CN104698107B - 一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 - Google Patents
一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104698107B CN104698107B CN201510129885.XA CN201510129885A CN104698107B CN 104698107 B CN104698107 B CN 104698107B CN 201510129885 A CN201510129885 A CN 201510129885A CN 104698107 B CN104698107 B CN 104698107B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extraction
- soil sample
- soil
- antibiotic
- antibiotics
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明提供了一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，首先将土样冷冻干燥后研磨，称取过筛后的土样以及硅藻土，均匀混合后加入底部垫有纤维素滤膜的萃取池中，用硅藻土填满萃取池后旋紧萃取池盖后放入加速溶剂萃取仪中循环萃取，萃取后用氮气吹扫，萃取溶剂为甲醇与pH为5～6缓冲液的混合液，收集萃取液导入固相萃取小柱进行富集净化，后用甲醇作为洗脱液将固相萃取柱中的抗生素洗脱出来，用氮气吹扫浓缩，最后用甲醇定容，并用高效液相色谱串联质谱进行检测。本方法自动化程度高，步骤精简，同时具有高回收率、短耗时、少耗材的优点，有利于进行大批量检测土壤样品中抗生素残留的研究。
Description
技术领域
本发明涉及一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，属于化学领域。
背景技术
我国目前是抗生素使用大国，每年在医用和农用上使用的抗生素总量达到上千万吨，这些抗生素并不能完全被生物体完全吸收或分解，进入生物体内的抗生素约30％-90％均以原药或代谢产物的形势经动物排泄物排放到环境中。随着集约化畜牧业快速发展，大量抗生素或化工合成的抗生素类药物作为兽药或饲料添加剂用于养殖，而未经处理的畜禽粪便作为有机肥用于农业生产是抗生素进入土壤环境的主要途径之一，且每年重复使用有机肥料的过程会增加抗生素在土壤中的累积。除此之外，含有大量抗生素的生活污水和养殖废水在经过基础的污水处理程序后无法完全去除废水中的抗生素，这些含有抗生素的处理水最终汇入环境水体中，在地表水与地下水交互的过程中，必然经过土壤层的过滤，部分抗生素会停留在土壤中发生一系列物理化学作用，甚至被土壤中的微生物利用而残留在土壤中。残留在土壤中的抗生素极易向植物体内富集，且容易促进土壤中的微生物基因进化产生抗性基因造成生态污染。
由于土壤成分复杂且含有大量有机质，因此要从中提取出目标抗生素的前处理过程比较复杂，需要经过萃取、净化、浓缩等步骤，且经过前处理后的样品要求尽量降低基质影响以加强检测的准确性。目前已有很多前处理方法提取土壤中的抗生素，传统的方法是使用微波辅助萃取法，该方法是在一定微波条件和温度条件下使用萃取液对土样进行萃取，同时辅助涡旋、离心等方法收集萃取液，再使用固相萃取方法净化、浓缩萃取液。该方法在处理一批样品的耗时较长，需要重复性操作较多耗费人力，使用的有机试剂较多且存在少量溶剂挥发。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，自动化程度高，步骤精简，同时具有高回收率、短耗时、少耗材的优点，有利于进行大批量检测土壤样品中抗生素残留的研究。
本发明为解决其技术问题所采用的技术方案是：提供了一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥，将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比为1～5：1～5，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂为甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，甲醇与柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的体积比为1:0.5～1，在萃取温度为40～100℃、萃取压力为1000～1500psi的环境下，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取2～3次，每次萃取时间为2～15min；
(4)用相当于萃取池容积的50％～150％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫，收集静态循环萃取后的萃取液；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇进行定容，得到待测的抗生素样本；
(6)利用高效液相色谱串联质谱对待测的抗生素样本进行测定。
步骤(1)中对土壤样本进行冷冻干燥采用以下方法：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃。
步骤(2)中，土壤样本与硅藻土的质量比为1：4。
步骤(3)中，萃取温度为100℃，萃取压力为1500psi，静态循环萃取次数为3次，每次萃取时间为15min。
步骤(4)中，用相当于萃取池体积的50％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s。
步骤(6)中，所述高效液相色谱串联质谱流动相分别为乙腈和含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，测定时采用梯度洗脱检测，质谱模式为阳离子模式。
本发明基于其技术方案所具有的有益效果在于：
(1)本发明首先对土壤样本冷冻、干燥、磨碎，再与硅藻土混合，硅藻土能够作为分散剂使用，也可作为干燥剂，有利于提高萃取的效率和回收率；
(2)本发明将混合后的土壤样本与硅藻土混合，利用ASE150加速溶剂萃取仪萃取，在萃取温度为40～100℃、萃取压力为1000～1500psi的环境下，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取2～3次，每次萃取时间为2～15min，相比于使用微波超声等方法，提取操作简便，自动化程度高，一次性得到全部萃取液；并且提取时间短，整个萃取过程消耗的时间约为45-50分钟，相比常规超声的提取方法，节省人力，节省近一半的时间；同时在该萃取条件下，可以高效提取土壤样品中残留的10种抗生素，回收率达到83％-110％；本发明将加速溶剂萃取方法应用于提取土壤中的抗生素，与传统的微波萃取方法相比，省略了漩涡、离心等辅助步骤，高自动化节省人力，萃取溶剂使用量降低环境友好，萃取过程全封闭提升安全性，适用于大批量处理土壤样品；
(3)本发明在加速萃取方法之后对收集的萃取液进行固相萃取，进一步净化浓缩萃取液，得到小体积高浓度的样品，经过固相萃取之后的溶液在检测时能够降低样品基质影响，降低抗生素的检测限，提高检测率；
(4)本发明的萃取溶剂采用甲醇和pH为5～6的缓冲液的混合液，加入缓冲液能够稳定萃取液的酸碱度，能够提高抗生素的回收率；同时，缓冲对中作为共轭酸的柠檬酸的pKa为4.76，接近于配置缓冲液的目标pH值5～6，且柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的缓冲范围为3.0-6.6，缓冲液的pH值5～6在缓冲对的缓冲范围3.0-6.6之内，将配置后的缓冲液与甲醇混合制成混合液，萃取时无沉淀，回收率高；
(5)本发明的步骤中有机溶剂使用量少，采用的加速溶剂萃取重复三次，对于每1g土壤样本而言，每次使用的溶剂量为15mL，最终提取出含有目标抗生素的萃取液共45mL，对环境友好，适用于大批量处理土壤样品；
(6)本发明选用高效液相色谱串联质谱检测样品，灵敏度高，选择性好，基质干扰程度低。
附图说明
图1是土壤样本中10种磺胺类、大环内酯类和四环素类抗生素的回收率。
图2是高效液相色谱串联质谱分析仪检测10种抗生素的离子谱图。
图3是不同加速溶剂萃取参数条件下土样中10种抗生素回收率对比。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
本发明提供了一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，可以用于富集提取土样中磺胺类、大环内酯类和四环素类共10种抗生素，采用以下仪器与试剂：
仪器：ASE150加速溶剂萃取仪(Dionex，德国)；HPLC-MSMS高效液相色谱串联质谱(Agilent，美国)；Extend-C18色谱柱(1.8μm，2.1mmi.d.×100mm)；SPE固相萃取装置。
试剂：所使用的试剂均为色谱纯，包括甲醇、柠檬酸、柠檬酸钠、高纯氮气、超纯水。
实施例1：
本发明的一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法具体包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃；将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比可以为1～5：1～5，本实施例中土壤样本的质量为1g，硅藻土的质量为4g，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂可以为体积比为1:0.5～1的甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，本实施例中缓冲液的pH值为5、甲醇和缓冲液为等体积；设置ASE150加速溶剂萃取仪的参数：萃取温度为100℃、萃取压力为1500psi、静止时间15min、萃取循环次数3次、萃取溶剂体积50％、氮气吹扫时间60s，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取3次，每次萃取时间为15min；
(4)用相当于萃取池体积的50％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s，收集静态循环萃取后的萃取液；整个加速溶剂萃取过程用时约45～50min；图1为土壤样本中10种磺胺类、大环内酯类和四环素类抗生素的回收率；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇定容至1mL，得到待测的抗生素样本等待上机分析；
(6)利用AgilentHPLC-MS/MS高效液相色谱串联质谱分析仪对待测的抗生素样本进行测定，分析条件具体为：流动相A为乙腈，流动相B为含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，按照梯度洗脱条件检测样品中的抗生素，梯度洗脱条件为：初始流动相A为15％，保持2min后，在3min内上升至90％并保持2min，后在3min内下降到15％并保持5min，梯度洗脱总用时15min。色谱柱温度为40℃，进样体积为5μL，质谱模式为阳离子模式ESI+，干燥器温度为325℃，毛细管电压为3500psi，喷雾压力为40psi。对于化合物的定量采用两组离子对，并从中选择一组仪器响应较高的离子对用于定量目标化合物。图2为高效液相色谱串联质谱分析仪检测10种抗生素的离子谱图，波峰处的数值为出峰时间，单位为min。
实施例2：
本发明的一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法具体包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃；将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比可以为1～5：1～5，本实施例中土壤样本的质量为1g，硅藻土的质量为4g，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂可以为体积比为1:0.5～1的甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，本实施例中缓冲液的pH值为5、甲醇和缓冲液为等体积；设置ASE150加速溶剂萃取仪的参数：萃取温度为40℃、萃取压力为1500psi、静止时间2min、萃取循环次数2次、萃取溶剂体积50％、氮气吹扫时间60s，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取2次，每次萃取时间为2min；
(4)用相当于萃取池体积的150％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s，收集静态循环萃取后的萃取液；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇定容至1mL，得到待测的抗生素样本等待上机分析；
(6)利用AgilentHPLC-MS/MS高效液相色谱串联质谱分析仪对待测的抗生素样本进行测定，分析条件具体为：流动相A为乙腈，流动相B为含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，按照梯度洗脱条件检测样品中的抗生素，梯度洗脱条件为：初始流动相A为15％，保持2min后，在3min内上升至90％并保持2min，后在3min内下降到15％并保持5min，梯度洗脱总用时15min。色谱柱温度为40℃，进样体积为5μL，质谱模式为阳离子模式ESI+，干燥器温度为325℃，毛细管电压为3500psi，喷雾压力为40psi。对于化合物的定量采用两组离子对，并从中选择一组仪器响应较高的离子对用于定量目标化合物。
实施例3：
本发明的一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法具体包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃；将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比可以为1～5：1～5，本实施例中土壤样本的质量为1g，硅藻土的质量为4g，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂可以为体积比为1:0.5～1的甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，本实施例中缓冲液的pH值为5、甲醇和缓冲液为等体积；设置ASE150加速溶剂萃取仪的参数：萃取温度为50℃、萃取压力为1500psi、静止时间2min、萃取循环次数2次、萃取溶剂体积50％、氮气吹扫时间60s，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取2次，每次萃取时间为2min；
(4)用相当于萃取池体积的50％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s，收集静态循环萃取后的萃取液；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇定容至1mL，得到待测的抗生素样本等待上机分析；
(6)利用AgilentHPLC-MS/MS高效液相色谱串联质谱分析仪对待测的抗生素样本进行测定，分析条件具体为：流动相A为乙腈，流动相B为含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，按照梯度洗脱条件检测样品中的抗生素，梯度洗脱条件为：初始流动相A为15％，保持2min后，在3min内上升至90％并保持2min，后在3min内下降到15％并保持5min，梯度洗脱总用时15min。色谱柱温度为40℃，进样体积为5μL，质谱模式为阳离子模式ESI+，干燥器温度为325℃，毛细管电压为3500psi，喷雾压力为40psi。对于化合物的定量采用两组离子对，并从中选择一组仪器响应较高的离子对用于定量目标化合物。
实施例4：
本发明的一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法具体包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃；将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比可以为1～5：1～5，本实施例中土壤样本的质量为1g，硅藻土的质量为4g，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂可以为体积比为1:0.5～1的甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，本实施例中缓冲液的pH值为5、甲醇和缓冲液为等体积；设置ASE150加速溶剂萃取仪的参数：萃取温度为50℃、萃取压力为1500psi、静止时间15min、萃取循环次数3次、萃取溶剂体积50％、氮气吹扫时间60s，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取3次，每次萃取时间为15min；
(4)用相当于萃取池体积的50％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s，收集静态循环萃取后的萃取液；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇定容至1mL，得到待测的抗生素样本等待上机分析；
(6)利用AgilentHPLC-MS/MS高效液相色谱串联质谱分析仪对待测的抗生素样本进行测定，分析条件具体为：流动相A为乙腈，流动相B为含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，按照梯度洗脱条件检测样品中的抗生素，梯度洗脱条件为：初始流动相A为15％，保持2min后，在3min内上升至90％并保持2min，后在3min内下降到15％并保持5min，梯度洗脱总用时15min。色谱柱温度为40℃，进样体积为5μL，质谱模式为阳离子模式ESI+，干燥器温度为325℃，毛细管电压为3500psi，喷雾压力为40psi。对于化合物的定量采用两组离子对，并从中选择一组仪器响应较高的离子对用于定量目标化合物。
以上四组实施例中的优化参数如下表所示：
表1优化参数表
其中M4为实施例1，M1为实施例2，M2为实施例3，M3为实施例4，再针对每组实验组增加一个未加标准的空白土样和一个加入100ng混合抗生素标准的土样，回收率的计算公式如下：
其中：
R：回收率，％；
100：向土样中加入的10种抗生素混合标准的质量100ng；
C1：未加入混合标准液的样品的检测浓度，ng/mL；
C2：加入混合标准溶液的样品的检测浓度，ng/mL；
V1：未加入混合标准液的样品上机前定容体积，mL；
V2：加入混合标准溶液的样品上机前定容体积，mL；
V1＝V2＝1mL。
图3为不同加速溶剂萃取参数条件下土样中10种抗生素回收率对比，由图3可知，回收率高的方法为编号M4的方法，也就是本发明最终选定的方法。结合表1中四种方法的参数设定：对比实验组M1和M2可知，萃取液体积的增加对萃取回收率影响不大，为节约有机试剂减轻环境负担，选择相当于萃取池体积50％的萃取液；对比实验组M2和M3可知，萃取静止时间和循环次数对实验结果影响很大，萃取时间适当增加可以提高回收率，综合考虑实验耗时和回收率，选择萃取时间为15min，循环次数由2次增加到3次；对比实验组M3和M4可知，萃取温度增加50℃，提取土壤中十种抗生素的回收率均有不同程度的提高，因此选择萃取温度为100℃。
本发明选择实验组M4的快速萃取方法参数，萃取土壤样品自动化程度高，省人力短耗时，总用时45-50min；相比之下使用的有机试剂较少，资源节约，环境友好。
Claims (6)
1.一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)采集土壤样本，对土壤样本进行冷冻和干燥，将冷冻和干燥后的土壤样本磨碎，过100～200目筛后待用；
(2)取经步骤(1)处理后的土壤样本与硅藻土均匀混合，土壤样本与硅藻土的质量比为1～5：1～5，将混合后的土壤样本与硅藻土放入底部放置有纤维素滤膜的萃取池中，再用硅藻土填满萃取池，旋紧萃取池上方的盖子，放入ASE150加速溶剂萃取仪中；
(3)制备萃取溶剂，所述萃取溶剂为甲醇和pH为5～6的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的混合液，甲醇与柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液的体积比为1:0.5～1，在萃取温度为40～100℃、萃取压力为1000～1500psi的环境下，用萃取液对土壤样本与硅藻土进行静态循环萃取2～3次，每次萃取时间为2～15min；
(4)用相当于萃取池容积的50％～150％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫，收集静态循环萃取后的萃取液；
(5)依次用1～2倍固相萃取柱容积的甲醇和等体积的超纯水在重力作用下活化固相萃取柱，在真空泵制造的负压条件下将萃取液导入固相萃取柱，萃取液全部导入后用1～2倍固相萃取柱容积的超纯水清洗固相萃取柱，用2～3倍固相萃取柱容积的甲醇将固相萃取柱中的目标抗生素在重力作用下洗脱出，得到含有目标抗生素的浓缩洗脱液，利用氮气吹扫浓缩洗脱液，对氮气吹扫后的浓缩洗脱液用甲醇进行定容，得到待测的抗生素样本；
(6)利用高效液相色谱串联质谱对待测的抗生素样本进行测定。
2.根据权利要求1所述的快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于：步骤(1)中对土壤样本进行冷冻干燥采用以下方法：将土壤样本放入冰箱内进行预冻，再将预冻后的土壤样本置于冷冻干燥仪中，冷冻干燥温度为-40℃。
3.根据权利要求1所述的快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于：步骤(2)中，土壤样本与硅藻土的质量比为1：4。
4.根据权利要求1所述的快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于：步骤(3)中，萃取温度为100℃，萃取压力为1500psi，静态循环萃取次数为3次，每次萃取时间为15min。
5.根据权利要求1所述的快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于：步骤(4)中，用相当于萃取池容积的50％的萃取溶剂冲洗萃取池，然后用氮气吹扫60s。
6.根据权利要求1所述的快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法，其特征在于：步骤(6)中，所述高效液相色谱串联质谱流动相分别为乙腈和含有0.1％甲酸和5mmol/L乙酸铵的超纯水，测定时采用梯度洗脱检测，质谱模式为阳离子模式。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510129885.XA CN104698107B (zh) | 2015-03-24 | 2015-03-24 | 一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510129885.XA CN104698107B (zh) | 2015-03-24 | 2015-03-24 | 一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104698107A CN104698107A (zh) | 2015-06-10 |
| CN104698107B true CN104698107B (zh) | 2016-05-04 |
Family
ID=53345451
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510129885.XA Expired - Fee Related CN104698107B (zh) | 2015-03-24 | 2015-03-24 | 一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104698107B (zh) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105675768A (zh) * | 2016-04-25 | 2016-06-15 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 快速萃取-超高效液相色谱法测定溶剂残留量的方法 |
| CN107817158A (zh) * | 2017-09-01 | 2018-03-20 | 上海华之光谱仪器有限公司 | 一种用于有机样品前处理的全自动快速萃取装置及其萃取方法 |
| CN107907606A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-04-13 | 吉林省农业科学院 | 一种同时快速检测土壤中多种除草剂的方法 |
| CN109870574A (zh) * | 2017-12-05 | 2019-06-11 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 提取食品中抗生素残留的试剂盒以及检测方法 |
| CN108318613A (zh) * | 2018-01-11 | 2018-07-24 | 四川国测检测技术有限公司 | 一种环境样品中抗生素的检测方法 |
| CN112946146A (zh) * | 2019-11-26 | 2021-06-11 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种基于加速溶剂提取法的含有激素残留的生物样品的前处理方法 |
| CN114264536B (zh) * | 2020-09-16 | 2022-12-13 | 南京理工大学 | 检测生物样品中液晶单体的前处理方法 |
| CN112505195A (zh) * | 2020-11-13 | 2021-03-16 | 山西省环境科学研究院 | 一种准确灵敏检测环境样品中抗生素的方法 |
| CN113063864B (zh) * | 2021-03-17 | 2022-06-21 | 湖北省地质实验测试中心(国土资源部武汉矿产资源监督检测中心) | 一种水溶剂提取测定固态环境样品中磺胺类抗生素的方法 |
| CN113960224A (zh) * | 2021-09-26 | 2022-01-21 | 裕菁科技(上海)有限公司 | 应用于生物样本液液萃取前处理中的添加剂以及萃取方法 |
| CN113984466B (zh) * | 2021-10-14 | 2024-01-12 | 安徽科技学院 | 一种用于土壤酚酸检测的批量化测定方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20120196309A1 (en) * | 2011-01-28 | 2012-08-02 | Yale University | Methods and Kits for Detection of Antibiotic Resistance |
| CN102081077A (zh) * | 2011-02-24 | 2011-06-01 | 北京吉天仪器有限公司 | 动物性食品中五种磺胺类药物残留量的测定方法 |
| CN102998405A (zh) * | 2011-09-09 | 2013-03-27 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 一种测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法 |
| CN103940937B (zh) * | 2014-02-18 | 2016-06-22 | 东莞理工学院 | 一种采用加速溶剂萃取在线净化法测定食品或环境样品中抗生素含量的方法 |
-
2015
- 2015-03-24 CN CN201510129885.XA patent/CN104698107B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104698107A (zh) | 2015-06-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104698107B (zh) | 一种快速溶剂萃取土壤中残留多种抗生素的前处理方法 | |
| CN108318613A (zh) | 一种环境样品中抗生素的检测方法 | |
| CN103512984B (zh) | 一种检测不同种类“瘦肉精”残留的样品前处理方法 | |
| CN107907620A (zh) | 超声萃取‑固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中六类24种抗生素的方法 | |
| CN103543224A (zh) | 一种阿维菌素和伊维菌素残留的检测方法 | |
| CN103543218B (zh) | 一种测定富含蛋白质样品中四环素类抗生素残留的方法 | |
| CN105548392B (zh) | 利用高效液相色谱同时检测畜禽粪便中多种抗生素的方法 | |
| CN104730168A (zh) | 一种水体残留四环素类、氟喹诺酮类和磺胺类抗生素同步检测的方法 | |
| CN103293248A (zh) | 一种分离富集水中磺胺类抗生素的方法 | |
| CN102998405A (zh) | 一种测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法 | |
| CN102841161A (zh) | 一种水产品中辛基酚和壬基酚的气相色谱-质谱检测方法 | |
| CN105651894A (zh) | 环境土壤中抗生素的测定方法 | |
| CN104568562A (zh) | 一种水样及其悬浮物中亚硝胺类化合物的预处理方法 | |
| CN103724394B (zh) | 甘草酸和甘草黄酮的连续分离纯化方法 | |
| CN103323550A (zh) | 一种同时检测水中五种药物的方法 | |
| CN103267820A (zh) | 一种污泥中多种雌激素的共检测方法 | |
| CN101692073B (zh) | 一种测定畜牧粪便中抗生素的方法 | |
| CN103823005A (zh) | 一种测定污泥中痕量四环素、土霉素和金霉素含量的方法 | |
| CN103901139B (zh) | 一种用于生物尿液中四溴双酚a分析的前处理方法 | |
| CN113311086A (zh) | 一种检测极片中残留nmp的方法 | |
| CN101852699A (zh) | 中药材有机氯类农药残留样品测定前的处理方法 | |
| CN101561421A (zh) | 固相萃取-高效液相色谱法检测生活污水中土霉素的方法 | |
| CN108037226A (zh) | 微波萃取-固相萃取前处理结合液质联用技术同时检测畜禽粪便中三类6种雌激素的方法 | |
| CN103926368B (zh) | 从玉米浆中提取生物素的方法及其薄层层析扫描检测方法 | |
| CN115963205A (zh) | 一种加速溶剂萃取-液质联用测定动物源性食品中地西泮、氯丙嗪和利巴韦林含量的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160504 Termination date: 20180324 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |