CN106435008A - 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 - Google Patents
用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106435008A CN106435008A CN201611219099.XA CN201611219099A CN106435008A CN 106435008 A CN106435008 A CN 106435008A CN 201611219099 A CN201611219099 A CN 201611219099A CN 106435008 A CN106435008 A CN 106435008A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- coturnicis japonicae
- carnis coturnicis
- genomic dna
- female
- chdas
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6879—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for sex determination
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法，属于分子生物学技术领域。本发明利用鹌鹑CHD1基因在Z染色体和W染色体上的长度差异设计特异性引物，以鹌鹑基因组DNA为模板进行PCR扩增并进行溶解曲线分析，由于母鹌鹑核型为ZW型，PCR产物含有2条大小不同的片段，条带大小分别为470bp和638bp，因此溶解曲线为2个峰；公鹌鹑核型为ZZ型，PCR产物仅有1个片段，条带大小为638bp，因此溶解曲线为1个峰，利用溶解曲线的差异可以将公母鹌鹑清晰分开。本发明中鹌鹑性别检测方法具有快速、准确、经济实用的特点，适合高通量操作。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于检测鹌鹑性别的引物，同时还涉及包含该引物的试剂盒以及鹌鹑性别检测方法，属于分子生物学技术领域。
背景技术
鹌鹑(Cotuenix coturnix)又被称为日本鹑，为高产高效特禽。鹌鹑的性别与其生产力有着密切的联系。在肉用鹌鹑中，雄性鹌鹑生长发育较快，经济效益远高于雌性鹌鹑；而在蛋用鹌鹑中则反之。目前，自别雌雄配套体系虽然已经被畜禽工作者研究出用于鹌鹑的性别鉴定，根据伴性遗传原理，根据出壳时绒毛的颜色可鉴定子一代鹌鹑的雌雄，但父母代的性别仍需经过传统的翻肛法来辨别。然而在生产实践中，由于鹌鹑出生后泄殖腔粘膜色泽不一，为鉴定工作带来了不小的难度。加之鹌鹑个体小，不易进行操作，在翻肛检查时如有失误，会间接伤及鹌鹑内脏，影响其生长发育和育雏率。
公布号CN101962677A的发明专利公开了一种鉴定禽类性别的方法，首先运用比较基因法对NCBI数据库中多种禽类的CHD1序列进行比对，确定所有禽类中较保守的区域，根据该区域设计一对特异性引物CHD-NIE-1F/CHD-NIE-1R(如SEQ ID NO.1～2所示)，利用该引物对禽类基因组DNA进行PCR扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后，根据带型判断禽类性别，如为单一条带(576bp)判定为雄性，双条带(576bp和368bp)判定为雌性。但是，该专利未公开PCR扩增的引物序列，同时采用电泳法检测PCR产物费时费力，不适用高通量操作，并且核酸染料为致癌物质，污染环境，对操作人员也有一定的危害。目前，鹌鹑性别外形鉴定方法虽在现实生产中被普遍运用，但是应用分子生物学方法检测对性别起决定性作用的基因代表了今后鉴定的发展方向。因此开发一种快速准确鉴定鹌鹑性别的PCR检测方法十分必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于检测鹌鹑性别的引物。
同时，本发明还提供一种包含上述引物的试剂盒。
最后，本发明再提供一种鹌鹑性别检测方法，该方法操作简单、快捷，检测灵敏度高、特异性好，结果准确、可靠。
为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：
用于检测鹌鹑性别的引物，根据鹌鹑CHD1基因在Z染色体和W染色体上的长度差异设计合成，引物如下所示：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
用于检测鹌鹑性别的试剂盒，包含以下引物：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
所述试剂盒还可以包括：2×SYBR qPCR mix(或者2×PCR mix，均为市售商品)、阳性对照基因组DNA(雌性鹌鹑基因组DNA和雄性鹌鹑基因组DNA)、ddH2O以及DNA Marker等。
具体的，试剂盒组成为：2×SYBR qPCR mix 500μL(或者2×PCR mix 500μL)，10μmol/L CHDS 50μL，10μmol/L CHDAS 50μL，ddH2O 1mL，100ng/μL雌性鹌鹑基因组DNA 20μL，100ng/μL雄性鹌鹑基因组DNA 20μL，使用说明书1份。
鹌鹑性别检测方法，包括以下步骤：以待测样本基因组DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行qPCR扩增，并进行融解曲线分析，出现单峰且峰位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双峰且峰位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性。
所述qPCR扩增的反应体系为：2×SYBR qPCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或阳性对照(100ng/μL雌性或雄性鹌鹑基因组DNA)1～2μL，ddH2O 6.6～7.6μL，总计20μL。
所述qPCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火30s，72℃延伸20s，40个循环；采集荧光信号；最后72℃延伸5min。
鹌鹑性别检测方法，包括以下步骤：以待测样本基因组DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行PCR扩增，扩增产物经电泳分析出现单一条带(638bp)且条带位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双条带(638bp和470bp)且条带位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性。
所述PCR扩增的反应体系为：2×PCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/LCHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或阳性对照(100ng/μL雌性或雄性鹌鹑基因组DNA)1μL，ddH2O 7.6μL，总计20μL。
所述PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火3.s，72℃延伸20s，40个循环；最后72℃延伸5min。
本发明的有益效果：
本发明利用鹌鹑CHD1基因在Z染色体和W染色体上的长度差异设计特异性引物，以鹌鹑基因组DNA为模板进行PCR扩增并进行溶解曲线分析，由于母鹌鹑核型为ZW型，PCR产物含有2条大小不同的片段，条带大小分别为470bp和638bp，因此溶解曲线为2个峰；公鹌鹑核型为ZZ型，PCR产物仅有1个片段，条带大小为638bp，因此溶解曲线为1个峰，利用溶解曲线的差异可以将公母鹌鹑清晰分开。
本发明中鹌鹑性别检测方法具有快速、准确、经济实用的特点，适合高通量操作。
附图说明
图1为实施例4中qPCR扩增的反应程序图；
图2为实施例4中qPCR扩增的溶解曲线；
图3为实施例5中PCR产物凝胶电泳图。
具体实施方式
下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
用于检测鹌鹑性别的引物，根据鹌鹑CHD1基因在Z染色体和W染色体上的长度差异设计合成，引物如下所示：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
实施例2
用于检测鹌鹑性别的试剂盒，包含：2×SYBR qPCR mix(购自北京索莱宝生物科技有限公司)500μL，10μmol/L CHDS 50μL，10μmol/L CHDAS 50μL，100ng/μL雌性鹌鹑基因组DNA 20μL，100ng/μL雄性鹌鹑基因组DNA 20μL，ddH2O 1mL，使用说明书1份；引物如下所示：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
操作说明：
1)提取待检测样本基因组DNA；
2)利用引物CHDS、CHDAS进行qPCR扩增，并进行融解曲线分析；
扩增体系如下：
2×SYBR qPCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或阳性对照(100ng/μL雌性或雄性鹌鹑基因组DNA)1～2μL，ddH2O6.6～7.6μL，总计20μL；
扩增程序如下：
95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火30s，72℃延伸20s，40个循环；采集荧光信号；最后72℃延伸5min；
3)溶解曲线中出现单峰且峰位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双峰且峰位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性。
实施例3
用于检测鹌鹑性别的试剂盒，包含：2×PCR mix 500μL，10μmol/L CHDS 50μL，10μmol/LCHDAS 50μL，100ng/μL雌性基因组DNA20μL，100ng/μL雄性鹌鹑基因组DNA 20μL，ddH2O 1mL，DNA Marker 2000及使用说明书1份；引物如下所示：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
操作说明：
1)提取待检测样本基因组DNA；
2)利用引物CHDS、CHDAS进行PCR扩增；
扩增体系如下：
2×PCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或阳性对照基因组DNA 1μL，ddH2O 7.6μL，总计20μL；
扩增程序如下：
95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火3.s，72℃延伸20s，40个循环；最后72℃延伸5min；
3)扩增产物经电泳分析出现单一条带(638bp)且条带位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双条带(638bp和470bp)且条带位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性。
实施例4
鹌鹑性别检测方法，步骤如下：
1)提取待检测样本基因组DNA，-20℃保存备用；
2)以待检测样本DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行qPCR扩增，添加融解曲线；
扩增体系为：2×SYBR qPCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/LCHDAS0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA 1μL，ddH2O 7.6μL，总计20μL；
扩增程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火30s，72℃延伸20s，40个循环；采集荧光信号；最后72℃延伸5min(见图1)；
阳性对照(100ng/μL雌性或雄性鹌鹑基因组DNA)扩增同上；
4)反应结束后，确认qPCR产物的溶解曲线(见图2，图中粗线条代表雌性鹌鹑，细线条代表雄性鹌鹑)，溶解曲线显示：样本1出现1个峰，且峰的位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照中雄性鹌鹑的相同，判定为雄性鹌鹑，样本2出现2个峰，且峰的位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照中雌性鹌鹑的相同，判定为雌性鹌鹑。
实施例5
鹌鹑性别检测方法，步骤如下：
1)提取待检测样本基因组DNA，-20℃保存备用；
2)以待测样本DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行PCR扩增，得扩增产物；
扩增体系为：2×PCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA 1μL，ddH2O 7.6μL，总计20μL；
扩增程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火3.s，72℃延伸20s，40个循环；最后72℃延伸5min；
3)取扩增产物进行凝胶电泳分析(见图3，图中11、22均为DNA Marker，1～10、12～21均为待测样本)，结果显示：样本2、3、4、6、8、12、13、14、15、18、19、20出现单一条带，测序长度638bp(见SEQ ID NO.1)，判定为雄性鹌鹑；样本1、5、7、9、10、16、17、21出现双条带，测序长度638bp和470bp(见SEQ ID NO.2)，判定为雌性鹌鹑。
序列表
SEQUENCE LISTING
<110> 河南科技大学
<120> 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法
<170> PatentIn version 3.5
<211> 638
<212> DNA
<213> 扩增序列
<221> CHD1_Z
<222> (1)..(638)
<400> 1
CCATACCTCT GATCCTTCTG CATTGAAATG AGACCCTGCT TGTTTCCTCA GTTCCCCTTT 60
TATTGATCCA TCAGGTCTCT AAAGAGATTG AAGGCAACAG TCTATAAGTA ATTCTTTAGC 120
TATACTCCCA TCCCATTAAC CTGGAACCAG TTTAACTTAA TTCATACTTT CATAATTTTC 180
AACTGATAAT ACAGTATTGT GAAGGGACAA AAAGAAGGAA TGTTAACATA TTCCTTCACG 240
AATTTAAGTT TGCTTTCTTT TCTTAAGCAA AATAATAGAG ACAGATAATC ACAGATGGAT 300
GAAATATTGG CAAGGAGCTC TAGAGGTCAT CTTGTCTGTG CTCAAGCAAG GTCTGCTACA 360
ACAGGTTGTC CAGGACCATG CCCATTTGGC TTTTAAGTAT CACGGAGAAT GGCGATTTCA 420
CAACATCTAA AGAACTCAGT GCACTACTCT GTCACCCTCA GAGTTAAAAC ATGATTGTTC 480
TTAAGTTCAG GATAAAGACC TCTTTGTTAC CCAAAATTGT TACCTGGAAG GGAAACTGGC 540
GATACTTTAG ATATTCTGCT AAGATGTCCA GCATCCTCAC CATCTGAGAG AAAATCTCAA 600
CTCTGATGCC ACATTCTCGC AGACGAATCA GTAACTTG 638
<211> 470
<212> DNA
<213> 扩增序列
<221> CHD1_W
<222> (1)..(470)
<400> 2
CCATACCTCT GATCCTTCTG CATTGAAATG ATCCAGTGCT TGTTTCCTCA GTTCTCCTTT 60
TATTGATCCA TCAAGTCTCT AAAGAGATCA AATATTACAG TTAAAAAGGA ACTCATACTA 120
TATTCTAGTC TGAGCAACCT GAATACACAG TTGCCAAAAC AATTGAGGGC AAGGGGAGGA 180
ATGGGGGGGA AGGAGAAGGA GGAGAATAAT GCAACACCTT GCACCATAGT AATTGCCAGT 240
CTTTTTCTAT ACGTAAAATT AAACTTTTAT AAGTCTTTCT ACAGAAAGAA CGCTTTTACT 300
TAAGATAAAG TGACAAAGAT CAAGGCTTCC TGGCTACTGC CATCAAAATT CTTACCTGAA 360
AAGGAAACTG ACGATACTTC AAGTATTCTG CTAAGATATC TAGCATCCTC ACCATCTGAG 420
AGAAAATCAG TACTCTGTTG CCACGTTCTC GCAGACGAAT CAGTAACTTG 470
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<221> CHDS
<222> (1)..(21)
<400> 3
CCATACCTCT GATCCTTCTG C 21
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<221> CHDAS
<222> (1)..(21)
<400> 4
CAAGTTACTG ATTCGTCTGC G 21
Claims (10)
1.用于检测鹌鹑性别的引物，其特征在于：引物如下：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
2.用于检测鹌鹑性别的试剂盒，其特征在于：包含以下引物：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含2×SYBR qPCR mix、雄性鹌鹑基因组DNA和雌性鹌鹑基因组DNA。
4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含2×PCR mix、雄性鹌鹑基因组DNA和雌性鹌鹑基因组DNA。
5.鹌鹑性别检测方法，其特征在于：包括以下步骤：以待测样本基因组DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行qPCR扩增，并进行融解曲线分析，出现单峰且峰位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双峰且峰位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性；
引物如下：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：所述qPCR扩增的反应体系为：2×SYBRqPCR mix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或100ng/μL阳性对照基因组DNA 1～2μL，ddH2O 6.6～7.6μL，总计20μL。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述qPCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火30s，72℃延伸20s，40个循环；采集荧光信号；最后72℃延伸5min。
8.鹌鹑性别检测方法，其特征在于：包括以下步骤：以待测样本基因组DNA为模板，利用引物CHDS、CHDAS进行PCR扩增，扩增产物经电泳分析出现单一条带且条带位置与雄性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雄性，出现双条带且条带位置与雌性鹌鹑基因组DNA阳性对照相同的判定为雌性；
引物如下：
CHDS：5'-CCATACCTCTGATCCTTCTGC-3'；
CHDAS：5'-CAAGTTACTGATTCGTCTGCG-3'。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系为：2×PCRmix 10μL，10μmol/L DHDS 0.7μL，10μmol/L CHDAS 0.7μL，100ng/μL待测样本基因组DNA或100ng/μL阳性对照基因组DNA 1μL，ddH2O 7.6μL，总计20μL。
10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，57℃退火3.s，72℃延伸20s，40个循环；最后72℃延伸5min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611219099.XA CN106435008A (zh) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611219099.XA CN106435008A (zh) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106435008A true CN106435008A (zh) | 2017-02-22 |
Family
ID=58215395
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201611219099.XA Pending CN106435008A (zh) | 2016-12-26 | 2016-12-26 | 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106435008A (zh) |
Cited By (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108315443A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-07-24 | 辽宁大学 | 一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的引物及鉴定方法 |
| CN108575805A (zh) * | 2018-03-14 | 2018-09-28 | 浙江省农业科学院 | 家禽性别的光电探测方法 |
| CN108624702A (zh) * | 2018-05-21 | 2018-10-09 | 天津海睿斯生物科技有限公司 | 一种简便快速鉴别鸟类性别的方法 |
| RU2725210C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-06-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани перепелки обыкновенной (Coturnix coturnix) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726248C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ выявления ДНК ткани домашнего осла (Equus asinus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726242C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
| RU2726432C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для определения ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле |
| RU2726555C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК ткани домашнего осла (Equus asinus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726433C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани ежа обыкновенного (Erinaceus europaeus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728382C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани собаки домашней (Canis lupus familiaris) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728662C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани кошки домашней (Felis silvestris catus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728639C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани кошки домашней (Felis silvestris catus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728660C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ определения ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле |
| RU2728612C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани собаки домашней (Canis lupus familiaris) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| CN113621694A (zh) * | 2021-01-28 | 2021-11-09 | 江苏省家禽科学研究所 | 一种用于鹌鹑性别鉴定的pcr引物、试剂盒及其方法 |
| RU2785381C1 (ru) * | 2021-12-24 | 2022-12-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК возбудителя криптоспоридиоза (Cryptosporidiosis) в биологическом материале животных и кормах с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101962677A (zh) * | 2010-09-15 | 2011-02-02 | 华南农业大学 | 一种鉴定禽类性别的方法 |
| CN106244689A (zh) * | 2016-08-02 | 2016-12-21 | 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种基于pcr技术进行鹌鹑性别鉴定的方法 |
-
2016
- 2016-12-26 CN CN201611219099.XA patent/CN106435008A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101962677A (zh) * | 2010-09-15 | 2011-02-02 | 华南农业大学 | 一种鉴定禽类性别的方法 |
| CN106244689A (zh) * | 2016-08-02 | 2016-12-21 | 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 | 一种基于pcr技术进行鹌鹑性别鉴定的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| CASSANDRA E. FAUX ET AL.: "High-throughput real-time PCR and melt curve analysis for sexing Southern Ocean seabirds using fecal samples", 《THERIOGENOLOGY》 * |
| HSUEH-WEI CHANG ET AL.: "High-throughput avian molecular sexing by SYBR green-based real-time PCR combined with melting curve analysis", 《BMC BIOTECHNOLOGY》 * |
| JESSICA L. BRUBAKER ET AL.: "A noninvasive, direct real-time PCR method for sex A noninvasive, direct real-time PCR method for sex", 《MOLECULAR ECOLOGY RESOURCES》 * |
| 付晶等: "鹌鹑性别鉴定的分子标记方法", 《东北农业大学学报》 * |
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108575805A (zh) * | 2018-03-14 | 2018-09-28 | 浙江省农业科学院 | 家禽性别的光电探测方法 |
| CN108575805B (zh) * | 2018-03-14 | 2020-11-27 | 浙江省农业科学院 | 家禽性别的光电探测方法 |
| CN108315443A (zh) * | 2018-04-03 | 2018-07-24 | 辽宁大学 | 一种准确简便鉴定沼泽山雀性别的引物及鉴定方法 |
| CN108624702A (zh) * | 2018-05-21 | 2018-10-09 | 天津海睿斯生物科技有限公司 | 一种简便快速鉴别鸟类性别的方法 |
| RU2726433C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани ежа обыкновенного (Erinaceus europaeus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728639C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани кошки домашней (Felis silvestris catus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726432C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для определения ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле |
| RU2726555C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК ткани домашнего осла (Equus asinus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726248C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ выявления ДНК ткани домашнего осла (Equus asinus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728382C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-29 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани собаки домашней (Canis lupus familiaris) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2728662C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани кошки домашней (Felis silvestris catus) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2726242C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
| RU2728660C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ определения ДНК вируса нодулярного дерматита (LSDV) в биологическом материале животных методом ПЦР с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле |
| RU2728612C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-07-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ идентификации ДНК ткани собаки домашней (Canis lupus familiaris) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| RU2725210C1 (ru) * | 2019-10-16 | 2020-06-30 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для идентификации ДНК ткани перепелки обыкновенной (Coturnix coturnix) в сухих кормах и мясных полуфабрикатах |
| CN113621694A (zh) * | 2021-01-28 | 2021-11-09 | 江苏省家禽科学研究所 | 一种用于鹌鹑性别鉴定的pcr引物、试剂盒及其方法 |
| CN113621694B (zh) * | 2021-01-28 | 2023-05-23 | 江苏省家禽科学研究所 | 一种用于鹌鹑性别鉴定的pcr引物、试剂盒及其方法 |
| RU2785381C1 (ru) * | 2021-12-24 | 2022-12-07 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Тест-система для выявления ДНК возбудителя криптоспоридиоза (Cryptosporidiosis) в биологическом материале животных и кормах с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106435008A (zh) | 用于检测鹌鹑性别的引物、试剂盒及检测方法 | |
| CN104805208B (zh) | 用于检测人类kras基因7种热点突变的引物探针组合物、试剂盒及检测方法 | |
| CN114686597A (zh) | 一种银龙鱼性别鉴定snp分子标记及其应用 | |
| CN104774958A (zh) | 鉴别驴、马、狐狸动物源性的引物探针组合物、试剂盒和多重实时荧光定量pcr检测方法 | |
| CN106757379A (zh) | 肺癌多基因变异文库构建方法 | |
| CN104711339B (zh) | 一种鸡显性白羽基因的鉴定方法 | |
| CN106399574A (zh) | 鉴定西瓜种皮颜色的InDel分子标记及其引物和应用 | |
| CN106701910A (zh) | 一种用于鉴定鸽子性别的引物对、试剂盒及方法 | |
| CN112105746B (zh) | 一种rna化学修饰的单基因单碱基分辨率检测方法 | |
| CN104263857B (zh) | 一种快速检测水貂肠炎病毒的纳米pcr试剂盒及其应用 | |
| CN106947817B (zh) | 一种用于蛸科物种鉴定的dna条形码 | |
| CN105586438B (zh) | 用于检测赤羽病毒、口蹄疫病毒和蓝舌病毒的GeXP多重快速检测用引物和检测方法 | |
| CN105567868B (zh) | 用于检测赤羽病毒、牛病毒性腹泻病毒和蓝舌病毒的GeXP多重快速检测用引物和检测方法 | |
| CN108148913A (zh) | 一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法 | |
| CN108754010A (zh) | 一种快速检测总rna样本中基因组dna残留的方法 | |
| CN104611454B (zh) | 一种同时检测蓝狐、貉和犬物种成分的引物组及其应用 | |
| CN103789445B (zh) | 京海黄鸡12周龄体重的分子遗传标记及应用 | |
| CN103757094A (zh) | 一种基于荧光pcr检测tyms基因多态性的方法 | |
| CN203200273U (zh) | 鸡性别快速鉴别试剂盒 | |
| CN106636364A (zh) | 一种快速鉴别龙鱼种类的多重pcr试剂盒及其鉴别方法 | |
| CN106244713B (zh) | 一种检测北京油鸡五趾性状的方法及应用 | |
| JP2022506752A (ja) | がんを診断するための方法及び関連するキット | |
| CN110106276A (zh) | 一种鉴别当归的试剂盒及鉴别方法 | |
| CN105586437B (zh) | 四种进境奶牛携带病毒GeXP检测方法的建立 | |
| Shin et al. | Quantitative evaluation of the molecular marker using droplet digital PCR |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170222 |