KR0137958B1 - 테이코플라닌의 신규 치환된 알킬아미드 유도체 - Google Patents

Abstract

본 발명은 아미드 잔기가 디-또는 폴리-알킬아민으로부터 유도되는 테이코플라닌의 C63 아미드 유도체 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다. 이 유도체는, 테이코플라닌성 생성물을 클로로아세토니트릴과 같은 활성 에스테르 형성제와 반응시키고 이이서 이 활성 에스테르를 적당한 디- 또는 폴리-알킬아민과 접촉시킴으로써 제조된다. 본 발명의 아미드 유도체는 그람 양성 및 그람 음성 박테리아에 대해서 항균 작용이 있다.

Description

[발명의 명칭]

테이코플라닌의 신규 치환된 알킬아미드 유도체

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 하기 일반식(Ⅰ)을 갖는 테이코플라닌 화합물의 알킬아미드 및 그의 제약학상 허용되는 산 부가염에 관한 것이다.

상기 식에서, R은 수소, 또는 아민 작용기의 보호기이고, Y는 일반식 -NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W의 화합물이며, 여기에서, R₁은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이고, alk₁, alk₂및 alk₃는 각각 독립적으로 탄소 원자수 2 내지 10의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이며, p는 1 내지 50의 정수이고, q는 0 내지 12의 정수이며, X는 -NR₂-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₂는 수소, (C₁-C₄)알킬, alk₄,NR₃,R₄기(여기서, alk₄는 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분자쇄 알킬렌이고, R₃은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이며, R₄는 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p가 1인 경우에는 R₁및 R₂가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는(C₂-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, T는 -NR₅-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₅는 수소, (C₁-C₄)알킬, alk₅NR₆R₇기(여기서 alk₅는 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이고, R₆은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이며, R₇은 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p와 q가 모두 1인 경우에는 R₂및 R₅가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, W는 히드록시, NR₈R₉, NR₁₁R₁₂R₁₃An이되, X가 NR₂이고, p가 1이고, q가 0인 경우에는 W는 히드록시 이외의 기이며, 이기서 R₈은 H 또는 (C₁-C₆)알킬이고, R₉는 H, (C₁-C₆)알킬, 5-6원 시클로알킬, COOR₁₀이며, R₁₀은 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬이고, R₁₁, R₁₂및 R₁₃은 각각 독립적으로 (C₁-C₄)알킬이며, An은 제약학적 허용되는 산으로부터 유도된 음이온이고, A는 H 또는 -N[(C₉-C₁₂)지방족 아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B는 수소 또는 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M은 수소 또는 α-D-만노피라노실이고, A와 M이 동시에 수소인 경우에만 B가 수소를 나타낸다.

테이코플라닌은 탄소, 질소 및 무기 염류의 동화될 수 있는 공급원을 함유하는 배양 배지 중에서 균주 악티노플라네스 테이코미세티쿠스 ATCC 31121[Actinoplanes teichomyceticus nov. sp. ATCC 31121]을 배양함으로써 얻어지는, 구명칭이 테이코마이신인 항생물질의 국제 비독점 명칭(INN)이다(미합중국 특허 제4,239,751호 참조).

상기 인용한 특허 명세서에 기재된 방법에 따르면, 테이코마이신 A₁, A₂및 A₃을 함유하는 항생물질의 복합체는 개개의 발효 브로쓰를 적당한 수불용성 유기 용매로 추출하고 통상의 방법에 의해 추출 용매로부터 침전시켜 회수한다. 이어서, 단리된 항생물질 복합체의 주요인자인 테이코마이신 A₂를 Sephadex컬럼 크로마토그래피에 의해 기타 성분들로부터 분리시킨다. 영국 특허 제2121401호에는 항생물질 테이코마이신 A₂가 실제로는 함께 생성된 5종의 서로 밀접한 관련이 있는 주성분들의 혼합물로 되어 있는 것으로 기재되어 있다.

최근의 구조 연구에 의하면, 테이코플라닌 A₂(종래의 테이코마이신 A₂)의 주성분 1, 2, 3, 4 및 5는 R이 수소이고, Y가 히드록시이고, A가 -N[(C₁₀-C₁₁)-지방족 아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노-클로코피라노실이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노-글루코피라노실이고, M이 α-D-만노피라노실인 상기 일반식(Ⅰ)로 표시할 수 있음을 알게 되었다.

더욱 구체적으로, 테이코플라닌 A₂의 성분 1에서, [(C₁₀-C₁₁)]-지방족 아실] 치환체는 Z-4-데세노일을, 테이코플라닌 A₂의 성분 2에서는 8-메틸-노나노일을, 테이코플라닌 A₂의 성분 3에서는 데카노일을, 테이코플라닌 A₂의 성분 4에서는 8-메틸데카노일을, 테이코플라닌 A₂의 성분 5에서는 9-메틸데카노일을 각각 나타낸다.

유럽 특허 출원 공고 제306645호에서는 β-D-2-데옥시-2-아미노-글루코피라노실 잔기의 지방족 산기가 6-메틸 옥타노일기(화합물 A 또는 RS₃) 또는 n-노나노일기(화합물 B 또는 RS₄)인 테이코플라닌 화합물의 제법이 기재되어 있다.

나머지 두 테이코플라닌 화합물들(RS1 및 RS2)에 대해서는 1988년 9월 25일부터 30일까지 빈에서 개최된 제17차 크로마토그래피에 관한 국제 심포지움에서 자놀(Zanol) 등이 발표한 연구 논문 Isolation by HPLC and structural determination of minor components of teicoplanin에 기재되어 있다.

상기 화합물들은 β-d-2-데옥시-2-아미노-글루코피라노실 잔기의 지방족 아실 잔기가 각각 메틸-운데카노일(RS1) 및 도데카노일(RS2)인 것을 특징으로 한다.

당 잔기가 존재하는 경우, 모든 당 잔기는 O-글리코시드 결합에 의해 테이코플라닌 핵에 결합된다.

이외에도, 테이코플라닌, 그의 순수 인자 또는 임의 비율로 혼합된 상기 인자들의 혼합물을 1 또는 2개의 당 잔기의 선택적 가수분해에 의해 단일의 항생물질로 변형시킬 수 있음을 알게 되었다.

이들은 항생물질 L 17054 및 항생물질 L 17046으로 명명되어 유럽 특허 제119575호 및 동 제119574호에 각각 기재되어 있다.

항생물질 L 17054의 제조에 바람직한 가수분해 조건은 0.5N의 염산과, 70°내지 90℃의 반응 온도 및 일반적으로 15 내지 90분 사이의 반응 시간이다.

항생물질 L 17054는, Y가 히드록시이고, R 및 A가 수소이며, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노-글루코피라노실이고, M이 α-D-만노피라노실(여기서, 당 잔기는 O-글리코시드 결합에 의해 팹티드 핵에 연결되어 있음)인 상기 일반식(Ⅰ)로 표시된다.

항생물질 L 17046의 제조에 바람직한 가수분해 조건은 1-3N의 염산과 50°내지 90℃의 반응 온도 및 일반적으로 30 내지 60분 사이의 반응 시간이다.

항생물질 L 17046은, Y가 히드록시이고, R, A 및 M이 수소 원자이며, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노-글루코피라노실(여기서, 당 잔기는 O-글리코시드 결합에 의해 펩티드 핵 연결되어 있음)인 상기 일반식(Ⅰ)로 표시된다.

유럽 특허 출원 공고 제301247호에는 데-만노실 테이코플라닌 유도체, 즉, A 및 B가 수소 이외의 기이고, M이 수소이며, Y가 히드록시인 상기 일반식(Ⅰ)의 화합물이 기재되어 있다.

테이코플라닌 화합물의 모든 당 잔기를 선택적으로 완전히 분절시키면, Y가 히드록시이고, R, A, B 및 M이 각각 독립적으로 수소 원자인 상기 일반식(Ⅰ)로 표시되는, 아글리콘 분자(소위, 항생물질 L 17392)또는 데글루코테이코플라닌이 얻어진다. 이와 같은 선택적 가수분해 방법은 유럽 특허 출원 공고 제146053호에 기재되어 있다.

위와 동일한 구조식을 갖는 물질이 유럽 특허 출원 공고 제0090578호에 항생물질 A 41030 인자 B로 명명되어 공개되어 있다.

이러한 물질은, 균주 스트렙토미세스 비르기니애(Streptomyces virginiae) NRRL 12525 또는 스트렙토미세스 베리기니애 NRRL 15156을 적당한 배지 중에서 발효시키고, 단리, 정제후, 적어도 7개 인자들의 항생물질 복합체인 항생물질 A 41030의 구성 성분들, 항생물질 A 41030 인자 B로 분리시키는 단계들을 포함하는 미생물학적 방법에 의해 얻는다.

상기 지명한 화합물들, 즉, 테이코플라닌, 테이코플라닌 A₂복합체, 테이코플라닌 A₂성분 1, 테이코플라닌 A₂성분 2, 테이코플라닌 A₂성분 3, 테이코플라닌 A₂성분 4, 테이코플라닌 A₂성분 5, 화합물 A 또는 RS3, 화합물 B 또는 RS4, RS1, RS2, 항생물질 L 17054, 항생물질 L 17046, 항생물질 L 17392, 유럽 특허 출원 공고 제301247호의 데-만노실 테이코플라닌 유도체 및 임의 비율로 혼합한 이들의 혼합물들은 모두 본 발명의 치환 알킬아미드 유도체 제조에 적합한 출발물질이다.

본 명세서에서, 테이코플라닌 화합물 또는 테이코플라닌 출발물질은 상기 출발물질 중 어느 하나, 즉, 미합중국 특허 제4,239,751호에 따라서 얻은 테이코플라닌, 그의 추가 정제물, 테이코플라닌 A₂복합체, R이 수소 또는 N-보호기이고, Y가 히드록시이며, A가 수소 또는 -N[(C₉-C₁₂)지방족 아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B가 수소 또는 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 수소 또는 β-D-만노피라노실이되, A와 M이 동시에 수소인 경우에만 B가 수소일 수 있는 상기 일반식(Ⅰ)의 화합물, 그의 염 또는 임의 비율로 혼합한 이들의 혼합물들 중 어느 하나를 의미한다.

본 명세서에서 알킬은 단독으로 또는 다른 치환제와 결합하여 있는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소기를 의미하며, 좀더 구체적으로 (C₁-C₆)알킬은 탄소 원자수 1 내지 6의 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소 쇄, 예를들면 메틸, 에틸, 프로필, 1-메틸에틸, 부틸, 1-메틸프로필, 1,1-디메틸에틸, 펜틸 1-메틸부틸, 2-메틸부틸, 1-헥실, 2-헥실, 3-헥실, 3,3-디메틸-1-부틸, 4-메틸-1-펜틸 및 3-메틸-1-펜틸을 의미하고, 마찬가지로 (C₁-C₄)알킬은 탄소 원자수 1 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 쇄, 예를들면 상기 예시한 기들중 탄소 원자가 1 내지 4개인 알킬기를 의미한다.

본 명세서에서, alk₁, alk₂, alk₃은 탄소 원자수 2 내지 10의 독립적인 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌 쇄를 의미하며, 그 예로서는 하기의 것을 들 수 있다.

마찬가지로, alk₄및 alk₅는, 상기 예시한 기들 중 탄소 원자가 2 내지 4개인 알킬렌 쇄와 같은, 탄소 원자수 2 내지 4의 독립적인 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌 쇄를 의미한다.

본 발명의 바람직한 화합물은, R이 수소, 또는 아민 작용기의 보호기이고, Y가 일반식

-NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W

[여기서 R₁은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이고, alk₁, alk₂및 alk₃은 각각 독립적으로 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이며, p는 1 내지 12 사이의 정수이고, q는 0 내지 12 사이의 정수이며, X는 -NR₂-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₂는 수소, (C₁-C₄)알킬, alk₄NR₃R₄기(여기서, alk₄는 탄소 원자수2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이고, R₃은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이며, R₄는 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p가 1인 경우에는 R₁및 R₂가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는(C₂-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, T는 -NR₅-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₅는 수소, (C₁-C₄)알킬, alk₅NR₆R₇기(여기서, alk₅는 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이고, R₆은 수소 또는(C₁-C₄)알킬이며, R₇은 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p와 q가 모두 1인 경우에는 R₂및 R₅가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, W는 히드록시, NR₈R₉, NR₁₁R₁₂R₁₃An이되, X가 NR₂이고, p가 1이고, q가 0인 경우에는 W는 히드록시 이외의 기이며, 여기서 R₈은 H 또는 (C₁-C₆)알킬이고, R₉는 H, (C₁-C₆)알킬, 5-6원 시클로알킬, COOR₁₀이며, R₁₀은 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬이고, R₁₁, R₁₂및 R₁₃은 각각 독립적으로 (C₁-C₄)알킬이며, An은 제약학적 허용되는 산으로부터 유도된 음이온이다]의 화합물이고, A가 H 또는 -N[(C₉-C₁₂)지방족 아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B가 수소 또는 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 수소 또는 α-D-만노피라노실이되, A와 M이 동시에 수소인 경우에만 B가 수소를 나타낼 수 있는 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 그의 제약학상 허용되는 산 부가염이다.

바람직하기로는, X 및(또는) T가 각각 -NR₂- 및(또는) -NR₅-인 경우에는 alk₄및 alk₅가 C₂-C₃직쇄를 나타내는 것이 좋다.

전술한 바와 같이, 상기 p는 1 내지 50의 정수이며, q는 0 내지 12의 정수이다. 하지만, X 및(또는) T가 각각 -NR₂- 및(또는) -NR₅-인 경우에 p와 q는 1 내지 12 사이의 정수가 바람직하며, 또한 X와 T가 모두 산소 원자인 경우에 p와 q는 p+q가 2 내지 50 사이가 되도록 하는 수인 것이 바람직하다.

본 명세서 및 특허 청구의 범위에서 C₅-C₆시클로알킬은 메틸 및 에틸과 같은 탄소 원자수 1 내지 3의 저급 알킬기로 치환시킬 수 있는 시클로펜틸 및 시클로헥실기를 의미한다.

바람직한 화합물은, X가 -NR₂-기(R₂는 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 alk₄NR₃R₄임)인 일반식(Ⅰ)의 화합물이다.

또 다른 바람직한 화합물 군으로, p가 1이고, X가 -NR₂-이며, 이 R₂가 R₁과 함께 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₃)일킬렌 잔기를 나타내는 일반식(Ⅰ)의 화합물들이 있다.

위와 같은 경우, alk₁이 -CH₂-CH₂-기인 화합물들이 특히 바람직하다.

또 다른 바람직한 화합물 군에는 p가 1이고, q가 1이며, X와 T가 각각 -NR₂- 및 -NR₅-이고, 이 R₂및 R₅가 함께 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₃)알킬렌 잔기를 나타내는 일반식(Ⅰ)의 화합물들이 있다.

이 경우, alk₂가 -CH₂-CH₂-기인 화합물들이 특히 바람직하다. 다른 바람직한 화합물은 X와 T가 산소원자이고, p+q가 2 내지 50이며, W가 히드록시 또는 NR₈R₉이고, 이 R₈은 수소 또는(C₁-C₄)알킬이며, R₉는 수소, (C₁-C₄)알킬, 시클로펜틸 또는 시클로헥실인 일반식(Ⅰ)로 표시된다.

이 중, W가 NR₈R₉이며, 이 R₈은 상기 정의한 바와 동일하고, R₉는 COOR₁₀(R₁₀은 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬기이다)인 화합물들이 한층 더 바람직하다.

본 명세서에 사용된 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬에서 (C₁-C₄)알킬기는 (C₁-C₃)직쇄 또는 분지쇄 알킬쇄로 치환될 수 있는 메틸렌 잔기이며, 그 예로서

등을 들 수 있다.

식 -NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W 로 표시되는 기의 대표적인 예를 상기 일반적 정의에 따라 열거하면 다음과 같다 :

본 발명의 화합물은 항균 작용을 나타내고, 주로 그람 양성 박테리아에 대하여 반합성 항생제로서 유용하지만, 특히 그람 음성 박테리아에 대하여, 더욱 구체적으로 대장균(Escherichia coli) 및 녹농균(Pseudomonas aeruginosa)에 대해서도 활성이 있다.

테이코플라닌 복합체의 각종 C⁶³아미드 유도체, 단일 성분들 및 그의 아글리콘 및 슈도아글리콘(pseudoaglycons)이 유럽 특허 출원 공고 제218099호 및 국제 특허 출원 공개 제WO 88/06600호에 기재되어 있다.

본 발명의 화합물은 Y가 OH인 일반식(Ⅰ)의 대응하는 유도체(즉, 대응하는 카르복실산 화합물)를 아미드화시켜서 제조한다.

상기한 본 발명의 화합물의 제조에 출발물질로서 사용된 물질은 단일 산물이거나 또는 2종 이상의 산물들의 혼합물일 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조를 위한 출발물질로 상기 형태들을 모두 사용할 수 있기 때문에, 상기 일반식(Ⅰ)의 단일 화합물 또는 둘 이상의 화합물의 혼합물 형태로 된 최종 생성물을 얻을 수 있다. 이들 화합물의 혼합물도 역시 본 발명의 일부이며, 이들의 생물학적 응용 및 용도에 사용할 수 있거나 또는 마침내는 당 업계의 공지 방법에 의해 이들의 독립 성분들로 분리시킬 수 있다. 테이코플라닌 아미드 유도체의 최종 생성물 혼합물로부터 독립 성분들을 얻기에 적합한 분리 방법으로는 유럽 특허 출원 공고 제218099호 및 국제 특허 출원 공개 제WO 88/06600호에 기재되어 있는 방법들을 예로 들 수 있다.

상기 인용한 유럽 특허 출원 및 국제 특허 출원에 기재되어 있는 아미드화 반응 공정을 본 발명의 화합물의 제조에도 또한 이용할 수 있다. 상기 공정은 전술한 카르복실산 출발물질을 불활성 유기 용매 중에서 축합제 존재 하에 일반식(Ⅱ)

-NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W

(식 중, R₁, alk₁, alk₂, alk₃, X, T, p, q 및 W는 상기한 바와 동일한 의미를 가진다)로 표시되는 과량의 적당한 아민으로 축합시키는 단계가 포함되어 있다.

아미드화 반응에 유용한 불활성 유기 용매는 반응 공정에 지장을 주지 않으며 테이코플라닌 출발물질을 적어도 일부 용해시킬 수 있는 유기 비양성자성 용매류가 바람직하다.

상기 불활성 유기 용매의 예로는 유기 아미드류, 알킬 에테르류, 글리콜 및 폴리올의 에테르류, 포스포르 아미드류 및 술폭시드류가 열거된다. 그 중 바람직한 불활성 유기 용매로는 디메틸포름아미드, 디메톡시에탄, 헥사메틸포스아미드, 디메틸술폭시드 및 이들의 혼합물을 예로 들 수 있다.

본 발명의 방법에서 축합제로는 유기 화합물, 특히 펩티드 합성에서 아미드 결합을 형성하기에 적합한 것이면 좋다.

축합제의 대표적인 예로서는 디페닐 포스포르아지데이트, 디에틸 포스포르아지데이트, 디(4-니트로페닐) 포스포르아지데이트, 디모르 폴릴포스포르아지데이트 및 디페닐포스포로클로리데이트와 같은, (C₁-C₄)알킬, 페닐 또는 헤테로시클릭 포스포르아지데이트류를 들 수 있다. 그 중, 바람직한 축합제는 디페닐 포스포르아지데이트, 즉, 인산 디페닐 에스테르 아지드(DPPA)이다. 명세서 상에 기재된 본 발명의 아미드화 공정에서 아민 반응물은 통상적으로 몰 과량으로 사용한다.

일반적으로, 아민 반응물이 비교적 저렴하고 용이하게 구입할 수 있는 물질인 경우에는 2 내지 6배 몰 과량, 바람직하기로는 3 내지 4배 몰 과량으로 사용한다.

아미드화 반응을 진행시키기 위해서는 아민이 테이코플라닌 출발물질의 카르복시 작용기와 염을 형성할 수 있어야 한다. 아민이 선택한 반응 매질 중에서 이러한 염을 형성할 수 있을 만큼 충분히 강하지 못한 경우에는 반응 혼합물에 염 형성용 염기를 적어도 테이코플라닌 출발물질과 등몰량으로 첨가할 필요가 있다.

아민 반응물이 다소 고가이거나 또는 구입하기가 어려운 제품일 때에는 적은 몰 과량의 아민 반응물에 염형성용 염기를 첨가하여 사용하는 방법이 적합하다.

상기 염 형성용 염기의 예로서는 트리메틸아민, 트리에틸아민, N-메틸 피롤리딘 또는 피콜린 등과 같은, 3급 유기 지방족 또는 헤테로시클릭 아민류를 들 수 있다.

축합제는 일반적으로 테이코플라닌 출발 화합물의 몰 수에 대해서 1.2 내지 1.7배, 바람직하기로는 1.5배와 같은 약간의 몰 과량으로 사용한다.

그 밖에도 또한, 아민 반응물을 반응 매질 중에 대응하는 산 부가염, 예를들면 염산염으로서 혼입시키면 편리할 수 있다. 이 경우, 그의 염으로부터 아민을 유리시킬 수 있는 강 염기를 적어도 2배 이상의 몰비, 바람직하기로는 2 내지 4배 몰 과량으로 사용한다. 또한, 이 경우에 적합한 염기는 상기 예시한 바와 같은 3급 유기 지방족 또는 헤테로시클릭 아민이다. 실제로, 적어도 몇몇 경우에는 동일 반응계에서 상기한 염기에 의해 유리되는 아민의 염을 사용하는 것이 특히 이 염이 대응하는 유리 아민보다 더욱 안정한 경우에, 아주 바람직하다.

반응 온도는 특정 출발물질 및 반응 조건에 따라 상당히 달라질 수 있다. 일반적으로는 0-20℃의 온도에서 반응시키는 것이 바람직하다.

또한, 반응 시간도 기타의 반응 변수에 따라서 상당히 달라진다. 일반적으로, 축합반응은 약 24-48시간이면 완료된다.

경우에 따라서는, 반응 추이를 TLC 또는 바람직하기로는 HPLC에 의해 당 업계의 공지 방법에 따라 모니터한다.

이들 분석 결과를 기초로 하여, 당 업계의 숙련자는 반응의 진행 상황을 판단할 수 있고, 예컨대 컬럼 크로마토그래피에 의한 추가의 일반 분리 조작 및 정제와 관련하여 용매를 사용한 추출, 비용매의 첨가에 의한 침전 등을 비롯한 자체 공지 기술에 따라서 반응의 종결 시기 및 반응물의 처리 시기를 결정할 수 있을 것이다.

아민 반응물이 선택된 반응 조건하에서 불활성이 아닌 다른 작용기를 함유하는 경우에는, 이 작용기를 자체 공지의 보호기에 의하여 적합하게 보호한다.

본 발명의 또 다른 바람직한 실시태양에 의하면, Y가 상기 정의한 바의 기인 일반식(Ⅰ)의 화합물은, Y가 OH이고, N¹⁵-아미노 작용기가 바람직하게 보호되는 상기 일반식(Ⅰ)의 카르복실산의 활성화된 에스테르를 일반식(Ⅱ)의 적당한 아민과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

N¹⁵-아미노 작용기는 참조 문헌[그린(T.W.Green)의 Protective Groups in Organic Synthesis, 뉴욕 소재의 John Wiley and Sons사 출판(1981년), 및 맥오미(M. Mc.Omie)의 Protecting Group in Organic Chemistry, 뉴욕 소재의 Plenum Press사 출판(1973)]에 기재되어 있는 바와 같은 당 업계에 널리 알려진 방법에 의해 보호시킬 수 있다.

보호기는 반응 공정의 조건에서 인정해야 하고, 아미드화 반응에 지장을 주어서는 안되며, 반응의 말기에는 새로 형성된 아미드 결합 및 화합물, 예를들면 당 성분들의 전체 구조를 변경시키지 않고 반응 매질로부터 용이하게 분절시켜 제거할 수 있어야 한다.

테이코플라닌 출발물질의 N¹⁵일급 아미노 작용기 및 필요시 아민 Ⅱ 반응물의 아미노 작용기를 보호하기 위해 본 발명의 방법에서 적합하게 사용될 수 있는 N-보호기의 대표적인 예로는 다음과 같은 옥시카르보닐기를 특징적으로 포함하는 카르바메이트 형성제를 들 수 있다 :

1,1-디메틸프로피닐옥시카르보닐, t-부틸옥시카르보닐, 비닐옥시카르보닐, 아릴옥시카르보닐, 신나밀옥시카르보닐, 벤질옥시카르보닐, p-니트로벤질옥시카르보닐, 3,4-디메톡시-6-니트로벤질옥시카르보닐, 2,4-디클로로벤질옥시카르보닐, 5-벤즈이속사졸릴메틸옥시카르보닐, 9-안트라닐메틸옥시카르보닐, 디페닐메틸옥시카르보닐, 이소니코티닐옥시카르보닐, S-벤질옥시카르보닐 등.

기타 적합한 N-보호제에는, 피보호 아미노기와 함께 쉬프 염기를 형성할 수 있는 알데히드류 또는 케톤류, 또는 그의 유도체들이 있다.

이와 같은 쉬프 염기 형성제로서는 예를들면 벤즈알데히드류가 바람직하고, 특히 2-히드록시벤즈알데히드(살리실알데히드)가 바람직하다.

경우에 따라서, 편리한 보호 방법은 아민을 에탄올과 같은 저급 알칸올 중에서, 바람직하게는 실온에서 벤즈알데히드와 반응시킴으로써 제조할 수 있는 벨질리덴 유도체를 형성하는 것이다. 선택한 테이코플라닌 출발물질과의 반응이 종료된 후, 벤질리덴 보호기는 당 업계의 공지 방법, 예를들면 촉매로서 탄소상의 팔라듐을 사용하는 촉매적 수소첨가 반응으로 제거할 수 있다.

그러나, 이 경우에는 촉매적 수소첨가 반응에 의해 변성될 수 있는 기의 존재에 유의해야 한다. A가 상기 정의한 바와 동일한 기이고 그의 아실부가 (Z)-4-데세노일인 일반식(Ⅰ)의 아미노 보호 유도체(또는 이를 함유하는 혼합물)의 촉매적 수소첨가 반응으로 인한 전형적인 결과는 데세노일 화합물이 적어도 부분적으로 대응하는 데카노일 화합물로 변형된다는 것이다.

숙련된 기술자이면 알고 있는 바와 같이, 특정 보호기의 최종 선택은 목적한 구체적인 아미드 유도체의 특성에 따라 좌우된다. 실제로, 이와 같은 최종 화합물의 아미드 작용기는 보호기(들)의 제거 조건에서 안정해야 한다.

상이한 보호기들의 제거 조건들을 알려져 있으므로, 숙련된 기술자는 알맞는 보호기를 선택할 수 있을 것이다.

활성화된 에스테르의 형성은 피어서 및 피어서(Fieser and Fieser)의 Reagent for Organic Sythesis, John Wiley and Sons Inc.사 출판, 129-130페이지(1967년)에 일반적 의미로 기재되어 있다.

본 발명의 방법에서 편리하게 사용될 수 있는 상기 활성화된 에스테르 형성제로서는 그 예가 문헌[슈바이쩌(R. Schwyzer) 등의 Helv. Chim. Acta, (1955년판), 38권, 67-70페이지]에 기재되어 있고, ClCH₂CN,를 들수 있다.

이 유형에 바람직한 시약은 클로로아세토니트릴이다. 이 경우, 클로로아세토니트릴 자체나 또는 디메틸포름아미드(DMF)를 바람직한 용매로서 사용할 수 있다.

일반적으로 활성화된 에스테르의 형성에 유용한 불활성 유기 용매는 반응의 진행에 지장을 주지 않으며 카르복실산 출발물질을 적어도 부분적으로 용해시킬 수 있는 유기 비양성자성 용매이다.

상기 불활성 유기 용매의 예로서는 유기 아미드류, 알킬 에테르류, 글리콜 및 폴리올의 에테르류, 포스포르아미드류, 술폭시드류 및 방향족 화합물들을 들 수 있다. 바람직한 불활성 유기 용매의 예는 디메틸포름아미드, 디메톡시에탄, 헥사메틸포스포르아미드, 디메틸술폭시드, 벤젠, 톨루엔 및 이들의 혼합물이다.

특히, 아세토니트릴, 디메틸술폭시드, 디메틸포름아미드로부터 선택한 용매가 더욱 바람직하다. 활성 에스테르의 형성은 일반적으로, 반응 과정을 방해하지 않는 염기, 예를들면 트리에틸아민 등의 트리알칼아민, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 중탄산나트륨 또는 중탄산칼륨의 존재하에서 수행한다. 일반적으로, 염기는 테이코플라닌 카르복실산 출발물질에 대해 2 내지 6몰의 몰비로 사용하며, 바람직하기로는 약 3배 몰 과량으로 사용한다. 바람직한 염기는 트리에틸아민이다.

활성화된 에스테르 형성제는 테이코플라닌 카르복실산 출발물질보다 큰 과량으로 사용한다. 일반적으로는 5 내지 35몰의 몰비로 사용하며, 약 20 내지 30배의 몰 과량으로 사용하는 것이 바람직하다. 반응 온도는 10℃ 내지 60℃, 바람직하기로는 15℃ 내지 30℃이다. 통상, 반응 시간은 기타 특정한 반응 변수에 따라 좌우되며, 일반적으로는 3 내지 48시간이다.

이 경우, HPLC 또는 TLC로 반응 과정을 측정하여 반응의 완료시기와 목적한 중간생성물의 회수를 위한 공정 개시 시기를 결정할 수 있다. 활성화된 에스테르 중간생성물은 이를 제조하는 동일한 방응 매질 중에 직접 사용할 수 있지만, 일반적으로는 비용매를 사용한 침전 또는 용매를 사용한 추출에 의해 단리되며, 추가의 정제 처리없이 그대로 다음 반응 단계에서 사용한다. 그러나, 필요하다면, 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 또는 역상 컬럼 크로마토그래피와 같은 컬럼 크로마토그래피로 정제하여도 무방하다.

이어서, 수득한 활성화된 에스테르 중간 생성물은 유기 극성 용매의 존재하에 온도 5℃ 내지 60℃, 바람직하기로는 10℃ 내지 30℃에서 일반식(Ⅱ)

-NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W (Ⅱ)

의 아민 유도체 몰 과량과 반응시킨다.

유기 극성 용매는 이 경우에 극성 양성자성 용매이거나 또는 극성 비양성자성 용매이다.

유기 극성 양성자성 용매의 바람직한 예로는 에탄올, n-프로판올, 이소-프로판올, n-부탄올 등과 같은 저급 (C₂-C₄)알칸올 또는 이들의 혼합물을 들 수 있고, 바람직하게는 건식 형태로 사용된다.

유기 극성 비양성자성 용매의 예로서는 N,N-디메틸포름아미드(DMF), 헥사메틸포스포르아미드(HMPA), 또는 이들의 혼합물, 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라히드로-2-(1H)피라미돈(DMPU), 디메틸술폭시드(DMSO) 또는 디메톡시에탄(DME)이 바람직하다.

활성화된 에스테르와 선택된 아민과의 반응은 온도 5℃ 내지 60℃에서 수행할 수 있으나, 일반적으로 바람직한 온도는 10℃ 내지 30℃이고, 가장 바람직한 온도는 20℃ 내지 25℃이며, 한편으로 활성화된 에스테르 중간생성물과 상기 정의한 아민(Ⅱ) 사이의 바람직한 몰비는 1 : 5 내지 1 : 30, 더욱 바람직하기로는 1 : 10 내지 1 : 20이다. 반응의 진행 상황은 보통 TLC 또는 HPLC로 모니터할 수 있다.

아미드화 반응으로 얻은 아미드 유도체는 종래의 방법에 따라서, 예를들면 용매의 증발이나 또는 비용매의 첨가에 의하여 반응액으로부터 회수한다. 아미노 보호기의 제거는 통상적으로 아미드화 반응으로부터 단리된 조생성물에 대해 수행한다.

테이코플라닌 유도체로부터 상기 보호기를 제거하는 방법의 예가 예를들면 국제 출원 공개 제WO 88/06600호에 기재되어 있다.

촉매적 수소첨가법을 사용하는 경우, 통상적으로, 강산, 바람직하기로는 무기산(mineral acid)의 희석 수용액 존재하에 이 묽은 강산성 수용액과 혼화할 수 있는 유기 용매 중에서 반응을 수행한다. 이어서, 반응물을 여과하여 일반식(Ⅰ)의 아미드의 무기산 부가염이나 또는 대응하는 유리 염기를 회수한다. 당 잔기의 분절을 유발하지 않는 조건(예, 저온, 짧은 반응시간)하에서 아미노 보호기가 묽은 무기산으로 처리하여 제거 할 수 있는 기(예, 쉬프 염기 또는 C₁-C₄)알콕시 카르보닐기)인 경우에는 상기와 유사한 반응을 행한다.

본 발명의 일반식(Ⅰ)의 화합물을 제조하는 또 다른 방법은 Y가 -NR₁alk₁XH 또는 NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-TH인 일반식(Ⅰ)의 N⁶³아미드의 N¹⁵보호 유도체를 산 수용체의 존재하에 불활성 용매중에서 일반식 r-[alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W 또는 r-[alk₃]_qW(각 식에서, R₁, alk₁, alk₂, alk₃, X 및 T는 상기에서 정의한 바와 동일하고, r은 할로, 메탄술포닐 또는 토실이다)의 반응물과 반응시키는 것으로 이루어진다. 이 경우에, p는 1 또는 2가 바람직하고, q는 0 이외의 정수, 바람직하기로는 1 또는 2가 좋고, X 및 T는 바람직하기로는 NH 또는 산소, 가장 바람직하기로는 산소인 것이 좋다. 상기 N⁶³아미드의 N¹⁵보호 유도체는 본 발명의 일반식(Ⅰ)의 화합물의 일반적 제조 방법에 따라서 제조한다.

W가 -NR₈R₉-이고, R₈이 상기에 정의한 바와 동일하며, R₉가 COOR₁₀이고, R₁₀이 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬인 일반식(Ⅰ)의 화합물을 목적하는 경우에는, W가 -NHR₈-이고 R₈이 상기에 정의한 바와 동일한 기인 N⁶³아미드의 N¹⁵보호 유도체를 탄산나트륨과 같은 무수 알칼리성 카르보네이트의 존재하에서 α-아실옥시-알킬 p-니트로페닐 카르보테이트와 반응시켜야 한다. 상기 α-아실옥시-알킬 p-니트로페닐 카르보네이트는 문헌[J. Med. Chem., 31, 318-322페이지(1988년)]에 기재되어 있는 바와 같이 제조할 수 있다.

본 발명의 몇몇 아미드 화합물, 예를들면 테이코플라닌 A2의 아미드, 그의 단일 성분 또는 상기 두 성분 이상의 임의 혼합물은, 앞서 인용한 유럽 특허 제119575호 및 동 제119574호에 기재된 방법에 의한 1개 또는 2개의 당 전기의 선택적 가수분해에 의하여 단일 항생제를 제조하기 위한 출발물질로서 사용할 수 있다.

A가 수소이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 α-D-만노피라노실인 일반식(Ⅰ)의 화합물을 제조하는 방법에는, A가 -N[(C₉-C₁₂)지방족-아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 α-D-만노피라노실인 일반식(Ⅰ)의 대응하는 아미드 화합물(즉, 테이코플라닌 A2 복합체의 카르복시아미드 유도체 또는 그의 단일 성분)을 유럽 특허 출원 공고 제146822호에 기재된 방법에 따라 가수분해하는 것으로 이루어지는 또 다른 방법이 있다.

이 방법은 상기 물질을 대략 실온에서 진한 유기산 수용액과 접촉시키는 것으로 이루어지며, 바람직하기로는 10℃ 내지 50℃의 온도에서 75％ 내지 95％ 농도의 트리플루오로아세트산 수용액과 접촉시키는 것이 좋다.

A와 M이 각각 수소이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피나노실인 일반식(Ⅰ)의 화합물의 또 다른 제조방법을, A가 N[(C₉-C₁₂) 지방족 아실]-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 α-D-만노피라노실인 일반식(Ⅰ)의 화합물을 유럽 특허 출원 공고 제175100호에 따라 가수분해하는 것으로 이루어진다.

이 방법은 상기 출발물질을 실온에서는 액체인 에테르류, 케톤류 또는 이들의 혼합물로부터 선택한 극성 비양성자성 유기 용매의 존재하에서 강산과 접촉시키는 것으로 이루어진다.

후자의 경우에 출발물질로서는 또한, 상기한 바와 같이 진한 트리플루오로아세트산 수용액을 사용한 가수분해 방법에 의해 얻어지는, A가 수소이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M이 α-D-만노피라노실인 일반식(Ⅰ)의 아미드 화합물을 사용할 수 있다.

산 부가염을 단리시키기 위해서는, 아미노 보호기의 분절 처리로 얻어진 반응액을 수성 염기, 예를들면 수산화나트륨 수용액의 첨가에 의해 일반적으로 4 내지 7의 pH값을 갖게 하고, 이어서 감압하에 용매를 증발시킨 후 생성된 고형물을 보호기 제거 단계시에 첨가된 바 있는 강산과의 부가염 형태로 분리시킨다. 이러한 생성물은 종래의 기술법, 예를들면 컬럼 크로마토그래피법, 비용매의 첨가에 의한 용액으로부터의 침전법, 예비 HPLC법 등으로 추가 정제하여도 좋다. 이 산부가염은 이를 수성 용매 중에 현탁 또는 용해시키고 이어서 적당한 pH값을 갖게하여 유리 염기 형성을 축적함으로써 일반식(Ⅰ)의 대응하는 유리 염기로 전환시킬 수 있다. 이어서, 생성물은 예를들면 유기 용매를 사용한 추출에 의해 회수하거나 또는 선택된 산을 첨가하여 상기한 바와 같이 처리하여 또 다른 산 부가염을 변형시킨다.

종종, 상기 공정 후에, 회수한 생성물을 종래의 탈염 공정으로 처리하는 것이 요구되는 경우도 있다.

예를들면, 조절된 다공성 폴리덱스트란 수지(예, Sephadex LH20)상의 컬럼 크로마토그래피 또는 실란화실리카겔 상의 컬럼 크로마토그래피를 편리하게 사용할 수 있다. 불필요한 염은 수용액을 사용해서 용출시킨 후, 아세토니트릴/물 5 : 95 내지 약 100％ 아세토니트릴과 같은 물과 극성 또는 비극성 유기 용매의 혼합물의 선형 구배 또는 계단형 구배에 의하여 목적 생성물을 용출시키고 용매의 증발 처리 또는 동결건조 처리를 행하여 목적 생성물을 회수한다.

유리 염기 형태로 있는 일반식(Ⅰ)의 화합물은, 다음과 같이 처리하여 대응하는 산 부가염으로 변형시킬 수 있다. 먼저, 이 유리 염기형을 수성 용매에 현탁 또는 용해시키고, 약간 몰 과량의 선택된 산을 첨가한다.

이어서 생성된 용액 또는 현탁액을 동결건조하여 목적한 산 부가염을 회수한다. 경우에 따라서는, 동결건조처리 대신에, 물과 혼화할 수 있는 비용매의 첨가에 의한 석출로 최종 염을 회수할 수 있다.

유리 염기형이 용해되는 유기 용매 중에서 상기 최종 염이 블용성인 경우에는, 여기에 화학 양론적 양 또는 약간 몰과량의 선택된 산을 첨가한 후에 비염 형태의 유기용액을 여과하여 회수할 수 있다.

일반식(Ⅰ)의 화합물의 대표적인 산 부가염으로서는, 예를들면 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 트리클로로아세트산, 숙신산, 시트로산, 아스코르브산, 락트산, 말레산, 푸마르산, 팔미트산, 콜산, 팜산, 점액산, 캄포르산, 글루타르산, 글리콜산, 프탈산, 타라타르산, 라우르산, 스테아르산, 살리실산, 메탄술폰살, 벤젠술폰산, 소르브산, 피크르산, 벤조산, 신남산 등의 유기 및 무기산과의 표준 반응에 의해 형성된 염들을 들 수 있다.

본 발명의 바람직한 부가염은 제약학적 허용되는 산 부가염이다.

제약학상 허용되는 산 부가염은 생물학적, 제조학적 및 제제학적 관점에서 제약 관례에 어긋나지 않는 산과의 염을 의미한다.

제약학상 허용되는 산 부가염에 적합한 산의 예로는 상기에 열거한 산들을 들 수 있다.

본 발명의 화합물은 유리 염기 형태 및 이들의 산 부가염 형태 모두가 그람-양성 박테리아 및 그람-음성 박테리아에 대한 항균제로서 유용하다.

그러나, 본 발명의 화합물은 그람-음성 박테리아에 대하여, 더 구체적으로는 녹농균에 대해 현저하게 양호한 활성을 나타낸다.

실제로, 존재시, 이들은 상기 속의 미생물체에 대한 테이코플라닌 항생물질 중에서도 가장 강력한 활성 유도체이다. 이 활성치는 데글루코테이코플라닌 코어(deglucoteicoplanin core)를 갖는 본 발명의 화합물에 대해서 깊은 연관성이 있지만, 테이코플라닌 핵을 갖는 본 발명의 항생물질에 대해서도 역시 주목할만 하다.

본 발명의 화합물의 항균 작용은 시험관내에서 마이크로 적정의 표준 2배 희석 시험법에 따라 디프코 토드-헤위트(Difco Todd-Hewitt) 브로쓰(화농연쇄상구균(Strep. pyogenes) 및 폐렴쌍구균(Strep. pneumoniae)) 또는 옥소이드 이소-센시 테스트(Oxoid Iso-Sensitest) 브로쓰(스타필로콕사이(Staphylococci), 대변연쇄상구균(Strep. faecalis) 및 그람-음성 미생물)를 사용하여 증명할 수 있다. 브로쓰 배양약을 최종 접종물이 1ml당 약 10⁴콜로니 형성단위(CFU/ml)가 되도록 충분히 희석시킨다. 37℃에서 18-24시간 배양후, 가시적인 성장을 나타내지 않는 최소 농도를 억제 농도(MIC)라 한다.

본 발명의 대표적인 화합물의 항균 시험 결과를 하기 표 Ⅰ에 요약한다.

표 Ⅰ

시험관내 항균 활성도(MIC, ㎍/ml)

표 Ⅰ(계속)

시험관내 항균 활성도(MIC, ㎍/ml)

표 Ⅰ(계속)

시험관내 항균 활성도(MIC, ㎍/ml)

표 1(계속)

시험관내 항균 활성도(MIC, ㎍/ml)

표 1(계속)

시험관내 항균 활성도(MIC, ㎍/ml)

녹농균의 일부 다중 내성 임상 단리물에 대한 화합물 22, 23, 25, 26, 27, 29의 활성도를 하기 표 Ⅱ에 나타낸다.

표Ⅱ

녹농균에 대한 본 발명의 화합물의 활성도는 테이코플라닌 및 동일 미생물에 대한 MIC(㎍/ml)가 32 이상인 유럽 특허 출원 공고 제218099호 및 국제 특허 출원 공개 제WO 88/06600호의 가장 근접한 화합물의 활성도보다 크다.

녹농균 박테리아에 대한 본 발명의 화합물의 활성도는 특히 이 균주에 기인한 감염의 중요성 면에서 깊은 연관이 있다.

녹농균에 의한 임상학적 감염으로는 국소 감염, 예를 들면 상처 부위(특히 화상 부위), 요로, 기도, 장, 눈 및 귀의 감염 및 내성이 약화된 환자의 일차 국소 감염 부위에서 나타나서 전이소들이 다른 각종 기관 중에서 발육하게 되는 전신 감염(혈액, 뼈 또는 패혈증)을 들 수 있다.

패혈증균이 확산되고 있는 환자에 대한 예후는 아직 빈약하며, 몇몇 저자는 매우 높은(종종 100％) 사망률을 보고하였다[John Wiley and Sons사가 1975년에 출판한 클라크(P.H Clarke) 및 리치몬드(M.H. Richmond)공저, Genetics and Biochemistry of Pseudomonas의 제2장 참조].

또한, 데글루코테이코플라닌 및 테이코플라닌 슈도아글리콘과는 상이한 본 발명의 테이코플라닌 화합물은 당 업계에 공지된 테이코플라닌 아미드 유도체와 비교하여 경구 투여시 현저하게 높은 생체내 활성을 나타내었다.

문헌[아리올리(V. Arioli) 등의 Journal of Antibiotics 29권, 511페이지, 1976년]에 기재된 방법에 따라 화농연쇄상구균 C 203을 감염시켜 패혈증에 걸린 생쥐의 생체내 시험에서 본 발명에 의한 대표적인 화합물의 ED50 값(mg/kg)을 하기 표Ⅲ에 기재한다.

표Ⅲ

생체내 활성도

생체내에서 화합물 50은 정맥내 투여(40mg/kg, 7/8 생존/처리) 및 피하 투여(ED50≤38mg/kg)하였을 때 대장균을 감염시켜 패혈증에 걸리게 한 생쥐의 치유에 특히 효과가 있는 것을 발견하였다.

상기한 항균 작용에 비추어 볼 때, 본 발명에 의한 화합물은 활성 성분들에 민감한 병원균에 의한 감염성질환의 예방 및 치료를 위한 인체 및 수의 약품용 항균제의 활성성분으로서 효과적으로 사용할 수 있다.

이와 같은 치료에 있어서, 본 발명의 화합물은 화합물 그 자체로 또는 임의 비율의 혼합물 형태로 사용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 경구, 국소 또는 비경구로 투여할 수 있으며, 이 중에서 비경구 투여가 적합하다. 투여 경로에 따라서, 이들 화합물은 여러가지 투약형으로 제형할 수 있다. 경구 투여용 제형은 캡슐제, 정제, 액제 또는 현탁액제일 수 있다. 당 업계에 공지된 바와 같이, 캡슐제 및 정제에는 활성성분 이외에, 희석제(예, 락토오스, 인산칼슘, 소르비톨 등), 윤활제(예, 스테아르산마그네슘, 활석, 폴리에틸렌글리콜), 결합제(예, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 소르비톨, 트리가칸트, 아카시아), 풍미제 및 허용되는 붕해제와 습윤제와 같은 통상의 부형제를 함유시킬 수 있다. 일반적으로, 수용성 또는 유성 용액제 또는 현탁액제 형태의 액상 제형에는 현탁제와 같은 통상의 첨가제를 함유시켜도 좋다. 또한, 국소 투여용으로는 본 발명의 화합물을 비강 및 인후의 피부, 점막 또는 기관지 조직을 통하여 흡수시키시에 적합한 형태로 제형할 수 있으며, 크림, 연고, 액상 분무제 또는 흡입제, 설하정 또는 인후 도포제의 형태로 투여하는 것이 편리하다.

본 발명의 화합물의 또 다른 이점은 넓은 범위의 pH에서 수용해도가 현저하게 높으며, 따라서 적합한 제약 조성물에 대해서 흔히 있는 문제들이 일어나지 않는다.

눈 또는 귀의 의약품으로 사용하기 위해, 제제는 연고제, 크림제, 로숀제, 도포제 또는 분말제와 같은 소수성 또는 친수성 기재로 제형된 액체 또는 반액체 제형으로 만들 수 있다.

직장내 투여의 경우에는 본 발명의 화합물을 예를 들면 코코아 버터, 왁스, 경랍 또는 폴리에틸렌글리콜 및 그의 유도체와 같은 통상의 부형제와 혼합시킨 좌약 형태로 투여한다.

주사용 조성물은 유성 또는 수용성 부형제 중의 현탁액제, 용액제 또는 에멀젼제와 같은 제형이어도 좋고, 여기에 현탁제, 안정화제 및(또는) 분산제와 같은 조제를 함유시켜도 좋다.

다른 방법으로서, 활성성분은 주사 직전에 멸균수와 같은 적합한 부형제를 첨가하여 재구성할 수 있는 분말제 형태일 수 있다.

활성성분의 투여량은 치료 개체의 크기 및 상태, 투약 경로 및 횟수 및 발병 원인제와 같은 여러가지 요인에 따라 결정한다.

본 발명의 화합물은 일반적으로 체중 1Kg 당 활성성분 약 0.5 내지 30mg을 투여하고, 적합하기로는 1일 투약량을 2 내지 4회로 나누어서 투여하는 것이 효과적이다. 특히 적합한 조성물은 단위제형 당 약 20 내지 약 300g을 함유하는 복용 단위 형태로 제조한 것들이다.

이하, 실시예에 의해서 본 발명의 실시태양을 설명하지만, 이들 실시예가 본 발명의 영역을 제한하는 것으로 간주해서는 안된다.

[실시예-실험부문]

표 제

이하의 실시예에서 출발물질은 테이코플라닌 A₂복합체(TGA), 그의 단일 성분 또는 2개 이상의 상기 성분들의 혼합물이다.

전형적인 복합체 혼합물은 본질적으로, A로 표시된 β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실의 지방족 아실 잔기가 각각 Z-(4)-데세노일(AC₁), 8-메틸노나노일(AC₂), 데카노일(AC₃), 8-메틸데카노일(AC₄) 및 9-메틸데카노일(AC₅)이고, B가 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실(AcGlu)이며, M이 α-D-만노피라노실(Man)이고, Y가 OH인 상기 일반식(Ⅰ)에 대응하는 다섯 성분들로 이루어진다.

이 혼합물은 아크로님 TGAC_1-5에 의해 동정된다. 상기 혼합물의 단일 성분들 중 하나가 출발물질로서 사용되는 경우, 이는 상기한 아미노글루파라노실 라디칼의 특정 지방족 아실 잔기에 따라 TGAC₁, TGAC₂, TGAC₃, TGAC₄또는 TGAC₅로 동정된다.

이 성분 이상의 혼합물이 사용되는 경우, 이는 복합체에 대한 것과 동일한 시스템에 따라서 나타난다. 예를 들면, 아크로님 TGAC_2-5는 성분 1이 더이상 존재하지 않는 성분 2 내지 5의 혼합물을 나타낸다. 이 혼합물은 촉매적 수소첨가 반응으로 성분 1의 이중결합을 포화시켜 성분 1을 성분 3으로 전화시킬 때 얻어진다. 아크로님 TGAC_2,3은 성분 2와 3의 혼합물을 나타내고, TGAC_4,5는 성분 4와 5의 혼합물을 나타낸다.

항생물질 L 17392(즉, 테이코플라닌의 아글리콘)은 아크로님 DTG로 표시하는 한편, 슈도아글리콘 L 17054 및 L 17046은 각각 TGA3-1 및 TGA3-2로 표시하고, 데-만노실 슈도아글리콘(유럽 특허 출원 공고 제 301247호)을 DM-TGAC로 표시한다.

얻어지는 최종 생성물은 하기 표에서 상기 일반식(Ⅰ)에 대해, β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실 라디칼의 특수한 지방족 아실 치환체의 기호 A에 대한 표시(A/AC)로 상기에서 설명한 바와 같이 통상의 용어 AC₁, AC₂, AC₃, AC₄, AC₅를 사용하여 동정한다. 둘 이상의 성분들로 된 혼합물이 얻어지는 경우, 이를 상기한 바와 동일한 공식 시스템을 통해 나타낸다.

[실시예 1-30]

혼합물 TGAC_2-5의 N⁶³-카르복시아미드를 목적하는 경우에는 다음과 같은 방법을 사용한다.

A : N¹⁵-벤질옥시카르보닐(CBZ) 테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분 1 내지 5의 제조

무수 아세톤 10ml중의 벤질 클로로포르메이트 4.5ml 용액을 실온에서 디메틸포름아미드(DMF) 300ml중의 테이코플라닌 A₂복합체(또는 그의 단일 성분 1 내지 5) 45g(약 24mmol) 및 트리에틸아민(TEA) 6ml(약 44mmol) 교반 용액에 적가하였다. 약 60분 후, 에틸에테르 600ml를 첨가, 여과하여 석출물(약 59％)을 수집하고, 이를 다시 아세톤/물 1 : 1(v/v)의 혼합물 2.5L에 용해시켰다. 얻어진 용액을 35℃에서 감압하에 약 1.6L까지 농축시키고, 이어서 에틸에테르 1.6L로 추출하여 분리 제거하였다.

빙초산을 사용해서 수용층을 pH 4.8로 조절한 후, n-부탄올 1.5L로 추출하였다. 유기층을 분리하여 물 1.5L(2×75ml)로 세정한 다음, 45℃에서 감압하에 약 200ml의 체적까지 농축시켰다. 여기에 에틸 아세테이트(약 800ml)를 첨가하여 고형분을 분리시키고 여과하여 취한 후, 에틸 에테르(약 500ml)로 세정하고, 실온에서 철야로 진공 건조시켜 45.7g(약 96％)의 순수한 표제 화합물을 수득하였다.

B : N¹⁵-CBZ-테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분 1 내지 5, 시아노메틸 에스테르의 제조

DMF 450ml중의 N¹⁵-CBZ-테이코플라닌 A₂복합체(또는 그의 단일 성분) 45g(약 22mmol)의 교반액에 TEA 5.25ml(약 37mmol) 및 클로로아세토니트릴 60ml를 실온에서 첨가하였다. 20시간 후, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 4.5L중에 붓고, 여과하여 석출물(약 50g)을 수집한 다음, 메탄올/물 1 : 1(v/v)의 혼합물 900ml에 재용해시켰다. 얻어진 용액을 빙초산을 사용해서 pH 5.5로 조절하고, 이어서 n-부탄올 1.1L를 첨가하였다. 35℃에서 감압하여 대부분의 메탄올을 증발시켜서 n-부탄올과 물의 혼합물(약 1.5L)을 얻은 다음, 이로부터 유기층을 분리하고 물 500ml로 세정한 후, 40℃에서 감압하에 약 200ml의 체적까지 농축시켰다. 에틸 아세테이트를 800ml 첨가하여 고형물을 분리, 수거하고 에틸 에테르 500ml로 세정한 후, 35℃에서 진공 건조시켜 44.2g(약 98％ 수율)의 순수 표제 화합물을 수득하였다.

C : N-CBZ-테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분 1 내지 5의 N⁶³-카르복시아미드의 제조

N¹⁵-CBZ-테이코플라닌 A₂복합체(또는 그의 단일 성분 1 내지 5) 16g(약 8mmol), 시아노메틸 에스테르 및 DMF 또는 DMSO 160ml중의 적당한 아민 반응물 과량(약 50 내지 100mmol)으로 된 용액을 실온에서 60-120분 동안 교반하고, 그후 무수 에탄올 160ml를 첨가하고 이어서 에틸 아세테이크 1.5L를 첨가하였다. 분리된 고형물을 여과에 의해 취하여, 에틸 에테르 500ml로 세정한 다음, 실온에서 공기중에 건조하여, 분체상 물질(수율은 일반적으로 85％를 상회함)을 얻었으며, 이는 다음 단계의 수소첨가 반응에 사용할 수 있는 충분한 순도(HPLC 적정 농도가 일반적으로 90％를 상회함)를 가졌다.

D : 테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분들 2 내지 5의 N⁶³-카르복시아미드의 제조

상기에서 얻은 생성물(5mmol)을 메탄올 : 0.04N 염산 7/3(v/v)의 혼합물 500ml에 용해시키고, 생성된 용액을 실온 및 상압에서 5％ Pd/C(5g)의 존재하에 수소 첨가 반응시켰다. 반응이 종결되자(HPLC) 즉시 셀라이트 판넬(BDH 545)을 통해 여과하여 촉매를 제거하였다. 1N NaOH를 사용해서 투명한 여액의 pH를 6.5로 조절하고, 여기에 n-부탄올 500ml를 첨가하였다. 얻어진 혼합물을 40℃에서 감압하에 농축시켜 체적이 약 150ml가 되게 하고 에틸 에테르 350ml를 첨가하여 석출된 침전물을 여과하여 취하였다. 반응을 테이코플라닌 A₂복합체의 성분 1에 대응하는 유도체를 함유하는 기질중에서 행하는 경우, 성분 1의 카르복시아미드가 성분 3의 카르복시아미드로 거의 완전히 전환되기 때문에 관련 최종 생성물은 성분 1 카르복시아미드를 함유하지 않는다.

E : 역상 컬럼 크로마토그래피에 의한 생성물의 정제

상기에서 얻은 조 생성물(10g)을 아세토니트릴 : 물 1 : 1(v/v)의 혼합물(300ml)에 용해시켰다. 이어서 탁한 용액이 형성될 때까지 물을 첨가하고(어느 경우에나 700ml 이하의 물이 첨가됨), 형성된 용액을 침전 초기에 얻은 바와 같은 용매 혼합물(즉, 상기 탁한 용액을 얻기 위해 첨가된 H₂O 양을 기초해서 산출한 비율로 혼합한 CH₃CN 및 H₂O)중에서 제조한 500g의 실란화 실리카-겔 컬럼(0.06-0.2mm ; Merck Co,사제품)의 상부에 부하하였다. 이 컬럼은 유속 400ml/시간에서 14시간 동안 빙초산을 사용하여 미리 pH 3.2로 조절한 물 중의 아세토니트릴 10％에서 80％까지의 선형 구배로 전개되었고, 이 동안에 수집한 25ml의 분획물을 HPLC로 모니터하였다. 목적한 순수 생성물을 함유하는 이들 분획물을 합하고 n-부탄올을 충분히 첨가한 후, 45℃에서 진공하에 농축시켜 탁한 무수 부탄올성 용액을 얻었다. 이 체적의 3배량의 에틸 에테르를 첨가하여 분리된 고형물을 수집하고, 에틸 에테르로 세정한 후, 실온에서 진공하에 철야 건조시켜 순수한 최종 화합물을 얻었다.

이와 같이 하여 얻은 본 발명의 화합물(표Ⅳ)은, 분자내에 존재하는 염기성 작용기만이 테이코플라닌 A₂복합체의 15 위치에 있는 유리 아미노기인 때나 또는 아미드 치환체로 도입된 부가 아미노기가 아세트산과의 산 부가염을 형성하기에 충분한 염기성이 아닌 경우에 유리 염기(FB)로서 얻어졌다. 다른 형태로는, 이들이 아세테이트로서 회수되었다.

산 부가염 형태가 필요할 때에는 다음과 같은 방법에 따라 대응하는 히드로클로라이드의 제조를 수행하였다.

유기 염기로서 또는 아세테이트로서 테이코플라닌 A₂복합체(또는 그의 단일 성분)의 아미드 1mmol을 DMF 10ml에 용해시켰다. 이어서, 10％몰 과량의 10N HCl(염화시키고자 하는 하나의 아미노 작용기에 대해서는 0.11ml, 2개의 아미노기에 대해서는 0.22ml 등)을 5℃에서 교반하면서 첨가하고, 그 후에 에틸 에테르 40ml를 첨가하였다. 이어서 침전된 석출물을 여과하여 수집하고, 에틸 에테르로 세정한 다음, 실온에서 밤새 진공 건조하였다(수율 95％).

테이코플라닌 A₂복합체의 성분 1(TGAC₁)(또는 TGAC_1-5혼합물)의 N⁶³-카르복시아미드가 필요한 경우에는 다음과 같은 방법을 사용한다 :

A : N¹⁵-t-부틸옥시카르보닐(t-BOC) 테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분들 1 내지 5의 제조

테이코플라닌 A₂복합체 또는 그의 단일 성분 1 내지 5 10g(약 5mmol), 트리에틸아민(TEA) 1.2ml(약 8.5mmol) 및 t-부틸-2,4,5-트리클로로페닐카르보네이트 2.4g(약 8mmol)을 DMF 100ml중에서 24시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서 이를 물 200ml에 부었다. 1N HCl를 사용해서 얻어진 탁한 용액의 pH를 3으로 조절하고 n-부탄올/에틸 아세테이트 35 : 65(v/v) 혼합물 600ml로 추출하였다. 유기층을 분리하여 물(2×100ml)로 세정한 후, 45℃에서 감압하에 약 100ml의 체적으로 농축시켰다. 에틸 아세테이트(약 400ml)의 첨가로 석출된 고형물을 여과하여 수집하고 에틸 에테르(약 200ml)로 세정한 다음, 실온에서 밤새 진공 건조하여 10.3g(수율 약 98％)의 순수한 표제 화합물을 수득하였다.

B' : N¹⁵-t-BOC-테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분 1 내지 5, 시아노메틸 에스테르의 제조

상기 방법 B와 거의 유사하게 처리하여 t-BOC-테이코플라닌 A₂복합체로부터 표제 화합물을 수득하였다(수율 약 98％).

C' : N¹⁵-t-BOC-테이코플라닌 A₂복합체 및 그의 단일 성분 1 내지 5의 N⁶³-카르복시아미드의 제조

바람직한 용매로서 DMF 대신에 디메틸술폭시드(DMSO)를 사용한 것 이외에는 상기 방법 C와 유사하게 처리하여, N¹⁵-BOC-테이코플라닌 A₂복합체, 시아노메틸 에스테르로부터 실질적으로 같은 수율(보통 85％) 및 순도(HPLC 적정농도가 보통 90％)로 표제 화합물을 얻었다.

D' : 테이코플라닌 A₂복합체 또는 그의 단일 성분의 N⁶³카르복시아미드 제조

생성물(N¹⁵-t-BOC-테이코플라닌 A₂복합체 또는 그의 단일 성분의 N⁶³-카르복시아미드) (4mmol)을 무수 트리플루오로아세트산(TFA) 40ml에 10℃에서 용해시켰다. 투명한 용액이 형성되자 곧(어느 경우에서나 TFA의 첨가후 5분 내에) 반응 혼합물을 10℃에서 냉각시키면서 여기에 메탄올 40ml를 첨가하여 희석시켰다. 에틸 에테르 420ml를 첨가하여 생성된 침전물을 여과하여 수집하고 에틸 에테르(5×200ml)로 세정하였다.

얻어진 조 생성물(5g)을 아세토니트릴/물 1 : 1(v/v) 혼합물(150ml)에 용해시키고 1N NaOH를 사용해서 생성된 용액의 pH를 6으로 조절한 다음, 물로 희석시키고 상기한 바와 동일한 크로마토그래피 방법(E)으로 생성물을 정제하였다.

데글루코테이코플라닌(DTG)의 N⁶³-카르복시아미드를 목적하는 경우에는 다음과 같은 방법을 사용한다.

A'' : N¹⁵-t-부틸옥시카르보닐(t-BOC)데글루코테이코플라닌의 제조

DMF 600ml중의 항생물질 L 17392(데글루코테이코플라닌) 45g(약 37mmol) 교반 용액에 t-부틸-2, 4, 5-트리클로로페닐카르보네이트 19.3g(약 65mmol)과 TEA 10.2ml(약 74mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하여 이를 물 1.5L에 부었다. 생성된 용액을 1N 염산을 사용해서 pH 3으로 조절하고, 이어서 에틸 아세테이트 : n-부탄올 2 : 1(v/v) 혼합물 3L로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 물 1L로 세정하고, 이어서 이를 40℃에서 진공하에 체적이 약 300ml로 될 때까지 농축시켰다. 에틸 에테르 700ml를 첨가했을 때 고형물의 분리가 일어났고 이를 여과하여 취한 후, 에틸 에테르 200ml로 세정한 다음, 실온에서 밤새 진공 건조하여 순수한 표제 화합물 44g(수율 92％)을 얻었다.

B'' : N¹⁵-t-BOC-데글루코테이코플라닌 시아노메틸 에스테르의 제조

DMF 440ml중의 N¹⁵-t-BOC-데글루코테이코플라닌 44g(약 33mmol), TEA 4.7ml(약 34mmol) 및 클로로아세토니트릴 44ml 용액을 실온에서 20시간 교반한 후, 에틸 아세테이트 1L를 첨가하여 생성된 석출물을 여과 수집하였다. 이 석출물(약 46g)을 메탄올 : 물 1 : 2(v/v) 혼합물 1.5L에 재용해시켜서 얻어진 용액을 빙초산으로 pH 5.6으로 조절하였다.

2L의 n-부탄올 첨가후, 30℃에서 진공하에 메탄올을 대부분 증발시키고, 유기층을 분리, 물 1L로 세정한 다음, 35℃에서 진공하에 체적이 약 300ml로 될 때까지 농축시켰다. 에틸 에테르를 700ml 첨가시 고형물이 분리되었으며, 이를 여과하여 수집하고 에틸 에테르 500ml로 세정한 다음 실온에서 밤새 진공 건조하여 순수한 표제 화합물 42.5g(96％)을 얻었다.

C'' : N¹⁵-t-BOC-데글루코테이코플라닌의 N⁶³-카르복시아미드 제조

N¹⁵-t-BOC-데글루코테이코플라닌 14g(약 10mmol)과 DMF 200ml중의 적당한 반응성 아민 과량(100 내지 150mmol)의 교반 용액에 빙초산 8.9ml(약 150mmol)를 실온에서 첨가하였다. (빙초산의 몰량은 반응성 아민의 구조에 따라 좌우된다. 실제로, 아민 1mmol에 대해서, 아민이 부가의 염기성 작용기들을 함유하지 않은 경우에 0.5mmol의 빙초산이 필요하며, 아민이 부가의 염기성 작용기 1개를 함유하는 경우에는 1mmol의 빙초산이, 아민이 2개의 부가의 염기성 작용기를 함유하는 경우에는 2mmol의 빙초산이 필요하다.) 아세트산이 축합반응에 필요하지 않을 지라도, 염기성 조건하에서 일어날지도 모르는 C₃위치에서 분자의 에피머화를 피하는 데에는 종종 적합하다.

더우기, 산의 존재는 대부분의 경우에서 축합 반응의 속도에 영향을 미치지 않는다.

3-6시간 후(몇몇 경우를 제외하고는 반응이 3시간 내에 일반적으로 종결됨), 에틸 아세테이트 600ml를 첨가하고, 생성된 석출물을 여과하여 수집한 후, 에틸 에테르 200ml로 세정하고, 실온에서 밤새 진공 건조하여 다음이 보호기 제거 단계에 사용할 수 있는 충분한 순도의 생성물을 얻었다(수율 75％).

D'' : 데글루코테이코플라닌의 N⁶³-카르복시아미드 제조

일반적으로 HPLC 적정 농도가 85％이고 주요 불순물로서 반응성 아민의 아세테이트를 일부 함유하는 상기 단계에서 얻은 생성물 1mmol을 무수 트리플루오로아세트산(TFA) 25-30ml중에서 20분 동안 실온으로 교반하고, 25℃에서 감압하에 용매를 증발시켰다. 오일상 잔류물을 물 : 아세토니트릴 6 : 4(v/v) 혼합물 50ml에 재용해시키고, 생성된 용액을 침전히 일어날 때까지 물로 희석하였다. 이와 같이 하여 얻은 현탁액을 필요시 1N 염산으로 pH 3.0으로 조절하여 물 중의 실란화 실리카-겔(0.06 내지 0.2mm ; Merck Co.사 제품) 100g의 컬럼 상부에 부하시켰다.

E'' : 역상 컬럼 크로마토그래피에 의한 생성물의 정제

상기한 바와 같이 생성물을 부하시킨 칼럼을 물 1L로 전개시키고, 이어서 10％의 물중 아세토니트릴로부터 50％의 0.01N 염산중 아세토니트릴로 선형 구배로 200ml/h의 유속에서 15시간 동안 용출을 행하여 10ml의 분획물을 수집하였다. 순수 생성물을 함유하는 이들 분획물을 합하고, 충분한 n-부탄올을 첨가하여 얻은 혼합물을 농축시킨 후에 탁한 무수 부탄올성 용액(30-100ml)을 얻었다. 이 용액의 3배량의 에틸 에테르를 첨가하여 고형물을 분리하고 여과하여 취한 후, 에틸 에테르로 세정하고 실온에서 진공하에 2-3일 동안 건조하여 데글루코테이코플라닌의 순수한 최종 아미드를 히드로클로라이드로서 얻었다.

대응하는 트리플루오로아세테이트는, 10％로부터 점차 60％의 물중 아세토니트릴 선형 구배로 용출시키고 트리플루오로아세트산을 첨가하여 용출제의 pH를 2.5로 유지시킨 것 이외에는 상기 크로마토그래피 방법에 의해 수득하였다.

적당한 시약 TGAC, 그의 단일 성분, DTG 또는 DMTGAC 및 일반식(Ⅱ)

-NHR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W (Ⅱ)

의 아민을 상기한 조건하에서 사용함으로써 표 Ⅳ에 표시한 화합물들을 얻었다.

표 Ⅳ

TGA, DMTGAC 및 DTG 카르복시아미드 유도체

* Y=-NH(CH₂)₄NH(CH₂)₃-NH₂인 화합물과의 혼합물

표 Ⅳ(계속)

* Y=-NHCH(CH₃)CH₂[OCH(CH₃)CH₂]₅OCH₂(CH₃)NH₂인 화합물과 혼합물

표 Ⅳ(계속)

* Y=-NH(CH₂)₄NH(CH2)₃=NH₂인 화합물과 혼합물

표 Ⅳ(계속)

[실시예 31]

일반식(Ⅰ)

로 표시되는 화합물 31의 제조.

DMF 20ml중의 상기한 바와 같이 제조한 N¹⁵-CBZ-데이코플라닌 A₂복합체, 시아노메틸 에스테르 2g(약 1mmol)과 1,3-디메틸-1,3-프로판디아민 2ml의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 용액에 무수 에탄올 20ml와 이어서 에틸 아세테이트 200ml를 첨가하였다. 분리된 고형물을 여과하여 수집하고, 에틸 에테르 50ml로 세정한 다음, 실온에서 밤새 진공 건조하여 순수한 N¹⁵-CBZ-테이코플라닌 A₂복합체, 1-메틸-3-(메틸아미노)프로필-아미드 1.95g을 수득하였다.

무수 메탄올 100ml중의 상기 화합물 1.37g(0.65mmol) 교반용액에 무수 중탄산나트륨 1g(9.4mmol)과 2-브로모에틸 트리메틸 암모늄 브로마이드 2.5g(10.1mmol)을 실온에서 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 45℃에서 3일간 교반하고, 이를 10℃로 냉각하여 물 100ml에 부었다. 30℃에서 감압하에 메탄올을 증발시키고, n-BuOH/EtOAc 1/2(v/v) 혼합물 300ml를 사용하여 수용층을 추출하였다. 유기층을 분리하고 40℃에서 감압하에 소 용적(약 200ml)이 될 때까지 농축시켰다. 에틸 에테르 180ml를 첨가하여 석출된 고형물(표제 화합물의 N¹⁵-CBZ 전구체 1.12g)을 수집하고, 실시예 1에 기재한 바와 동일한 조건하에서 수소 첨가 반응하여 0.45g의 화합물 31을 수득하였다.

[실시예 32]

일반식(Ⅰ)

로 표시되는 화합물 32의 제조

2g의 N¹⁵-CBZ-데글루코테이코플라닌, 시아노메틸 에스테르 용액을 사용한 것 이외에는 실시예 31에 기재한 방법과 유사하게 처리하여 화합물 32를 얻었다.

[실시예 33]

일반식(Ⅰ)

(R=H, A/AC=AC_2-5, B=AcGlu, M=Man, Y=-NH(CH₂)₃(NH(CH₂)₄NHCOOCH(CH₃)OCOCH₃와 Y=NH(CH₂)₄NH(CH₂)₃NHCOOCH(CH₃)OCOCH₃)의 혼합물) 로 표시되는 화합물 33의 제조

무수 DMF 50ml중의 화합물 5의 N¹⁵-CBZ 유도체(상기 실시예 1에 기재한 바와 같이 제조) 2g(0.9mmol) 교반 용액에 무수 탄산나트륨 1.2g(11mmol), α-아세톡시-에틸 p-니트로페닐카르보네이트 2.7g(10mmol)을 실온에서 첨가하였다. 3시간 후, 이 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 500ml에 붓고, 석출된 고형물을 수집하여 에틸 아세테이트 100ml로 세정하고, 상기 실시예 1에 기재한 바와 같이 수소 첨가 반응시켜 0.57g의 표제 화합물 33을 수득하였다.

[실시예 34]

일반식(Ⅰ)

(R=H, A/AC=H, B=H, M=H, Y=NH(CH₂)₃(NH(CH₂)₄NHCOOCH(CH₃) OCOCH₃와 Y=NH(CH₂)4NH(CH₂)₃NHCOOCH(CH₃)OCOCH₃)의 혼합물)

로 표시되는 화합물 34의 제조

화합물 23의 N¹⁵-CBZ 유도체 2g을 사용한 것 이외에는 실시예 32에 기재한 방법과 유사하게 처리하여 0.6g의 화합물 34를 제조하였다.

[실시예 35-36]

일반식(Ⅰ)

로 표시되는 화합물 35와 일반식(Ⅰ)

로 표시되는 화합물 36의 제조

메탄올 560ml중의 N¹⁵-CBZ-테이코플라닌 A₂5.3g(약 2.5mmol)의 교반 현탁액에 1-메틸-3-(메틸아니모)프로필-아미드(실시예 31에 기재한 바와 같이 제조)와 식 C1CH₂CH₂(OCH₂CH₂)₂OH 및 C1CH₂CH₂OCH₂CH₂OH 의 적당한 클로로에톡시-히드록시에틸 시약 각각 17ml 및 탄산칼륨 1.86g(13.5mmol)을 실온에서 첨가하였다. 45℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 15℃까지 냉각하고, 1N HC1을 사용해서 pH 6으로 조절하였다. 35℃에서 감압하에 메탄올을 증발시키고, 고체 잔류물을 실시예 1에 기재한 바와 같이 수소 첨가 반응시켜 1.9g의 화합물 35 또는 0.97g의 화합물 36을 얻었다.

[실시예 37-41]

TGA 3-1 아미드 유도체의 제조

90％ 트리플루오로아세트산 수용액 100ml중의 상기한 바와 같이 제조하고 하기 표 Ⅴ에 나타낸 테이코플라닌 A₂복합체 또는 그의 단일 성분의 적당한 아미드 유도체 4g(약 2mmol)의 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 용매를 증발시키고, 오일상 잔류물을 H₂O 200ml에 재용해시켰다. pH 8로 조절한 후, 생성된 용액을 H₂O중 실란화 실리카 겔 400g의 칼럼상에 부하하였다. 실시예 1에 기재한 바와 같이 크로마토그래피를 행하여 표제 화합물들을 수득하였다.

표 Ⅴ

TGA3-1 카르복시아미드 유도체

(*) Y=-NH(CH₂)₄-NH(CH₂)₃-NH₂인 화합물과의 혼합물

[실시예 42-45]

TGA 3-2 아미드 유도체의 제조

1,2-디메톡시에탄(DME) 80ml중의, 상기한 바와 같이 제조하고 하기 표 Ⅵ에 보고한 테이코플라닌 화합물의 적당한 아미드 유도체 4g(약 2mmol) 현탁액을 무수 HC1로 버블링시키면서 실온에서 2일간 교반하였다. 그후 불용 물질은 여과하여 수집하였다. 상기(실시예 1)에 기재한 바와 같이 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 화합물들을 수득하였다.

표 Ⅴ

TGA3-2 카르복시아미드 유도체

[실시예 46-55]

A''' -일반적 방법(디페닐 포스포르아지드 사용)

디메틸술폭시드 60ml중, 테이코플라닌 A₂, 또는 그의 단일 성분(또는 임의 비율로 혼합한 성분들의 혼합물), 또는 N¹⁵-t-부틸옥시카르보닐(t-BOC) 데글루코테이코플라닌 6mmol 교반액에 적당한 중간체 아민(이하에 기재한 바와 같이 제조) 30mmol과 디페닐포스포르아지드(DPPA) 10mmol을 0-5℃에서 첨가하였다. 실온에서 밤새 교반후, 에틸 아세테이트 240ml를 첨가하여 석출된 고형물을 수집하고, 상기한 바와 같이(벙법 E) 역상 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 순수한 TGAC 아미드 또는 N¹⁵-t-BOC-데글루코테이코플라닌 아미드(BOC-DTG 아미드)를 얻었다.

BOC-DTG 아미드의 경우나 또는 아미드성 부위상에 BOC 보호기를 함유하는 아미드의 경우, 이들 화합물 1mmol을 실온에서 무수 트리플루오로 아세트산 30ml중에 용해시키고 상기한 바와 동일한 방법(예를 들면 DTG의 N⁶³-카르복시아미드의 제조를 위한 방법 D )을 행하여 BOC 보호기를 제거하였다.

B'' -화합물 46-52의 중간체 아민의 제조

1. 디아민, O,O' -비스(2-아미노프로필)폴리에틸렌글리콜 1900(Jeffa- mine^TMED 2001)을 Fluka Chemie AG사에서 구입하였다(화합물 46의 중간체 아민).

2. 화합물 47-52의 중간 반응성 아민을 위하여 통상의 중간체 디-(3-BOC-아미노프로필)아민, 즉, BOC-NH-(CH₂)₃-NH-(CH₂)₃-NH-BOC를 다음과 같이 미리 제조하였다.

테트라히드로푸란(THF) 300ml중의 2-(t-부톡시카르보닐)옥시아미노-2-페닐아세토니트릴(BOC-ON, Aldrich-Chemie사 제품) 142g 용액을 10℃에서 THF 400ml중의 비스-(3-아미노프로필)아민(Fluke Chemie AG사 제품) 42ml의 교반액에 적가하였다. 실온에서 16시간 후, 용매를 증발시키고, 오일상 잔류물을 에틸 아세테이트 1L에 용해시켰다. 얻어진 용액을 1N NaOH(200ml)로 이어서 물(2×300ml)로 세정한 후, 0.01N HCl(2×500ml)로 추출하였다. 수용상을 1N NaOH로 pH 8로 조절하고, n-부탄올 500ml로 추출하였다. 유기층을 분리하여 물 250ml로 세정하고, 이어서 최종 체적이 약 70ml가 될 때까지 농축시켰다. 6℃에서 철야 방치시 결정체들이 형성되었으며, 이를 여과하여 수집한 바, 유리 염기로서 순수한 표제 화합물 75g을 수득하였다.

¹H NMR : 2.93, 2,44, 1.47(CH₂) ; 1.38(N-BOC) ; 6.68(NH)

3. N' ,N'' -디-t-BOC-트리스-(3-아미노프로필)아민(유도체 47-50) :

무수 에탄올 500ml중의 상기 디-t-BOC 중간성 트리아민 45g 교반액에 3-브로모-프로피오니트릴 21ml 및 탄산칼륨 25g을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고, 이어서 여과한 다음 약 100ml의 최종 체적까지 농축시킨 후, 물 800ml로 희석시켰다. 얻어진 용액(pH 8)을 에틸 아세테이트(2×800ml)로 추출하였다. 유기층을 분리하여 물(2×200ml)로 세정한 후, 약 100ml의 최종 체적으로 농축시켰다. 6℃에서 철야 방치하여 분리된 결정질 고체를 여과에 의해 수집해서 디-(3-t-BOC-아미노프로필)아미노-1-프로피오니트릴 34g을 수득하였다.

¹H NMR : 2.94, 2.63, 2.54, 2.37, 1.47(CH2) ; 1.36(N-BOC) ; 6.73(NH)

상기 생성물을 NaOH 8.5g을 함유하는 에탄올성 용액 200ml에 용해시켰다. 얻어진 용액에 활성 촉매로서 라니 니켈(Aldrich-Chemie사 제품) 4g을 첨가하고, 이 현탁액을 2.5atm에서 10시간 동안 수소 첨가 반응시켰다. 오일상 잔류물을 에틸 아세테이트 500ml에 용해시키고, 생성된 용액을 물(2×100ml)로 세정한 후, 유기 용매를 증발시켜서 약 34g의 표제 화합물을 수득하였다.

¹H NMR : 2.93, 2.54, 2.32, 1.49(CH2) ; 1.41(N-BOC) ; 6.77(NH)

4. 3-(3-아미노프로필)-3-(3,3-디메틸아미노프로필)-아미노-1-프로필아민(유도테 51) :

무수 에탄올 400ml중의 3,3-디메틸-아미노-1-프로필 클로라이드, 히드로클로라이드 19g 교반액에 디-t-BOC 중간성 트리아민 20g과 탄산칼륨 28g을 실온에서 첨가하고 이어서 요오드화칼륨 3g을 첨가하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 환류시키고, 이어서 여과한 후 용매를 증발시켰다. 잔류물을 물 400ml에 재용해시키고, 얻어진 용액을 에틸 아세테이트 600ml로 추출하였다. 유기층을 분리하여, 물(2×200ml)로 세정한 후, 용매를 증발시켜서 다음 단계에 사용할 수 있는 충분한 순도를 갖는 표제 화합물의 디-t-BOC 유도체를 오일상 잔류물(8.7g)로 수득하였다.

¹H NMR : 2.91, 2.42, 2.31, 2.61, 1.47(CH₂) ; 1.36(N-BOC) ; 2.09(NH₃).

염화메틸렌 30ml중의 상기 생성물로 된 용액을 무수 트리플루오로아세트산 30ml로 실온에서 2시간 동안 처리한 후, 용매를 증발시켰다. 오일상 잔류물을 무수 에탄올 40ml에 용해시키고, 무수 HCl로 실온에서 버블링시켜 생성물을 완전히 석출하였다. 여과후, 테트라-히드로클로라이드로서 표제 화합물 3.8g을 얻었다.

¹H NMR : 3.2-2.91(6-CH₂) ; 2.13-1.90(3-CH₂) ; 2.73(NCH₃)

BOC-DTG를 축합하는 데에 다음과 같이 제조한 유리 염기를 사용하였다. 테트라-히드로클로라이드(10mmol)를 1N NaOH(40ml)에 용해시키고, 얻어진 용액을 증발 건조하였다. 이어서 잔류물을 염화메틸렌(100ml)에 현탁시키고, 불용 물질은 여과 제거하였다. 용매를 증발시키고, 오일상 잔류물을 추가의 정제 처리없이 그대로 사용하였다.

5. 3-(3-아미노프로필)-3-(2,2-디에틸아미노에틸)-아미노-1-프로필아민(유도체 52) :

디-t-BOC 중간체 트리아민(20g)과의 반응에 2,2-디에틸아미노-1-에틸클로라이드, 히드로클로라이드(21g)를 사용한 것 이외에는 상기 방법과 동일하게 처리하여 표제 화합물의 디-t-BOC 유도체(11g)를 먼저 얻었다. 이어서, 염화메틸렌 용액 중의 트리플루오로아세트산으로 유사하게 처리하여 보호기를 제거하였다. 유리 염기(오일로서)를 상기한 바와 같이 최종적으로 얻었으며, 표제 화합물 8.2g을 수득하였다.

¹H NMR : 2.6-2.3(8-CH₂) ; 1.42(2-CH₂) ; 0.92(2-CH₃)

이들 반응 과정 및 최종 폴리아민의 동질성을 이동상으로서 1％ 수산화암모늄을 함유하는 염화메틸렌/메탄올 9 : 1(v/v) 혼합물을 사용하여 실리카겔 60 F254 예비 피복한 판(Merck Co.사 제품)상의 TCL에 의해 검사하였다. 점적들을 요오드로 전개하였다.

6. 4-(3,3-디메틸아미노프로필)피페라진(유도체 53) :

무수 에탄올 300ml중의 3,3-디메틸아미노-1-프로필 클로라이드 15.8g의 교반액에 1-벤질-피페라진 9ml와 탄산칼륨 14g을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류하에서 6시간 동안 교반한 후, 실온에서 냉각시키고 여과하였다. 용매를 증발시키고 오일상 잔류물을 물 300ml에 용해시켰다. 얻어진 용액을 염화메틸렌(2×200ml)으로 추출하였다. 유기층을 분리하여 물 200ml로 세정하고 이어서 용매를 증발시켰다. 오일상 잔류물(9g)을 95％ 에탄올 300ml에 용해시키고, 10％ Pd/C 3g상에서 수소 첨가 반응(25℃, 1atm)시켰다. H2 약 1L를 6시간 내에 흡수시켰다. 촉매를 여과 제거하고, 무수 HCl로 버블링시켜 투명한 여액을 만들었다. 분리된 고형물을 수집하고, 무수 에탄올로 세정한 후, 실온에서 밤새 진공 건조하여 트리-히드로클로라이드로서 순수한 표제 화합물 7g을 얻었다.

¹H NMR : 2.79, 2.53, 2.30(CH₂-피페라진), 2.79, 2.23, 2.15(CH₂-디메틸아미노프로필) ; 2.10(NCH₃).

유리 염기를 다음과 같이 하여 얻었다 : 상기 트리-히드로클로라이드(6g)을 2N NaOH(30ml)에 용해시키고 염화메틸렌(170ml)으로 추출한 후 유기 용매를 증발시켰다. 얻어진 오일상 잔류물을 추가 정제없이 화합물 53의 제조에 사용하였다.

7. N,N' -비스-(3-아미노프로필)노난-1,5-디아민 및 N,N' -비스(3-아미노프로필)데칸-1,5-디아민

이들 유도체는 공지된 화합물이며, 문헌[이스라엘(Israel, M. J.), 로젠필드(Rosenfield, S.S.) 및 모디스트(Modest, E.J.) 공저, J. Med. Chem, 1964년판, 7권, 710페이지]에 기재된 방법에 따라서 적당한 알파-, 오메가-알킬렌디아민을 모노- 및 디-시아노에틸화시키고 이어서 니트릴을 통상의 온순한 조건하에서 촉매 환원시켜 제조하였다.

방법 A''' 에 따라 제조한 화합물에 대해서 표 Ⅵ에 나타낸다.

표 Ⅵ

TGA 및 DTG 카르복시아미드 유도체

HPLC분석은 20마이크로미터 루우프 인젝터 Rheodyne mod. 7125 및 254nm에서의 UV 검출기가 설치된 Varian mod 5000 LC 펌프로 수행하였다.

컬럼 : Lichrosorb RP-8(20-30마이크로미터)로 예비 충전된 Hibar Lichro Chrt 15-4(Merck사 제품) 예비 컬럼(1.9cm)에 이어서 Lichrosorb RP-8(10마이크로미터)로 예비충전된 Hibar RT 250-4(Merck사 제품) 컬럼.

용출제 : A, 0.2％ HCOONH₄수용액 : B, CH₃CN.

유속 : 2ml/분.

주입량 : 20마이크로미터.

용출 : 30분 동안 A중 B 20％에서 60％의 선형 구배.

몇몇 대표적인 화합물의 체류 시간은 표 Ⅶ에 보고한다.

산-염기 적정 : 생성물을 MCS(메틸셀로솔브) : H₂O 4 : 1(v/v)에 용해하고, 동일한 용매 혼합물 중의 0.01M HCl 과량을 첨가하여 얻어진 용액을 0.01N NaOH로 적정하였다. 일부 대표적인 당량을 하기 표 Ⅷ에 보고한다.

¹H-NHR 스펙트라는 500MHz, 온도 20℃ 내지 30℃에서 내부 기준(델타=0.00ppm)으로서 테트라메틸실란(TMS)을 갖는 DMSO-D₆중의 Bruker AM 500 분광계상에 기록하였다. 표 Ⅸ는 일부 대표적인 화합물의 가장 중요한 화학적 이동(δppm)을 나타낸다.

표 Ⅶ

본발명의 일부 대표적인 화합물에 대해 상기한 바와 같이 측정한 체류 시간(ta) :

표 Ⅷ

식(Ⅰ)의 일부 대표적인 화합물의 수율 및 당량(EW) :

(괄호안은 각각의 분자에 대해 적정한 당량수를 나타냄)

표 Ⅸ

내부 기준(δ=0.00ppm)으로서 테트라메틸실란을 갖는 DMSO-d₆에 기록된

일부 대표적인 화합물의 중요한¹H-NMR 할당 :

Claims (12)

1. 하기 일반식(Ⅰ)의 테이코플라닌 아미드 유도체 및 그의 제약학상 허용되는 산 부가염.

   (Ⅰ)

   상기 식에서, R은 수소, 또는 아민 작용기의 보호기이고, Y는 일반식 -NR₁-alk₁-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W의 화합물이며, 여기에서 R₁은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이고, alk₁, alk₂및 alk₃는 각각 독립적으로 탄소 원자수 2 내지 10의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이며, p는 1 내지 50의 정수이고, q는 0 내지 12의 정수이며, X는 -NR₂-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₂는 수소, (C₁-C₄)알킬, alk₄NR₃R₄기(여기서, alk₄는 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이고, R₃은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이며, R₄는 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p가 1인 경우에는 R₁및 R₂가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는 (C₁-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, T는 -NR₅-기 또는 산소 원자이며, 여기서 R₅는 수소, (C₁-C₅)알킬, alk₅NR₆R₇기(여기서, alk₅는 탄소 원자수 2 내지 4의 직쇄 또는 분지쇄 알킬렌이고, R₆은 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이며, R₇은 수소, (C₁-C₄)알킬 또는 5-6원 시클로알킬이다)이거나 또는 p와 q가 모두 1인 경우에는 R₂및 R₅가 함께 2개의 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₄)알킬렌 잔기를 형성할 수 있고, W는 히드록시, NR₈R₉, NR₁₁R₁₂R₁₃An이되, X가 NR₂이고, p가 1이고 q가 0인 경우에는 W는 히드록시 이외의 기이며, 여기서 R₈은 H 또는 (C₁-C₆)알킬이고, R₉는 H, (C₁-C₆)알킬, 5-6원 시클로알킬, COOR₁₀이며, R₁₀은 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬이고, R₁₁, R₁₂및 R₁₃은 각각 독립적으로 (C₁-C₄)알킬이며, An은 제약학적 허용되는 산으로부터 유도된 음이온이고, A는 H또는 -N[C₉-C₁₂)지방족 아실]-β-D-데옥시-2-아미노글루코피라노실이고, B는 수소 또는 N-아세틸-β-D-2-데옥시-2-아미노글루코피라노실이며, M은 수소 또는 α-D-만노피라노실이되, A와 M이 동시에 수소인 경우에만 B가 수소를 나타낸다.
2. 제1항에 있어서, 기호 A의 (C₉-C₁₂)지방족 아실기가(Z)-4-데세노일, 8-메틸노나노일, 데카노일, 8-메틸데카노일, 9-메틸데카노일, 6-메틸옥타노일, 노나노일, 10-메틸운데카노일 및 도데카노일 중의 하나인 것을 특징으로 하는 화합물.
3. 제1항에 있어서, p가 1이고, q가 1이며, X와 T가 각각 NR₂- 및 -NR₅-이고, 여기서 R₂및 R₅가 함께 질소 원자들을 연결하는 (C₂-C₃)알킬렌 잔기를 형성하는 것을 특징으로 하는 화합물.
4. 제1항에 있어서, 알킬렌 잔기가 -CH₂-CH₂-기인 것을 특징으로 하는 화합물.
5. 제1항에 있어서, X와 T가 산소 원자이고, W가 히드록시 또는 -NR₈R₉-이며, 여기서 R₈이 수소 또는 (C₁-C₄)알킬이고, R₉가 탄소 원자수 1 내지 3의 저급 알킬로 치환될 수 있는 수소, (C₁-C₄)알킬, 시클로펜틸 또는 시클로헥실인 것을 특징으로 하는 화합물.
6. 제1항에 있어서, W가 -NR₈R₉-이고, 여기서 R₈은 상기 정의한 바와 동일한 기이며, R₉가 COOR₁₀이고, R₁₀이 (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬기인 것을 특징으로 하는 화합물.
7. 제1항에 있어서, (C₁-C₆)아실옥시-(C₁-C₄)알킬 잔기의 (C₁-C₄)알킬기가 (C₁-C₃)직쇄 또는 분지쇄 알킬쇄로 치환될 수 있는 메틸렌기인 것을 특징으로 하는 화합물.
8. A, B, M이 제1항에서 정의한 바와 동일하고, Y가 OH인 일반식(Ⅰ)의 대응하는 카르복실 테이코플라닌 출발물질을 하기 일반식(Ⅱ)의 아민으로 아미드화시키는 것으로 이루어지는 제1항의 테이코플라닌 유도체의 제조 방법.

   -NHR₁-(alk₁)-[X-alk₂]_p-[T-alk₃]_q-W (Ⅱ)

   (여기서, R₁, alk₁, alk₂, alk₃, X, T, p, q 및 W는 제1항에서 정의한 바와 동일하다)
9. 제8항에 있어서, 아미드화 공정이 불활성 유기 용매 중에서, (C₁-C₄)알킬, 페닐 또는 헤테로시클릭 포스포르아지 데이트로부터 선택된 축합체의 존재하에 0℃ 내지 20℃ 사이의 온도에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
10. 제8항에 있어서, 아미드화 공정이 카르복실 출발물질을 바람직하게는 N¹⁵-아미노 작용기 상에서 보호된 그의 대응하는 활성화된 에스테르로 전환시키고, 이 활성화된 에스테르를 유기 극성 용매의 존재하에 5℃ 내지 60℃, 바람직하기로는 10℃ 내지 30℃ 사이의 온도에서 제8항의 일반식(Ⅱ)로 표시된 몰 과량의 아민과 반응시킴으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
11. 제10항에 있어서, 활성화된 에스테르가 시아노메틸 에스테르이고, 아민에 대한 그의 몰비가 1 : 5 내지 1 : 30인 것을 특징으로 하는 방법.
12. 활성 성분으로서 제1항의 화합물을 함유하는 박테리아 감염 치료용 제제.