použití kapalné matrice tvořené směsí dithiothreitolu a dithioerythritolu v poměru 3:1. Termosprejové MS spektrum (TSPMS) se měří na spektrometru Fisons Trio-1000 (Fisons Co., Valencia, Kalifornie, USA) za použití amoniové jonizace. Hmotnostní spektra s chemickou jonizací se měří na přístroji Hewlett Packard 5989 (Hewlett-Packard Co., Palo Alto, Kalifornie, USA) (amoniová ionizace, PBMS). Pokud je popisována intenzita iontů obsahujících chlor nebo brom, byl pozorován očekávaný poměr intenzit (přibližně 3 : 1 pro ionty s obsahem 35C1/37C1 a 1 : 1 pro ionty s obsahem 79Br/8IBr). V těchto případech je uvedena pouze intenzita iontu s nižší hmotností.
HPLC se provádí s detekcí pří 214 nm za použití kolony 250 x 4,6 mm, Rainin Microsorb C-18 (Rainin Co., Wobum, Massachusetts, USA), přičemž eluce se provádí isokraticky za použití systému se dvěma čerpadly a mísičem, který dodává uvedenou směs acetonitrilu a vodného O,1M roztoku dihydrogenfosforečnanu draselného o pH 2,1 (s přísadou kyseliny orthofosforečné) rychlostí 1,5 ml/min. Vzorky se nastřikují ve směsi acetonitrilu a fosfátového pufru o pH 7,0 (0,025M hydrogenfosforečnan sodný a 0,025M dihydrogenfosforečnan draselný). Obsah nečistot v procentech se zjišťuje jako procentický podíl celkové integrované plochy, obvykle v průběhu 10 až 15minutového pokusu. Uvedené teploty tání nejsou korigovány a stanovují se na bodotávku Buchi 510 (Buchi Laboratoriums - Technik AG, Flawil, Švýcarsko) [na tomto bodotánku má kyseliny benzoová teplotu tání 120,5 až 122 °C a kyselina p-bronbenzoová teplotu tání 137,5 až
140,5 °C (Aldrich, čistota nad 99 %)].
-45CZ 289233 B6
Sloupcová chromatografíe se provádí na silikagelu Amicon (30μΜ, velikost pórů 6 nm), (Amicon D Vision, W. Grace & Co. Beverly, Mass. USA) ve skleněné koloně za nízkého tlaku dusíku.
Pokud není uvedeno jinak, používá se reakčních činidel z obchodních zdrojů. Dimethylformamidu, 2-propanolu, tetrahydrofuranu a dichlormethanu (reakční rozpouštědla) se používá v bezvodém stavu a jedná se o produkty získané od Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin, USA). Mikroanalýzy byly provedeny v laboratoři Schwarzkopf Microanalytical Laboratory, Woodside, NY, USA). Pokud jsou v příkladech znižovány koncentrační a odpařovači postupy, jedná se o postupy odstraňování rozpouštědel za podlaku vodní vývěvy v rotačním odpařováku při teplotě lázně nižší než 45 °C.
Postup A (Kopulace peptidu za použití DEC)
Na 0,1 až 0,7M roztoku primárního aminu (1,0 ekvivalentu hydrochloridu primárního aminu a 1,0 až 1,3 ekvivalentu triethylaminu a ekvivalent chlorovodíku) v dichlormethanu (pokud není uvedeno jiné rozpouštědlo se postupně působí při 25 °C 0,95 až 1,2 ekvivalentu specifikované karboxylové kyseliny, 1,2 až 1,8 ekvivalentu hydrátu hydroxybenzotriazolu (obvykle 1,5 ekvivalentu, vztaženo na karboxylovou kyselinu) a 0,95 až 1,2 ekvivalentu (což v molámím poměru odpovídá karboxylové kyselině) l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidhydrochloridu (DEC) a směs se míchá po dobu 14 až 20 hodin. [V případě kopulací prováděných ve větším měřítku, tj. s vyšším množstvím rozpouštědel než 50 ml, se v tomto okamžiku směs zkoncentruje a zbytek se rozpustí v ethylacetátu.] Směs se zředí ethylacetátem, 2 až 3 x promyje 1 nebo 2N roztokem hydroxidu sodného, 2 až 3 x 1 nebo 2N roztokem chlorovodíku [pokud produkt obsahuje ionizovatelnou aminovou funkční skupinu, promývání kyselinou se vypustí], organická vrstva se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje. Vzniklý surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu, triturací nebo překrystalováním, podle toho, jak je to uvedeno, za použití specifikovaných rozpouštědel. Přečištěné produkty se analyzují RP-HPLC, přičemž pokud není jejich čistota vyšší než 95 %, je tento údaj zdůrazněn. Výjimky z použití postupu A jsou jednotlivě uvedeny, pokud je to vhodné, dále. Reakce prováděné při teplotě v rozmezí od 0 do 25 °C se provádějí tak, že se reakční nádoba na počátku vychladí v izolované ledové lázni, která se potom nechá ohřát v průběhu několika hodin na teplotu místnosti.
Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Isopropylester (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (DEC, 1,03 g, 5,38 mmol) se v jedné dávce při 25 °C přidá k roztoku isopropylesteru (3S)-amino-4-fenyl-(2R)-hydroxymáselné kyseliny (1,35 g, 4,93 mmol), 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (1,06 g, 5,4 mmol) a hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu (1,15 g, 7,5 mmol) v dichlormethanu (15 ml). Vzniklá směs se 18 hodin míchá při 25 °C a zředí ethylacetátem. Ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N hydroxidem sodným a dvakrát 2N kyselinou chlorovodíkovou, vysuší síranem hořečnatým a zkoncentruje. Zbytek se chromatografiije na 112 g silikagelu za použití
-46CZ 289233 B6 směsi ethylacetátu a hexanů v poměru 1 : 4 (1,5 litru) a poté směsí ethylacetátu a hexanů v poměru 1 : 3, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu v 91% výtěžku.
HPLC (70/30 5,69 minuty (78 %), 21,5 minuty (19 %), TSPMS 415/417 (MH+, 100%).
*H NMR (CDC13): δ (S, 1H), 7,57 (d, 1H), J = 2 Hz), 7,38 - 7,18 (m, 7-8H), 6,73 (d, 1H. J = asi 2 Hz), 6,57 (d, 1H), J = 9,7 Hz), 5,04 (septet, 1H, J = 6,3 Hz), 4,83 (m, 1H), 4,19 (dd, 1H, J = 2Hz), 3,51 (s, 1H, J = 3,6 Hz), 3,05 (m, 2H), 1,17 (d, 3H, J = 6,3 Hz), 1,11 (d, 3H), J = 6,3 Hz).
V produktu je přítomno asi 15 % další látky, předpokládá se, že se jedná o N,O-bis(5-chlor-lHindol-2-karboxylový derivát): d (zčásti) 9,80 (s, 1H), 5,28 (dd, 1H, indol-C02OH).
Příklad IA
Isopropylester 3(S),2(R)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Roztok 3(S),2(R)-N-[l,l-dimethylethoxy)karbonyl]-3-amino-2-hydroxy-4-fenylbutyronitrilu (Parris et al., Biochemistry 1992, 31, 8125-8141) (252 g, 0,912 mol) v suchém 2-propanolu (6 litrů) se při 5 až 17 °C smísí sbezvodým chlorovodíkem (374 g). Vzniklá směs se míchá 20 hodin při 25 °C (před okolní atmosférou je chráněna rourkou obsahující Drierit) a při méně než 10 °C se k ní přidá další bezvodý chlorovodík (348 g). Získaná směs se míchá 72 hodin při 25 °C a zkoncentruje. Zbytek se rozpustí v 0,lN kyselině chlorovodíkové, roztok se nechá stát 1 hodinu při 25 °C a extrahuje etherem (3x1 litr). Hodnota pH vodné fáze se 6N hydroxidem sodným (asi 450 ml) zvýší na 12. Vytvořená suspenze se extrahuje ethylacetátem (4x1 litr). Extrakty se promyjí vodou (500 ml), roztokem chloridu sodného (500 ml), vysuší a zkoncentrují za vzniku 177 g žluté pevné látky. Tato pevná látka se rozpustí ve vroucím isopropyletheru (2 litry), horký roztok se přefiltruje a filtrát se varem zkoncentruje na objem 1,4 litru. Po ochlazení se vyloučí pevná látka, která se shromáždí filtrací ochlazené směsi, promyje chladným isopropyletherem a vysuší (107 g). Druhá frakce (12,2 g) se získá z matečného louhu. Třetí frakce se získá tak, že se matečný louh zkoncentruje a zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití gradientu 2-propanolu v dichlormethanu (1% až 4%), jako elučního činidla a produkt se překrystaluje z isopropyletheru, kdy se získá 4,4 g požadované sloučeniny. Celkem se vyrobí
123,6 g (57 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 109 °C.
*H NMR (CDCI3): δ 7,35 - 7,2 (m, 5H), 5,11 (septet, 1H, J = 6,2 Hz), 4,01 (d, 1H), J = 2,2 Hz), 3,30 (ddd, 1H), 2,91 (s, AB, 1H, J = 6,3,13,3, Hz), 2,71 (B AB, 1H, J = 8,5,13,3 Hz), 1,8 (br, 23H), 1,25 (d, 6H), J = 6,2 Hz), TSP-MS 238 (MH+).
Příklad 2
Hydrochlorid [(lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-methylpiperazin-l-yl)-3-oxopropyl]amidu 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Dihydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-l-(4—methylpiperazin-l-yl)-4-fenylbutan-l-onu (0,25 mmol) a 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (0,30 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A. Výsledný produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 8% ethanolu v dichlormethanu. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve 42% výtěžku a současně také méně polární látka ve 13% výtěžku, kterou je podle *H NMR odpovídající N,O-bis(5-chlor-lH-indol-2-karbonylový derivát. Polárnější požadovaná látka (48 mg) se rozpustí ve směsi methanolu a 0,25 ml IN kyseliny chlorovodíkové. Vzniklý roztok se zkoncentruje a pevný zbytek se trituruje s etherem. Získá se 42 mg sloučeniny uvedené v nadpisu (HPLC (70/30) 80%, 2,53 minuty a 13 %; 4,04 minuty). Posledně uvedený odpovídá retenční době Ν,Ο-bis O-acylovaného derivátu, jehož izolace byla popsána výše.
-47CZ 289233 B6 ’Η NMR (D2O): δ 7,70 (s, 1H), 7,5 - 7,2 (m, 7H), 7,05 (s, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,58 (m, 4H), 3,34 (m, 4-5H), 2,97 (s, 1,5H), 2,91 (s, 1,5H), PBMS 455/457 (MH+, 100%).
Příklad 2A
Dihydrochlorid (3S)-amino-(2R)hydroxy-l-(4-methylpiperazin-l-yl)-4-fenylbutan-l-onu
Terc.butylester [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4~methylpiperazm-l-yl)-3-oxopropyl]karbamové kyseliny (0,190 g, 0,5 mmol) se během 0,5 hodiny při 25 °C rozpustí v 4M chlorovodíku v dioxanu. Vzniklá směs se zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 212 mg sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (15/85) 2,85 min, PBMS 278 (MH+, 100%).
Příklad 2B
Terc.butylester [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-methylpiperazin-l-yl)-3-oxopropyl)karbamové kyseliny
N-Methylpiperazin (75 mg, 0,75 mmol) a (2R,3S)-3-terc.butoxykarbonylamino-2-hydroxy-4fenylmáselná kyselina (0,200 g, 0,68 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A. Získá se 225 mg (88 %) bezbarvé pěny, které se použije bez dalšího přečištění. PBMS 378 (MH+, 100%).
Příklad 3 [(1 S)-((R)-hydroxymethylkarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid methylaminu (0,38 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,35 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (použije se však dimethylformamidu při 0 až 25 °C). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 1 až 8% ethanolu v dichlormethanu s obsahem 0,5 % hydroxidu amonného. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (82 %).
HPLC (70/30) 98 % při 3,09 min, PBMS 386/388 (MH+, 100%).
Analýza pro C2oH20C1N303 + 0,25 H2O: vypočteno: C 61,54, H 5,29, N 10,75 nalezeno: C 61,17, H 5,63, N 10,83.
Příklad 4
Methylester (3 S)-[(5-fluor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Methylester (3S)-amino-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (0,8 mmol, WO 9325574, příklad 1A) a 5-fluor-lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,8 mmol) se podrobí kopulační reakci
-48CZ 289233 B6 způsobem popsaným v postupu A (pracuje se však při 0 až 25 °C a za použití kyselé a poté bazické extrakce). Surový produkt se přečistí triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 71 %) o teplotě tání 219,5 až 210 °C.
HPLC (60/40), 4,51 minuty (98 %), PBMS 371 (MH+, 100%).
Analýza pro C20H19FN2O4 + 0,25 H2O: vypočteno: C 64,08, H 5,27, N 7,44 nalezeno: C 64,14, H 5,30, N 7,48.
Příklad 5
Methylester (3 S-[(5-brom-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Methylester (3S)-atnino-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (WO 93/25574, příklad IA) (0,7 mmol) a 5-brom-lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,7 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A (pracuje se však při 0 až 25 °C). Surový produkt obsahuje 25 % Ν,Ο-bis-acylované sloučeniny (HPLC) a použije se ho pro následující transformaci bez dalšího přečištění. Výtěžek činí 97 %.
HPLC (70/30), 4,03 minuty (73 %), 11,8 minuty (25 %).
Vzorek produktu se trituruje se směsí etheru a hexanů a přečištěný produkt se charakterizuje a podrobí biologickým zkouškám.
HPLC (70/30), 4,03 minuty (94 %), 11,7 minuty (4 %).
FABMS 431/433 (MH+, 35%), 307 (100%).
’H NMR (CDCI3): δ 9,31 (br, 1H), 7,75 (d, 1H, J = asi 2Hz), 7,35 - 7,20 (m, 7H), 6,73 (d, 1H, J =
1,6 Hz), 6,47 (d, 1H), J = 9,6 Hz), 4,80 (m, 1H), 4,21 (dd, 1H, J = 2,5 Hz), 3,72 (s, 3H), 3,33 (d, 1H), J = 4 Hz), 3,06 (m, 2H).
Analýza pro C2oHi9BrN20: vypočteno: C 55,70, H 4,44, N 6,50 nalezeno: C 56,12, H 4,62, N 6,16.
Příklad 6 [(lS)-((R)-Dimethylkarbamoylhydroxymethyl)-2-fenylethyl]amid 5-fluor-lH-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid dimethylaminu (0,52 mmol) a (3R)-[(5-fluor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2S)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,43 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (pracuje se však při 0 až 25 °C). Surový produkt se rozpustí v dichlormethanu a vzniklý roztok se míchá s asi 200 mg dimethylaminopyridin (DMAP)-polystyrenové pryskyřice (Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI, USA) po dobu 1 hodiny, přefiltruje a zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky (výtěžek 62 %) o teplotě tání 213 až 214 °C.
HPLC (60/40) 4,15 minuty (97 %), TSPM 384 (MH+, 100%).
-49CZ 289233 B6
Analýza pro C21H22FN3O3:
vypočteno: C 65,78, H 5,78, N 10,96 nalezeno: C 65,89, H 6,16, N 11,00.
Příklad 7 { (1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethy 1} amid 5-brom-1 H-indol2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3 S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-feny lbutyramidu (0,36 mmol) a 3-[(5-brom-lH-indol-2-karbonyl)amino]-2-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,36 mmol) se podrobí kopulační reakcí způsobem popsaným v postupu A. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 30% a 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla a poté triturací se směsí etheru a hexanů v poměru 1:1. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu v 65% výtěžku.
HPLC (60/40) 5,77 minuty (100 %), PBMS 460/462 (MH+, 90%).
Analýza pro C2iH22BrN3C>4: vypočteno: C 54,79, H 4,82, N 9,13 nalezeno: C 64,88, H 5,22, N 8,83.
Příklad 8 { (1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-3-methyllH-indol-2-karboxyIové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,3 mmol) a 5-chlor-3-methyl-lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,3 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A. Surový produkt se přečistí triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu v 59% výtěžku.
HPLC (60/40) 7,45 minuty (100 %), PMBS 430/432 (MH+, 100/40%).
*H NMR (CDClj): δ 8,98 (br, 1H), 7,56 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,4 - 7,15 (m, 7H), 6,35 (d, 1H, J = 9 Hz), 4,95 (m, 1H), 4,32 (d, 1H, J = 5,1 Hz), 3,81 (d, 1H, J = 5 Hz), 3,36 (s, 3H), 3,15 (s, 3H), 3,15 (dd, 1H), 3,03 (dd, 1H, J = 13,16 Hz), 2,51 (s, 3H).
Analýza pro C22H24CIN3O4: vypočteno: C 61,46, H 5,63, N 9,77 nalezeno: C 61,13, H 5,53, N 9,74.
Příklad 8A
5-Chlor-3-methyl-l H-indol-2-karboxylová kyselina
2N hydroxid sodný (20 ml) se přidá k suspenzi ethylesteru 5-chlor-3-methyl-lH-indol-2karboxylové kyseliny (7,0 g, 29,4 mmol) v methanolu (50 ml). Vzniklá směs se 18 hodin míchá při 25 °C a přidá se kní tetrahydrofuran (100 ml). Získaný roztok se 30 minut zahřívá ke zpětnému toku a zkoncentruje. Zbytek se rozpustí ve vodě a vodný roztok se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Vodná vrstva se okyselí, vyloučená sraženina se shromáždí filtrací a promyje vodou (výtěžek: 5,24 g).
-50CZ 289233 B6
Příklad 8B
Ethylester 5-chlor-3-methyl-lH-indol-2-karboxylové kyseliny p-Chlorfenylhydrazon ethyl-2-oxobutanoátu se připraví modifikovanou Japp-Klingemannovou reakcí, jak je popsána vLions ang Hughes (J. Proč. Roy. Soc. N.S. Wales, 1939, 71:445) za použití p-chloranilinu a ethyl-2-ethylacetoacetátu. Připravený fenylhydrazon se postupem popsaným vLions and Hughes, J. Proč. Roy. Soc. N.S. Wales, 1939, 71:445 pro odpovídající bromfenylhydrazon nechá reagovat s chlorovodíkem v ethanolu. Výsledná směs se zkoncentruje a zbytek se suspenduje ve vodě. Sloučenina uvedená v nadpisu se shromáždí filtrací jako oranžová pevná látka.
Příklad 8C
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu 31055— 274-2 311055-85-1
Terc.butylester {(lS)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}karbamové kyseliny (791 mg, 2,3 mmol) se během 45 minut při 25 °C rozpustí ve 4M roztoku chlorovodíku v dioxanu, vzniklá směs se zkoncentruje a zbytek se odpaří s etherem. Zbytek se suspenduje v etheru a suspenze se přefiltruje. Získá se 583 mg (91 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
Příklad 8D
Terc.butylester {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)-methyl]-2-fenylethyl}karbamové kyseliny (3S)-terc.Butoxykarbonylamino-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (10,06 g, 34,1 mmol, Schweizerhall, lne.; S. Plainfield, NJ) a hydrochlorid N,O-dimethylhydroxylaminu (3,49 g, 35,7 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakcí. Surový produkt (10,7 g) se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 25 až 50% ethylacetátu v hexanech. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě pěny (9,5 g, 83 %).
MS 339 (MH+, 100%).
Příklad 9
Methylester (3 S)-[(5,6-dichlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Methylester (3S)-amino-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (1,2 mmol) a 5,6-dichlor-lHindol-2-karboxylová kyselina (1,2 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční doba 72 hodin). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 40 % ethylacetátu v hexanech. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu v 52% výtěžku o teplotě tání 198 až 202 °C.
TSPMS: 421/423 (MH+, 100%).
-51CZ 289233 B6
Analýza pro C20HUCI2N2O4 + 0,25 H2O: vypočteno: C 66,42, H 4,38, N 6,58 nalezeno: C 56,25, H 4,17, N 6,58.
Příklad 9A
5,6-Dichlor-lH-indol-2-karboxylová kyselina
Zinkový prach (3,52 g, 54 mmol) se pomalu přidá k zahřátému roztoku 3,4-chlor-5nitrofenylpyrohroznové kyseliny (1,5 g, 5,4 mmol) v kyselině octové (15 ml). Po několika málo minutách dojde k intenzivní (exotermické) reakci. Vzniklý roztok se zahřeje na 80 °C a chromatografie na tenké vrstvě ukáže, že reakce je dokončena. Reakční směs se přefiltruje, odfiltrovaná pevná látka se promyje kyselinou octovou a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se rozpustí ve 2N hydroxidu sodném a získaný roztok se promyje etherem (3 x), dichlormethanem (2 x) a okyselí 6N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Okyselená směs se extrahuje ethylacetátem. Extrakty se vysuší a zkoncentrují. Získá se světle hnědá pevná látka (458 mg, 34 %).
HPLC (60/40), 5,31 (93 %).
Příklad 9B
Draselná sůl 3,4-dichlor-5-nitrofenylpyrohroznové kyseliny
Absolutní ethanol (25 ml) se přidá 3 až 15 °C přidá k míchané směsi kovového draslíku (2,67 g, 68 mmol) v etheru (100 ml). Vzniklý roztok se během 5 až 10 minut při 3 °C smísí s roztokem diethyloxalátu (10,0 g, 62 mmol) a 2-methyl-3,4-dichlor-l-nitrobenzenu (10,0 g, 62 mmol). Získaný roztok se míchá 30 minut při 3 °C a 18 hodin při 25 °C. Poté se směs přefiltruje a oddělená pevná látka se promyje etherem a vysuší (13,7 g). Tato látka (12,7 g) se rozpustí v 400 ml horké vody, vodný roztok se ochladí a extrahuje etherem. Vodná vrstva se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 2. Etherová vrstva se oddělí, vysuší a zkoncentruje. Získá se 7,5 g pevné látky, která se trituruje s hexany. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žluté pevné látky (7,01 g, 41 %).
Příklad 10 {(lS)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-kyano-lH-indol2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,3 mmol) a 5-kyano-lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,3 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční doba 5 dní). Surový produkt se během 45 minut při 25 °C rozpustí v methanolu, který obsahuje 1,0 ekvivalentu IN hydroxidu sodného. Methanolický roztok se zkoncentruje a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N kyselinou chlorovodíkovou a dvakrát 2N hydroxidem sodným, vysuší a zkoncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech. Produkt se dále přečistí triturací se směsí etheru a hexanů v poměru 1:1. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu v 66% výtěžku o teplotě tání 210 až 211 °C.
HPLC (60/40) 3,9 minuty (100%); PBMS 407 (MH+, 100%).
-52CZ 289233 B6 ‘H NMR (CDCIj): 5 9,83 (br, IH), 7,97 (s, IH), 7,46 (m, 2H), 7,36 (m, 4H), 6,88 (d, IH, J = 2 Hz), 6,56 (d, IH, J = 10 Hz), 4,95 (m, IH), 4,32 (d, IH, J = 5,5 Hz), 3,83 (d, IH, J = 5,4 Hz), 3,36 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 3,10 (m, 2H).
Analýza pro C22H22N4O4: vypočteno: C 65,01, H 5,46, N 13,78 nalezeno: C 64,92, H 5,60, N 13,78.
Příklad 10A
5-Kyano-l H-indol-2-karboxylová kyselina
Ethylester 5-kyano-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (1,71 g, 8,0 mmol) se přidá k roztoku ethanolu (10 ml) a hydroxidu draselného (2 g). Vzniklá směs se 1 hodinu zahřívá ke zpětnému toku a přidá se k ní voda, aby se vzniklá sraženina rozpustila. Hodnota pH roztoku se 6N kyselinou chlorovodíkovou nastaví na 1, načež se vyloučí sraženina. Směs se poté ochladí v ledové lázni a přefiltruje. Oddělená bezbarvá pevná látka se promyje chladnou vodou a vysuší (1,51 g). Část tohoto produktu (1,4 g) se suspenduje v horké kyselině octové (40 ml) a suspenze se ochladí. Vytvořená pevná látka se odfiltruje, promyje chladným ethylacetátem a vysuší. Získá se 980 mg (70 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 3,09 minuty (97 %).
Příklad 10B
Ethylester 5-kyano-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Zinkový prach (57,8 g, 887 mmol) se přidává k horké suspenzi ethylesteru 3-kyano-5nitrofenylpyrohroznové kyseliny (23,2 g, 88 mmol) v kyselině octové (225 ml) a vodě (225 ml) (Pozor! Reakce je zpočátku výrazně exotermická) takovou rychlostí, aby se udržela teplota zpětného toku. Reakční směs se udržuje při teplotě zpětného toku 0,5 hodiny a přefiltruje se. Odfiltrované soli se promyjí horkou kyselinou octovou (150 ml). Filtrát se přes noc ochladí, vyloučené krystaly se odfiltrují, promyjí chladnou směsí kyseliny octové a vody v poměru 1 : 1 a vodou a vysuší (10,11 g, 53%). Filtrát se zkoncentruje, zbytek se rozpustí v ethylacetátu a vytvořený roztok se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Získá se druhá dávka produktu (5,05 g).
Hlavní dávka se použije při následujících transformacích.
Příklad 10C
Ethylester 3-kyano-5-nitrofenylpyrohroznové kyseliny
Roztok ethoxidu sodného v ethanolu (z 2,2 g 400 mmol kovového sodíku ve 400 ml methanolu) se přidá při 0°C ke směsi destilovaného diethyloxalátu (120 g, 821 mmol) a 3-methyl-4nitrobenzonitrilu (32 g, 197 mmol). Vzniklý červený roztok se zahřívá 18 hodin na 40 °C. Poté se směs ochladí a zředí vodou (600 ml). Zředěná směs se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 2,1 a přefiltruje při 13 °C, čímž se shromáždí vyloučená sraženina. Surový produkt se vysuší a přečistí chromatografií na silikagelu za použití 15, 30 a 50% acetonu v hexanech. Získá se oranžová pevná látka, která se použije bez dalšího přečištění (23,6 g, 31 %).
-53CZ 289233 B6
Příklad 11 {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenyIethyl} amid 5-methyl-l Hindol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R}-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,5 mmol) a 5-methyl-l H-indol-2-karboxylová kyselina (0,5 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A (reakční teplota 0 až 25 °C, nejprve extrakce kyselinou, poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Výtěžek: 75 %, HPLC (60/40), 5,06 minuty (99%), PMBS 396 (MH+, 100%).
’H NMR (CDClj): δ 9,14 (br, 1H), 7,4 - 7,2 (m, 6H), 7,07 (dd, 1H, J = asi 8 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 2Hz), 6,45 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,90 (m, 1H), 4,29 (d, 1H, J = 5,5 Hz), 3,83 (d, 1H, J = 5,5 Hz), 3,35 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 3,09 (dd, 1H, J = 6,13 Hz), 3,00 (dd, 1H, J = 9,13 Hz), 2,42 (s, 3H).
Analýza pro C22H25N3O4: vypočteno: C 66,82, H 6,37, N 10,18 nalezeno: C 66,97, H 6,48, N 10,33.
Příklad 12 {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-fluor-l H-indol2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,5 mmol) a 5-fluor-l H-indol-2-karboxylová kyselina (0,5 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A (nejprve extrakce kyselinou, poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Výtěžek: 69 %, HPLC (60/40), 4,55 minuty (95%), PMBS 400 (MH+, 100%).
’H NMR (CDCI3): δ 9,34 (br, 1H), 7,4 - 7,2 (m, 7H), 7,00 (dt,, 1H, J = 2,5, 9,1 Hz), 6,80 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,48 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,93 (m, 1H), 4,30 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 3,83 (d, 1H), J = 5,3 Hz), 3,35 (s, 3H), 3,14 (s, 3H), 3,08 (dd, 1H, A AB), 3,02 (dd, 1H, J = 5,11 Hz, B AB).
Analýza pro C21H22FN3O4: vypočteno: C 63,15, H 5,55, N 10,52 nalezeno: C 64,19, H 6,07, N 10,91.
Příklad 13 {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 1 H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3 S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,26 mmol) a lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,28 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A (reakční teplota 0 až 25 °C). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Výtěžek: 87 %, HPLC (60/40) 4,26 minuty (96%), PMBS 382 (MH+, 100%).
*H NMR (CDCI3): δ 9,24 (br, 1H), 7,63 (d, 1, J = 8,0 Hz), 7,4 - 7,15 (m, 8H), 7,11 (dt, 1H, J = 8,0, 1,5 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 6,48 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,94 (m, 1H), 4,30 (d, 1H, J =
-54CZ 289233 B6
5,5 Hz), 3,84 (d, IH, J = 5,4 Hz), 3,36 (s, 3H), 3,14 (s, 3H), 3,09 (dd, IH, J = 6, 13 Hz, A AB),
3,03 (dd, IH, J= 10, 13 Hz, B AB).
Analýza pro C21H23N3O4:
vypočteno: C 66,13, H 6,08, N 11,01 nalezeno: C 66,19, H 6,08, N 11,02.
Příklad 14 { (1 S)-[(Methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny (3S)-[(5-Chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-4-fenylmáselná kyselina (357 mg, 1,0 mmol) a hydrochlorid N,O-dimethylhydroxylaminu (98%, 98 mg, 1,0 mmol) se podrobí kopulační reakci popsané v postupu A (jako rozpouštědla se použije dimethylformamidu). Vzniklá pěna se trituruje s etherem a získaná lepivá pevná látka se rozpustí v dichlormethanu. Dichlormethanový roztok se zkoncentruje a zbytek se trituruje s hexany. Získá se 215 mg (54%) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 6,38 minuty (98 %), PBMS 400/402 (MH+, 100%).
Analýza pro C21H22CIN3O3: vypočteno: C 63,08, H 5,55, N 10,51 nalezeno: C 62,91, H 5,79, N 10,21.
Příklad 14A (3 S)-[(5-Chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-4-fenylmáseIná kyselina
2N hydroxid sodný (3,0 ml) se při 25 °C přidá k suspenzi methylesteru (3S)-[(5-chlor-lHindol-2-karbonyl)amino]-4-fenylmáselné kyseliny (1,28 g, 3,45 mmol) v methanolu (10 ml). Po 18 hodinách se reakční směs zředí tetrahydrofuranem (10 ml), vzniklý roztok se 10 minut zahřívá ke zpětnému toku a zkoncentruje. Pevný zbytek se míchá 15 minut se 6N kyselinou chlorovodíkovou. Vytvořená suspenze se přefiltruje, oddělená pevná látka se promyje 2N kyselinou chlorovodíkovou a vysuší. Získá se 1,15 g (93 %) požadované sloučeniny.
HPLC (60/40) 5,18 minuty (100 %).
Příklad 15
Methylester (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (DEC, 71 g, 370 mmol) se při 25 °C přidá ke směsi methylesteru (3S)-amino-(2R)-hydroxy-4~fenylmáselné kyseliny (WO 93/25574, příklad IA, 77,5 g, 370 mmol), 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (72,45 g, 370 mmol) a hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu v dichlormethanu (640 ml). Vzniklá směs se 18 hodin míchá a poté zkoncentruje. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N hydroxidem sodným, dvakrát IN kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vyšší a zkoncentruje. Získá se látka ve formě žluté pěny (140,7 g, 98 %), které se použije pro následující hydrolýzu bez dalšího přečištění HPLC (70/30) 3,61 minuty (82 %),
-55CZ 289233 B6
9,57 minuty (13 %). Čistý vzorek se získá chromatografií na silikagelu za použití ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla a má teplotu tání 180 až 183 °C.
*H NMR (CDCI3): δ 9,52 (br, 1H), 7,55 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,35 - 7,15 (m, 7H), 6,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 10 Hz), 4,82 (m, 1H), 4,22 (s, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,4 (br, 1H), 3,05 (m, 2H).
BCNMR(CDC13, 75,5 mHz): δ 174,2, 164,4, 137,1, 135,0, 131,1, 129,8, 128,8, 128,3, 127,0, 126,2,125,0,121,0,113,2, 102,3,70,4,43,3,43,1,38,1.
TSPMS 387/389 (MH+, 100/30%).
Analýza pro C20H19CIN2O4 + 0,5 H2O: vypočteno: C 60,69, H 5,09, N 7,08 nalezeno: C 60,38, H 4,98, N 6,86.
Příklad 16
3-[(5-Chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2RS)-hydroxypropionová kyselina
Hydrochlorid methylesteru (RS)-3-amino-2-hydroxypropionové kyseliny (6,6 mmol) a 5chlor-lH-indol-2-karboxylová kyselina (6,6 mmol) se podrobí kopulační reakci způsobem popsaným v postupu A. Přitom se však směs podrobí nejprve kyselé a poté bazické extrakci a během prvního promytí kyselinou se vytvoří sraženina, takže se směs přefiltruje a filtrát se zpracuje obvyklým způsobem podle postupu A. Surový produkt (920 mg) s rozpustí v methanolu a 2 hodiny při 25 °C nechá reagovat s IN hydroxidem sodným (6,6 ml). Ke směsi se přidá IN hydroxid sodný (6,6 ml) a směs se zkoncentruje. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se promyje 2N kyselinou chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Bezbarvý pevný zbytek se míchá v chloroformu a vytvořená směs se přefiltruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (763 mg, 40 %) o teplotě tání 214 až 215 °C.
HPLC (60/40) 2,86 minuty (89 %), PBMS (283/285 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-de): δ 11,78 (s, 1H), 8,62 (t, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz,) 7,42 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 2, 8,7 Hz), 7,14 (d, 1H, J = 2Hz), 4,18 (dd, 1H, J = 5,8 Hz), 3,58 (m, 2H).
Analýza pro C12HHCIN2O4 + 0,1 H2O: vypočteno: C 50,66, H 3,97, N 9,85 nalezeno: C 50,80, H 4,06, N 9,48.
Příklad 16A
Hydrochlorid methylesteru (RS)-3-amino-2-hydroxypropionové kyseliny
Směs D,L-isoserinu (2,06 g, 19,6 mmol), methanolu (20 ml) a chlortrimethylsilanu (9,5 g, 88 mmol) se 5 hodin zahřívá ke zpětnému toku, ochladí a zkoncentruje. Získá se 3,20 g sloučeniny uvedené v nadpisu.
-56CZ 289233 B6
Příklad 17 [(1 S)-((R)-methoxymethylkarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-methoxy-N,N-dimethyl-4-fenylbutyramidu (0,84 mmol) a 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (0,80 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční teplota 0 až 25 °C, rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 2:1). Produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanů v poměru 1:1, jako elučního činidla. Získá se sloučenina ve výtěžku 81 %.
HPLC (60/40) 5,44 minuty (100 %), TSPMS 414/416 (MH+, 100/30%).
’H NMR (CDClj): 8 9,38 (br, IH), 7,60 (d, IH, J = 2 Hz), 7,4 - 7,2 (m, 6H), 7,20 (dd, IH, J = 2, 9 Hz), 7,03 (d, IH, J = 8 Hz), 6,92 (d, IH, J = 2 Hz), 4,50 (m, IH), 4,00 (d, IH, J = 2 Hz), 3,40 (d, 3H), 3,22 (dd, A AB, IH, J = 5,13 Hz), 3,00 (dd, B AB, IH, J = 10,13 Hz), 2,86 (s, 3H), 2,65 (s,3H).
Analýza pro C22H24C1N3O: vypočteno: C 63,48, H 5,84, N 10,15 nalezeno: C 63,48, H 5,97, N 9,97.
Příklad 17A
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-methoxy-N,N-dimethyl-4-fenylgutyramidu
Terc.butylester (1 S,2R)-(l-benzyl-2-dimethylkarbamoyl-2-methoxyethyl)karbamové kyseliny (283 mg, 0,84 mmol) se během 1,5 hodiny při 25 °C rozpustí v 4N chlorovodíku v dioxanu (1 ml). Vzniklý roztok se zkoncentruje a zbytek se odpaří s etherem a vysuší.
Příklad 17B
Terc.butylester (lS,2R)-(l-benzyl-2-dimethylkarbamoyl-2-methoxyethyl)karbamové kyseliny
Olejová disperze natriumhydridu (53 mg, 50%) se při 0 °C přidá k roztoku terc.butylesteru (lS,2R}-(l-benzyl-2-dimethylkarbamoyl-2-hydroxyethyl)karbamové kyseliny (322 mg, 1,0 mmol) v tetrahydrofuranu (4 ml). Po odeznění efervescence (několik minut se ke směsi přidá methyljodid (155 mg) a po 15 minutách dalších 11 mg disperze natriumhydridu a 23 mg methyljodidu. Po 15 minutách se ke směsi přidá vodný roztok chloridu amonného a ethylacetát. Organická vrstva se oddělí, promyje vodou a 2N hydroxidem sodným, vysuší a zkoncentruje. Získá se viskózní olej (283 mg, 84 %), kterého se použije bez dalšího přečištění.
Příklad 17C
Terc.butylester (1 S,2R)-( l-benzyl-2-dimethylkarbamoyl-2-hydroxyethyl)karbamové kyseliny (3S)-terc.Butoxykarbonylamino-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (Schweizerhall, lne., S. Plainfield, NJ, 1,02 g, 3,4 mmol) a hydrochlorid dimethylaminu (338 mg, 4,1 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, směs dimethylformamidu a dichlormethanu, jako rozpouštědlo, extrakce kyselinou a poté bází). Surový produkt
-57CZ 289233 B6 se chromatografuje na silikagelu za použití 1 až 8% ethanolu v dichlormethanu. Získá se 995 mg (91 %) požadované sloučeniny ve formě pěny.
Příklad 18 (3-azetidin-l-yl-(lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl)amid 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Azetidin (0,44 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,4 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (směs dimethylformamidu a dichlormethanu v poměru 1:1, jako rozpouštědlo). Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve výtěžku 94 %.
HPLC (60/40) 4,55 minuty (>98%), PBMS 412/414 (MH+, 100%).
Analýza pro C22H22CIN3O3 + 0,25 H2O: vypočteno: C 63,46, H 5,45, N 10,09 nalezeno: C 63,61, H 5,66, N 10,27.
Příklad 19 [(1 S)-Benzyl-(2R)-methoxy-2-(methoxymethylkarbamoyl)ethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny (3S,2R)-3-Amino-(2R)-N-dimethoxy-N-methyl-4-fenylburyramid (0,31 mmol) a 5-chlorlH-indol-2-karboxylová kyselina (0,31 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se požadovaná sloučenina ve výtěžku 81 %.
HPLC (60/40) 7,39 minuty (98 %), PBMS (430/432) (MH+, 100%).
’H NMR (CDCI3): 5 9,44 (s, 1H), 7,58 (d, 1H, J = asi 2 Hz), 7,4 - 7,22 (m, 6H), 7,19 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8 Hz), 6,89 (d, 1H, J = asi 2 Hz), 6,80 (d, 1H, J = 8 Hz), 4,72 (m, 1H), 3,93 (s, 1H), 3,39 (s, 3H), 3,24 (s, 3H), 3,19 (dd, 1H, J = 5,1, 13 Hz, A AB), 3,06 (s, 3H), 2,95 (dd, 1H, J = 10,9,13 Hz, B AB).
Analýza pro C22H24CIN3O4 + 0,33 C6Hi4: vypočteno: C 62,85, H 6,30, N 9,16 nalezeno: C 62,91, H 6,29, N 8,95.
Příklad 19A (3S,2R)-3-Amino-(2R)-N-dimethoxy-N-methyl-4-fenylbutyramid
Terc.butylester (1 S,2R)-( l-benzyl-2-methoxymethylkarbamoyl-2-methoxyethyl)karbamové kyseliny (113 mg, 0,32 mmol) se během 1 hodiny při 25 °C rozpustí ve 4N chlorovodíku vdioxanu (4 ml). Vzniklý roztok se zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (93 mg, 100 %).
-58CZ 289233 B6
Příklad 19B
Terc.butylester (1 S,2R)-( l-benzyl-2-methoxymethylkarbamoyl-2-methoxyethyl)karbamové kyseliny
Disperze natriumhydridu (30 mg 50% disperze v oleji) se při 0 °C přidá k roztoku terc.butylesteru (1 S,2R)-( l-benzyl-2-methoxymethylkarbamoyl-2-hydroxyethyl)karbamové kyseliny v tetrahydrofuranu (2 ml). Po 5 minutách se ke směsi přidá methyljodid (175 mg), vzniklá směs se 18 hodin nechá stát při 25 °C a přidá se k ní ethylacetát a nasycený vodný roztok chloridu amonného. Organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší a zkoncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 10 až 20% ethylacetátu v hexanech. Získá se 113 mg (52 %) požadované sloučeniny. HPLC (60/40) 6,45 minuty (>96%).
Příklad 20
Benzylester [(2S)—[(5—chlor—1 H-indol-2-karbonyl)amino]-( 1 R)-(methoxymethyl)karbamoyl)3-fenylpropoxy]octové kyseliny
Hydrochlorid benzylesteru (lR,2S)-[2-amino-l-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxy]octové kyseliny (162 mg, 0,38 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční teplota: 0 až 25 °C) s 5-chlor-lH-indol-2-karboxylovou kyselinou (71 mg, 0,36 mmol). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 75% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (61 %) ve formě sklovité pevné látky.
TSPMS 564/566 (MH+, 90/60%), 581/583 MH+NH3, 100/50%).
Příklad 20A
Hydrochlorid benzylesteru (lR,2S)-[2-amino-l-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxy]octové kyseliny
Benzylester (lR,2S)-[2-terc.butoxykarbonylamino-l-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxyjoctové kyseliny (170 mg, 0,35 mmol) se během 1,5 hodiny při 25 °C rozpustí ve 4N chlorovodíku v dioxanu (2 ml). Vzniklý roztok se zkoncentruje a zbytek se odpaří s etherem a vysuší. Získá se 163 mg oleje.
MS 387 (MH+, 100%).
Příklad 20B
Benzylester (1 R,2S)-[2-terc.butoxykarbonylamino-l-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxyjoctové kyseliny
Disperze natriumhydridu (120 mg, 50% voleji, 2,8 mmol) se při 0 °C přidá kroztoku terc.butylesteru (1 S,2R)-( l-benzyl-2-methoxymethylkarbamoyl-2-hydroxyethyl)karbamové kyseliny (858 mg, 2,5 mmol) v tetrahydrofuranu (8 ml). Po odeznění šumivé reakce se ke směsi přidá benzylbromacetát (0,56 g, 2,5 mmol) a vzniklá směs se zahřeje na 25 °C. Po 2 hodinách se k ní přidá další disperze natriumhydridu (12 mg), směs se míchá 1 hodinu a zředí ethylacetátem a nasyceným chloridem amonným. Organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší a zkoncentruje. Získaný olej se chromatografuje na silikagelu za použití 20 až 75% ethylacetátu
-59CZ 289233 B6 v hexanech, jako elučního činidla. Frakce o nejvyšší čistotě se spojí, čímž se získá 175 mg (15 %) požadované sloučeniny ve formě oleje.
MS 487 (MH+), 387 (100%).
Příklad 21 [(2S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karboxylamino]-(lR)-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxyjoctová kyselina
Směs benzylesteru [(2 S>—[(5—chlor— 1 H-indol-2-karbonyl)amino]-( lR)-(methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropoxy]octové kyseliny (120 mg, 0,2 mmol) a 50% vlhkého hydroxidu palladia na uhlíku, jako katalyzátor, v methanolu (50 ml) se 1 hodinu třepe za tlaku vodíku 275 kPa a teplotě 25 °C. Vzniklá směs se 30 minut nechá stát a přefiltruje přes pomocný filtrační prostředek. Filtrát se zkoncentruje a pevný zbytek (121 mg) se chromagotrafuje na silikagelu za použití 25 až 100% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 84 mg pevné látky.
HPLC (60/40), 4,81 (37 %) a 6,24 minuty (63 %).
’H NMR a MS analýza ukáže, že ve směsi je přítomen methylester 5-des-Cl sloučeniny uvedené v nadpisu a methylester sloučeniny uvedené v nadpisu. Tato pevná látka se rozpustí v tetrahydrofuranu a tetrahydrofuranový roztok se 30 minut při 25 °C nechá reagovat s IN hydroxidem sodným (170 μΐ). Vytvořený roztok se zkoncentruje a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a IN kyselinu chlorovodíkovou. Organická vrstva se oddělí, promyje vodou, vysuší a zkoncentruje. Získá se směs sloučeniny uvedené v nadpisu a jejího des-5-Cl analogu. Výtěžek činí 85 mg, 71 %.
HPLC (60/40) 3,49 minuty (37 %), 4,23 minuty (61 %), MS 338 (MH+, 100%), TSPMS 474/476 (MH+ pro sloučeninu uvedenou v nadpisu, 40 %), 440 (MH+ pro její des-Cl analog, 95 %).
Příklad 22 (3 S)-[( 1 H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyramid (2R,3S)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylburyramid (0,59 mmol, US 4 599 198, příklad ID) a indol-2-karboxylová kyselina (0,71 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (promytí kyselinou a poté bází). Vzniklý produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 66 až 100% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se požadovaná sloučenina v 89% výtěžku.
HPLC (60/40, kolona Dupont Zorbax C-8), 99%, MS 338 (MH+, 100%).
!H NMR (DMSO-d6), δ 11,53 (s, 1H), 7,95 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,5 až 7,15 (m, 8,8Hz), 7,2 (d, 1H, J = asi 7 Hz), 7,09 (d, 1H, J = asi 8 Hz), 5,95 (d, 1H, J = 6 Hz), 4,55 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 2,98 (dd, lh, A AB, J = 6,13 Hz), 2,80 (dd, 1H, B AB, J = 8,13 Hz).
-60CZ 289233 B6
Příklad 23 (3S)-[(5-Chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2S)-hydroxy-4-fenylbutyramid
5-Chlor-lH-indol-2-karbonylfluorid (0,30 g, 1,29 mmol) se při 25 °C přidá k roztoku hydrochloridu (2S,3S)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylbutyramidu (0,319 g, 1,61 mmol) a triethylaminu (145 mg, 1,42 mmol) v dichlormethanu (2 ml). Po 18 hodinách se směs zředí ethylacetátem, zředěný roztok se promyje dvakrát IN roztokem kyseliny chlorovodíkové, dvakrát nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 50 až 100% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 0,31 g pevné látky, která se překrystaluje z isopropylalkoholu. Výtěžek: 0,020 g, FABMS 372/374 (MH+, 21 %), 217 (100%).
Ή NMR (DMSO-dé, zčásti): δ 8,5 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,48 (d, 1H, J = 2Hz), 7,4 - 7,1 (m, 9H), 5,95 (d, 1H, J = 7 Hz), 4,56 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 2,92 (dd, 1H, J = 11,13 Hz), 2,67 (dd, J = 3, 13 Hz).
Příklad 23A
5-Chlor-l H-indol-2-karbonylfluorid
Roztok 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (10,0 g, 51,1 mmol) a pyridinu (33,1 mmol) v acetonitrilu se při 25 °C přidá k roztoku fluoridu kyseliny kyanurové (2,76 g, 20,4 mmol) v acetonitrilu (celkem 340 ml). Odebírají se alikvoty reakční směsi, která se vždy rozloží butylaminem a podrobí chromatografii na tenké vrstvě. Tak se ukáže, že reakce je po 1 hodině téměř dokončena. Reakční směs se nalije na led a extrahuje etherem. Extrakt se vysuší síranem sodným a zkoncentruje. Získané pevné látky se použije bez dalšího přečištění (10,0 g, 99 %). Alikvotní vzorek rozložený butylaminem se podrobí chromatografii na tenké vrstvě, která ukáže přítomnost určitého množství 5-chlorindol-2-karboxylové kyseliny a méně polárního Nbutylamidu. Vzorek produktu se přečistí chromatografíí na silikagelu za použití směsi ethylacetátu v hexanech (50 až 100%), aby se mohla provést charakterizace sloučeniny (16368—130— 1).
Příklad 23B
Hydrochlorid (2 S,3 S)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylbutyramidu
Terc.butylester [(lS)-((S)-karbamoyIhydroxymethyl)-2-fenylethyl]karbamové kyseliny (0,50 g, 1,7 mmol) se během 1 hodiny při 25 °C rozpustí ve 4M roztoku chlorovodíku vdioxanu. Výsledná směs se zkoncentruje, zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 430 mg bezbarvé pevné látky.
HPLC (60/40) 2,68 min, 100%.
Příklad 23C
Terc.butylester [(1 S)-((S)-karbamoylhydroxymethyl)-2-fenylethyl]karbamové kyseliny
Tetrabutylamoniumfluorid (23 ml 1M v tetrahydrofuranu) se při 0 °C přidá k roztoku terc.butylesteru {(lS)-[(S)-(terc.butyldimethylsilanyloxy)karbamoylmethyl]-2-fenylethyl}karbamové kyseliny v tetrahydrofuranu (6 ml). Po 30 minutách se směs zředí ethylacetátem a vodou, organická vrstva se oddělí, promyje vodou, dvakrát IN kyselinou chlorovodíkovou,
-61CZ 289233 B6 dvakrát IN hydrogenuhličitanem sodným a roztokem chloridu sodného. Vzniklá emulze se přefiltruje přes pomocnou filtrační látku, filtrát se vysuší a zkoncentruje na bezbarvou pevnou látku (0,5 g, 20 %). Část (3,1 g) filtrací oddělené pevné látky (3,3 g) se překrystaluje z horkého ethylacetátu a za horka přefiltruje. Získá se 1,33 g bezbarvé pevné látky.
Příklad 23D
Terc.butylester {(lS)-[(S)-(terc.butyldimethylsilanyloxy)karbamoylmethyl]-2-fenylethyl}karbamové kyseliny
30% Peroxid vodíku (7,2 ml, 64 mmol) se během 15 minut při 0 °C přidá k roztoku terc.butylesteru [ 1 (S)-benzyl-(2S)-(terc.butyldimethylsilanyloxy)-2-kyanoethyl]karbamové kyseliny (příklad 24d, 5,0 g, 12,8 mmol) a IN hydroxidu sodného (22 ml) v ethanolu (110 ml). Vzniklá směs se 1,5 hodiny míchá a smísí s 10% vodným roztokem thiosíranu sodného (175 ml). Výsledná směs se zkoncentruje a extrahuje ethylacetátem. Extrakty se vysuší síranem sodným a zkoncentrují. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 20 až 33% ethylacetátu v hexanech. Získá se 3,17 g (61 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bezbarvé pevné látky.
Příklad 24 {(lS)-[(S)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-lH-indol2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid Ν,Ο-dimethylhydroxylaminu (0,4 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (0,38 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Výtěžek: 72 %.
HPLC (60/40) 5,05 min, 98 %, PBMS 416/418 (MH+, 100%).
’H NMR (CDClj): 5 9,30 (br, 1H), 7,60 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,33 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,3 - 7,15 (m, 6-7H), 6,75 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 4,65 (d, 1H, J = 4 Hz), 3,71 (s, 3H), 3,06 (s, 3H), 2,87 (m, 2H),l,6(br).
Analýza pro C21H22CIN3O4 + 0,35 H2O: vypočteno: C 59,74, H 5,42, N 9,95 nalezeno: C 60,14, H 5,65, N 9,55.
Příklad 24A (3 S)-[(5-Chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
IN vodný hydroxid sodný (2,6 ml) se při 25 °C přidá k roztoku methylesteru (3S)-[(5-chlor-lHindol-2-karbonyl)amino]-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (500 mg, 1,29 mmol) v methanolu. Po 18 hodinách se směs zkoncentruje, zbytek se rozpustí v ethylacetátu a vodě a vzniklý roztok se okyselí 6N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje třikrát ethylacetátem. Organické vrstvy se spojí, vysuší a zkoncentrují. Získá se 417 mg (87 %) pevné látky.
HPLC (60/40) 4,23 (>98%).
-62CZ 289233 B6
Příklad 24B
Methylester ((3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Methylester (3S)-amino-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (1,4 mmol) a 5-chlor-lHindol-2-karboxylová kyselina (1,37 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční teplotě: 0 až 25 °C, reakční doba 40 hodin, rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 1:1). Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (94 %) o teplotě tání 214 až 221 °C.
HPLC (60/40) 5,38 minuty (97%), PBMS 387/389 (MH+, 100%).
Analýza pro C2oHi9C1N204: vypočteno: C 62,10, H 4,95, N 7,24 nalezeno: C 62,16, H 5,07, N 7,11.
Příklad 24C
Methylester (3S)-amino-(2S)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Terc.butylester [l(S)-Benzyl-(2S)-(terc.butyldimethylsilanyloxy)-2-kyanoethyl]karbamové kyseliny (417 mg) se přidá k roztoku bezvodého chlorovodíku (3,2 g) v methanolu (20 ml). Reakční nádoba s vytvořeným roztokem se uzavře a uchovává 5 dnů při 25 °C. Reakční směs se zkoncentruje na 308 mg bezbarvé pevné látky, která je podle *H NMR (D2O) homogenní. Tato látka se smísí se spektrálně ekvivalentní látkou, která je připravena stejným postupem ze 400 mg stejného prekurzoru. Získaná směs těchto látek se společně rozpustí v nasyceném vodném roztoku hydrogenuhličitanu sodného a roztok se desetkrát extrahuje chloroformem. Spojené extrakty se vysuší a zkoncentrují. Získá se 328 mg (75 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
Příklad 24D
Terc.butylester [l(S)-benzyl-(2S)-(terc.butyldimethylsilanyloxy)-2-kyanoethyl]karbamové kyseliny
N-terc.butoxykarbonyl-(3S)-amino-(2RS)-hydroxy-4-fenylbutyronitril se postupem popsaným v US patentu číslo 4 599 198 příkladu 1B převede na odpovídající O-terc.butyldimethylsilylethery. Izomery se oddělí chromatografií na silikagelu za použití 7 až 8% etheru v hexanech. Sloučenina uvedená v nadpisu se izoluje od svého o trochu méně polárního 2R izomerů (podle příkladu 1B v US patentu č. 4 599 198).
Příklad 24E
N-terc .Butoxykarbonyl-(3 S)-amino-(2RS)-hydroxy-4-fenylbutyronitril
Roztok hydrogensiřičitanu sodného (4,38 g) ve vodě (100 ml) ochlazený na 5 °C se při 0 až 5 °C přidá k roztoku N-terc.butoxykarbonyl-L-fenylalaninalu (J. Med. Chem. 1985, sv. 28, 1779 až 1790, 10,0 g, 40,1 mmol) v dimethoxyethanu (100 ml). Vzniklá směs se 2 hodiny míchá při 0 °C, poté přes noc při 25 °C, zkoncentruje na objem 80 ml a zředí ethylacetátem (250 ml). Ethylacetátový roztok se smísí s kyanidem draselným (2,61 g, 40,1 mmol) Po 4 hodinách při
-63CZ 289233 B6 °C se oddělí organická vrstva, která se promyje dvakrát vodou a jednou roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Olejovitý zbytek se nechá vykrystalovat ze směsi etheru a hexanů. Získá se bezbarvá pevná látka (3,53 g) o teplotě tání 95 až 98 °C. Druhá frakce se získá tak, že se matečný louh (5,0 g) překrystaluje ze směsi etheru a hexanů. Získá se bezbarvá pevná látka (2,44 g) o teplotě tání 88 až 92 °C. Látky o nižší teplotě tání, získané jako pozdější frakce, se použije pro následující silylační transformaci.
Příklad 25 (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
2N vodný roztok hydroxidu sodného (375 ml) se při 10 až 22 °C přidá k roztoku surového methylesteru (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenyimáselné kyseliny (který obsahuje 13 % N,0-bis-5-chlor-lH-indol-2-karbonylové nečistoty, 140,7 g, 363 mmol) v methanolu (1900 ml). Vytvořená směs se míchá při 25 °C. Po 2 hodinách se roztok zkoncentruje a zbytek se rozpustí v ethanolátu (2 litry) a 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové (500 ml). Vodná vrstva se oddělí a promyje dvakrát 2N kyselinou chlorovodíkovou. Organické vrstvy se spojí, promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší síranem sodným a zkoncentrují. Zbytek (137,6 g) se nechá ztuhnout ve 100 ml horkého ethylacetátu (vznikne suspenze). K suspenzi se přidá chloroform (1300 ml) a výsledná suspenze se 5 minut za mechanického míchání zahřívá ke zpětnému toku a za horka přefiltruje. Odfiltrovaná pevná látka se promyje směsí chloroformu a ethylacetátu (3:1, 400 ml), která je zahřáta téměř na teplotu varu. Získaná pevná látka se za vakua suší do konstantní hmotnosti (101 g, 75 %). Filtrát se zkoncentruje a zbytek se překrystaluje tak, že se rozpustí v horkém tetrahydrofuranu (70 ml), k roztoku se předají horké hexany (200 ml), směs se přes noc chladí, poté přefiltruje a oddělená pevná látka se promyje směsí tetrahydrofuranu a hexanů (1 : 5). Získá se 7,03 g (5 %) pevné látky. Matečné louhy z posledního kroku se zkoncentrují a překrystalují stejným postupem, přičemž se získá ll,07g (8%) pevné látky. Všechny tři frakce vykazují retenční dobu při HPLC (60/40) 4,2 minuty (>98%). Analýza na obsah 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny se snadno provede vysokotlakou kapalinovou chromatografií na 15cm sloupci C8 Zorbax za použití směsi vody, acetonitrilu, triethylaminu a octové kyseliny v poměru 600 : 400: 2:1, jako elučního činidla, která ukáže, že první frakce obsahuje 0,4 %, druhá 0,7 % a třetí 21 % 5-chlor-lH-indol2-karboxylové kyseliny. Teplota tání sloučeniny uvedené v nadpisu získané v hlavní frakci je 209 až 212 °C, TSPMS 373/375 (MH+, 100%).
'H NMR (DMSO-de): δ 12,6 (br, IH), 11,7 (s, IH), 8,17 (d, IH, J = 9,1 Hz), 7,71 (d, IH, J = 2 Hz), 7,39 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,28 (m, 4H), 7,17 (m, 3H), 5,55 (br, IH), 4,57 (m, IH), 4,05 (d, IH, J = 3,6 Hz), 2,97 (dd, IH, A AB, J = 6,5,13,5 Hz), 2,87 (dd, IH, B AB, J = 8,5,13,5 Hz).
Analýza pro C19H17CIN2O4: vypočteno: C 61,21, H 4,60, N 7,51 nalezeno: C 61,09, N 4,63, N 7,59.
Příklad 26 (3R)-[(5-Fluor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
Roztok methylesteru (3S)-[(5-fluor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (190 mg, 0,5 mmol), IN hydroxidu sodného (1 ml) a methanolu (5 ml) se 18 hodin míchá při 25 °C. Hodnota pH roztoku se IN kyselinou chlorovodíkovou nastaví na 1 až 2 a okyselený roztok se zkoncentruje. Pevný zbytek se rozmělní pod vodou při 25 °C a odfiltruje. Oddělená pevná látka se promyje etherem a vysuší. Získá se 160 mg (87 %) bezbarvého skla.
-64CZ 289233 B6
HPLC (60/40) 3,49 minuty (99%).
’H NMR (částečně, DMSO-d6): δ 8,15 (d, IH, J = 8 Hz), 7,42 (m, 2H), 7,3 (m, 4H), 7,15 (m, 2H), 7,03 (dt, IH), 4,60 (m, IH), 4,03 (d, IH), 3,00 (d, IH, J = 8, 13 Hz), 2,90 (dd, IH, J = 8, 13 Hz).
Příklad 27 (3 S)-[(5-Brom-l H-idol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
IN vodný hydroxid sodný (60 ml) se při 25 °C přidá k roztoku methylesteru (3S)-[(5-brom-lHindol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (2,45 g, 5,7 mmol) v methanolu (60 ml). Po 2 hodinách se směs zkoncentruje a zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a 2N kyselinu chlorovodíkovou. Vodná vrstva se oddělí a extrahuje ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí IN kyselinou chlorovodíkovou a roztok chloridu sodného, vysuší a zkoncentrují. Pevný zbytek se při 25 °C trituruje s chloroformem. Získá se požadovaná sloučenina (85 %) o teplotě tání 213 až 216 °C.
HPLC (60/40) 4,24 minuty (100 %), TSPMS (417/419 (MH+, 98%).
’H NMR (částečně, DMSO-Λ): δ 11,72 (br, IH), 8,20 (d, IH, J = 10 Hz), 7,86 (d, IH, J = 2 Hz), 7,4 - 7,1 (m, 8H), 4,60 (m, IH), 4,04 (d, IH, J = 3,5 Hz), 3,00 (dd, IH, A AB, J = 7, 13 Hz), 2,88 (dd, IH, B AB, J = 8,5,13 Hz).
Analýza pro Ci9H17BrN2O4 + 0,25 H2O: vypočteno: C 54,11, H 4,18, N 6,64 nalezeno: C 54,15, H 4,15, N 6,64.
Příklad 28 (2S)-[(5,6-dichlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
IN vodný roztok hydroxidu sodného (1,18 ml) se při 25 °C přidá k suspenzi methylesteru (3S)— [(5,6-dichlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (249 mg, 0,6 mmol) v methanolu (5 ml). Po 18 hodinách se směs zkoncentruje a zbytek se rozdělí mezi přebytek 2N kyseliny chlorovodíkové a ethylacetát. Vodná vrstva se oddělí a promyje ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se promyjí roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentrují. Získá se 259 mg žluté pevné látky.
HPLC (60/40), 4,96 minuty (100 %), TSPMS 407/409 (MH+, 100/40%).
*H NMR (částečně, DMSO-d6): δ 11,8 (br, IH), 8,28 (d, IH, J = 9 Hz), 7,98 (s, IH), 7,58 (s, IH), 7,3 - 7,15 (m, 6H), 4,60 (m, IH), 4,07 (d, IH, J = 3-4 Hz), 2,98 (dd, IH, A AB, J = 6, 13 Hz), 2,88 (dd, IH, J = 9,13 Hz).
Analýza pro C19H16CI2N2O4 + 0,5 H2O:
vypočteno: C 54,82, H 4,12, N 6,73 nalezeno: C 54,86, H 4,08, N 6,78.
-65CZ 289233 B6
Příklad 29 (3R)-[(5-Chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina
IN vodný roztok hydroxidu sodného (1,69 ml) se při 25 °C přidá k suspenzi methylesteru (3R)[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (326 mg, 0,8 mmol) v methanolu. Po 2,5 hodiny se směs zkoncentruje (zjištěna přítomnosti výchozí látky) a znovu rozpustí v methanolu a IN vodném roztoku hydroxidu sodného (0,5 ml). Po 1 hodině se směs zkoncentruje a zbytek se rozdělí mezi přebytek 2N kyseliny chlorovodíkové a ethylacetát, organická vrstva se oddělí, vysuší a zkoncentruje. Získá se 288 mg (92 %) sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 215 až 223 °C.
HPLC (60/40) 3,89 minuty (93 %), TSPMS 373/375 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-de): δ 12,7 (br, 1H), 11,65 (s, 1H), 8,50 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,37 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,4 - 7,1 (m, 7H), 5,7 (br, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,17 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 2,94 (dd, 1H, A AB, J = 10,14z), 2,78 (dd, 1H, B AB, J = 3,14 Hz).
Analýza pro C19H17CIN2O4 + 0,1 H2O: vypočteno: C 60,92, H 4,63, N 7,48 nalezeno: C 60,72, H 4,78, N 7,53.
Příklad 29A
Methylester (3R)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Hydrochlorid methylesteru (2R,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny 239 mg, 1,0 mmol) a 5-chlor-lH-indol-2-karboxylová kyselina (200 mg, 1,05 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, promývání nejprve kyselinou a poté bází). Surového produktu se použije bez dalšího přečištění. Získá se 328 mg (87 %) požadované sloučeniny.
Příklad 29B
Hydrochlorid methylesteru (2R,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny
Směs (2R,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (200 mg, 1,0 mmol, Sigma Chemicaí Co., St. Louis, MO, USA), chlortrimethylsilanu (500 mg, 4,6 mmol) a methanolu (2 ml) se 5,5 hodiny zahřívá ke zpětnému toku a poté zkoncentruje. Získá se 244 mg (100 %) požadované sloučeniny ve formě pěny.
Příklad 30 [(2RS)-hydroxy-2-(methoxyethylkarbamoyl)ethyl]amid 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid Ν,Ο-dimethylhydroxylaminu (1,0 mmol) a 3-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2RS)-hydroxypropionová kyselina (0,95 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, promytí nejprve kyselinou a poté bází). Surový produkt se trituruje s etherem. Získá se bezbarvá pevná látka (69 %) o teplotě tání 192 až 192,5 °C.
-66CZ 289233 B6
HPLC (60/40), 3,18 minuty (96 %), PBMS 326/328 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-d6): δ 11,80 (s, 1H), 8,62 (t, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,41 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 2, 8,7 Hz), 7,13 (s, 1H), 5,35 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,74 (m, 2H), 3,34 (s, 3H).
Analýza pro C14H16CIN3O4:
vypočteno: C 51,62, H 4,95, N 12,90 nalezeno: C 51,78, H 5,07, N 12,75.
Příklad 31 (3 S)-[(5-Chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy—4-fenylbutyramid
K roztoku methylesteru (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (100 mg, 0,27 mmol) v methanolu (10 ml) se přidá bezvodý amoniak ve výrazném přebytku. Vzniklá směs se 48 hodin zahřívá na 70 °C v Parrově reakční nádobě z nerezové soli při tlaku nižším než 344 kPa. Výsledná směs se ochladí, zkoncentruje a pevný zbytek se trituruje s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (60 %).
HPLC 3,52 minuty (95 %), PMS 372/374 (MH+, 100%).
‘H NMR (částečně, DMSO-d6): δ 11,75 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,5 - 7,1 (m, 9H), 5,90 (br, 1H), 4,52 (br, 1H), 3,93 (br, 1H), 2,95 (dd, 1H), 2,88 (dd, 1H).
Analýza pro C19H18CIN3O3 + 0,5 H2O: vypočteno: C 59,92, H 5,03, N 11,03 nalezeno: C 59,66, H 5,10, N 11,40.
Příklad 32 {(2S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5,6-dichlor-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid N,O-dimethylhydroxylaminu (0,24 mmol) a (3S)-[(5,6-dichlor-lH-indol-2karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,22 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční doba: 96 hodin, nejprve promyjí kyselinou, poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (72 %) o teplotě tání 210až211,5 °C.
HPLC (60/40) 7,2 minuty (99 %), PBMS 450/452 (MH+, 100%).
’H NMR (CDClj): δ 10,41 (br, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,4 - 7,2 (m, 6H), 6,78 (d, 1H, J = asi 1Hz), 6,58 (d, 1H, J = 10 Hz), 5,03 (m, 1H), 4,34 (d, 1H, J = 5 Hz), 3,85 (d, 1H, J = 5 Hz), 3,37 (s, 3H), 3,2 - 3,0 (m, 2H), 3,10 (s, 3H).
Analýza pro C2iH2iC12O3N4:
vypočteno: C 56,01, H 4,70, N 9,33 nalezeno: C 55,61, H 4,68, N 9,22.
-67CZ 289233 B6
Příklad 33 [(1 S)-((R)-Hydroxydimethylkarbamoylmethyl)-2-fenylmethyl]amid 5-chlor-l H-indol-25 karboxylové kyseliny
Hydrochlorid dimethylaminu (262 mg, 3,22 mmol) v (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,0 g, 2,68 mmol) se podrobí kopulační reakci v dimethylformamidu (4 ml) za použití triethylaminu (530 mg, 3,22 mmol), hydrátu 110 hydroxybenzotriazolu (612 mg, 4 mmol) a hydrochloridu l-(3-dimethylaminopropyl)-3ethylkarbodiimidu 18 hodin při 25 °C. Reakční směs se zředí chloroformem (80 ml) a ethylacetátem (10 ml). Zředěná směs se promyje 2N hydroxidem sodným a 2N kyselinou chlorovodíkovou, vysuší a zkoncentruje na 1,2 bezbarvé pěny. Tato látka se rozpustí v ethylacetátu a vzniklý roztok se promyje dvakrát 2N roztokem hydroxidu sodného, vysuší 15 a zkoncentruje. Získá se 1,02 g bezbarvé pevné látky, která se rozmělní v 10 ml chladného etheru a výsledná směs se přefiltruje. Oddělená pevná látka se promyje 5 ml chladného etheru a vysuší, čímž se získá 715 mg (67 %) bezbarvé pevné látky o teplotě tání 190 až 192 °C.
HPLC (60/40) 4,53 minuty (100%), FABMS 400/402 (MH+, 80%), 178 (100%).
*H NMR (CDC13): δ 9,40 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,4 - 7,1 (m, 7H), 6,86 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,62 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,65 (m, 1H), 4,40 (m, 2H), 3,10 (m, 2H), 2,88 (s, 3H), 2,72 (s, 3H).
Analýza pro C21H22CINO3:
vypočteno: C 63,08, H 5,55, N 10,51 nalezeno: C 63,03, H 5,68, N 10,25.
Příklad 34 {(1 S)-[(R)-hydroxy(hydroxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylthyl} amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid N-methylhydroxylaminu (167 mg, 2,0 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-235 karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (373 mg, 1,0 mmol) se způsobem popsaným v postupu a podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: DMF, promytí bází se vypustí). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 4% ethanolu v dichlormethanu s obsahem 0,5 % octové kyseliny, jako elučního činidla. Přečištěný produkt se trituruje s etherem v hexanech. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (13 %) o teplotě tání 182 40 až 184,5 °C.
HPLC (60/40) 4,26 minuty (97 %), TSPMS 402/404 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-de, zčásti): δ 11,67 (br, 1H), 9,89 (br, 1H), 8,08 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,71 (d, 45 1H, J = 1,9 Hz), 7,39 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,35 - 7,1 (m, 78H), 4,73 (m, 2H), 4,51 (m, 1H), 3,05 (s, 3H), 2,93 (m, 2H).
-68CZ 289233 B6
Příklad 35 [(lS)-((R-hydroxymethoxykarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid N-methoxylaminu (0,77 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino](2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (0,70 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 1 až 10% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla a poté triturací s etherem v hexanech. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (72 %) o teplotě tání 215 až 216,5 °C (za rozkladu).
HPLC (60/40) 3,35 minuty, (>99%), FABMS (MH+, 100%).
Analýza pro C20H20CIN3O4 + 0,7 H2O: vypočteno: C 57,96, H 5,20, N 10,14 nalezeno: C 57,90, H 5,15, N 10,10.
Příklad 36 { (1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-l H-indol2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid N,O-dimethylhydroxylaminu (7,4 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (6,7 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 40 a poté 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získaný produkt se přes noc míchá se směsí etheru a hexanů v poměru 1:1. Pevná látka se shromáždí filtrací a vysuší. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (70 %) o teplotě tání 189 a 190 °C.
’H NMR (CDCIj): δ 9,52 (br, 1H), 7,56 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,4 - 7,4 (m, 5H), 7,38 (m, 1H), 7,18 (dd, 1H, J = 2,0, 8,8 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 6,53 (d, 1H, J = 9 Hz), 4,94 (m, 1H), 4,31 (d, 1H, J = 5,2 Hz, s D2O se zhroutí na s), 3,86 (d, 1H, J = 5,6 Hz, zaměnitelný s D2O), 3,35 (s, 3H) 3,13 (s, 3H), 3,13 - 2,98 (m, 2H).
PBMS 593/595 (MH+, 65%), 200 (100%).
Následující analýza se týká látky, která byla překrystalována ze směsi ethylacetátu a hexanů v poměru 1 :1 (zhroucení při 150 °C, teplota tání 189 až 190 °C):
Analýza pro C2iH2C1N3O4: vypočteno: C 60,65, H 5,33, N 10,10 nalezeno: C 60,52, H 5,34, N 10,32.
Příklad 37 (2S)-[(5-Chlor-lH-indol-2-karbonyl)amin]-(lR)-methoxymethylkarbamoyl)-3-fenylpropylester 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3S)-amino-(2R)-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (4,2 mmol) a 5-chlor-l H-indol-2-karboxyIová kyselina (4,2 mmol) se způsobem popsaným v postupu A
-69CZ 289233 B6 podrobí kopulační reakci. Vzniklá směs se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 33 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (100 mg), dále jako méně polární hlavní frakce {(lS)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)ethyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (970 mg) a konečně také směs těchto dvou látek (159 mg, obsahující převážně polárnější produkt).
Sloučenina uvedená v nadpisu: PBMS 593/595 (MH+, 60%) 400 (100%).
*H NMR (CDCI3): δ 9,62 (br, 2H), 7,69 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,56 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,4 - 7,2 (m, 1H), 7,04 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 6,91 (d, 1H, J = 1-2 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,09 (m, 1H), 3,47 (s, 3H), 3,26 (dd, 1H, J = 6,13 Hz), 3,14 (s, 3H), 2,99 (dd, 1H, J = 10,13 Hz).
Příklad 38 ((lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-pyrrolidin-l-ylpropyl)amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny
Pyrrolidin (0,5 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselné kyseliny (0,5 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se trituruje s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (65 %).
HPLC (60/40) 6,3 minuty (98 %), PBMS (426/428 (MH+, 100%).
Analýza pro C23H24CIN3O3 + 0,25 H2O: vypočteno: C 64,18, H 5,74, N 9,76 nalezeno: C 64,02, H 5,71, N 9,61.
Příklad 39 [(1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-(3-hydroxyazetidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid 3-hydroxyazetidinu (0,56 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)aminoJ(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,5 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 1:1). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 2 až 10% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (69 %).
HPLC (60/40) 3,38 minuty (96 %), PBMS 428/430 (MH+, 100%).
Analýza pro C22H22CIN3O4 + 0,125 H2O: vypočteno: C 61,43, H 5,21, N 9,77 nalezeno: C 61,09, H 5,57, N 9,68.
-70CZ 289233 B6
Příklad 40 ((1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-isoxazolidin-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid isoxazolidinu (Cupps, T, L. et al., J. Org. Chem. 1985, 50, 3972-3979, 0,83 mmol) a (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,79 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 50 až 75% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (75 %).
HPLC (60/40), 4,94 minuty (95 %), TSPMS 428/430 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSP-d6): δ 11,70 (s, IH), 8,17 (d, IH, J = 9,3 Hz), 7,781 (s, IH, J = 2 Hz), 7,38 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,27 (m, 4H), 7,15 (m, 3H), 5,02 (d, IH), 4,61 (m, IH), 4,42 (dd, IH), 4,10 (m, IH), 3,93 (m, IH), 3,55 (m, IH), 2,95 (m, 2H), 2,26 (m, 2H).
Analýza pro C22H22C1N3O4: vypočteno: C 61,75, H 5,18, N 9,82 nalezeno: C 61,59, H 5,35, N 9,44.
Příklad 41 [(1 S)-((R)-diethylkarbamoylhydroxymethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Diethylamin (0,45 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4fenylmáselná kyselina (0,4 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití směsi 10 až 25% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Výtěžek je 35 % sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 218 až 222 °C.
HPLC (60/40) 7,06 minuty (96 %), PBMS 428/430 (MH+, 100%).
*H NMR (CDC13): δ 9,14 (s, IH), 7,61 (s, IH), 7,4 - 7,15 (m, 7H), 6,81 (d, 1,3H), 6,55 (d, IH, J = 10 Hz), 4,55 (m, IH), 4,37 (d, IH, J = 5,2 Hz), 4,29 (d, IH, J = 5,3 Hz), 4,34 (m, IH), 3,2 3,0 (m, 3H), 2,88 (q, 2H, J = 7 Hz), 1,05 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 0,98 (t, 3H, J = 7,1 Hz).
Příklad 42 ((lS)-{(R)-hydroxy-[(2-hydroxyethyl)methylkarbamoyl]methyl}-2-fenylethyl)amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid N-(2-hydroxyethyl)methylaminu (0,77 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,70 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid, extrakce nejprve kyselinou, poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 8% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla a triturací se směsí etheru a hexanů. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (65 %) o teplotě tání 192,5 až 195 °C.
HPLC (60/40) 3,67 minuty (93 %), TSPMS 430/432 (MH+, 100%).
-71CZ 289233 B6
Ή NMR (CDClj): δ 9,18 (br, 1H), 7,60 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,4 - 7,25 (m, 6H), 7,24 (dd, 1H, J = 2, 9 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,63 (d, 1H, J = 9 Hz), 4,85 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 3,63 (m, 2H), 3,12 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 2,5 (br, 2H).
Analýza pro C22H24CIN3O4: vypočteno: C 61,46, H 5,63, N 9,77 nalezeno: C 61,45, H 5,95, N 9,85.
Příklad 43 ((lS)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-piperidin-l-ylpropyl)amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid piperidinu (0,42 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,4 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 1:1). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 25% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (97 %).
HPLC (60/40) 6,92 minuty (100 %), PBMS 440/442 (MH+, 100%).
Analýza pro C24H26CIN3O3: vypočteno: C 65,52, H 5,96, N 9,55 nalezeno: C 65,27, H 6,12, N 9,29.
Příklad 44 ((1 S)-benzyl-2(R)-hydroxy-3-morfolin-4-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Morfolin (0,55 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,5 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (50 %).
HPLC (60/40) 5,37 minuty (>98%), TSPMS 442/444 (MH+, 100%).
*H NMR (CDCI3): δ 9,13 (br, 1H), 7,59 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,35 - 7, 1 (m, 7H), 6,79 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,51 (d, 1H, J = 9 Hz), 4,55 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,62 (m, 2H), 3,50 (m, 3H), 2,95 (m, 1H).
Analýza pro C23H24C1N3O4: vypočteno: C 62,51, H 5,47, N 9,51 nalezeno: C 62,11, H 5,39, N 9,19.
-72CZ 289233 B6
Příklad 45 ((1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-[ 1,2]oxazinan-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid [l,2]oxazinanu (0,42 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,4 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 1 : 1). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 25% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (76 %).
HPLC (60/40) 6,07 minuty (99 %), PBMS 442/444 (MH+, 100%).
Ή NMR (CDC13): δ 9,41 (br, IH), 7,58 (d, IH, J = 2 Hz), 7,38 - 7,18 (m, 8H), 6,78 (d, IH, J = 2 Hz), 6,55 (d, IH, J = 9 Hz), 4,89 (m, IH), 4,58 (s, IH), 4,0 (m, IH), 3,67 (m, 3H), 3,10 (m, 2H), 1,9 (br), l,7(m, 4H).
Analýza pro C23H24CIN3O4: vypočteno: 62,51, H 5,47, N 9,51 nalezeno: 62,18, H 5,59, N 9,29.
Příklad 46 [(1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-((3 S)-hydroxypyrrolidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny (R)-3-hydroxypyrrolidin (0,58 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-7-fenylmáselná kyselina (0,56 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se dvakrát přečistí chromatografií na silikagelu za použití 25 až 100% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (9%).
HPLC (60/40) 3,87 minuty (96 %), PBMS 442/444 (MH+, 100%).
Příklad 47 [(lS)-((R)-Terc.butoxykarbamoylhydroxymethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid O-terc.butylhydroxylaminu (2,0 mol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,0 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědle: dimethylformamid, promytí kyselinou se vypustí). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 30 až 50% ethylacetátu hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (77 %).
Ή NMR (CDClj): δ 9,38 (br, IH), 9,18 (br, IH), 7,85 (br, IH), 7,53 (s, IH), 7,3 - 7,0 (m, 7H), 6,87 (s, IH), 4,40 (d, IH, J = 4 Hz), 4,30 (m, IH), 3,20 (m, 2H), 1,12 (s, 9H).
-73CZ 289233 B6
Příklad 48 ((1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-thiazolidin-3-ylpropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Thiazolidin (0,70 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4fenylmáselná kyseliny (0,67 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: směs dichlormethanu a dimethylformamidu v poměru 1 : 1). Získaného produktu (93 %) se použije bez dalšího přečištění.
HPLC (60/40) 5,78 minuty (96 %), PBMS 444/446 (MH+, 100%).
Analýza pro C22H22CIN3O3S: vypočteno: C 59,52, H 5,00, N 9,47 nalezeno: C 59,29, H 5,22, N 9,22.
Příklad 49 [(1 S)-((R)-Dimethylkarbamoylhydroxymethyl)-2-fenylethyl]amid 5-brom-l H-indol-2karboxylové kyseliny
Hydrochlorid dimethylaminu (0,39 mmol) a (3S)-[(5-brorn-lH-indol-2-karbonyl)aminoJ(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,32 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C). Surový produkt (159 mg) se 1 hodinu při 25 °C míchá se 200 mg polystyren-DMAP pryskyřice (Aldrich Chemical, Co., Milwaukee, WI, USA) v dichlormethanu. Výsledná směs se přefiltruje a filtrát se zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (68 %) o teplotě tání 171 až 176 °C.
HPLC (60/40) 5,4 minuty (>98%), TSPMS 444/446 (MH+, 85%).
Analýza pro C2iH22N3O3Br: vypočteno: C 56,77, H 4,99, N 9,46 nalezeno: C 56,42, H 5,33, N 9,08.
Příklad 50 {(1 S)-[(R)-hydroxy(pyridin-3-ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny
3-Aminopyridin (0,7 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4fenylmáselná kyselina (0,70 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 8% ethanolu v dichlormethanu s obsahem 0,5 % hydroxidu amonného, jako elučního činidla a poté triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (45 %).
HPLC (60/40) 3,08 minuty (>99 %), TSPMS 449/451 (MH+, 100%).
Analýza pro C24H21CIN4O3 + 0,3 H2O:
vypočteno: C 63,45, H 4,74, N 12,33 nalezeno: C 63,35, H 5,03, N 12,37.
-74CZ 289233 B6
Příklad 51 {(lS)-[(R)-hydroxy-(2,2,3-trifluorethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny
2,2,2-Trifluorethylamin (0,28 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,28 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo; dimethylformamid). Surový produkt se přečistí triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (81 %) o teplotě tání 228 až 229 °C. PBMS 454/456 (100%, MH+), 471/473 (MH+NH3, 80%).
Analýza pro C21H19CIF3N3O3: vypočteno: C 55,58, H 4,22, N 9,26 nalezeno. C 55,29, H 4,25, N 9,04.
Příklad 52 [l-(Methoxymethylkarbamoankarbonyl)-2-fenylethyl]amid (S)-5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (DEC, 790 mg, 4,12 mmol), Dichloroctová kyselina (136 mg, 1,06 mmol) a {(lS)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (287 mg, 0,69 mmol) se v uvedeném pořadí při 0 °C přidají k roztoku bezvodého dimethylsulfoxidu (4 ml) a toluenu (bezvodý, 4 ml). Po 18 hodinách při 25 °C se reakční směs zředí ethylacetátem a výsledný roztok se promyje 2N kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se vysuší a zkoncentruje. Vzniklá pěna se překrystaluje z etheru. Získá se 100 mg (35 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 10,72 minuty (87 %), výchozí látka se v tomto případě eluuje 6,68 minuty a je jí přítomno méně než 0,5 %. PBMS 414/416 (MH+, 70%), 384/386 (100%).
’H NMR (CDCI3 s obsahem 10 až 20 % DMSO-d6): δ 9,90 (m, 1H), 7,54 (d, 1H, J = 1,7 Hz), 7,3 - 7,1 (m, asi 7H), 7,04 (m, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,40 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,2 (m, 2H), 3,08 (s, 3H).
Příklad 53 [(lS)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-hydroxypiperidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid 4-hydroxypiperidinu (0,51 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,48 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C). Surový produkt se přečistí triturací s etherem, poté s vroucím ethylacetátem a chromatografií na silikagelu za použití 50 až 100% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (57 %) o teplotě tání 230 až 232 °C.
HPLC (60/40) 3,92 minuty, TSPMS 456/458 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-dé): δ 11,65 (br, 0,5H), 11,60 (br, 0,5H), 8,24 (m, 1H), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,38 (d, 0,5H, J = 9 Hz), 7,37 (d, 0,5H, J = 0 Hz), 7,3 - 7,1 (m, 7H), 4,3-4,7 (m, 2H), 4,5 (m,
-75CZ 289233 B6
2H), 3,8 -3,65 (m, 3H), 3,2 (m, 1H), 3,1 (dd, 1H), 3,0 (dd, 1H), 1,95 (m, 0,5H), 1,7 - 1,65 (m,
2H), 1,4-1,25 (m, 1,5H).
Příklad 54 [(1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-((3R,S)-hydroxypiperidin-l-yl)-3-oxopropyl)-amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny
3-Hydroxypiperidin (0,56 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,54 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla a poté triturací se směsí etheru a hexanů v poměru 1:1. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (47 %).
HPLC (60/40) 4,44 minuty (92 %), PBMS (456/458 (MH+, 100%).
Analýza pro C24H26CIN3O4: vypočteno: C 63,22, H 5,75, N 9,22 nalezeno: C 63,93, H 5,90, N 8,92.
Příklad 55 [(1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-((2R)-hydroxymethylpyrTolidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny
R-2-Pyrrolidinmethanol (1,1 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R}hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,1 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 1 až 8% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla a poté chromatografií na silikagelu za použití 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (9 %) o teplotě tání 236 až 239 °C.
HPLC (60/40) 5,17 minuty (84%), TSPMS 456/458 (MH+, 100%).
Analýza pro C24H26CIN3O4: vypočteno: C 63,22, H 5,75, N 9,22 nalezeno: C 63,23, H 6,11, N 8,52.
Příklad 56 ((lS)-{(R)-[(2-dimethylaminoethyl)methylkarbamoyl]hydroxymethyl}-2-fenylethyl)amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny
N-(2-Dimethylaminoethyl)methylamm (0,77 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,70 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 1 až 8% ethanolu v dichlormethanu s obsahem 0,5 % hydroxidu amonného, jako elučního činidla a poté triturací s etherem v hexanech. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (87 %).
HPLC (60/40) 2,89 minuty (96 %), TSPMS 457/459 (MH+, 100%).
-76CZ 289233 B6
Analýza pro C24H29C1N4O3 + 0,2 H2O:
vypočteno: C 62,59, H 6,43, N 12,16
nalezeno: C 62,85, H 6,82, N 12,06.
Příklad 57 [(1 S)-Benzyl-3-(3R,4R)-dihydroxypyrrolidin-l-yl)-2-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny (3R,4R)-3,4-Dihydroxypyrolidin [získaný postupem popsaným v US patentu č. 4 634 775 za použiti 2S,3S-(-)-vinné kyseliny (nepřirozený izomer)] (1,0 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,0 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití ethylacetátu, jako elučního činidla a poté triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (72 %).
HPLC (60/40) 3,21 minuty (97 %), TSPMS 458/460 (MH+, 100%).
Analýza pro C22H24C1N3O5:
vypočteno: C 60,33, H 5,28, N 9,18
nalezeno: C 60,09, H 5,21, N 9,08.
Příklad 58 [(1 S)-Benzyl-3-((2S,4S)-dihydroxypynOlidm-l-yl)-( lR)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny (3S,4S)-Dihydroxypyrrolidin [získaný postupem popsaným v US patentu č. 4 634 775 za použití 2R,3R-(+)-vinné kyseliny] (1,0 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,0 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití ethylacetátu, jako elučního činidla se poté triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (60 %).
HPLC (60/40) 3,02 minuty (98 %), TSPMS 458/460 (MH+, 100%).
*H NMR (DMSO-de): δ 11,7 (br, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,38 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 7,26 (m, 4H), 7,15 (m, 3H), 5,18 (d, 1H, J = 4,0 Hz, zaměnitelný), 5,11 (d, 1H), 5,08 (d, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,27 (dd, 1H, J = 5, 9 Hz, v D2O se zhroutí na d), 3,95 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,64 (dd, 1H, J = 4,9 Hz), 3,34 (m, 3H), 2,92 (m, 2H).
Analýza pro C23H24C1N3O5 + 0,5 H2O: vypočteno: C 59,16, H 5,40, N 9,00 nalezeno: C 59,44, H 5,29, N 8,95.
-77CZ 289233 B6
Příklad 59 [(1 S)-Benzyl-3-((3R,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (3R,4S)-dihydroxypyrrolidinu (cis- nebo meso-izomer, 0,86 mmol) a (3S)-[(5chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,82 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 1 až 10% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (39%).
HPLC (60/40) 2,92 minuty (96 %), PBMS 458/460 (MH+, 100%).
Analýza pro C23H24C1N3OS + 0,75 H2O: vypočteno: C 58,60, H 5,45, N 8,91 nalezeno: C 59,22, H 5,52, N 8,59.
Příklad 59A
Hydrochlorid cis-3,4-<iihydroxypyrrolidinu (cis nebo meso izomer)
Terc.butylester cis-3,4-dihydroxypyrrolidin-2,5-<iihydropyrrol-l-karboxylové kyseliny (1,99 g, 9,8 mmol) se při 5 °C rozpustí v 4M chlorovodíku v dioxanu. Vzniklá suspenze se míchá 1 hodinu při 25 °C. Výsledná směs se zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem. Získá se světle purpurový prášek (1,30 g, 95 %).
Příklad 59B
Terc.butylester cis-3,4-dihydroxypyrrolidin-l-karboxylové kyseliny
Roztok surového terc.butylesteru 2,5-dihydropyrrol-l-karboxylové kyseliny se postupně při 25 °C smísí s oxidem osmičelým (2,5% v terc.butanolu, 6 ml) a N-oxidem N-methylmorfolinu. Po 48 hodinách se ke směsi přidá 10% vodný roztok thiosíranu sodného a výsledná směs se 30 minut míchá a částečně zkoncentruje, aby se odstranil tetrahydrofuran. Vodná směs se extrahuje dvakrát etherem. Etherové extrakty se promyjí 10% thiosíranem sodným a 0,lM kyselinou chlorovodíkovou, vysuší a zkoncentrují. Získaný tmavě oranžový olej se chromatografuje na silikagelu za použití 1, 2,4, 8 a 10% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se 4,09 g jantarově zbarveného sirupu.
Příklad 59C
Terc.butylester 2,5-dihydropyrrol-l-karboxylové kyseliny
Diterc.butyldikarbonát (83 g, 380 mmol) se při 0 °C přidá k roztoku 3-pyrrolidinu (který obsahuje 35 % pyrrolidinu, 25 g, 362 mmol) v tetrahydrofúranu (500 ml). Výsledná směs se 1 hodinu míchá při 25 °C a zkoncentruje. Získaného žlutého oleje (76,2 g) se použije bez dalšího přečištění.
-78CZ 289233 B6
Příklad 60 ((lS)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-thiomorfolin-4-ylpropyl)amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny
Thiomorfolin (0,52 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4fenylmáselná kyselina (0,49 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (75 %).
HPLC (60/40) 7,12 minuty (97 %), PBMS 458/460 (MH+, 100%).
‘H NMR (CDC13, zčásti): 5 9,15 (br, IH), 7,60 (d, IH, J = 2 Hz), 7,4 - 7,2 (m, 7H), 6,80 (d, IH, J = 2 Hz), 6,52 (d, IH), J = 9 Hz), 4,55 (m, IH), 4,29 (s, IH), 4,10 (m, IH), 3,4 (m, IH), 3,30 (m, IH), 3,2 -2,85 (m, 4H), 2,62 (m, IH), 2,5 (m, IH), 2,4 (m, IH).
Příklad 61 {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxypyridin-2-ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny
2-Methylaminopyridin (3,4 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (3,4 mmol) se způsobem popsaným v příkladu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid; l-hydroxy-7-azabenzotriazolu se použije místo 1-hydroxybenzotriazolu; reakční doba: 18 hodin a vypustí se promytí kyselinou). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 4% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla a poté čtyřnásobnou triturací s etherem. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (5 %).
HPLC (60/40) 5,57 minuty (95 %), TSPMS 463/465 (MH+, 100%).
*H NMR (DMSO-d6): 5 11,73 (dt, IH, J = 2,9 Hz), 7,72 (d, IH, J = 2 Hz), 7,43 (s, IH), 7,41 (s, IH), 7,28 (m, IH), 7,25 - 7,1 (m, 5H), 7,02 (m, 2H), 5,05 (d, IH, J = 9 Hz), 4,60 (m, IH, 4,35 (m, IH), 3,22 (s, 3H), 2,70 (m, 2H).
Analýza pro C25H23CIN4O3 + 1,3 H2O: vypočteno: C 61,74, H 5,31, N 11,52 nalezeno: C 61,84, H 5,00, N 11,52.
Příklad 62 [(lS)-Benzyl-3-(4-formylpiperazin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny
1-Formylpiperazin (0,77 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-
4-fenylmáselná kyselina (0,70 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid, promytí kyselinou a poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 8% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla a poté triturací se směsí etheru a hexanů. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 78 %).
HPLC (60/40), 3,45 minuty (96 %), PBMS (369/471 (MH+, 100%).
-79CZ 289233 B6
Analýza pro C24H25CIN4O4 + 0,3 H2O: vypočteno: C 60,77, H 5,44, N 11,81 nalezeno: C 60,65, H 5,70, N 11,85.
Příklad 63 [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-hydroxymethylpiperidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny
4-(Hydroxymethyl)piperidin (1,5 mmol) (J. Med. Chem. 1991, 34, 1073) a (3S)-[(5-chlor-lHindol-2-karbonyl)-amino]-(2R)-hydroxy-4—fenylmáselná kyselina (1,4 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografíí na silikagelu za použití 50 až 100% ethylacetátu hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 70 %).
HPLC (60/40) 4,09 minuty (97 %), TSPMS 470/472 (MH+, 100%).
Analýza pro C2H28CIN3O4 + 0,25 H2O: vypočteno: C 63,29, H 6,05, N 8,85 nalezeno: C 63,39, H 6,00, N 8,63.
Příklad 64 ((1S)—{(R)-hydroxy[methyl-2-pyridin-2-ylethyl)karbamoyl]methyl }-2-fenylethyl)amid 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny
Methyl-(2-pyridin-2-ylethyl)amid (0,77 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,70 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografíí na silikagelu za použití 0,5 až 8% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 82 %).
HPLC (60/40) 3,33 minuty (97 %), TSPMS 491/493 (MH+, 100).
*H NMR (CDClj): δ 9,84 (br, 0,7 H), 9,35 (br, 0,3H), 8,49 (m, 1H), 7,7 až 7,5 (m, 2H), 7,4 - 7,1 (m, 9H), 6,92 (d, 0,3H, J = 8 Hz), 6,8 (m, 1,4H), 6,65 (d, 0,3H, J = 9 Hz), 4,62 (m, 1,5H), 4,5 (m, 0,5H), 4,34 (s, 0,7H), 4,29 (s, 0,3H), 3,82 (m, 1H), 3,48 (m, 2H), 3,05 (m, 3H), 2,86 (s, 1H), 2,70 (s,2H).
Analýza pro C27H27CIN4O3 + 0,2 H2O: vypočteno: C 65,57, H 5,58, N 11,33 nalezeno: C 65,56, H 5,84, N 11,36.
Příklad 65
Ethylester l-{ (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl} piperidin-4-karboxylové kyseliny
Ethylhexahydropyridin-3-karboxylát (ethylisonipekotát) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,75 mmol) se způsobem popsaným
-80CZ 289233 B6 v postupu A podrobí kopulační reakci. Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 40% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 95 %).
HPLC (60/40) 7,96 minuty (95 %), PBMS 512/514 (MH+, 100%).
Příklad 66
Terc.butylester l-{(3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl} pyrrolidin-2(S)-karboxylové kyseliny
Terc.butylester (S)-pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (2,1 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční doba 60 hodin). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 25 až 50 % ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (74 %).
HPLC (60/40) 8,27 minuty (99 %), TSPMS 526/528 (MH+, 100%).
Analýza pro C28H32CIN3O5:
vypočteno: C 63,93, H 6,13, N 7,99 nalezeno: C 64,05, H 6,32, N 7,79.
Příklad 67 { (1 R)-[(S)-Hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethy 1} amid 5-chlor-1 H-indol2-karboxylové kyseliny
5-Chlor-lH-indol-2-karboxylová kyselina (0,25 mmol) a hydrochlorid (2S,3R)-3-amino-2hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu (0,25 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, promytí kyselinou a potom bází). Surový produkt se během 2 hodin při 25 °C rozpustí v ethanolu obsahujícím 0,25 ekvivalentu IN hydroxidu sodného a během další hodiny se směs smísí s druhou dávkou 0,25 ekvivalentu IN hydroxidu sodného (aby se hydrolyzoval méně polární N,O-bis-5-chlor-lH-indolkarbonylový derivát). Vzniklý roztok se zkoncentruje a zbytek se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se promyje 2N kyselino chlorovodíkovou a roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Zbytek se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 30 až 50% ethylacetátu v hexanu. Chromatografovaná látka (obsahující polární nečistotu) se rozpustí v ethylacetátu. Ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N hydroxidem sodným, vysuší a zkoncentruje. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 57 %) o teplotě tání 165 až 167 °C.
HPLC (60/40) 5,36 minuty (98 %), PBMS 416/418 (MH+, 100%).
’H NMR (CDCI3): δ 9,45 (br, 1H), 7,58 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,4 - 7,1 (m, 7H), 6,77 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,51 (d, 1H, J = 10 Hz), 4,91 (m, 1H), 4,30 (d, 1H, J = 5 Hz), 3,83 (d, 1H, J = 5 Hz), 3,35 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 3,09 (m, 2H).
Analýza pro C21H22CIN3O4 + 1,0 H2O:
vypočteno: C 58,13, H 5,58, N 9,68 nalezeno: C 58,05, H 5,24, N 9,54.
-81CZ 289233 B6
Příklad 67A
Hydrochlorid(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-N-methoxy-N-methyl-4-fenylbutyramidu {1 (R)-[Hydroxy-((S}-methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} karbamová kyselina (285 mg, 0,8 mmol) se rozpustí v chladném 4N chlorovodíku v dioxanu. Vzniklý roztok se 1 hodinu míchá při 0 °C. Poté se směs zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 207 mg (90 %) pevné látky.
Příklad 67B {(1 S)-Hydroxy-((R)-methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} karbamová kyselina (2S,3R)-3-(terc.Butoxykarbonylamino)-2-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (300 mg, 1,0 mmol, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) a hydrochlorid N,O-dimethylhydroxylaminu (104 mg, 1,1 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (reakční teplota 0 až 25 °C). Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (výtěžek 88 %).
HPLC (60/40) 4,90 minuty (95 %).
Příklad 68 { (1 R)-[hydroxy-((R)-methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethy 1} amid 5-chlor-1Hindol-2-karboxylové kyseliny
Dihydrochlorid Ν,Ο-dimethylhydroxylaminu (0,32 mmol) a (3R)-[(5-chlor-lH-indol-2karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (0,3 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (0 až 25 °C, promytí kyselinou a poté bází). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20 až 50% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (73 %).
HPLC (60/40) 4,86 minuty (95 %), PBMS 416/418 (MH+, 100%).
*H NMR (CDC13): δ 9,47 (br, IH), 7,58 (d, IH, J = 1,7 Hz), 7,31 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,30 - 7,10 (m, 6H), 6,78 (d, IH, J = 10 Hz), 6,74 (s, IH), 5,00 (m, IH), 4,63 (m, IH), 3,80 (br, asi IH), 3,70 (s, 3H), 3,04 (s, 3H), 2,87 (m, 2H).
Analýza pro C21H22CIN3O4 + 0,1 H2O: vypočteno: C 60,39, H 5,36, N 10,06 nalezeno: C 60,76, H 5,74, N 9,78.
Příklad 69 [(1 S)-Benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-( l-oxo-l-thiazolidin-3-yl)propyl]amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny m-Chlorperoxobenzoová kyselina (62 mg 50 %, 0,18 mmol) se při 25 °C přidá k roztoku ((1S)— benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-thiazolidin-3-ylpropyl)amidu 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny (80 mg, 0,18 mmol) v dichlormethanu (2 ml). Po 1 hodině se směs nalije do směsi nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (12 ml), 10% vodného roztoku thiosíranu sodného (12 ml) a ethylacetátu. Vodná vrstva se oddělí a dvakrát extrahuje ethyl
-82CZ 289233 B6 acetátem. Organické vrstvy se spojí, promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a zkoncentrují.
Získá se žlutá pevná látka (80 mg, 96 %).
HPLC (60/40) 3,37 (97 %), PBMS 460/462 (MH+, 100%).
Příklady 70 a 71 [(lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-oxo-3-(l-oxo-l-thiomorfolin-4-yl)propyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny (příklad 70) a [(1 S)-benzyl-3-( 1, l-dioxo-l-thiomorfolin-4-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny (příklad 71) m-Chlorperoxobenzoová kyselina (45 mg 500, 0,13 mmol) se při 25 °C přidá k roztoku ((1S)benzyl(2R)-hydroxy-3-oxo-3-thiomorfolin-4-ylpropyl)amidu 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (60 mg, 0,13 mmol) v dichlormethanu (1,5 ml). Po 1 hodině se směs nalije do směsi nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (12 ml), 10% vodného roztoku thiosíranu sodného (12 ml) a ethylacetátu. Vodná vrstva se oddělí a dvakrát extrahuje ethylacetátem. Organické vrstvy se spojí, promyjí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší a zkoncentrují. Získá se sulfoxid uvedený v nadpisu (příklad 70) ve formě žluté pevné látky, která se chromatografuje na silikagelu za použití 1% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Výtěžek 44 mg (72 %).
HPLC (60/40) 6,14 minuty (98 %), PBMS 474/476 (MH+, 100%).
Také se izoluje méně polární produkt (8 mg), který se identifikuje jako sulfon uvedený v nadpisu (příklad 71).
HPLC (60/40) 6,44 minuty (96 %), PBMS 490/492 (MH+, 100%).
Příklad 72 l-{(3S)-[(5-Chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl}piperidm-4karboxylová kyselina
Roztok hydroxidu lithného (0,2 ml IN roztoku ve vodě) se při 25 °C přidá k roztoku ethylesteru l-{(3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl}piperidin—4karboxylové kyseliny (111 mg, 0,22 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml). Po 18 hodinách se směs zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem. Vytvořená pevná látka se rozdělí mezi vodu a ethylacetát a ke směsi se přidá 6N kyselina chlorovodíková pro úpravu pH směsi na 1. Organická vrstva se oddělí, vysuší a zkoncentruje. Získá se 109 mg (100 %) pevné látky.
HPLC (60/40) 3,79 minuty (99 %), TSPMS 484/486 (MH+, 100%).
'H NMR (DMSO-dé): δ 12,25 (br, 1H), 11,65 (br, 1H), 8,17 (d, 0,5H, J = 9 Hz), 8,14 (d, 0,5H, J = 9 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,38 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,35 - 7,1 (m, 7H), 4,78 (m, 1H, zaměnitelný s D2O), 4,5 (m, 2H), 4,1 (m, 1H), 3,8 (m, 0,5H), 3,7 (m, 0,5H), 3,15 (m, 0,5H), 3,0 (m, 2-2,5H), 2,75 (m, 1H), 1,5 (možný m, 1H), 1,8 (m, 2-2,5H), 1,5 (m, asi 1,5H).
-83CZ 289233 B6
Analýza pro C25H26CIN3O6 + 0,55 H2O: vypočteno: C 60,80, H 5,53, N 8,51 nalezeno: C 61,15, H 5,68, N 8,11.
Příklad 73 [(1 S)-((R)-hydroxyhydroxykarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Trifluoroctová kyselina (2 ml) se přidá k roztoku [(lS)-((R)-terc.butoxykarbamoylhadroxymethyl)-2-fenylethyl]amidu 5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (256 mg, 0,58 mmol) v dichlormethanu (2 ml). Dichlormethanový roztok se 18 hodin míchá při 25 °C a přidá se k němu další trifluoroctová kyselina (2 ml). Směs se 72 hodin nechá stát a zkoncentruje. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití 2,5, 5 a 10% ethanolu v dichlormethanu, který obsahuje 1 % kyseliny octové. Přečištěný produkt se trituruje se směsí etheru a hexanů a vysuší. Získá se 70 mg (31 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 3,11 (96%).
Analýza pero C19H18CIN3O4 + 1,0 H2O: vypočteno: C 56,23, H 4,97, N 10,35 nalezeno: C 56,63, H 4,94, N 9,95.
Příklad 74 ((1 S)-{ [Benzylpiperidin-4-yl)methylkarbamoyl]-(R)-hydroxymethyl }-2-fenylethyl)amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny
Hydrochlorid (l-benzylpiperidin-4-yl)methylaminu (evropská patentová publikace EPO 0 457 686, příklad IA, 200 mg, 0,8 mmol) a (3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino](2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (310 mg, 0,8 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 0,5 až 4% ethanolu v dichlormethanu obsahujícím 0,5 % hydroxidu amonného, jako elučního činidla. Získá se 140 mg (30 %) bezbarvé pěny.
HPLC (60/40) 4,15 minuty (95 %), TSPMS 559/562 (MH+, 100%).
Analýza pro C32H35CIN4O3 + HC1 +1,5 H2O: vypočteno: C 61,73, H 6,31, N 9,00 nalezeno: C 61,61, H 6,29, N 8,71.
Příklad 75
Terc.butylester 4-({(3S)-[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl}methylamino)piperidin-l-karboxylové kyseliny
Terc.butylester 4-methylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny (575 mg, 2,6 mmol) a (3S)[(5-chlor-lH-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylmáselná kyselina (1,0 g, 2,6 mmol) se způsobem popsaným v postupu A podrobí kopulační reakci (rozpouštědlo: dimethylformamid). Surový produkt se přečistí chromatografií na silikagelu za použití 20,30, 40,
-84CZ 289233 B6 a 75% ethylacetátu v hexanech, jako elučního činidla. Získá se 319 mg (21 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 10,31 minuty (94 %), 569/571 (MH+, 100%).
Příklad 75A
Terc.butylester 4-methylaminopiperidin-l-karboxylové kyseliny
Práškové molekulární síto (0,3 nm, 5,2 g), hydrochlorid methylaminu (16,96 g, 251 mmol), bezvodý octan sodný (41,21 g, 502 mmol) a 95% natriumkyanborhydrid (3,99 g, 60 mmol) se při 0 °C postupně přidají k roztoku terc.butylesteru 4-oxopiperidin-l-karboxylové kyseliny v methanolu (400 ml). Vzniklá směs se během několika hodin nechá ohřát na 25 °C. Po 18 hodinách při 25 °C se reakční směs přefiltruje přes celit. Oddělená pevná látka se promyje methanolem a ethylacetátem a filtrát se zkoncentruje. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N hydroxidem sodným a jednou chloridem sodným, vysuší a zkoncentruje na olej (12,79 g, 119 %).
Příklad 76
Hydrochlorid {(1 S)-[(R)-hydroxy(methylpiperidin-4~ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amidu 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Terc.butylester 4—({(3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-(2R)-hydroxy-4-fenylbutyryl}methylamino)piperidin-l-karboxylové kyseliny (292 mg, 0,5 mmol) se při 0 °C rozpustí v 4M chlorovodíku v dioxanu. Vzniklý roztok se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Poté se směs zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 249 mg (96 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 2,59 minuty (96 %), PBMS 469/471 (MH+, 100%).
’H NMR (DMSO-de): δ 11,7 (s, 0,3H), 11,6 (s, 0,7H), 8,75 (br, 2H, zaměnitelný s D2O), 7,70 (d, IH, J = 2Hz), 7,4 - 7,1 (m, 8H), 4,94 (d, 0,3H).
Analýza pro C^HmCIN^ + HC1 + 0,7 H2O: vypočteno: C 57,96, H 6,11, N 10,82 nalezeno: C 58,22, H 6,23, N 10,46.
Příklad 77
Hydrochlorid ((lS)-{(R)-hydroxy[methyl-(l-methylpiperidin-4-yl)karbamoyl]methyl}-2fenylethyl)amidu 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny
Molekulární síto (0,3 nm, práškové, 100 mg), triethylamin (22 mg, 0,2 mmol), ledová kyselina octová (64 mg, 1,1 mmol), natriumkyanborhydrid (95%, 18 mg, 0,3 mmol) a vodný formaldehyd (37 % hmot, ve vodě, 22 mg, 0,3 mmol) se postupně při 25 °C přidají k roztoku hydrochloridu {(lS)-[(R)-hydroxy-(methylpiperidin-4-ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amidu 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny (100 mg, 0,2 mmol) v methanolu (2 ml). Po 18 hodinách se reakční směs přefiltruje přes celit. Oddělená pevná látka se promyje methanolem a zkoncentruje. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a ethylacetátový roztok se promyje dvakrát 2N hydroxidem sodným a roztokem chloridu sodného, vysuší a zkoncentruje. Bezbarvý pevný zbytek se přečistí
-85CZ 289233 B6 chromatografií na silikagelu za použití 1 až 8% ethanolu v dichlormethanu, jako elučního činidla. Získá se bezbarvá pevná látka (93 mg, 91 %), která se při 0 °C rozpustí v methanolu. Methanolický roztok se smísí s 1,0 IN kyselinou chlorovodíkovou (0,21 ml) a výsledný roztok se ihned zkoncentruje. Zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 87 mg (79 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40), 2,86 minuty (95 %), TSPMS 483/485 (MH+, 100%).
Příklad 78
Methylester (3 S)-[(5-chlor-l H-indol-2-karbonyl)amino]-4-fenylmáselné kyseliny
Hydrochlorid methylesteru (3S)-3-amino-4-fenylmáselné kyseliny (1,15 g, 5 mmol) a 5-chlorlH-indol-2-karboxylová kyselina se podrobí kopulační reakci, způsobem popsaným v postupu A. Surový produkt se přečistí triturací s etherem. Získá se 1,46 g (79 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
HPLC (60/40) 8,85 minuty (100 %), PBMS 371/373 (MH+, 100,35%).
Analýza pro C20H19CIN2O3:
vypočteno: C 64,78, H 5,16, N 7,55 nalezeno: C 64,81, H 5,34, N 7,46.
Příklad 78A
Hydrochlorid methylesteru (3S)-amino-4-fenylmáselné kyseliny
Methylester (3S)-terc.butoxykarbonylamino-4-fenylmáselné kyseliny (viz Heterocycles, str. 1835 (1989) aj. med. Chem. 1975, str. 761, 3,49 g, 12,1 mmol) se při 0°C rozpustí ve 4M chlorovodíku v dioxanu. Vzniklá směs se míchá 0,5 hodiny při 25 °C, zkoncentruje a zbytek se trituruje s etherem a vysuší. Získá se 2,56 g (92 %) sloučeniny uvedené v nadpisu.
PATENTOVÉ NÁROKY

Claims (36)

1. Indol-2-karboxamidy obecného vzorce I (I),
-86CZ 289233 B6 kde přerušovaná čára představuje případnou vazbu;
A představuje skupinu obecného vzorce -C(H)=, -C(alkyl)= s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -C(halogen)=, když přerušovaná čára představuje vazbu; nebo A představuje methylenskupinu nebo skupinu obecného vzorce -CH(alkyl)- s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, když přerušovaná čára nepředstavuje vazbu;
Ri, Rio a Rn představuje nezávisle atom vodíku, atom halogenu, 4-, 6- nebo 7-nitroskupinu, kyanoskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fluormethylskupinu, difluormethylskupinu nebo trifluormethylskupinu;
R2 představuje atom vodíku;
R3 představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku;
R4 představuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu, n-propylskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až
3 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenylhydroxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkoxyalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové a 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-2- nebo -3ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž kruh obsažený v R4 nebo třemi substituenty nezávisle zvolený ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje pyrid-2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, isothiazol-3-, -4- nebo-5ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyridazin-3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrimidin-2-, -4-, -5- nebo -6-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazin-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo l,3,5-triazin-2-ylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický kruh obsažený ve zbytku R4 je popřípadě substituován na uhlíku jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
Rs představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, alkanoylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkoxyskupinu s 1 až
4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylalkoxyskupinu se 2 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy uhlíku ve druhé alkoxylové části, benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo karbonyloxyskupinu, přičemž tato karbonyloxyskupina je prostřednictvím vazby uhlík-uhlík připojena kfenylovému, thiazolylovému, imidazolylovému, ΙΗ-indolylovému, fiirylovému, pyrrolylovému, oxazolylovému, pyrazolylovému, isoxazolylovému, isothiazolylovému,
-87CZ 289233 B6 pyridazinylovému, pyrimidinylovému, pyrazinylovému nebo 1,3,5-triazinylovému kruhu a přičemž kruh obsažený ve zbytku R5 je popřípadě substituován na atomu uhlíku jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu a trifluormethylskupinu;
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku; nebo
R5 a R7 dohromady popřípadě představují oxoskupinu;
Ré představuje karboxyskupinu, alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxylové části nebo skupinu vzorce C(O)NRgR9 nebo C(O)Ri2, kde
Rg představuje atom vodíku, alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; a
R9 představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, methylen-perfluorovanou alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkylové části, fenylskupinu, pyridylskupinu, thienylskupinu, furylskupinu, pyrrolylskupinu, pyrrolidinylskupinu, oxazolylskupinu, thiazolylskupinu, imidazolylskupinu, pyrazolylskupinu, pyrazolinylskupinu, pyrazolidinylskupinu, isoxazolylskupinu, isothiazolylskupinu, pyranylskupinu, piperidylskupinu, morfolinylskupinu, pyridazinylskupinu, pyrimidinylskupinu, pyrazinylskupinu, piperazinylskupinu nebo 1,3,5-triazinylskupinu, přičemž kruh obsažený v R9 je připojen prostřednictvím vazby uhlík-dusík; nebo
R9 představuje alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, která je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových částí; nebo
R9 představuje alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, která je substituována jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího fenylskupinu, pyridylskupinu, furylskupinu, pyrrolylskupinu, pyrrolidinylskupinu, oxazolylskupinu, thiazolylskupinu, imidazolylskupinu, pyrazolylskupinu, pyrazolinylskupinu, pyrazolidinylskupinu, isoxazolylskupinu, isothiazolylskupinu, pyranylskupinu, pyridylskupinu, piperidylskupinu, morfolinylskupinu, pyridazinylskupinu, pyrimidinylskupinu, pyrazinylskupinu, piperazinylskupinu nebo 1,3,5-triazinylskupinu, přičemž nearomatický kruh obsahující atom dusíku, který je součástí R9, je popřípadě na atomu dusíku substituován jednou alkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, benzylskupinou, benzoylskupinou nebo alkoxykarbonylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části a přičemž dále kruh obsažený v Rg je popřípadě na atomu uhlíku substituován jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu a mono-N- a di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, s tou podmínkou, že nezahrnuje kvatemizovaný atom dusíku a žádnou vazbu dusík-kyslík, dusík-dusík nebo dusík-halogen;
Ri2 představuje piperazin-l-ylskupinu, 4-alkylpiperazin-l-ylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, 4-formylpiperazin-l-ylskupinu, morfolinoskupinu, thiomorfolinoskupinu, 1-oxothiomorfolinoskupinu, 1,1-dioxothiomorfolinoskupinu, thiazolidin-3-ylskupinu, 1oxothiazolidin-3-ylskupinu, 1, l-dioxothiazolidin-3-ylskupinu, 2-alkoxykarbonylpyrrolidin-l-ylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, oxazolidin-3-ylskupinu nebo 2(R)-hydroxymethylpyrrolidin-l-ylskupinu; nebo
-88CZ 289233 B6
R12 představuje 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou oxazetidin-2-ylskupinu, 2-, 4a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou oxazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mononebo -disubstituovanou thiazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l-oxothiazolidin-3-ylskupinu, 2-, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou 1,1dioxothiazolidin-3-ylskupinu, 3- a/nebo 4-mono nebo -disubstituovanou pyrrolidin-1ylskupinu, 3-, 4- a/nebo 5-mono -di- nebo -trisubstituovanou piperidin-l-ylskupinu, 3-,
4- a/nebo 5-mono-, -di- nebo -trisubstituovanou piperazin-l-ylskupinu, 3-substituovanou azetidin-l-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l,2-oxazinan-2ylskupinu, 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou pyrazolidin-l-ylskupinu, 4- a/nebo
5- mono- nebo -disubstituovanou isoxazolidin-2-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono a/nebo -disubstituovanou isothiazolidin-2-ylskupinu, přičemž každý ze substituentů je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, aminoskupinu, mono-N- a di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v každé z alkylových části, formylskupinu, oxoskupinu, hydroxyiminoskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, karboxyskupinu, karbamoylskupinu, monoN- a di-N,N-alkylkarbamoylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, alkoxyiminoskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxymethoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku valkoxylové části, alkoxykarbonylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku valkoxylové části, karboxyalkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylové části a hydroxyalkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku;
přičemž však pokud R4 představuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu nebo n-propylskupinu, potom R5 představuje hydroxyskupinu a/nebo pokud R5 a R7 představují atomy vodíku, potom R4 nepředstavuje atom vodíku, methylskupinu, ethylskupinu, n-propylskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku valkoxylové a 1 až 3 atomy uhlíku valkylové části a Re představuje skupinu C(O)NR8R9 nebo C(O)R]2 nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva zvolená ze souboru zahrnujícího
a) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je volný atom vodíku v karboxyskupině ve významu Re nebo v karboxyskupině obsažené ve zbytku Rg, R nebo Ri2 nahrazen alkylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkanoyloxymethylskupinou se 2 až 12 atomy uhlíku v alkanoylové části, l-(alkanoyloxy)ethylskupinou se 4 až 9 atomy uhlíku, l-methyl-l-(alkanoyloxy)ethylskupinou s 5 až 10 atomy uhlíku, alkoxykarbonyloxymethylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku, 1(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou se 4 až 7 atomy uhlíku, l-methyl-l-(alkoxykarbonyloxy)ethylskupinou s 5 až 8 atomy uhlíku, N-(alkoxykarbonyl)aminomethylskupinou se 3 až 9 atomy uhlíku, l-(N-alkoxykarbonyl)amino)ethylskupinou se 4 až 10 atomy uhlíku, 3-ftalidylskupinou, 4-krotonolaktonylskupinou, gamma-butyrolakton-4-ylskupinou, di-N,N-alkylaminoalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z prvních dvou alkylových částí a 2 až 3 atomy uhlíku ve druhé alkylové části, jako je β-dimethylaminoethylskupina, karbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, Ν,Ν-dialkylkarbamoylalkylskupinou s 1 až 2 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, piperidinoskupinou, pyrrolidinoskupinou nebo morfolinoalkylskupinou se 2 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;
b) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je volný atom vodíku v hydroxyskupině ve významu R5 nahrazen alkanoyloxymethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, 1(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, 1-methyl-l(alkanoyloxy)ethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkanoylové části, alkoxykarbonyloxymethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku valkoxylové části, N-alkoxykarbonylaminomethylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku v alkoxylové části, sukcinoylskupinou, alkanoylskupinou s 1 až 6
-89CZ 289233 B6 atomy uhlíku, α-aminoalkanoylskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, arylactylskupinou a aaminoacylskupinou nebo α-aminoacyl-a-aminoacylskupinou, kde každý a-aminoacylový zbytek je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího zbytky přírodních L-aminoskupin vyskytující se v proteinech, P(O)(OH)2, -P(OXOalkyl)2 s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí a glykosylskupinu, což je zbytek vzniklý odstraněním hydroxyskupiny z poloacetalu sacharidu;
c) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je atom vodíku ve významu R2 nahrazen skupinou R-karbonyl, RO-karbonyl, NRR-karbonyl, kde každý ze symbolů R a R' je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku a benzylskupinu, nebo kde seskupení R-karbonyl představuje přírodní aaminoacylskupinu nebo α-aminoacyl-a-aminoacylskupinu, v níž oba a- aminoacylové zbytky jsou přírodní, skupinu vzorce -C(OH)C(O)OY, kde Y představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo enzylskupinu, skupinu vzorce C(OYo)Yi, kde Yo představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a Yi představuje alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, karboxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, aminoalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových substituentů aminoskupiny, skupinu vzorce -C(Y2)Y3, kde Y2 představuje atom vodíku nebo methylskupinu a Y3 představuje mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, morfolinoskupinu, piperidin-l-ylskupinu nebo pyrrolidin-l-ylskupinu;
d) deriváty sloučenin obecného vzorce I, v nichž je atom vodíku ve významu R3 nahrazen 1hydroxyalkylskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo 1-hydroxy-l-fenylmethylskupinou;
e) deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde R2 a R3 představují společně atom uhlíku, což má za následek vznik pětičlenného kruhu, přičemž připojovací atom uhlíku je popřípadě jednou nebo dvakrát nezávisle substituován atomem vodíku, alkylskupinou s 1 až 6 atom uhlíku, cykloalkylskupinou se 3 až 6 atomy uhlíku nebo fenylskupinou;
deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde R3 a R5 jsou spojeny za vzniku oxazolidinového kruhu a 2-uhlík oxazolidinového kruhu je popřípadě jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku a fenylskupinu; a deriváty sloučenin obecného vzorce I, kde Rs je spojen s Rg nebo R9 za vzniku oxazolidin-4onového kruhu, přičemž 2-uhlík tohoto kruhu je popřípadě jednou nebo dvakrát substituován substituentem nezávisle zvoleným ze souboru zahrnujícího atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 6 atomy uhlíku, fenylskupinu a oxoskupinu.
2. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I, kde
Ri představuje skupinu 5-H, 5-halogen, 5-methyl, 5-trifluormethyl nebo 5-kyano;
R10 a R11 představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1
-90CZ 289233 B6 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v R4 je v uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje hydroxyskupinu;
Re představuje skupinu vzorce C(O)NR8R9 nebo C(OR)i2; a
R7 představuje atom vodíku;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
3. Indol-2-karboxamidu podle nároku 2 obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii; atom uhlíku b má (R) stereochemii;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až
2 atomy uhlíku v alkylové části, ftir-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž každý z výše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a fluoru;
Ré představuje skupinu C(O)NRgR9;
Rg představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až
3 atomy uhlíku; a
R9 představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, hydroxyskupinu, hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, pyridylskupinu, morfolinylskupinu, piperazinylskupinu, pyrrolidinylskupinu, piperidylskupinu, imidazolylskupinu nebo thiazolylskupinu nebo alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, která je substituována jedním substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího pyridylskupinu, morfolinylskupinu, piperazinylskupinu, pyrrolidinylskupinu, piperidylskupinu, imidazolylskupinu a thiazolylskupinu;
a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
-91CZ 289233 B6
4. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 zvolené ze souboru zahrnujícího:
[(lS)-((R)-hydroxydimethylkarbamoylmethyl)-2-fenylethyl]amid 5-chlor-lH-indol-2karboxylové kyseliny, {(lS)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl}amid 5,6-dichlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny, {(1 S)-[(R)-hydroxy(methoxymethylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethy 1} amid 5-chlor-l H-indol2-karboxylové kyseliny, ((lS)-{(R)-hydroxy-[(2-hydroxyethyl)methylkarbamoyl]methyl}-2-fenylethyl)amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny, {(1 S)-[(R)-hydroxy(methylpyridin-2-ylkarbamoyl)methyl]-2-fenylethyl} amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny, a ((lS)-{(R)-hydroxy-[(methyl(2-pyridin-2-ylethyl)karbamoyl]methyl}-2-fenylethyl)amid 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny.
5. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
6. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R] představuje 5chlorskupinu, Rn představuje atom vodíku, R10 představuje 6-chlorskupinu, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methoxyskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
7. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R, představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje methoxyskupinu; a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
8. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5chlorskupinu, R10 a Rn představuje atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a Rg představuje 2-(hydroxy)ethylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
9. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5chlorskupinu, R]0 a Rn představuje atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje pyridin-2-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
10. Indol-2-karboxamidy podle nároku 3 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představuje atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu, Rg představuje methylskupinu a R9 představuje 2-(pyridin-2-yl)ethylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
-92CZ 289233 B6
11. Indol-2-karboxamidy podle nároku 2 obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii;
atom uhlíku b má (R) stereochemii;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fiir-2ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž každý z výše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a fluoru;
Rg představuje skupinu C(O)Rt2; a
R12 představuje morfolinoskupinu, 4-alkylpiperazin-l-ylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, 3-substituovanou azetidin-l-ylskupinu, 3- a/nebo 4-mono- nebo -disubstituovanou pyrrolidin-l-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou isoxazolidin-2-ylskupinu, 4- a/nebo 5-mono- nebo -disubstituovanou l,2-oxazinan-2ylskupinu, přičemž každý ze substituentů je nezávisle zvolen ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, hydroxyskupinu, aminoskupinu, mono-N- a di-N,N-alkylaminoskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v každé z alkylových částí, oxoskupinu, hydroxyiminoskupinu a alkoxyskupinu;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
12. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 zvolené ze souboru zahrnujícího hydrochlorid [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(4-methylpiperazin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny, [(lS)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-(3-hydroxyazetidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-lHindol-2-karboxylové kyseliny, ((1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-isoxazolidin-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2karboxylové kyseliny, ((1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-[ 1,2]oxazinan-2-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l-indol-2karboxylové kyseliny, [(1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-((3 S)-hydroxypyrrolidin-l-yl)-3-oxopropyl]amid 5-chlor-l Hindol-2-karboxylové kyseliny, [(1 S)-benzyl-3-((3 S,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5chlor-1 H-indol-2-karboxylové kyseliny, [(lS)-benzyl-3-((3R,4S)-dihydroxypyrolidin-l-yl)-(2R)-hydroxy-3-oxopropyl]amid 5-chlorlH-indol-2-karboxylové kyseliny a ((1 S)-benzyl-(2R)-hydroxy-3-morfolin-4-yl-3-oxopropyl)amid 5-chlor-l H-indol-2-karboxylové kyseliny.
-93CZ 289233 B6
13. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Rj představuje 5-chlorskupinu, Rio a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje 4methylpiperazin-l-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
14. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chIorskupinu, R10 a Rn představují atom vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R12 představuje 3hydroxyazetidin-l-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
15. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje isoxazolidin-2-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
16. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R12 představuje (l,2)-oxazinan-2-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
17. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představuje atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a Rn představuje 3(S)-hydroxypyrrolidin-l-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
18. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R]2 představuje (3S,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
19. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5chlorskupinu, RI0 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R]2 představuje (3R,4S)-dihydroxypyrrolidin-l-ylskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
20. Indol-2-karboxamidy podle nároku 11 obecného vzorce I, kde Ri představuje 5-chlorskupinu, R10 a Rn představují atomy vodíku, R4 představuje benzylskupinu a R]2 představuje morfolinoskupinu; jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
21. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
R10 a Rn představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představují atomy vodíku;
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třeba substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu nebo kyanoskupinu; nebo
-94CZ 289233 B6
R» představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové částí, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v Rj je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
Rs představuje hydroxyskupinu;
Rí představuje karboxyskupinu nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxylové části; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
22. Indol-2-karboxamidy podle nároku 21 obecného vzorce I, kde atom uhlíku a má (S) stereochemii; atom uhlíku b má (R) stereochemii;
Rj představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thien-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fiir-2-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části nebo fur-3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž každý z výše uvedených kruhů je substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku nebo fluoru;
Rio a Rn představují atomy vodíku;
Ró představuje karboxyskupinu; a
R7 představuje atom vodíku;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
23. Indol-2-karboxamidy podle nároku 22 obecného vzorce I, kde
Ri představuje 5-chlorskupinu;
Rio a Rn představují atomy vodíku; a
R4 představuje benzylskupinu;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
-95CZ 289233 B6
24. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
5 Rio a R] i představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
R2 a R3 představuje atomy vodíku;
R» představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 15 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3-nebo -4-alylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo 20 -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4- nebo -5-yl- alkyskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, 25 isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený v Ri je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, 35 alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy uhlíku ve drahé alkoxylové části nebo benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
Re představuje karboxyskupinu nebo alkoxykarbonylskupinu s 1 až 8 atomy uhlíku v alkoxy40 lové části; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
25. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I, kde
Ri představuje atom vodíku, atom halogenu, methylskupinu nebo kyanoskupinu;
Rio a Rn představuje každý nezávisle atom vodíku nebo atom halogenu;
A představuje skupinu vzorce -C(H)=;
55 R2 a R3 představují atomy vodíku;
-96CZ 289233 B6
R4 představuje fenylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž uvedená fenylskupina je substituována jedním, dvěma nebo třemi substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku a atom halogenu nebo jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, trifluormethylskupinu, hydroxyskupinu, aminoskupinu a kyanoskupinu; nebo
R4 představuje thien-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrid2-, -3- nebo -4-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, thiazol-2-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, imidazol-1-, -2-, -4- nebo -5ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, fur—2— nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrrol-2- nebo -3-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, oxazol-2-, -4— nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, pyrazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, isoxazol-3-, -4- nebo -5-ylalkylskupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylové části, přičemž heterocyklický zbytek obsažený VR4 je na uhlíku popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze souboru zahrnujícího atom halogenu, trifluormethylskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atom uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, aminoskupinu a hydroxyskupinu;
R5 představuje atom fluoru, alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, aminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, mono-N- nebo di-N,N-alkylaminoalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkylových a 1 až 4 atomy uhlíku v každé z alkoxylových částí, karboxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku v první a 1 až 4 atomy uhlíku ve druhé alkoxylové části nebo benzyloxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části;
Rg představuje skupinu vzorce C(O)NR8R9 nebo C(O)R]2; a
R7 představuje atom vodíku, atom fluoru nebo alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku;
jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1.
26. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení chorob nebo stavů závislých na glykogen fosforyláze u savců.
27. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení hyperglykemie u savců.
28. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení diabetes u savců.
29. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení hypercholesterolemie u savců.
30. lndol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení aterosklerózy u savců.
GZ 289233 B6
31. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení hyperinzulinemie u savců.
32. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení hypertenze u savců.
33. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro léčení hyperlipidemie u savců.
34. Indol-2-karboxamidy podle nároku 1 obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli a proléčiva definovaná v nároku 1 pro použití jako léčiva pro prevenci perioperačního ischemického poškození myokardu u savců.
35. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství indol-2-karboxamidu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodné soli nebo proléčiva podle nároku 1 a farmaceuticky vhodný nosič.
36. Farmaceutický prostředek podle nároku 36 pro léčení chorob nebo stavů závislých naglykogen fosforyláze u savců, vyznačující se tím, že obsahuje indol-2karboxamid obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky vhodnou sůl nebo proléčivo podle nároku 1 v množství účinném pro léčení chorob nebo stavů závislých na glykogen fosforyláze a farmaceuticky vhodný nosič.
CZ19961627A 1995-06-06 1996-06-05 Indol-2-karboxamidy a farmaceutické prostředky na jejich bázi CZ289233B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA002223625A CA2223625C (en) 1995-06-06 1995-06-06 Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
PCT/IB1995/000443 WO1996039385A1 (en) 1995-06-06 1995-06-06 Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ162796A3 CZ162796A3 (en) 1996-12-11
CZ289233B6 true CZ289233B6 (cs) 2001-12-12

Family

ID=25679897

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19961627A CZ289233B6 (cs) 1995-06-06 1996-06-05 Indol-2-karboxamidy a farmaceutické prostředky na jejich bázi

Country Status (40)

Country Link
US (1) US6297269B1 (cs)
EP (1) EP0832066B1 (cs)
JP (1) JP3068200B2 (cs)
CN (1) CN1374082A (cs)
AP (2) AP9600817A0 (cs)
AT (1) ATE205477T1 (cs)
AU (1) AU700887B2 (cs)
BG (1) BG62566B1 (cs)
BR (1) BR9602626A (cs)
CA (1) CA2223625C (cs)
CO (1) CO4700453A1 (cs)
CZ (1) CZ289233B6 (cs)
DE (1) DE69522718T2 (cs)
DK (1) DK0832066T3 (cs)
DZ (1) DZ2036A1 (cs)
ES (1) ES2161291T3 (cs)
FI (1) FI974437L (cs)
GR (1) GR3037075T3 (cs)
HR (1) HRP960266B1 (cs)
HU (1) HUP9601285A3 (cs)
IL (1) IL118236A0 (cs)
IS (1) IS1846B (cs)
LV (1) LV11614B (cs)
MA (1) MA23874A1 (cs)
MX (1) MX9709874A (cs)
NO (1) NO307335B1 (cs)
NZ (1) NZ286736A (cs)
OA (1) OA10459A (cs)
PL (1) PL314603A1 (cs)
PT (1) PT832066E (cs)
RU (1) RU2159613C2 (cs)
SG (1) SG45481A1 (cs)
SI (1) SI9600163A (cs)
SK (1) SK72096A3 (cs)
TN (1) TNSN96075A1 (cs)
TR (1) TR199600478A1 (cs)
TW (1) TW450961B (cs)
WO (1) WO1996039385A1 (cs)
YU (1) YU34796A (cs)
ZA (1) ZA964646B (cs)

Families Citing this family (112)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2223625C (en) * 1995-06-06 2003-06-03 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
US5952322A (en) * 1996-12-05 1999-09-14 Pfizer Inc. Method of reducing tissue damage associated with non-cardiac ischemia using glycogen phosphorylase inhibitors
ES2276460T3 (es) 1997-04-15 2007-06-16 Csir Extractos de plantas que tienen actividad supresora del apetito.
KR100666591B1 (ko) * 1997-06-18 2007-01-11 스미스클라인비이참피이엘시이 티아졸리딘디온 및 메트포르민을 사용한 당뇨병의 치료
US20020004515A1 (en) * 1997-06-18 2002-01-10 Smith Stephen Alistair Treatment of diabetes with thiazolidinedione and metformin
EP1745774A3 (en) 1997-08-11 2007-04-11 Pfizer Products Inc. Solid pharmaceutical dispersions with enhanced bioavailability
US6096778A (en) * 1997-10-07 2000-08-01 Cephalon, Inc. α-ketoamide multicatalytic protease inhibitors
US6150378A (en) 1997-10-07 2000-11-21 Cephalon, Inc. Peptidyl-containing α-ketoamide cysteine and serine protease inhibitors
US6083944A (en) * 1997-10-07 2000-07-04 Cephalon, Inc. Quinoline-containing α-ketoamide cysteine and serine protease inhibitors
UA57811C2 (uk) * 1997-11-21 2003-07-15 Пфайзер Продактс Інк. Фармацевтична композиція, що містить інгібітор альдозоредуктази та інгібітор глікогенфосфорилази (варіанти), комплект, який її включає, та способи лікування ссавців зі станом інсулінорезистентності
WO1999038501A2 (en) 1998-02-02 1999-08-05 Trustees Of Tufts College Method of regulating glucose metabolism, and reagents related thereto
US5998463A (en) * 1998-02-27 1999-12-07 Pfizer Inc Glycogen phosphorylase inhibitors
CN1303290A (zh) * 1998-05-01 2001-07-11 伊莱利利公司 sPLA2抑制剂酯
EP0978279A1 (en) * 1998-08-07 2000-02-09 Pfizer Products Inc. Inhibitors of human glycogen phosphorylase
US6686335B1 (en) 1998-09-22 2004-02-03 Cephalon, Inc. Hydroxamate-containing cysteine and serine protease inhibitors
BR0007532A (pt) 1999-01-13 2001-11-20 Univ New York State Res Found Métodos para identificar inibidores de proteìnaquinase, para testar compostos para umacapacidade de inibir a atividade de proteìnaquinase e para inibir uma proteìna quinase, inibidorde proteìna tirosina quinase não peptìdica, e,método de tratar uma condição responsiva a uminibidor de proteìna quinase em um paciente
US6239163B1 (en) 1999-03-15 2001-05-29 Novo Nordisk A/S Salt of (2R,3R,4R)-3,4-dihydroxy-2-hydroxymethylpyrrolidine
US6316489B1 (en) 1999-03-15 2001-11-13 Novo Nordisk A/S Salt of (2R,3R,4R)-3,4-dihydroxy-2-hydroxymethylpyrrolidine
US6410750B1 (en) * 1999-06-18 2002-06-25 Pfizer Inc. Processes and intermediates for preparing 3(S)-[(5-chloro-1H-indole-2-carbonyl)-amino]-2(R)-hydroxy-4-phenyl-butyric acid
EP1088824B1 (en) * 1999-09-30 2004-01-07 Pfizer Products Inc. Bicyclic pyrrolyl amides as glycogen phosphorylase inhibitors
GB2355657B (en) 1999-10-27 2004-07-28 Phytopharm Plc Inhibitors Of Gastric Acid Secretion
YU32702A (sh) 1999-11-04 2005-06-10 Ortho-Mcneil Pharmaceutical Inc. Nepeptidni supstituisani benzotiazepini kao antagonisti vazopresina
US20030139434A1 (en) 2000-01-21 2003-07-24 Bork Balkan Combinations comprising dipeptidylpeptidase-iv inhibitor
CO5271699A1 (es) * 2000-01-24 2003-04-30 Pfizer Prod Inc Procedimiento para el tratamiento de cardiomiopatia utilizando inhibidores de la glucogeno fosforilasa
EP1295609A4 (en) * 2000-02-24 2004-11-03 Takeda Chemical Industries Ltd MEDICINES WITH MIXED ACTIVE SUBSTANCES
US6555569B2 (en) * 2000-03-07 2003-04-29 Pfizer Inc. Use of heteroaryl substituted N-(indole-2-carbonyl-) amides for treatment of infection
US6395767B2 (en) 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
US20010053778A1 (en) * 2000-03-16 2001-12-20 Hoover Dennis J. Pharmaceutical compositions of glycogen phosphorylase inhibitors
US6562807B2 (en) * 2000-06-23 2003-05-13 Novo Nordisk A/S Glucagon antagonists/inverse agonists
GB2363985B (en) 2000-06-30 2004-09-29 Phytopharm Plc Extracts,compounds & pharmaceutical compositions having anti-diabetic activity and their use
IL144507A0 (en) * 2000-07-31 2002-05-23 Pfizer Prod Inc Use of glycogen phosphorylase inhibitors to inhibit tumor growth
US6746856B2 (en) 2000-08-09 2004-06-08 Pfizer Inc. Microbial conversion of bicyclic heteroaromatic compounds
WO2002036066A2 (en) * 2000-11-01 2002-05-10 Yeda Research And Development Co. Ltd. Pharmaceutical compositions comprising organic vanadium complexes for treatment of ischemia
US6821960B2 (en) * 2000-11-17 2004-11-23 Noyo Nordisk Pharmaceuticals, Inc. Glucagon antagonists/inverse agonists
US20030037045A1 (en) * 2001-05-21 2003-02-20 Ian Melhado Distributed computing environment for recognition of proteomics spectra
AR036711A1 (es) * 2001-10-05 2004-09-29 Bayer Corp Peptidos que actuan como agonistas del receptor del glp-1 y como antagonistas del receptor del glucagon y sus metodos de uso farmacologico
US7005445B2 (en) 2001-10-22 2006-02-28 The Research Foundation Of State University Of New York Protein kinase and phosphatase inhibitors and methods for designing them
CA2464214C (en) 2001-10-22 2011-02-08 The Research Foundation Of State University Of New York Protein kinase and phosphatase inhibitors, methods for designing them, and methods of using them
CA2465382A1 (en) * 2001-10-29 2003-05-08 Japan Tobacco Inc. Indole compound and medicinal use thereof
CA2837936A1 (en) 2001-11-26 2003-06-05 Trustees Of Tufts College Peptidomimetic inhibitors of post-proline cleaving enzymes
WO2003045228A2 (en) 2001-11-26 2003-06-05 Trustees Of Tufts College Methods for treating autoimmune disorders, and reagents related thereto
EP1470128A1 (en) * 2002-01-18 2004-10-27 Pfizer Products Inc. Intermediates for preparing glycogen phosphorylase inhibitors
MXPA04007433A (es) 2002-02-01 2004-10-11 Pfizer Prod Inc Procedimiento para preparar dispersiones solidas amorfas homogeneas de farmaco secadas por pulverizacion utilizando un dispositivo de secado por pulverizacion modificado.
MXPA03000966A (es) 2002-02-28 2003-09-04 Pfizer Prod Inc Agentes antidiabeticos.
GB0205175D0 (en) 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205165D0 (en) 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205166D0 (en) * 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205162D0 (en) 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205176D0 (en) 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0205170D0 (en) 2002-03-06 2002-04-17 Astrazeneca Ab Chemical compounds
DE10215908B4 (de) * 2002-04-11 2005-08-18 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Acyl-3-carboxyphenyl-harnstoffderivate und deren Verwendung als Arzneimittel
DE10215907A1 (de) * 2002-04-11 2003-11-06 Aventis Pharma Gmbh Acyl-4-carboxyphenyl-harnstoffderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US6683106B2 (en) 2002-04-15 2004-01-27 Pfizer Inc. N-(indole-2-carbonyl)-b-alaninamide crystal forms
AU2003227360A1 (en) * 2002-04-25 2003-11-10 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel amide derivatives or salts thereof
US7057046B2 (en) 2002-05-20 2006-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Lactam glycogen phosphorylase inhibitors and method of use
DE10225635C1 (de) * 2002-06-07 2003-12-24 Aventis Pharma Gmbh N-Benzoylureido-Zimtsäurederivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
JP4374428B2 (ja) * 2002-07-11 2009-12-02 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 尿素置換されたおよびウレタン置換されたアシル尿素、それらの製造方法および医薬としてのそれらの使用方法
DE60332125D1 (de) * 2002-08-29 2010-05-27 Merck Sharp & Dohme Indole mit antidiabetischer wirkung
UY27967A1 (es) 2002-09-10 2004-05-31 Pfizer Acetil 2-hindroxi-1,3-diaminoalcanos
AU2003274462A1 (en) * 2002-11-07 2004-06-07 Pfizer Products Inc. N-(indole-2-carbonyl) amides as anti-diabetic agents
US7098235B2 (en) 2002-11-14 2006-08-29 Bristol-Myers Squibb Co. Triglyceride and triglyceride-like prodrugs of glycogen phosphorylase inhibiting compounds
FR2847471B1 (fr) * 2002-11-25 2006-12-29 Expanscience Lab Composition comprenant au moins un derive d'acide carbamique ,son utilisation cosmetique et comme medicament
WO2004071458A2 (en) 2003-02-13 2004-08-26 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University REGULATION OF FOOD INTAKE AND GLUCOSE PRODUCTION BY MODULATION OF LONG-CHAIN FATTY ACYL-CoA LEVELS IN THE HYPOTHALAMUS
US20040180845A1 (en) * 2003-03-13 2004-09-16 Newgard Christopher B. Methods and compositions for modulating glycogen synthesis and breakdown
BRPI0409465A (pt) * 2003-04-17 2006-05-02 Pfizer Prod Inc derivados de carboxamida como agentes antidiabéticos
CA2521962A1 (en) * 2003-04-30 2004-11-11 Pfizer Products Inc. Anti-diabetic agents
BRPI0410445B1 (pt) * 2003-05-21 2017-11-28 Prosidion Limited Pyrrolopyridine-2-carboxylic acid amide inhibitor compound of glycogen phosphorylase, pharmaceutical composition comprising the same, process for its production and intermediate compounds
US7405210B2 (en) 2003-05-21 2008-07-29 Osi Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolopyridine-2-carboxylic acid amide inhibitors of glycogen phosphorylase
MY140849A (en) * 2003-07-07 2010-01-29 Kowa Co 2, 4-bis (trifluoroethoxy) pyridine compound and drug containing the compound
US7767828B2 (en) 2003-11-12 2010-08-03 Phenomix Corporation Methyl and ethyl substituted pyrrolidine compounds and methods for selective inhibition of dipeptidyl peptidase-IV
US7576121B2 (en) 2003-11-12 2009-08-18 Phenomix Corporation Pyrrolidine compounds and methods for selective inhibition of dipeptidyl peptidase-IV
JP5435841B2 (ja) 2003-11-12 2014-03-05 フェノミックス コーポレーション 複素環式ボロン酸化合物
US7317109B2 (en) 2003-11-12 2008-01-08 Phenomix Corporation Pyrrolidine compounds and methods for selective inhibition of dipeptidyl peptidase-IV
JP2007525503A (ja) * 2004-02-27 2007-09-06 バーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド カスパーゼインヒビターおよびそれらの使用
WO2005085194A2 (en) * 2004-03-08 2005-09-15 Prosidion Limited Indole-2-carboxylic acid hydrazides as glycogen phosphorylase inhibitors
WO2005085245A1 (en) 2004-03-08 2005-09-15 Prosidion Limited Pyrrolopyridine-2-carboxylic acid hydrazides
JP2008505975A (ja) 2004-07-12 2008-02-28 フェノミックス コーポレーション 制約されたシアノ化合物
WO2006055463A2 (en) 2004-11-15 2006-05-26 Bristol-Myers Squibb Company 2-amino-3-functionalized tetralin derivatives and related glycogen phosphorylase inhibitors
WO2006053274A2 (en) 2004-11-15 2006-05-18 Bristol-Myers Squibb Company 2-amino-1-functionalized tetralin derivatives and related glycogen phosphorylase inhibitors
US7223786B2 (en) 2004-11-15 2007-05-29 Bristol-Myers Squibb Company 2-aminonaphthalene derivatives and related glycogen phosphorylase inhibitors
US7226942B2 (en) 2004-11-15 2007-06-05 Bristol-Myers Squibb Company 2-amino-4-functionalized tetralin derivatives and related glycogen phosphorylase inhibitors
EP1819681B1 (en) 2004-11-23 2009-08-12 Warner-Lambert Company LLC 7-(2h-pyrazol-3-yl)-3,5-dihydroxy-heptanoic acid derivatives as hmg co-a reductase inhibitors for the treatment of lipidemia
US20090298745A1 (en) * 2004-12-02 2009-12-03 Gerard Hugh Thomas Treatment of Diabetes with Glycogen Phosphorylase Inhibitors
US7825139B2 (en) 2005-05-25 2010-11-02 Forest Laboratories Holdings Limited (BM) Compounds and methods for selective inhibition of dipeptidyl peptidase-IV
AU2006290908C1 (en) 2005-09-14 2014-04-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors for treating diabetes
US7741317B2 (en) 2005-10-21 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company LXR modulators
US7888376B2 (en) 2005-11-23 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic CETP inhibitors
ZA200806752B (en) * 2006-01-27 2009-10-28 Fibrogen Inc Cyanoisoquinoline compounds that stabilize hypoxia inducible factor (HIF)
PE20110235A1 (es) 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
US7838542B2 (en) 2006-06-29 2010-11-23 Kinex Pharmaceuticals, Llc Bicyclic compositions and methods for modulating a kinase cascade
DE102006042147A1 (de) * 2006-09-06 2008-03-27 Dynamit Nobel Gmbh Explosivstoff- Und Systemtechnik Hydrochloride von 3-Amino-2-hydroxycarbonsäureamiden
JP2010502670A (ja) 2006-09-07 2010-01-28 ニコメッド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 真性糖尿病のための組合せ治療
CA2663544A1 (en) * 2006-09-13 2008-03-20 Sanofi-Aventis Isoserine derivatives for use as coagulation factor ixa inhibitors
EP2094643B1 (en) 2006-12-01 2012-02-29 Bristol-Myers Squibb Company N-((3-benzyl)-2,2-(bis-phenyl)-propan-1-amine derivatives as cetp inhibitors for the treatment of atherosclerosis and cardiovascular diseases
ATE518544T1 (de) 2007-03-12 2011-08-15 Zadec Aps Rotbusch-extrakt gegen diabetes
CN103373985B (zh) 2008-06-19 2015-10-28 武田药品工业株式会社 杂环化合物及其用途
US9447089B2 (en) 2009-04-03 2016-09-20 Plexxikon Inc. Compositions and uses thereof
WO2011041293A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine derivatives as apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
EP2531501B1 (en) 2010-02-03 2013-11-20 Takeda Pharmaceutical Company Limited Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
US20130072519A1 (en) 2010-05-21 2013-03-21 Edward Lee Conn 2-phenyl benzoylamides
EP2680874A2 (en) 2011-03-04 2014-01-08 Pfizer Inc Edn3-like peptides and uses thereof
ES2642883T3 (es) 2011-05-31 2017-11-20 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Inhibidores de neprilisina
JP5959075B2 (ja) * 2011-05-31 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
US8513244B2 (en) 2011-05-31 2013-08-20 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
MY188344A (en) 2012-03-09 2021-12-01 Biotropics Malaysia Berhad Extract formulations of rhodamnia cinerea and uses thereof
SG11201507496UA (en) 2013-04-17 2015-11-27 Pfizer N-piperidin-3-ylbenzamide derivatives for treating cardiovascular diseases
CN103497181B (zh) 2013-09-30 2016-03-30 承德医学院 作为糖原磷酸化酶抑制剂的苯并氮杂卓酮类化合物、其制备方法及医药用途
KR20160094956A (ko) 2013-11-05 2016-08-10 벤-구리온 유니버시티 오브 더 네게브 리서치 앤드 디벨럽먼트 어쏘러티 당뇨병 및 당뇨병으로부터 발생하는 합병증 질환의 치료를 위한 화합물
EP3110424A1 (en) * 2014-02-28 2017-01-04 Tensha Therapeutics, Inc. Treatment of conditions associated with hyperinsulinaemia
WO2016055901A1 (en) 2014-10-08 2016-04-14 Pfizer Inc. Substituted amide compounds
JOP20210193A1 (ar) 2019-01-18 2023-01-30 Astrazeneca Ab مثبطات pcsk9 وطرق استخدامها
CN115583908B (zh) * 2021-07-05 2024-08-06 西北农林科技大学 一种吲哚甲酰胺类化合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4764610A (en) 1981-07-16 1988-08-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal indole sulfonamides
US4836846A (en) 1981-07-16 1989-06-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal indole sulfonamides
NZ202232A (en) 1981-11-06 1985-08-16 Smithkline Beckman Corp N-carboxyalkylproline-containing tripeptides and pharmaceutical compositions
SU1227198A1 (ru) * 1982-09-29 1986-04-30 Ленинградское Ордена Ленина И Ордена Трудового Красного Знамени Производственное Объединение Мясной Промышленности Способ получени полипептидов
US4933325A (en) 1985-08-14 1990-06-12 G. D. Searle & Co. Pyridyl and pyrimidinyl substituted tyrosyl dipeptide amides
US4902708A (en) 1985-12-31 1990-02-20 Biomeasure, Inc. CCK antagonists
US5089638A (en) 1986-06-16 1992-02-18 Merck & Co., Inc. Amino acid analogs as CCK-antagonists
HU204285B (en) 1986-10-31 1991-12-30 Pfizer Process for producing renin-inhibiting polypeptides of small molecule mass and pharmaceutical compositions containing them
US5034376A (en) 1986-10-31 1991-07-23 Pfizer Inc. Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
EP0288965A2 (de) 1987-04-29 1988-11-02 Hoechst Aktiengesellschaft Peptide mit Phospholipase A2- hemmender Wirkung
US5128346A (en) 1987-09-21 1992-07-07 Abbott Laboratories Derivatives of D-glutamic acid and D-aspartic acid
US5250517A (en) 1987-10-06 1993-10-05 Hoffmann-La Roche Inc. Renin inhibiting compounds
US5346907A (en) 1988-04-05 1994-09-13 Abbott Laboratories Amino acid analog CCK antagonists
EP0336356A3 (en) 1988-04-05 1991-09-25 Abbott Laboratories Derivatives of tryptophan as cck antagonists
US4904846A (en) 1988-04-29 1990-02-27 Augustin Oscadal Oil filled body heater
US5010089A (en) 1988-08-12 1991-04-23 Biomeasure, Inc. CCK antagonists and their use in treating gastrointestinal disorders
FR2643371B1 (fr) 1989-02-17 1993-11-05 Roussel Uclaf Nouveaux derives de l'acide 2-amino pentanedioique, leur procede de preparation et leur application comme medicaments
US4997950A (en) 1989-04-20 1991-03-05 Richard Finbar Murphy Novel C-terminal gastrin antagonists
IE902238A1 (en) 1989-06-30 1991-01-16 Abbott Lab Tetrapeptide type-b cck receptor ligands
IE902295A1 (en) 1989-07-07 1991-01-16 Abbott Lab Amino acid analog cck antagonists
EP0431520B1 (en) 1989-12-04 1995-02-08 G.D. Searle & Co. Heterocyclic acyl aminodiol beta-amino acid derivatives
HUT61575A (en) 1990-02-09 1993-01-28 Rhone Poulenc Rorer Sa Process for producing n-acetamido-n-phenyl glycineamide derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
EP0518961A1 (fr) 1990-03-07 1992-12-23 Aventis Pharma S.A. Derives de glycinamide, leur preparation et les medicaments les contenant
FR2674522B1 (fr) 1991-03-26 1993-07-16 Lipha Nouveaux derives de l'indole, procedes de preparation et medicaments les contenant.
FR2678938B1 (fr) 1991-07-10 1993-10-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Derives de pyrrolidine, leur preparation et les medicaments les contenant.
GB9206757D0 (en) 1992-03-27 1992-05-13 Ferring Bv Novel peptide receptor ligands
WO1994006755A1 (en) 1992-09-18 1994-03-31 Japan Tobacco Inc. Alcohol derivative having renin-inhibiting activity and use thereof
WO1994007815A2 (en) 1992-09-25 1994-04-14 Abbott Laboratories Small peptide anaphylatoxin receptor ligands
CA2223625C (en) * 1995-06-06 2003-06-03 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
ATE205477T1 (de) 2001-09-15
MX9709874A (es) 1998-03-31
TW450961B (en) 2001-08-21
SI9600163A (en) 1997-02-28
DE69522718T2 (de) 2002-02-07
AU700887B2 (en) 1999-01-14
SK72096A3 (en) 1997-11-05
TR199600478A1 (tr) 1997-03-21
CO4700453A1 (es) 1998-12-29
HUP9601285A2 (hu) 1998-09-28
HU9601285D0 (en) 1996-07-29
HRP960266A2 (en) 1997-08-31
FI974437A0 (fi) 1997-12-05
IL118236A0 (en) 1996-09-12
HUP9601285A3 (en) 2001-04-28
JPH11500445A (ja) 1999-01-12
JP3068200B2 (ja) 2000-07-24
ZA964646B (en) 1997-12-05
HRP960266B1 (en) 2002-08-31
BG62566B1 (bg) 2000-02-29
GR3037075T3 (en) 2002-01-31
FI974437A7 (fi) 1997-12-05
FI974437L (fi) 1997-12-05
OA10459A (en) 2002-03-27
PL314603A1 (en) 1996-12-09
CZ162796A3 (en) 1996-12-11
IS4345A (is) 1996-12-07
ES2161291T3 (es) 2001-12-01
DE69522718D1 (en) 2001-10-18
EP0832066B1 (en) 2001-09-12
LV11614A (lv) 1996-12-20
EP0832066A1 (en) 1998-04-01
DK0832066T3 (da) 2001-11-19
RU2159613C2 (ru) 2000-11-27
IS1846B (is) 2003-02-07
DZ2036A1 (fr) 2002-10-22
AP9600817A0 (en) 1996-07-31
AP624A (en) 1997-12-19
WO1996039385A1 (en) 1996-12-12
NO962322L (no) 1996-12-09
CA2223625C (en) 2003-06-03
PT832066E (pt) 2001-12-28
NZ286736A (en) 2001-07-27
TNSN96075A1 (fr) 2005-03-15
BG100635A (bg) 1997-09-30
AP9600816A0 (en) 1996-07-31
MA23874A1 (fr) 1996-12-31
NO307335B1 (no) 2000-03-20
SG45481A1 (en) 1998-01-16
NO962322D0 (no) 1996-06-05
BR9602626A (pt) 1998-09-01
US6297269B1 (en) 2001-10-02
CA2223625A1 (en) 1996-12-12
AU5475396A (en) 1996-12-19
LV11614B (en) 1997-04-20
CN1374082A (zh) 2002-10-16
YU34796A (sh) 1999-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0832066B1 (en) Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
JP3314938B2 (ja) グリコーゲンホスホリラーゼ抑制剤としての置換されたｎ−（インドール−２−カルボニル）−グリシンアミド類および誘導体
JP3277147B2 (ja) グリコーゲン・ホスホリラーゼインヒビターを用いる、非−心虚血と関連する組織損傷の軽減方法
SK7222000A3 (en) Combination of an aldose reductase inhibitor and a glycogen phosphorylase inhibitor
US6277877B1 (en) Substituted n-(indole-2-carbonyl)glycinamides and derivates as glycogen phosphorylase inhibitors
EP1134213B1 (en) Process for the preparation of substituted N-(indole-2-carbonyl)- glycinamides
US6846820B2 (en) Substituted N-(indole-2-carbonyl) -amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
CZ20001837A3 (cs) Kombinace inhibitoru aldosa reduktasy a inhibitoru glykogen fosforylasy
MXPA00005025A (en) Combination of an aldose reductase inhibitor and a glycogen phosphorylase inhibitor

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20040605