CN112843045A - 3`-羟基鹰嘴豆素a的用途以及包含其的药物组合物 - Google Patents

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王彧
韩立峰
苗琳
王雪妮
刘二伟
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Abstract

本发明实施例公开了一种墨旱莲化学成分作为植物雌激素的用途，具体地说，墨旱莲中的3'‑羟基鹰嘴豆素A在制备用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物中的用途。本发明还涉及一种治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物组合物，其中所述药物组合物包含3'‑羟基鹰嘴豆素A和药学上可接受的载体或赋形剂。经研究表明，本发明从墨旱莲中所得到的3'‑羟基鹰嘴豆素A有植物雌激素的作用，可以预期3'‑羟基鹰嘴豆素A或含有它的墨旱莲提取物、药物组合物可以用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病，进一步地，可以用于制备用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物。

Description

3′-羟基鹰嘴豆素A的用途以及包含其的药物组合物
本申请为2016年7月6日提交中国专利局、申请号为201610524066.X、发明名称为“墨旱莲化学成分作为植物雌激素的用途”的中国专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及墨旱莲化学成分的新用途领域，特别涉及墨旱莲化学成分作为植物雌激素的用途。
背景技术
女性绝经后，雌激素分泌会减少，并导致记忆力下降、潮热、疲劳、易怒以及骨密度降低等问题。雌激素替代疗法等传统疗法曾一度流行，但其副作用较大，长期使用可增加子宫癌及乳腺癌的发病率，因而被限制使用。而后科学家发现植物中存在一类与内源性雌激素结构类似的杂环多酚类的活性成分。其能够与哺乳动物或人的雌激素受体(estrogenreceptor，ER)结合，产生雌激素样或抗雌激素样活性效应，被称为植物雌激素(phytoestrogen，PE)。植物雌激素具双向调节作用，一方面，当机体内雌激素水平低于正常水平时，可发挥拟雌激素样作用，这一作用可以防治女性更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症和心血管疾病等；另一方面，在体内雌激素水平高于正常水平(如乳腺增生、子宫肌瘤等病症)时，可产生雌激素拮抗作用，有效减弱靶细胞对雌激素的应答。寻找具有雌激素活性而又没有雌激素副作用的植物雌激素，作为膳食补充剂，或者为临床提供新的治疗选择，仍是本领域技术人员所期待的。
墨旱莲为菊科植物鳢肠Eclipta prostrata L.的地上部分，别名旱莲草，具有补血，凉血止血，清热解毒，滋阴补肝肾的作用。现代药理学研究表明，墨旱莲具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎等药理作用，临床上用于治疗冠心病、出血性疾病等。
发明内容
发明人对墨旱莲的药效物质基础进行了深入的研究，制备了墨旱莲提取物并进一步地从中提取分离出了17种化合物，并出人意料地发现了这些化合物绝大部分具有植物雌激素活性，可以用作补充雌激素的膳食补充剂，或用于制备治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物。本发明基于上述发现得以完成。
本发明第一方面提供了墨旱莲提取物在制备用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物中的用途。
根据本发明第一方面任意一项的用途，其中所述的墨旱莲提取物包含至少一种选自以下的化合物：旱莲苷IV、3′-羟基鹰嘴豆素A、5-丁-1′-炔-3′-羟基-4′-氯-(2-戊-1″，3″-二炔)-噻酚、木樨草素7-O-β-D葡萄糖苷、旱莲苷I、木樨草素、5-醛基-2,2′,5′,2″-三联噻酚、刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷、原儿茶酸乙酯、豆甾醇、5-醛基-5′-(3-丁烯-1-炔基)-2,2′-二联噻酚、蟛蜞菊内酯及旱莲苷A。
根据本发明第一方面任意一项的用途，其中每克墨旱莲中含有10-4000微克的木樨草素7-O-β-D葡萄糖苷、7-450微克的木樨草素、300-1400微克的旱莲苷IV、900-3000微克的旱莲苷A及10-350微克的刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷。
根据本发明第一方面任意一项的用途，其中所述的墨旱莲提取物由以下方法制备：
1)将墨旱莲用乙醇水溶液提取；浓缩至无醇后获得粗浸膏；其中，乙醇水溶液优选采用体积百分数为50-90％，更优选采用60-80％，最优选采用70％的乙醇水溶液；乙醇水溶液的用量优选为墨旱莲的2-10倍量，更优选为4-7倍量，最优选为5倍量。提取时间优选为1-4小时，更优选为2-3小时；提取次数优选为1-6次，更优选为2-4次，最优选为3次；
2)将所得粗浸膏溶散于水中(水量为粗浸膏的3-20倍量，更优选为6-15倍量，最优选为10倍量。)后用石油醚和乙酸乙酯萃取，去溶剂后分别得石油醚萃取部分浸膏、乙酸乙酯萃取部分浸膏及水层浸膏；其中，优选用石油醚和乙酸乙酯分别萃取1-6次，更优选为2-4次，最优选为3次；去溶剂可以通过减压蒸馏等本领域常用的方式实现，本发明在此不进行限定。
3)将步骤2)中获得的各部分浸膏合并、干燥后即得墨旱莲提取物。干燥可以采用本领域常用的方式，本发明在此不进行限定。
根据本发明第一方面任意一项的用途，其中所述与雌激素分泌异常相关的疾病为由雌激素水平高于正常水平而引起的疾病或由雌激素水平低于正常水平而引起的疾病，包括但不限于：更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症、心血管疾病、乳腺增生、乳腺癌及子宫肌瘤。
本发明第二方面提供了一种治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物组合物，其中所述药物组合物包含前述任意的墨旱莲提取物和药学上可接受的载体或赋形剂。
根据本发明第二方面任意一项的药物组合物，其中所述与雌激素分泌异常相关疾病为由雌激素水平高于正常水平而引起的疾病或由雌激素水平低于正常水平而引起的疾病，包括但不限于：更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症、心血管疾病、乳腺增生、乳腺癌及子宫肌瘤。
本发明第三方面提供了一种治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物组合物，其中所述药物组合物包含至少一种选自下列的药物活性成分和药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物活性成分包括：旱莲苷IV、3′-羟基鹰嘴豆素A、5-丁-1′-炔-3′-羟基-4′-氯-(2-戊-1″，3″-二炔)-噻酚、木樨草素7-O-β-D葡萄糖苷、旱莲苷I、木樨草素、5-醛基-2,2′,5′,2″-三联噻酚、刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷、原儿茶酸乙酯、豆甾醇、5-醛基-5′-(3-丁烯-1-炔基)-2,2′-二联噻酚、蟛蜞菊内酯及旱莲苷A。
根据本发明第三方面任意一项的药物组合物，其中该药物组合物中所包含的药物活性成分从墨旱莲中提取得到。
从墨旱莲中提取得药物活性成分的方法如下：
根据前述墨旱莲提取物制备方法中的步骤2)获得石油醚萃取部分浸膏、乙酸乙酯萃取部分浸膏及水层浸膏；
将水层浸膏通过大孔树指吸附分离，然后进行梯度洗脱，将洗脱物用硅胶柱层析，最后通过制备液相色谱制备得到化合物6(木樨草素)和化合物7(芹菜素)；
将乙酸乙酯萃取部分浸膏用硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，获得15个馏分，然后通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱(甲醇洗脱)、Flash中压色谱柱层析(ODS-C18)和/或制备液相色谱分离得到化合物14(蟛蜞菊内酯)、化合物10(刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷)、化合物17(旱莲苷A)、化合物1(旱莲苷IV)、化合物4(木樨草素7-O-β-D葡萄糖苷)、化合物5(旱莲苷I)、化合物2(3′-羟基鹰嘴豆素A，英文名3′-hydroxybiochanin A)、化合物11(原儿茶酸乙酯)及化合物16(刺囊酸)；
将石油醚萃取部分浸膏用硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，共得17个馏分，然后通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱(甲醇洗脱)、Flash中压色谱柱层析(ODS-C18)和/或制备液相色谱分离得到化合物9(5-醛基-2,2′；5′,2″-三联噻酚)、化合物13(5-醛基-5′-(3-丁烯-1-炔基)-2,2′-二联噻酚)、化合物3(5-丁-1′-炔-3′-羟基-4′-氯-(2-戊-1″，3″-二炔)-噻酚)、化合物15(5-羟甲基-2,2′；5′,2″-三联噻酚)、化合物12(豆甾醇)及化合物8(2,2′；5′,2″-三联噻酚)。
根据本发明第三方面任意一项的药物组合物，其中所述与雌激素分泌异常相关的疾病为由雌激素水平高于正常水平而引起的疾病或由雌激素水平低于正常水平而引起的疾病，包括但不限于：更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症、心血管疾病、乳腺增生、乳腺癌及子宫肌瘤。
如本文使用的，术语“治疗”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对已经罹患本发明所述与雌激素分泌异常相关的疾病的哺乳动物个体(优选为人)采用本发明的药物进行处理，以期对所述疾病产生治疗、治愈、缓解、减轻等作用。类似地，如本文使用的，术语“预防”具有其一般含义，并且在本文特别地是指对可能罹患本发明所述与雌激素分泌异常相关的疾病或者对本发明所述与雌激素分泌异常相关的疾病具有罹患风险的哺乳动物个体采用本发明的药物进行处理，以期对所述疾病产生防止、预防、阻止、隔断等作用。
如本文所用的，“药学上可接受的”表示当以通常用药剂量使用时没有实质的毒性作用，从而可被政府或与其相当的国际组织批准或者已被批准用于动物，更特别地用于人，或者被登录在药典上。
本发明药物组合物中可用的“药学上可接受的载体或赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的载体，特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体或赋形剂包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。
如本文使用的，术语“药物组合物”具有其一般含义。此外，本发明的“药物组合物”还可以以保健品、功能性食品、食品、食品添加剂等形式存在或提供。可采用制药领域特别是制剂领域中的常规技术，通过药品生产中常用的提取分离纯化手段得到本发明的药物组合物的原料的有效成分，任选地与一种或更多种药学可接受的载体或赋形剂混合，然后形成所需的剂型，来制备本发明的药物组合物。根据本发明的药物组合物，其为可以适用于口服给药、胃肠外给药或局部给药、外用给药的药物制剂。本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。具体地说，根据本发明的药物组合物，所述的药物剂型包括但不限于：片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂、注射液、注射用粉剂、透皮贴剂、软膏剂、凝胶剂、栓剂、口服溶液、口服混悬液、注射用乳剂、口服乳剂等、缓释片剂、控释片剂。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
用于口服施用的剂型可包括例如片剂、丸剂、硬或软胶囊剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、散剂、粉剂、细粒剂、颗粒剂、小丸剂、酏剂等，并不限于此。除了活性成分外，这些制剂还可包含稀释剂(例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纤维素和甘氨酸)、润滑剂(例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其镁盐、钙盐和聚乙二醇)。片剂还可包含粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷。必要时，其还可包含药用添加剂，例如崩解剂(如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐)、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂等。片剂可根据常用的混合、造粒或包衣的方法制备。
用于肠道外施用的剂型可包括例如注射剂、药用滴剂、软膏剂、洗剂、凝胶剂、乳膏、喷雾剂、混悬剂、乳剂、栓剂、贴剂等，并不限于此。
根据本公开的药物组合物可口服或非肠道例如经直肠、经局部、经皮肤、经静脉内、经肌内、经腹膜内或经皮下施用。
如本文使用的，术语“约”其通常是指本领域允许的误差范围，例如±10％，例如±5％，例如±2％。
经研究表明，本发明从墨旱莲中所得到的化合物具有不同程度的植物雌激素的作用，可以预期本发明所得到的化合物或含有它的墨旱莲提取物、药物组合物可以用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病，进一步地，可以用于制备用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物。
具体实施方式
下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行描述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1墨旱莲中活性成分的制备
取20kg墨旱莲(购自安国圣山药业有限公司，批号：mhl0001，产地：河北)，用100L70％乙醇热回流提取，每次提取时间2小时，共提取3次。在45℃下减压蒸馏，浓缩至无醇，估算浸膏质量约1kg。
将粗浸膏溶散于10L水中，用等量石油醚和乙酸乙酯萃取3次，分别得石油醚萃取部分浸膏255g(命名为EPA-P)，乙酸乙酯萃取部分浸膏150g(命名为EPA-E)，水层浸膏600g(命名为EPA-W)。
水层部分(EPA-W)600g，通过大孔树脂D101吸附分离，采用纯水，30％乙醇，70％乙醇，纯乙醇洗脱，30％乙醇洗脱物为EPA-W-D3。
EPA-W-D3组分共25g，用50g硅胶拌样，250g硅胶装柱，进行硅胶柱层析，柱体积600ml。用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，得到共16个馏分；TLC(薄层色谱)检测后合并，合并馏分1-4记为：EPA-W-D3-1；合并馏分5-6记为：EPA-W-D3-5；合并馏分7-8记为：EPA-W-D3-7；合并馏分9-10记为：EPA-W-D3-9；合并馏分11-13记为：EPA-W-D3-11；馏分14记为：EPA-W-D3-14。其中组分EPA-W-D3-11通过制备液相色谱制备得到化合物6(348mg)、7(83mg)。
乙酸乙酯部分(EPA-E)150g，以200g硅胶拌样，1.6Kg硅胶装柱，进行硅胶柱层析，柱体积4L。用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，洗脱梯度(二氯甲烷-甲醇体积比)分别为1:0，100:1，50:1，25:1，12.5:1，7:1，4:1，1:1，0:1，每个梯度收集两个柱体积。所得各馏分通过TLC分析检测，共15个馏分。
其中第8，9馏分合并，命名为EPA-E8，通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱(甲醇洗脱)、制备液相色谱分离得到化合物14(32mg)。第11馏分命名为EPA-E11，通过Sephadex LH-20凝胶，甲醇洗脱、Flash中压色谱柱层析(ODS-C18)，40％甲醇→100％甲醇梯度洗脱、制备液相色谱分离，系列比例甲醇水洗脱，TLC及HPLC检测各洗脱馏分，合并相同馏分，得到化合物10(130mg)、化合物17(1290mg)。第13，14，15馏分合并，命名为EPA-E13，通过SephadexLH-20凝胶、制备液相色谱分离得到化合物1(95mg)、化合物4(25mg)、化合物5(210mg)。第5，6馏分合并，命名为EPA-E5，经硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶、Flash中压色谱柱层析(ODS-C18)、制备液相色谱分离得到化合物2(49mg)、化合物11(114mg)、化合物16(43mg)。
石油醚部分(EPA-P)255g，以500g硅胶拌样，通过硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯(体积比1：0→0：1)进行梯度洗脱，共得17个馏分。各组分通过TLC分析检测，合并得8个组分，馏分1命名为EPA-P-1；馏分2-4为EPA-P-2；馏分5-7为EPA-P-5；馏分8-10为EPA-P-8；馏分11-14为EPA-P-11；馏分15为EPA-P-15；馏分16为EPA-P-16；馏分17为EPA-P-17。
组分EPA-P-1通过制备液相色谱制备得到化合物8(88mg)。组分EPA-P-5通过Flash中压色谱(ODS-C18)分离得到EPA-P-5-F6,再通过制备液相色谱制备得到化合物9(98mg)、13(45mg)。组分EPA-P-8通过Flash中压色谱(ODS-C18)分离得到EPA-P-8-F3，EPA-P-8-F7，再通过制备液相色谱制备得到化合物3(43mg)。组分EPA-P-11通过反复Sephadex LH-20凝胶分离，再通过制备液相色谱制备、重结晶方法得到化合物15(61mg)、12(149mg)。本实施例中的百分数均为体积百分数；馏分命名均按洗脱顺序命名。
实施例2：化合物1-17结构的确定
通过1H、13C-NMR，确定化合物1-17结构；所确定的化合物1-17结构如表1所示。
NMR仪器的型号为：BRUKER AVANCEⅢ500超导核磁共振波谱仪(TMS为内标，瑞士Bruker公司)；
具体的：
化合物1的表征如下：
1H-NMR(500MHz,pyridine-d5)谱低场区有2个氢：δ5.65(1H，br s，H-12)和5.25(1H，br s，H-16)。中低场区可以观测到：δ3.31(1H，m)为H-3位氢信号；δ4.92(1H,d,J＝7.0Hz,H-1′)和δ5.37(1H,d,J＝7.5Hz,H-1″)提示有两个葡萄糖基存在。在高场区还可观测到7个特征的甲基峰信号：δ1.85(3H,s,H-27),1.28(3H,s,H-23),1.19(3H,s,H-30),1.10(3H,s,H-24),1.07(3H,s,H-29),1.03(3H,s,H-26),和0.87(3H,s,H-25)。13C-NMR(125MHz，pyridine-d5)谱数据归属如下：38.8(C-1)，26.7(C-2)，89.0(C-3)，39.6(C-4)，56.0(C-5)，18.6(C-6)，33.4(C-7)，39.9(C-8)，47.2(C-9)，37.0(C-10)，23.9(C-11)，122.4(C-12)，145.2(C-13)，42.2(C-14)，36.2(C-15)，74.7(C-16)，48.9(C-17)，41.5(C-18)，47.4(C-19)，31.1(C-20)，36.3(C-21)，32.9(C-22)，28.3(C-23)，16.9(C-24)，15.6(C-25)，17.5(C-26)，27.3(C-27)，180.0(C-28)，33.6(C-29)，24.8(C-30)，105.1(C-1′)，83.4(C-2′)，78.3(C-3′)，71.6(C-4′)，77.9(C-5′)，62.7(C-6′)，106.1(C-1″)，77.1(C-2″)，78.0(C-3″)，71.6(C-4″)，77.9(C-5″)，62.8(C-6″)。
化合物2的表征如下：
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱低场区，可以看到δ12.98(1H,s)为5位羟基与羰基缔合信号；6.23(1H,d,J＝1.5Hz,H-6),6.39(1H,d,J＝1.5Hz,H-8)。氢谱低场区信号δ:8.36(1H,s,H-2)提示该化合物为异黄酮。低场区还可看到B环的一组ABX信号：7.14(1H,d,J＝1.5Hz,H-2′),6.82(1H,d,J＝8.5Hz,H-5′),6.99(1H,dd,J＝1.5,8.5Hz,H-6′)，提示B环3′，4′二取代；氢谱中还可观测到一个甲氧基信号：δ3.80(3H,s,4′-OCH3)。在13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱上出现相应的异黄酮碳信号：δ:93.6(C-8),98.9(C-6),104.3(C-10),113.2(C-2′),115.2(C-5′),121.5(C-3),121.6(C-6′),122.2(C-1′),146.6(C-4′),147.2(C-3′),154.1(C-2),157.4(C-9),161.9(C-5),164.2(C-7),180.1(C-4)，以及甲氧基信号δ56.0(4′-OCH3)。
化合物3的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱低场区有2个氢：δ7.10(1H，d，J＝4.0Hz)和7.06(1H，d，J＝4.0Hz)分别为噻酚环上H-3和4位氢信号；中低场区可以观测到：δ4.82(2H，dd，J＝4.5，6.5Hz)为H-3′位氢信号；δ3.79(1H，dd，J＝4.5，11.5Hz)和3.73(1H，dd，J＝6.5，11.5Hz)分别为H-4′位的氢信号；在高场区有一个明显的甲基峰信号：δ2.04(3H，s，H-5″)。13C-NMR(125MHz，CDCl3)谱数据归属如下：δ4.8(C-5″)、48.7(C-4′)、63.1(C-3′)、64.1(C-3″)、66.3(C-2″)、79.1(C-1′)、79.7(C-1″)、83.6(C-4″)、90.7(C-2′)、123.4(C-5)、124.5(C-2)、132.7(C-4)、133.6(C-3)。
化合物4的表征如下：
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱低场区，可以看到δ12.99(1H,s)为5位羟基与羰基缔合信号；δ6.45(1H,d,J＝2.0Hz)和δ6.79(1H,d,J＝2.0Hz)分别为6位和8位氢信号；6.75(1H,s)为3位氢质子信号，低场区还可看到B环的一组ABX信号：δ6.91(1H,d,J＝8.5Hz,H-5′)，7.42(1H,d,J＝2.0Hz,H-2′)和7.45(1H,dd,J＝2.0,8.5Hz,H-6′)，提示B环3′，4′二取代；此外，还可观测到一组β-D葡萄糖信号：δ5.08(1H,d,J＝7.5Hz,H-1″),3.28(1H,m,H-2″),3.30(1H,m,H-3″),3.19(1H,m,H-4″),3.45(1H,m,H-5″),3.71(1H,dd,J＝4.0,11.5Hz,H-6″b),3.49(1H,m,H-6″a)。在13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱上出现黄酮苷元相应的15个碳信号：δ94.6(C-8),99.4(C-6),103.1(C-3),105.2(C-10),113.5(C-2′),115.9(C-5′),119.1(C-6′),121.3(C-1′),145.7(C-3′),149.8(C-4′),156.8(C-9),161.0(C-5),162.8(C-7),164.4(C-2)和181.8(C-4)；碳谱中还观测到一组对应的β-D葡萄糖信号：δ99.8(C-1″),73.0(C-2″),76.3(C-3″),69.4(C-4″),77.2(C-5″),60.5(C-6″)。
化合物5的表征如下：
1H-NMR(500MHz,pyridine-d5)谱低场区有2个氢：δ5.63(1H，br s，H-12)和5.32(1H，br s，H-16)。中低场区可以观测到：δ3.43(1H，m)为H-3位氢信号；δ4.96(1H,d,J＝7.5Hz,H-1′)和δ6.34(1H,d,J＝8.0Hz,H-1″)提示有两个葡萄糖基存在。在高场区还可观测到7个特征的甲基峰信号：δ1.86(3H,s,H-27),1.30(3H,s,H-23),1.15(3H,s,H-26),1.05(3H,s,H-30),1.01(3H,s,H-29),1.01(3H,s,H-24)和0.90(3H,s,H-25)。13C-NMR(125MHz，pyridine-d5)谱数据归属如下：38.9(C-1)，26.6(C-2)，88.9(C-3)，39.5(C-4)，55.9(C-5)，18.6(C-6)，33.5(C-7)，40.1(C-8)，47.2(C-9)，37.1(C-10)，23.9(C-11)，122.7(C-12)，144.5(C-13)，42.1(C-14)，36.2(C-15)，74.2(C-16)，49.1(C-17)，41.3(C-18)，47.2(C-19)，30.9(C-20)，36.0(C-21)，32.2(C-22)，28.3(C-23)，17.1(C-24)，15.6(C-25)，17.6(C-26)，27.3(C-27)，176.0(C-28)，33.2(C-29)，24.6(C-30)，106.9(C-1′)，75.8(C-2′)，79.4(C-3′)，71.9(C-4′)，78.3(C-5′)，63.1(C-6′)，96.0(C-1″)，74.2(C-2″)，79.4(C-3″)，71.1(C-4″)，78.8(C-5″)，62.2(C-6″)。
化合物6的表征如下：
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱低场区，可以看到δ12.98(1H,s)为5位羟基与羰基缔合信号；δ6.19(1H,d,J＝2.0Hz)和δ6.45(1H,d,J＝2.0Hz)分别为6位和8位氢信号；6.67(1H,s)为3位氢质子信号。此外，低场区还可看到B环的一组ABX信号：δ6.89(1H,d,J＝8.0Hz,H-5′)，7.40(1H,d,J＝2.0Hz,H-2′)和7.41(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz,H-6′)，提示B环3′，4′二取代。在13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱上出现15个相应的碳信号：δ93.7(C-8),98.7(C-6),102.8(C-3),103.6(C-10),113.3(C-2′),115.9(C-5′),118.9(C-6′),121.4(C-1′),145.6(C-3′),149.6(C-4′),157.2(C-9),161.4(C-5),163.8(C-2),164.0(C-7)和181.6(C-4)。
化合物7的表征如下：
1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱低场区，可以看到δ12.96(1H,s)为5位羟基与羰基缔合信号；δ6.19(1H,d,J＝2.0Hz)和δ6.48(1H,d,J＝2.0Hz)分别为6位和8位氢信号；6.78(1H,s)为3位氢质子信号。此外，低场区还可看到B环的一组AA′BB′信号：δ6.93(2H,dd,J＝2.0,8.5Hz,H-3′,5′)和7.93(2H,dd,J＝2.0,8.5Hz,H-2′,6′)，提示B环对位取代。在13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱上出现13个相应的碳信号(包括两个对称碳信号)：δ93.9(C-8),98.7(C-6),102.8(C-3),103.6(C-10),115.9(C-3′,5′),121.1(C-1′),128.4(C-2′,6′),157.2(C-9),161.1(C-4′),161.4(C-5),163.7(C-2),164.0(C-7)和181.7(C-4)。
化合物8的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱低场区，可以看到δ7.08(br s,2H)为3′和4′位质子信号；7.02(2H，dd，J＝3.5,5.0Hz，H-4，4″)，7.17(2H，dd，J＝1.0,3.5Hz，H-3，3″)和7.22(2H，dd，J＝1.0,5.0Hz，H-5，5″)，提示结构中存在对称结构。在13C-NMR(125MHz,CDCl3)谱上出现6个芳香碳，123.7(C-3、3″)、124.3(C-3′、4′)、124.5(C-5、5″)、127.9(C-4、4″)、136.2(C-2′、5′)、137.1(C-2、2″)。
化合物9的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱低场区，δ9.86为5位醛基质子信号；δ7.67(1H，d，J＝4.0Hz)和7.24(1H，overlapped)为A环上4和3位氢信号；7.28(1H，overlapped)和7.27(1H，overlapped)分别为B环上H-4′和3′的信号；7.23(1H，overlapped)，7.13(1H，d，J＝4.0Hz)和7.05(1H,dd,J＝4.0,5.0Hz)分别为C环上H-3″,5″和4″的信号。具体碳谱数据(125MHz,CDCl3)如下：δ124.0(C-3)、124.5(C-3″)、124.7(C-5″)、125.4(C-4′)、126.9(C-3′)、128.1(C-4″)、134.5(C-2′)、136.4(C-5′)、137.3(C-4)、139.2(C-2″)、141.6(C-5)、146.8(C-2)、182.4(5-CHO)。
化合物10的表征如下：
1H-NMR(500MHz,pyridine-d5)谱低场区有2个氢：δ5.63(1H，br s，H-12)和5.29(1H，br s，H-16)。中低场区可以观测到：δ3.44(1H，dd,J＝5.0,11.0Hz)为H-3位氢信号；δ6.31(1H,d,J＝8.5Hz,H-1′)提示有一个葡萄糖基存在。在高场区还可观测到7个特征的甲基峰信号：δ1.82(3H,s,H-27),1.21(3H,s,H-23),1.16(3H,s,H-26),1.05(3H,s,H-30),1.03(3H,s,H-24),1.00(3H,s,H-29)和0.97(3H,s,H-25)。13C-NMR(125MHz，pyridine-d5)谱数据归属如下：39.1(C-1)，28.1(C-2)，78.1(C-3)，39.4(C-4)，56.0(C-5)，18.9(C-6)，33.2(C-7)，40.2(C-8)，47.3(C-9)，37.5(C-10)，23.9(C-11)，122.7(C-12)，144.5(C-13)，42.1(C-14)，36.0(C-15)，74.1(C-16)，48.9(C-17)，41.4(C-18)，47.3(C-19)，30.9(C-20)，36.1(C-21)，32.3(C-22)，28.8(C-23)，16.6(C-24)，15.8(C-25)，17.6(C-26)，27.3(C-27)，176.0(C-28)，33.6(C-29)，24.6(C-30)，95.9(C-1′)，74.1(C-2′)，79.4(C-3′)，71.0(C-4′)，78.8(C-5′)，62.2(C-6′)。
化合物11的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CD3OD)谱低场区，可以看到一组ABX芳香氢质子信号：δ7.43(1H,d,J＝2.0Hz,H-2),7.42(1H,dd,J＝2.0,8.0Hz,H-6),6.80(1H,d,J＝8.0Hz,H-5),一组乙基氢质子信号：δ4.29(2H,q,J＝7.0Hz,H-8)；δ1.35(3H,t,J＝7.0Hz,H-9)。在13C-NMR(125MHz,CD3OD)谱上出现六个相应的芳香碳信号：δ122.9(C-1),117.4(C-2),146.2(C-3),145.7(C-4),115.9(C-5)和123.6(C-6)，一个羧基碳信号：δ168.5(C-7)，一组乙基碳信号δ61.7(C-8),14.7(C-9)。
化合物12的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱低场区有3个氢：δ5.34(1H，d，J＝5.0Hz，H-6)，5.15(1H，dd，J＝9.0，15.0Hz，H-22)和δ5.02(1H，dd，J＝9.0，15.0Hz，H-23)。中低场区δ3.52(1H，m，H-3)为3位的连氧氢信号。高场区出现6个甲基信号：δ1.02(3H，d，J＝7.0Hz，H-21)，1.01(3H，s，H-19)，0.85(3H，d，J＝7.0Hz，H-26)，0.81(3H，t，J＝7.0Hz，H-29)，0.80(3H，d，J＝7.0Hz，H-27)和0.70(3H，s，H-18)。13C-NMR(125MHz，CDCl3)谱具体数据归属如下δ：12.1(C-18)、12.3(C-29)、19.0(C-27)、19.4(C-19)、21.1(C-11,16)、21.2(C-21)、24.4(C-15)、25.4(C-28)、28.9(C-16)、31.7(C-25)、31.9(C-2,7,8)、36.5(C-10)、37.3(C-1)、39.7(C-12)、40.5(C-20)、42.2(C-13)、42.3(C-4)、50.2(C-9)、51.3(C-24)、56.0(C-17)、56.9(C-14)、71.8(C-3)、121.7(C-6)、129.3(C-23)、138.3(C-22)、140.8(C-5)。
化合物13的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱中δ9.86为5位醛基质子信号；δ7.67(1H，d，J＝4.0Hz)和7.24(1H，d，J＝4.0Hz)为A环上4和3位氢信号；7.22(1H，d，J＝4.0Hz)和7.14(1H，d，J＝4.0Hz)分别为B环上H-3′和4′的信号；6.02(1H，dd，J＝11.5,17.5Hz,H-4″)；5.76(1H，dd，J＝1.0,17.5Hz)和5.60(1H，dd,J＝1.0,11.5Hz)为5″位的烯氢信号。13C-NMR(125MHz，CDCl3)谱数据归属如下：δ82.7(C-2″)、94.3(C-3″)、116.6(C-4″)、124.6(C-3)、124.8(C-5′)、126.0(C-3′)、127.8(C-5″)、133.1(C-4′)、137.2(C-2′)、137.2(C-4)、142.1(C-5)、146.1(C-2)、182.5(5-CHO)。
化合物14的表征如下：
在1H-NMR(500MHz,DMSO-d6)谱低场区，可以看到4个芳香氢质子信号：δ6.47(1H,d,J＝2.0Hz,H-8),6.63(1H,d,J＝2.0Hz,H-6),7.18(1H,s,H-13),7.25(1H,s,H-10)。在13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)谱上出现12个芳香碳，2个烯碳，一个羰基碳和一个甲氧基碳信号：δ158.8(C-1),101.6(C-2),155.2(C-3),96.6(C-4),154.7(C-5),93.1(C-6),162.1(C-7),98.1(C-8),157.7(C-9),104.5(C-10),145.3(C-11),144.2(C-12),98.8(C-13),113.6(C-14),148.8(C-15),55.6(C-16)。
化合物15的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CDCl3)谱的低场区有7个氢，δ7.22(1H，d，J＝5.0Hz)，7.17(1H，d，J＝3.0Hz)和7.02(1H，overlapped)分别为C环上H-5″，3″和4″位氢信号；7.06(1H，d，J＝3.5Hz)和7.05(1H，d，J＝3.5Hz)分别为B环上H-4′和3′的信号；7.03(1H，overlapped)和6.92(1H，d，J＝3.0Hz)分别为A环上H-3和4的信号。在中低场区有一个明显的宽单峰：δ4.81(2H，br s，5-CH2OH)。碳谱具体数据(125MHz,CDCl3)如下：δ60.2(5-CH2OH)、123.3(C-3)、123.8(C-3″)、124.3(C-3′、4′)、124.5(C-5″)、126.3(C-4)、127.9(C-4″)、136.1(C-5′)、136.4(C-2′)、137.1(C-2″)、137.4(C-2)、143.1(C-5)。
化合物16的表征如下：
13C-NMR(125MHz，pyridine-d5)谱数据归属如下：39.1(C-1)，28.2(C-2)，78.1(C-3)，39.4(C-4)，55.9(C-5)，18.9(C-6)，33.4(C-7)，40.0(C-8)，47.3(C-9)，37.5(C-10)，23.9(C-11)，122.5(C-12)，145.2(C-13)，42.2(C-14)，36.2(C-15)，74.7(C-16)，48.9(C-17)，41.5(C-18)，47.3(C-19)，31.1(C-20)，36.2(C-21)，32.9(C-22)，28.8(C-23)，16.6(C-24)，15.7(C-25)，17.6(C-26)，27.3(C-27)，180.0(C-28)，33.6(C-29)，24.8(C-30)。
化合物17的表征如下：
1H-NMR(500MHz,CD3OD)谱低场区有2个氢：δ5.29(1H，br s，H-12)和4.46(1H，br s，H-16)。中低场区可以观测到：δ3.18(1H，m)为H-3位氢信号；δ4.32(1H,d,J＝7.5Hz,H-1′)提示有一个葡萄糖基存在。在高场区还可观测到7个特征的甲基峰信号：δ1.37(3H,s,H-27),1.05(3H,s,H-23),0.97(3H,s,H-30),0.96(3H,s,H-25),0.88(3H,s,H-29),0.85(3H,s,H-24)和0.79(3H,s,H-26)。13C-NMR(125MHz，CD3OD)谱数据归属如下：38.0(C-1)，27.1(C-2)，90.9(C-3)，36.3(C-4)，57.2(C-5)，19.4(C-6)，34.4(C-7)，40.2(C-8)，47.8(C-9)，36.6(C-10)，24.5(C-11)，123.5(C-12)，145.1(C-13)，40.7(C-14)，39.9(C-15)，75.3(C-16)，47.8(C-17)，42.1(C-18)，42.7(C-19)，31.5(C-20)，36.3(C-21)，32.8(C-22)，28.6(C-23)，17.1(C-24)，16.1(C-25)，17.8(C-26)，27.3(C-27)，181.2(C-28)，33.5(C-29)，25.0(C-30)，106.8(C-1′)，75.8(C-2′)，78.4(C-3′)，71.7(C-4′)，77.7(C-5′)，62.9(C-6′)。
表1化合物列表
Figure BDA0002945932450000141
Figure BDA0002945932450000151
Figure BDA0002945932450000161
实施例3墨旱莲提取物中化合物含量的测定
(a)对照品及供试品溶液的制备
分别称取各对照品适量，精密称定，置10mL容量瓶中，加体积分数为50％的甲醇-水溶液至刻度，得对照品系列溶液①，木樨草素7-O-β-D葡萄糖苷(简称A,18.15mg),木樨草素(简称B,4.64mg),旱莲苷IV(简称C,11.85mg),芹菜素(简称D,1.56mg),旱莲苷A(简称E,21.50mg),刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷(简称F,2.60mg),刺囊酸(简称G,8.45mg)。取对照品系列溶液①各1mL分别置10mL容量瓶中，加体积分数为50％的甲醇-水溶液至刻度，得对照品系列溶液②。取各对照品溶液②等体积混合，加体积分数为50％的甲醇-水溶液稀释，得到对照品混标溶液；最终得各化合物的线性范围为：0.028－20.17μg/mL(A),0.012－8.59μg/mL(B),0.060－43.89μg/mL(C),0.008－5.78μg/mL(D),0.033－23.89μg/mL(E),0.013－9.63μg/mL(F),0.013－9.39μg/mL(G)。
取墨旱莲粗粉样品约1.00g，精密称定，置50mL量瓶中，精密加入25mL体积分数为50％的甲醇-水溶液，称定重量，室温下超声30分钟，放置30分钟，加甲醇补足重量.过滤，取续滤液1mL置10mL容量瓶中，加体积分数为50％的甲醇-水溶液定溶，取1mL定溶液只离心管中，以13171g离心10分钟，取上清即得供试品溶液。
(b)墨旱莲的HPLC-QQQ(高效液相色谱-三重四级杆质谱)分析HPLC流动相：乙腈(A)-水(含0.1％甲酸；B)；采用梯度洗脱方式：0–5分钟,30–100％A；5–10分钟,100％A；10–11分钟,100–30％A；11–20分钟,30％A；流速0.5mL/分钟；柱温35℃；进样体积1μL。
QQQ：电喷雾离子源(ESI)；采用负离子模式；液氮为雾化气和干燥气，高纯氮为碰撞气；干燥气流速8.0L/分钟，温度350℃；雾化气压力45psig；毛细管电压4000V；采用MRM(多反应监测)模式同时监测7个化合物(见表2)；
表2 MRM定量参数
Figure BDA0002945932450000171
(c)线性关系考察
吸取对照品混标溶液适量，加50％甲醇稀释，共制备7份不同浓度混标溶液，按上述(b)中的HPLC-QQQ条件测定，每个样品测定3次，以峰面积为纵坐标Y，样品浓度(μg/mL)为横坐标X，进行线性回归，绘制标准曲线，结果线性关系良好，R2均在0.9990以上，详见表3。
表3定量标准曲线,定量限及检测限
Figure BDA0002945932450000181
(d)检测限与定量限
以50％甲醇(体积百分数)稀释对照品混标溶液，按上述(b)中HPLC-QQQ条件测定，分别以信噪比(S/N)为3和10计算最低检测限(LOD)和最低定量限(LOQ)，结果见表3。
(e)精密度与重复性
日内精密度(Intra-day Precision)：取标准曲线中间点的同一对照品混标溶液，按上述HPLC-QQQ条件连续进样6次，记录LC-MS谱图，积分、计算峰面积，计算相对标准偏差(RSD)，考察仪器的精密度，结果各化合物的RSD均小于2.37％，表明日内精密度良好，结果如表4所示。
日间精密度(Inter-day Precision)：取标准曲线中间点的同一对照品混标溶液，连续3天，每隔12小时，按上述HPLC-QQQ条件测定一次，记录LC-MS谱图，积分、计算峰面积，计算RSD，结果各化合物的RSD均小于2.49％，表明日间精密度良好，结果如表4所示。
重复性试验：平行取6份同一样品(S9)，按3.1项下方法制备供试品溶液，照上述HPLC-QQQ条件，测定峰面积，计算RSD，结果各化合物的RSD均小于2.99％，表明供试品制备方法重复性良好。结果如表4所示。
表4.精密度，重复性及加样回收率
Figure BDA0002945932450000191
(f)样品测定及结果
采用上述(b)中HPLC-QQQ对13批(S1-S13)不同产地的墨旱莲进行含量测定，每份样品测定3次。结果见表5。
各批墨旱莲的产地如下：
S1：湖南；S2：河北；S3：河南；S4：河南；S5：河北；S6：未知；S7：江苏；S8：未知；S9：河北；S10：未知；S11：未知；S12：河北；S13：安徽。
表5.含量测定结果(平均数±标准差,μg/g,n＝3)
Figure BDA0002945932450000201
ND:表示未检测出；
实施例4化合物1-17雌激素活性筛选实验
试剂：DMEM/F-12,HEPES,no phenol red为
Figure BDA0002945932450000203
公司生产，；货号为11039-021规格为500ml/瓶；
活性碳吸附胎牛血清FBS为BioInd公司生产，货号为04-201-1A，规格为500ml/瓶；
penicillin streptomycin solution为hyclone公司生产，货号为SV30010规格为100ml/瓶；
FBS为Hyclone公司生产货号：SH30084.03E规格500ml；
ERαAntibody(F-10)为Santa Cruz公司生产货号：sc-8002规格200μg/ml；
Donkey Anti-Mouse IgG H&L(Alexa
Figure BDA0002945932450000202
488)为abcam公司生产货号：ab150105 500ug；
Hochest33342为SIGMA公司生产货号：14533；
他莫昔芬为Sigma-Aldrich公司生产货号：T5648-1G
PBS由KH2PO4，Na2HPO4，NaCl，KCl粉末用超纯水配制，粉末均为Sigma公司生产；
DMSO为索来宝公司生产,细胞培养级别，货号：D8371规格50ml/瓶；
4％多聚甲醛为索莱宝公司生产，货号：P1110规格500ml/瓶；
TritonX-100为索莱宝公司生产货号T8200规格100ml/瓶；
Tween-20为索莱宝公司生产货号：T8220规格100ml；
仪器:High Screening Assay(Operetta)在Perkin Elmer公司购买；
CO2培养箱IL-161HI为STIK公司生产；
可调速可定时漩涡混合器(SI-T256)
电热式恒温水浴锅为天津欧诺仪器公司生产；
移液枪为Eppendorf公司生产；
尼康ECLIPSE Ti-U倒置生物显微镜
1.6R台式多用离心机为Thermo公司生产；
制水机为美国密理博Milli-Q Century超纯水系统，型号为Milli-QAcademic,Milli-Q Grandient,Milli-Q Biocel,Milli-Q Synthesis
4℃海尔冰箱
-20℃海尔冰箱
化合物1-17样品配制：用称取的样品质量m除以该样品的相对分子质量M，得到该样品的物质的量n,然后加入10*n体积的DMSO,得到10-1mol/L的初始浓度。取10ul体积的10-1mol/L的药物，用DMSO稀释至100ul，得到浓度为10-2mol/L浓度的药物，以此类推，稀释至10-4mol/L，分装为10ul每管，-20℃保存。
采用间接免疫荧光的方法筛选能够选择性激活雌激素受体入核的化合物。实际上，雌激素受体由细胞浆进入细胞核是其发挥基因组途径调控基因转录的起始步骤。
1、细胞及其培养
MCF-7细胞(
Figure BDA0002945932450000221
Number:HTB-22TM)购自ATCC并由本室传代培养；MCF-7细胞在37℃，5％CO2的细胞培养箱中，用10％FBS/DMEM(4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰和110mg/L丙酮酸钠，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素)培养。
2、核迁移实验步骤
在37℃，5％CO2的条件下，在细胞培养箱中使用含有10％活性炭吸附的胎牛血清和1％双抗的无酚红DMEM/F12培养液培养MCF-7细胞。72h后，细胞密度为80％左右，将细胞按7000/孔的密度铺于96孔黑板中，中间60孔为实验孔，每孔中加入含1％活性炭吸附的血清及1％双抗的无酚红DMEM/F12培养液100ul，周围孔用100mlPBS填充，培养过夜，待细胞完全贴壁。用无酚红DMEM/F12培基稀释药品(药品是用DMSO稀释至10-4M,分装保存于-20℃冰箱)至10-7M。96孔板中实验孔每孔100ul浓度10-7M的药物溶液，阳性药为他莫昔芬，空白对照加入含有1‰DMSO的无酚红DMEM/F12培养基，每种药物设三个复孔。给药完成后，在37℃，5％CO2的条件下孵育半小时，用4％的多聚甲醛固定细胞半小时(室温)。用PBS洗细胞三遍，每孔200ul,每遍一分钟。加入0.2％的TritonX-100打孔半小时(室温)，用PBS洗细胞三遍，每孔200ul,每遍一分钟。加入5％的胎牛血清(Hyclone小牛血清，用PBS稀释)封闭2小时(室温)，加入一抗(0.01％Tween-20+0.5％Hyclone胎牛血清+1％一抗+PBS，一抗为ERα),4℃孵育过夜，PBST(PBS+0.05％Tween-20)洗细胞三遍，每孔200ul,每遍5分钟，然后再用PBS洗三遍，每孔200ul,每遍一分钟。避光加入二抗(0.01％Tween-20+0.5％Hyclone胎牛血清+万分之一的Hochest+二百分之一的二抗+PBS，二抗为Alex488,),室温孵育两小时。PBST(PBS+0.05％Tween-20)洗细胞三遍，每孔200ul,每遍5分钟，然后再用PBS洗三遍，每孔200ul,每遍一分钟，最后孔内加入100ulPBS上高内涵。高内涵拍照完成后，用高内涵自动处理数据，即核内的荧光值比细胞质内的荧光值，取三个空的平均值。用Graphpad作图，SPSS处理数据，药物组与空白组对比是否有统计学意义。实验结果如表6所示：
表6化合物1-17对雌激素受体α的激活作用结果
Figure BDA0002945932450000231
*p<0.05，**p<0.01,***p<0.001，ns代表无效
从上述的活性实验可以看出，从墨旱莲中分离出的化合物1-17，除化合物7、化合物8、化合物15、化合物16外，其它化合物均能够与雌激素受体ERα结合，提高其转录活性，证实了这些化合物具有雌激素样作用。因此，可用于防治更年期综合征、绝经后骨质疏松症、乳腺癌、子宫癌、前列腺癌和结肠癌，且其药理作用在心血管系统、生殖系统和免疫调节等领域得到扩展。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims (8)

1.3'-羟基鹰嘴豆素A在制备用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述与雌激素分泌异常相关的疾病包括更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症、心血管疾病、乳腺增生、乳腺癌及子宫肌瘤中的至少一种。
3.一种用于治疗和/或预防与雌激素分泌异常相关的疾病的药物组合物，其包含3'-羟基鹰嘴豆素A。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述3'-羟基鹰嘴豆素A以单体形式或以墨旱莲提取物的形式提供。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中，所述药学上可接受的载体或赋形剂选自溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、防腐剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、香味剂、甜味剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂和抗氧化剂中的至少一种。
7.根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述药物组合物的剂型选自片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、丸剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂、散剂、细粒剂、小丸剂、酏剂或注射剂中的一种。
8.如权利要求3所述的药物组合物，其中所述与雌激素分泌异常相关的疾病包括更年期综合征、前列腺癌、骨质疏松症、心血管疾病、乳腺增生、乳腺癌及子宫肌瘤中的至少一种。
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