CS252792B1 - Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? - Google Patents
Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? Download PDFInfo
- Publication number
- CS252792B1 CS252792B1 CS86425A CS42586A CS252792B1 CS 252792 B1 CS252792 B1 CS 252792B1 CS 86425 A CS86425 A CS 86425A CS 42586 A CS42586 A CS 42586A CS 252792 B1 CS252792 B1 CS 252792B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- surface antigen
- hbs
- monoclonal antibody
- mouse
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se týká myšího lymfocytárního hybridomu, produkujícího protilátku proti povrchovému antigenu hepatitidy ES, který je uložen ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV pod označením HESs 7 2 C A.?. Samotná monoklonální protilátka tohoto hybridomu je vhodná pro detekci povrchového antigenu v enzymoimunologickém testu .
Description
(54)
Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A?
Řešení se týká myšího lymfocytárního hybridomu, produkujícího protilátku proti povrchovému antigenu hepatitidy ES, který je uložen ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV pod označením HESs 7 2 C A.?. Samotná monoklonální protilátka tohoto hybridomu je vhodná pro detekci povrchového antigenu v enzymoimunologickém testu .
252 792 *·>
eZ
252 792
Vynález se týká nového hybridomu, t.j. hybridní buněčné linie, která byla sestrojena fúzí buněk myelomové linie Sp2/O a mycích slezinných lymfoidních buněk, produkujících protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy 3* Povrchový antigen je důležitou součástí viru hepatitidy 3 a jeho stanovení má zásadní význam při diagnostice onemocnění.
Dosud se protilátky proti povrchovému antigenu vyrábějí tak, že purifikovaný povrchový antigen je opakovaně injikován produkčním zvířatům, nejčastěji králíkům (kozám).
Sérum takto imunizovaných zvířat, odebírané po určité době působení antigenu, slouží jako zdroj protilátek. Tento postup, který je nazýván konvenčni imunizace ma 2 zásadní neodstranítelné nevýhody. ?ro každou imunizaci je nezbytný povrchový antigen, jehož purifikace představuje velmi nákladný a zdravotně rizikový postup. Protilátky proti povrchovému antigenu, ale i protilátky proti lidským sérovým bílkovinám, především proti lidskému sérovému albuminu, přičemž tyto balastní protilátky je nutno odstraňovat.
Nevýhody konvenčních sér proti povrchovému antigenu odstraňuje použití hybridomové technologie, Produkt hybridomu - monoklonální protilátka je namířena proti jediné antigenní determinantě povrchového antigenu a produkce monoklonálních protilátek nevyžaduje imunizací zvířat antigenem. Použití monoklonální protilátky dále umožňuje zvýšení citlivosti detekční metody SL13A, který je používán pro diagnostiku choroby.
Z publikovaných výsledků je známo, že povrchový antigen viru hepatitidy 3 není jedinou antigenní složkou, ale představuje komplex několika antigenů. Ve všech izolátech se nachází skupinově specifická determinanta a. Další 2 páry subtypově specifických determinant d/y a r/w se obvykle nevyskytují společně a jsou považovány za alely (Le Bovier,
G.L.: The heterogeneity of Australia antigen, J· Infect.
Dis. 123: 671, 1971)0
252 792
Monoklonální protilátky proti skupinově specifické determinantě a jsou výhodné pro diagnostické použití
Podstatného pokroku v diagnostice heoatitidy B, který se projeví ve výší citlivosti a zároveň vyšší spolehlivosti testu, se dosáhne jsou-li k dispozici klonované hybridní buněčné linie produkující monoklonální protilátku proti skupinově specifické a determinantě povrchového antigenu. Takový hybridom je uložen ve Sbírce hybridomů Ústavu moleKulární genetiky ČSAV v Praze ó, Plemingovo nám. 2, ood označením HBs 720 ^·
Uvedený hybridom byl získán způsobem známým z odborné literatury (Kunitomo, K., íahara, S., Saji, H·, Hosoi, T.j Monoclonal antibodies to hepatitis B surface antigen (HBsAg) as a tool for the au tomated HBsAg screening. Vox Sanguinis 4b: 104) 1983)» klonováním populace hybridních buněk získaných hybridizací buněk ze sleziny myší kmene BAL3/c, které byly imunizovány povrchovým antigenem viru heoatitidy 3 a buněk myší myelomové linie Sp2/0.
Výhodou hybridomů je, že produkují homogenní monoklonální protilátky, které reagují s povrchovým antigenem. Hybridom HBs 720^Αγ je možno kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišně buňky a je adaptován pro růst in vivo v oeritoneální dutině myší kmene BALB/c. Z konzerv, které jsou uchovávány v kapalném dusíku, je možné zahájit produkci protilátky bez dalšího antigenu. Protilátka produkovaná klonem HBs 720^A^ reaguje specificky s a determinantou povrchového antigenu viru hepatitidy B.
Příklad
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno 2xlOb hybridomových buněk do peritoneální dutiny myši kmene 3ALB/'c. Této myši bylo 14 dní před podáním hybridomových buněk aplikováno 0,7 ml parafinového oleje do peritoneální dutiny. Po 12 dnech růstu hybridomů v peritoneální
252 792
- 4 dutině byla myš usmrcena a naprodukovaná ascitická tekutina byla odebrána· Celkem bylo získáno 5 ml ascitická tekutiny, ve které bylo obsaženo 10 mg/ml imunoglobulinu. Monoklonální orotilátka reagovala specificky s povrchovým antigenem viru heoatitidy B v enzymoimunologickém a radioimunologickém testu.
Z ascitické tekutiny byl petrifikován imunoglobulin oomocí síranové metody a tímto imunoglobulinem byly potahovány mikrotitracní destičky v koncentraci >0 ug/ml. Pak byly přidány vzorky vyšetřované na přítomnost povrchového antigenu viru heoatitidy B a konjugát polyklonální protilátky proti povrchovému antigenu s křenovou peroxidázou a enzymoimunologický test byl dokončen způsobem oouzíváným pro detekci oovrchového antigenu pomocí diagnostické soupravy 1L1SA HtísAg Micro 1 (Ú50L) viz leták. Použití monoklonální protilátky umožnilo detekci 1,5 ng povrchového antigenu/ml, což představuje dvojnásobné zvýšení citlivosti testu ve •srovnání se systémem používajícím konvenční polyklonální protilátky.
Základním kultivačním medium pro buňky hybridomu HBs 72C .A„ je Haglovo minimální esenciální medium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny, foto medium (označované jako H-MZMd - Ústav molekulární genetiky GtíAV) je pro kultivaci hybridomů doplněno penicilinem, střep torny činem a- inaktivovaným telecím šerem (3ioveta, Ivanovice na Hané). Hybridom je kultivován při 37°C· Hybridom HBs 720^Αγ produkuje protilátku podtřídy IgGI, izoelektrický bod je pH 5j2-5>4·
Monoklonální protilátka produkovaná klonem HBs 720^Αγ reaguje specificky s povrchovým antigenem viru heoatitidy B. Tento hybridom může být průmyslově využíván jako zdroj protilátky proti povrchovému antigenu v diagnostických soupravách.
Claims (1)
- PH DUŠI VYNÁLEZUKíyší lymfocytární hybridom HBs 720^ produkující monoklonální protilátku podtřídy IgGI proti povrchovému antigenu viru hepatitidy BVytiskly Moravské tiskařské závody,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS86425A CS252792B1 (cs) | 1986-01-20 | 1986-01-20 | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS86425A CS252792B1 (cs) | 1986-01-20 | 1986-01-20 | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS42586A1 CS42586A1 (en) | 1987-02-12 |
| CS252792B1 true CS252792B1 (cs) | 1987-10-15 |
Family
ID=5336291
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS86425A CS252792B1 (cs) | 1986-01-20 | 1986-01-20 | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS252792B1 (cs) |
-
1986
- 1986-01-20 CS CS86425A patent/CS252792B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS42586A1 (en) | 1987-02-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4623627A (en) | Monoclonal antibody having specificity for the double-stranded conformation of native DNA and diagnostic methods using same | |
| KR100214759B1 (ko) | 인간 인터로이킨-6 수용체에 대한 항체 | |
| JP5715634B2 (ja) | 非交差反応性抗ＩｇＧ抗体 | |
| JP5766286B2 (ja) | 抗ヒトＩｇＧ１抗体 | |
| US11413342B2 (en) | Cyclophosphamide analogs for use as immunogens and assay conjugates for an immunoassay of cyclophosphamide and ifosfamide | |
| CA1296660C (en) | Monoclonal antibody against a ras oncogene p21 related dodecapeptide | |
| AU2006213411A1 (en) | Antibody for assay of ADAMTS13 activity and method of activity assay | |
| EP1098198A1 (en) | Method for the qualitative and quantitative determination of class igG human antibodies | |
| CS252792B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBs 720^A? | |
| Quesniaux et al. | An enzyme immunoassay for the screening of monoclonal antibodies to cyclosporin | |
| KR880005258A (ko) | Ifn-오메가에 대한 모노클로날 항체, 이들의 제조방법, 및 ifn-오메가의 정제 및 탐지를 위한 이들의 용도 | |
| JP3745411B2 (ja) | モノクローナル抗体 | |
| CS253240B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom HBslC6B12 | |
| KR100188245B1 (ko) | 면역원성 물질의 고도로 보존된 아미노산 서열에 대한 항체, 이의 제조 방법 및 이를 함유하는 면역 검정물 | |
| CS255640B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem produkující protilátky proti povrchovému antigenu viru hepatitidy B, které lze značit křenovou peroxidázou | |
| JP4037933B2 (ja) | 抗ヒトカルシトニンモノクローナル抗体 | |
| CS265494B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridom produkující protilátky proti e antigenu viru hepatitidy B (HBeAg) | |
| EP0419367A1 (fr) | Procédé de détection d'une substance biologique à l'aide de ligands | |
| CS255642B1 (cs) | Myáí lymfocytérníhybridom produkujíc! protilátky proti korovému antigenu viru hepatitidy B | |
| RU2049816C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток мыши mus musculus l., используемый для получения моноклональных антител к тироксину | |
| CS258886B1 (cs) | Myší lymfocytářní hybridom produkující protilátky proti korovému antigenu viru-hepatitidy B | |
| JPH08242883A (ja) | ２−メチルイソボルネオールに対するモノクローナル抗体、その製造方法及びこれを用いる２−メチルイソボルネオールの測定方法 | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CS235850B1 (cs) | Myší lymfocitární hybridom produkující protilátku proti lidskému -transferinu | |
| WO1998008090A1 (en) | Anti-idiotypic antibodies to an epiglycanin |