CN108575805B - 家禽性别的光电探测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了禽性别的光电探测方法，将由W染色体含有GFP的母鸭或Z染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配收集的待检蛋水平固定，并应静止几秒钟，以使胚盘内部完全静止，并允许胚盘能在顶部自由旋转；在垂直于蛋的纵轴平面上选取蛋壳上20‑50个位点，进行荧光测量，荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式。本发明具有以下的有益效果是能够在种蛋无破损的情况下进行雌性胚蛋的鉴别，而且快速有效，准确率达到百分之一百。
Description
技术领域
本发明属于生物学技术领域，涉及家禽性别的光电探测方法。
背景技术
禽类生物的雌性选择对于提高家禽业的的生产效率具有重要的价值，肉禽和蛋禽的生产性能很高，这两种新陈代谢的巨大差异意味着雄性蛋禽并不具有生产价值。现在，雄性在出生后被筛选出来，立即进行安乐死。这对于整个产业来说都存在很大的道德问题和经济损失。
在我们的待性别鉴定实验动物中，已事先通过技术手段将标记荧光基因定位到了雌性Z染色体(Z*)上的安全位置，获得Z*W个体，然后与ZZ(雄性)杂交，产生以下后代：ZW(雌性)，Z*Z(雄性)，ZZ*(雄性)，ZW(雌性)。在这种情况下，雌性Z染色体上的标记基因将总是由雄性携带。因此，当这一标记基因是绿色荧光蛋白时，在受精蛋刚离开母体时雄性胚胎处于只有约6万个未分化细胞的胚盘阶段，即可在509nm波长下发出绿色荧光。
在另一种情况下，我们将标记荧光基因特异性地设计到W染色体(W*)上的安全位置，然后所有雌性都携带标记基因，并且在胚胎阶段都将在509nm波长下发出荧光。此时可能会存在胚蛋中母体物质荧光的干扰，不过实验证实这部分荧光的强度会快速下降，因此一段时间后，母体荧光蛋白的活性大大降低，即可清楚地区分出胚盘细胞所发出的荧光了。
发明内容
本发明的目的在于提供禽性别的光电探测方法，本发明具有以下的有益效果是能够在种蛋无破损的情况下进行雌性胚蛋的鉴别，而且快速有效，准确率达到百分之一百。
本发明所采用的技术方案按照以下步骤进行：
步骤1：将由W染色体含有GFP的母鸭或Z染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配收集的待检蛋水平固定，并应静止几秒钟，以使胚盘内部完全静止，并允许胚盘能在顶部自由旋转；
步骤2：在垂直于蛋的纵轴平面上选取蛋壳上20-50个位点，进行荧光测量，荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式；
步骤3：当没有来自胚盘的任何荧光时，出现第一种形式；当胚盘有特定的荧光时，就会出现第二种形式；
步骤4：如果是由W染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的胚蛋，所有检测到GFP荧光出现第二种形式的胚蛋为母胚蛋，不能检测到GFP荧光出现第一种形式的胚蛋为公胚蛋；如果是由Z染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的胚蛋，所有检测到GFP荧光出现第二种形式的胚蛋为公胚蛋，不能检测到GFP荧光出现第一种形式的胚蛋为母胚蛋。
进一步，步骤2中荧光测量为509nm荧光测量。
进一步，步骤2中荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式，第一种形式是没有任何波峰出现；在第二种形式中，波峰出现在蛋壳表面的顶部位置。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
实施例1：
检测W染色体含有GFP荧光基因母鸭所产的种蛋，用本发明装置，具体实施步骤与结果如下；
1、收集由W染色体含有GFP荧光基因的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的种蛋10枚，清除蛋壳表面污渍后待检。
2、待检蛋水平固定，并应静止几秒钟，以使胚盘内部完全静止，并允许胚盘能在顶部自由旋转。
3、在垂直于蛋的纵轴平面上选取蛋壳上20个位点，进509nm荧光测量，荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式。第一种形式是没有任何波峰出现；在第二种形式中，波峰出现在蛋壳表面的顶部位置；
4、经检测，检测到GFP荧光出现第二种形式的母胚蛋4枚，未检测到GFP荧光出现第一种形式的公胚蛋6枚，分别收集孵化出壳后性别鉴定，结果表明所有母胚蛋出壳小鸭均为雌性个体，检测的公胚蛋全部为雄性个体。
实施例2：
检测在Z染色体含有GFP荧光基因母鸭所产的种蛋，用本发明装置，具体实施步骤与结果如下；
1、收集由Z染色体含有GFP荧光基因的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的种蛋10枚，清除蛋壳表面污渍后待检。
2、待检蛋水平固定，并应静止几秒钟，以使胚盘内部完全静止，并允许胚盘能在顶部自由旋转。
3、在垂直于蛋的纵轴平面上选取蛋壳上50个位点，进509nm荧光测量，荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式。第一种形式是没有任何波峰出现；在第二种形式中，波峰出现在蛋壳表面的顶部位置；
4、经检测，检测到GFP荧光出现第二种形式的公胚蛋5枚，未检测到GFP荧光出现第一种形式的母胚蛋5枚，分别收集孵化出壳后性别鉴定，结果表明所有母胚蛋出壳小鸭均为性个体，检测的公胚蛋全部为雄性个体。
本发明优点还在于：
1、通过为孵化鉴定胚蛋雌性后，能够减少雄性胚蛋孵化在人工、能源等方面的投入，降低种禽生产成本，同时减少了后期雄性个体出生后就淘汰造成的浪费。
2、将鉴定出来的雄性胚蛋进行加工生产提高种禽生产效率，增加种禽生产的附加值，提高养殖收益。
3、有利于种禽经营生产单位培育品种的有效保护，通过这种方式可以将种禽生产企业培育的优势品种进行雌型单买。
以上所述仅是对本发明的较佳实施方式而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。
Claims (3)
1.家禽性别的光电探测方法，其特征在于按照以下步骤进行：
步骤1：将由W染色体含有GFP的母鸭或Z染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配收集的待检蛋水平固定，并应静止几秒钟，以使胚盘内部完全静止，并允许胚盘能在顶部自由旋转；
步骤2：在垂直于蛋的纵轴平面上选取蛋壳上20-50个位点，进行荧光测量，荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式；
步骤3：当没有来自胚盘的任何荧光时，出现第一种形式；当胚盘有特定的荧光时，就会出现第二种形式；
步骤4：如果是由W染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的胚蛋，所有检测到GFP荧光出现第二种形式的胚蛋为母胚蛋，不能检测到GFP荧光出现第一种形式的胚蛋为公胚蛋；如果是由Z染色体含有GFP的母鸭与不含GFP的公鸭交配生产的胚蛋，所有检测到GFP荧光出现第二种形式的胚蛋为公胚蛋，不能检测到GFP荧光出现第一种形式的胚蛋为母胚蛋。
2.按照权利要求1所述家禽性别的光电探测方法，其特征在于：所述步骤2中荧光测量为509nm荧光测量。
3.按照权利要求1所述家禽性别的光电探测方法，其特征在于：所述步骤2中荧光测量的位置与荧光强度之间的相关性具有两种独特形式，第一种形式是没有任何波峰出现；在第二种形式中，波峰出现在蛋壳表面的顶部位置。
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