CS258886B1 - Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B - Google Patents
Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B Download PDFInfo
- Publication number
- CS258886B1 CS258886B1 CS867432A CS743286A CS258886B1 CS 258886 B1 CS258886 B1 CS 258886B1 CS 867432 A CS867432 A CS 867432A CS 743286 A CS743286 A CS 743286A CS 258886 B1 CS258886 B1 CS 258886B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antigen
- antibodies against
- cortical
- producing antibodies
- hepatitis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Řešení ae týká myšího lymfocytárního hybridovu, produkujícího protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy ,B,"který je uložen ve Sbírcg hybridomú Ústavu molekulární genetiky ČSAV pod označením HBc 18 H5G1. Protilátka je vhodná pro detekci korového antigenu, pro afinitní purifikaci korového antigenu a pro detekci protilátek proti korovému antigenuv lidských eéreoh.
Description
Vynález se týká myšího lymfocytárnlho hybrldomu produkujícího protilátky proti korovému antigenu viru hepartlťidy 0.
Hybridní buněčná Unie byla sestrojena fúzi buněk myši myelomové Unie SP2/0 a myších slezínných lymfoldnich buněk, produkujících protilátky proti korovému /dřeňovému/ antigenu viru hepatltldy B. Korový antigen je strukturální součásti vlrlonu viru hepatltldy B. Pro výraz korový antigen je odbornou světovou véřejnostl běžně přijímáno označeni CORE HBcAg.
Stanoveni hladiny protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech má zásadní význam, pro diagnostiku a monitorováni hepatltldy B. Toto vyšetřeni zatím není možné v klinických podmínkách v ČSSR provádět, vzhledem k tomu, že není dostupná detekční souprava obsahující purlflkovaný korový antigen a protilátky proti němu.
Tento nedostatek odstraňuje myši lymfocytárni hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatltldy podle vynálezU/Uložený ve Sb1rce hybrldomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV, Praha 6, Flemlngpvo nám. 2, pod označením HBc Uvedené protilátky mohou být použity v enzymolmunologl ckém testu pro detekci borového antigenu, dále pro af1nltni Čištěni korového antigenu, což umožňuje puriflkovat vysoce čistý korový antigen z jater nemocných hepatltldou typu B.
Monoklonálni proti látku je rovněž možné využi t v modi fikovaném enzymolmunologlckém testu pro detekci protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech. Podstatného pokroku v diagnostice a monitorováni hepatltldy B se dosáhne, je-11 k dispozici klonovaná hybridní linie, produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatltldy B.
Uvedený hybridom byl získán způsobem známým z odborné literatury (Kohler, G., Milstein, C., Nátuře 256: 495-497,
1975) klonováním populace hybridních buněk získaných hybridizací buněk ze sleziny myší kmene BALB/c, které byly imunizovány korovým antigenem viru hepatitidy B a buněk myší myelomové linie SP2/0. Výhodou hybridomu HBc 18 Hj-G^ je» že produkuje protilátky specificky reagující s korovým antigenem viru hepatitidy B. Tuto monoklonální protilátku lze použít pro detekci korovóho antigenu, pro afinitní purifikaci korového antigenu a pro diagnostiku protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech. Použití této protilátky umožňuje vyvinutí diagnostické soupravy pro detekci protilátek proti korovému antigenu dosahující optimálních parametrů.
Hybridom HBc 18 H^Gj je možno kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišné buňky a je adaptován pro růst in vivo v peritoneální dutině myší kmene BALB/c. Z konzerv, které jsou uchovávány v kapalném dusíku je možné zahájit produkci protilátky.
Příklad:
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno 1,5 a 106 hybridomových buněk do peritoneální dutiny myši kmene BALB/c. Této myši bylo 14 dní před podáním hybridomových buněk aplikováno 0,7 ml parafinového oleje do peritoneálni dutiny. Po 12 dnech růstu hybridomu v peritoneální dutině byla myš usmrcena a neprodukovaná ascitická tekutina byla odebrána. Celkem bylo získáno 5 ml ascitické tekutiny, ve které bylo obsaženo přibližně 3 mg/ml imunoglobulinu, Monoklonální protilátka reagovala specificky s korovým antigenem v enzynoimunologickém testu.
Z ascitické tekutiny byl pomocí síranové metody vypurifikován imunoglobulin. Baroky mikrotitračních destiček byly potahovány monoklonální protilátkou produkovanou klonem HBc 18 H^Gi v koncentraci 30^Ug/ml, pak byly přidány vzorky obsahující různé koncentrace korového antigenu viru hepatitidy B a nakonec byl přidán konjugát polyklonální protilátky proti korovému antigenu s křenovou peroxidázou a enzymoimunologický test byl ** 3 ·· dokončen standardním způsobem. Tento test umožnil detekci 10 ng korového antigenu/ml.
Základní kultivační médium pro buňky hybridomu HBc 18 H^G^ je Eaglovo minimální esenciální medium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny. Toto medium (označované jako H-MEMd- Ostav molekulární genetiky'ČSAV) je pro kultivaci hybridomů doplněno inaktivovaným telecím sórem (Bioveta, Ivanovice na Hané), penicilinem a streptomycinem. Hybridom je kultivován při 37°C. Hybridom HBc 18 H^Gj produkuje'protilátku podtřídy IgG2A, izoelektrický bod je pH 7,3 - 7,6.
Monoklonální protilátka produkovaná klonem HBc 18 HgG.j reaguje specificky s korovým antigenem viru hepatitidy B, Tuto protilátku lze využit k detekci korového antigenu, k afinitni purifikaci korového antigenu a k detekci lidských protilátek proti korovému antigenu v enzymoimunologické testu. Tento hybridom může být průmyslově využíván jako zdroj protilátky proti korovému antigenu v diagnostických soupravách*
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUMyši lymfocytárni hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B, uložený ve Sbírce hvbridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV, pod označením HBc 18 HgG|.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867432A CS258886B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867432A CS258886B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS743286A1 CS743286A1 (en) | 1988-01-15 |
| CS258886B1 true CS258886B1 (cs) | 1988-09-16 |
Family
ID=5423442
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS867432A CS258886B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS258886B1 (cs) |
-
1986
- 1986-10-15 CS CS867432A patent/CS258886B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS743286A1 (en) | 1988-01-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| IE57956B1 (en) | Novel monoclonal antibodies and hybridoma cells,processes for their preparation and their applications | |
| JPH06113832A (ja) | ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリッドセルライン及びその製造法 | |
| IE54462B1 (en) | Monoclonal antibodies against hepatitis b virus | |
| FI83669C (fi) | Foerfarande foer specifik bestaemning av pankreas -amylas. | |
| JPH09176199A (ja) | 抗ファクターＸａ・ティシュファクターパスウェイインヒビター複合体モノクローナル抗体及びその使用 | |
| KR100998419B1 (ko) | 햅텐 화합물 및 항체 | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| JPS60155198A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| CS265494B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridom produkující protilátky proti e antigenu viru hepatitidy B (HBeAg) | |
| JP3841364B2 (ja) | 抗ヒトビトロネクチン・トロンビン・アンチトロンビンｉｉｉ 複合体モノクローナル抗体、ハイブリドーマ及び免疫学的測定方法 | |
| CS265495B1 (cs) | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B | |
| CS253240B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12 | |
| RU2049817C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к фенобарбиталу | |
| JPH04356198A (ja) | モノクローナル抗体及びアシアログリコプロテインレセプターの測定法 | |
| CS255640B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem produkující protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B, které lze značit křenovou peroxidázou | |
| JPH0475597A (ja) | ヒト免疫不全ウイルスの逆転写酵素に対するモノクローナル抗体、その製法及びその抗体産生株 | |
| JP2593865B2 (ja) | ヒトファクターｉに対する単クローン性抗体 | |
| RU2049818C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., испольуемый для получения моноклональных антител к дигоксину | |
| RU2049816C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к тироксину | |
| CS252792B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? | |
| SU1673597A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS. мUSсULUS L., используемый дл получени моноклональных антител к теофиллину | |
| SU1496266A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS - продуцент моноклональных антител против ангиотензин-превращающего фермента из легких человека | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CS253337B1 (cs) | Myši lymfocytárnf hybridem IMG CZAS RT-14 |