CN1045976A - 新的取代的替考拉宁的烷基酰胺衍生物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及替考拉宁的新的C63酰胺衍生物(其中酰胺部分是由二或多烷基胺衍生而得)和制备这些衍生物的方法。
制备本发明的衍生物的方法包括将相应的替考拉宁与形成活性酯的反应物如氯乙腈反应，然后将所述的活性酯与合适的二或多烷基胺接触。
本发明的酰胺衍生物对抗格兰氏阳性和格兰氏阴性细菌有活性。

Description

本发明涉及具有通式Ⅰ的取代的替考拉宁（Teicoplanin）化合物的烷基酰胺及其药用加成盐，
式中
R为氢或胺官能团的保护基;
Y为通式-NR1-alk1-〔X-alk2〕p-〔T-alk3〕q-W的化合物，其中
R1为氢或（C1-C4）烷基;
alk1、alk2和alk3各为含有2-10个碳原子的直链或支链亚烷基;
P为1至50的一个整数;
q为0至12的一个整数;
X为-NR2-或氧原子，其中R2为氢、（C1-C4）烷基、alk4NR3R4，其中alk4为含有2-4个碳原子的直链或支链亚烷基，R3为氢或（C1-C4）烷基，R4为氢、（C1-C4）烷基或5-6元环烷基;或R1和R2一起形成连接两个氮原子的（C2-C4）亚烷基，其条件是这种情况下P为1;
T为-NR5-或氧原子，其中R5为氢、（C1-C4）烷基、alk5NR6R7，其中alk5为含有2-4个碳原子的直链或支链亚烷基，R6为氢或（C1-C4）烷基，R7为氢、（C1-C4）烷基或5-6元环烷基，或R2和R5一起形成连接二个氮原子的（C2-C4）亚烷基，其条件是在这种情况下p和q均为1;
W为羟基、NR8R9，其中R8为H或（C1-C6）烷基，R9为H、（C1-C6）烷基、5-6元环烷基、COOR10（其中R10为（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基）和N R11R12R13An
Figure 901017590_IMG7
，其中
R11、R12和R13各为（C1-C4）烷基，An 为药用酸衍生的阴离子;其条件是，当X同时为NR2时，P为1，q为0，而W不为羟基;
A为H或-N〔（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基;
B为H或N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基;
M为氢或α-D-吡喃甘露糖基;
其另一条件是，只有当A和M同时为氢时，B才能为氢。
替考拉宁（Teicoplanin）是早先称为teichomycin的抗菌物质的国际非独占名称（INN），该抗菌物质是通过在含有可吸收碳、氮和无机盐源的培养基中培养菌株（Actinoplanes        teichomyceticus        nov.sp.ATCC        31121）的方法获得的（见美国专利4，239，751号）。
根据上面引用的专利所描述的步骤，含Teichomycin A1、A2和A的抗菌复合物可按常规方法通过用适宜的不溶于水的有机溶剂萃取，再从萃取溶剂中沉淀的方法自发酵液中收集。然后用交联葡萄糖凝胶（Sephadex ）的柱色谱将分离的抗菌复合物的主要成份Teichomycin A2与其它成份分离。英国专利2121401号指出，抗菌Teichomycin A2实际是五种密切相关的共同组产的主要组分的混合物。
根据近来的结构研究，替考拉宁A2（早先称为Teichomycin A2）主组分1、2、3、4和5可用上面的通式Ⅰ表示，式中R为氢，Y为羟基，A为-N〔（C10-C11-）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基。
更具体地说，在替考拉宁A2组分1中，〔（C10-C11）-脂族酰基〕取代基为2-4-癸烯酰基，在替考拉宁A2组分2中所述的取代基为8-甲基壬酰基，在替考拉宁A2组分3中所述的取代基为癸酰基，在替考拉宁A2组分4中所述的取代基为8-甲基癸酰基，在替考拉宁A2组分5中所述的取代基为9-甲基癸酰基。
欧洲专利申请公开306645号描述了替考拉宁化合物的生产，其中β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基的脂肪酰基是6-甲基-辛酰基（化合物A或RS3）或正壬基（化合物B或BS4）。
Zanol等人在第十七届色谱分析国际讨论会（1988年9月25日至30日在维也纳举行）发表的题为《替考拉宁的少量组分的高效色谱分离和结构测定》的论文中描述了其它二种替考拉宁化合物（RS1和RS2）。
所述的化合物的特征在于β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基的脂族酰基分别是甲基-十一烷酰基（RS1）和十二烷酰基（RS2）。
所有的糖基如果存在，则通过O-配糖键连接到替考拉宁核上。
另外，现已发现，可将替考拉宁，它的一种纯的成分或任意的各种成分以任意比例形成的混合物通过对一个或二个糖基选择性水解转化成单一的抗菌产品。他们被称为抗生素L17054和抗菌生素L17046并分别述于欧洲专利119575号和欧洲专利119574号。
生产抗生素L17054的优选水解条件是：采用0.5N盐酸，反应温度为70至90℃，反应时间通常为15至90分钟。
抗生素L17054可用通式Ⅰ表示，式中Y为羟基，R和A为氢，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基，其中糖基通过O-配糖键连接到肽核上。
制备抗生素L17046的优选水解条件是：采用1-3N盐酸，反应温度为50至90℃，反应时间通常为30至60分钟。
抗生素L17046可用通式Ⅰ表示，式中Y为羟基，R、A或M为氢原子，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基，其中糖基通过O-配糖键连接到肽核上。
欧洲专利申请公开301247号描述了脱甘露糖基替考拉宁衍生物，即通式Ⅰ中A和B不为氢，M为氢且Y为羟基的化合物。
替考拉宁化合物的所有糖基完全选择裂解得到糖苷配基分子，该分子称为抗生素L17392或脱葡糖替考拉宁，且可用通式Ⅰ表示，式中Y为羟基，R、A、B和M各自为氢。该选择水解方法在欧洲专利申请公开146053中有述。
欧洲专利申请公开0090578号公开了具有相同结构式的一种物质，该物质称为抗生素A41030成分B。
该物质可用生物方法获得，该方法包括在合适的介质中用菌株费吉尼亚链霉菌（streptomyces        virginiae）NRRL12525或费吉尼亚链霉菌NRRL        15156进行发酵，然后离析，提纯并分离抗生素A41030的组分，抗生素A41030是至少七种成分的抗生素复合物，包括抗生素A41030成分B。
所有上述化合物，即替考拉宁、替考拉宁A2复合物、替考拉宁A2组分1、替考拉宁A2组分2、替考拉宁A2组分3、替考拉宁A2组分4、替考拉宁A2组分5、“化合物A或RS3”“化合物B或RS4”、RS1、RS2，抗生素L17054、抗生素L17046、抗生素L17392、欧洲专利申请公开301247号的脱甘露糖基替考拉宁衍生物和其以任何比例形成的混合物是制备本发明的取代的烷基酰胺衍生物的适宜原料。
在本说明书中，“替考拉宁化合物”或“替考拉宁原料”是指上述原料中的任意一种，好美国专利4，239，751所述方法获得的替考拉宁、其进一步提纯的任何物质、替考拉宁A2复合物，上述通式Ⅰ中各取代基是下述基团的化合物：R为氢或N-保护基，Y为羟基，A为氢或-N〔（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，B为氢或N-乙酰基-β-D-2-氨基吡喃葡糖基，M为氢或α-D-吡喃甘露糖基，其条件是只有当A和M同时为氢时，B才为氢;其盐或上述物质以任意比例形成的混合物。
本文所用的术语“烷基”，不管是单独还是与其它取代基组合，均包括直链或支链烃基，具体地说，“（C1-C6）烷基”表示含1至6个碳原子的直链或支链脂族烃链，如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、1-己基、2-己基、3-己基、3，3-二甲基-1-丁基、4-甲基-1-戊基和3-甲基-1-戊基等;“（C1-C4）烷基”表示含1至4个碳原子的直链或直链烃链，如上面例举的含1至4个碳原子的那些烷基。
本文所用的术语“alk1”、“alk2”、“alk3”表示含2至10个碳原子的独立的直链或支链亚烷基链，例如：
-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-，
Figure 901017590_IMG10
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-，
Figure 901017590_IMG11
类似地，“alk4”和“alk5”表示含2至4个碳原子的独立的直链或支链亚烷基链，例如上面例举的含2至4个碳原子的那些亚烷基。
优选的通式Ⅰ的化合物是式中，
R为氢或氨基官能团的保护基;
Y为通式-NR1-alk1-〔X-alk2〕p-〔T-alk3〕q-W的化合物及其药用加成盐，
其中，
R1为氢或（C1-C4）烷基，
alk1、alk2和alk3各自为含2-4个碳原子的直链或支链亚烷基;
p为1至12的一个整数;
q为0至12的一个整数;
X为-NR2-或氧原了，其中，R2为氢、（C1-C4）烷基、alk4NR3R4基，其中alk4为含2至4个碳原子的直链或直链亚烷基，R3为氢或（C1-C4）烷基，R4为氢、（C1-C4）烷基或5-6元环烷基;或R1和R2一起形成连接二个氮原子的（C2-C4）亚烷基，其条件是在这种情况下p为1：
T为-NR5-基或氧原子，其中，R5为氢、（C1-C4）烷基、alk5NR6R7基，其中alk5为含2至4个碳原子的直链或直链亚烷基，R6为氢或（C1-C4）烷基，R7为氢、（C1-C4）烷基或5-6元环烷基;或R2和R5一起形成连接二个氮原子的（C2-C4）亚烷基，其条件是在这种情况下p和q均为1：
W为羟基、NR8R9，其中R8为H或（C1-C6）烷基，R9为H、（C1-C6）烷基、5-6元环烷基、CCOR10，其中R10为（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基，和N
Figure 901017590_IMG12
R11R12R13An
Figure 901017590_IMG13
，其中
R11、R12和R13各自为（C1-C4）烷基和由药用盐衍生的阴离子;其条件是当X同时为NR2时，p为1，q为0，而W不为羟基;
A为H或-N〔（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，
B为氢或N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基;
M为氢或α-D-吡喃甘露糖基;
其另一条件是只有当A和M同时为氢时，B才能为氢。
优选的是，当X和/或T为-NR2-和/或-NR5-时，alk4和alk5为C2-C4直链。
如上所述，P为1至50的一个整数，q为0至12的一个整数。优选的是，当X和/或T为-NR2-和/或-NR5-时，P和q为1至12，而当X和T均为氧原子时，P+q应为2至50。
本说明书和权利要求书所用的术语“C5-C6环烷基”是指被含1至3个碳原子的低级烷基（如甲基和乙基）任意取代的环戊基和环己基。
优选的化合物是通式Ⅰ中X为-NR2-基（R2为氢、（C1-C4）烷基或alk4NR3R4）的那些化合物。
另一组优选的化合物是通式Ⅰ中P为1且X为-NR2-（其中R2和R1一起为连接氮原子的（C2-C3）亚烷基）的那些化合物。
在达种情况下，特别优选的是alk1为-CH2-CH2-的那些化合物。
再一组优选的化合物是通式Ⅰ中P为1、q为1以及X和T分别为-NR2和-NR5-（其中R2和R5一起为连接氮原子的（C2-C3）亚烷基）的那些化合物。
在这种情况下，特别优选的是alk2为-CH2-CH2-的那些化合物。
其它优选的化合物是通式Ⅰ中X和T为氧原子，p+q为2至50，W为羟基或NR8R9，其中R8为氢或（C1-C4）烷基，R9为氢、（C1-C4）烷基、环戊基或环己基的化合物。
还有一些优选的化合物是式中W为NR8R9〔其中R8如上所定义，R9为COOR10，而R10为（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基）的那些化合物。
在术语“（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基”中，（C1-C4）烷基是被（C1-C3）直链或支链烷基任意取代的亚烷基，例如：
-COOCH2OCOCH3，
Figure 901017590_IMG14
根据上面所给的总定义，基团-NR1-alk1-〔x-alk2〕p-〔T-alk3〕q-W的代表性实例有：
-NH（CH2）2-NH（CH2）2-NH2
-NH（CH2）2-NH（CH2）3-NH2
-NH（CH2）2-NH（CH2）4-NH2
-NH（CH2）4-NH（CH2）2-NH2
-NH（CH2）3-NH（CH2）4-NH2
-NH（CH2）2-NH（CH2）3-NH（CH2）2-NH2
-NH（CH2）2-NH（CH2）4-NH（CH2）2-NH2
-NH（CH2）3-NH（CH2）4-NH（CH2）3-NH2
-NH（CH2）2-NH（CH2）3-NH（CH2）4-NH2
-NH（CH2）4-NH（CH2）3-NH（CH2）4-NH2
-NH（CH2）3NH（CH2）9-NH（CH2）3NH2
-NH（CH2）3NH（CH2）10-NH（CH2）3NH2
-NH[（CH2）2NH]2-（CH2）2-NH2
-NH[（CH2）3NH]2-（CH2）3-NH2
Figure 901017590_IMG16
Figure 901017590_IMG18
本发明的化合物显示出抗菌活性，可用作抗格兰氏阳性细蓖的半合成抗菌剂，但对抗格兰氏阴性细菌，具体地说对抗大肠埃希氏菌和绿脓假单胞菌也有特别的活性。
替考拉宁复合物的各种C63酰胺衍生物、其单一组分和其糖苷配基和假糖苷配基在欧洲专利申请公开218099号和国际专利申请公开WO88/06600号中有所描述。
本发明的化合物可通过对通式Ⅰ（式中Y为OH）的相应衍生物（即相应的羧酸）进行酰胺化的方法来制备。
用作制备本发明的化合物的上述原料物质既可以是单一的产物，也可以是一种或多种产物的混合物。
因为制备本发明的化合物的所述原料可以以所述二种形式使用，所以获得的最终产物也是上述通式Ⅰ的单一化合物或二种或多种化合物的混合物。化合物的这些混合物也是发明的一部分，可用于生物应用和用途，或者采用本领域已知步骤被最终分离成其单一组分。适合于从替考拉宁酰胺衍生物的最终产品的混合物中获得单一组分的分离方法的例子在下列文献中有所描述：欧洲专利申请公开218099号和国际专利申请公开WO88/06600号。
在上述欧洲专利申请和国际专利申请中所述的酰胺化步骤也可用于本发明化合物的制备。所述步骤包括在缩合剂存在下，在惰性有机溶剂中将上述羟酸原料与过量的通式Ⅱ的适宜胺缩合。
式中R1、alk1、alk2、alk3、X、T、p、q和W与上述定义相同。
用于酰胺化反应的惰性有机溶剂是有机非质子溶剂，该溶剂对反应过程无不利影响且能至少部分溶解替考拉宁原料。
所述的惰性有机溶剂的例子有有机酰胺，烷基醚、二元醇和多元醇的醚、磷酰胺和亚砜、惰性有机溶剂的优选例子有二甲基甲酰胺、二甲氧基乙烷、六甲基磷酰胺、二甲基亚砜和其混合物。
本发明的缩合剂是适合在有机化合物，特别是肽的合成中形成酰胺键的缩合剂。
缩合剂的典型例子是叠氮磷酸的（C1-C4）烷酯、苯酯或杂环酯，例如叠氮磷酸二苯酯、叠氮磷酸二乙酯、叠氮磷酸二（4-硝基苯基）酯，二吗啡酚基叠氮磷酸酯和氯磷酸二苯酯。优选的缩合剂是叠氮磷酸二苯酯，即磷酸二苯酯叠氮化物（DPPA）。在这里所述的本发明的酰胺化方法中，胺反应物的摩尔用量通常过量。
总的来说，当胺反应物是相当便宜的或易获得的反应物时，其摩尔用量为过量2至6倍，以3至4倍为优选。
为了进行酰胺化反应，胺必须能与替考拉宁的羧酸官能团形成盐。若胺在选择的反应介质中不足以强到形成盐，则必须往反应混合物中加入至少与替考拉宁原料等摩尔量的一种成盐碱。
当胺反应物相当贵或难以获得时，其适宜的方法是使胺反应物的摩尔过量减少，同时加入一种成盐碱。
所述的成盐碱的例子是有机脂族或杂环叔胺;如三甲胺，三乙胺，N-甲基吡咯烷或甲基吡啶等。
缩合剂的摩尔用量通常略为过量，例如为替考拉宁原料化合物的1.2至1.7倍，较好的为1.5倍。
另外，胺反应物也可以以相应的酸加茂盐（例如盐酸盐）的形式较为方便地加入到反应介质中。在这种情况下，要使用至少二倍摩尔量，最好过量2至4倍摩尔量的能使胺从其盐中游离出的强碱。在这种情况下，适用的碱仍然是如上所例举的有机脂族或杂环叔胺。事实上，至少在某些情况下，更优先选用胺的盐（其胺可用碱游离出），尤其是当胺的盐比相应的游离胺更稳定时。
反应温度变化很大，取决于具体的原料和反应条件。进行反应的优选温度通常为0至20℃。
反应时间变化很大，取决于其它反应参数。缩合反应通常在24-48小时内完成。
在任何情况下，可按本领域已知的方法用薄层色谱法或高效液相色谱法监测反应过程。
基于这些分析结果，本领域熟练技术人员将能够判断反应过程，决定何时中止反应并按众所周知的技术开始处理反应物料，所述技术包括，例如，用溶剂萃取，加入非溶剂进行沉淀等，同时进行进一步的常规分离操作和提纯，例如柱色谱。
如果胺反应物含有选择的反应条件下不呈惰性的其它官能团，则所述的官能团可用众所周知的保护基进行合适的保护。
根据本发明的另一优选实施方案，通式Ⅰ中Y为上述定义的基团的化合物可通过将相同通式Ⅰ（式中Y为OH，N15-氨官能团最好被保护）的羧酸的“活性酯”与通式Ⅱ的适宜胺反应的方法来制备。
N15-氨基官能团可按以下文献所述的本领域已知的方法进行保护，例如T.W.Greene，“Protective Groups in Organic Synthesis”，John Wiley and Sons，New York，1981和M.Mc.Omie，“Protecting Groups in Organic Chemistry”Plenum Press，New York，1973。
保护基团在反应工艺条件下必须稳定，对酰胺化反应不产生不利的影响，并且在反应结束后易于解离和从反应介质中脱除而不改变新形成的酰胺键和化合物如糖组分的总体结构。
用以保护原料替考拉宁中的N15伯氨基官能团的（必要时）胺（Ⅱ）试剂中氨基官能团的本发明方法适用的N-保护基团的代表例是以如下氧羰基为特征的氨基甲酸酯生成剂：1，1-二甲基丙炔氧基羰基，叔丁氧基羰基，乙烯氧基羰基，芳氧基羰基，肉桂氧基羰基，苄氧基羰基，对-硝基苄氧基羰基，3，4-二甲氧基-6-硝基苄氧基羰基，2，4-二氯苄氧基羰基，5-苯并异恶唑甲氧基羰基，9-氨茴酰甲氧基羰基，二苯基甲氧基羰基，异烟碱氧基羰基，2-苄氧基羰基等。
其他适宜的N-保护试剂是可与待保护的氨基生成席夫碱的醛或酮或其衍生物。
优选的席夫碱生成剂的例子是苯甲醛，尤其优选的是2-羟基苯甲醛（水扬醛）。
在某些情况下，一种方便的保护方法是生成亚苄基衍生物，其制备是使胺与苯甲醛在低级醇如乙醇中并最好在室温下反应。与选择的替考拉宁原料反应完毕后，可按本领域已知方法如催化加氢（使用例如钯/炭作催化剂）除去亚苄基保护基。
但是，在上述情况下，应注意某些基团可通过催化加氢改性。对式（Ⅰ）氨基被保护的衍生物（其中A代表如上定义的基团，其酰基部分为（Z）-4-癸烯酰基）或其混合物催化加氢的一个典型后果是癸烯酰基化合物至少部分转化成相应的癸烷酰基化合物。
正如熟练技术人员所知，保护基团的具体选择最终取决于所需具体酰胺衍生物的特性。实际上，最终化合物的酰胺官能团应在除去保持基团的条件下稳定。
由于不同保护基的脱除条件是公知的，熟练技术人员能够选择适当的保护基团。
“活性酯”的生成反应在以下文献中有概括叙述，Fieser，“Reagent        for        Organic        Synthesis”，John        Wiley        and        Sons        Inc.，第129-130页（1967）。
本发明方法使用的所述活性酯的生成试剂的例子由R.Schwyzer等在Helv.Chim.Acta，1955，38，69-70中叙述并包括：
ClCH2CN，BrCH2COOC2H5，BrCH（COOC2H5）2，ClCH2COCH3，
属于该类型的一个优选试剂是氯乙腈。在该例中，氯乙腈本身或二甲基甲酰胺（DMF）可作为优选的溶剂使用。
一般地讲，适宜生成“活性酯”的惰性有机溶剂是那些对反应过程不产生不利影响并能够至少部分地溶解羧酸原料的有机非质子溶剂。
所述惰性有机溶剂的例子有有机酰胺类，烷基醚类，二醇醚和多醇醚类，磷酰胺类，亚砜类和芳族化合物。优选的惰性有机溶剂的例子有二甲基甲酰胺，二甲氧基乙烷，六甲基磷酰胺，二甲基亚砜，苯，甲苯及其混合物。
更优选的溶剂选自乙腈，二甲亚砜，二甲基甲酰胺。活性酯的生成反应通常是在不影响反应过程的碱的存在下进行，碱的例子有例如三烷基胺如三乙胺，碳酸钾或碳酸钠，或碳酸氢钾或碳酸氢钠。一般地讲，碱对替考拉宁羧酸原料的摩尔比为2-6，推荐的是，碱以三倍摩尔过量使用。优选的碱是三乙胺。
“活性酯”的生成试剂的使用量比替考拉宁羧酸原料大为过量。摩尔用量通常过量5-35倍，最好是过量约20-30倍。反应温度在10-60℃之间，最好在15-30℃之间。反应时间一般取决于其他具体反应参数，通常为3-48小时。
在这种情况下，可利用高效液相色谱法（HPLC）或薄层色谱法（TLC）鉴测反应过程以确定反应完成时间和回收所需中间体的时间。“活性酯”中间体可在与制备本身相同的反应介质中直接使用，但是，在通常情况下，可利用非溶剂沉淀法或溶剂萃取法分离中间体，而且不必进一步提纯，用于下一反应步骤。但是若必要，可以利用柱色谱法如快速柱色谱法或反相柱色谱法提纯。
然后，所得“活性酯”中间体与摩尔过量的式Ⅱ胺衍生物在有机极性溶剂存在下，在5-60℃，最好在10-30℃温度下反应。
在该例中，有机极性溶剂可以是极性质子溶剂或非质子溶剂。
优选的有机极性质子溶剂的例子有（C2-C4）低级烷醇如乙醇，正丙醇，异丙醇，正丁醇等，或其混合物，最好以无水状态使用。
优选的有机极性非质子溶剂的例子有N，N-二甲基甲酰胺（DMF），六甲基磷酰胺（HMPA），或其混合物，1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2（1H）-嘧啶酮（DMPU），二甲基亚砜（DMSO）或二甲氧乙烷（DMF）。
“活性酯”与选择的胺的反应在5-60℃，较好在10-30℃，最好在20-35℃温度下进行，“活性酯”中间体与上述定义的胺（Ⅱ）的摩尔比较好为1∶5-1∶30，最好为1∶10-1∶20。反应过程通常可利用薄层色谱法或高效液相色谱法来鉴测。
可以按照普通方法，例如溶剂蒸发法或加入非溶剂法将在酰胺化反应中所得的酰胺衍生物从反应溶液中分离出。氨基保护基团通常是在从酰胺化反应中分离出的粗产品上脱除的。
国际专利申请WO88/06600号叙述了从替考拉宁衍生物脱除所述保护基团的方法例。
如果采用催化加氢方法，则该反应通常是在稀的强酸（最好为无水机酸）水溶液存在下，在与所述稀的强酸水溶液混溶的有机溶剂中进行。然后对反应滤液进行后处理以回收式Ⅰ酰胺的无机酸加成盐或相应的游离碱。如果氨基保护基团可用稀的无机酸脱除（例如保护基团为席夫碱或C1-4烷氧羰基），则可在不引起糖部分裂解的条件（例如低温，短的反应时间）下，进行上述类似方法。
本发明式Ⅰ化合物的另一个制备方法包括：在酸接受剂存在下，在惰性溶剂中使式Ⅰ中N15保护的N63酰胺衍生物（其中Y为-NR1alk1XH或NR1-alk1〔X-alk2〕-TH）与式r-〔alk2）10-〔T-alk3〕q-W或式r-〔alk3〕-W试剂反应，其中，符号R1，alk1，alk2，alk3，X和T分别如上所定义，r代表卤素，甲磺酰基或甲苯磺酰基。在该例中，p最好为1或2，q不为零并最好为1或2，X和T较好代表NH或氧，最好代表氧。按照制备本发明式Ⅰ化合物的通用方法，制备上述N15保护的N63酰胺衍生物。
若需要其中W代表-NR8R9-（其中R8如上定义，R9为COOR10，R10为（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基）的式Ⅰ化合物，则需要使N15保护的N63酰胺衍生物（式中W为-NHR8），而R8如上定义）与碳酸α-酰氧基-烷基对硝基苯基酯在无碳酸碱金属盐如碳酸钠的存在下进行反应。
碳酸α-酰氧基-烷基对硝基苯基酯可按J.Med.Chem.，31，第318-322（1988）页所述方法进行制备。
本发明的某些酰胺如替考拉宁A2复合物，其单一组分或两种或多种组分的混合物可用作制备单一抗生素的原料，方法是按欧洲专利119575号和119574号所述方法，选择水解一个或多个糖部分。
制备其中A为氢，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基的式Ⅰ化合物的另一个方法包括按照欧洲专利申请公开146822号所述方法水解相应的式Ⅰ酰胺化合物（其中A为-N-〔（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基，即，替考拉宁A2复合物或其单一组分的羧酰胺衍生物）。
该方法包括使上述原料与浓的有机酸水溶液在室温下接触，最好是与浓度为75%-95%的三氟乙酸水溶液在10-50℃温度下接触。
式Ⅰ化合物（其中A和M均为氢，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基）的另一个制备方法包括使式Ⅰ化合物（其中A为N〔（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基）按欧洲专利申请175100所述方法进行水解。
该方法包括在室温下为液态并选自醚、酮或其混合物的极性非质子有机溶剂存在下，使上述原料与强酸接触。
在后一种情况下，也可以使用A为氢、B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基、M为α-D-吡喃甘露糖基的式Ⅰ酰胺化合物，该化合物是用浓的三氟乙酸水溶液按上述方法进行水解而获得的。
为了分离酸加成盐，通过加入碱溶液如氢氧化钠水溶液将由裂解氨基保护基团得到的反应溶液的PH值调至4-7，减压蒸除溶剂后，形成的固体以与强酸（在除去保护步骤过程中已加入）的加成盐的形式分离出。可以利用普通技术，例如柱色谱法，加非溶剂从溶液沉淀法，高效液相制备色谱法等进一步提纯该产品。可以将酸加成盐转化成相应的式Ⅰ游离碱，方法是，将酸加成盐悬浮于或溶解于溶剂水溶液中，然后将其调至适当的PH值，随后形成游离碱。然后利用例如有机溶剂萃取法回收该产品，或者，通过加入选择的酸和如上后处理将该产品转化成另一酸加成盐。
有时，在上述操作之后，需要使回收的产品进行常规的脱盐操作。
例如，可以采用控制多孔聚葡聚糖树脂（例如Sephadex        LH20）柱色谱法或硅烷化硅胶柱色谱法。用水溶液洗脱不需要的盐之后，用水和极性或非极性有机溶剂的混合物，例如乙腈/水，从5%-100%乙腈线性梯度或阶梯梯度洗脱所需产物，然后通过蒸发溶剂或冻干回收产物。
式Ⅰ化合物的游离碱可以转化成相应的酸加成盐，方法是：将游离碱悬浮或溶解于含水的溶剂中并且加入略微过量的选择的酸。然后冷冻干燥所形成的悬浮液或溶液，得到所需酸加成盐。在某些情况下，可不采用冷冻干燥，而加入可与水溶混的非溶剂，通过沉淀作用回收最终的盐。
如果最终的盐不溶于有机溶剂而其游离碱溶于有机溶剂，则可以在加入化学计量量的或略微过量的选择的酸之后，过滤无盐的有机溶液得到最终的盐。
式Ⅰ化合物代表性的和适宜的酸加成盐包括与有机酸和无机酸进行标准反应而生成的酸加成盐，例如这些酸包括盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，乙酸，三氟乙酸，三氯乙酸，琥珀酸，柠檬酸，抗坏血酸，乳酸，马来酸，富马酸，棕榈酸，胆酸，pamoic        acid，粘酸，樟脑酸，戊二酸，乙醇酸，苯二甲酸，酒石酸，月桂酸，硬脂酸，水杨酸，甲磺酸，苯磺酸，山梨酸，苦味酸，苯甲酸，肉桂酸等。
本发明优选的酸加成盐是药用酸加成盐。
术语“药用酸加盐”是指与生物学定义酸的加成盐，其制备和配方标准均符合药典要求。
适宜作“药用酸加盐”的酸包括以上列举的酸。
本发明化合物的游离碱和其酸加成盐适宜作抗菌剂，可抗格兰氏阳性和格兰氏阴性细菌。
但是，本发明化合物对格兰氏阴性细菌，尤其是对绿脓假单胞菌具有异常好的活性。
实际上，目前在替考拉宁抗生素中这些化合物是对该属微生物最有效的衍生物。具有脱糖替考拉宁核的本发明化合物具有突出的活性，而具有替考拉宁核的本发明化合物也具有显著的活性。
使用Difco Todd-Hewitt肉汤（酿脓链球菌和肺炎链球菌）或Oxoid Iso-Sensitest肉汤（葡萄球菌，粪链球菌和格兰氏阴性微生物），利用在微量滴定管中的标准两倍稀释试验，可以说明本发明化合物的体外抗菌活性。足够稀释肉汤培养物以使最终接种物的菌落生长单位/ml（CFU/ml）约为104。最低抑制浓度（MIC）是在37℃孵育18-24小时后没有观察到生长的最低浓度。
本发明代表化合物的抗菌试验结果总结于表Ⅰ。
化合物22，23，25，26，27和29对某些绿脓假单胞菌的多抵抗临床隔离物的活性见诸表Ⅱ。
Figure 901017590_IMG22
Figure 901017590_IMG24
Figure 901017590_IMG25
Figure 901017590_IMG26
本发明化合物比替考拉宁和欧洲专利申请公开218099中以及国际专利申请WO/8806600中最接近的化合物具有更高的抗绿脓假单胞菌活性，抗相同微生物的MIC（微克/ml）决不低于32。
从由于所述菌株引起的感染的重要性来看，本发明化合物的抗绿脓假单胞菌活性尤其恰如其分。
绿脓假单胞菌临床感染包括局部感染例如创伤（尤其是烧伤）、泌尿道、呼吸道、肠、眼和耳感染，以及全身性感染（血液，骨或败血），全身性感染由抵抗力弱患者的主要局部感染部位引起，导致感染部位向各个器官转移扩展。
对感染败血假单胞菌的患者进行预测是困难的，某些作者报道死亡率非常高（有时达100%）。参见P.H.Clarke和M.H.Richmond的“Genetics        and        Biochemistry        of        Pseudomonas”（第二章），John        Wiley        and        Sons（1975）。
此外，与脱糖替考拉宁和替考拉宁假苷配基不同，本发明的替考拉宁化合物，就口服而言，比本领域已知的替考拉宁酰胺衍生物具有显著高的体内活性。
用被酿脓链球菌C203败血感染的小鼠作体内试验，本发明代表化合物在体内试验中的ED50值（mg/kg）由表Ⅲ给出，其中酿脓链球菌C203按V.Arioli等在Journal        of        Antibiotics        29，511，1976所述方法制备。
表Ⅲ 体内活性
化合物序号 ED50(mg/kg)s.c. p.o.
269111533 0.090.050.060.030.060.06 约    6081.2约    8081.2约    6074.4
已经发现，在治疗被大肠埃希氏杆菌感染的小鼠时，通过静脉内注射（40mg/kg，7/8观察/待治）和经皮下注射（ED50≤38mg/kg）后，化合物50具有显著的体内活性。
根据上述抗菌活性，本发明化合物可用作人类和兽类抗菌药制剂的活性成分，用来预防和治疗由易感于所述活性成分的病菌引起和感染疾病。
在上述治疗中，可以以单一化合物或以任何比例的混合物形式使用这些化合物。
本发明化合物可以口服，局部给药或非肠胃给药，但最好是非肠胃给药。基于给药途径，这些化合物可制成各种剂型。口服制剂可以是胶囊，片剂，溶液剂或悬浮剂。如本领域公知，除了活性成分外，胶囊剂和片剂还可以包括常规赋形剂如稀释剂例如乳糖，磷酸钙，山梨醇等;润滑剂例如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇;粘合剂例如聚乙烯吡咯烷酮，明胶，山梨醇，黄蓍胶，金合欢;增香剂以及适宜的崩解剂和润湿剂。液体制剂通常为水或油溶液或悬浮液，并可包括常规添加剂如悬浮剂。若用以局部用途，则本发明化合物也可制成用于皮肤、鼻和喉或支气管组织的粘液膜的适当剂型，也可采用乳油剂，软膏剂，液体喷雾剂或吸入剂，锭剂或喉涂剂等剂型。
本发明化合物另一个优点是其在宽的PH值范围内具有显著高的水溶解性，因此避免了药用组合物的一般问题。
对于治疗眼或耳，制剂可采取液体或半液体形式，在疏水性或亲水基剂中配制，例如软膏剂，乳油剂，洗剂，涂剂或粉剂。
对于直肠给药，本发明化合物可以以结合常规载体的栓剂形式给药，常规载体例如有可可油，石蜡，鲸蜡或聚乙二醇及其衍生物。
注射组合物可以采用以油或水作载体的悬浮液，溶液或乳液，并且可以包括配制剂如悬浮剂，稳定剂和/或分散剂。
另一种作法是，活性成分可采用粉剂形式，使用时可用适当的载体如无菌水重新配制。
活性成分的给药量取决于诸多因素如待治疗对象的大小和状态，给药途径和频率以及涉及的成因剂。
本发明化合物通常在约0.5-30mg活性成分/kg体重的剂量下是有效的，最好每天分2-4次给药。组合物最好制成含约20-300mg/单位的剂量单位形式。
以下实施例说明本发明的实施方式，但是不应认为是限制本发明的全部范围。
实施例-实验部分
在以下实施例中，原料可以是替考拉宁A2复合物（TGA）其单一组分或一种或多种所述组分的混合物。
典型的复合物混合物主要由对应于或Ⅰ的五种组分组成，其中符号A代表的β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基的脂族酰基部分分别是：
Z-（4）-癸烯酰基（AC1）
8-甲基壬酰基（AC2）
癸烯酰基（AC3）
8-甲基癸酰基（AC4）和
9-甲基癸酰基（AC5），
B是N-β乙酰基-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基（AcGlu），
M是α-D-吡喃甘露糖基（Man）和
Y是OH。
该混合物用缩写字TGAC1-5表示。若原料是所述混合物的一个单一组分，则基于上述氨基吡喃葡萄糖基的具体的脂族酰基，该单一组分用TGAC1，TGAC2，TGAC，TGAC4或TGAC5表示。
若使用一种或多种组分的混合物，则可根据复合物的相同系统标明。例如，缩写字TGAC2-5表示组分2-5的混合物，而不再存在组分1。当催化加氢使成分1双键饱和使其转化成组分3时，便可获得该混合物。缩写字TGAC2，3，是指组分2，3的混合物，缩写字TGAC4，5，是指成分4和5的混合物。
抗生素L17392（替考拉宁的糖苷配基）由DTG表示，假糖苷配基L17054和L17046分别由TGA3-1和TGA3-2表示，脱甘露糖基假糖苷配基（欧洲专利申请公开301247号）由DM-TGAC表示。
使用如上定义的缩写字AC1，AC2，AC3，AC4和AC5，符号A标明β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡萄糖基的特定脂族酰基取代基（A/AC），并参考式Ⅰ，来表示下表中的所得最终产品。若获得的是一种或多种组分的混合物，则通过上述相同的正规系统标明。
实施例1-30
当需要TGAC2-5混合物的N63-羧酰胺时，使用下述步骤：
A.制备N15-苄氧羰基（CBZ）替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5
将4.5ml苄基氯甲酸酯的10ml无水丙酮溶液在室温下滴加到45g（约24mmol）替考拉宁A2复合物（或其单一组分1-5）和6ml（约44mmol）三乙胺（TEA）的300ml二甲基甲酰胺（DMF）的搅拌溶液中。约60分钟后，加600ml乙醚，过滤收集沉淀（约59g）再溶于2.51丙酮/水（1∶1，V/V）的混合物中。所得溶液在35℃减压浓缩至体积约1.61，然后用1.61乙醚萃取，乙醚分离后弃掉。
用冰醋酸将水层调至PH4.8，用1.51正丁醇萃取。分离有机层，用1.51水（2×750ml）洗涤，然后在45℃减压浓缩至体积约200ml。加入乙酸乙酯（约800ml），过滤收集分离出的固体，用乙醚（约500ml）洗涤，并在室温下真空干燥过夜，得到45.7g（约96%）纯的标题化合物。
B.制备N15CBZ-替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5，氰甲基酯
向45g（约22mmol）N15CBZ-替考拉宁A2复合物（或其单一组分1-5）的450mlDMF搅拌溶液中，室温下加入5.251（约37mmol）TEA和60ml氰乙腈。20小时后，将反应混合物倾入4.51乙酸乙酯中，过滤收集沉淀（约50g），再将其溶于900ml甲醇/水（1∶1，V/V）混合物中。用水醋酸将所得溶液调至PH5.5，然后加入1.11正丁醇。在35℃减压蒸除大部分甲醇，得到正丁醇和水混合物（约1.51），分离有机层，用500ml水洗涤，在40℃减压浓缩至体积约200ml。加入800ml乙酸乙酯，过滤收集分离出的固体，用500ml乙醚洗涤，并在35℃真空干燥过夜，得到44.2g（约98%）纯的标题化合物。
C.制备N15CBZ-替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5的N63_羧酰胺
16g（约8mmol）N15_CBZ-替考拉宁A2复合物（或其单一组分1-5），氰甲基酯和大量过量（50-100mmol）适当胺反应物的160mlDMF或DMSO溶液在室温下搅拌60-120分钟，然后加入160ml无水乙醇，继之1.51乙酸乙酯。过滤收集分出的固体，用500ml乙醚萃取，然后于空气中室温下干燥，得到纯度足以用于下步氢化步骤（HPLC滴定一般＞90%）的粉未（产率一般为＞85%）。
D.制备替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5的N63 -羧酰胺
将上述所得产物（5mmol）溶于500ml甲醇/0.04N盐酸（7/3，V/V）混合物中，所得溶液在室温和常压下在5%Pd/C（5g）存在下氢化。反应一结束（HPLC），用硅藻土（BDH545）板滤除催化剂。用1NNaOH将透明的滤液调至pH6.5，加入500ml正丁醇。所得混合物在40℃减压浓缩至体积约150ml，然后加入350ml乙醚，过滤收集沉淀。当反应是用含有相当于替考拉宁A2复合物组分1的衍生物的基质进行时，相应的最终产物并不含有组分1的羧酰胺，这是因为它已经几乎完全转化成组分3的羧酰胺。
E.用反相柱色谱纯化产物
将上面得到的粗产物（10g）溶于乙腈/水（1∶1，V/V）混合物（300ml）中。加水至形成混浊溶液（加水量不超过700ml），将其加到硅烷化硅胶（0.06-0.2分;Merck        Co.）柱上端。该硅烷化硅胶是用相同的溶剂混合物（即CH        CN和水，其用量比基于为得到混浊溶液所需的加水量），以沉淀开始出现时制备的。柱以乙腈在水中10%-80%的浓度线性梯度洗脱，（用冰醋酸将乙腈的水溶液事先调至PH3.2），以400ml/小时的速率进行15小时，同时用HLPC监测以25ml份收集。将含有所需纯产物的份合并，加入足量的正丁醇，于45℃减压下燥后得到混浊的无水丁醇溶液。加入3倍体积的乙醚，收集分开的固体，用乙醚洗涤，室温下真空干燥过夜，得到纯的目的化合物。
当分子中仅有的碱官能团是替考拉宁A2复合物15位上的游离氨基，或当以酰胺取代基引入的附加氨基其碱性不足以用乙酸形成酸加成盐时，本发明的化合物（表Ⅳ）以游离碱形式获得。不然则以乙酸盐形式回收。
当需要这种酸加成盐时，根据下述步骤制备相应的盐酸化物：
将1mmol或是游离碱或是乙酸盐形式的替考拉宁A2复合物（或其单一组分）的酰胺溶于10mlDMF。将摩尔过量10%的10NHcl（一个氨官能团需0.11ml盐酸，两个氨基需0.22ml，以此类推）在5℃搅拌加入，然后加入40ml乙醚。过滤收集形成的沉淀，用乙醚洗涤，室温下真空干燥过夜（产率＞95%）。
当需要替考拉宁A2复合物（或混合物TGAG1-5）的成分1（TGAC）的N63 -羧酰胺时，采用下述步骤：＜A′制备N15 -叔丁氧羰基（t-BOC）替考拉宁A2复合物及其单一成分1-5 10g（约5mmol）替考拉宁A2复合物及其单一成分1-5，1.2ml（约8.5mmol）三乙胺（TEA）和2.4g（约8mmol）叔丁基-2，4，5-三氯苯基碳酸酯的100ml三甲基甲酰胺（DMF）溶液在室温下搅拌24小时。然后将其倾入200ml水中，用1NHcl将所得混浊混合物调至PH3，然后用600ml正丁醇/乙酸乙酯（35：65，V/V）混合物萃取。分离有机相，用水洗涤（2×100ml），然后于45℃减压浓缩至体积约100ml。加入乙酸乙酯（约400ml），过滤收集分开的沉淀，用乙醚（约200ml）提取，于室温下真空干燥过夜，得到10.3g（约98%）纯的标题化合物。
B′.制备N15 -t-BOC-替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5，氰甲基酯
基本上如前述步骤B，由t-BOC-替考拉宁A2复合物得到标题化合物。
C′.制备N15 -t-BOC-替考拉宁A2复合物及其单一组分1-5的N63 -羧酰胺
基本上按前述步骤C，但使用二甲亚砜（DMSO）取代DMF作为溶剂，由N15 -t-BOC-替考拉宁A2复合物得到标题化合物，氰甲基酯，产率（一般＞85%），纯度（HPLC滴定＞90%）。
D′.制备替考拉宁A2复合物或其单一组分的N63羧酰胺
将产物（N15t-BOC-替考拉宁A2复合物或其单一组分的N63羧酰胺）（4mmol）在10℃溶于40ml无水三氟乙酸（TFA）。一旦形成透明溶液（约2分钟，在任何情况下，加入TFA后不超过5分钟），便在10℃冷却下用40ml甲醇稀释反应混合物。加入420ml乙醚，过滤收集分离的沉淀，用乙醚洗涤（5×200ml）。
将粗产物（5g）溶于乙腈/水（1∶1，V/V）混合物（150ml），用1NNaOH将溶液PH调至6并用水稀释后，按照上面E.所述的色谱提纯步骤，可便利地进行产物纯化。
当需要脱葡糖替考拉宁（DTG）的N63 -羧酰胺时，采用下述步骤
A″.制备N15 -叔丁氧羰基（t-BOC）脱葡糖替考拉宁
向45g（约37mmol）抗生素L17392（脱葡糖替考拉宁）的600mlDMF搅拌溶液中，加入19.3g（约65mmol）叔丁基-2，4，5-三氯苯基碳酸酯和10.2ml（约74mmol）TEA。反应混合物在室温下搅拌24小时，然后倾入1.51水中。用1N盐酸将溶液的PH调至3，然后用31乙酸乙酯/正丁醇（2∶1，V/V）混合物提取。分出有机层，用11水提取，然后在40℃减压浓缩至体积约为300ml。加入700ml乙醚，过滤收集分离的沉淀，用200ml乙醚提取，室温下真空干燥过夜，得到44g（92%）纯的标题化合物。
B″.制备N15 -t-BOC-脱葡糖替考拉宁氰甲基酯
44g（约33mmol）N15 -t-Boc脱葡糖替考拉宁，4.7ml（约34mmol）TEA和44ml氰乙腈的440mlDMF溶液在室温下搅拌20小时，然后加入11乙酸乙酯，过滤收集沉淀。再将其（约46g）重新溶于1.51甲醇/水（1∶2，V/V）混合物，用冰醋酸将溶液调至PH5.6。
加入21正丁醇后，在30℃减压蒸除大部分甲醇，分出有机层，用1l水洗涤，然后在35℃减压浓缩至最终体积约300ml。加入700ml乙醚，过滤收集分离的沉淀，用500ml乙醚洗涤，然后在室温下真空干燥过夜，得到42.5g（96%）纯的标题化合物。
C″.制备N15 -t_Boc脱葡糖替考拉宁的N63 -羧酸胺
向14g（约10mmol）N15 -t-Boc-脱葡糖替考拉宁和大量过量（100-150mmol）适当的反应物胺的200mlDMF搅拌溶液中，在室温下加入8.9ml（约150mmol）冰醋酸。冰醋酸的摩尔量取决于反应物胺的结构。实际上，当胺不含其他碱性官能团时，每毫摩尔胺需要0.5mmol冰醋酸，当胺含有一个附加碱性官能团时，需要1mmol（冰醋酸，当胺含有两个附加碱性官能团时，需要2mmol冰酯酸。尽管缩合反应并不需要有冰醋酸，但有时为防止在碱性条件下可能出现在C3位分子差向异构副反应，采用它是适宜的。
此外，酸的存在在绝大数情况下不影响缩合反应速率。
3-6小时后（除在少数情况下，反应一般在3小时内完成），加入600ml乙酸乙酯，过滤收集沉淀，用200ml乙醚洗涤，室温下真空干燥过夜，得到其纯度足以适于下面脱保护基步骤的产物（产率＞75%）。
D″.制备脱葡糖替考拉宁的N63 -羧酸胺
1mmol上述得到的产物（HPLC滴定一般＞85%，含有某些作为主要杂质的反应物胺的乙酸盐）的25-30ml无水三氟乙酸溶液在室温下搅拌20分钟，然后在25℃减压蒸除溶剂。油状残余物重新溶解于50ml水/乙腈（6∶4，V/V）混合物中，用水稀释所得溶液至沉淀开始出现。用1N盐酸将悬浮液调至PH3.0（如有必要），所得溶液置于水中含有100g硅烷化硅胶（0.06-0.2分;Merck        Co.）的柱的上端。
E″.用反相柱色谱纯化产物
装有上述产物的柱用1l水洗脱，然后以线性梯度为10%乙腈水溶液至50%乙腈0.01N盐酸溶液，用15小时，速率为200ml/小时洗脱，同时以10ml份收集。将含有纯产物的份极性化，加入足量的正丁醇，浓缩后得到混浊的无水丁醇溶液（30-100ml）。加入三倍体积的乙醚，过滤收集分离的固体，用乙醚洗涤，室温下真空干燥2-3天得到纯的盐酸盐形式的脱葡糖替考拉宁的酰胺。
按照上面的色谱提纯步骤，但以线性梯度为10%-60%乙腈水溶液洗脱，用加入三氟乙酸来使洗脱剂PH保持在2.5，可得到相应的氟乙酸盐。
通过使用适当的试剂TGAC，其单一组分，DTG或DMTGAC和式为-NHR1-alk1-〔X-alk2〕p-〔T-alk3〕q-W（Ⅱ）的胺，在前述条件下，可得到表Ⅳ中所示的化合物。
Figure 901017590_IMG27
Figure 901017590_IMG29
Figure 901017590_IMG30
实施例31
制备式Ⅰ化合物31
2g（约1mmol）N15 -CBZ-替考拉宁A2复合物（如上述制备的氰甲基酯）和2ml1，3-二甲基1，3-丙二胺的20mlDMF溶液在室温下搅拌2小时，加入20ml无水乙醇，再加入200ml乙酸乙酯。过滤收集分离的固体。用50ml乙醚洗涤，室温下真空干燥过夜，得到1.95g纯的N15 -CBZ-替考拉宁A2复合物，1-甲基-3-（甲氨基）丙基-酰胺。
向1.37g（0.65mmol）上述化合物的100ml无水甲醇的搅拌溶液中。室温下加入1g（9.4mmol）无水碳酸氢钠和2.5g（10.1mmol）溴化2-溴乙基三甲基铵。反应混合物在45℃搅拌3天，然后冷却至10℃，倾入100ml水中。减压下于30℃蒸除甲醇，水相用BuOH/EtOAc（1/2，V/V）混合物（300ml）提取。分离有机相，40℃减压浓缩至小体积（约20ml）。加入180ml乙醚，收集沉淀的固体（1.12g标题化合物的N15 -CBZ前体），在实施例1所述条件下氢化，得到0.45g的化合物31。
实施例32
制备式Ⅰ化合物32
Figure 901017590_IMG33
按照实施例31所述步骤，使用2gN15 -CBZ-脱葡糖替考拉宁（氰甲基酯），得到化合物32。
实施例33
制备式Ⅰ化合物33
（R＝H，A/AC-AC2-5，B＝AcGlu，M＝Man，Y＝-NH（CH2）3NH（CH2）4NHCOOCH（CH3）OCOCH3与Y＝-NH（CH2）4NH（CH2）3NHCOOCH（CH3）OCOCH3的混合物）
室温下，向2g（0.9mmol）化合物5的N-CBZ衍生物（实施例1制备）的50ml无水DMF溶液中，加入1.2g（11mmol）无水碳酸钠和2.7g（10mmol）α-乙酰氧基-乙基对硝基苯基碳酸酯。3小时后，将反应混合物倾入500ml乙酸乙酯中，收集沉淀的固体，用100ml乙酸乙酯洗涤，如实施例1所述进行氢化，得到0.57g标题化合物33。
实施例34
制备式Ⅰ化合物34
（R＝H，A/AC＝H，B＝H，M＝H，Y＝NH（CH2）3NH（CH2）4NHCOOCH（CH3）OCOCH3与Y＝NH（CH2）4NH（CH2）3NHCOOCH（CH3）OCOCH3的混合物）
按照实施例32所述步骤，使用2g化合物23的N-CBZ衍生物，得到0.6g化合物34。
实施例35-36
制备式Ⅰ化合物35
Figure 901017590_IMG34
和式Ⅰ化合物36
Figure 901017590_IMG35
向5.3g（约2.5mmol）N15 -CBZ-替考拉宁A2的560ml甲醇的悬浮液中，于室温下加入1-甲基-3-（甲氨基）丙基酰胺（如实施例31制备），17ml式分别为为clCH2CH2（OCH2CH2）OH和clCH2CH2OCH2CH2OH的适当氯乙氧基-羟乙基试剂和1.86g（13.5mmol）碳酸钾。45℃搅拌3小时后，将反应混合物冷却至15℃，用1NHcl将PH调至6。30℃减压蒸除甲醇，固体残余物如实施例1所述进行氢化，得到1.9g化合物35或0.97g化合物36。
实施例37-41
制备TGA3-1酰胺衍生物
4g（约2mmol）替考拉宁A2复合物或其单一组分的适当酰胺衍生物（如上所制备并示于下面表Ⅴ）的100ml90%三氟乙酸水溶液在室温下搅拌2小时，然后蒸除溶剂，油状残余物重新溶于200mlH2O。将PH调到8后，所得溶液置于于水中含有400g硅烷化硅胶的柱上。如实施例1所述进行色谱提纯，得到标题化合物。
Figure 901017590_IMG36
实施例42-45        制备TAG3-2酰胺衍生物
4g（约2mmol）替考拉宁化合物的适当酰胺衍生物（如上所制备并示于下面表Ⅵ）的80ml1，2-二甲氧乙烷（DMF）悬浮液在室温下搅拌2天，同时鼓入Hcl。然后过滤收集不溶物。如实施例1进行柱色谱提纯，得到标题化合物。
实施例46-55A″′一般步骤（采用叠氮磷酸二苯基酯基）
向6mmol替考拉宁A2或其单一组分（或其组分间任何比例的混合物）或N15 -叔丁氧羰基（t-BOC）脱葡糖替考拉宁的60ml二甲亚砜（DMSO）的搅拌溶液中，于0℃加入30mmol适当的中间体胺（制备方法如下）和10mmol叠氮磷酸二苯基酯（DPPA）。室温下搅拌过夜，然后加入240ml乙酸乙酯，收集沉淀的固体，如前述方法E用反相柱色谱提纯，得到纯的TGAC酰胺或N15 -t-BOC-脱葡糖替考拉宁酰胺（BOC-DTG酰胺）。
在BOC-DTG酰胺或在酰胺部分含有BOC保护基的酰胺情况下，通过在室温下将1mmol这类化合物溶于30ml无水三氟乙酸，并以前述相同的步骤（例如制备DTG的N63 -羧酰胺的方法D″），可以脱除BOC保护基。
B″′制备化合物46-55的中间体胺
1.二胺0.0′-双（2-氨丙基）聚乙二醇1900（JeffamineTMED2001）是从Fluka Chemie AG购买的（化合物46的中间体胺）。
2.对于化合物47-52的中间反应物胺，先按如下方法制备共同中间体二-（3-BOC-氨丙基）胺
BOC-NH-（CH2）3NH-（CH2）3-NH-BOC
将142g2-（叔丁氧基羰基氧亚氨基-2-苯乙腈（BOC-ON，Aldrich-Chemie）的300ml四氢呋喃（THF）溶液在10℃滴加到42ml双（3-氨基丙基）胺（Fluka        Chemie        AG）的400ml        THF搅拌溶液中。室温下保持16小时后，蒸除溶剂，将油状残余物溶于11乙酸乙酯，得到的溶液用1NNaOH（200ml）洗涤，然后用水（2×300ml）洗涤，接着用0.01NHcl（2×500ML）提取。将水相用1NNaOH调至PH8，用500ml正丁醇提取。分离有机层，用250ml水洗涤，然后浓缩至最终体积约70ml。于6℃静置过夜，形成结晶，过滤收集，得到纯的标题化合物，为游离碱形式。
1H-NMR：2.93，2.44，1.47（CH2）;1.38（N-BOC）6.68（NH）
3.N′，N″-二-叔-BOC-三-（3-氨丙基）胺（用于衍生物47-50）
室温下，向45g上述二-叔-BOC中间体三胺的500ml无水乙醇搅拌溶液中，加入21ml3-溴-丙腈和25g碳酸钾。反应混合物搅抖过夜，然后过滤并浓缩至最终体积约100ml，此后用800ml水稀释。用乙酸乙酯（2×800ml）提取所得溶液（PH8）。分离有机相，用水（2×200ml）洗涤，然后浓缩至最终体积约100ml。6℃静置过夜，过滤收集分离出的结晶固体，得到34g二-（3-叔-BOC-氨丙基）氨基-1-丙腈。
1H-NMR：2.94，2.63，2.54，2.37，1.47（CH2）;1.36（N-BOC）;6.73（NH）
将上述产物溶于200ml含有8.5gNaOH的乙醇溶液。向溶液中加入4g阮内镍（活性催化剂，Aldrich-chemie），悬浮液在2.5大气压下氢化10小时。滤除催化剂并蒸除溶剂，将油状残余物溶于500ml乙酸乙酯，所得溶液用水洗涤（2×100ml），然后蒸除溶剂，得到约34g标题化合物。
1H-NMR：2.93，2.54，2.32，1.49（CH2），1.41（N-BOC）;6.77（NH）
4.3-（3-氨丙基（-3-（3，3-二甲基氨基丙基）-氨基-1-丙胺（用于衍生物51）
室温下，向19g3，3-二甲基氨基-1-丙基氯盐酸盐的400ml无水乙醇搅拌溶液中，加入20g二叔-BOC中间体三胺和28g碳酸钾，接着加入3g碘化钾。反应混合物回流6小时，然后过滤，蒸除溶剂。残余物再溶于400ml水，用600ml乙酸乙酯提取。分离有机层，用水洗涤（2×200ml），然后蒸除溶剂，得到油状残余物（8.7g），即标题化合物的二叔-BOC衍生物，其纯度足以用于下面步骤。
1H-NMR：2.91，2.42，2.31，2.16，1.47（CH2），1.36（N-BOC），2.09（NCH）
室温下用30ml无水三氟乙酸处理含上述产物的30ml二氯甲烷溶液，然后蒸除溶剂。将油状残余物溶于40ml无水乙醇，室温下鼓入无水Hcl至观察到产物完全沉淀。过滤收集，得到3.8g标题化合物，为四盐酸化物。
1H-NMR：3.2-2.91（6-CH2）;2.13-1.90（3-CH2）;2.73（NCH3）
对于与BOC-DTG缩合，使用下述制备的游离碱，即将该四盐酸化物（10mmol）溶于1NNaOH（40ml），然后蒸发该溶液至干。将残余物悬浮于二氯甲烷（100ml），滤除不溶物。蒸除溶剂后，油状残余物不需进一步纯化便可直接使用。
5.3-（3-氨丙基-3-（2，2-二乙基氨基乙基）-氨基-1-丙胺（用于衍生物52）
采用与上述完全相同的步骤，使用2，2-二乙基氨基-1-乙基氯盐酸盐（21g）与二叔-BOC中间体三胺（20g）反应，首先得到11g标题化合物的二叔-BOC衍生物。以相似的方式用三氟乙酸的二氯甲烷溶液处理，脱除保护基。如上述得到游离碱（油），最后得到标题化合物（8.2g）。
1H-NMR：2.6-2.3（8-CH2）;1.42（2-CH2）;0.92（2-CH3）
这些反应过程和最终多胺的均一性在硅胶60F254预涂覆板（Merck Co.）上，用含有1%氢氧化铵的二氯甲烷/甲醇（9∶1，V/V）混合物作为流动相，进行TLC检查。斑点用碘展开。
6.4-（3，3-二甲基氨基丙基）哌嗪（用于衍生物53）
向15.8g3，3-二甲基氨基-1-丙基氯的300ml无水乙醇的搅拌溶液中，加入9ml1-苄基哌嗪和14g碳酸钾。反应混合物回流搅拌6小时，然后冷却至室温过滤。蒸除溶剂，油状残余物溶于300ml水。用二氯甲烷（2×200ml）提取所得溶液。分离有机相，用200ml水洗涤，然后蒸除溶剂。将油状残余物（9g）溶于300ml95%乙醇，加3g10%Pd/C氢化（25℃，1大气压）。6小时内约吸收11H。滤除催化剂，将无水Hcl鼓入透明的滤液。收集分出的固体，用无水乙醇洗涤，室温下真空干燥过夜，得到7g纯的标题化合物，为三盐酸化物。
1H-NMR：2.79，2.53，2.30（CH2-哌嗪）2.79，2.23，2.15（CH2二甲基氨基丙基）;2.10（NCH3）
将上述三盐酸化物（6g）溶于2NNaOH（30ml），接着用二氯甲烷（170ml）提取并蒸除有机溶剂，得到游离碱。生成的油状残余物不用进一步提纯便可用于制备化合物53。
7.N，N′-双（3-氨基丙基）壬烷-1，5-二胺和N，N′-双（3-氨基丙基）癸烷-1，5-二胺
这些衍生物是已知化合物，其制备可按Israel，M.J.，Rosenfield        S.S.，Mdest，E.J.，J.Med.Chem.1964，7，710的方法，对适当的α-，ω-亚烷基二胺进行一和二氰乙基化，然后通常在温和条件下催化还原腈类。
下面表Ⅶ示出了根据A″′步骤制备的化合物（46-55）。
HPLC分析：用Varian型仪器进行分析，5000LC泵配有20微升环管注射器（Rheodyne型）在254nmUV监测。
柱：预装填Lichrosorb        RP-8（20-30微米）的前置柱Hibar        Lichro        Cart        25-4（Merck）（1.9cm）;然后是预装填Lichrosorb        RP-8（10微米）的Hibar        RT-250-4（Merck）柱。
洗脱剂：A，0.2%HCOONH4水溶液;
B，CH3CN
流速：2ml/分
注射：20微升
洗脱：30分钟内B在A中的线性梯度为20-60%。一些代表性化合物的保留时间示于表Ⅷ。
酸碱滴定：产物溶于MCS（甲基溶纤剂）：H2O＝4∶1（V/V），然后将过量0.01MHcl加入相同溶剂混合物溶液，所得溶液用0.01NNaOH滴定。一些代表性化合物的当量示于表Ⅸ。
用四甲基硅烷（TMS）作为内标（δ＝0.00ppm）在DMSO-D6中在温度20-30℃记录500MHZ1H-NMR谱（使用Bruker AM500光谱仪）。表Ⅹ示出了一些代表性化合物最明显的化学位移（ppm）。
表Ⅷ
本发明一些代表性化合物的保留时间（tR）
表Ⅷ（续）
Figure 901017590_IMG41
表Ⅸ
式Ⅰ一些代表性化合物的产率和当量（EW）。
括号内数值是滴定每分子当量的次数
表Ⅸ（续）
                                                                                                            表Ⅹ
用四甲基硅烷作内标，在DMSO-D6
中记录的一些代表性化合物的1H-NMR分布（δ＝0.00ppm）
化合物2 3.61,2.95（CH2-侧链）；0.83,1.18,1.46,
                                                    2.02(酰基链）；4.18-5.62
                                                    （肽CH);1.89
                                                    (乙酰氨基葡糖）；6.18-8.45(芳族质子和肽NH)
化合物4 3.45,2.82,2.63,2.08,1.66(CH2-侧链）
                                                    0.87,1.23,1.45,2.01(酰基链）；
                                                    1.88(乙酰氨基葡糖）；
                                                    4.15-5.71(肽CH)；6.26-8.56(芳族质子和）
                                                                                                                                                                        肽NH
化合物6 3.52,2.73,2.58,1.91,1.56(CH2-侧链）；
                                                    0.84,1.15,1.46,2.02(酰基链）；
                                                    1.82（乙酰葡糖胺）;3.42(甘露糖）;
                                                    4.15-5.69(肽CH);6.29-8.53(芳族质子和肽NH)
化合物7 3.68,3.12,2.98,2.05(CH2-侧链）；
                                                    0.84,1.16,1.44,2.01（酰基链）；
                                                    1.89（乙酰氨葡糖）；3.42(甘露糖）；
                                                    4.13-5.58(肽CH);6.21-8.53(芳族质子和肽NH)
                                                                                        表Ⅹ（续）
8 3.68,2.92,1.98(CH2-侧链）；0.82,1.25
                                                                        1.43,2.01（酰基链）；1.87（乙酰氨基葡糖）
                                                                        4.17-5.65(肽CH);6.26-8.57(芳族质子和肽NH)
9 3.48,2.98,1.98(CH2-侧链）；0.82,1.12,
                                                                        1.43,2.01(酰基链）；1.86(乙酰氨基葡糖）；
                                                                        4.16-5.62(肽CH);6.18-8.58(芳族质子和肽NH)
11 3.71,2.93,1.98,1.73,(CH2-侧链）；0.83,1.23
                                                                        1.47,2.02(酰基链）；1.89(乙酰氨基葡糖）；
                                                                        4.13-5.58(肽CH);6.21-8.62(芳族质子和肽NH)
15 3.52,3.13(CH2哌嗪）；3.42-2.07(CH2-侧链）；
                                                                        0.83,1.16,1.45,2.02(酰基链）；
                                                                        1.88(乙酰氨基葡糖）；4.16-5.32(肽CH);
                                                                        6.18-8.53(芳族质子和肽NH)
21 3.52,3.04,2.81,(CH2-N);4.15-5.62(肽CH)
                                                                        6.18-8.62(芳族质子和肽NH)
                                                                                    表Ⅹ（续）
化合物22 3.17,2.93,2.83,1.87,1.80(CH2-侧链）；
                                                                                4.15-5.61(肽CH);
                                                                                6.18-8.53(芳族质子和肽NH)
″23 3.42,2.98-2.71,1.72,1.61(CH2亚精胺）；
                                                                                4.15-5.63(肽CH),
                                                                                6.19-8.43(芳族质子和肽NH)
″24 3.38,3.12,2.98(CH2-N),1.89(CH2);
                                                                                4.17-5.58(肽CH);6.18-8.48(芳族质子和NH)
″25 3.34,3.08,2.84,1.78(CH2-侧链）；
                                                                                4.16-5.58(肽CH);
                                                                                8.31-8.48(芳族质子和肽NH)
″26 3.36,2.98,2.87（CH2-N);1.89,1.77(CH2);
                                                                                4.15-5.62(肽CH);
                                                                                6.18-8.42(芳族质子和肽NH)
                                                                                            表Ⅹ（续）
化合物27 3.12,3.03-2.82,1.88,1.81,1.65(CH2-侧链）；
                                                                    4.15-5.62(肽CH);6.19-8.41(芳族质子和肽NH)
″29 3.48,3.12,2.83,2.64(CH2-N);4.18-5.61
                                                                    (肽CH);6.21-8.70(芳族质子和肽NH)
″30 3.49,3.11,2.95,2.85,1.85(CH2侧链）；
                                                                    4.18-5.81(肽CH);6.21-8.56(芳族质子和肽NH)
″31 3.01N(CH3)
Figure 901017590_IMG44
3;2.95,2.21,1.68(CH2-侧链）；
2.28,2.06,(NCH3);0.83,1.21,1.46(酰基链）；
                                                                    1.86（乙酰氨基葡糖），3.48（甘露糖）；
                                                                    4.17-5.82(肽CH);6.14-8.62(芳族质子和肽NH)
″34 3.03-2.81,1.82,1.62,1.43(CH2-侧链）；
2.01(CH3-CH),1.23(CH3);4.13-5.62(肽CH);
                                                                    6.19-8.47(芳族质子和肽NH)
                                                                                        表Ⅹ（续）
化合物35 5.25(CH2-O),4.51(CH2OH);2.06(NCH3);0.81,
                                                                        1.23,1.45,2.02(酰基链）；
                                                                        1.87(乙酰胺基葡糖）；4.12-5.69(肽CH);
                                                                        6.14-8.48(芳族质子和肽NH)
″36 5.22(CH2-O);3.72,2.82(CH2-侧链）；
1.93(NCH3);0.83,1.14,1.43,2.01(酰基链）；
                                                                        1.87(乙酰胺基葡糖）；4.18-5.72(肽CH);
                                                                        6.31-8.45(芳族质子和肽NH)
″44                                                        3.68,3.34,2.95,1.99,1.84(亚精胺）；
                                                                        1.87(乙酰胺基葡糖）;4.18-5.61(肽CH);
                                                                        6.19-8.56(芳族质子和肽NH)
″39                                                        3.71,3.37,2.98,1.98,1.82(亚精胺）；
                                                                        1.86(乙酰葡糖胺）；3.44(甘露糖）；
                                                                        4.16-5.58(肽CH);6.29-8.54(芳族质子和肽NH)
                                                                                表Ⅹ（续）
化合物46 3.41,3.23,3.16,2.94(CH2-侧链）；1.12,
1.23(CH3-侧链）；0.81,1.15,1.46,
                                                                        2.00(酰基链），1.86(乙酰葡糖胺）；
                                                                        4.16-5.59(肽CH);6.23-8.01(芳族质子和肽NH)
″47 3.45,3.09,2.35,1.84(CH2-侧链）；0.82,1.14,
                                                                        1.46,2.03(酰基链）；1.86(乙酰葡糖胺）
                                                                        4.12-5.62(肽CH)；6.23-8.43(芳族质子和肽NH(
″50 3.43,3.24,2.85,1.84(CH2-侧链）；
                                                                        4.12-5.62(肽CH),6.21-8.51(芳族质子和肽NH)
″51 3.45,3.39,3.05,2.91,2.12,1.98(CH2-侧链）；
2.74(NCH3);4.13-5.59(肽CH);
                                                                        6.18-8.61(芳族质子和肽NH).
″52 3.48,3.12,1.89(CH2-侧链）；1.18(2CH3-乙基);
                                                                        4.12-5.61(肽CH);6.20-8.50(芳族质子和肽NH)
                                                                                            表Ⅹ（续）
化合物53 3.42,3.39,3.30,1.98(CH2-哌嗪，CH2-丙基）；
2.75(NCH3);4.05-5.63(肽CH);
                                                                            6.32-8.52(芳族质子和肽NH)
″55 3.32,2.98,2.76,1.86,1.52,1.24(CH2-侧链);
                                                                            4.13-5.62(肽CH);
                                                                            6.31-8.42(芳族质子和肽NH).
″54                                                            3.37,3.34,3.07,2.86,1.75,1.59,
1.26(CH2-侧链）；4.14-5.61(肽CH)；
                                                                            6.21-8.34（芳族质子和肽NH)

Claims (10)

1、制备通式I的替考拉宁衍生物和药用酸加成盐的方法，
Figure 901017590_IMG1
式中，
R为氢或胺官能团保护基；
Y为通式-WR1-alk1-[X-alk2]p-[T-alk3]q-W的化合物，其中
R1为氢或(C1-C4)烷基；
alk1、alk2和alk3各自为含2至10个碳原子的直链或支链亚烷基；
p为1至50的一个整数；
q为0至12的一个整数；
X为-NR2-或氧原子，其中R2为氢、(C1-C4)烷基、alk4NR3R4基，其中alk4为含2至4个碳原子的直链或支链亚烷基，R3为氢或(C1-C4)烷基，R4为氢、(C1-C4)烷基或5-6元环烷基；或R1和R2一起形成连接二个氮原子的(C2-C4)亚烷基，其条件是这种情况下p为1；
T为-NR5-或氧原子，其中R5为氢(C1-C4)烷基、alk5NR6R7基，其中alk5为含2至4个碳原子的直链或支链亚烷基，R6为氢或(C1-C4)烷基，R7为氢(C1-C4)烷基或5-6元环烷基；或R2和R5一起形成连接二个氮原子的(C2-C4)亚烷基，其条件是在这种情况下p和q均为1；
W为羟基、NR8R9，其中R8为H或(C1-C6)烷基，R9为H、(C1-C6)烷基、5-6元环烷基、COOR10(其中R10为(C1-C6)酰氧基-(C1-C4)烷基)和
N
Figure 901017590_IMG2
R11R12R13An ，其中
R11、R12和R13各为(C1-C4)烷基，An
Figure 901017590_IMG4
为药用酸衍生的阴离子；其条件是，当X同时为NR2时，p为1，q为零，而W不为羟基；
A为H或-N[(C9-C12)脂族酰基]-β-D-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，
B为H或N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基；
M为氢或α-D-吡喃甘露糖基；
其另一条件是，只有当A和M同时为氢时，B才能为氢；
该方法包括用下列通式Ⅱ的胺
(式中R1、alk1、alk2、alk3、X、T、p、q和w如上所定义)对通式I相应的羧酸替考拉宁原料(式中A、B、M如上所定义，Y为OH)进行酰胺化。
2、权利要求1所述的方法，其中酰胺化反应在缩合剂的存在下，在惰性有机溶剂中，在0至20℃的温度下进行，所述缩合剂选自叠氮磷酸的（C1-C4）烷酯、苯酯或杂环酯。
3、权利要求1所述的方法，其中酰胺化通过将羧酸原料转化成其相应的活性酯，其N15-氨基最好被保护，然后将该活性酯与摩尔过量的权利要求1中的通式Ⅱ的胺在有机极性溶剂存在下，在5至60℃的温度下，最好在10至30℃的温度下进行反应。
4、权利要求3所述的方法，其中活性酯是氰甲基酯，其与胺的摩尔比为1∶5至1∶30。
5、权利要求4所述的方法，其中氰甲基酯的制备是在惰性有机溶剂和对反应过程无影响的碱存在下，将N15-氨基官能团最好被保护的羧酸原料与摩尔用量过量约20至30倍的氯乙腈在5至60℃，最好在10至30℃的温度下反应。
6、制备通式Ⅰ的化合物的方法，式中W为-NR8R9-，其中R8如权利要求1所定义，R9为COOR10，而R10为（C1-C6）酰氧基-（C1-C4）烷基，该方法包括在无水碱金属碳酸盐存在下将N63-酰胺的N15被保护的衍生物（式中W为-WHR8，而R8如权利要求1所定义）与碳酸α-酰氧基烷基对硝基苯基酯反应。
7、权利要求1至6所述的方法，该方法还包括除去N15保护基的附加步骤。
8、制备权利要求1的一种替考拉宁酰胺衍生物的方法，该方法包括在惰性溶剂中酸接受体存在下，将通式Ⅰ的N63酰胺的N15被保护的衍生物（式中Y为-NR1alk1XH或NR1-alk1-〔X-alk2〕p-TH）与通式r-〔alk2〕p-〔T-alk3〕q-W或r-〔alk3）qW（式中符号R1、alk1、alk2、alk3、X和T如权利要求1所定义，r为卤素、甲磺酰基或甲苯磺酰基）所示的反应物反应。
9、制备通式Ⅰ的化合物的方法，式中A为氢，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基，该方法包括在室温下用浓有机酸水溶液，最好是在10至50℃的温度下用浓度为75至95%的三氟乙酸水溶液对通式Ⅰ相应的酰胺化合物进行水解，式中A为N-〔（C9-C12）脂族乙酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基-吡喃葡糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基。
10、制备通式Ⅰ的化合物的方法，式中A和M均为氢，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，该方法包括将通式Ⅰ相应的酰胺化合物（式中A为N（C9-C12）脂族酰基〕-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，B为N-乙酰基-β-D-2-脱氧-2-氨基吡喃葡糖基，M为α-D-吡喃甘露糖基）在极性非质子有机溶剂中与强酸接触，所述有机溶剂选自在室温下为液态的醚，酮和其混合物。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1871023B (zh) * 2003-09-17 2012-08-22 克利亚制药股份公司 一种具有改进的抗生素活性的糖肽组合物
CN111148536A (zh) * 2017-09-29 2020-05-12 国立研究开发法人国立长寿医疗研究中心 非细胞根管填料以及非细胞牙体组织再生促进试剂盒

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT836619E (pt) * 1995-07-05 2004-11-30 Aventis Bulk S P A Purificacao de antibioticos dalba-heptidicos por focagem isoelectrica
WO2000039156A1 (en) 1998-12-23 2000-07-06 Advanced Medicine, Inc. Glycopeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
SG87877A1 (en) * 1998-12-23 2002-04-16 Advanced Medicine Inc Glycopeptide derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
ES2158770B1 (es) * 1999-02-03 2002-04-16 Smithkline Beecham Sa Nuevos glicopeptidos.
US7186855B2 (en) 2001-06-11 2007-03-06 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US8048917B2 (en) 2005-04-06 2011-11-01 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US6818787B2 (en) 2001-06-11 2004-11-16 Xenoport, Inc. Prodrugs of GABA analogs, compositions and uses thereof
US20060074014A1 (en) 2002-11-18 2006-04-06 Vicuron Pharmaceuticals Inc. Dalbavancin compositions for treatment of bacterial infections
US7119061B2 (en) 2002-11-18 2006-10-10 Vicuron Pharmaceuticals, Inc. Dalbavancin compositions for treatment of bacterial infections
US20050004011A1 (en) 2002-11-18 2005-01-06 Marco Cavaleri Compositions and methods for treating bacterial infections with protein-dalbavancin complexes
RU2570425C1 (ru) * 2014-12-22 2015-12-10 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков имени Г.Ф. Гаузе" Химерные антибиотики на основе гликопептидов и 11,12-циклического карбоната азитромицина и способ их получения

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8522574D0 (en) * 1985-09-12 1985-10-16 Lepetit Spa Amides of teicoplanin compounds
GB8704847D0 (en) * 1987-03-02 1987-04-08 Lepetit Spa Substituted alkylamides of teicoplanin compounds
GB8827202D0 (en) * 1988-11-22 1988-12-29 Lepetit Spa Process for preparing 63-carboxyamides of teicoplanin antibiotics

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1871023B (zh) * 2003-09-17 2012-08-22 克利亚制药股份公司 一种具有改进的抗生素活性的糖肽组合物
CN111148536A (zh) * 2017-09-29 2020-05-12 国立研究开发法人国立长寿医疗研究中心 非细胞根管填料以及非细胞牙体组织再生促进试剂盒
CN111148536B (zh) * 2017-09-29 2021-12-28 兴和株式会社 非细胞根管填料以及非细胞牙体组织再生促进试剂盒

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WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication