KR20120114730A - 마이크로에멀젼에 의한 감마오리자놀을 함유한 경피약물전달 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 강력한 항산화력을 지닌 감마 오리자놀을 마이크로에멀젼 시스템에 적용하여 그 내부의 포집된 활성물질의 안정도를 증가시켜 경피 약물전달체로서 응용하는 기술에 관한 것이다. 적용되는 감마 오리자놀은 그 자체의 항산화력으로 내부에 포집된 활성물질의 안정성을 증가시켜주게 되면서 활성물질을 포집한 마이크로 입자의 물리화학적 안정성을 증가시켜 주는 효과를 주게 된다. 이와 같이 본 발명은 감마오리자놀을 적용하여 나노 유화입자를 제조하고 입자 내부의 불안정한 활성물질을 안정화시키는 마이크로에멀젼 방식의 경피 약물 전달체의 제조에 관한 것이다.

Description

마이크로에멀젼에 의한 감마오리자놀을 함유한 경피약물전달 조성물{Microemulsion as a transdermal delivery system comprising Gamma Oryzanol}

본 발명은 경피 흡수가 용이한 약물전달 방식인 마이크로에멀젼 기술로써 레시틴과 감마오리자놀을 적용하여 생체친화성이 있으며 마이크로에멀젼의 나노유화입자 내부에 활성물질을 포집함으로써 활성물질의 안정도를 향상시킨 나노유화입자의 제조 및 이를 함유한 조성물에 관한 것이다.

U.S.Pat. No 5,338,761은 유용성 약물과 지질, 글리세롤과 물, 인지질 혹은 수용성 비이온성 계면활성제를 사용하여 나노미터 크기 내지 마이크로미터 크기의 유화입자를 제조하는 기술이다.

또한,U.S.Pat. No 6,120,751는 전하를 지닌 인지질을 유화제로 하여 나노입자를 제조하는 기술을 언급하고 있다.

그리고, 유화제, 오일 및 물로 이루어진 3상이 적당한 농도를 이룰 때 형성되는 마이크로에멀젼을 이용한 나노크기의 유화입자의 제조에 관한 기술 등이 보고되고 있다(미국특허 5,152,923호, WO 91/06,286호 및 WO 91/06,287호).

또한, 유화입자의 단점을 보완하기 위하여 고분자를 사용한 나노입자의 제조에 대한 연구가 진행되고 있으며, 일례로 마이크로 캡슐을 피부 표면에 장기간 머물게 하면서 서서히 약물을 방출시키도록 하는 서방성 제제에 대한 연구가 보고되었다(미국특허 5,286,495, WO 89/08,449 및 WO 88/01,213).

이러한 마이크로에멀젼 기술은 점차 발전 되어 (1)수용성 및 지용성 약물에 대한 높은 용해도, (2)열역학적 안정성, (3)투명한 제형, (4)마이크로플루다이져(고압유화기)와 같은 별도의 외부 에너지가 없어도 마이크로에멀젼화될 수 있는 기술로까지 발전 되고 있다.

그리고, 마이크로에멀젼 기술은 난용성 물질의 용해도를 높여주면서 미세한 입자상태를 만들어 주기 때문에 이에 따라 상간의 접촉 면적이 증가되면서 물질 이동이 대량으로 일어나게 되어 최종적으로 상피조직에 약물 침투를 증가시켜 준다는 점에서 비슷한 다른 에멀젼 시스템인 하이드로겔 또는 리포좀 제형에 비해 훨씬 경피흡수가 잘 이루어지는 방식이라고 언급하고 있다( Malmstem, Handbook of Microemulsion Science and Technology, Kumar,P.Ed.Marcell Dekker,Inc., New York, 1999).

경피약물전달 시스템에서 저분자의 약물이 적당한 용해도를 가질수록 각질층의 침투 및 흡수가 용이하게 이루어진다는 것은 잘 알려진 사실이다.

또한 경피약물전달 시스템에 있어서 각질층 통과와 피부 자극성 여부가 중요한 요소로서 작용하고 있다.

마이크로에멀젼 시스템은 일반적으로 오일, 계면활성제, 그리고 수상으로 구성되어 있으며 지용성 및 수용성의 활성물질이 약 1~100nm의 크기로 만들어 지게 된다.

하지만 계면활성제의 농도가 대부분 25~44 중량%, 심지어 70 중량%까지 점유하기 때문에 피부 자극성의 문제점이 대두하게 된다.

이처럼 고농도의 계면활성제를 기반으로 하는 마이크로에멀젼 방식은 약물의 침투력을 증가시키지만, 피부의 지질을 용해시키고 각질층을 변성시켜 결국에는 피부 습진이나 홍반을 유발시키는 세포독성의 부작용을 가져 오게 된다.

이에 따라 비이온 계면활성제를 적용하여 그 농도를 최소화시키거나, 콩 또는 계란에서 추출한 천연 유래의 레시틴을 적용하고 있다(Aboofazel, Lawrence: Investigations into the formation and characterization of phospholipid microemulsions. I. Pseudo-ternary phase diagrams of systems containing water, lecithin-alcohol-isopropyl myristate. Int. J. Pharm. 93, 161-175).

레시틴은 천연 유래의 세포독성이 가장 적은 물질로서 마이크로에멀젼 방식에 적절한 소재이지만, 소수성이 높기 때문에 이를 해결하고자 알코올 류를 적용하고 있다.

그러나 알코올 류는 대체적으로 피부를 건조시켜 세포독성을 유발시키는 결과를 가져 오기 때문에 무 알코올 첨가의 마이크로에멀젼 방식이 소개되고 있다.

U.S.Pat. No 5,654,337을 살펴 보면, 생체친화성 유기용제로서 이소프로필미리스테이트, 그리고 레시틴, 계면활성제, 정제수와 요소를 포함시킨 약물전달체제를 기술하고 있다.

이 방식으로 speed gel 형태의 제형이 만들어지지만 고점도로 인해 여러가지 물성의 다른 첨가제 등을 부가할 경우, 상 안정성이 깨어진다는 단점이 존재한다.

U.S.Pat. No 5,688,761은 유중수(Oil-in-Water) 마이크로에멀젼 방식으로서 수용성 단백질 계통의 약물 전달에 알맞은 방식이다.

수용성 용액을 첨가하면 유중수(Oil-in-Water)에서 수중유(Water-in-Oil) 마이크로에멀젼으로 바뀌며 활성성분을 방출하게 된다.

그러나 고농도의 계면활성제를 적용하기 때문에 세포독성의 문제점이 존재하게 된다.

U.S.Pat. No 6,191,105은 폴리머와 공유결합적으로 연동시킨 인슐린 단백질의 경구 또는 정맥주사 전달방식을 기술하고 있다.

이 방식은 HLB값으로 3~7 범위 내의 친유성 및 친수성 성질을 함께 나타내는 수중유(Water-in-Oil) 마이크로에멀젼을 기술하고 있다.

그러나 이 방식은 제형의 점도상승을 가져 올 수 있지만, 생체 내에서 대사화 되지 않는 폴리에칠렌글리콜 또는 프로필렌글리콜을 사용하고 있는 문제점을 안고 있다.

U.S.Pat. No 6,602,511은 이중 연속성 마이크로에멀젼이라는 기술을 소개하고 있는데, 친수성 및 친유성 계면활성제, 계면활성제 film modifier, 마이크로에멀젼 계의 극성을 조절하는 첨가제 등으로 이루어진 유중수(Oil-in-Water) 시스템으로써 지용성 약물의 경구, 정맥주사,경피흡수에 적합한 방식이라고 되어 있다.

그러나 이 기술은 에탄올을 3~13중량% 을 사용하기 때문에 반복 투여에 따른 세포독성의 문제점을 안고 있다.

U.S.Pat. No 6,638,537은 친유성 약물의 정맥주사 용으로 유중수(Oil-in-Water)마이크로에멀젼 기술을 적용하고 있다.

장쇄 폴리머 계면활성제와 보조계면활성제로서 단쇄 지방산(C8~C12)을 사용하고 있고 무알콜 적용의 기술이지만 최소 25중량%의 계면활성제를 사용하기 때문에 세포독성의 문제점이 존재한다.

U.S.20080139392는 저농도의 레시틴, 9개 이상의 탄소로 이루어진, HLB값이 5이하인 친유성 첨가제(예: Sorbitan monooleate)와 친수성 성격이 강한 양친매성 첨가제(예:Octanoic acid 및 Sodium Octanoate혼합물)를 적용한 서방성의 마이크로에멀젼 약물 전달방식을 기술하고 있다. 무알콜 적용 및 계면활성제를 최소량으로 사용하여 생체친화적인 에멀젼을 적용시킨 기술이지만, 실제 2중량% 내지 6중량% 농도의 레시틴에 Octanoic acid와 Sodium Octanoate를 상당량(최대 24중량%) 적용하여 상온에서 장시간 방치하게 되면 이들 물질의 용해도 등의 차이로 인해 투명성이 사라지면서 침전물이 발생하는 등의 열역학적 안정성이 깨어지는 문제점이 존재하게 된다.

일반적으로 마이크로에멀젼에 있어서 유화막은 외계와 동적 평형상태에 놓여지게 되는데 이 때 유화물 내부에 있는 활성성분이 포함된 유화입자는 지속적으로 수상과 접하게 되며 이에 따라 유화입자는 산화, 분해에 의한 변성이 생기는 문제점이 나타난다.

또한, 유화막은 물리 화학적으로 매우 약하고 불안정하여 염이나 전하를 지닌 유기물 또는 무기물에 의한 접촉으로 인하여 쉽게 파괴되고, 열이나 빛에 대해서도 매우 약하기 때문에, 장기간 보관에 있어 불안정한 상으로 바뀔 수 있다.

마이크로에멀젼의 나노미터 크기의 유화입자의 이러한 특성 상, 수용액 상에서 불안정한 경향을 보이는 활성성분을 적용하는 것은 더욱 위험이 따르게 된다.

따라서, 불안정한 활성성분을 함유한 나노 유화입자를 제형화 하는 데에 있어서 유화 입자 내 안정성이 선결되어야 한다.

레시틴을 적용하는 경우에도 내부에 포집되는 활성물질의 안정성을 향상시키기 위한 방법이 필연적으로 요구되고 있으며, 특히 활성성분을 안정하게 포집되도록 하는 과정을 거쳐 실제 상피조직에서 활성성분이 대량 용출되도록 하는 마이크로에멀젼 기술에 대한 개선 필요성이 요구되고 있다.

상기 언급한 문제점을 해결하기 위하여, 본 발명자들은 생체친화성이 우수한 레시틴과 함께 감마오리자놀을 적용함으로써 이 물질이 가진강력한 항산화력 작용으로 나노유화입자 내부의 불안정한 활성물질을 안정하게 포집, 장기 보관할 수 있을 것으로 예상하였으며, 이렇게 안정화된 활성성분을 포집한 마이크로에멀젼을 피부에 실제 적용할 경우에 물리적인 전단력에 의하여 계면막이 일시에 파괴되면서 내부에 포집된 다량의 활성성분이 상피조직에 침투하여 방출될 수 있을 것으로 예상하고, 마이크로에멀젼에 적용하기 위한 연구를 진행하였다.

그 결과, 적절한 함량비의 레시틴과 감마 오리자놀을 사용하여 나노 유화입자를 제조할 경우, 나노 유화입자 자체의 물리화학적 안정도가 크게 향상되었음을 확인하였으며, 또한, 내부에 포집된 활성물질의 안정성이 크게 향상되었음을 확인하였다.

즉, 생체적합성이 우수한 레시틴 및 항산화력이 우수한 감마 오리자놀을 최적비로 사용함으로써 상기와 같은 문제점을 해결할 수 있음을 알게 되어 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 레시틴과 감마 오리자놀을 적정비로 사용함으로써 물리화학적으로 안정한 나노 유화입자의 제조방법을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 상기 나노 유화입자의 내부의 활성성분을 안정하게 포집하는 방법에 관한 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 상기 나노 유화입자를 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 레시틴과 감마 오리자놀을 적정비로 사용함으로써 물리화학적으로 안정한 1nm ~500nm 크기를 가지며, 내부에 활성 성분을 포집함으로써 생성된 나노 유화입자의 제조 방법 및 이를 함유하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 나노유화입자의 크기는, 바람직하게는 30nm ~150nm인 것이 좋으며 보다 바람직하게는 50nm 인 것이 좋다.

본 발명에 적용되는 감마 오리자놀은 항산화제로 널리 알려진 비타민E 보다 4배나 강력한 항산화 효과를 지니고 있다(Hiramitsu T & Armstrong D, Preventive effect of antioxidants on lipid peroxidation in the retina, Ophthalmic Res., 23(1991), 196-203).

그리고, 혈중 콜레스테롤 치를 낮추어 주며 콜레스테롤의 체내 흡수를 억제하며 혈소판 응집을 감소시키고 고지혈증을 치료하며 폐경기 증상의 완화 및 근육 강화에도 사용되고 있다.

본 발명에 사용되는 레시틴은 포스파티딜콜린, 포스파디딜에탄올아민, 포스파티딜이노시톨 및 포스파티딜세린으로 이루어지는 혼합물 내지 또는 단일 물질로서 정제 정도에 상관이 없으며, 수소첨가 정도에 무관하며, 상기 유도체의 함량비에 무관하게 적용할 수 있다.

레시틴의 유화제로서의 기능을 보조하기 위하여 추가적으로 계면활성제를 사용할 수 있으며, 나노 유화입자의 분산 안정성 향상을 위하여 수용성 고분자를 병행하여 사용할 수 있다.

상기 나노유화입자는 나노미터 크기의 입자가 분산되어 있는 상태를 의미하며, 수용액 중 나노유화입자의 함량은 0.0001중량％ 내지 90중량％ 정도가 적당하며, 바람직하게는 0.1중량％ 내지 50중량％, 보다 바람직하게는 10중량％인 것이 좋다.

본 발명에 사용되는 활성성분은 항생제, 항종양제, 항염증제, 해열제, 진통제, 항부종제, 진해 거담제, 진정제, 근육이완제, 항간질제, 항궤양제, 항우울제, 항알레르기제, 강심제, 항부정맥제, 혈관확장제, 혈압강하제, 당뇨치료제, 항상성제제, 폴리펩티드, 호르몬 등의 의약원료, 항산화제, 미백원료, 콜라겐 합성 촉진제 등의 주름제거?완화제, 피부장벽강화 및 피부 보습력 증강제, 나노 입자의 무기물 중에서 수상 또는 유상에서 난용성이면서 불안정한 활성물질이 선택된다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정 되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림, 영양크림, 팩, 젤, 피부 점착타입의 화장료, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션 등의 제형을 갖는 화장료, 샴푸, 린스, 바디크렌저, 비누, 치약, 구강청정제 등의 세정료 조성물일 수 있으며, 또한, 로션, 연고, 하이드로겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 의약료 제형일 수 있다.

본 발명은 생체친화성이 우수한 레시틴과 항산화력이 우수한 감마 오리자놀을 이용하여 상기 1 내지 500 나노미터 크기의 유화입자를 제조하고, 그 안에 활성물질을 포집시켜 이를 피부에 도포시, 물리적인 전단력에 의하여 계면막이 일시에 파괴되면서, 다량의 나노입자가 피부 상피조직에 침투하게 하게 한 것이다.

즉, 피부 도포 시 나노 유화입자의 외부환경이 소수성으로 바뀜으로써 계면막을 형성하는 레시틴과 감마 오리자놀이 세포 사이의 인지질 층으로 흡수되고 이 따라 내부에 포집된 활성성분이 순간적으로 대량 방출하게 되며, 특히, 50 나노미터 이하의 나노입자는 각질층을 침투, 확산되어 진피층 상단까지 도달하게 되고 이에 따라 방출된 활성물질의 피부 상피조직으로 흡수가 극대화 되는 장점이 있다.

이와 같이 방출되는 유효성분의 효능 및 효과로서 피부 세포의 활성화, 피부 미백, 주름개선, 항산화, 피부 보습 등의 피부미용 및 소염진통 효과를 들 수 있다.

본 발명에서 레시틴의 유화력을 보조하기 위하여 사용할 수 있는 계면활성제는 그 종류와 구조에 제한됨이 없으나, 예를 들면, 고급지방산 비누,알킬황산에스테르염, 폴리옥시에틸렌알킬에테르황산염, 알킬에테르인산에스테르염, N-아실아미노산염 등의 음이온계면활성제, 염화알킬트리메틸암모늄, 염화디알킬디메틸암모늄, 염화벤잘코늄 등의 양이온계면활성제, 알킬디메틸아미노초산베타인, 알킬아미드디메틸아미노초산베타인, 2-알킬-N-카르복시-N-하이드록시이미다졸리늄베타인 등의 양쪽성계면활성제, 폴리옥시에틸렌 형태, 다가알콜에스테르 형태, 에틸렌옥사이드/프로필렌옥사이드 블록 공중합체 등의 비이온성계면활성제, 에틸셀룰로스 등과 같은 같은 고분자 계면활성제, 라놀린, 콜레스테롤, 사포닌 등의 천연계면활성제 등의 적용이 가능하다.

본 발명에서 나노 유화입자의 분산 안정성을 위하여 사용되는 수용성 고분자 물질은 제한이 없으나, 예를 들면 천연 고분자류로서 아카시아검, Irish moss, karaya gum, gum tragacanth, gum guaiac, xanthan gum, locust bean gum과 이의 유도체가 가능하며, 카세인, 젤라틴, 콜라겐, 알부민, 글로블린, 피브린 등의 단백질과 이의 유도체, 셀룰로오스, 덱스트린, 펙틴, 전분, 아가, 만난 등의 천연 유래 카보하이드레이트류와 이의 유도체, 합성된 고분자로서 폴리비닐류 고분자와 이의 유도체(예 : 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐메틸에테르, 폴리비닐에테르 등), 폴리카르복시산과 이의 유도체(예 : 폴리아크린산, 폴리메타크릴산, 폴리메틸메타그릴레이트 등), 폴리에틸렌, 폴리프로필렌 등의 hydrocarbone류와 이의 이성질체, 폴리사카라이드와 이의 유도체(폴리슈크로즈, 폴리글루코스, 폴리락토스 및 이의 염류) 등이 가능하며, 상기한 고분자들의 단독, 병용, 가교화된 형태 및 염의 형태를 가진 고분자들이 가능하다.

상기한 고분자류는 생체 적 합성이 우수한 고분자로서 본 발명의 나노 유화입자의 분산안정성의 향상에 기여할 수 있다.

나노 유화입자에 포집되어 사용되는 활성성분에는 특별한 제한이 없으나, 예를 들면 의약료로서 젠타마이신(gentamycin), 디베카신(dibekacin), 카넨도마이신(kanendomycin), 리비도마이신(lividomycin), 토브라마이신(tobramycin), 아미카신(amikacin), 프라디오마이신(fradiomycin), 시소미신(sisomicin), 테트라사이클린 하이드로클로라이드(tetracycline hydrochloride), 옥시테트라사이클린 하이드로클로라이드(oxytetracycline hydrochloride), 롤리테트라사이클린(rolitetracycline), 옥시사이클린 하이드로클로라이드(doxycycline hydrochloride), 암피실린(ampicillin), 피페라실린(piperacillin), 티카르실린(ticarcillin), 세팔로틴(cephalothin), 세팔로리딘(cephaloridine), 세포티암(cefotiam), 세프술로딘(cefsulodin), 세프메녹심(cefmenoxime), 세프메타졸(cefmetazole), 세파졸린(cefazolin), 세포탁심(cefotaxime), 세포페라존(cefoperazone), 세프티족심(ceftizoxime), 목솔락탐(moxolactam), 락타모세프(latamoxef), 티에나마이신(thienamycin), 설파제신(sulfazecin), 아즈티레오남(azthreonam) 등의 항생제, 블레오마이신 하이드로클로라이드(bleomycin hydrochloride), 메토트렉테이트(methotrexate), 엑티노마이신 D(actinomycin D), 미토마이신 C(mitomycin C), 빈블라스틴 설페이트(vinblastine sulfate), 빈크리스틴 설페이트(vincristine sulfate), 다우노루비신 하이드로클로라이드(daunorubicin hydrochloride), 아드리아마이신(adriamycin), 네오카르시노스타틴(neocarcinostatin), 시토신 아라비노사이드(cytosine arabinoside), 플루오로우라실(fluorouracil), 테트라하이드로푸릴-5-플루오로우라실(tetrahydrofuryl-5-fluorouracil), 크레스틴(krestin), 피시바닐(picibanil), 렌티난(lentinan), 레바미솔(levamisole), 베스타틴(bestatin), 아지멕손(azimexon), 글리시르히진(glycyrrhizin), 폴리 I:C, 폴리 A:U, 폴리 ICLC 등의 항종양제, 나트륨 살리실레이트(sodium salicylate), 설피린(sulpyrine), 나트륨 플루페나메이트(sodium flufenamate), 나트륨 디클로페낙(sodium diclofenac), 나트륨 인도메타신(sodium indomethacin), 모르핀 하이드로클로라이드(morphine hydrochloride), 페티딘 하이드로클로라이드(pethidine hydrochloride), 레보르파놀 타르타레이트(levorphanol tartrate), 옥시모르폰(oxymorphone) 등의 항염증, 항부종제, 라이소자임 클로라이드(lysozyme chloride), 단백질 합성 자극 펩타이드 등의 호르몬 의약품, 조효소 Q10(co-Q10), 비네아트롤(vineatrol(resvaratrol)), BHT, 비타민 A 및 이의 유도체, AA2G(ascorbic acid-2-glucoside)를 포함한 수용성 비타민 C유도체들, 비타민 E와 이의 유도체, triclosan, chlorohexidine, cetylpyridinium chloride, 천연정유 등의 항균제, minoxidil, TGF(transforming growth factor), EGF(Epidermal growth factor), FGF(Fibroblast growth factor), IGF(Insuline-like growth factor), testosterone, androgen등의 육모제, 양모제, 미백원료, 콜라겐 합성 촉진제 등의 주름제거, 완화제 및 세라미드, 스핑고산 등의 피부장벽강화 및 피부보습력 증강제, 파파인(papain)등의 각질 제거효소, 토르말린(Tourmaline), 니아신아마이드(Niacinamide),아데노신(adenosine), N-아세틸글루코스아민(N-acetylglucosamine), 우르솔릭산(ursolic acid), 디아세틸볼딘(diacetyl boldine) 등이 함유 가능하며, 나노 입자 내부에 포집하는 활성성분의 종류 및 함량은 목적과 경우에 따라 조절이 가능하다.

본 발명에서 설명하는 활성성분은 전달하고자 하는 약물의 종류, 용해도 등의 물리화학적 성질에 따라서 레시틴 및 감마 오리자놀의 혼용비율이 다르게 적용된다.

활성물질을 포함하는 나노유화입자 조성물 즉, 마이크로에멀젼 조성물을 100 중량% 기준으로 할 때 마이크로에멀젼화 하기 위한 레시틴의 양은 0.1~10중량%의 범위로써, 바람직하게는 1.0 내지 5.0중량%의 레시틴을 적용한다.

내부 포집 활성성분의 종류에 따라 다르게 적용되는 감마 오리자놀은, 활성물질을 포함하는 나노유화입자 조성물 즉, 마이크로에멀젼 조성물을 100 중량% 기준으로 할 때 0.001 내지 10중량%으로 사용하며, 바람직하게는 0.1 내지 5.0중량%으로 적용한다.

이하 본 발명의 구성을 실시예, 참고예, 시험예 및 표를 통하여 상세히 설명하기로 한다. 다만, 본 발명의 권리범위는 실시예, 참고예, 시험예 등에 의하여 본 발명의 청구범위가 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 의해 제공되는 레시틴과 감마 오리자놀을 이용한 나노유화입자는 물리화학적으로 안정한 상태를 장기간 유지하는 특징이 있으며, 특히, 내부에 활성성분을 포집시키는 경우, 소량의 감마 오리자놀을 사용함으로써 내부에 포집된 활성성분의 산화를 막아 주어 나노 유화입자를 장기간 안정하게 유지시켜주는 장점을 가지게 된다.

감마 오리자놀은 Jinan Bangda Pharmaceutical Co., Ltd의 원료를 구입하여 사용하였다.

레시틴은 PHOSPHOLIPON 90을 Nattermann Phopholipid GmbH에서 구입하여 사용하였으며, 전체 레시틴 중의 Phosphatidylcholine은 92.4%, lysophosphatidylcholine은 2.8%였다.

활성물질을 포함하는 나노유화입자 조성물 즉, 마이크로에멀젼 조성물 100 중량% 기준으로 하여 레시틴의 양은 0.1~10중량%의 범위로써, 바람직하게는 1.0 내지 5.0중량%의 레시틴을 적용한다. 내부포집 활성성분의 종류에 따라 사용되는 감마 오리자놀은, 활성물질을 포함하는 나노유화입자 조성물 즉, 마이크로에멀젼 조성물 100 중량% 기준으로 하여 0.001 내지 10.0중량%으로 적용하며, 바람직하게는 0.01 내지 5.0중량%으로 적용한다.

나노 유화입자 및 내부에 활성성분을 포집한 나노 유화 입자의 제조, 입자 크기 그리고, 감마 오리자놀의 함유 여부에 의한 활성물질의 안정도, 피부침투력 및 화장료 조성물로서의 적용예를 살펴 보면 다음과 같다.

실시예 1: 화장료 용 마이크로에멀젼 제조(감마 오리자놀의 농도별 유화입자의 제조)

나노 유화입자의 내부에 포집시킨 활성성분의 안정화 정도를 확인하기 위하여 다음과 같이 레티놀을 활성성분으로 내부에 포집시킨 화장료용 나노 유화입자를 제조하였다.

레티놀 0.7g, 이소프로필미리스테이트 10g, 레시틴 5g 혼합물에 감마 오리자놀을 “무첨가, 0.1g, 1.0g, 2.0 g, 3g” 으로 각각 혼합, 가온하여 60℃에서 균일 용해시키면서 정제수로 100g이 되도록 한다. 호모믹서를 사용하여 5,000rpm, 3분간 1차 유화를 한 후, 마이크로플루다이저를 사용하여 3회 처리하여 감마 오리자놀의 농도별로 나노 유화입자를 제조하였다.

나노 유화입자의 평균 입경 값은 [표 1] 같다.

*평균입경은 동적 레이저 광산란법(Dynamic light scattering, Zetasizer 3000HS, Malvern, UK)을 사용하여 측정하였으며, 산란각은 90도로 고정하고, 온도는 25℃으로 유지하였다.

수역학적 입자 직경과 분산도(polydispersity)는 contin 방법에 의거해 계산하였다.

구분	레티놀 첨가 유무	감마오리자놀(투입량)	평균 입경(nm)
실험 1	유	무첨가	35
실험 2-a	유	0.1	36
실험 2-b	무	0.1	35
실험 3-a	유	1.0	38
실험 3-b	무	1.0	38
실험 4-a	유	2.5	45
실험 4-b	무	2.5	41
실험 5-a	유	5.0	48
실험 5-b	무	5.0	45

실시예 2: 나노입자의 상 안정도

나노 유화입자의 상 안정도를 확인하기 위하여 각각의 실시예를 온도가 설정된 인큐베이터에 제조된 시료를 보관하고, 30일이 경과한 후에 나노 유화입자의 분산 안정성 및 유화안정도에 관한 경시변화를 확인하였다.

나노 유화입자의 입경의 증감을 측정하기 위하여 실시예 1에서 사용한 동적 레이저 광산란법을 사용하여 측정을 진행하였으며, 육안으로 관찰하여 응집, 침전이 되는 시료의 경우는 별도의 입경 측정을 실시하지 않았다. 실험결과를 다음의 [표 2]에 정리하여 나타내었다.

구분	0℃	25℃	37℃	45℃
실험 1	+	-	-,-,-	-,-,-
실험 2-a	+	+	+	+
실험 2-b	++	++	+	+
실험 3-a	++	++	+	+
실험 3-b	++	++	+	+
실험 4-a	++	++	++	++
실험 4-b	++	++	++	++
실험 5-a	++	++	++	++
실험 5-b	++	++	++	++
* 상기 표에서, ++: 입경의 변화가 초기 입경에 대해서 50%이하 +: 입경의 변화가 초기 입경에 대해서 50% 초과 내지 100%이하 -: 입경의 변화가 초기 입경에 대해서 100% 초과인 경우 -, -: 응집 및 침전 현상 -, -, -: 층 분리 현상

상기 [표 2]의 결과를 두고 볼 때, 감마 오리자놀의 첨가 없이 나노입자화 된 경우(실험 1)에는 시간 경과에 따라 응집, 침전 등으로 육안으로 관찰되는 입자가 형성되어 안정도가 매우 낮게 나타났음을 알 수 있다.

그러나, 감마 오리자놀을 함께 사용하여 제조한 나노 유화입자의 경우에는 활성물질인 레티놀의 첨가 유무에 관계없이 30일이 경과한 후에도 물리적으로 안정한 상을 유지하고 있음을 확인할 수 있다.

실시예 3: 활성성분의 안정도 평가

감마 오리자놀을 적용한 나노 유화 입자 내의 활성성분인 레티놀의 안정도를 확인하기 위하여 실시예 1의 [표 1]의 조성물 중 레티놀을 포함시킨 마이크로에멀젼 조성물을 25℃에서 30일간 방치 한 후 고성능 액체크로마토그라피를 사용하여 레티놀의 함량을 측정하였다.

레티놀 정량 분석 조건은 다음과 같다.

a. 컬럼: C18(4.6X250mm, 5m)

b. 이동상: 메탄올 혹은 메탄올 93%

c. 유속: 0.8ml/min

d. 검출기: UV 325nm

구분	레티놀 함량(중량%)	감마오리자놀(투입량)	30일 경과 후 레티놀 함량(중량%)
실험 1	0.7	무첨가	0.180
실험 2-a	0.7	0.1	0.196
실험 3-a	0.7	1.0	0.196
실험 4-a	0.7	2.5	0.198
실험 5-a	0.7	5.0	0.198

상기의 [표 3]에 의한 결과를 볼 때, 감마 오리자놀을 함유하지 않은 나노 유화입자 중의 활성성분인 레티놀은 25℃에서 상당한 함량 감소를 나타내는 반면에 항산화 작용을 하는 감마 오리자놀이 함유된 나노 유화입자 내부에 포집된 활성성분인 레티놀은 함량이 96% 이상 유지되고 있어 상당히 안정한 상태를 보여 주고 있음을 확인할 수 있다. 상기의 결과로부터, 레시틴과 함께 적용되는 감마 오리자놀이 나노 유화 입자의 안정성에 미치는 영향을 알 수 있다.

실시예 4: 감마 오리자놀을 함유한 마이크로에멀젼의 피부 침투력 시험

피부침투력 시험은 MatTek Permeation Device에 재조합된 사람 피부 Epiderm^TM EPI-200을 사용하였고 시료는 하기 [표 4]의 실험 6 내지 10의 화장료용 마이크로에멀젼 조성물을 대상으로 하였다.

실험6, 실험7, 실험8, 실험9, 실험 10에서 각각 0.4mL의 시료를 취하여 donor compartment에 투입하고 PBS용액(0.01M Phosphate+0.137M NaCl, pH 7.4) 5mL는 receptor compartment에 투입하였다. 정해진 시간((0.5 h, 1.5 h, 2.5 h, 3.5 h, 4.5 h and 5.5 h) 에 맞추어 receiver solution을 새로운 PBS 용액으로 대체하였다.

그리고 고성능 액체크로마토그라피를 사용하여 활성성분인 알부틴의 용출 함량을 측정하였다. [표 5]는 그 결과이다.

구분	성분(중량%)	실험 6	실험 7	실험 8	실험 9	실험 10
A	이소프로필미리스테이트	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
	스테아린산	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
	감마오리자놀	0.1	1.0	2.0	3.0	5.0
	시클로메치콘	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	방부제	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
	부틸렌글라이콜	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0
B	글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	정제수	64.3	63.4	62.4	61.4	59.4
	레시틴	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	알부틴	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0

*상기 실험 6 내지 10의 마이크로에멀젼 조성물을 제조 시 A상과 B상을 혼합, 60℃에서 호모믹서를 사용하여 5,000rpm, 3분간 1차 유화를 한 후, 마이크로플루다이저를 사용하여 3 회 처리하였다.

구분	시간(h)
	0.5	1.5	2.5	3.5	4.5	5.5
실험 6	0.1100	0.2640	0.3259	0.3885	0.3918	0.3955
실험 7	0.1200	0.2866	0.2276	0.3246	0.3899	0.3907
실험 8	0.1438	0.2646	0.2745	0.3265	0.3635	0.3988
실험 9	0.1450	0.2891	0.3276	0.3478	0.4020	0.4041
실험 10	0.1588	0.2815	0.3234	0.3476	0.4022	0.4027

5.5시간 경과후 용출량과 시간에 따른 용출량 곡선을 보면 경피흡수 시험결과가 양호하게 나타났다. 감마 오리자놀의 비율을 증가시켜 경피흡수 수치가 어떻게 나타나는지를 알고자 하였으나 큰 상관관계가 없는 것으로 나타났다. 단지, 감마 오리자놀의 농도가 높아질수록 용출량이 조금씩 증가하는 점을 볼 때, 감마 오리자놀의 물성이 친유성이며 이에 따라 활성물질의 상피조직의 세포간지질에의 침투가 용이해 질 수 있다는 가정을 할 수 있다.

따라서, 본 발명에 의한 마이크로에멀젼 방식의 약물전달에 있어 활성물질의 안정성을 유지할 수 있는 방법으로써 강력한 항산화제인 감마 오리자놀의 활용이 고려된다.

특히, 불안정한 물성을 보이는 활성물질을 포함시키는 마이크로에멀젼 조성물, 즉 나노사이즈화된 약물이 피부와 접촉되는 표면적이 극대화되어 약물의 경피흡수를 촉진시키는 마이크로에멀젼의 특성상 안정한 상태의 약물의 효과적인 전달이 가능해져 의약료 및 화장료 등에 사용되는 수용성 및 유용성 약물의 효능을 극대화할 수 있다.

Claims (6)

1. 레시틴 및 감마 오리자놀을 사용하여 마이크로에멀젼을 제조하고, 그 내부에 활성물질을 포집한 나노유화입자의 제조 및 이를 함유한 조성물
   
2. 제 1 항에서 있어서, 상기 레시틴은 포스파티딜콜린, 포스파디딜에탄올아민, 포스파티딜이노시톨 및 포스파티딜세린으로 이루어지는 그룹에서 선택된 적어도 1종 이상의 인지질인 것을 특징으로 한다.
   
3. 제 1 항에 있어서, 감마 오리자놀의 적용되는 양은 활성물질을 포집하는 나노유화입자 조성물 100 중량% 기준으로, 0.001 내지 20 중량 %로 사용하며, 바람직하게는 0.01 내지 5중량%으로 한다
   
4. 제 1 항에 있어서, 상기 활성물질은 난용성 의약료, 미백원료, 콜라겐 합성 촉진제, 주름제거 완화제, 피부장벽강화제, 피부보습력 증강제, 각질제거효소,
   '토르말린으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 활성물질이다.
   
   
5. 제 1 항에 있어서, 감마오리자놀을 사용하여 나노유화 입자의 내부 포집된 활성물질의 물리적, 화학적 안정성을 증가시킨 나노 유화입자의 제조방법
   
6. 제 1 항에 있어서, 레시틴과 감마오리자놀을 사용하여 제조된 나노유화입자를 함유하는 화장료 조성물