CS265495B1 - Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B - Google Patents
Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B Download PDFInfo
- Publication number
- CS265495B1 CS265495B1 CS876302A CS630287A CS265495B1 CS 265495 B1 CS265495 B1 CS 265495B1 CS 876302 A CS876302 A CS 876302A CS 630287 A CS630287 A CS 630287A CS 265495 B1 CS265495 B1 CS 265495B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- antibodies against
- hepatitis
- hbcag
- producing antibodies
- mouse lymphocyte
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se -týká myšího lymfocytárního hybridomu, produkujícího protilátky proti "core" antigenu viru hepatitidy B tHBcAg), který je uložen ve Sbírce hybřidomů Ostavu molekulární genetiky ČSAV pod označením IMG CZAS HBc 13y F9C7. Protilátku lze značit křenovou peroxidázou a využít pro detekci protilátek proti HBcAg třídy IgM v lidských sérech a dále pro detekci a afinitní purifikaci HBcAg.
Description
Vynález se týká myšího lymfooytárního hybridomu produkujícího protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B (HBcAg).
Hybridní buněčná linie byla sestrojena fúzí buněk myší myelomové linie (SP2/0) a myších slezinných lymfoidních buněk, produkujících protilátky proti HBcAg. HBcAg je strukturální součástí virionu viru hepatitidy B.
Stanovení hladiny protilátek proti HBcAg a jejich rozlišení na protilátky třídy IgM a IgG má zásadní význam pro diagnostiku a monitorování hepatitidy B. Stanovení hladiny celkových protilátek lze provádět pomocí kompetičního enzymoimunologického testu, kdy jamky jsou potahovány HBcAg a je přidáno testované sérum, společně s monoklonální protilátkou značenou křenovou peroxidázou. Stanovení protilátek třídy IgM lze provést pomocí enzymoimunologického testu, následuje přidáni testovacího séra, HBcAg a monoklonální protilátky značené křenovou peroxidázou.
Obě tato stanovení lze provádět pomocí značené monoklonální protilátky, produkované hybridomem podle vynálezu, který je uložen ve Sbírce hybridomu Ostavu molekulární genetiky ČSAV, Praha 6, Flemingovo nám. 2 pod označením IMG CZAS HBc 13y FgC?. Uvedené protilátky mohou být rovněž použity pro detekci HBcAg a pro afinitni purifikaoi HBcAg. Uvedený hybridóm byl získán způsobem známým z odborné literatury (Kfthler, G., Milstein, C., Nátuře 256:
495 až 497) klonováním populace hybridních buněk získaných hybridizací buněk ze sleziny imunizovaných myši kmene BALB/c a buněk myší myelomové linie SP2/0. Myši byly imunizovány HBcAg purifikovaným z bakterií, obsahujících rekombinantní expresní plasmid. Dosud připravené protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B produkované hybridomy AO č. 255 642 ,
AO ě. 258 886, mají nevýhodu v tom, že po označení těchto protilátek křenovou peroxidázou dochází vždy k určitým ztrátám imunologické aktivity. Tuto nevýhodu odstraňuje použiti protilátky produkované hybridomem HBc 13y FgC7 podle vynálezu, kterou lze značit křenovou peroxidázou aniž dochází ke ztrátám imunologické aktivity. Tuto protilátku lze použít k detekci celkové hladiny protilátek a protilátek třídy IgM v lidských sérech, pro detekci a afinitni purifikací HBcAg. Použití této protilátky umožňuje vyvinutí diagnostické soupravy pro detekci protilátek třídy IgM.
Hybridóm HBc 13y FgC7 je možno kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišné buňky a je adaptován pro růst in vivo v peritoneální dutině myši kmene BALB/c. Z konzerv, které jsou uchovávány v kapalném dusíku, je možné zahájit produkci protilátky.
Příklad
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno lxlO6 hybridomových buněk do peritoneální dutiny myší kmene BALB/c. Této myši bylo 14 dní před podáním hybridomových buněk aplikováno 0,7 ml parafinového oleje do peritoneální dutiny. Po 15 dnech růstu v peritoneální dutině byla myš usmrcena a neprodukovaná ascitická tekutina odebrána. Celkem bylo získáno 5 ml ascitické tekutiny, ve které bylo obsaženo průměrně 5,5 mg/ml protilátky. Monoklonální protilátka specificky reagovala s HBcAg v enzymoimunologickém testu.
Základní kultivační médium pro buňky hybridomu HBc 13y FgC7 je Eaglovo minimální esenciální médium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny. Toto médium (označované jako H-MEMd- Ostav molekulární genetiky ČSAV) je pro kultivaci hybridomů doplněno inaktivovaným telecím sérem (Bioveta, Ivanovice na Hané), penicilinem a streptomycinem. Hybridóm je kultivován při 37 °C. Hybridóm HBc 13y FgC7 produkuje protilátku podtřídy IgG2A, izoelektrický bod je pH 6,5 až 6,8.
Monoklonální protilátka produkovaná klonem HBc 13y FgC7 reaguje specificky s HBcAg a tuto protilátku lze značit křenovou peroxidázou, aniž dochází ke ztrátám imunologické aktivity. Tuto protilátku lze použít k detekci protilátek třídy IgM v lidských sérech k detekci a afinitni purifikací HBcAg. Tento hybridóm může být průmyslově využíván jako zdroj protilátky proti HBcAg v diagnostických soupravách.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUMyší lymfocytární hybridom IMG CZAS HBc 13y FgC? produkující protilátky proti core antigenu viru hepatitidy B.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS630287A1 CS630287A1 (en) | 1989-03-14 |
| CS265495B1 true CS265495B1 (cs) | 1989-10-13 |
Family
ID=5409749
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS876302A CS265495B1 (cs) | 1987-08-28 | 1987-08-28 | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS265495B1 (cs) |
-
1987
- 1987-08-28 CS CS876302A patent/CS265495B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS630287A1 (en) | 1989-03-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| EP0176365A2 (en) | Human monoclonal antibody and its preparation | |
| JPH09176199A (ja) | 抗ファクターＸａ・ティシュファクターパスウェイインヒビター複合体モノクローナル抗体及びその使用 | |
| US5171664A (en) | Monoclonal antibody to okadaic acids, process for producing the monoclonal antibody, assay reagent for assaying okadaic acids using the monoclonal antibody, and assay method | |
| CS265495B1 (cs) | Myči lymfocytámí hybridem produkující protilátky proti „core" antigenu viru hepatitidy B | |
| WO1988000240A1 (en) | Preparation of monoclonal antibodies | |
| CN1242425A (zh) | 抗P185neu/c－erbB－2单克隆抗体杂交瘤其制备方法及肿瘤检测用途 | |
| JPH0789998A (ja) | 抗ミクロシスチンモノクローナル抗体およびそれを産生するハイブリドーマ | |
| CS265494B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridom produkující protilátky proti e antigenu viru hepatitidy B (HBeAg) | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| JPH01168299A (ja) | モノクローナル抗体およびそれを産生するハイブリドーマ | |
| RU2395575C1 (ru) | ШТАММ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО Mus musculus L. - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) (ВАРИАНТЫ), МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО, ПРОДУЦИРУЕМОЕ ШТАММОМ (ВАРИАНТЫ), НАБОР ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ФОРМАТА "СЭНДВИЧ" ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ МАТРИКСНОГО БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) | |
| WO1986002365A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| RU1835848C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus l - продуцент моноклональных антител к холерному энтеротоксину | |
| Kudo et al. | Isolation the characterization of monoclonal antibodies against pili of Corynebacterium renale and Corynebacterium pilosum | |
| CS255640B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem produkující protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B, které lze značit křenovou peroxidázou | |
| WO1987006616A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| JPH01160494A (ja) | ヒト免疫不全ウイルスに対するモノクローナル抗体およびそのモノクローナル抗体の製法 | |
| SU1744107A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных мUS мUSсULUS - продуцент моноклональных антител против эритроцитарного антигена V F-системы крупного рогатого скота и родственных ему видов | |
| RU2117042C1 (ru) | Штамм культивируемых гибридных клеток животного mus musculus - продуцент моноклонального антитела к термостабильному компоненту капсулоподобной субстанции возбудителя мелиоидоза | |
| WO1986002360A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| CS253240B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12 | |
| RU2049818C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., испольуемый для получения моноклональных антител к дигоксину |