CN107468728A - 厚叶岩白菜提取物及提取方法和在口腔疾病中的医用用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种厚叶岩白菜提取物及提取方法和在口腔疾病中的医用用途。通过刃天青染色法和XTT法对厚叶岩白菜的提取物进行了抑菌活性和抑制生物膜活性研究,发现厚叶岩白菜的提取物对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌及该菌生物膜具有明显的抑制作用,且对变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌及该菌生物膜形成的抑制作用更强,可用于制备预防和治疗口腔疾病的日用品及药物。
Description
技术领域
本发明提供一种厚叶岩白菜提取物及提取方法,本发明进一步公开了该提取物在口腔疾病中的医用用途,属于中药制药技术领域。
背景技术
口腔疾病的发生主要是由于口腔内环境微生物失去均衡而导致的一种细菌感染性疾病,其具有流行性、高发性、多发性和反复性等特点,导致生活质量降低的同时带来巨大的经济负担。常见的口腔疾病主要包括龋病、牙周炎等,主要的致病菌包括变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌等。调查显示,我国儿童乳牙患龋率高达67.0%,中年人群恒牙患龋率达59.9%,老年人群中全口无牙者达6.9%,人群牙龈炎、牙石检出率也较高,口腔健康状况普遍较差。临床案例和实验研究结果证实,口腔疾病与心脑血管疾病、胃肠疾病、糖尿病等全身性疾病都有一定的相关性。因此,口腔疾病的预防和治疗在公共卫生健康中显得尤为重要。
龋病是口腔疾病的主要疾病之一。龋病致病菌可定植牙齿表面形成生物膜,即牙菌斑,利用食物中的蔗糖,代谢产酸,从而导致牙齿脱矿形成龋齿。因此,有效的抑制细菌生长并干扰生物膜形成或堆积是防治和治疗龋病的有效方法。
牙周炎是一种细菌感染性疾病。牙周炎致病菌可定植牙齿表面或牙龈组织,进而形成牙菌斑,细菌或其分泌的致病因子通过牙本质暴露的牙本质小管、牙髓等方式进入髓腔引发炎症反应,导致牙周组织的破坏,进而使牙齿脱落。有研究显示,牙周炎与糖尿病、心脑血管疾病等全身性疾病具有一定的相关性。因此一种能够抑制或杀死牙周炎致病菌并能抑制其生物膜形成是预防和治疗牙周炎的有效方式。
牙菌斑生物膜的形成和堆积也是其它口腔疾病发生和发展的直接原因。牙菌斑生物膜是口腔细菌所形成的微生物群体,牙菌斑生物膜的形成是一种适应过程,是细菌能够抵抗表面活性剂、抗生素或宿主防御功能的杀灭作用,是各种细菌长期共存,在合适的微环境中发挥不同的致病作用。因此干扰牙菌斑生物膜的形成或降低牙菌斑生物膜的生物量,是预防和治疗口腔疾病的有效途径。
近年来抗生素和化学合成药被广泛应用于人类疾病,效果显著,但长期大量使用会使细菌产生耐药性,且其本身也具有各种的毒副作用,对人类健康和环境造成了一定程度的威胁,口腔疾病的预防和治疗也面临着同样的困境。如,氯已定作为一种广谱的抗菌剂,是漱口水等口腔护理剂的主成分和口腔疾病预防和治疗的典型药,但研究显示,氯已定能够引起口腔微环境的失衡,并且能够增加细菌的耐药性。含氟牙膏虽然对口腔疾病具有一定的预防作用,但是由于大多数人无法掌握正确的刷牙技巧,从而起到的效果甚微,并且会对环境产生一定程度的影响。因此一种对口腔疾病可有效预防和治疗的药物或日用品是急需的。我国中草药资源丰富,因其具有药用、保健等功效,并且有低毒、低残留、耐药性发病率低等多种优势,而越来越受到国内外研究者的重视。
本发明涉及的厚叶岩白菜[Bergeniacrassifolia(L.)Fritsch]为虎耳草科岩白菜属多年生常绿草本,高15~31厘米。根状茎粗壮,具鳞片和枯残托叶鞘。叶均基生;叶片革质,倒卵形、狭倒卵形、阔倒卵形或椭圆形,是同属植物中形体较大种类。厚叶岩白菜是岩白菜属植物中药用价值最高的种类,主要用于治疗慢性支气管炎、肺炎、肺心病、支气管哮喘等呼吸系统疾病,其中利用其提取物制成的复方岩白菜素片,已广泛用于临床,用于化痰止咳。但是对于厚叶岩白菜在预防和治疗口腔疾病等方面的用途却未见报道。
发明内容
本发明提供了厚叶岩白菜提取物及其在制备预防和治疗口腔疾病的日用品或药物中的用途。
本发明所述的一种厚叶岩白菜水提物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜粉按w/v=1:10的比例加水浸泡1-5小时,100℃回流提取1-5小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到水提液;50℃恒温水浴挥干,即得。
本发明所述的一种厚叶岩白菜甲醇提取物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜按w/v=1:10的比例加入甲醇,冷浸12-48小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到甲醇提取液;50℃恒温水浴挥干,即得。
本发明所述的一种厚叶岩白菜乙醇提取物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜粉按w/v=1:10的比例加入70%~95%乙醇、浸泡1-5小时,100℃回流提取1-5小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到70%~95%乙醇提取液;50℃恒温水浴挥干,即得。
本发明所述的以厚叶岩白菜水提物为活性成分在制备治疗龋病和牙周疾病药物中的用途。
本发明所述的以厚叶岩白菜水提物为活性成分的药物,为含有权利要求1~3所述的任意一种提取物制成的喷剂、片剂、注射剂、胶囊剂。
本发明所述的以厚叶岩白菜水提物为活性成分的日用品,为含有权利要求1~3所述的任意一种提取物制成的漱口液、牙膏及其他口腔护理剂。
采用刃天青染色法和XTT法对厚叶岩白菜水提物、甲醇提取物、70%和95%乙醇提取物及各萃取物进行了抑菌活性和对该菌的生物膜抑制作用的研究,发现厚叶岩白菜水提取物及萃取物、95%乙醇提取物及萃取物、70%乙醇提取液及萃取物和甲醇提取物及萃取物对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌及该菌生物膜均有不同的抑制作用,且对变异链球菌和牙龈卟啉单胞菌及该菌生物膜形成的抑制作用较强。说明厚叶岩白菜水提取物及萃取物、95%乙醇提取物及萃取物、70%乙醇提取液及萃取物和甲醇提取物及萃取物可用于以上致病菌所引起的龋齿及牙周炎具有预防和治疗作用。
本发明的积极效果在于:提供了厚叶岩白菜水提物、甲醇提取物、乙醇提取物及各萃取物及提取方法;公开了对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌、牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌及该菌生物膜均的抑制作用,可用于制备以上致病菌所引起的龋齿及牙周炎预防和治疗的药物和日用品。
具体实施方式
通过以下实施例进一步举例描述本发明,并不以任何方式限制本发明,在不背离本发明的技术解决方案的前提下,对本发明所作的本领域普通技术人员容易实现的任何改动或改变都将落入本发明的权利要求范围之内。
实施例1:
厚叶岩白菜水提物及萃取物的制备
厚叶岩白菜的水提物及萃取物制备是取干燥的厚叶岩白菜粉碎,按1g厚叶岩白菜粉加10ml水的比例,取500g厚叶岩白菜粉中分别加入5000mL纯水,浸泡2小时,100℃回流提取2小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,40℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液。经萃取后剩余的原液为得到水提液。50℃恒温水浴挥干,得到水提物及其萃取物。将所得到的各提取物溶于无菌的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为50mg/mL并经微孔滤膜器除菌,即得无菌的厚叶岩白菜提取测试母液;-20℃保存,即得。
实施例2:
厚叶岩白菜70%乙醇提取物及萃取物的制备
厚叶岩白菜的70%乙醇提物制备是取干燥的厚叶岩白菜粉碎,按1g厚叶岩白菜粉加10ml 70%乙醇的比例,取500g厚叶岩白菜粉中分别加入5000mL 70%乙醇,浸泡2小时,100℃回流提取2小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,40℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液。经萃取后剩余的原液为得到70%乙醇提取液。50℃恒温水浴挥干,得到70%乙醇提取物及萃取物。将所得到的各提取物溶于无菌的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为50mg/mL并经微孔滤膜器除菌,即得无菌的厚叶岩白菜提取测试母液;-20℃保存,即得。
实施例3:
厚叶岩白菜95%乙醇提取物及萃取物的制备
厚叶岩白菜的95%乙醇提物制备是取干燥的厚叶岩白菜粉碎,按1g厚叶岩白菜粉加10ml 95%乙醇的比例,取500g厚叶岩白菜粉中分别加入5000mL 95%乙醇,浸泡2小时,100℃回流提取2小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,40℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液。经萃取后剩余的原液为得到95%乙醇提取液。50℃恒温水浴挥干,得到95%乙醇提取物及其萃取物。将所得到的各提取物溶于无菌的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为50mg/mL并经微孔滤膜器除菌,即得无菌的厚叶岩白菜提取测试母液,-20℃保存,即得。
实施例4:
厚叶岩白菜甲醇提取物及萃取物的制备
厚叶岩白菜的甲醇提物制备是取干燥的厚叶岩白菜粉碎,按1g厚叶岩白菜粉加10ml甲醇的比例,取500g厚叶岩白菜粉中分别加入5000mL甲醇,浸泡24小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,40℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液。经萃取后剩余的原液为得到甲醇提取液。50℃恒温水浴挥干,得到甲醇提取物及萃取物。将所得到的各提取物溶于无菌的二甲基亚砜(DMSO),终浓度为50mg/mL并经微孔滤膜器除菌,即得无菌的厚叶岩白菜提取测试母液,-20℃保存,即得。
通过以下试验本发明在制备预防和治疗口腔疾病中的医用用途
试验例1:
本发明对龋病致病菌的抑制作用
龋病是口腔疾病的主要疾病之一。龋病致病菌可定植牙齿表面形成生物膜,即牙菌斑,利用食物中的蔗糖,代谢产酸,从而导致牙齿脱矿形成龋齿。因此,有效的抑制细菌生长并干扰生物膜形成或堆积是防治和治疗龋病的有效方法。
取对数期的变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌,稀释到菌浓度为107cfu/mL。用培养基稀释厚叶岩白菜各提取物及萃取物母液,浓度至5mg/mL。96孔板中,每孔加入100μl的菌液和100μl的提取物的稀释液。混合均匀后,每孔加入无菌的15μl的刃天青(1%,纯水)显色液,37℃,培养24h。未经处理的菌液作为变色的阳性对照,培养基作为未变色的阴性对照。实验结果见表1-4。
表1.本发明的最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表1的结果显示,在浓度小于2.5mg/mL时,厚叶岩白菜的水提物及其正丁醇萃取物对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌和嗜酸乳杆菌有不同程度的抑制作用,其中对变异链球菌的抑制作用最为明显,水提物和正丁醇萃取物的MIC值分别为1.25mg/mL和0.625mg/mL。
表2.本发明最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表2的结果显示,在浓度小于2.5mg/mL时,厚叶岩白菜的70%乙醇提取物的氯仿萃取物对变异链球菌、嗜酸乳杆菌有抑制作用,乙酸乙酯萃取物对变异链球菌和血液链球菌具有明显的抑制作用,其中对变异链球菌的抑制作用最为明显。
表3.本发明最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表3的结果显示,在浓度小于2.5mg/mL时,厚叶岩白菜的95%乙醇提取物对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌和嗜酸乳杆菌均有抑制作用,且乙酸乙酯萃取物对嗜酸乳杆菌也具有抑制作用,其中对变异链球菌的抑制作用最为明显。
表4.本发明最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表4的结果显示,在浓度小于2.5mg/mL时,厚叶岩白菜的甲醇提取物对变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌和嗜酸乳杆菌均有抑制作用,其中对变异链球菌的抑制作用最为明显。但其萃取物未表现出抑菌活性。
综上所述,厚叶岩白菜水提物及正丁醇萃取物,70%乙醇氯仿萃取物及乙酸乙酯萃取物,95%乙醇提取物及乙酸乙酯萃取物和甲醇提取物对龋病致病菌具有不同程度的抑制作用,其中对变异链球菌的作用最为明显。变异链球菌是公认的龋病致病菌中的代表菌,该菌是早期的牙菌斑定植菌,为其他菌的定植提供了基础,因此对变异链球菌的抑制,对预防和治疗龋病尤为重要。
试验例2
本发明对龋病致病菌生物膜活力的影响
取对数期的变异链球菌、血链球菌、唾液链球菌、嗜酸乳杆菌,稀释套菌浓度为107cfu/mL。用培养基稀释厚叶岩白菜各提取物及萃取物的母液至浓度至5mg/mL。在96孔板中,每孔加入100μl培养基及100μl菌液,37℃,培养24小时。孵育后,吸去培养基,用无菌PBS(pH 7.0)冲洗三次,每孔加入100微升培养基及100μl的1/2MIC浓度的药液,37℃,孵育24h。培养结束后,吸取每孔的上清液,PBS冲洗三次,每孔加入100μl的XTT反应液,暗反应2h。酶标仪,492nm测其吸收波长。未经处理的菌液作为阴性对照,氯已定含漱液作为阳性对照。实验结果见表5。
表5.本发明对龋病致病菌生物膜的抑制作用
表5的结果显示,厚叶岩白菜提取物及其萃取物对四种致病菌所形成的生物膜具有不同的抑制作用。其中,对变异链球菌所形成的生物膜的抑制作用更为明显。与氯已定含漱液相比,抑制作用更有效。
试验例3
叶岩白菜提取物及萃取物抑制牙周炎致病菌实验研究
牙周炎是一种细菌感染性疾病。牙周炎致病菌可定植牙齿表面或牙龈组织,进而形成牙菌斑,细菌或其分泌的致病因子通过牙本质暴露的牙本质小管、牙髓等方式进入髓腔引发炎症反应,导致牙周组织的破坏,进而使牙齿脱落。有研究显示,牙周炎与糖尿病、心脑血管疾病等全身性系统性疾病具有一定的相关性。因此一种能够抑制或杀死牙周炎致病菌并能抑制其生物膜形成是预防和治疗牙周炎的有效方式。
取对数期的牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌,稀释到菌浓度为107cfu/mL。用培养基稀释厚叶岩白菜各提取物及萃取物母液,浓度至5mg/mL。在96孔板中,每孔加入100μl的菌液和100μl的提取物的稀释液。混合均匀后,每孔加入无菌15μl的刃天青(1%,纯水)显色液,37℃,厌氧箱中培养24h。未经处理的菌液作为变色的阳性对照,培养基作为未变色的阴性对照。实验结果见表6-9。
表6.厚叶岩白菜水提物及萃取物最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
由表6可以看出,厚叶岩白菜水提取及其乙酸乙酯和正丁醇萃取物分别对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌具有不同程度的抑菌效果,其中正丁醇萃取物的效果更为明显。
表7.厚叶岩白菜70%乙醇提取物及萃取物的最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表7的结果显示,厚叶岩白菜70%乙醇提取物及氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取物菌对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌显示了不同的抑制作用,其中氯仿萃取物对牙龈卟啉单胞杆菌的抑菌效果更为明显,70%乙醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物对具核梭杆菌和伴放线杆菌更为敏感。
表8.厚叶岩白菜95%乙醇提取物及萃取物的最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表8的结果显示,厚叶岩白菜95%乙醇提取物以及乙酸乙酯萃取物对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌具有不同程度的抑制作用,且对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用更有效。
表9.厚叶岩白菜甲醇提取物及萃取物的最小抑菌浓度(MIC mg/mL)
注:-:MIC>2.5;+:MIC=2.5;++:MIC=1.25;+++:MIC=0.625
表9的结果显示,厚叶岩白菜甲醇提取物及其氯仿萃取物对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌均有抑制作用,且各细菌对氯仿萃取物更为敏感。
综上所述,厚叶岩白菜提取物及其萃取物对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌均表现了不同的抑菌活性,且牙龈卟啉单胞菌对该药更为敏感。
试验例3
厚叶岩白菜提取物及萃取物对牙周炎致病菌生物膜的抑制作用
取对数期的牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌,稀释套菌浓度为107cfu/mL。用培养基稀释厚叶岩白菜各提取物及萃取物的母液至浓度至5mg/mL。在96孔板中,每孔加入100μl培养基及100μl菌液,37℃,厌氧培养24小时。孵育后,吸去培养基,用无菌PBS(pH7.0)冲洗三次,每孔加入100μl培养基及100μl的各浓度的药液,37℃,厌氧条件孵育24h。培养结束后,吸取每孔的上清液,PBS冲洗三次,每孔加入100μl的XTT反应液,暗反应2h。酶标仪,492nm测其吸收波长。未经处理的菌液作为阴性对照,氯已定含漱液作为阳性对照。实验结果见表10。
表10.厚叶岩白菜提取物及萃取物对牙周致病菌生物膜的抑制作用
表10的结果显示,厚叶岩白菜提取物及萃取物对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌和伴放线杆菌所形成的生物膜均有不同程度的抑制作用。生物膜量的减少证明了厚叶岩白菜提取物,能够有效的干扰生物膜的形成以及堆积。结合表6、7、8和9结果表明,厚叶岩白菜提取物及萃取物不仅可以对游离的致病菌具有抑制作用,对粘附的细菌也有抑制作用。与氯已定含漱液相比,其效果更为显著,进一步证实了厚叶岩白菜提取物及萃取物制备预防和治疗牙周疾病药物和口腔护理剂的合理性。
Claims (6)
1.一种厚叶岩白菜水提物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜粉按w/v=1:10的比例加水浸泡1-5小时,100℃回流提取1-5小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到水提液;50℃恒温水浴挥干,即得。
2.一种厚叶岩白菜甲醇提取物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜按w/v=1:10的比例加入甲醇,冷浸12-48小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到甲醇提取液;50℃恒温水浴挥干,即得。
3.一种厚叶岩白菜乙醇提取物的提取方法,包括以下步骤:
取厚叶岩白菜粉按w/v=1:10的比例加入70%~95%乙醇、浸泡1-5小时,100℃回流提取1-5小时,过滤离心,收集滤液,残渣重复上述操作两次,合并三次滤液,20-50℃减压浓缩,得到提取液,依次分别加入等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行系统萃取,分别得到石油醚萃取液、氯仿萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液;经萃取后剩余的原液为得到70%~95%乙醇提取液;50℃恒温水浴挥干,即得。
4.以厚叶岩白菜水提物为活性成分在制备治疗龋病和牙周疾病药物中的用途。
5.以厚叶岩白菜水提物为活性成分的药物,为含有权利要求1~3所述的任意一种提取物制成的喷剂、片剂、注射剂、胶囊剂。
6.以厚叶岩白菜水提物为活性成分的日用品,为含有权利要求1~3所述的任意一种提取物制成的漱口液、牙膏及其他口腔护理剂。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109813588A (zh) * | 2019-02-19 | 2019-05-28 | 湖北泰康医疗设备有限公司 | 一种寄生虫染色液 |
CN110227103A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-09-13 | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种抗口腔病原菌的组合物及其制备方法和应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008169174A (ja) * | 2007-01-15 | 2008-07-24 | Yoshihiro Futamura | 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するベルゲニン誘導体、それからなる食品製剤、化粧品、抗炎症剤 |
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Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008169174A (ja) * | 2007-01-15 | 2008-07-24 | Yoshihiro Futamura | 炎症性サイトカイン産生抑制作用を有するベルゲニン誘導体、それからなる食品製剤、化粧品、抗炎症剤 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
刘斌: "新疆特色植物厚叶岩白菜的活性成分研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
熊辅信等: "《中药现代研究荟萃》", 31 May 2002 * |
马忠杰: "厚叶岩白菜中岩白菜素的提取分离", 《药学通报》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109813588A (zh) * | 2019-02-19 | 2019-05-28 | 湖北泰康医疗设备有限公司 | 一种寄生虫染色液 |
CN110227103A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-09-13 | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) | 一种抗口腔病原菌的组合物及其制备方法和应用 |
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