CS255642B1 - Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B - Google Patents
Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B Download PDFInfo
- Publication number
- CS255642B1 CS255642B1 CS867431A CS743186A CS255642B1 CS 255642 B1 CS255642 B1 CS 255642B1 CS 867431 A CS867431 A CS 867431A CS 743186 A CS743186 A CS 743186A CS 255642 B1 CS255642 B1 CS 255642B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antigen
- cortical
- hepatitis
- virus
- hybridoma
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Řešení se týká myšího lymfocytámího hybridomu, produkujícího protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B, který je uložen ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV pod označením IMG-CZAS HBc 18 E^B.^. Protilátka je vhodná pro detekci korového antigenu, pro afinitní purifikaci korového antigenu a pro detekci protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech.
Description
Vynález se týká myšího lymfocytárního hybridomu produkujícího protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B.
Hybridní buněčná linie byla sestrojena fúzí buněk myší myelomové linie SP2/0 a myších slezinných lymfoidních buněk, produkujících protilátky proti korovému /dřeňovému/ antigenu viru hepatitidy B. Korový antigen je strukturální součástí virionu viru hepatitidy B. Pro výraz korový antigen” je odbornou světovou veřejností běžně přijímáno označení CORE HBcAg.
Stanovení hladiny protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech má zásadní význam pro diagnostiku a monitorování hepatitidy B. Toto vyšetření zatím není možné v klinických podmínkách v ČSSR provádět, vzhledem k tomu, že není dostupná detekční souprava obsahující purifikovaný korový antigen a protilátky proti němu.
Tento nedostatek odstraňuje myší lymfocytární hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B podle vynálezu uložený ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV, Praha 6, Flemingovo nám. 2, pod označením IMG-CZAS HBc 18 EuBi2· Uvedené protilátky mohou být použity v enzymoimunologickém testu pro detekci korového antigenu, dále pro afinitní čištění korového antigenu, což umožňuje purifikovat vysoce čistý korový antigen z jater nemocných hapatitidou typu B.
Monoklonální protilátku je rovněž možné využít v modifikovaném enzymoimunologickém testu pro detekci protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech. Podstatného pokroku v diagnostice a monitorování hepatitidy B se dosáhne, je-li k dispozici klonovaná hybridní linie, produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B.
Uvedený hybridom byl získán způsobem známým z odborné literatury (Ktthler, G., Milstein, C., Nátuře 256: 495-497, 1975) klonováním populace hybridních buněk získaných hybridizací buněk ze sleziny myši BALB/c, které byly imunizovány korovým antigenem viru hepatitidy B a buněk myší myelomové linie SP2/0. Výhodou hybridomu HBc 18 Ε^Β.^ 3e' produkuje protilátky specificky reagující s korovým antigenem viru hepatitidy B. Tuto monoklonální protilátku lze použít pro detekci korového antigenu, pro afinitní purifikaci korového antigenu a pro diagnostiku protilátek proti korovému antigenu v lidských sérech. Použití této protilátky umožňuje vyvinutí diagnostické soupravy pro detekci protilátek proti korovému antigenu dosahující optimálních parametrů.
Hybridom HBc 18 E^^B^2 3e mo^no kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišné buňky a je adaptován pro růst in vivo v peritoneální dutině myší kmene BALB/c. Z konzerv, které jsou uchovávány v kapalném dusíku je možné zahájit produkci protilátky.
Příklad
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno 1,5 x 10 hybridomových buněk do peritoneální dutiny myši kmene BALB/c. Této myši bylo 14 dní před podáním hybridomových buněk aplikováno 0,7 ml parafinového oleje do peritoneální dutiny. Po 12 dnech růstu hybridomu v peritoneální dutině byla myš usmrcena a naprodukovaná ascitická tekutina byla odebrána. Celkem bylo získáno 5 ml ascitické tekutiny, ve které bylo obsaženo přibližně 5 mg/ml imunoglobulinu. Monoklonální protilátka reagovala specificky s korovým antigenem v enzymoimunologickém testu.
Z ascitické tekutiny byl pomocí síranové metody vypurifikován imunoglobulin. Jamky mikrotltrakčníoh destiček byly potahovány monoklonální protilátkou produkovanou klonem HBc 18 e11e12' v koncentraci 30 )Ug/ml. Pak byly přidány vzorky obsahující různé koncentrace korového antigenu viru hepatitidy B a nakonec byl přidán konjugát polyklonální protilátky proti korovému antigenu s křenovou peroxidázou a enzymoimunologický test byl dokončen standardním způsobem. Tento tes umožnil detekci 10 ng korového antigenu/ml.
Základní kultivační médium pro buňky hybridomu HBc 18 E21B12 Ea94ovo minimální esenciální médium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny. Toto médium (označované jako H-MEMd - Ostav molekulární genetiky ČSAV) je pro kultivaci hybridomů doplněno inaktivovaným telecím sérem (Bioveta, Ivanovice na Hané), penicilinem a streptomycinem. Hybridom je kultivován při 37 °C. Hybridom HBc 18 produkuje protilátku podtřídy
IgG3, izoelektrický bod je pH 9. Λ
Monoklonální protilátka produkovaná klonem HBc 18 E^^B^2 reaguje specificky s korovým antigenem viru hepatitidy B. Tuto protilátku lze využít k detekci korového antigenu, k afinitní purifikaci korového antigenu a k detekci lidských protilátek proti korovému antigenu v enzymoimuňologickém testu. Tento hybridom může být průmyslově využíván jako zdroj protilátky proti korovému antigenu v diagnostických soupravách.' ,.
PŘEDMĚT VYNÁLEZU
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUMyší lymfocytární hybridom IMG-CZAS HBc 18 Ε^Β·^, produkující protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867431A CS255642B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867431A CS255642B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS743186A1 CS743186A1 (en) | 1987-07-16 |
| CS255642B1 true CS255642B1 (cs) | 1988-03-15 |
Family
ID=5423430
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS867431A CS255642B1 (cs) | 1986-10-15 | 1986-10-15 | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS255642B1 (cs) |
-
1986
- 1986-10-15 CS CS867431A patent/CS255642B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS743186A1 (en) | 1987-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5026827A (en) | Amphetamine-protein complex as immunogen for obtaining antibodies specific to methamphetamine | |
| IE57956B1 (en) | Novel monoclonal antibodies and hybridoma cells,processes for their preparation and their applications | |
| JPH06113832A (ja) | ジゴキシンに対し高い親和性を有するモノクローナル抗体を産生するハイブリッドセルライン及びその製造法 | |
| EP0363041A1 (en) | Monoclonal antibody to morphine, preparation of monoclonal antibody, assaying kit and assaying method of morphine | |
| JP3681206B2 (ja) | 抗ファクターＸａ・ティシュファクターパスウェイインヒビター複合体モノクローナル抗体及びその使用 | |
| FI83669C (fi) | Foerfarande foer specifik bestaemning av pankreas -amylas. | |
| US5171664A (en) | Monoclonal antibody to okadaic acids, process for producing the monoclonal antibody, assay reagent for assaying okadaic acids using the monoclonal antibody, and assay method | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| JPS60155198A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| CS265494B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridom produkující protilátky proti e antigenu viru hepatitidy B (HBeAg) | |
| JPS63209596A (ja) | モノクロ−ナル抗体及びその使用方法 | |
| CS265495B1 (cs) | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B | |
| RU2049817C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к фенобарбиталу | |
| FI93469B (fi) | Menetelmä hybridoomasolulinjan ja sen tuottaman vasta-aineen tuottamiseksi | |
| JPH01160493A (ja) | モノクローナル抗体及びその使用方法 | |
| CS255640B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem produkující protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B, které lze značit křenovou peroxidázou | |
| CS253240B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12 | |
| SU1673597A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS. мUSсULUS L., используемый дл получени моноклональных антител к теофиллину | |
| RU2049816C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к тироксину | |
| CS252792B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? | |
| RU2049818C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., испольуемый для получения моноклональных антител к дигоксину | |
| RU1776691C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L, - продуцент моноклональных антител против J @ Е человека | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| JP2001048900A (ja) | 抗体及びこれを使用した測定法 |