CS265495B1 - Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B - Google Patents
Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B Download PDFInfo
- Publication number
- CS265495B1 CS265495B1 CS876302A CS630287A CS265495B1 CS 265495 B1 CS265495 B1 CS 265495B1 CS 876302 A CS876302 A CS 876302A CS 630287 A CS630287 A CS 630287A CS 265495 B1 CS265495 B1 CS 265495B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hbcag
- hepatitis
- antibodies against
- mouse
- core
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 title 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 claims abstract description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract description 3
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 239000011833 salt mixture Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se -týká myšího lymfocytárního
hybridomu, produkujícího protilátky proti
"core" antigenu viru hepatitidy B tHBcAg),
který je uložen ve Sbírce hybřidomů Ostavu
molekulární genetiky ČSAV pod označením
IMG CZAS HBc 13y F9C7. Protilátku lze značit
křenovou peroxidázou a využít pro detekci
protilátek proti HBcAg třídy IgM v lidských
sérech a dále pro detekci a afinitní purifikaci
HBcAg.
Description
Vynález se týká myšího lymfooytárního hybridomu produkujícího protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B (HBcAg).
Hybridní buněčná linie byla sestrojena fúzí buněk myší myelomové linie (SP2/0) a myších slezinných lymfoidních buněk, produkujících protilátky proti HBcAg. HBcAg je strukturální součástí virionu viru hepatitidy B.
Stanovení hladiny protilátek proti HBcAg a jejich rozlišení na protilátky třídy IgM a IgG má zásadní význam pro diagnostiku a monitorování hepatitidy B. Stanovení hladiny celkových protilátek lze provádět pomocí kompetičního enzymoimunologického testu, kdy jamky jsou potahovány HBcAg a je přidáno testované sérum, společně s monoklonální protilátkou značenou křenovou peroxidázou. Stanovení protilátek třídy IgM lze provést pomocí enzymoimunologického testu, následuje přidáni testovacího séra, HBcAg a monoklonální protilátky značené křenovou peroxidázou.
Obě tato stanovení lze provádět pomocí značené monoklonální protilátky, produkované hybridomem podle vynálezu, který je uložen ve Sbírce hybridomu Ostavu molekulární genetiky ČSAV, Praha 6, Flemingovo nám. 2 pod označením IMG CZAS HBc 13y FgC?. Uvedené protilátky mohou být rovněž použity pro detekci HBcAg a pro afinitni purifikaoi HBcAg. Uvedený hybridóm byl získán způsobem známým z odborné literatury (Kfthler, G., Milstein, C., Nátuře 256:
495 až 497) klonováním populace hybridních buněk získaných hybridizací buněk ze sleziny imunizovaných myši kmene BALB/c a buněk myší myelomové linie SP2/0. Myši byly imunizovány HBcAg purifikovaným z bakterií, obsahujících rekombinantní expresní plasmid. Dosud připravené protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B produkované hybridomy AO č. 255 642 ,
AO ě. 258 886, mají nevýhodu v tom, že po označení těchto protilátek křenovou peroxidázou dochází vždy k určitým ztrátám imunologické aktivity. Tuto nevýhodu odstraňuje použiti protilátky produkované hybridomem HBc 13y FgC7 podle vynálezu, kterou lze značit křenovou peroxidázou aniž dochází ke ztrátám imunologické aktivity. Tuto protilátku lze použít k detekci celkové hladiny protilátek a protilátek třídy IgM v lidských sérech, pro detekci a afinitni purifikací HBcAg. Použití této protilátky umožňuje vyvinutí diagnostické soupravy pro detekci protilátek třídy IgM.
Hybridóm HBc 13y FgC7 je možno kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišné buňky a je adaptován pro růst in vivo v peritoneální dutině myši kmene BALB/c. Z konzerv, které jsou uchovávány v kapalném dusíku, je možné zahájit produkci protilátky.
Příklad
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno lxlO6 hybridomových buněk do peritoneální dutiny myší kmene BALB/c. Této myši bylo 14 dní před podáním hybridomových buněk aplikováno 0,7 ml parafinového oleje do peritoneální dutiny. Po 15 dnech růstu v peritoneální dutině byla myš usmrcena a neprodukovaná ascitická tekutina odebrána. Celkem bylo získáno 5 ml ascitické tekutiny, ve které bylo obsaženo průměrně 5,5 mg/ml protilátky. Monoklonální protilátka specificky reagovala s HBcAg v enzymoimunologickém testu.
Základní kultivační médium pro buňky hybridomu HBc 13y FgC7 je Eaglovo minimální esenciální médium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny. Toto médium (označované jako H-MEMd- Ostav molekulární genetiky ČSAV) je pro kultivaci hybridomů doplněno inaktivovaným telecím sérem (Bioveta, Ivanovice na Hané), penicilinem a streptomycinem. Hybridóm je kultivován při 37 °C. Hybridóm HBc 13y FgC7 produkuje protilátku podtřídy IgG2A, izoelektrický bod je pH 6,5 až 6,8.
Monoklonální protilátka produkovaná klonem HBc 13y FgC7 reaguje specificky s HBcAg a tuto protilátku lze značit křenovou peroxidázou, aniž dochází ke ztrátám imunologické aktivity. Tuto protilátku lze použít k detekci protilátek třídy IgM v lidských sérech k detekci a afinitni purifikací HBcAg. Tento hybridóm může být průmyslově využíván jako zdroj protilátky proti HBcAg v diagnostických soupravách.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUMyší lymfocytární hybridom IMG CZAS HBc 13y FgC? produkující protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS630287A1 CS630287A1 (en) | 1989-03-14 |
| CS265495B1 true CS265495B1 (cs) | 1989-10-13 |
Family
ID=5409749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS265495B1 (cs) |
-
1987
- 1987-08-28 CS CS876302A patent/CS265495B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS630287A1 (en) | 1989-03-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| CN112851803A (zh) | 抗h10亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体zju10-01及其应用 | |
| JPH07108915B2 (ja) | ヒト−マクロファージ遊走阻止因子蛋白質 | |
| EP0093775A1 (en) | Monoclonal antibodies against brugia malayi | |
| EP0176365A2 (en) | Human monoclonal antibody and its preparation | |
| US5130232A (en) | Monoclonal antibody immunoassay kit for avian reticuloendotheliosis virus | |
| JPH09176199A (ja) | 抗ファクターＸａ・ティシュファクターパスウェイインヒビター複合体モノクローナル抗体及びその使用 | |
| US5171664A (en) | Monoclonal antibody to okadaic acids, process for producing the monoclonal antibody, assay reagent for assaying okadaic acids using the monoclonal antibody, and assay method | |
| CS265495B1 (cs) | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B | |
| CN1017349B (zh) | 抗人心房钠尿肽的单克隆抗体 | |
| WO1988000240A1 (en) | Preparation of monoclonal antibodies | |
| JPH0789998A (ja) | 抗ミクロシスチンモノクローナル抗体およびそれを産生するハイブリドーマ | |
| CN1242425A (zh) | 抗P185neu/c－erbB－2单克隆抗体杂交瘤其制备方法及肿瘤检测用途 | |
| CS265494B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridom produkující protilátky proti e antigenu viru hepatitidy B (HBeAg) | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| RU2395575C1 (ru) | ШТАММ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО Mus musculus L. - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) (ВАРИАНТЫ), МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО, ПРОДУЦИРУЕМОЕ ШТАММОМ (ВАРИАНТЫ), НАБОР ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ФОРМАТА "СЭНДВИЧ" ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ МАТРИКСНОГО БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) | |
| RU1835848C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus l - продуцент моноклональных антител к холерному энтеротоксину | |
| WO1986002365A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| Kudo et al. | Isolation the characterization of monoclonal antibodies against pili of Corynebacterium renale and Corynebacterium pilosum | |
| WO1986003498A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| WO1987006616A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| CS255640B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem produkující protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B, které lze značit křenovou peroxidázou | |
| JPH0475597A (ja) | ヒト免疫不全ウイルスの逆転写酵素に対するモノクローナル抗体、その製法及びその抗体産生株 |