CN104606063B - 一种含有化妆品活性成分的脂质体及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有化妆品活性成分的脂质体及其制备方法和用途。本发明的含有化妆品活性成分的脂质体粒径小且均匀，能够使其包裹的活性物质透过角质层，到达皮肤的深层，有效实现深层保养。而且，本发明的小粒径脂质体减少了脂质体成品的碰撞沉淀几率，提高了脂质体化妆品的稳定性。本发明使用主客体化学方法制备含有化妆品活性成分的脂质体，使得类脂分子和活性成分分子在分子层次上均匀混合，避免了活性成分的聚集失活现象，而且制备条件温和，避免了对活性成分的损害。

Description

一种含有化妆品活性成分的脂质体及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种含有化妆品活性成分的脂质体及其制备方法和用途。

背景技术

脂质体(liposome)是一种由脂类分子自组装形成的具有类似生物膜双分子层的超分子结构(球形微囊)，其结构特征在于具有外层亲水和内层疏水的双分子层结构和内囊空腔，直径通常在几十纳米到几十微米。自从上世纪六十年代确认其结构后，以脂质体作为载体的药物传输体系已获得广泛应用。1986年，法国Doir公司开发了商品名为

的脂质体化妆品系列，实现了脂质体在皮肤保健和化妆品领域的实用化。将保湿剂、维生素制成脂质体，可以利用其缓释特点，延长对皮肤保护功效时间；将防晒剂制成脂质体，可以增加在皮肤中的渗透性，增加保护效果；还可以将具有抗皮肤老化和皮肤保健作用的各种天然原料提取物用脂质体进行装载，实现天然产物以脂质体为载体在皮肤护理中的应用(CN 1297249 C、CN 102085157 B)。

相对于化妆品溶液制剂、乳液制剂(如化妆品的微乳液、反相胶束等)和包合物制剂(如化妆品的高分子包合物等)，脂质体化妆品的特点在于：其一，它是以天然的磷脂分子或合成的类脂分子作为基础载体材料。这些载体材料与皮肤的相容性好，可以生物降解且没有免疫过敏反应。而且，构成载体的磷脂分子本身也是重要的皮肤护养活性成分。其二，脂质体既可以将疏水性活性成分包封在类脂双层膜内，还可以将水溶性活性成分(例如天然产物或合成化合物、维生素、氨基酸、多肽、蛋白质以及多糖类生物大分子等)包裹在脂质体的内囊水腔中。由于受到类脂双分子膜的保护，可以显著提高这些活性成分的稳定性。这对于保护常规条件下不稳定的抗氧化成分和营养性成分特别重要。

目前，脂质体在化妆品领域的应用还面临一些技术挑战：(1)虽然已有多种方法适合在实验室方便地制备脂质体，但目前适用于工业化的脂质体的制备方法对工艺要求和设备投入的成本高，限制了脂质体化妆品的应用。(2)现有方法制备的脂质体化妆品粒径较大且尺寸分布不均匀(100-800nm)，虽然常见的100-200nm粒径的脂质体化妆品已被称为纳米脂质体，但其尺寸范围超过了公认的纳米尺寸10-100nm。更重要的是小粒径的脂质体能更好地穿透含角质层的表皮(通常厚度为0.04-1.6mm)到达深处的真皮和皮下组织，有利于实现深层护养获得更好的皮肤保养效果，而大粒径和宽尺寸分布则制约了脂质体在皮肤中的渗透扩散作用。已有报道显示粒径为120nm的脂质体对表皮层的穿透性约为粒径是400nm脂质体的三倍(International Journal of Pharmaceutics,2003,258,p141-145)。(3)脂质体化妆品的稳定性还有待进一步提高，以提高保存和使用周期。

现有的常用脂质体制备方法有脂膜水化法，超声分散法，两相注入法，超临界法等。目前工业上广泛使用的方法为脂膜水化法和超声分散法。脂膜水化法是将磷脂和胆固醇等类脂溶于有机溶剂，然后将溶液置于圆底烧瓶中，旋转减压蒸干有机溶剂，从而在烧瓶内壁上挂上一层类脂膜。随后加入缓冲溶液，充分振荡烧瓶使脂质膜水化脱落得到脂质体。如此制得的脂质体粒径在0.2-5μm之间，需要在后续步骤中将其反复在压力下通过具有100-200nm孔径的滤膜，从而制备成为平均粒径为100-200nm的均匀的脂质体。超声分散法制备脂质体是在旋转减压蒸干有机溶剂获得类脂分子膜后，加入缓冲液，将该溶液经强超声波处理制备脂质体。超声分散法是制备小脂质体的常用方法，但是所制备的脂质体粒径分布不均匀，相当部分的脂质体粒径超过100nm。而且，强烈的超声波及超声过程中产生的局部过热会引起活性成分的氧化降解，需要在超声处理前去除溶液中溶解的氧气，还需要在超声过程中进行降温处理和添加抗氧化剂。在超声分散后制得的脂质体溶液中会混有超声探头产生的微小金属残渣也需要进一步纯化去除。

发明内容

本发明的目的是提供一种含有化妆品活性成分的纳米脂质体及其制备方法和用途。所制得的脂质体粒径小而且分布窄。

本发明另一目的在于提供一种含有上述纳米脂质体的化妆品。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

一种含有化妆品活性成分的脂质体，其特征在于，所述脂质体为单室脂质体，所述单室脂质体的粒径分布在15-100nm范围之内，特别地，在20-80nm范围之内，更进一步地，在20-50nm范围之内。

根据本发明，所述含有化妆品活性成分的脂质体的粒径小而且分布窄，其D97(粒径小于它的脂质体占总量的97％)为小于等于90nm，优选的，D97小于等于80nm，更优选的小于等于60nm，进一步优选小于等于50nm。

根据本发明，所述单室脂质体又称为单层泡囊，其是由一层类脂双分子层膜包裹。

根据本发明，所述化妆品活性成分被嵌入脂质体双层膜中或结合在双层膜上，或被包裹在脂质体内囊中。所述化妆品被嵌入脂质体双层膜中是指化妆品嵌入到双层膜的疏水层中；所述化妆品结合在脂质体双层膜上是指化妆品通过电荷作用、疏水作用、物理或化学吸附作用与双层膜相互作用而负载在双层膜上；所述化妆品被包裹在脂质体内囊中是指化妆品被脂质体双层膜包裹在脂质体的内囊中。

根据本发明，所述化妆品活性成分可为水溶性的、脂溶性的、或两亲性的化妆品活性成分；例如维生素、氨基酸、多肽、蛋白质、糖、和多糖类生物大分子等。所述活性成分包括成分单一的天然或合成化合物或其混合物。

所述活性成分可以是抗氧化剂和自由基清除剂，具体包括维生素C及其衍生物，例如，乙酸抗坏血酸酯、磷酸抗坏血酸酯和棕榈酸抗坏血酸酯；维生素A及其衍生物；叶酸及其衍生物；维生素E及其衍生物，如乙酸生育酚基酯；维生素D及其衍生物，如活性维生素D3、黄酮或类黄酮；氨基酸如组氨酸，甘氨酸、酪氨酸、色氨酸及其衍生物；类胡萝卜素和胡萝卜素，如α-胡萝卜素，β-胡萝卜素；尿酸及其衍生物；α-羟基酸如柠檬酸、乳酸、苹果酸；芪及其衍生物。所述活性成分还可以是具有营养功能或其他功能的多肽和蛋白质。所述多肽包括例如胶原多肽，汗腺多肽；所述蛋白质包括胶原蛋白，促进自由基分解代谢的酶，例如超氧歧化酶(SOD)或过氧化氢酶，以及促进表皮细胞生长的细胞因子，例如表皮生长因子(EGF)等。所述活性成分还可以是具有皮肤护养和保健功能的天然产物提取物，如人参茎叶提取物或芦荟提取物。

其中，维生素E是一种脂溶性维生素，包括生育酚类、三烯生育酚等。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水。维生素E是生物最主要的抗氧化剂之一。维生素E还可抑制眼睛晶状体内的过氧化脂反应，使末梢血管扩张，改善血液循环，预防近视眼发生和发展。

维生素C(抗坏血酸)是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素，易溶于水。最广为人知的是缺乏维生素C会造成坏血病。维生素C还具备有抗氧化，抗自由基功能。体内酪氨酸—酪氨酸酶反应受到维生素C干扰会抑制黑色素的合成，从而达到美白，淡斑的功效。

胶原蛋白肽是由胶原或明胶经蛋白酶降解处理后制成的一种胶原蛋白前体产品，由两个或两个以上的氨基酸组成，分子量在180-5000克/摩尔。胶原蛋白肽相对于胶原蛋白具有更小的分子量(以及更小的分子尺寸)，能被肠胃、血管及肌肤吸收。胶原蛋白肽含有大量的羟基，能让皮肤保持湿润、水嫩状态，具有美白效果。胶原蛋白肽进入皮肤后，还可修复断裂老化的弹力纤维网，使皮肤弹性恢复。补充胶原蛋白肽后可直接渗透到皮肤真皮层，重整肌肤纤维组织机构，使细小皱纹得到舒缓。

超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内氧自由基的天然清除剂，主要作用为清除生物体内自由基。在生物体多种生理反应中自然生成称为超氧阴离子自由基(O₂ ^-)的中间产物。它具有极强的氧化能力，是生物氧毒害的重要因素。超氧化物歧化酶高效催化如下的反应2O₂ ^-+2H⁺→H₂O₂+O₂。具有抗衰老、抗辐射、美容功能。

人参茎叶提取物主要含有多种人参单体皂甙，人参皂甙总含量一般在80－90％之间。还含有少量的β-谷甾醇、黄酮类山柰酚、三叶豆甙、人参黄酮甙和木犀草素葡萄糖甙。人参皂甙具有抗氧化作用，可以明显抑制脑和肝中过氧化脂质形成，减少大脑皮层和肝中脂褐素的含量，同时也能增加超氧化物歧化酶和过氧化氢酶在血液中的含量。此外，人参皂甙中的部分单体皂甙可减少体内自由基含量，延缓神经细胞衰老并降低老年发生的记忆损伤。人参茎叶提取物应用于医药保健行业，可以配制成抗疲劳、抗衰老以及健脑的保健食品。也应用于美容化妆品行业，制成祛斑、减少皱纹、活化皮肤细胞、增强皮肤弹性的化妆品。

根据本发明，所述脂质体由类脂分子(lipid)构成，例如可以由一种或多种类脂分子构成，即可以为单一物质也可以为混合物。所述类脂分子包括中性类脂分子，负电性类脂分子、正电性类脂分子或其混合。所述脂质体可以由中性类脂分子单独组成，也可以由两种或两种以上类脂分子混合物组成。所述混合物可为中性类脂和负电性类脂的混合物、中性类脂和正电性类脂的混合物；或者中性类脂、负电性类脂和正电性类脂的混合物。优选的，进一步优选的，所述中性类脂和负电性类脂的混合物中，所述中性类脂分子所占比例为50-99.99％，优选70-99.9％，更优选90-99％；所述负电性类脂分子所占比例为0.01-50％，优选0.1％-30％，更优选1％-10％。所述中性类脂和正电性类脂的混合物中，所述中性类脂所占比例为50-99.99％，优选70-99.9％，更优选90-99％；所述正电性类脂所占比例为0.01-50％，优选0.1％-30％，更优选1％-10％。所述中性类脂、负电性类脂和正电性类脂的混合物中，所述中性类脂所占比例为40-99.98％，优选60-99.8％，更优选80-98％，所述负电性类脂所占比例为0.01-30％，优选0.1％-20％，更优选1％-10％，所述正电性类脂的比例为0.01-30％，优选0.1％-20％，更优选1％-10％。所述比例为摩尔比。

根据本发明，所述中性类脂包括中性磷脂，如磷脂酰胆碱(卵磷脂)、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、中性合成磷脂等。具体分子包括：大豆卵磷脂(SPC)、氢化大豆卵磷脂(HSPC)、二癸酰基卵磷脂(DDPC)、二月桂酰基卵磷脂(DLPC)、二肉豆蔻酰基卵磷脂(DMPC)、二棕榈酰基卵磷脂(DPPC)、二硬脂酰基卵磷脂(DSPC)、二油酰基卵磷脂(DOPC)、二油酰基卵磷脂(DOPC)、二芥酰基卵磷脂(DEPC)、1-肉豆蔻酰基-2-棕榈酰基卵磷脂(MPPC)、1-肉豆蔻酰基-2-硬脂酰基卵磷脂(MSPC)、1-棕榈酰基-2-肉豆蔻酰基卵磷脂(PMPC)、1-棕榈酰基-2-硬脂酰基卵磷脂(PSPC)、1-硬脂酰基-2-肉豆蔻酰基卵磷脂(SMPC)、1-硬脂酰基-2-棕榈酰基卵磷脂(SPPC)、1-肉豆蔻酰基-2-油酰基卵磷脂(MOPC)、1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂(POPC)、1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC)、二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)，二芥酰基磷脂酰乙醇胺(DEPE)、1-棕榈酰基-2-油酰基基磷脂酰乙醇胺(DLPE)、1-棕榈酰基-2-油酰基基磷脂酰乙醇胺(POPE)等。

根据本发明，所述负电性类脂包括磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酸、负电性合成磷脂等。具体分子包括：二月桂酰磷脂酰甘油(DLPG)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、1,2-棕榈酰磷脂酰甘油(DPPG)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、二油酰磷脂酰甘油(DOPG)、二芥酰磷脂酰甘油(DEPG)、1-棕榈酰基-2-油酰基磷脂酰甘油(DOPG)、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸(DPPS)、二肉豆蔻酰磷脂酸(DMPA)、二棕榈酰磷脂酸(DPPA)、二硬脂酰磷脂酸(DSPA)、二月桂酰磷脂酸(DLPA)、二油酰磷脂酸(DOPA)等。所述负电性类脂可提高脂质体的稳定性，增加脂质体在体内血液循环系统的寿命。

根据本发明，所述正电性类脂包括合成的胺基类脂等。上述正电性类脂分子使得脂质体能通过静电作用与带负电荷的活性成分或生物大分子如蛋白质、脱氧核糖核酸、核糖核酸等结合。含正电性类脂分子的脂质体还可提高对表皮组织细胞膜的结合。

根据本发明，所述含有化妆品活性成分的脂质体中的脂质体由类脂分子构成，所述类脂分子还任选包括附加剂，所述附加剂可为单一物质或多种物质的组合，其为可以改善脂质体的各项性能等的类脂或类脂衍生物。

所述附加剂可以为能够提高脂质体对活性成分的包封率并提高脂质体稳定性的组分，例如胆固醇和神经酰胺(Ceramide)及其衍生物，如鞘磷脂(sphingomyelin)等，其在所形成的脂质体的各个组分中的摩尔比为0-70％，优选0.01％-50％，更优选0.1％-30％。

所述附加剂还可以为聚乙二醇修饰的类脂类分子(类脂衍生物)，其在所形成的脂质体的各个组分中的摩尔比为0-50％，优选0.01％-30％，更优选0.1％-20％。其中修饰类脂类分子的聚乙二醇分子量为50-10000克/摩尔，优选100-3000克/摩尔。上述聚乙二醇修饰的类脂类分子能够提高脂质体的稳定性。

所述附加剂还可以为单糖或多糖分子修饰的类脂类分子(类脂衍生物)，如脑苷脂(cerebroside)、神经节苷脂(ganglioside)等，其在所形成的脂质体的各个组分中的摩尔比为0-50％，优选0.01％-30％，更优选0.1％-20％。所述单糖或多糖分子修饰的类脂类分子能够提高脂质体的稳定性和提高对表皮组织的结合作用。

本发明还提供了一种制备含有化妆品活性成分的脂质体的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

a)制备类脂分子、化妆品活性成分与客体分子的混合溶液。

b)将步骤a)中得到的类脂分子、化妆品活性成分与客体分子的混合溶液与主体分子溶液混合，制备得到脂质体。

c)任选的，将脂质体进行分离。

所述化妆品活性成分可为水溶性的、脂溶性的、或两亲性的化妆品活性成分。当化妆品活性成分为水溶性时，在步骤b)中，将混合溶液与主体分子溶液混合后，得到含有脂质体的溶液，在所述脂质体的内囊水腔中或/和外部溶液中含有化妆品活性成分。任选地，在获得上述含有脂质体的溶液后，分离脂质体外部溶液中的活性成分。

根据本发明，上述制备方法中的步骤a)，所述制备类脂分子、化妆品活性成分与客体分子的混合溶液的方法可以将类脂分子、化妆品活性成分与客体分子直接混合在一起，也可以先分别制备类脂分子与客体分子的混合溶液、化妆品活性成分与客体分子的混合溶液，然后再将上述两种混合溶液进行混合。

根据本发明，所述的类脂分子(lipid)为形成所述脂质体(Liposome)的所有类脂或类脂衍生物。其可为单一物质也可以为混合物。所述类脂分子包括：能够形成双分子层膜材的类脂(例如磷脂等)，以及任选的附加剂。

根据本发明，所述的客体分子为上述类脂分子的助溶剂，优选的，其为上述类脂分子在亲水环境中的助溶剂。该助溶剂优选为表面活性剂，包括离子表面活性剂、两性表面活性剂、非离子表面活性剂或高分子表面活性剂。

根据本发明，所述离子表面活性剂为阴离子型表面活性剂或阳离子型表面活性剂。所述阴离子型表面活性剂例如为羧酸盐、磺酸盐或磷酸酯盐表面活性剂，优选具有极性亲水基团为羧酸根、磺酸根、磷酸根等的脂肪烃，例如十二烷基磺酸钠、胆酸钠等。所述阳离子型表面活性剂例如可为具有极性亲水基团为伯氨基、叔氨基、仲氨基、季铵基等的脂肪烃，其中，所述脂肪基的碳原子数为8-24。

根据本发明，所述两性表面活性剂为分子上同时具有正负电荷的表面活性剂，包括卵磷脂型、氨基酸型，如十二烷基氨基丙酸、和甜菜碱型。所述甜菜碱型包括羧酸基甜菜碱、磺基甜菜碱、磷酸脂甜菜碱；例如烃(烷)基二甲基甜菜碱[RN⁺(CH₃)₂CH₂COO^-]、烃(烷)基二甲基磺乙基甜菜碱[RN⁺(CH₃)₂CH₂CH₂SO₃ ^-]、烃(烷)基二甲基磺丙基甜菜碱[RN⁺(CH₃)₂CH₂CH₂CH₂SO₃ ^-]、烃(烷)基二甲基羟丙基磷酸脂甜菜碱[RN⁺(CH₃)₂CH₂CH(OH)CH₂HPO4^-]，上述例举的表面活性剂中的基团R为碳原子数为9-18的烃基。所述两性表面活性剂还包括氧化铵型表面活性剂，通常适用的氧化胺包括：C_12-18烷基二(C_1-6烷基)氧化胺，例如：月桂基二甲基氧化胺、肉豆蔻二甲基氧化胺；C_12-18烷基二(羟基C_1-6烷基)氧化胺，例如二(2-羟乙基)椰油基氧化胺、二(2-羟乙基)十六烷基氧化胺、二(2-二羟乙基)硬脂基氧化胺；C_12-18烷基酰氨基丙基氧化胺，例如：椰油酰氨基丙基二甲基氧化胺、肉桂酰氨基丙基二甲基氧化胺、椰油酰氨基丙基二(2-羟乙基)氧化胺。

根据本发明，所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯型(聚乙二醇型)、多元醇型表面活性剂或天然糖类非离子表面活性剂。所述聚氧乙烯型表面活性剂是由环氧乙烷与含有活泼氢的化合物进行加成反应的产物，所述含有活泼氢化合物例如有：脂肪醇、烷基酚、脂肪酸、脂肪胺及脂肪酰胺、油脂、山梨醇和蔗糖等。所述聚氧乙烯型表面活性剂包括：烷基(烃基)酚聚氧乙烯醚，其中所述分子中加成的环氧乙烷数为6-20，优选9-12，例如分子中加成的环氧乙烷数为9-12的辛基酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、异辛基苯基聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧丙烯醚或聚氧乙烯醚等；所述聚氧乙烯型表面活性剂还包括高碳脂肪醇聚氧乙烯醚，该脂肪醇含碳原子数为12-18，加成的环氧乙烷数为6-25，优选15-20；所述聚氧乙烯型表面活性剂还包括高碳脂肪酸甲酯乙氧基化物(由脂肪酸甲酯与环氧乙烷加成)，该脂肪酸含碳原子数为12-18，加成的环氧乙烷数为6-25，优选15-20；所述聚氧乙烯型表面活性剂还包括聚丙二醇的环氧乙烷加成物，所述聚丙二醇中丙二醇重复单元数为6-20，优选6-10，加成的环氧乙烷数为6-25，优选15-20。所述多元醇型表面活性剂是由含有多个羟基的多元醇、烷基醇胺等与高级脂肪酸生成的酯类或酰胺类化合物。包括山梨醇脂肪酸酯类、乙二醇单硬脂酸酯或双硬脂酸酯、聚乙二醇双硬脂酸酯、丙二醇单硬脂酸酯、丙二醇藻酸酯、甘油单硬脂酸酯和双硬脂酸酯、蔗糖酯或烷基醇酰胺型表面活性剂等；所述山梨醇脂肪酸酯类主要包括失水山梨醇酯及其环氧乙烷加成物，例如斯潘系列，吐温系列等。斯潘系列具体包括：失水山梨醇单月桂酸酯(Span-20)、失水山梨醇单棕榈酸酯(Span-40)、失水山梨醇单硬脂酸酯(Span-60)、失水山梨醇单油酸酯(Span-80)。所述天然糖类非离子表面活性剂是由天然糖与脂肪酸或醇形成的酯或醚。其中成酯的脂肪酸或成醚的脂肪链含碳原子数为6-14，优选7-12。所述天然糖类非离子表面活性剂包括单糖酯或醚，如吡喃糖酯、葡萄糖酯或其醚，以及多糖酯或醚，如蔗糖酯、果糖酯、麦芽糖酯或其醚，具体的可为：辛基-β-D-葡萄糖甙、壬基-β-D-葡萄糖甙、癸基-β-D-葡萄糖甙、正十二烷基-β-D-麦芽糖苷、正十四烷基-β-D-麦芽糖苷等。

根据本发明，所述高分子表面活性剂为天然高分子表面活性剂或合成高分子表面活性剂。如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是氟碳表面活性剂和硅基表面活性剂。

根据本发明，所述的主体分子是指所有能与作为助溶剂的客体分子结合的化合物。包括：环糊精及其衍生物、杯芳烃及其衍生物、柱芳烃及其衍生物、葫芦脲及其衍生物等。

根据本发明，所述环糊精包括6-12个D-吡喃葡萄糖单元，优选含有6、7、8个葡萄糖单元，亦即α-、β-和γ-环糊精。所述环糊精衍生物包括环糊精外表面的醇羟基全部或部分进行醚化、酯化反应生成的醚衍生物(R’-O-)、酯衍生物(R’-COO-)、或者发生氧化反应得到的醛和酮衍生物(R’-CO-)。其中，R’为C_1-6烷基、环烷基、芳基、-C_1-6烷基芳基、取代的C_1-6烷基，取代的芳基、取代的-C_1-6烷基芳基，其中所述取代基为羟基、氨基、醚基、酯基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、叠氮基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基等。

根据本发明，所述环糊精衍生物还可以是对环糊精及其衍生物交联反应得到的桥联环糊精、环糊精交联聚合物，其中环糊精或环糊精衍生物重复单元数为2-100，优选2-20，更优选2-10。所述环糊精衍生物还可以是与高分子相连的环糊精或其衍生物，其中所述高分子为天然高分子和合成高分子，如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是氟基高分子、硅基高分子。

根据本发明，所述杯芳烃(Calixarene)是由对位取代的苯酚、间苯二酚(resorcinol)和邻苯三酚(pyrogallol)与醛发生缩合反应得到的杯[n]芳烃，如分子式1所示：

分子式1

其中n为4-12的整数，优选为4-7；Ra独立地选自氢、C_1-6烷基(例如叔丁基、异丙基)、芳基、-C_1-6烷基芳基(例如苄基)、杂芳基、-C_1-6烷基杂芳基、醚基、酯基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、叠氮基，上述基团还可以进一步被取代基取代，所述取代基为C_1-6烷基、环烷基。Rb独立地选自氢、C_1-6烷基、环烷基、芳基、-C_1-6烷基芳基等；Rc为氢。

所述杯芳烃衍生物可为杂杯芳烃及其衍生物，所述杂杯芳烃为上述分子式1中的苯环中的碳原子被1-4个杂原子取代，所述杂原子可为N、O、S等。

所述杯芳烃衍生物或杂杯芳烃衍生物为其酚羟基全部或部分进行醚化、酯化反应生成的醚、酯衍生物；所述结构如上述分子式1，其中，Rc可相同也可不同，独立地选自氢、环氧乙烷数为9-12的聚氧乙烯醚基、C_1-6烷基、环烷基、-CO-C_1-6烷基、芳基、-C_1-6烷基芳基、取代的C_1-6烷基、取代的芳基、取代的-C_1-6烷基芳基，其中所述取代基为羟基、氨基、醚基、酯基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、叠氮基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基等。

所述杯芳烃衍生物还可以是对杯芳烃、含杂原子杯芳烃及其衍生物交联反应得到的桥联杯芳烃、杯芳烃交联聚合物，其中杯芳烃、含杂原子杯芳烃及其衍生物的重复单元数为2-100，优选2-20，更优选2-10。所述杯芳烃衍生物还可以是与高分子相连的杯芳烃、含杂原子杯芳烃或其衍生物，其中所述高分子为天然高分子和合成高分子，如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是氟基高分子、硅基高分子。

所述柱芳烃(Pillararene)是由对苯二酚或对苯二酚醚及其衍生物通过亚甲基桥连接得到的柱[n]芳烃，如分子式2所示：

分子式2

其中n为4-12的整数，优选为4-7；R1和R2独立地选自氢、环氧乙烷数为9-12的聚氧乙烯醚基、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、环烷基、-CO-C_1-6烷基、芳基、-C_1-6烷基芳基，上述基团均可以进一步被取代基取代，其中所述取代基为羟基、氨基、醚基、酯基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、叠氮基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基等。

所述柱芳烃衍生物可为杂柱芳烃及其衍生物，所述杂柱芳烃为上述分子式2中的苯环中的碳原子被1-4个杂原子取代，所述杂原子可为N、O、S等。

所述柱芳烃衍生物可以是对柱芳烃、含杂原子柱芳烃及其衍生物交联反应得到的桥联柱芳烃、柱芳烃交联聚合物，其中柱芳烃、含杂原子柱芳烃及其衍生物的重复单元数为2-100，优选2-20，更优选2-10。所述柱芳烃衍生物还可以是与高分子相连的柱芳烃、含杂原子柱芳烃或其衍生物，其中所述高分子为天然高分子和合成高分子，如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是氟基高分子、硅基高分子。

所述葫芦脲(Cucurbituril)及其衍生物为甘脲及取代甘脲与甲醛缩合而成的葫芦[n]脲及其衍生物，其中n为4-12的整数，优选为5-8；取代甘脲上的取代基独立的选自：C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、环烷基、C_1-6烷氧基、芳基、C_1-6烷基芳基、C_1-6烷氧基芳基。

所述葫芦脲衍生物还可以是对葫芦脲交联反应得到的桥联葫芦脲、葫芦脲交联聚合物，其中葫芦脲重复单元数为2-100，优选2-20，更优选2-10。所述葫芦脲衍生物还可以是与高分子相连的葫芦脲，其中所述高分子为天然高分子和合成高分子，如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是氟基高分子、硅基高分子。

本发明所述的烷基代表碳原子数为1-6的直链或支链烷基，例如，甲基、乙基、丙基、丁基、异丁基、叔丁基等。

本发明所述的烯基代表碳原子数为2-6的直链或支链烯基，例如，乙烯、丙烯、异丙烯、丁烯等。

本发明所述的炔基代表碳原子数为2-6的直链或支链炔基，例如，乙炔、丙炔、丁炔等。

本发明所述的环烷基代表具有3-8个，优选4-7个环原子的碳环，例如环戊烷基、环己烷基或环庚烷基。

本发明所述的芳基指具有6-24个碳原子的单环、多环芳族基团，代表性的芳基包括：苯基、萘基等。

本发明所述的杂芳基指具有1-20个碳原子、至少1个，优选1-4个选自N、S、O杂原子的单环或多环杂芳族基团，代表性的杂芳基包括：吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噻唑基、吲哚基等。

本发明所述氨基代表基团-NR¹ ₂，其中，R¹独立的选自H、烷基、芳基、杂芳基、杂环基。

本发明所述的醚基代表基团-OR²，其中，R²独立的选自C_1-6烷基、-(CH₂-CH₂O)n-CH₂-CH₃(n大于2)；所述醚基例如为甲基醚、乙基醚、丙基醚、异丙基醚、丁基醚、异丁基醚、叔丁基醚、环氧乙烷数为9-12的聚氧乙烯醚基等。

本发明所述的酯基指代表基团-O-COR³，其中，R³独立的选自C_1-6烷基、取代的C_1-6烷基，所述取代基可为C_1-6烷基、-OC_1-6烷基、-(CH₂-CH₂O)n-CH₂-CH₃(n大于2)等；所述酯基例如甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、含取代基为环氧乙烷数为9-12的聚氧乙烯醚的C_1-4有机酸酯等。

在所述含有化妆品活性成分的脂质体的制备中，所述主体分子和客体分子可以依据主客体化学的已有知识，通过调节客体分子和主体分子的溶解性、分子大小和亲油亲水平衡使主体分子能够包裹住客体分子，从而释放出类脂分子，使其形成脂质体。

在一个优选实施方式中，所述主体分子为环糊精及其衍生物、杯芳烃及其衍生物、柱芳烃及其衍生物、葫芦脲及其衍生物，所述客体分子为离子表面活性剂。进一步的，所述离子表面活性剂优选为阴离子型表面活性剂，更优选的，所述阴离子型表面活性剂具有极性亲水基团为羧酸根、磺酸根、磷酸根等的脂肪烃，例如十二烷基磺酸钠、胆酸钠等。

在一个优选实施方式中，所述主体分子为环糊精及其衍生物、杯芳烃及其衍生物、柱芳烃及其衍生物、葫芦脲及其衍生物，所述客体分子为两性表面活性剂。进一步优选的两性表面活性剂为氨基酸型表面活性剂、氧化铵型表面活性剂。更优选为氧化胺型表面活性剂，包括：C_12-18烷基二(C_1-6烷基)氧化胺，例如：月桂基二甲基氧化胺、肉豆蔻二甲基氧化胺；C_12-18烷基二(羟基C_1-6烷基)氧化胺，例如二(2-羟乙基)椰油基氧化胺、二(2-羟乙基)十六烷基氧化胺、二(2-二羟乙基)硬脂基氧化胺；C_12-18烷基酰氨基丙基氧化胺，例如：椰油酰氨基丙基二甲基氧化胺、肉桂酰氨基丙基二甲基氧化胺、椰油酰氨基丙基二(2-羟乙基)氧化胺。

在一个优选实施方式中，所述主体分子为环糊精及其衍生物、杯芳烃及其衍生物、柱芳烃及其衍生物、葫芦脲及其衍生物，所述客体分子为非离子表面活性剂。进一步的，所述非离子表面活性剂优选为聚氧乙烯型(聚乙二醇型)、多元醇型表面活性剂、或天然糖类非离子表面活性剂。优选适用的聚氧乙烯型表面活性剂包括烷基酚聚氧乙烯醚、高碳脂肪醇聚氧乙烯醚、高碳脂肪酸甲酯乙氧基化物、聚丙二醇的环氧乙烷加成物，例如分子中加成的环氧乙烷数为9-12的辛基酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、异辛基苯基聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧丙烯醚或聚氧乙烯醚等。所述多元醇型表面活性剂优选为山梨醇脂肪酸酯类，例如斯潘系列，吐温系列等。斯潘系列具体包括：失水山梨醇单月桂酸酯(Span-20)、失水山梨醇单棕榈酸酯(Span-40)、失水山梨醇单硬脂酸酯(Span-60)、失水山梨醇单油酸酯(Span-80)。所述天然糖类非离子表面活性剂优选为单糖酯或醚，如吡喃糖酯、葡萄糖酯或其醚，以及多糖酯或醚，如蔗糖酯、果糖酯、麦芽糖酯或其醚，具体的可为：辛基-β-D-葡萄糖甙、壬基-β-D-葡萄糖甙、癸基-β-D-葡萄糖甙、正十一烷基-β-D-麦芽糖苷等、正十二烷基-β-D-麦芽糖苷等、正十四烷基-β-D-麦芽糖苷等。

进一步优选的，所述环糊精衍生物、杯芳烃衍生物、柱芳烃衍生物、葫芦脲衍生物为醚衍生物(R’-O-)、酯衍生物(R’-COO-)、或者发生氧化反应得到的醛和酮衍生物(R’-CO-)。其中，R’为C_1-6烷基、环烷基、芳基、-C_1-6烷基芳基、取代的C_1-6烷基、取代的芳基、取代的-C_1-6烷基芳基，其中所述取代基为羟基、氨基、醚基、酯基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、叠氮基、C_1-6烷氧基、C_2-6烯基、C_2-6炔基等。所述衍生物还可以是对主体分子进行交联反应得到的桥联、交联聚合物，其中桥联或交联的重复单元数为2-100，优选2-20，更优选2-10。所述衍生物还可以是与高分子交联的衍生物，其中所述高分子为天然高分子和合成高分子，如聚环氧乙烷、聚环氧丙烷、环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物、接枝共聚物等，还可以是硅基高分子。

在所述制备方法中，所述类脂分子与客体分子的摩尔比为0.001:1至100:1，优选0.01:1至10:1，更优选0.05:1至5:1。

在所述制备方法中，所述主体分子与客体分子的摩尔比为0.001:1至100:1，优选0.05:1至10:1，更优选0.1:1至5:1。

在一个优选实施方式中，在所述制备方法中出现的如下溶液：所述的类脂分子、客体分子、活性成分混合溶液；所述的类脂分子与客体分子混合溶液；所述的活性成分与客体分子混合溶液；所述的主体分子溶液；在上述溶液中，优选使用的溶剂为水或缓冲盐溶液，所述缓冲盐溶液例如磷酸缓冲盐溶液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。缓冲盐溶液的pH值为2-12。优选的pH值为7.4。

在一个优选实施方式中，在所述制备方法中，将所获得的含有化妆品活性成分的脂质体进行分离纯化，得到纯化的含有化妆品活性成分的脂质体。所述分离方法例如：高速离心、凝胶渗透色谱、半透膜透析等。

在一个优选实施方式中，在所述制备方法中，所获得的含有化妆品活性成分的脂质体可制成固态脂质体粉末，例如通过冻干法。

本发明还提供了上述含有化妆品活性成分的脂质体用于化妆品的用途。

本发明进一步提供了一种脂质体化妆品，其包括0.01-30％重量比(优选0.1-10％重量比)的所述含有化妆品活性成分的脂质体。

根据本发明，所述脂质体化妆品中还任选地含有化妆品辅剂的一种或多种，所述化妆品辅剂例如防腐剂、着色剂、增稠剂、香味剂、多元醇、电解质等，各种辅剂在溶液中的重量比为0.01-30％，优选0.1-10％，进一步优选0.1-5％。

根据本发明，所述着色剂包括色料、色料混合物或具有色料状效果的粉末。色料可以包括例如：铁氧化物，天然的铝硅酸盐如赭石、二氧化钛、云母、高岭土、含锰的粘土如棕土和代赭石、碳酸钙、滑石、云母-二氧化钛、云母-二氧化钛-氧化铁、尼龙小球、陶瓷小球、膨胀的和非膨胀的合成聚合物粉末、粉末状天然有机化合物如磨碎的固态藻类、磨碎的植物碎片、谷物淀粉。

根据本发明，所述脂质体化妆品的pH值为4-7，优选pH值为5-6，更优选pH值为5.5以与表皮组织的酸碱度匹配。

根据本发明，所述的脂质体化妆品可为液体制剂、凝胶制剂、膏霜剂、膜剂(例如面膜)、乳液等，优选的，所述液体制剂为水溶液。

根据本发明，所述的脂质体化妆品还可含有甘油、丙二醇或其衍生物、丁二醇或其衍生物、或其混合物等。其可以用于增湿，还可以降低溶液的凝固点。优选甘油，其含量优选1-30％重量百分比，又优选1-20％重量百分比。

本发明上述脂质体化妆品的制备方法可以根据现有技术的已知方法来制备，例如对于脂质体化妆品液体制剂，其方法包括，将上述含有化妆品活性成分的脂质体加入到溶剂中配制成为重量比为0.01-30％的溶液。所述溶剂优选为缓冲溶液，例如磷酸缓冲溶液。对于脂质体化妆品的凝胶制剂，其制备方法包括将上述含有化妆品活性成分的脂质体加入到溶剂中配制成为重量比为0.01-30％的溶液，再在上述制得的溶液中加入凝胶形成剂增稠得到脂质体化妆品凝胶。适宜的凝胶形成剂包括：卡波树脂(聚烯基醚交联的丙烯酸聚合物)、黄原胶、角叉菜聚糖、阿拉伯树胶、瓜尔胶、琼脂、藻酸盐和甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、季铵化的纤维素、季铵化的瓜尔胶、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、蒙脱石等。优选卡波树脂和羟乙基纤维素。具体例如卡波940树脂、卡波980树脂，其含量为0.1-3.0％，优选0.2-1.0％重量百分比。优选氢氧化钠，氢氧化钾和三乙醇胺等作为中和剂用于中和调节卡波树脂的pH值。

本发明的主要优点包括：

1)本发明提供了一种含有化妆品活性成分的脂质体，其粒径小而且分布窄，粒径分布在15-100nm范围之内，特别地，在20-80nm范围之内，更进一步地，在20-50nm范围之内。所得脂质体为单室脂质体。

2)本发明的含有化妆品活性成分的脂质体粒径小且均匀，能够使其包裹的活性物质透过角质层到达皮肤的深层，有效实现深层保养。

3)本发明的含有化妆品活性成分的脂质体粒径小，减少了脂质体成品的碰撞沉淀几率，提高了脂质体化妆品的稳定性。克服了脂质体化妆品长时间存放不稳定的问题。经检测，本发明的含有化妆品活性成分的脂质体在4℃下存放6个月，没有出现包封率和粒径的明显变化。

4)在本发明的脂质体化妆品制备方法中，引入主客体化学使得类脂分子和活性成分分子在分子层次上均匀混合，避免了活性成分的聚集失活现象，而且制备条件温和，避免了对活性成分的损害。具体地，本发明避免常用的脂膜水化法中的滤膜加压尺寸控制步骤中加压对脂质体的破坏和超声分散法中超声对活性成分的破坏。

5)本发明的主客体化学的制备方法，反应速率快、耗时短，提供了一条快速实时实地制备脂质体化妆品的途径。本发明可以分别制备类脂分子与客体分子混合溶液、脂溶性活性成分分子与客体分子混合溶液，然后再与主体分子溶液混合，可以实时地、方便地调节活性成分在脂质体中的上载量。另外，本发明的方法也适用于在脂质体内囊水腔中装载水溶性活性成分，可以实现脂质体和脂溶性和水溶性活性成分的复合装载。

6)通过本发明提供的将脂质体前体溶液实时混合的制备方法，克服了目前脂质体化妆品长时间存放后不稳定的问题，从而保证脂质体化妆品的质量。本发明中作为前体的类脂分子与客体分子混合溶液和主体分子溶液的稳定性高，室温下可以存放一年以上，4℃下两年，可以在冷冻条件下固态保存三年后解冻亦不出现混浊。

附图说明

图1为本发明的三种代表性主体分子结构(上)及其示意图(下)；(a)β-环糊精；(b)4-叔丁基杯[6]芳烃；(c)葫芦[7]脲。

图2为本发明的代表性活性成分结构式。(a)脂溶性化合物维生素E；(b)水溶性化合物维生素C。

图3为通过动态激光散射测定的实施例1中制备的纳米脂质体的粒径分布图。

图4为通过动态激光散射测定的实施例8中制备的装载维生素E的纳米脂质体的粒径分布图。

图5为实施例10中制备的包含维生素A和维生素E的纳米脂质体柱洗脱曲线图。洗脱峰(1)为含维生素A和维生素E的纳米脂质体，(2)为未被包裹的维生素A和维生素E。

图6实施例15中制备的含维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液浊度变化随时间变化图。

具体实施方式

实施例1 主客体法制备含维生素E的纳米脂质体(客体分子与主体分子摩尔比为1:5)

将0.01克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(化学命名1-硬脂酰基-2-油酰基-sn-甘油基-3-磷酸胆碱，SOPC，分子量788)和0.6毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入25毫升含有2毫摩尔/升正十二烷基-β-D-麦芽糖苷(非离子表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得SOPC和维生素E完全溶解于该非离子表面活性剂磷酸缓冲盐溶液。将0.33克γ-环糊精(分子量1297)溶于50毫升室温下(25℃)水中，得到5毫摩尔/升的γ-环糊精水溶液。将SOPC和维生素E混合溶液加入到该γ-环糊精水溶液中，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：维生素E摩尔比为100：10的纳米脂质体溶液。

采用动态激光散射来测定本实施例制备的含维生素E纳米脂质体的粒径分布，如图3所示。由图中可以看出，本实施例制备的含维生素E纳米脂质体的粒径在20-50nm范围之内。

实施例2 制备固态含维生素E的纳米脂质体

将0.32克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)和10毫克维生素E(VE，分子量473)用50毫升氯仿溶解，放入250毫升圆底烧瓶中，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入100毫升含有16毫摩尔/升的壬基-β-D-葡萄糖甙(非离子表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4，搅拌并加温该溶液至55℃，使得SOPC和维生素E完全溶解于该非离子表面活性剂磷酸缓冲盐溶液。将4克β-环糊精溶于100毫升55℃水，保温。在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：维生素E摩尔比为100：5的极微小脂质体。静置至室温时，有浅黄色环糊精-壬基葡萄糖甙复合物析出，过滤除去沉淀。继续降温至4℃，第二次析出环糊精-壬基葡萄糖甙复合物，抽滤除去沉淀，得到初步纯化的含维生素E极微小脂质体溶液。本实施例制备的极微小脂质体的粒径用动态激光散射测定为20-50nm。初步纯化的含维生素E极微小脂质体溶液可通过冻干法制成固态制剂。为此，将等体积的作为冷冻干燥辅剂的葡萄糖水溶液(0.1克/升)加入到所得溶液中，液氮急冻所得混合溶液，然后置于高真空(10～40Pa)的容器中，室温下(25℃)冷冻干燥48小时，得到浅黄色固态极微小脂质体粉末。

初步纯化的含维生素E单磷脂组分极微小脂质体溶液可通过半透膜透析法进一步纯化。为此，移取10毫升该溶液装入截留分子量为10000的透析袋中，悬挂于2000毫升去离子水中透析24小时。透析后的脂质体溶液经由液相色谱-质谱仪检测，采用电喷雾法离子化，在分子量为250-3000的范围内仅检测到维生素E的质量峰(m/z:474,[M+H]⁺)和SOPC的质量峰(m/z:789,[M+H]⁺)。可见，本发明制备的含维生素E极微小脂质体内囊水腔中不含环糊精或环糊精-客体分子复合物。

实施例3 使用两性表面活性剂制备含维生素E纳米脂质体

将0.01克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)、3毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压蒸干溶剂。向该圆底烧瓶中加入50毫升含有1毫摩尔/升

LO(月桂基二甲基氧化胺)(两性表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得SOPC和维生素E完全溶解。将0.10克α-环糊精溶于50毫升室温下水中。将所得SOPC和维生素E混合溶液加入该α-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：维生素E摩尔比为100：5的极微小脂质体。本实施例制备的极微小脂质体的粒径分布在20-50nm范围之内。

实施例4 使用离子型表面活性剂制备含维生素E纳米脂质体

将0.01克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)、3毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压蒸干溶剂。向该圆底烧瓶中加入50毫升含有1毫摩尔/升胆酸钠(离子型表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得SOPC和维生素E完全溶解于该离子型表面活性剂溶液。将0.10克α-环糊精溶于50毫升室温下水中。将所得SOPC和维生素E混合溶液加入该α-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合30分钟。由此制得SOPC：维生素E摩尔比为100：5的极微小脂质体。本实施例制备的极微小脂质体的粒径分布在20-50nm范围之内。

实施例5 制备带负电荷的含维生素E纳米脂质体

将0.02克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)，0.2毫克二硬脂酰磷脂酰甘油钠盐(DSPG，分子量801)和1.2毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有1毫摩尔/升异辛基苯基聚氧乙烯醚(曲拉通X-100，非离子表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得类脂分子完全溶解于该非离子表面活性剂溶液。将0.14克γ-环糊精溶于50毫升室温下(25℃)水中，得到γ-环糊精水溶液。将所得类脂分子和VE混合溶液加入该γ-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：维生素E：DSPG摩尔比为100：10：1的表面带负电荷的极微小脂质体溶液。本实施例制备的极微小脂质体的粒径在20-50nm范围之内。

实施例6 使用杯芳烃作为主体分子制备含维生素E纳米脂质体

将0.02克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)和1.2毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有1毫摩尔/升壬基-β-D-葡萄糖甙的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得SOPC完全溶解于该非离子表面活性剂溶液。将0.37克市购的4-磺酸杯[8]芳烃(分子量1489)溶于50毫升室温下(25℃)水中，得到5毫摩尔/升的4-磺酸杯[8]芳烃水溶液。将SOPC和维生素E混合溶液加入该4-磺酸杯[8]芳烃水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：维生素E之摩尔比为100:10的极微小脂质体溶液。本实施例制备的极微小脂质体的粒径在15-100nm范围之内。

实施例7 葫芦脲作为主体分子制备含维生素E纳米脂质体

将0.02克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)和1.2毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)用25毫升氯仿溶解，放入100毫升圆底烧瓶中，减压蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有1毫摩尔/升壬基-β-D-葡萄糖甙的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得SOPC完全溶解于该非离子表面活性剂溶液。将0.29克市购的葫芦[7]脲(分子量1163)溶于50毫升室温下水中，得到葫芦[7]脲水溶液。将SOPC和维生素E混合溶液加入该葫芦[7]脲水溶液，在强力搅拌下混合30分钟。由此制得SOPC：维生素E之摩尔比为100:10的极微小脂质体溶液。本实施例制备的极微小脂质体的粒径在20-80nm范围之内。

实施例8 制备含胆固醇和维生素E的纳米脂质体

将64毫克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)，3.9毫克胆固醇(分子量387)用25毫升氯仿溶解，和4.7毫克脂溶性维生素E油剂(VE，分子量473)放入100毫升圆底烧瓶中，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有10毫摩尔/升异辛基苯基聚氧乙烯醚(非离子性表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得类脂分子和维生素E完全溶解于该异辛基苯基聚氧乙烯醚磷酸缓冲盐溶液。将1.4克γ-环糊精溶于50毫升水中。将所得类脂分子和维生素E混合溶液加入到该γ-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合30分钟。由此制得SOPC：胆固醇：维生素E之摩尔比为80:10:10的含维生素E的纳米脂质体溶液。图4为动态激光散射测定的本实施例制备的维生素E纳米脂质体的粒径，其分布在15-55nm范围之内。

实施例9 制备含胶原蛋白肽的纳米脂质体

将72毫克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788克/摩尔)，4.0毫克胆固醇(分子量387克/摩尔)用25毫升氯仿溶解放入100毫升圆底烧瓶中，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有10毫摩尔/升异辛基苯基聚氧乙烯醚的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得类脂分子完全溶解于该异辛基苯基聚氧乙烯醚磷酸缓冲盐溶液。然后，向该缓冲液中加入30毫克深海鱼皮胶原蛋白肽(分子量～2000克/摩尔)。将1.4克γ-环糊精溶于50毫升水中。将所得类脂分子和胶原蛋白肽混合溶液加入到该γ-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合30分钟。由此制得含胶原蛋白肽的纳米脂质体溶液，该脂质体中SOPC：胆固醇之摩尔比为90:10的。本实施例制备的纳米脂质体的粒径在20-50nm范围之内。

实施例10 制备含维生素A和维生素E的纳米脂质体护眼液

在100毫升圆底烧瓶中，将56毫克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)，3.9毫克胆固醇(分子量387)，3.0毫克脂溶性维生素A(分子量286)和4.7毫克脂溶性维生素E油剂(食品级，分子量473)用25毫升氯仿溶解，减压下蒸干溶剂。向该圆底烧瓶中加入50毫升含有10毫摩尔/升异辛基苯基聚氧乙烯醚的磷酸缓冲盐溶液，pH值7.4。通过振荡圆底烧瓶使得类脂分子、胆固醇、维生素A和维生素E完全溶解于该异辛基苯基聚氧乙烯醚磷酸缓冲盐溶液。将1.4克γ-环糊精溶于50毫升水中。所得客体分子溶液，亦即类脂分子、维生素A、和维生素E混合溶液以及主体分子溶液，亦即γ-环糊精水溶液都用高压灭菌器进行灭菌处理。将所得类脂分子和维生素A、维生素E混合溶液加入到该γ-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：胆固醇：维生素A：维生素E之摩尔比为70:10:10:10的含维生素A和维生素E的纳米脂质体溶液。本实施例制备的纳米脂质体的粒径在20-50nm范围之内。

采用葡聚糖凝胶G50柱(2cm×21cm)纯化含维生素A和维生素E的纳米脂质体溶液，每次凝胶柱的上载量为50毫升。洗脱液为pH 6的磷酸盐缓冲液，室温下层析，流速为2mL/min。以305nm波长(在该波长维生素A和维生素E都有吸收)的吸光度变化检测洗脱情况，收集洗脱液，每份2mL。合并纯化的含维生素A和维生素E的脂质体洗脱液，共得约80毫升。将所得溶液置于250毫升两口烧瓶中，室温下在烧瓶的一侧鼓泡通入氮气以除去溶液中溶解的氧气。除氧处理可增长脂质体的保存时间，而且控制通入氮气的时间，可以调节溶液体积从而调节纳米脂质体在溶液中的浓度。通过调节通氮气的速率和时间，得到50毫升溶液。向纯化后的脂质体溶液加入0.4毫升甘油(重量比为1％)，制得护眼液。

图5为本实施例包含维生素A和维生素E的脂质体柱洗脱曲线图。检测波长305nm。洗脱峰(1)为维生素A和维生素E脂质体，(2)为未被包裹的游离维生素A和维生素E。由洗脱峰(1)的面积除以洗脱峰(1)和(2)的面积之和可得到本实施例中脂质体活性成分的包封率为93.1％。

实施例11 制备含维生素A、维生素E和维生素C的纳米脂质体护肤液

在250毫升圆底烧瓶中，将1.6克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)，110毫克胆固醇(分子量387)，90毫克脂溶性维生素A(分子量286)和140毫克脂溶性维生素E油剂(食品级，分子量473)用50毫升氯仿溶解，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有0.16摩尔/升的癸基-β-D-葡萄糖甙(非离子表面活性剂)的磷酸缓冲盐溶液，pH值5.5，室温下搅拌，使得SOPC、胆固醇、维生素A和维生素E完全溶解于该癸基-β-D-葡萄糖甙磷酸缓冲盐溶液。然后，向该缓冲液中加入200毫克维生素C。室温下将28克中等取代度的羟丙基-β-环糊精(平均分子取代度6，分子量1619)溶于50毫升水，得到羟丙基-β-环糊精水溶液。将所得类脂分子和维生素A、维生素E、维生素C的混合溶液加入到该羟丙基-β-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：胆固醇：维生素A：维生素E之摩尔比为70:10:10:10的含维生素A和维生素E的纳米脂质体溶液。维生素C以溶液状态存在于脂质体的内囊水腔和外部水溶液中。本实施例制备的纳米脂质体的粒径在15-60nm范围之内。

将所得含有维生素A、维生素E和维生素C纳米脂质体溶液分5份，依次用50毫升的标准离心管浓缩(使用20毫升规格的Thermo Scientific圆锥形蛋白浓缩器，截留分子量20KDa)。离心机转速为5000转/分钟，离心15分钟，使得溶液浓缩10倍。在相同离心条件下用pH值5.5的磷酸盐缓冲液洗涤一次该浓缩液，合并浓缩后的溶液共收得10毫升脂质体溶液。向该脂质体溶液中加入2.0毫升的甘油和13毫升pH值为5.5的磷酸缓冲盐溶液，制得25毫升含有维生素A、维生素E和维生素C的纳米脂质体护肤液，该护肤液中含有重量比为10％的甘油和1.9克纳米脂质体(重量比为8％)，所述纳米脂质体中含有90毫克维生素A和140毫克维生素E，200毫克维生素C存在于内囊水腔和外部水溶液中。

实施例12 制备含维生素A、维生素E和维生素C的纳米脂质体护肤霜

按照实施例11基本相同的方法制得含有维生素A、维生素E和维生素C护肤液，唯一的区别在于加入1.0毫升甘油使其重量百分比为5％。向上述所得到的25毫升护肤液中加入0.13克卡波940树脂，缓慢滴加1摩尔/升的三乙醇胺溶液并充分搅拌，使得溶液的pH值保持为5.5。制得含有维生素A、维生素E和维生素C的纳米脂质体护肤霜。

实施例13 制备含有维生素A、维生素E和人参提取物的纳米脂质体的护肤液和护肤霜

按照实施例11基本相同的方法制备含有维生素A、维生素E和人参茎叶提取物的护肤液，唯一的区别是用20毫升市售人参茎叶提取物替代实施例11中的水溶性的维生素C。

按照实施例11基本相同的方法制得含有维生素A、维生素E和人参提取物的护肤液，区别仅在于：用20毫升市售人参茎叶提取物替代水溶性的维生素C，以及加入1.0毫升甘油使其重量百分比为5％。向上述所得到的25毫升护肤液中加入0.13克卡波940树脂，缓慢滴加1摩尔/升的三乙醇胺溶液并充分搅拌，使得溶液的pH值保持为5.5。制得含有维生素A、维生素E和人参提取物的纳米脂质体护肤霜。

实施例14 制备含有维生素A、维生素E和胶原蛋白肽的纳米脂质体的护肤液和护肤霜

按照实施例11基本相同的方法制备含有维生素A、维生素E和深海鱼皮胶原蛋白肽的护肤液，唯一的区别是用300毫克深海鱼皮胶原蛋白肽(分子量～2000)替代实施例11中的水溶性的维生素C。

按照实施例11基本相同的方法制备含有维生素A、维生素E和深海鱼皮胶原蛋白肽的护肤液，区别仅在于：用300毫克深海鱼皮胶原蛋白肽(分子量～2000)替代水溶性的维生素C，以及加入1.0毫升甘油使其重量百分比为5％。向上述所得到的25毫升护肤液中加入0.13克卡波940树脂，缓慢滴加1摩尔/升的三乙醇胺溶液并充分搅拌，使得溶液的pH值保持为5.5。制得含有维生素A、维生素E和深海鱼皮胶原蛋白肽的纳米脂质体护肤霜。

实施例15 制备含维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液

在250毫升圆底烧瓶中，将160毫克1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂(SOPC，分子量788)，11毫克胆固醇(分子量387)，9毫克脂溶性维生素A(分子量286)和14毫克脂溶性维生素E油剂(食品级，分子量473)用50毫升氯仿溶解，减压下蒸干溶剂。向圆底烧瓶中加入50毫升含有16毫摩尔/升的升的癸基-β-D-葡萄糖甙磷酸缓冲盐溶液，pH值5.5，搅拌并加温该溶液至37℃，使得SOPC、胆固醇、维生素A和维生素E完全溶解于该升的癸基葡萄糖甙磷酸缓冲盐溶液。然后，向该缓冲液中加入20毫克维生素C和33毫克大豆超氧岐化酶(高纯度SOD，分子量～33000)。将2.0克β-环糊精溶于50毫升40℃水，得到β-环糊精水溶液。将所得类脂分子和维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的混合溶液加入到该β-环糊精水溶液，在强力搅拌下混合15分钟。由此制得SOPC：胆固醇：维生素A：维生素E之摩尔比为70:10:10:10的含维生素A和维生素E的纳米脂质体溶液。维生素C和SOD以溶液状态存在于脂质体的内囊水腔和外部水溶液中。本实施例制备的纳米脂质体的粒径在20-60nm范围之内。

利用环糊精在水溶液中溶解度随温度变化的特性除去环糊精和壬基葡萄糖甙包合物，对含纳米脂质体溶液进行纯化。将溶液体系降温至4℃，静置4小时即可析出环糊精-癸基葡萄糖甙复合物，抽滤除去沉淀，得到含维生素A和维生素E的纳米脂质体和维生素C及超氧岐化酶的溶液。将所得含有维生素A、维生素E和维生素C纳米脂质体溶液分5份，依次用50毫升的标准离心管浓缩(使用20毫升规格的Thermo Scientific圆锥形蛋白浓缩器，截留分子量20KDa)。离心机转速为5000转/分钟，离心5分钟，使得溶液浓缩10倍。合并各次浓缩后的溶液共收得10毫升。该溶液中含有0.19克纳米脂质体(重量比为1.9％)，该纳米脂质体中含有约9毫克维生素A和约14毫克维生素E。20毫克维生素C和33毫克超氧岐化酶存在于内囊水腔和外部水溶液中。向该脂质体溶液中加入2.4毫升的甘油和2.6毫升pH值为5.5的磷酸缓冲盐溶液，制得含有维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液。

实施例16 制备含维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤霜

按照实施例15基本相同的方法制备含有维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液，唯一的区别是加入0.6毫升甘油，使其重量百分比为5％。向上述所得到的15毫升护肤液中加入0.08克卡波940树脂，缓慢滴加1摩尔/升的三乙醇胺溶液并充分搅拌，使得溶液的pH值保持为5.5。制得含有维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤霜。

实施例17 含维生素E的脂质体包封率和稳定性考察

取实施例8中新鲜制备的含胆固醇和维生素E的纳米脂质体样品10毫升，加入氯仿25毫升，震荡混合10分钟后移至离心管，5000g离心10分钟。将有机相移至另一洁净容器，取20微升进样，进行反相高效液相色谱测定。色谱条件：C18柱(4.6mm×150mm)，以甲醇-水(85:15体积比)为流动相A，甲醇为流动相B梯度洗脱，梯度洗脱时间40分钟。流速1.0毫升·分钟^-1，进样量20微升，检测波长265nm。经与维生素E样品峰对照，所制备的维生素E脂质体的包封率为92±4％(三次测量均值±标准偏差)。

取实施例8中制备的含维生素E的纳米脂质体样品25毫升，按照《中国药典》2005年版附录XIXC原料药与药物制剂稳定性实验指导原则进行加速试验，结果6个月后包封率按照上述方法测定为89±7％(三次测量均值±标准偏差)。对照上述测定的新鲜脂质体包封率，6个月后脂质体包封率未发生明显变化。粒径经动态激光散射监测在15nm-60nm范围之内。对照图4测定的新鲜脂质体粒径范围15-55nm，粒径亦未发生明显变化。以上说明含维生素E的纳米脂质体未发生融合及维生素E渗漏。

实施例18 含维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液的存贮稳定性

取实施例15中制备的含维生素A、维生素E、维生素C和超氧岐化酶的纳米脂质体护肤液样品6毫升，等分为3份分别置于5毫升试样瓶中。三份样品分别置于室温下(25℃)、4℃以及-18℃下保存。监测样品浊度变化(上海海恒机电XZ-1型散射式浊度仪)。测得浊度变化如图6所示。结果显示，在-18℃条件下保存180天的样品浊度无变化，4℃浊度略有增加。室温下样品保存180天后，目测无明显变化。经浊度仪测出的浊度增加为0.8NTU，依然小于生活饮用水的浑浊度要求(1NTU)。

Claims (33)

1.一种制备含有化妆品活性成分的脂质体的方法，包括如下步骤：

a)制备类脂分子、客体分子、化妆品活性成分相混合的溶液；

b)将所得混合溶液与主体分子溶液混合制备得到含有化妆品活性成分的脂质体；

c)任选的，将脂质体进行分离，

所述类脂分子为能够形成所述脂质体的类脂，所述的客体分子为所述类脂分子的助溶剂，所述的主体分子是指所有能与作为助溶剂的客体分子结合的化合物；

所述脂质体由类脂分子构成，所述的类脂分子为中性磷脂，所述中性磷脂为1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂；

所述的主体分子为：环糊精及其衍生物、杯芳烃、4-磺酸杯[8]芳烃、葫芦脲及其衍生物；

所述环糊精包括6-12个D-吡喃葡萄糖单元；所述环糊精衍生物为环糊精外表面的醇羟基全部或部分进行醚化、酯化反应生成的醚衍生物(R’-O-)、酯衍生物(R’-COO-)、或者发生氧化反应得到的醛和酮衍生物(R’-CO-)；其中，R’为C_1-6烷基、取代的C_1-6烷基，其中所述取代基为羟基、氨基、磺酸基、亚磺酸基、硝基、亚硝基、C_1-6烷氧基；

所述葫芦脲及其衍生物为甘脲及取代甘脲与甲醛缩合而成的葫芦[n]脲及其衍生物，其中n为4-12的整数；取代甘脲上的取代基独立的选自：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基；

所述的客体分子为表面活性剂，包括阴离子表面活性剂、两性表面活性剂、非离子表面活性剂；

所述阴离子型表面活性剂为胆酸钠；

所述两性表面活性剂为氧化胺型表面活性剂，所述氧化胺型表面活性剂为：C_12-18烷基二(C_1-6烷基)氧化胺；C_12-18烷基二(羟基C_1-6烷基)氧化胺；C_12-18烷基酰氨基丙基氧化胺；

所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯型、天然糖类非离子表面活性剂；

所述聚氧乙烯型表面活性剂为：烃基酚聚氧乙烯醚，其中所述烃基酚聚氧乙烯醚分子中加成的环氧乙烷数为6-20；高碳脂肪醇聚氧乙烯醚，该脂肪醇含碳原子数为12-18，加成的环氧乙烷数为6-25；

所述天然糖类非离子表面活性剂是由天然糖与脂肪酸或醇形成的酯或醚；其中成酯的脂肪酸或成醚的脂肪链含碳原子数为6-14，所述天然糖类非离子表面活性剂包括单糖酯或醚，以及多糖酯或醚。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述脂质体为单室脂质体，所述单室脂质体的粒径分布在15-100nm范围之内。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述脂质体为单室脂质体，所述单室脂质体的粒径分布在20-80nm范围之内。

4.如权利要求1所述的方法，其中，所述化妆品活性成分被嵌入脂质体双层膜中或者结合在双层膜上或者包裹在脂质体内囊。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述含有化妆品活性成分的脂质体的粒径D97小于等于90nm。

6.如权利要求1所述的方法，其中，所述含有化妆品活性成分的脂质体的粒径D97小于等于50nm。

7.如权利要求1-6任一项所述的方法，其中，所述活性成分包括成分单一的天然或合成化合物或其混合物，所述化妆品活性成分为水溶性的、脂溶性的或两亲性的化妆品活性成分。

8.如权利要求7所述的方法，其中，所述化妆品活性成分为维生素、氨基酸、多肽、蛋白质、糖、多糖类生物大分子。

9.如权利要求7所述的方法，其中，所述活性成分是抗氧化剂和自由基清除剂。

10.如权利要求7所述的方法，其中，所述活性成分为维生素C及其衍生物；维生素A；叶酸；维生素E及其衍生物；维生素D及其衍生物；黄酮或类黄酮；氨基酸；类胡萝卜素和胡萝卜素；尿酸；α-羟基酸；或者，所述活性成分是具有营养功能或其他功能的多肽和蛋白质；具有皮肤护养和保健功能的天然产物提取物；

所述维生素C衍生物为乙酸抗坏血酸酯、磷酸抗坏血酸酯和棕榈酸抗坏血酸酯；所述维生素E衍生物为乙酸生育酚基酯；所述维生素D衍生物为活性维生素D₃。

11.如权利要求10所述的方法，其中，所述氨基酸为组氨酸、甘氨酸、酪氨酸、色氨酸；所述类胡萝卜素和胡萝卜素为α-胡萝卜素，β-胡萝卜素；所述α-羟基酸为柠檬酸、乳酸、苹果酸；所述多肽为胶原多肽；所述蛋白质为胶原蛋白，促进自由基分解代谢的酶；所述天然产物提取物为人参茎叶提取物或芦荟提取物。

12.如权利要求11所述的方法，其中，促进自由基分解代谢的酶为超氧歧化酶或过氧化氢酶。

13.如权利要求1所述的方法，其中，所述类脂分子还包括能够改善脂质体性能的附加剂，所述附加剂为单一物质或多种物质的组合。

14.如权利要求13所述的方法，其中，所述附加剂为能够提高脂质体对药物的包封率并提高脂质体稳定性的组分。

15.如权利要求13所述的方法，其中，所述附加剂为胆固醇、神经酰胺或鞘磷脂。

16.如权利要求13所述的方法，其中，所述附加剂在所形成的脂质体的各个组分中的摩尔比为0-70％。

17.如权利要求13所述的方法，其中，所述附加剂为聚乙二醇修饰的类脂类分子，或者，单糖或多糖分子修饰的类脂类分子。

18.如权利要求17所述的方法，其中，所述附加剂在所形成的脂质体的各个组分中的摩尔比为0-50％；所述修饰类脂类分子的聚乙二醇分子量为50-10000。

19.如权利要求17所述的方法，其中，所述单糖或多糖分子修饰的类脂类分子为脑苷脂、神经节苷脂。

20.如权利要求1所述的方法，其中，所述氧化胺型表面活性剂为月桂基二甲基氧化胺、肉豆蔻二甲基氧化胺；二(2-羟乙基)椰油基氧化胺、二(2-羟乙基)十六烷基氧化胺、二(2-二羟乙基)硬脂基氧化胺；椰油酰氨基丙基二甲基氧化胺、肉桂酰氨基丙基二甲基氧化胺、椰油酰氨基丙基二(2-羟乙基)氧化胺。

21.如权利要求1所述的方法，其中，所述天然糖类非离子表面活性剂包括单糖酯或醚，以及多糖酯或醚，所述单糖酯或醚为吡喃糖酯、葡萄糖酯或其醚，所述多糖酯或醚为蔗糖酯、果糖酯、麦芽糖酯或其醚。

22.如权利要求1所述的方法，其中，所述聚氧乙烯型表面活性剂为分子中加成的环氧乙烷数为9-12的辛基酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚。

23.如权利要求1所述的方法，其中，所述天然糖类非离子表面活性剂为：辛基-β-D-葡萄糖甙、壬基-β-D-葡萄糖甙、癸基-β-D-葡萄糖甙、正十二烷基-β-D-麦芽糖苷、正十四烷基-β-D-麦芽糖苷。

24.如权利要求1所述的制备方法，其中，所述环糊精含有6、7、8个葡萄糖单元，即α-、β-和γ-环糊精。

25.如权利要求1所述的方法，其中，所述类脂分子与客体分子的摩尔比为0.001:1至100:1；所述主体分子与客体分子的摩尔比为0.001:1至100:1。

26.如权利要求25所述的方法，其中，所述类脂分子与客体分子的摩尔比为0.01:1至10:1；所述主体分子与客体分子的摩尔比为0.05:1至10:1。

27.如权利要求1所述的方法，其中，所述的类脂分子、客体分子、化妆品活性成分混合溶液；所述的类脂分子与客体分子混合溶液；所述的化妆品活性成分与客体分子混合溶液；所述的主体分子溶液；在上述溶液中，所使用的溶剂为水或缓冲盐溶液。

28.如权利要求27所述的方法，其中，所述缓冲盐溶液为磷酸缓冲盐溶液，柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。

29.一种脂质体化妆品，其特征在于，含有0.01-30重量％的含有化妆品活性成分的脂质体，其中所述含有化妆品活性成分的脂质体通过权利要求1-28任一项所述的方法制备；任选地，还含有化妆品辅剂的一种或多种。

30.如权利要求29所述的脂质体化妆品，其中，所述化妆品辅剂为防腐剂、着色剂、增稠剂、香味剂、多元醇、电解质，所述辅剂为化妆品的0.01-30重量％。

31.如权利要求30所述的脂质体化妆品，其中，所述着色剂包括色料、色料混合物或具有色料状效果的粉末。

32.如权利要求31所述的脂质体化妆品，其中，所述的脂质体化妆品为液体制剂、凝胶制剂、膏霜剂、膜剂。

33.如权利要求29所述的脂质体化妆品，其中，所述的脂质体化妆品为乳液。

Images