CN114441271B - 一种新型染色液的配置及染色方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医疗试剂技术领域，具体涉及一种新型染色液的配置及染色方法，包括配置第一染色液和第二染色液，获取样本；将样本烤干固定，得到固化样本；将第一染色液滴加在固化样本上进行染色，得到第一染色样本；对第一染色样本进行冲洗，得到第一冲洗样本；将第二染色液滴加在第一冲洗样本上进行染色，得到第二染色样本；对第二染色样本进行冲洗，染色完成，使用配置的第一染色液和第二染色液对样本染色的时间更短，解决了现有的分泌物染色方法对样本染色的时间较长的问题。
Description
技术领域
本发明涉及医疗试剂技术领域，尤其涉及一种新型染色液的配置及染色方法。
背景技术
阴道分泌物检验是现代医学妇科、产科等临床检验的常规项目之一，在对阴道分泌物检验过程中需要使用染色液对分泌物进行染色。
目前国内较为广泛应用于阴道分泌物染色液主要是瑞士-吉姆萨染色液和革兰氏染色液，这两种染色液的染色方法都采用干法染色，瑞士-吉姆萨染色液包括A染色和B染色剂，先经过A染色剂对分泌物样本染色，再覆盖B染色液染色，将A、B染色液混匀，染色时间超过4分钟。革兰氏染色需要初染、媒染、脱色、复染共四步染色的过程，染色时间超过5分钟。具有操作染色时间长的缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新型染色液的配置及染色方法，旨在解决现有的分泌物染色方法对样本染色的时间较长的问题。
为实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种新型染色液的染色方法，包括以下步骤：
配置第一染色液和第二染色液，获取样本；
将所述样本烤干固定，得到固化样本；
将所述第一染色液滴加在所述固化样本上进行染色，得到第一染色样本；
对所述第一染色样本进行冲洗，得到第一冲洗样本；
将所述第二染色液滴加在所述第一冲洗样本上进行染色，得到第二染色样本；
对所述第二染色样本进行冲洗，染色完成。
其中，所述将所述样本烤干固定，得到固化样本的具体方式为：
将所述样本涂抹在载玻片上；
对所述载玻片上的所述样本进行烘烤，得到固化样本。
其中，所述烘烤温度为40-75℃。
第一方面，本发明提供了一种新型染色液的配置方法，所述第一染色液的配置方法包括：
按重量份配比取亚甲基蓝1-5份、天青Ⅱ1-2份、曙红5-8份、甲醇45-60份、甘油2-5份和纯化水3-5份；
将所述纯化水3-5份和所述甘油2-5份加入所述甲醇45-60份，进行搅拌混合，得到第一混合溶液；
将所述取亚甲基蓝1-5份和所述天青Ⅱ1-2份加入所述第一混合溶液，进行搅拌混合，得到第二混合溶液；
将所述曙红5-8份加入所述第二混合溶液，进行超声混合，得到第三混合溶液；
将所述第三混合溶液静置，得到第一染色液。
其中，所述第二染色液的配置方法包括：
按重量份配比碱性品红1-5份、中性红1-2份、甲醇45-60份和纯化水4份；
将所述碱性品红1-5份、所述中性红1-2份、所述甲醇45-60份和所述纯化水4份进行超声混合，得到第四混合溶液；
将所述第四混合溶液密封后静置，得到第二染色液。
本发明的一种新型染色液的染色方法，通过配置第一染色液和第二染色液，获取样本；将所述样本烤干固定，得到固化样本；将所述第一染色液滴加在所述固化样本上进行染色，得到第一染色样本；对所述第一染色样本进行冲洗，得到第一冲洗样本；将所述第二染色液滴加在所述第一冲洗样本上进行染色，得到第二染色样本；对所述第二染色样本进行冲洗，染色完成，使用配置的所述第一染色液和所述第二染色液对所述样本染色的时间更短，解决了现有的分泌物染色方法对样本染色的时间较长的问题。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明提供的一种新型染色液的染色方法的流程图。
图2是将所述样本烤干固定，得到固化样本的流程图。
图3是现有的分泌物染色方法的染色效果图。
图4是发明提供的一种新型染色液的染色方法对真菌感染样本的染色效果图。
图5是第一染色液的配置方法的流程图。
图6是第二染色液的配置方法的流程图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
请参阅图1至图4，第一方面，本发明提供一种新型染色液的染色方法，包括以下步骤：
S1、配置第一染色液和第二染色液，获取样本；
具体的，所述第一染色液按重量份配比包括碱性品红1-5份、中性红1-2份、甲醇45-60份和纯化水4份，所述第二染色液按重量份配比包括碱性品红1-5份、中性红1-2份、甲醇45-60份和纯化水4份。
S2、将所述样本烤干固定，得到固化样本；
具体方式为：S21、将所述样本涂抹在载玻片上；
将阴道分泌物作为样本，均匀涂抹在所述载玻片上。
S22、对所述载玻片上的所述样本进行烘烤，得到固化样本。
将涂抹有样本的所述载玻片放入烘箱，将所述烘箱的所述烘烤温度设置为为40-75℃，启动所述烘箱，所述烘箱对所述载玻片上的所述样本进行烘烤固化，直至将所述样本烤干，全过程无需对所述载玻片进行移动或翻转等步骤。
S3、将所述第一染色液滴加在所述固化样本上进行染色，得到第一染色样本；
所述第一染色液对所述载玻片上的所述固化样本的染色时间为8秒，在所述第一染色液滴加在所述固化样本之前，将所述载玻片倾斜30，可避免所述第一染色样本对所述载玻片背面污染，减少对所述载玻片背面的冲洗，从而节约对所述样本的染色时间。
S4、对所述第一染色样本进行冲洗，得到第一冲洗样本；
采用纯化水对所述第一染色样本进行冲洗，冲洗时间为4秒。
S5、将所述第二染色液滴加在所述第一冲洗样本上进行染色，得到第二染色样本；
所述第二染色液对所述第一冲洗样本的染色时间为8秒。
S6、对所述第二染色样本进行冲洗，染色完成。
采用纯化水对所述第二染色样本进行冲洗，冲洗时间为4秒。
请参阅图5至图6，第二方面，本发明提供一种新型染色液的配置方法，所述第一染色液的配置方法包括：
S101、按重量份配比取亚甲基蓝1-5份、天青Ⅱ1-2份、曙红5-8份、甲醇45-60份、甘油2-5份和纯化水3-5份；
具体的，通过电子天平进行称取。
S102、将所述纯化水3-5份和所述甘油2-5份加入所述甲醇45-60份，进行搅拌混合，得到第一混合溶液；
具体的，搅拌采用磁力搅拌器搅拌5min，在温度为15℃-30℃，湿度＜70％的温度环境下进行搅拌。
S103、将所述取亚甲基蓝1-5份和所述天青Ⅱ1-2份加入所述第一混合溶液，进行搅拌混合，得到第二混合溶液；
具体的，搅拌采用磁力搅拌器搅拌5min，在温度为15℃-30℃，湿度＜70％的温度环境下进行搅拌。
S104、将所述曙红5-8份加入所述第二混合溶液，进行超声混合，得到第三混合溶液；
具体的，采用超声波进行超声1h，直至所有原料混合均匀。
S105、将所述第三混合溶液静置，得到第一染色液。
所述第三混合溶液的静置时间为48小时。
进一步的，所述第二染色液的配置方法包括：
S201、按重量份配比碱性品红1-5份、中性红1-2份、甲醇45-60份和纯化水4份；
具体的，通过电子天平进行称取。
S202、将所述碱性品红1-5份、所述中性红1-2份、所述甲醇45-60份和所述纯化水4份进行超声混合，得到第四混合溶液；
具体的，采用超声波进行超声30min，直至所有原料混合均匀。
S203、将所述第四混合溶液密封后静置，得到第二染色液。
所述第四混合溶液的静置时间为48小时。
实施例1：
1.所述第一染色液的配置方法：取一个250ml的烧杯依次加入甲醇60ml、纯化水35ml，再加入甘油5ml，用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液a；电子天平称取亚甲基蓝2.5g和天青Ⅱ1.3g加入到溶液a中，继续使用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液b，电子天平称取曙红5g加入到溶液b中，采用超声波进行超声1h，混合均匀后，静置48h，得到A染色液。
2.所述第二染色液的配置方法：电子天平称取碱性品红3.5g、中性红1.5g，放入一个250ml的烧杯中，再依次加入甲醇60m，纯化水40ml，采用超声波进行超声30min，混合均匀后，密封，静置48h，得到B染色液。
以上各步骤都在温度15℃～30℃，湿度＜70％下进行。其中天青分为天青I和天青Ⅱ，天青I的英文名称为AzureⅠ,CAS号为531-55-5，分子量为305.83。天青Ⅱ的英文名称为AzureⅡ,CAS号为37247-10-2，分子量为625.68，两者是完全不同的物质，天青Ⅱ的特殊的结构，比天青I更容易上色，这是选择天青Ⅱ的主要原因。
实施例2：
1.所述第一染色液的配置方法：取一个250ml的烧杯依次加入甲醇60ml、纯化水35ml，再加入甘油5ml，用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液a；电子天平称取亚甲基蓝2g和天青Ⅱ1.5g加入到溶液a中，继续使用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液b，电子天平称取曙红6.8g加入到溶液b中，采用超声波进行超声1h，混合均匀后，静置48h，得到A染色液。
2.所述第二染色液的配置方法：电子天平称取碱性品红2.5g、中性红2.5g，放入一个250ml的烧杯中，再依次加入甲醇60m，纯化水40ml，采用超声波进行超声30min，混合均匀后，密封，静置48h，得到B染色液。
以上各步骤都在温度15℃～30℃，湿度＜70％下进行。
实施例3：
1.所述第一染色液的配置方法：取一个250ml的烧杯依次加入甲醇50ml、纯化水45ml，再加入甘油5ml，用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液a；电子天平称取亚甲基蓝2.8g和天青Ⅱ4g加入到溶液a中，继续使用磁力搅拌器搅拌5min，得到溶液b，电子天平称取曙红4g加入到溶液b中，采用超声波进行超声1h，混合均匀后，静置48h，得到A染色液。
2.所述第二染色液的配置方法：电子天平称取碱性品红4.5g、中性红1.5g，放入一个250ml的烧杯中，再依次加入甲醇60m，纯化水40ml，采用超声波进行超声30min，混合均匀后，密封，静置48h，得到B染色液。
以上各步骤都在温度15℃～30℃，湿度＜70％下进行。
本发明提供的一种新型染色液的染色方法的有益效果：
1、通过配置的所述第一染色液和所述第二染色液对样本进行染色的时间比传统的染色方式大大的缩短，传统染色方式经过两步染色，需耗时4分钟，改良后染色时间仅需24S；
2、染色效果比传统的染色方式更佳(如图4所示的真菌感染样本，图中有典型的真菌孢子、芽生孢子和菌丝。可判读为真菌感染样本，需要采用抗真菌药物进行治疗)。传统的染色方式，细胞着色后的颜色太深，不易于辨认，底色过重，容易对有形成分造成误判；改良后的染色方式，细胞着色深浅合适，利于观察判断，底色较浅，基本为无色，不会对有形成分造成误判，细小颗粒如真菌和细菌等染色效果也不受影响，清晰可见。
以上所揭露的仅为本发明一种新型染色液的配置及染色方法较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。
Claims (3)
1.一种新型染色液的染色方法，其特征在于，包括以下步骤：
配置第一染色液和第二染色液，获取样本；
将所述样本烤干固定，得到固化样本；
将所述第一染色液滴加在所述固化样本上进行染色，得到第一染色样本；
对所述第一染色样本进行冲洗，得到第一冲洗样本；
将所述第二染色液滴加在所述第一冲洗样本上进行染色，得到第二染色样本；
对所述第二染色样本进行冲洗，染色完成；
所述第一染色液的配置方法包括：
按重量份配比取亚甲基蓝1-5份、天青Ⅱ1-2份、曙红5-8份、甲醇45-60份、甘油2-5份和纯化水3-5份；
将所述纯化水3-5份和所述甘油2-5份加入所述甲醇45-60份，进行搅拌混合，得到第一混合溶液；
将所述取亚甲基蓝1-5份和所述天青Ⅱ1-2份加入所述第一混合溶液，进行搅拌混合，得到第二混合溶液；
将所述曙红5-8份加入所述第二混合溶液，进行超声混合，得到第三混合溶液；
将所述第三混合溶液静置，得到第一染色液；
所述第二染色液的配置方法包括：
按重量份配比碱性品红1-5份、中性红1-2份、甲醇45-60份和纯化水4份；
将所述碱性品红1-5份、所述中性红1-2份、所述甲醇45-60份和所述纯化水4份进行超声混合，得到第四混合溶液；
将所述第四混合溶液密封后静置，得到第二染色液。
2.如权利要求1所述的新型染色液的染色方法，其特征在于，
所述将所述样本烤干固定，得到固化样本的具体方式为：
将所述样本涂抹在载玻片上；
对所述载玻片上的所述样本进行烘烤，得到固化样本。
3.如权利要求2所述的新型染色液的配置及染色方法，其特征在于，
所述烘烤温度为40-75℃。
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