CN109813588B - 一种无需固定的寄生虫染色液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种无需固定的寄生虫染色液,包括下列重量份的成分组成伊红5~8%;天青2~5%;美蓝3~6%;甲醇10~50%;中性甘油0.01~0.02%;氯化钠5~6%;吐温‑201~2%;生育酚0.5~1%;纳米珍珠粉0.2~0.8%;乙酸乙酯0.6~0.9%;余量为水,本发明适用于寄生虫、各种微生物、血细胞涂片、骨髓涂片、脱落细胞涂片、染色体显带、细胞凋亡检测等的染色,只使用一种染液,不需固定,固定和染色合二为一,能在一张片子上同时作寄生虫、病菌、核异质细胞、细胞分类计数等多项检查,方法简便快速,染色力强、着色清晰、形态完整、易于辨别、检出率高。
Description
技术领域
本发明涉及卫生制剂制作技术领域,尤其涉及一种无需固定的寄生虫染色液。
背景技术
组织病理学的诞生已有150多年的历史,伊红溶液是常用的病理学试剂之一,其主要用来对组织切片染色,目前的伊红染色液中大都含有甲醛、二甲苯、氧化汞、氨水等,有毒害化学试剂,不仅对工作人员的身体造成了伤害,而且也对环境造成了污染。
对寄生虫染色单一,着色不清晰,形态不完整,并且是对单一的一类寄生虫易于辨认,其他种类的寄生虫不易于辨认,降低了检出率。
发明内容
本发明的提供一种无需固定的寄生虫染色液。
本发明的方案是:
一种无需固定的寄生虫染色液,包括下列重量份的成分组成:
伊红 5~8%;
天青 2~5%;
美蓝 3~6%;
甲醇 10~50%;
中性甘油 0.01~0.02%;
氯化钠 5~6%;
吐温-20 1~2%
生育酚 0.5~1%;
纳米珍珠粉 0.2~0.8%;
乙酸乙酯 0.6~0.9%;
余量为水。
作为优选的技术方案,所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
作为优选的技术方案,包括下列重量份的成分组成:
伊红 5%;
天青 3%;
美蓝 4%;
甲醇 20%;
中性甘油 0.01%;
氯化钠 5.6%;
吐温-20 1%;
生育酚 0.6%;
纳米珍珠粉 0.5%;
乙酸乙酯 0.8%;
余量为水。
本发明还提供了一种制备无需固定的寄生虫染色液的方法,
1)将5~6%重量份的氯化钠加入到温度30~39℃的水中,搅拌均匀后,升温到51~55℃,往升温的水中加入5~8%重量份的伊红、2~5%重量份的天青、3~6%重量份的美蓝、0.5~1%重量份的生育酚、0.2~0.8%重量份的纳米珍珠粉、 0.6~0.9%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在32~35℃的水浴温度下超声5-8min,得到第一溶液;
2)将0.01~0.02%重量份的中性甘油加入到10~50%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声2-3min,然后加入1~2%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声1-2min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1-3min,得到寄生虫染色液。
作为优选的技术方案,所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
作为优选的技术方案,所述步骤1)氯化钠加入到温度35℃的水中,搅拌均匀后,升温到54℃。
作为优选的技术方案,所述步骤1)中在33℃的水浴温度下超声7min。
作为优选的技术方案,所述步骤2)中35℃水浴温度下超声3min,在40℃的水浴温度下超声2min。
作为优选的技术方案,所述步骤3)器皿在水浴温度33℃下水浴超声2min。
本发明还提供了一种无需固定的寄生虫染色液的检测方法,如权利要求1所述一种无需固定的寄生虫染色液对涂片进行滴液检查。
由于采用了上述技术方案,一种无需固定的寄生虫染色液,1)将5~6%重量份的氯化钠加入到温度30~39℃的水中,搅拌均匀后,升温到51~55℃,往升温的水中加入5~8%重量份的伊红、2~5%重量份的天青、3~6%重量份的美蓝、0.5~1%重量份的生育酚、0.2~0.8%重量份的纳米珍珠粉、 0.6~0.9%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在32~35℃的水浴温度下超声5-8min,得到第一溶液;2)将0.01~0.02%重量份的中性甘油加入到10~50%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声2-3min,然后加入1~2%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声1-2min,得到第二溶液;3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1-3min,得到寄生虫染色液。
本发明的优点:
本发明的染色液适用于寄生虫、各种微生物、血细胞涂片、骨髓涂片、脱落细胞涂片、染色体显带、细胞凋亡检测等的染色,只使用一种染液,不需固定,固定和染色合二为一,能在一张片子上同时作寄生虫、病菌、核异质细胞、细胞分类计数等多项检查,方法简便快速,染色力强、着色清晰、形态完整、易于辨别、检出率高。
具体实施方式
为了弥补以上不足,本发明提供了一种无需固定的寄生虫染色液以解决上述背景技术中的问题。
一种无需固定的寄生虫染色液,包括下列重量份的成分组成:
伊红 5~8%;
天青 2~5%;
美蓝 3~6%;
甲醇 10~50%;
中性甘油 0.01~0.02%;
氯化钠 5~6%;
吐温-20 1~2%;
生育酚 0.5~1%;
纳米珍珠粉 0.2~0.8%;
乙酸乙酯 0.6~0.9%;
余量为水。
所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
包括下列重量份的成分组成:
伊红 5%;
天青 3%;
美蓝 4%;
甲醇 20%;
中性甘油 0.01%;
氯化钠 5.6%;
吐温-20 1%
生育酚 0.6%;
纳米珍珠粉 0.5%;
乙酸乙酯 0.8%;
余量为水。
本发明还提供了一种制备无需固定的寄生虫染色液的方法,
1)将5~6%重量份的氯化钠加入到温度30~39℃的水中,搅拌均匀后,升温到51~55℃,往升温的水中加入5~8%重量份的伊红、2~5%重量份的天青、3~6%重量份的美蓝、0.5~1%重量份的生育酚、0.2~0.8%重量份的纳米珍珠粉、 0.6~0.9%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在32~35℃的水浴温度下超声5-8min,得到第一溶液;
2)将0.01~0.02%重量份的中性甘油加入到10~50%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声2-3min,然后加入1~2%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声1-2min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1-3min,得到寄生虫染色液。
所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
所述步骤1)氯化钠加入到温度35℃的水中,搅拌均匀后,升温到54℃所述步骤1)中在33℃的水浴温度下超声7min。
所述步骤2)中35℃水浴温度下超声3min,在40℃的水浴温度下超声2min。
所述步骤3)器皿在水浴温度33℃下水浴超声2min。
本发明还提供了一种无需固定的寄生虫染色液的检测方法,其特征在于:如权利要求1所述一种无需固定的寄生虫染色液对涂片进行滴液检查。
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。
实施例1:
1)将5%重量份的氯化钠加入到温度30℃的水中,搅拌均匀后,升温到51℃,往升温的水中加入5%重量份的伊红、2%重量份的天青、3%重量份的美蓝、0.5%重量份的生育酚、0.2%重量份的纳米珍珠粉、 0.6%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在32℃的水浴温度下超声5min,得到第一溶液;
2)将0.01%重量份的中性甘油加入到10%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声2min,然后加入1%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声1min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1min,得到寄生虫染色液。
水为蒸馏水。
实施例2:
1)将6%重量份的氯化钠加入到温度39℃的水中,搅拌均匀后,升温到55℃,往升温的水中加入8%重量份的伊红、5%重量份的天青、6%重量份的美蓝、1%重量份的生育酚、0.8%重量份的纳米珍珠粉、0.9%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在35℃的水浴温度下超声8min,得到第一溶液;
2)将0.02%重量份的中性甘油加入到50%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声3min,然后加入2%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声2min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声3min,得到寄生虫染色液。
水为去离子水。
实施例3:
1)将5.6%重量份的氯化钠加入到温度35℃的水中,搅拌均匀后,升温到54℃,往升温的水中加入5%重量份的伊红、3%重量份的天青、4%重量份的美蓝、0.6%重量份的生育酚、0.5%重量份的纳米珍珠粉、 0.8%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在33℃的水浴温度下超声7min,得到第一溶液;
2)将0.01%重量份的中性甘油加入到200%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声3min,然后加入1%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声2min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1-3min,得到寄生虫染色液。
实施例4:
选用实施例3中的寄生虫染色液。
涂片无需固定,稍干燥后,直接滴加寄生虫染色液1-3滴,用滴管摊平使染液覆盖整张涂片,前后晃动2~3次(约2秒钟),用自来水或蒸馏水冲洗,趁湿镜检,也可待干后封片镜检。
检验结果核呈紫色,紫蓝色、深蓝色、黑蓝色;桨呈蓝色、红蓝色、灰红色、直至红色,在光镜下呈现出清晰的图像。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界。
Claims (10)
1.一种无需固定的寄生虫染色液,其特征在于,包括下列重量份的成分组成:
伊红 5~8%;
天青 2~5%;
美蓝 3~6%;
甲醇 10~50%;
中性甘油 0.01~0.02%;
氯化钠 5~6%;
吐温-20 1~2%;
生育酚 0.5~1%;
纳米珍珠粉 0.2~0.8%;
乙酸乙酯 0.6~0.9%;
余量为水。
2.如权利要求1所述的一种无需固定的寄生虫染色液,其特征在于:所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
3.如权利要求1所述的一种无需固定的寄生虫染色液,其特征在于:包括下列重量份的成分组成:
伊红 5%;
天青 3%;
美蓝 4%;
甲醇 20%;
中性甘油 0.01%;
氯化钠 5.6%;
吐温-20 1%
生育酚 0.6%;
纳米珍珠粉 0.5%;
乙酸乙酯 0.8%;
余量为水。
4.一种制备如权利要求1至3任一项所述的无需固定的寄生虫染色液的方法,其特征在于:
1)将5~6%重量份的氯化钠加入到温度30~39℃的水中,搅拌均匀后,升温到51~55℃,往升温的水中加入5~8%重量份的伊红、2~5%重量份的天青、3~6%重量份的美蓝、0.5~1%重量份的生育酚、0.2~0.8%重量份的纳米珍珠粉、0.6~0.9%重量份的乙酸乙酯,搅拌均匀,然后在32~35℃的水浴温度下超声5-8min,得到第一溶液;
2)将0.01~0.02%重量份的中性甘油加入到10~50%重量份的甲醇中,35℃水浴温度下超声2-3min,然后加入1~2%重量份的吐温-20,在40℃的水浴温度下超声1-2min,得到第二溶液;
3)将步骤1)的第一溶液与步骤2)中的第二溶液混合到器皿中,器皿在水浴温度33℃下水浴超声1-3min,得到寄生虫染色液。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述水为去离子水或蒸馏水其中的一种。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述步骤1)氯化钠加入到温度35℃的水中,搅拌均匀后,升温到54℃。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述步骤1)中在33℃的水浴温度下超声7min。
8.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述步骤2)中35℃水浴温度下超声3min,在40℃的水浴温度下超声2min。
9.如权利要求4所述的方法,其特征在于:所述步骤3)器皿在水浴温度33℃下水浴超声2min。
10.一种无需固定的寄生虫染色液的检测方法,其特征在于:如权利要求1所述一种无需固定的寄生虫染色液对涂片进行滴液检查。
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