CS268403B1 - Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 - Google Patents
Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 Download PDFInfo
- Publication number
- CS268403B1 CS268403B1 CS865403A CS540386A CS268403B1 CS 268403 B1 CS268403 B1 CS 268403B1 CS 865403 A CS865403 A CS 865403A CS 540386 A CS540386 A CS 540386A CS 268403 B1 CS268403 B1 CS 268403B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hbsag
- production line
- hbs
- hybridoma production
- cell hybrid
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešeni se týká nové produkční myší hybrldomová linie HBS-01 vytvářející specifickou monoklonálni protilátku podtřidy IgGl proti povrchovému entigenu viru hepetitidy B (HBsAg)
Description
Vynález se týká nové produkční hybridomové linie vytvářející specifickou monoklonélní protilátku proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B /HBsAg/. Hybridom byl sestrojen fúzí buňky myší myelomové linie a myšího lymfocytu, senzibilizovaného antigenem HBs. '
Diagnostická séra proti HBsAg jsou základní složkou souboru imunoreagencií, nezbytných pro eerologickou diagnostiku onemocnění člověka virovou hepatitidou 8 a pro zjišťování přítomnosti viru hepatitidy B v krvi a krevních derivátech v transfuzni službě. Tato aéra jsou součástí souprav pro detekci HBsAg /SEVATEST ELISA HBsAg - MACRO I nebo ELISA HBsAg MICRO 1/, které jsou používány ve zdravotnictví při rutinním vyšetřování krve.
Diagnostická séra používaná pro stanovení HBsAg pomocí uvedených testů jsou hyperimuni králičí e kozí antiséra, připravovaná dosud opakovanou imunizaci zvířat purifikovaným HBsAg,· připravovaným z lidských plazem nosičů HBsAg. Příprava HBsAg je značně náročná na materiální, metodické i organizeční zajištěni výrobního procesu. Nedostatkem tohoto způsobu přípravy hyperimuních antlsér je, že některá zvířata nedostatečně reaguji na imunizaci HBsAg, čímž dochází k výrobním ztrátám. Vedle žádaných protilátek proti HBsAg se v hyperimuních antisérech mohou vyskytnout i nežádoucí protilátky proti lidekým sérovým bílkovinám, které je nutno ze séra odstranit vysycením. Standardizace jednotlivých šarží diagnostických sér je při stávajícím způsobu přípravy obtížná a vždy neúplná, neboť z vlastní podstaty dosavadního způsobu přípravy imunních sér vyplývá, že nelze zíeket dvě výrobní Serže stejných vlastností. ·
Dalším nedostatkem vyšetřování HBsAg prováděného pomoci dosud užívaných polyklonálnich eér je, že nelze vyloučit chybné výsledky, způsobené nižší citlivostí nebo neočekávanými vlestnostmi diagnostických sér. f
Mnohé z uvedených problémů dosud používaného postupu přípravy diagnostických sér i řadu nedostatků vyplývajících z nevhodných vlestností dosud používaných polyklonálnich diagnostických sér je možné odstranit zevedením přípravy myších monoklonálních protilátek proti HBsAg produkovaných B-lymfocytérními hybrldomy. Hlavním přínosem zavedení monoklonálních protilátek je především zjednodušení a urychlení výrobního postupu, úspora purifikovaného HBs antigenu, standardizace přípravy jednotlivých šerží diagnostických sér, zvýšeni citlivosti a specifity vyšetření i zkrácení doby nutné pro provedení diagnostického testu.
Zdrojem monoklonální protilátky proti HBsAg je hybridomové linie HBS-01, uložená ve'sbirce hybridomů Ústavu sér a očkovacích látek, Praha 10, W.Piecka 108 pod označením HBS - 01.
Uvedený hybridom byl sestrojen způsobem známým z odborné literatury /S.Fazekas de St. Groth, 0. Scheidigger: Production of monoklonal antibodies: Strategy and tactics, 0. Immunol. Meth. 35:1, i960; 0. Kalil. 0. Crevet, M. Fellous, 3. Drouet, A.M. Courouce, C. Ropers: Production d'anticorps monoclonaus anti-HBs. Ann.Immunol. /Inst.Pasteur/ 132c,319,1961/ klonováním souboru hybridních buněk, vzniklých fúzí buněk myši myelomové linie P3-X63-Ag8.653 e ssnzibillzovaných lymfocytů, získaných ze slezin myší kmene 8ALB/c, imunizovaných HBsAg.
B-lymfocytárni hybridomové linie HBs-01 produkuje zcela homogeni protilátky tzv. protilátky monoklonální, které specificky reaguji s HBsAg a nikoliv s lidskými plasmatickými bílkovinami. Hybridom HBS - Ol je možné pěstovat v podmínkách buněčné kultury in vitro nebo in vivo v peritoneální dutině myší kmene BALB/c nebo jej dlouhodobě uchovávet při teplotě kapalného dusíku.' Monoklonální protilátka produkovaná hybridomem HBs - 01 je specifická pro HBsAg a prostá dalších nežádoucích protilátek.
Buňky hybridomů HBS - 01 jeví ultrastrukturálni obraz typických myelomových buněk s volnými i na membránu vázanými polyribozomy. V podmínkách buněčné kultury rostou jako
CS 268403 Bl slabš adherujlcl buňky /polosuapenzni kultura/ v mádlu MEM nebo RPMI 1640, doplněném 2-merkaptoetanolem /5 x 10$M/, 10 % telecího séra pro tkáňové kultury a antibiotiky / 100 j penicilinu, 10 pg βtřeptomyclnu a 40 /jg gentamyclnu v 1 ml/přl 37 °C. Střední generační doba produkční linie HBS -01 člnl 20 hodin. Produkovaná monoklonální protilátka je myší Imunoglobulln třídy IgG 1, její izoelektricky bod je 6,6 až 6,8.
Přiklad 1
Za účelem pomnožení produkční hybrídomové linie HBe - 01 a zlákání monoklonální protilátky bylo vyseto do kultivační nádobky 1 χ 105 buněk /1 ml kultivačního média. Po 3 dnech růstu buněk bylo z kultivační nádoby získáno kultivační médium, obohacené o monoklonálnl protilátky, vytvořené buňkami produkční hybrídomové linie. Monoklonální protilátky reagovaly β purifikovaným HBsAg v radioimunologickém stanoveni až do ředěni i 106
Přiklad 2 g Monoklonální protilátka proti HBsAg byla ziakána in vivo po inokulací 5 x 10 buněk hybrídomové produkční linie HBS - 01 do perltoneální dutiny myši kmene BALB/c, které bylo 14 dní předem injikováno stejným způsobem 0,5 ml parafínového oleje. Monoklonální protilátky proti HBeAg byly obsaženy v ascitické tekutině, získané z perltoneální dutiny myáí za 12 dni po Inokulací buněk. Monoklonální protilátky reagovaly a purifikovaným 9
HBsAg v radioimunologickém stanoveni až do ředěni 1 i 10 , Bylo získáno 5 ml ascitické tekutiny a obsahem imunoglobulinu 12 mg/ml.
Claims (1)
- P R E 0 M E T vynalezu • Myěí B-lymfocytárnl hybridomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 produkující monoklonální protilátku podtřidy IgGl proti povřchovému antigenu viru hepatitidy B.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS865403A CS268403B1 (cs) | 1986-07-16 | 1986-07-16 | Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS865403A CS268403B1 (cs) | 1986-07-16 | 1986-07-16 | Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS540386A1 CS540386A1 (en) | 1989-07-12 |
| CS268403B1 true CS268403B1 (cs) | 1990-03-14 |
Family
ID=5398877
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS865403A CS268403B1 (cs) | 1986-07-16 | 1986-07-16 | Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS268403B1 (cs) |
-
1986
- 1986-07-16 CS CS865403A patent/CS268403B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS540386A1 (en) | 1989-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0038642A1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis B and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus B and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| EP0138377B2 (en) | Lewis blood group phenotype assay | |
| WO1983001739A1 (en) | Monoclonal antibodies against brugia malayi | |
| CS268403B1 (cs) | Myši B-lymfocytárni hybrldomová produkční linie HBS - 01 AO 35/86 | |
| Groves et al. | A bovine monoclonal antibody to oestrone/oestradiol prepared by a (murine× bovine)× bovine interspecies fusion | |
| CS268404B1 (cs) | Myši B-lymfocytárnl hybridomová produkční linie HBS - 02 AO 36/Θ6 | |
| WO1983001785A1 (en) | Monoclonal antibodies against leishmania | |
| WO1986003498A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| RU1776691C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L, - продуцент моноклональных антител против J @ Е человека | |
| EP0093776A1 (en) | Monoclonal antibodies against schistosoma | |
| US5849539A (en) | Thymidine kinase-lacking ouabain-resistant chicken hybridoma | |
| EP0186371A2 (en) | Monoclonal antibodies specific to antigens of Hepatitis B virus | |
| SU1752763A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS MUScULUS L. - продуцент моноклональных антител к I @ Е человека | |
| KR910002851B1 (ko) | 체외면역에 의한 항황우독소 단일클론성 항체의 제조방법과 황우독소의 분석방법 | |
| CS253240B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12 | |
| JPH01257477A (ja) | 安定なウサギ−マウスハイブリドーマ及びその分泌物 | |
| RU2093574C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к igg свиньи | |
| CS235850B1 (cs) | Myší lymfocitární hybridom produkující protilátku proti lidskému -transferinu | |
| CS240807B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TEC - 01 | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| CS228859B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému erytrocytárnímu skupinovému antigenu A | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CS228860B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému transferinu | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| JPH01500722A (ja) | 膵臓α‐アミラーゼに対する抗体の産生及び診断への使用 |