CN106083871A - 一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，首先得到洋金花的浸提液；浸提液通过陶瓷膜过滤，纳滤膜浓缩，回收乙醇，得到混合物；混合物用稀盐酸溶解、抽滤后取滤液；滤液萃取后保留水溶液；水相调节pH后，再萃取四次取氯仿溶液；氯仿溶液干燥后回收氯仿，得到总生物碱；总生物碱用碱性氧化铝柱色谱进行分离后，回收氯仿，得到东莨菪碱。本发明提供一种利用浸渍提取技术从洋金花中提取东莨菪碱的方法。为了减少东莨菪碱的提取时间，本发明利用陶瓷膜对提取液进行浓缩，用碱性氧化铝干柱色谱分离出东莨菪碱，经高效液相色谱验证东莨菪碱的纯度。

Description

一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法

技术领域

本发明涉及东莨菪碱提取方法领域，具体是一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法。

背景技术

洋金花为茄科植物曼陀罗的花，又名曼陀罗花、风茄花和白曼陀罗。原产于印度，现主要分布于热带和亚热带地区，少数分布于温带，在世界各地均有大量栽培，资源十分丰富。洋金花生理活性较强，其主要生物活性成分为具有抗胆碱特性的莨菪碱、东莨菪碱及阿托品等生物碱，其次还包括黄酮、多糖、血球凝集素、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、肉豆蔻酸、二氢荧光素等多种成分。在我国洋金花药用历史悠久，应用广泛。公元2世纪名医华陀所创造的中药麻醉剂麻沸散就为洋金花制剂；李时珍在《本草纲目》中对曼陀罗花记载：八月采此花，七月采火麻子花，阴干，等分为末，热酒调服三钱，少顷昏昏如醉，割疮灸火，先宜服此，则不觉苦也；《中国药典》2010版对此花记载：性味辛、温，有毒；具平喘止咳、解痉镇痛之功效；用于哮喘咳嗽，脘腹冷痛，风湿痹痛和外科麻醉。

东莨菪碱是颠茄中药理作用最强的一种生物碱，在常温下为粘稠糖浆状液体，味苦而辛辣；易溶于乙醇、氯仿、丙酮和热水，微溶于苯和石油醚，能与多种无机或有机酸生成结晶的盐。研究表明，东莨菪碱作用与阿托品相似，其散瞳及抑制腺体分泌作用比阿托品强，对呼吸中枢具兴奋作用，但对大脑皮质有明显的抑制作用，此外还有扩张毛细血管、改善微循环以及抗晕船晕车等作用。临床用为镇静药，用于全身麻醉前给药、晕动病、震颤麻痹、狂躁性精神病、有机磷农药中毒等。由于本品既兴奋呼吸又对大脑皮质呈镇静作用，故用于抢救极重型流行性乙型脑炎呼吸衰竭（常伴有剧烈频繁的抽搐）亦有效。氢溴酸东莨菪碱为其氢溴酸盐，白色结晶性粉末，无苦味。能抑制腺体分泌，解除毛细血管痉挛，改善微循环，扩张支气管，解除平滑肌痉挛;对大脑皮质有镇静、安眠及呼吸中枢有兴奋作用。临床上用于麻醉镇痛、止咳、平喘，也可用于控制帕金森病的僵硬和震颤，对胃肠胆肾平滑肌痉挛，胃酸分泌过多，感染性休克，有机磷农药中毒也有效。

东莨菪碱以洋金花为原料提取得到，目前已知的提取方法有很多种，但是，这些方法提取方法普遍存在环境污染、提取纯化效率低及得率低、方法烦琐、溶剂无法回收等缺点，在实际生产中难以得到应用。严重制约产品的价格，影响其在相关领域中的应用。

发明内容 本发明的目的是提供一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，以解决现有技术东莨菪碱的提取过程中存在的问题。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案为：

一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：操作步骤依序如下：将干燥的洋金花粉碎，乙醇溶液恒温浸提，上清液离心，得到浸提液；浸提液通过陶瓷膜过滤，纳滤膜浓缩，回收乙醇，得到混合物；混合物用稀盐酸溶解，抽滤，取滤液；滤液用氯仿萃取三次，保留水溶液；水相加入NaOH溶液调节pH后，用氯仿萃取四次，取氯仿溶液；氯仿溶液用无水Na2SO4干燥，回收氯仿，得到总生物碱；总生物碱用碱性氧化铝柱色谱进行分离后，回收氯仿，得到东莨菪碱。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：具体操作步骤如下：

（1）粉碎：干燥的洋金花用中药粉碎机粉碎后过20～40目筛，得到洋金花粉；

（2）浸提：按质量体积比1:10～20（g/mL）取洋金花和30～60%乙醇溶液，在50～80℃，浸提2～6小时，提取三次；

（3）离心分离：浸提后的溶液，采用碟片式离心机，在8000～10000转/分钟下离心10～20Min，将提取液进行固液分离，以除去纤维素、碎渣等物质，得到上清液；

（4）陶瓷过滤、纳滤浓缩：将离心后的上清液采用分子截留量为10000～40000的陶瓷膜过滤后，再通过截留分子量为200～300的纳滤膜浓缩，使体积浓缩到纯化液体积的1/15，操作压力0.8Mpa，温度20～45℃，得到浓缩液；

（5）回收乙醇：采用旋转蒸发装置，在加热温度为30～60℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0 Mpa下，完全回收乙醇，得到混合物；

（6）酸洗：向得到混合物中添加1%盐酸溶液进行洗脱，初始洋金花质量与1%盐酸溶液体积比为1:1～3（g/mL），得到洗脱液；洗脱液用真空抽滤装置，在室温，真空度为0.6～1.0 MP下，抽滤三次，得到酸洗溶液；酸洗溶液用氯仿萃取三次，三次萃取的氯仿与酸洗溶液的体积比分别为1:1～5、1:2～8及1:2～8，保留水溶液，除去脂溶性杂质；

（7）碱洗：萃取后的水溶液用10%NaOH溶液调节pH8～11，然后用氯仿萃取四次，四次萃取氯仿与水溶液的体积比分别为：1:1～5、1:2～4、1:2～6及1:2～6，保留氯仿溶液，除去水溶性杂质；

（8）回收氯仿得到总碱：向氯仿溶液中加入无水Na2SO4脱水干燥至无片状晶体析出，然后将干燥后的氯仿溶液用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到总生物碱；

（9）东莨菪碱分离纯化：按质量体积比1:1～4（g/mL）取总生物碱和氯仿溶液，将总生物碱溶解，然后采用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱碱行分离；所用的的分离柱为玻璃层析柱，填充物为100～200目的碱性氧化铝，将碱性氧化铝和氯仿按质量体积比1:1～3（g/mL）混合均匀后装柱，碱性氧化铝的添加量到达柱高度的2/3为宜；之后，向柱中加入柱体积10～20%总生物碱溶解液，然后以氯仿为洗脱液在室温下进行洗脱，层析柱上端接恒流泵，从氯仿瓶中自动进样，控制进速度为1mL/Min；用10ml小试管置于自动收集器收集洗脱液，并控制出样速度为1mL/Min；取少量洗脱液，按洗脱液与1%的盐酸溶液的体积比为1：1混合均匀后，加入少量碘-碘化钾试剂进行检测反应，收集检测反应中有黑色针状沉淀生成的洗脱液，用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到东莨菪碱。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（2）中所述在40-80℃条件浸提，避免在高温条件下，东莨菪碱结构易发生变化。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（4）中所述用陶瓷膜和纳滤膜对浸提液进行过滤和浓缩：将上清液离心后通过陶瓷膜，东莨菪碱和小分子物质通过，而大分子物质被截留；然后再通过纳滤膜对其进行浓缩，富集东莨菪碱，绿色无污染，极大缩短了实验周期。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（5）中所述的在温度为30～60℃下回收乙醇味，浓缩提取液，温度过高会导致酒精爆沸，使得提取液进入旋蒸装置而导致东莨菪碱的提取率降低。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（7）中所述将萃取后的水溶液用NaOH调节pH至 8～11，然后用氯仿萃取四次，使得水溶性的东莨菪碱的盐在碱性条件下变溶于氯仿的东莨菪碱，然后通过氯仿萃取，除去水溶性杂质。

所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（9）中所述用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱进行分离，所用的分离柱为玻璃层析柱，分离柱应垂直固定在铁支架上，填充物为100～200目的碱性氧化铝，洗脱液为氯仿，洗脱过程中应保证溶剂液面始终高于吸附剂表面，且整个实验过程中始终不能破坏吸附剂表面。

本发明提供一种利用浸渍提取技术从洋金花中提取东莨菪碱的方法。为了减少东莨菪碱的提取时间，本发明利用陶瓷膜对提取液进行浓缩，用碱性氧化铝干柱色谱分离出东莨菪碱，经高效液相色谱验证东莨菪碱的纯度。

与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：

（1）该分离方法对环境污染小

本发明过程采用乙醇溶液作为提取剂，氯仿作为洗脱剂，两种试剂都可回收利用，所以该方法能有效地节省能源消耗并减少对环境的污染。

（2）东莨菪碱提取纯化的技术突破

长期以来，由于东莨菪碱的提取方法不仅成本高、步骤繁琐而且提取率低，严重制约了产品的价格。本方法采用膜分离技术极大缩短了提取周期，还通过优化一系列工艺参数，使得东莨菪碱的提取纯度和得率大大提高了。

（3）纯化工艺采用膜分离技术

本研究采用陶瓷膜和纳滤膜进行过滤和浓缩，不仅可以有机溶剂，而且技术能耗小，安全有效，工艺简单，操作也方便，自动化比较强。

附图说明

图1为本发明方法流程图。

图2为本发明制得的东莨菪碱高效液相色谱图。

具体实施方式

一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，操作步骤依序如下：将干燥的洋金花粉碎，乙醇溶液恒温浸提，上清液离心，得到浸提液；浸提液通过陶瓷膜过滤，纳滤膜浓缩，回收乙醇，得到混合物；混合物用稀盐酸溶解，抽滤，取滤液；滤液用氯仿萃取三次，保留水溶液；水相加入NaOH溶液调节pH后，用氯仿萃取四次，取氯仿溶液；氯仿溶液用无水Na2SO4干燥，回收氯仿，得到总生物碱；总生物碱用碱性氧化铝柱色谱进行分离后，回收氯仿，得到东莨菪碱。

如图1所示，本发明一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，具体操作步骤如下：

（1）粉碎：干燥的洋金花用中药粉碎机粉碎后过20～40目筛，得到洋金花粉；

（2）浸提：按质量体积比1:10～20（g/mL）取洋金花和30～60%乙醇溶液，在50～80℃，浸提2～6小时，提取三次；

（3）离心分离：浸提后的溶液，采用碟片式离心机，在8000～10000转/分钟下离心10～20 Min，将提取液进行固液分离，以除去纤维素、碎渣等物质，得到上清液；

（4）陶瓷过滤、纳滤浓缩：将离心后的上清液采用分子截留量为10000～40000的陶瓷膜过滤后，再通过截留分子量为200～300的纳滤膜浓缩，使体积浓缩到纯化液体积的1/15，操作压力0.8Mpa，温度20～45℃，得到浓缩液；

（5）回收乙醇：采用旋转蒸发装置，在加热温度为30～60℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0 Mpa下，完全回收乙醇，得到混合物；

（6）酸洗：向得到混合物中添加1%盐酸溶液进行洗脱，初始洋金花质量与1%盐酸溶液体积比为1:1～3（g/mL），得到洗脱液；洗脱液用真空抽滤装置，在室温，真空度为0.6～1.0 MP下，抽滤三次，得到酸洗溶液；酸洗溶液用氯仿萃取三次，三次萃取的氯仿与酸洗溶液的体积比分别为1:1～5、1:2～8及1:2～8，保留水溶液，除去脂溶性杂质；

（7）碱洗：萃取后的水溶液用10%NaOH溶液调节pH8～11，然后用氯仿萃取四次，四次萃取氯仿与水溶液的体积比分别为：1:1～5、1:2～4、1:2～6及1:2～6，保留氯仿溶液，除去水溶性杂质；

（8）回收氯仿得到总碱：向氯仿溶液中加入无水Na2SO4脱水干燥至无片状晶体析出，然后将干燥后的氯仿溶液用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到总生物碱；

（9）东莨菪碱分离纯化：按质量体积比1:1～4（g/mL）取总生物碱和氯仿溶液，将总生物碱溶解，然后采用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱碱行分离；所用的的分离柱为玻璃层析柱，填充物为100～200目的碱性氧化铝，将碱性氧化铝和氯仿按质量体积比1:1～3（g/mL）混合均匀后装柱，碱性氧化铝的添加量到达柱高度的2/3为宜；之后，向柱中加入柱体积10～20%总生物碱溶解液，然后以氯仿为洗脱液在室温下进行洗脱，层析柱上端接恒流泵，从氯仿瓶中自动进样，控制进速度为1mL/Min；用10ml小试管置于自动收集器收集洗脱液，并控制出样速度为1mL/Min；取少量洗脱液，按洗脱液与1%的盐酸溶液的体积比为1：1混合均匀后，加入少量碘-碘化钾试剂进行检测反应，收集检测反应中有黑色针状沉淀生成的洗脱液，用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到东莨菪碱。

步骤（2）中在40-80℃条件浸提，避免在高温条件下，东莨菪碱结构易发生变化。

步骤（4）中用陶瓷膜和纳滤膜对浸提液进行过滤和浓缩：将上清液离心后通过陶瓷膜，东莨菪碱和小分子物质通过，而大分子物质被截留；然后再通过纳滤膜对其进行浓缩，富集东莨菪碱，绿色无污染，极大缩短了实验周期。

步骤（5）中在温度为30～60℃下回收乙醇味，浓缩提取液，温度过高会导致酒精爆沸，使得提取液进入旋蒸装置而导致东莨菪碱的提取率降低。

步骤（7）中将萃取后的水溶液用NaOH调节pH至 8～11，然后用氯仿萃取四次，使得水溶性的东莨菪碱的盐在碱性条件下变溶于氯仿的东莨菪碱，然后通过氯仿萃取，除去水溶性杂质。

步骤（9）中用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱进行分离，所用的分离柱为玻璃层析柱，分离柱应垂直固定在铁支架上，填充物为100～200目的碱性氧化铝，洗脱液为氯仿，洗脱过程中应保证溶剂液面始终高于吸附剂表面，且整个实验过程中始终不能破坏吸附剂表面。如图2所示，经高效液相色谱验证，分离得到的东莨菪碱较纯，峰面积达98.27%。

具体实施例1：

（1）粉碎：干燥的洋金花用中药粉碎机粉碎后过20目筛，得到洋金花粉；

（2）浸提：按质量体积比1:10（g/mL）取洋金花和30%乙醇溶液，在50℃，浸提2小时，提取三次；

（3）离心分离：浸提后的溶液，采用碟片式离心机，在8000转/分钟下离心10Min，将提取液进行固液分离，以除去纤维素、碎渣等物质，得到上清液；

（4）陶瓷过滤、纳滤浓缩：将离心后的上清液采用分子截留量为10000的陶瓷膜过滤后，再通过截留分子量为200的纳滤膜浓缩，使体积浓缩到纯化液体积的1/15，操作压力0.8Mpa，温度20～45℃，得到浓缩液；

（5）回收乙醇：采用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30℃，冷凝水冷却，真空度为0.6Mpa下，完全回收乙醇，得到混合物；

（6）酸洗：向得到混合物中添加1%盐酸溶液进行洗脱，初始洋金花质量与1%盐酸溶液体积比为1:1（g/mL），得到洗脱液。洗脱液用真空抽滤装置，在室温，真空度为0.6MP下，抽滤三次，得到酸洗溶液。酸洗溶液用氯仿萃取三次，三次萃取的氯仿与酸洗溶液的体积比分别为1:1、1:2及1:2，保留水溶液，除去脂溶性杂质；

（7）碱洗：萃取后的水溶液用10%NaOH溶液调节pH为8，然后用氯仿萃取四次，四次萃取氯仿与水溶液的体积比分别为：1:1、1:2、1:2及1:2，保留氯仿溶液，除去水溶性杂质；

（8）回收氯仿得到总碱：向氯仿溶液中加入无水Na2SO4脱水干燥至无片状晶体析出，然后将干燥后的氯仿溶液用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30℃，冷凝水冷却，真空度为0.6Mpa下完全回氯仿，得到总生物碱；

（9）东莨菪碱分离纯化：按质量体积比1:1（g/mL）取总生物碱和氯仿溶液，将总生物碱溶解， 然后采用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱碱行分离。所用的的分离柱为玻璃层析柱，填充物为100～200目的碱性氧化铝，将碱性氧化铝和氯仿按质量体积比1:1（g/mL）混合均匀后装柱，碱性氧化铝的添加量到达柱高度的2/3为宜；之后，向柱中加入柱体积10%总生物碱溶解液，然后以氯仿为洗脱液在室温下进行洗脱，层析柱上端接恒流泵，从氯仿瓶中自动进样，控制进速度为1mL/Min。用10ml小试管置于自动收集器收集洗脱液，并控制出样速度为1mL/Min。取少量洗脱液，按洗脱液与1%的盐酸溶液的体积比为1：1混合均匀后，加入少量碘-碘化钾试剂进行检测反应，收集检测反应中有黑色针状沉淀生成的洗脱液，用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30℃，冷凝水冷却，真空度为0.6Mpa下完全回收氯仿，得到东莨菪碱。

具体实施例2：

（1）粉碎：干燥的洋金花用中药粉碎机粉碎后过40目筛，得到洋金花粉；

（2）浸提：按质量体积比1:20（g/mL）取洋金花和60%乙醇溶液，在80℃，浸提6小时，提取三次；

（3）离心分离：浸提后的溶液，采用碟片式离心机，在8000～10000转/分钟下离心20Min，将提取液进行固液分离，以除去纤维素、碎渣等物质，得到上清液；

（4）陶瓷过滤、纳滤浓缩：将离心后的上清液采用分子截留量为40000的陶瓷膜过滤后，再通过截留分子量为200～300的纳滤膜浓缩，使体积浓缩到纯化液体积的1/15，操作压力0.8Mpa，温度20～45℃，得到浓缩液；

（5）回收乙醇：采用旋转蒸发仪装置，在加热温度为60℃，冷凝水冷却，真空度为1.0Mpa下，完全回收乙醇，得到混合物；

（6）酸洗：向得到混合物中添加1%盐酸溶液进行洗脱，初始洋金花质量与1%盐酸溶液体积比为1:3（g/mL），得到洗脱液。洗脱液用真空抽滤装置，在室温，真空度为1.0 MP下，抽滤三次，得到酸洗溶液。酸洗溶液用氯仿萃取三次，三次萃取的氯仿与酸洗溶液的体积比分别为1:5、1:8及1:8，保留水溶液，除去脂溶性杂质；

（7）碱洗：萃取后的水溶液用10%NaOH溶液调节pH为11，然后用氯仿萃取四次，四次萃取氯仿与水溶液的体积比分别为：1:5、1:4、1:6及1:6，保留氯仿溶液，除去水溶性杂质；

（8）回收氯仿得到总碱：向氯仿溶液中加入无水Na2SO4脱水干燥至无片状晶体析出，然后将干燥后的氯仿溶液用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到总生物碱；

（9）东莨菪碱分离纯化：按质量体积比1:4（g/mL）取总生物碱和氯仿溶液，将总生物碱溶解， 然后采用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱碱行分离。所用的的分离柱为玻璃层析柱，填充物为100～200目的碱性氧化铝，将碱性氧化铝和氯仿按质量体积比1:3（g/mL）混合均匀后装柱，碱性氧化铝的添加量到达柱高度的2/3为宜；之后，向柱中加入柱体积20%总生物碱溶解液，然后以氯仿为洗脱液在室温下进行洗脱，层析柱上端接恒流泵，从氯仿瓶中自动进样，控制进速度为1mL/Min。用10ml小试管置于自动收集器收集洗脱液，并控制出样速度为1mL/Min。取少量洗脱液，按洗脱液与1%的盐酸溶液的体积比为1：1混合均匀后，加入少量碘-碘化钾试剂进行检测反应。收集检测反应中有黑色针状沉淀生成的洗脱液，用旋转蒸发仪装置，在加热温度为50℃，冷凝水冷却，真空度为1.0Mpa下完全回收氯仿，得到东莨菪碱。

Claims (7)

1.一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：操作步骤依序如下：将干燥的洋金花粉碎，乙醇溶液恒温浸提，上清液离心，得到浸提液；浸提液通过陶瓷膜过滤，纳滤膜浓缩，回收乙醇，得到混合物；混合物用稀盐酸溶解，抽滤，取滤液；滤液用氯仿萃取三次，保留水溶液；水相加入NaOH溶液调节pH后，用氯仿萃取四次，取氯仿溶液；氯仿溶液用无水Na2SO4干燥，回收氯仿，得到总生物碱；总生物碱用碱性氧化铝柱色谱进行分离后，回收氯仿，得到东莨菪碱。

2.根据权利要求1所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：具体操作步骤如下：

（1）粉碎：干燥的洋金花用中药粉碎机粉碎后过20～40目筛，得到洋金花粉；

（2）浸提：按质量体积比1:10～20（g/mL）取洋金花和30～60%乙醇溶液，在50～80℃，浸提2～6小时，提取三次；

（3）离心分离：浸提后的溶液，采用碟片式离心机，在8000～10000转/分钟下离心10～20Min，将提取液进行固液分离，以除去纤维素、碎渣等物质，得到上清液；

（4）陶瓷过滤、纳滤浓缩：将离心后的上清液采用分子截留量为10000～40000的陶瓷膜过滤后，再通过截留分子量为200～300的纳滤膜浓缩，使体积浓缩到纯化液体积的1/15，操作压力0.8Mpa，温度20～45℃，得到浓缩液；

（5）回收乙醇：采用旋转蒸发装置，在加热温度为30～60℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0 Mpa下，完全回收乙醇，得到混合物；

（6）酸洗：向得到混合物中添加1%盐酸溶液进行洗脱，初始洋金花质量与1%盐酸溶液体积比为1:1～3（g/mL），得到洗脱液；洗脱液用真空抽滤装置，在室温，真空度为0.6～1.0 MP下，抽滤三次，得到酸洗溶液；酸洗溶液用氯仿萃取三次，三次萃取的氯仿与酸洗溶液的体积比分别为1:1～5、1:2～8及1:2～8，保留水溶液，除去脂溶性杂质；

（7）碱洗：萃取后的水溶液用10%NaOH溶液调节pH8～11，然后用氯仿萃取四次，四次萃取氯仿与水溶液的体积比分别为：1:1～5、1:2～4、1:2～6及1:2～6，保留氯仿溶液，除去水溶性杂质；

（8）回收氯仿得到总碱：向氯仿溶液中加入无水Na2SO4脱水干燥至无片状晶体析出，然后将干燥后的氯仿溶液用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到总生物碱；

（9）东莨菪碱分离纯化：按质量体积比1:1～4（g/mL）取总生物碱和氯仿溶液，将总生物碱溶解，然后采用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱碱行分离；所用的的分离柱为玻璃层析柱，填充物为100～200目的碱性氧化铝，将碱性氧化铝和氯仿按质量体积比1:1～3（g/mL）混合均匀后装柱，碱性氧化铝的添加量到达柱高度的2/3为宜；之后，向柱中加入柱体积10～20%总生物碱溶解液，然后以氯仿为洗脱液在室温下进行洗脱，层析柱上端接恒流泵，从氯仿瓶中自动进样，控制进速度为1mL/Min；用10ml小试管置于自动收集器收集洗脱液，并控制出样速度为1mL/Min；取少量洗脱液，按洗脱液与1%的盐酸溶液的体积比为1：1混合均匀后，加入少量碘-碘化钾试剂进行检测反应，收集检测反应中有黑色针状沉淀生成的洗脱液，用旋转蒸发仪装置，在加热温度为30～50℃，冷凝水冷却，真空度为0.6～1.0Mpa下完全回氯仿，得到东莨菪碱。

3.根据权利要求2所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（2）中所述在40-80℃条件浸提，避免在高温条件下，东莨菪碱结构易发生变化。

4.根据权利要求2所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（4）中所述用陶瓷膜和纳滤膜对浸提液进行过滤和浓缩：将上清液离心后通过陶瓷膜，东莨菪碱和小分子物质通过，而大分子物质被截留；然后再通过纳滤膜对其进行浓缩，富集东莨菪碱，绿色无污染，极大缩短了实验周期。

5.根据权利要求2所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（5）中所述的在温度为30～60℃下回收乙醇味，浓缩提取液，温度过高会导致酒精爆沸，使得提取液进入旋蒸装置而导致东莨菪碱的提取率降低。

6.根据权利要求2所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（7）中所述将萃取后的水溶液用NaOH调节pH至 8～11，然后用氯仿萃取四次，使得水溶性的东莨菪碱的盐在碱性条件下变溶于氯仿的东莨菪碱，然后通过氯仿萃取，除去水溶性杂质。

7.根据权利要求2所述的一种洋金花中东莨菪碱的提取纯化方法，其特征在于：步骤（9）中所述用碱性氧化铝色谱柱将东莨菪碱和其它生物碱进行分离，所用的分离柱为玻璃层析柱，分离柱应垂直固定在铁支架上，填充物为100～200目的碱性氧化铝，洗脱液为氯仿，洗脱过程中应保证溶剂液面始终高于吸附剂表面，且整个实验过程中始终不能破坏吸附剂表面。