CN109633027B - 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法 - Google Patents

一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109633027B
CN109633027B CN201910017911.8A CN201910017911A CN109633027B CN 109633027 B CN109633027 B CN 109633027B CN 201910017911 A CN201910017911 A CN 201910017911A CN 109633027 B CN109633027 B CN 109633027B
Authority
CN
China
Prior art keywords
glutamic acid
ester hydrochloride
diethyl ester
acid diethyl
detection method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910017911.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109633027A (zh
Inventor
杜方鹏
孙庆伟
董占静
王先菊
闫玲玲
刘旭晶
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Baoyuan Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
SHANDONG BOYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANDONG BOYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical SHANDONG BOYUAN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201910017911.8A priority Critical patent/CN109633027B/zh
Publication of CN109633027A publication Critical patent/CN109633027A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109633027B publication Critical patent/CN109633027B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation

Abstract

本发明公开了一种L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法。它是将L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐样品溶解后顶空进样，采用GC‑ECD检测方法对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量，并进行了方法学验证，该方法具有专属性强、快速、灵敏等优点。本发明首次建立了采用GC‑ECD检测方法对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的定性和定量方法，便于对L‑谷氨酸二乙酯盐酸盐的质量进行控制。

Description

一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法
技术领域
本发明涉及一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的杂质——氯乙烷的气相色谱检测方法，属于医药技术领域。
背景技术
L-谷氨酸二乙酯盐酸盐是培美曲塞二钠合成过程中的关键中间体。培美曲塞二钠是一种结构上含有核心为吡咯嘧啶基团的抗叶酸制剂，通过破坏细胞内叶酸依赖性的正常代谢过程，抑制细胞复制，从而抑制肿瘤的生长。
氯乙烷是L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的反应物料，且氯乙烷为基因毒性杂质，http://toxnet.nlm.nih.gov/cpdb/明确收载氯乙烷的半数致癌量TD50为1810(mg/kg/day)，因此应制定氯乙烷在L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的检测方法，对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的质量进行控制。但经检索，目前尚无关于氯乙烷在L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的含量气相色谱仪检测方法的报道。
氯乙烷，英文名称：Chloroethane，分子式：C2H5Cl；分子量：64.51，结构式如下所示：
Figure BDA0001939710270000011
发明内容
针对上述问题，本发明首次提供了一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质氯乙烷的气相色谱检测方法。该方法顶空进样后采用GC-ECD检测方法对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量，并进行了方法学验证。经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点，能够可靠地对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质——氯乙烷进行定性定量分析。
本发明的技术方案是：一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，将L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品溶解后顶空进样，采用GC-ECD检测方法对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量。
其中，色谱条件为：
色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP，柱温：程序升温23±2℃保持15±2min，以10±1℃/min的速率升至80±5℃，保持1-3min；进样口模式：分流，分流比：18-22∶1，进样口温度：180±20℃，检测器：电子捕获检测器(ECD)，温度270±20℃。
顶空条件为：平衡温度：60±5℃，平衡时间：20±5min。
优选色谱条件：
色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP(30m×0.32mm，0.25μm)，柱温：程序升温23℃保持15min，以10℃/min的速率升至80℃，保持2min；载气：氮气，流速：1ml/min，模式：分流，分流比：20∶1，进样口温度：180℃，检测器：电子捕获检测器(ECD)，温度270℃。
顶空条件为：
平衡温度：60℃，平衡时间：20min，定量环温度：70℃，传输线温度：80℃，
顶空瓶体积：20ml，加液体积：5ml。
进一步的，本发明采用外标法测定L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷。
进一步的，在本发明的检测条件下，氯乙烷峰RT为3.5±0.1min，L-谷氨酸二乙酯盐酸盐不出峰。
本发明的优势是：
1、氯乙烷是L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的反应物料。本发明首次建立了L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质氯乙烷的气相色谱检测方法，便于对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的质量进行控制。
2、分离效果好
本发明首次建立了GC-ECD的检测方法，并对方法进行了优化，使这两种成分能够得到很好的分离。从图3～5可以看出：氯乙烷峰RT为3.515min；L-谷氨酸二乙酯盐酸盐不出峰，二者分离效果好。
3、方法的专属性强、快速、灵敏、准确
经实验证明，该方法具有专属性强(专门针对氯乙烷)、快速、灵敏(检出限为0.02μg/ml，定量限为0.05μg/ml)等优点，能够可靠地对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的含量进行定性定量分析。
附图说明
图1为氯乙烷标准工作曲线；
图2为空白溶液色谱图；
图3为氯乙烷对照品溶液色谱图，RT＝3.510min；
图4为样品溶液色谱图；
图5为混合溶液色谱图，RT＝3.515min。
具体实施方式
实施例1
1仪器与材料
1.1仪器：7890A气相色谱仪(Agilent)；
2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP(30m×0.32mm，0.25μm)，柱温：程序升温，23℃保持15min，以10℃/min的速率升至80℃，保持2min；载气：氮气，流速：1ml/min，模式：分流，分流比：20∶1，进样口温度：180℃。
检测器：电子捕获检测器(ECD)，温度270℃。
顶空条件为：平衡温度：60℃，平衡时间：20min，定量环温度：70℃，传输线温度：80℃，顶空瓶体积：20ml，加液体积：5ml。
2.2溶液的制备
2.21对照品溶液的制备
精密量取1ml氯乙烷溶液(0.1mg/ml的甲醇溶液)，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。系列稀释对照品浓溶液，得到浓度分别为0.01μg/ml、0.02μg/ml、0.05μg/ml、0.08μg/ml、0.1μg/ml的系列对照品溶液。
2.22样品溶液的制备
称取L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品10.28mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。
2.23混合溶液的制备
混合溶液：精密取1ml氯乙烷溶液(0.1mg/ml的甲醇溶液)，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，再加入L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品10.57mg，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。
2.24加标回收溶液的制备
加标回收溶液：精密取1ml氯乙烷溶液(0.1mg/ml的甲醇溶液)，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。分别精密量取5ml、10ml、12ml，置不同100ml量瓶中，再分别加入L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品10.32mg、9.77mg、10.81mg，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。
3分析方法的验证
3.1系统精密度
精密量取对照品溶液5ml，置20ml顶空瓶，密封，顶空进样，气相色谱仪检测。对照溶液连续顶空进样6次进行系统精密度试验，结果见表1。
表1 系统精密度
Figure BDA0001939710270000031
Figure BDA0001939710270000041
3.2线性关系
精密量取系列稀释对照品溶液各5ml，置不同20ml顶空瓶，密封，顶空进样，气相色谱仪检测，所得结果以氯乙烷的浓度为横坐标，平均峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。线性方程为y＝13971025482.99x+165514.77，r＝0.9978(权重：1/x2)(见图1)。
3.3准确度
精密量取各浓度加标回收溶液各5ml，置不同20ml顶空瓶，密封，顶空进样，气相色谱仪检测，按所得结果计算方法的准确度。结果见表7。
表7 准确度结果
Figure BDA0001939710270000051
3.3耐用性
精密量取对照品溶液5ml，置20ml顶空瓶，密封，顶空进样，气相色谱仪检测。在6小时内，重复顶空进样，对照品溶液中氯乙烷的峰面积RSD为7.17％。
3.3检出限：方法的检出限(LOD)为取信噪比S/N＝3倍时的氯乙烷的进样浓度，通过计算为0.02μg/ml。
3.4定量限：方法的检出限(LOD)为取信噪比S/N＝10倍时的氯乙烷的进样浓度通过计算为0.05μg/ml。
4讨论
本文建立了GC-ECD的检测方法，并对方法进行了优化，使这两种成分能够得到很好的分离(如图3-5)。经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏等优点，能够可靠地对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的含量进行定性定量分析。
氯乙烷为基因毒性杂质，http://toxnet.nlm.nih.gov/cpdb/明确收载氯乙烷的半数致癌量TD50为1810(mg/kg/day)，计算氯乙烷在L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中的限度为3.8％，从严控制，氯乙烷的限度订为0.1％。
实施例2：实际样品的检测
1)取L-谷氨酸二乙酯盐酸盐原药，用水溶解或者定容，配制成1ml中含有0.1mg L-谷氨酸二乙酯盐酸盐的溶液，作为供试品溶液；
2)取氯乙烷的甲醇溶液，用水溶解或者定容，配制成1ml中含有0.1μg/ml的氯乙烷溶液，作为对照品溶液；
3)取步骤1)制备的供试品溶液和对照品溶液，采用与实施例1完全相同的仪器和试剂，按照步骤2.1所示的色谱条件，精密量取供试品溶液5ml，置20ml顶空瓶，密封，顶空进样，气相色谱仪检测，记录色谱图；
3)采用外标法，以峰面积为指标，计算得出L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中杂质氯乙烷含量。
采用上述的方法检测三批样品，结果如下：
样品批号 1 2 3
氯乙烷含量％ 未检出 未检出 未检出
。

Claims (6)

1.一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，将L-谷氨酸二乙酯盐酸盐样品溶解后顶空进样，采用GC-ECD检测方法对L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷进行定性、定量；
GC-ECD检测方法使用的色谱柱为采用硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP；
柱温：程序升温23±2℃保持15±2min，以10±1℃/min的速率升至80±5℃，保持1-3min；
进样口模式：分流，分流比：18-22∶1，进样口温度：180±20℃。
2.如权利要求1所述的一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，采用电子捕获检测器ECD，检测器温度270℃±20℃。
3.如权利要求1所述的一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，所述顶空条件为：平衡温度：60±5℃，平衡时间：20±5min。
4.如权利要求1-3中任一项所述的一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，所述色谱条件是：
色谱柱：硝基对苯二酸改性的聚乙二醇色谱柱DB-FFAP，30m×0.32mm，0.25μm；柱温：程序升温，23℃保持15min，以10℃/min的速率升至80℃，保持2min；载气：氮气，流速：1ml/min，进样口模式：分流，分流比：20∶1，进样口温度：180℃；
检测器：电子捕获检测器ECD，温度270℃；
所述顶空条件为：平衡温度：60℃，平衡时间：20min，定量环温度：70℃，传输线温度：80℃；顶空瓶体积：20ml，加液体积：5ml。
5.如权利要求4所述的一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，所述氯乙烷的RT为3.5±0.1min，L-谷氨酸二乙酯盐酸盐不出峰。
6.如权利要求4所述的一种L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法，其特征是，采用外标法测定L-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷。
CN201910017911.8A 2019-01-09 2019-01-09 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法 Active CN109633027B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910017911.8A CN109633027B (zh) 2019-01-09 2019-01-09 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910017911.8A CN109633027B (zh) 2019-01-09 2019-01-09 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109633027A CN109633027A (zh) 2019-04-16
CN109633027B true CN109633027B (zh) 2021-04-09

Family

ID=66060363

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910017911.8A Active CN109633027B (zh) 2019-01-09 2019-01-09 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109633027B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110749692B (zh) * 2019-10-15 2022-03-18 扬子江药业集团有限公司 L-谷氨酸二乙酯盐酸盐及其光学异构体的分离检测方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105111214B (zh) * 2015-08-31 2017-10-31 江西农业大学 一种培美曲塞二钠的制备方法
CN105911208B (zh) * 2016-06-25 2017-12-29 江苏正大清江制药有限公司 一种测定盐酸溴己新中氯甲烷、氯乙烷的方法
CN105911207B (zh) * 2016-06-25 2018-04-27 江苏正大清江制药有限公司 一种测定盐酸氨基葡萄糖中氯甲烷、氯乙烷的方法
US10145834B2 (en) * 2016-07-19 2018-12-04 The Boeing Company Systems and methods for non-flammable indication of incendivity

Also Published As

Publication number Publication date
CN109633027A (zh) 2019-04-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021022876A1 (zh) 测定水合氯醛或其制剂中卤代酸含量的方法
CN111693633B (zh) 一种盐酸伊托必利中3,4-二甲氧基苯甲酰氯的检测方法
CN109060973B (zh) 一种检测硫辛酸注射液中乙二胺的方法
CN109580825B (zh) 消旋卡多曲中对甲苯磺酸酯类物质的检测方法
CN109633027B (zh) 一种l-谷氨酸二乙酯盐酸盐中氯乙烷的气相色谱检测方法
CN105021740A (zh) N1,n1-二异丙基乙二胺的高效液相色谱分析方法
CN113125602A (zh) 一种哌柏西利中残留溶剂的检测方法
CN110687223B (zh) 一种丙戊酸钠原料乙酰乙酸甲酯的含量测定方法
CN111679029A (zh) 一种盐酸伊托必利中对羟基苯甲醛的检测方法
CN111551645A (zh) 一种硫酸羟氯喹有关物质的检测方法及其应用
CN111239286A (zh) 一种检测替诺呋韦中基因毒性杂质的方法
CN107703225B (zh) 一种测定盐酸溴己新原料中有机溶剂残留的检测方法
CN108414648B (zh) 一种利用顶空气相色谱法检测罗库溴铵中残留溶剂的方法
CN114166982A (zh) 一种同时测定氨基己酸注射液中二聚体、三聚体和己内酰胺的方法
CN107677737A (zh) 一种检测维a酸中残留氯仿的方法
CN111812234A (zh) 泮托拉唑钠倍半水合物中残留溶剂的检测方法
CN109633046B (zh) 一种从盐酸度洛西汀中检测二甲胺的方法
CN109580822B (zh) 左旋-反式-1,2-环己二胺中杂质顺式-1,2-环己二胺的检测方法
CN112034058B (zh) 一种长春胺中异构体杂质的检测方法
CN112986413B (zh) 一种羟氯喹中羟氯喹侧链的检测方法
CN116465990B (zh) 苯磺酸阿曲库铵与苯磺酸顺阿曲库铵原料药中杂质1，5-己二醇、1，6-己二醇、3-甲基-1，5-戊二醇的检测方法
CN111595982B (zh) 一种1,3-二氧杂环戊烷类杂质的检测方法
CN111595954B (zh) 吲达帕胺原料药中dcc和dcu含量的检测方法
CN107091895B (zh) 采用hplc分离测定利奥西呱原料药中有关物质的方法
CN117929563A (zh) 1-苄基-3-哌啶醇中杂质和残留溶剂的分离测定方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP03 Change of name, title or address
CP03 Change of name, title or address

Address after: 251400 No. 12, Taixing East Street, Jibei Economic Development Zone, Jiyang District, Jinan City, Shandong Province

Patentee after: Shandong Baoyuan Pharmaceutical Co.,Ltd.

Address before: Strong in Jiyang County of Ji'nan City, 251400 North Street, Shandong Province Economic Development Zone

Patentee before: SHANDONG BOYUAN PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A method for the determination of chloroethane in diethyl L-glutamate hydrochloride by gas chromatography

Effective date of registration: 20221130

Granted publication date: 20210409

Pledgee: Qilu bank Limited by Share Ltd. Ji'nan science and technology innovation center sub branch

Pledgor: Shandong Baoyuan Pharmaceutical Co.,Ltd.

Registration number: Y2022980023658