CN104583418A - 用于氧化还原反应的试剂组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于改善用于氧化还原反应的试剂的稳定性的稳定性组合物，和包含该稳定性组合物的具有改善的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物。用于氧化还原反应的试剂组合物可用作用于电化学生物传感器的试剂。

Description

用于氧化还原反应的试剂组合物
技术领域
本发明涉及用于改善用于氧化还原反应的试剂的稳定性的稳定性组合物，并且涉及具有改善的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物。用于氧化还原反应的试剂组合物可以被应用于电化学生物传感器的试剂。
背景技术
血糖水平的周期性测量对于管理糖尿病是重要的，并且已经通过使用各种具有精确度和准确度的电化学生物传感器进行。用于测量血糖水平的电化学传感器通过以下方法制造：将包括酶、电子转移剂(electron transfer)和各种稳定剂以及分散剂的试剂施加到工作电极，并干燥施加有试剂的工作电极。影响电化学生物传感器的特性的最重要的因素是酶和电子转移剂的性能。
例如，最商业可得的电化学传感器使用的作为葡萄糖氧化还原酶的FAD-GOx(黄素腺嘌呤二核苷酸-葡糖氧化酶)具有热稳定性和对仅氧化葡萄糖的反应特异性，但是，通过使用采用FAD-GOx的传感器，趋于对血源如静脉血、动脉血和外周血显示大的测量值的波动，这是因为酶与溶解在血液中的氧发生反应。
同时，采用吡咯喹诺酮醌-葡萄糖脱氢酶(PQQ-GDH)的传感器几乎不受血氧的影响，但显示对单糖类如甘露糖、麦芽糖和乳糖或二糖类的特异性。尤其是，已经报道了由于具有肾腹膜透析的患者体中麦芽糖的影响，传感器可以引起团体医学实践(faculty medical practice)。采用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶(NAD-GDH)的传感器比PQQ-GDH显示更好的反应特异性，这是因为它不与二糖类如甘露糖、麦芽糖和乳糖发生反应，但具有需要NAD+或NADP+作为辅助因子以及低储存稳定性的缺点。
最近，使用黄素腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH)的电化学传感器已经被广泛使用，这是因为它不受血氧的量的影响，具有高的稳定性并且不像PQQ-GDH具有对麦芽糖的特异性。然而，根据产生酶的细菌或真菌的种类，FAD-GDH可使用有限种类的电子转移剂(介体)。
铁氰化钾[K3Fe(CN)6]通常被用作电子转移剂。其廉价并且由于高反应性可用于采用FAD-GOx、PQQ-GDH、或FAD-GDH的传感器。然而，使用铁氰化钾作为电子转移剂的传感器可显示由血液中的干扰物质如尿酸或龙胆酸引起的测量误差，并且由于温度和湿度引起的劣化而必须被特别小心地制造和储存。此外，因为被储存长时间之后的接地电流(ground current)的变化，难以精确地检测低浓度的葡萄糖。
与铁氰化物相比，三氯化六铵合钌[Ru(NH3)6Cl3]具有更好的氧化还原稳定性。利用三氯化六铵合钌作为电子转移剂的传感器可以容易地制造和储存，并且在长时间的储存之后接地电流的变化小。然而，三氯化六铵合钌不能与FAD-GDH一起使用，这导致难以制造商业可用的传感器。
最近，存在几种尝试以通过使用特殊类型的生物传感器来检测血糖，该生物传感器使用具有纳米孔表面、而不包括酶和电子转移剂的电极。例如，US8,083,926提出了通过使用具有环糊精纳米孔的电极检测低浓度的葡萄糖的方法。这种传感器不适于检测非常小量的葡萄糖，并且不适于传感器的大量生产。
因此，仍然需要用于氧化还原反应的试剂，或更具体地，用于电化学生物传感器的用于氧化还原反应的试剂，其不受氧的影响，由温度、湿度和长期储存引起的性能变化范围小，检测宽范围的葡萄糖浓度，并且适于大量生产。本发明提供了满足要求的生物传感器试剂组合物。
发明内容
本发明人确认了通过添加亲水性包合化合物(inclusion compound)至可用于电化学生物传感器的用于氧化还原反应的试剂，可以稳定氧化还原酶和电子转移剂，并且完成了本发明。
因此，本发明的实施方式提供了组合物，其包括含亲水性包合化合物，该组合物用于稳定用于氧化还原反应的试剂。
另一实施方式提供了具有改善的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物，其包括氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物。
进一步的实施方式提供了制备具有改善的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物的方法，其包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤。
进一步的实施方式提供了电化学生物传感器，其包括可用于电化学生物传感器的具有改善的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物。
附图说明
图1是根据本发明的实施方式的平面式生物传感器的分解斜视图。
图2是根据本发明的实施方式的面对面式(夹层式)生物传感器的分解斜视图。
图3是显示使用本发明的实施例2中的平面式生物传感器由各种葡萄糖浓度引起的电流变化的图。
图4是显示使用本发明的实施例1中的面对面式生物传感器由各种葡萄糖浓度引起的电流变化的图。
图5是显示当在50℃下温育实施例3和对比例2的面对面式生物传感器并根据本发明实施例3施加各种葡萄糖浓度时斜率变化的图。
图6是本发明的实施方式使用的硫堇的结构。
图7是本发明的实施方式使用的硫堇衍生物的结构。
具体实施方式
本发明人发现了，当硫堇或1-甲氧基PMS(1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐)和三氯化六铵合钌组合作为用于FAD-GDH酶的电子转移介体使用时，酶和电子转移介体之间的增加的反应速率显著改善了对葡萄糖的检测性能，并且提交了用于生物传感器的试剂组合物的专利申请(韩国专利申请号2012-0009668)。
如之前申请中所述，硫堇(图6)和具有相似结构的硫堇衍生物(图7)被一起用作第二电子转移介体以便增加含金属的络合物如三氯化六铵合钌(作为第一电子转移介体)和具有低反应性的氧化还原酶的反应速率，因此引起了不稳定的问题。本发明人持续研究以解决不稳定的问题，并发现当亲水性包合化合物(inclusion compound)如羟丙基--α-环糊精(HP-α-CD)、羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)或羟丙基-γ-环糊精(HP-γ-CD)被添加至试剂组合物作为试剂稳定剂传感器时，氧氧化还原反应效率和葡萄糖检测的性能改变几乎检测不到。亲水性包合化合物可与硫堇形成包合络合物，从而增加硫堇的溶解度，并且可限制与酶的直接反应，从而增加试剂组合物的稳定性。例如，HP-β-CD具有非常高的水溶性，使得其可以被溶解在水中至50％(w/v)每单位体积。HP-β-CD可与难溶性材料形成络合物，得到溶解在水中的稳定络合物。
本发明人发现了，在电化学生物传感器(包括FAD-GDH、转移介体的三氯化六氨合钌和硫堇)中含有亲水性包合化合物，可被用作用于氧化还原反应的试剂，其满足不与氧反应的性能，由温度和湿度引起的性能改变非常小，不影响由干扰物质引起的检测灵敏度，以及良好的长期稳定性，并且亲水性包合化合物可被用作用于电化学生物传感器的试剂和使用其的生物传感器，从而完成了本发明。
根据本发明，用于氧化还原反应的试剂或更具体地可用于电化学生物传感器的用于氧化还原反应的试剂不受氧的影响，由温度、湿度和长期储存引起的性能变化范围小，检测宽范围的葡萄糖浓度(例如，5至1000mg/dL)，并且适于大量生产。
在另一实施方式中，试剂组合物被应用于葡萄糖-检测生物传感器作为实例，但可以应用于各种生物传感器，通过改变使用的酶检测不同种类的物质如胆固醇、乳酸盐、肌酸、氢过氧化物、乙醇、氨基酸和谷氨酸盐。
根据本发明，用于生物传感器的试剂的稳定剂和包括该稳定剂的试剂组合物不受氧和干扰物质的影响，由温度、湿度和长期储存引起的性能变化范围小，因此可用作电化学生物传感器，检测血液中的各种代谢物，特别是葡萄糖。
如上所述，本发明的实施方式提供用于稳定用于氧化还原反应的试剂的组合物，该组合物包括亲水性包合化合物。
本发明的实施方式提供用于生物传感器的试剂，包括亲水性包合化合物，因为用于氧化还原反应的试剂可用于电化学生物传感器的试剂。
本发明的实施方式提供具有增加的稳定性的用于氧化还原反应的试剂组合物，包括氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物。
本发明的实施方式提供用于生物传感器的试剂，包括氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物，因为用于氧化还原反应的试剂可用于电化学生物传感器的试剂。
本发明的实施方式提供制备用于氧化还原反应的试剂的方法，包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤。
本发明的实施方式提供制备可用于电化学生物传感器的用于氧化还原反应的试剂的方法，包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤，因为用于氧化还原反应的试剂可用于电化学生物传感器的试剂。
本发明的实施方式提供电化学生物传感器，包括具有增加的稳定性的用于电化学生物传感器的试剂组合物。
下文中将更详细地解释本发明。
在本文中，“包合化合物”是指笼形化合物(clathrate compound)或围栏化合物(enclosure compound)，并且意指这样的络合物：其中一个化合物形成格栅腔体，另一个化合物在合适条件下配合在该格栅腔体中。
亲水性包合化合物可为选自由环糊精及其衍生物组成的组的至少一种化合物，更优选环糊精。环糊精可减少葡萄糖检测能力的改变，即使用于检测葡萄糖的传感器被长时间储存。
环糊精包括6元糖环分子的α-环糊精、7元糖环分子的β-环糊精或8元糖环分子的γ-环糊精，优选β-环糊精。
环糊精的衍生物可为含有选自由羟丙基、甲基等组成的组中的至少一种官能团的环糊精。例如，环糊精的代表性衍生物为羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、甲基-β-环糊精等。羟丙基-β-环糊精可作为实例呈现，但α-环糊精和γ-环糊精的衍生物显示与羟丙基-β-环糊精类似的性能(图4)。
当亲水性包合化合物被包含在用于氧化还原反应的试剂组合物、尤其是可用于电化学生物传感器的试剂组合物中时，包括环糊精和环糊精的衍生物、尤其是羟丙基-β-环糊精的亲水性包合化合物有高的水溶性，并且可通过与试剂中的难溶性材料形成水溶性和稳定的络合物而增加溶解度和稳定性。
在本发明中，提供亲水性包合化合物用于稳定用于氧化还原反应的试剂，例如可用于电化学生物传感器的试剂组合物。作为实施方式，提供用于氧化还原反应的试剂的稳定组合物，该组合物包括亲水性包合化合物作为活性组分，或用于生物传感器的试剂的稳定剂。
具有增加的稳定性的用于氧化还原反应的试剂或可用于电化学生物传感器的试剂组合物可为包括氧化还原酶和电子转移介体的用于氧化还原反应的试剂或可用于电化学生物传感器的试剂组合物。
在另一实施方式中，提供具有增加的稳定性的用于氧化还原反应的试剂或可用于电化学生物传感器的试剂组合物，包括氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物。更具体地，用于氧化还原反应的试剂组合物可应用于电化学生物传感器的试剂组合物。因此,可以提供具有增加的稳定性的可用于电化学生物传感器的试剂组合物。
在进一步的实施方式中，制备具有增加的稳定性的用于氧化还原反应的试剂的方法包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤。具体地，用于氧化还原反应的试剂组合物可应用于电化学生物传感器，因此，制备具有增加的稳定性的可用于电化学生物传感器的用于氧化还原反应的试剂的方法包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤。在方法中，混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物的步骤可如下进行：混合氧化还原酶和电子转移介体，并添加亲水性包合化合物至混合物。
一个实施方式提供电化学生物传感器，包括具有增加的稳定性的可用于电化学生物传感器的试剂组合物。
进一步的实施方式提供电化学生物传感器，包括具有增加的稳定性的可用于电化学生物传感器的试剂组合物。
如上所述，亲水性包合化合物可稳定试剂。
除非在文中另外指明，具有增加的稳定性的试剂(包括氧化还原酶、电子转移介体和用作为试剂的稳定剂的亲水性包合化合物)被描述为“用于氧化还原反应的试剂组合物或可用于电化学生物传感器的试剂组合物”，并且区别于包括氧化还原酶和电子转移介体的传统试剂进行描述，该传统试剂被称为“用于氧化还原反应的试剂或应用于电化学生物传感器的试剂”。同样，除非在文中另外指明，术语“试剂组合物”可包括用于氧化还原反应的试剂组合物或可用于电化学生物传感器的试剂组合物。
氧化还原酶是在活生物体内催化氧化还原反应的酶的通用术语，具体地，可以是通过与待检测的目标代谢物反应而被还原的酶。还原的酶与电子转移介体反应，从而产生信号如电流变化，其可被检测用于量化测量代谢物。可用于本发明的氧化还原酶的实例可为选自由各种脱氢酶、氧化酶、酯酶等组成的组中的至少一种。根据氧化还原反应的类型和待检测的目标材料，可以在这些酶中选择和使用合适的酶。
具体地，氧化还原酶可为选自由葡萄糖脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、葡糖氧化酶、胆固醇氧化酶、胆固醇酯酶、乳酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、醇氧化酶、醇脱氢酶、胆红素氧化酶等组成的组中的至少一种。
试剂组合物可进一步包括通过使用氧化还原酶从待检测的目标材料例如代谢物获得的储存氢的辅助因子。辅助因子的实例可为选自由黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、吡咯并喹啉醌(PQQ)等组成的组中的至少一种。
例如，为测量血糖浓度，氧化还原酶可为葡萄糖脱氢酶(GDH)，葡萄糖脱氢酶的辅助因子可为黄素腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH)，和/或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶。
在具体的实例中，氧化还原酶可为FAD-GDH(例如，EC 1.1.99.10等)、NAD-GDH(例如,EC 1.1.1.47等)、PQQ-GDH(例如,EC1.1.5.2等)、谷氨酸脱氢酶(例如,EC 1.4.1.2等)、葡糖氧化酶(例如,EC 1.1.3.4等)、胆固醇氧化酶(例如,EC 1.1.3.6等)、胆固醇酯酶(例如,EC 3.1.1.13等)、乳酸氧化酶(例如,EC 1.1.3.2等)、抗坏血酸氧化酶(例如,EC1.10.3.3等)、醇氧化酶(例如,EC 1.1.3.13等)、醇脱氢酶(例如,EC 1.1.1.1等)、胆红素氧化酶(例如,EC 1.3.3.5等)等。
在从酶和待检测的代谢物的反应而产生的还原的酶与电子转移介体进行反应之后，还原的电子转移介体可在施加有氧化还原电势的电极表面中产生电流。
电子转移介体可为第一电子转移介体和第二电子转移介体的混合物。
在第一电子转移介体和第二电子转移介体的混合物中，第一电子转移介体可为含金属的络合物，且第二电子转移介体可为选自由硫堇、1-甲氧基PMS(1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐)、3-氨基-7-(2,3,4,5,6-五羟基己酰氨基)-5-吩噻嗪、1-甲氧基-5-甲基酚嗪、天青C、天青A、亚甲蓝、甲苯胺蓝及其衍生物(图6和图7)组成的组中的至少一种。含金属的络合物可为选自由Ru、Fe、Os、Rh、Mo和Ir组成的组中的至少一种。
在实施方式中，含金属的络合物可为选自由以下组成的组中的至少一种：钌络合物，例如氯化六氨合钌[Ru(NH3)6Cl3]、三菲尼酮合钌{[Ru(菲尼酮)3]2+,菲尼酮＝1,10-菲咯啉-5,6-二酮}、钌tpybpy{[Ru(tpy)(bpy)H2O]2+,tpy＝2,2':6',2″-三联吡啶,bpy＝2,2'-联吡啶}等。
作为电子转移介体，在硫堇或其衍生物结合含金属的络合物的混合物，和/或1-甲氧基PMS或其衍生物结合含金属的络合物的混合物的情况下，硫堇或1-甲氧基PMS和含金属的络合物的摩尔比可为1:1至20(硫堇或1-甲氧基PMS的摩尔:含金属的络合物的摩尔)，或更具体地1:1至10。
根据优选的实例，钌络合物可与硫堇或其衍生物一起使用作为电子转移介体，从而显著增加葡萄糖检测能力，并除去干扰葡萄糖检测的各种材料的效果。
包括含金属的络合物(例如,钌络合物)和硫堇或硫堇衍生物作为电子转移介体的试剂组合物，基于100重量份的氧化还原酶，可包括20至700重量份的量的含金属的络合物，例如60至700重量份或30至340重量份的含金属的络合物。根据氧化还原酶的活性，可调节含金属的络合物的量。当在试剂组合物中使用具有高活性的氧化还原酶，少量的含金属的络合物可获得期望目标的试剂组合物。一般而言，当氧化还原酶的活性高时，可调节含金属的络合物的量在相对低的量。例如，在700U/mg的氧化还原酶的情况下，基于100重量份的氧化还原酶，含金属的络合物可以60至700重量份的量，例如以30至340重量份使用。当氧化还原酶的活性高于700U/mg时，可调节含金属的络合物的量至更低的值。当含金属的络合物的量低于该范围时，在高血糖水平时传感器的反应性变低，当该量高于该范围时，试剂的溶解速率非常低。
在包括含金属的络合物(例如,钌络合物)和硫堇或其衍生物作为电子转移介体的试剂组合物中，基于100重量份的氧化还原酶，可以2至25重量份的量，例如6至25重量份或6至20重量份包括硫堇或其衍生物。通过考虑氧化还原酶的活性，可以适当调节硫堇或其衍生物的量。当氧化还原酶的活性高时，少量的含金属的络合物可获得试剂组合物的效果。当氧化还原酶的活性更高时，硫堇或其衍生物的量可被调节至小的量。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，可以6至25重量份或6至20重量份的量包括硫堇或其衍生物。
当氧化还原酶的活性高于700U/mg时，硫堇或其衍生物的量可被调节至更小的量。如果硫堇或其衍生物的量低于该范围，则传感器对高血糖浓度不敏感。如果该量高于该范围，试剂不能快速溶解在血液中。
基于100重量份的氧化还原酶，试剂组合物可包括50至600重量份的量，例如80至500重量份、100至450重量份、200至600重量份、300至500重量份、或350至450重量份的作为试剂稳定剂的亲水性包合化合物。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，基于100重量份的氧化还原酶，可以200至600重量份的量，具体地300至500重量份，或更具体地350至450重量份使用亲水性包合化合物。如果氧化还原酶的活性高于700U/mg，包合化合物的量可以被调节至更低的量。当用作试剂稳定剂的亲水性包合化合物低于该范围时，硫堇或其硫堇衍生物不能完全溶解。如果亲水性包合化合物的量高于该范围，传感器的敏感度可变低。因此，用作试剂稳定剂的亲水性包合化合物优选为上述范围。
试剂组合物可进一步包括选自由表面活性剂、水溶性聚合物、季铵盐、脂肪酸、增稠剂等组成的组中的至少一种添加剂作为试剂溶解中的分散剂、试剂制备中的粘合剂和/或长期稳定剂。
表面活性剂可以使试剂以均匀的厚度分布和涂覆在电极上。表面活性剂的实例包括选自由聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、十二烷基硫酸钠、全氟辛烷磺酸盐、硬脂酸钠等组成的组中的至少一种。相对于100重量份的氧化还原酶，本发明的试剂组合物可包括3至25重量份的量，例如10至25重量份的表面活性剂，以便试剂可以在电极上均匀地展开并以均匀的厚度涂覆。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，可以10至25重量的量包括表面活性剂。当氧化还原酶的活性更高时，表面活性剂的量可以被调节至比该范围更低的量。
水溶性聚合物有助于使酶稳定和分散。水溶性聚合物可为选自由聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、全氟磺酸盐、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)、羧甲基纤维素(CMC)、乙酸纤维素、聚酰胺等组成的组中的至少一种。相对于100重量份的氧化还原酶，本发明的试剂组合物可包括10至70重量份的量，例如30至70重量份的水溶性聚合物，以便充分显示水溶性聚合物作为稳定剂和分散剂的功能。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，可以30至70重量份的量包括水溶性聚合物。当氧化还原酶的活性更高时，水溶性聚合物的量可被调节至比该范围更低的量。
为使水溶性聚合物有助于载体和酶的稳定和分散，水溶性聚合物可具有约2,500至3,000,000，例如，约5,000至1,000,000的重均分子量。
季铵盐可减少血细胞比容量的测量误差。季铵盐可为选自由十二烷基三甲基铵(cyltrimethylammonium)、十四烷基三甲基铵、十六烷基三甲基铵、十八烷基三甲基铵、四己基铵等组成的组中的至少一种。为了使季铵盐可减少血细胞比容量的测量误差，相对于100份重量的氧化还原酶，本发明的试剂组合物可以20至130重量份的量，例如70至130重量份包括季铵盐。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，可以70至130份重量份的量包括季铵盐。当氧化还原酶的活性更高时，季铵盐的量可被调节至比该范围更低的量。
类似于季铵盐，脂肪酸可减少血细胞比容量的测量误差，并使生物传感器的线性动态范围在高浓度扩展。脂肪酸可为选自由具有C4至C20的碳链的脂肪酸和其盐、或优选地具有C6至C12的碳链的脂肪酸和其盐组成的组中的至少一种。脂肪酸的实例包括选自由己酸、庚酸、辛酸、羊脂酸、壬酸、癸酸、十一酸、十二酸、十三酸、十四酸、十五酸、十六酸、十七酸、十八酸、十九酸、花生四烯酸和其脂肪酸组成的组中的至少一种。为了使脂肪酸可减少血细胞比容量的测量误差，并使生物传感器的线性动态范围在高浓度扩展，基于100重量份的氧化还原酶，本发明的试剂组合物可包括10至70重量份的量，例如30至70重量份的脂肪酸。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，可以30至70重量份的量包括脂肪酸。当氧化还原酶的活性高于700U/mg时，可以调节脂肪酸的量至比该范围更低。
增稠剂可以使试剂牢固地粘附至电极上。增稠剂包括选自由羟乙基纤维素(Natrosol)、DEAE-葡聚糖盐酸盐等组成的组中的至少一种。为了牢固地将试剂固定于电极，基于100重量份的氧化还原酶，本发明的试剂组合物可包括10至90重量份的量，例如30至90重量份的增稠剂。例如，当使用具有700U/mg的活性的氧化还原酶时，基于100重量份的氧化还原酶，可以使用30至90重量份的增稠剂。当使用具有高于700U/mg的活性的氧化还原酶时，可调节增稠剂的量至更低的量。
本发明的实施方式提供包括试剂组合物的电化学生物传感器。
实施方式提供平面式电化学生物传感器，包括工作电极和位于同一平面上的辅助电极，其中本发明的试剂组合物被包括在工作电极上(图1)。
另一实施方式提供面对面式电化学生物传感器，包括工作电极和位于不同平面上的辅助电极，其中本发明的试剂组合物被包括在工作电极上(图2)。
在生物传感器中，可以以任何形状包括试剂组合物，具体地在工作电极的涂层中，但不限于此。
平面式和面对面式电化学生物传感器可根据现有技术，如KR10-2004-0105429、KR10-2006-0089464、KR10-0854389、KR10-2008-0080841、KR10-2008-0084030、KR10-2008-0088028等中公开的方法进行制造。
下文中，平面式和面对面式电化学生物传感器的结构通过参考图1和图2进行解释。
图1中的平面式电化学生物传感器包括工作电极和位于同一平面上的辅助电极。从顶部到底部方向，上板11，安装有空气排气出口10，用于使血液扩散到传感器中；中间板9，通过使用两侧上的粘合剂层粘附上板和下板，并使血液由于血液的毛细管作用而扩散至电极中；本发明的试剂组合物8，例如通过涂覆包含在工作电极中和辅助电极中(对电极)；绝缘板7，安装有通道部分，用于限定工作电极和辅助电极的面积；工作电极2和辅助电极，在下板3上；和下板1，工作电极和辅助电极形成在下板1上，为顺序堆叠的结构。
图2中的面对面式电化学生物传感器包括工作电极和位于不同平面上的辅助电极。从顶部到底部方向，上板11，安装有空气出口10，用于使血液扩散到传感器和在其上印刷的辅助电极中；辅助电极3，印刷在上板上；中间板9，通过使用两侧上的粘合剂层粘附上板和下板，并使血液由于血液的毛细管作用而扩散至电极中；本发明的试剂组合物8，包含在工作电极中；绝缘板7，安装有通道部分，用于限定工作电极和辅助电极的面积；工作电极2，印刷在下板上；辅助电极的导线4；流动感测电极6，用于检测血液输入速率；和下板1，工作电极、辅助电极的导线和流动感测电极形成在下板1上，为顺序堆叠的结构。
如上所述，本发明的试剂组合物在传感器被长时间储存之后，传感器用于检测目标材料如葡萄糖的能力几乎不改变。因此，其可用于检测葡萄糖浓度的电化学生物传感器。
下文中，参考以下实施例描述本发明。然而，这些实施例仅是阐述本发明，本发明的范围不应被限于此。
[实施例]
<实施例1>制备包括试剂稳定剂的试剂组合物
除了100重量份的黄素腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC 1.1.99.10)的氧化还原酶以外；
80重量份(50mM)的Ru(NH3)6Cl3)作为含金属的络合物；36重量份(20mM)的硫堇；406重量份(50mM)的羟丙基-β-环糊精；52重量份的辛酸钠作为脂肪酸；104.3重量份的十四烷基三甲基溴化铵作为季铵盐；52重量份的DEAE-葡聚糖盐酸盐和11.7重量份的羟乙基纤维素(Natrosol)作为增稠剂；52重量份的80％-氢化的聚乙烯醇(重均分子量:9,000～10,000)作为水溶性聚合物；和17.4重量份的表面活性剂(商标:Triton X-100)被溶解在磷酸钠缓冲溶液(pH 6.4,0.1M,1249ml)和去离子水(1614.6ml)中，并被过滤以除去剩余的颗粒，以获得用于氧化还原反应的试剂组合物。
<实施例2>
包括实施例1的试剂组合物的平面式生物传感器
如图1中所述制造装配有0.5μl平均值的进料部分的平面式生物传感器:
聚酯下板1包括在其上形成的工作电极(面积:1.05mm2)和辅助电极，
工作电极2和辅助电极3是指通过根据丝网印刷方法印刷碳石墨制备的电极，
绝缘板7，用于限定工作电极和辅助电极的面积，
实施例1中获得的试剂组合物8，用于涂覆工作电极，
具有0.10mm厚度的中间板9，通过使用两侧上的粘合剂层粘附上板和下板，并使血液由于血液的毛细管作用而扩散至电极中，
空气出口10，用于使血液扩散到传感器中，和
聚酯上板11，构成生物传感器。
<实施例3>
包括实施例1的试剂组合物的面对面式生物传感器
在图2中显示的面对面式生物传感器实例的实施例中，制造具有0.5μl平均值的样品进料部分的面对面式生物传感器。
如下解释图2的生物传感器：
聚酯下板1，根据丝网印刷方法在其上印刷工作电极(面积:1.95mm2)、辅助电极的导线和流动感测电极，
工作电极2、3、4和6，通过根据丝网印刷方法印刷制备(工作电极2，辅助电极3，辅助电极的导线4，检测血液的输入速率的流动感测电极6)，
电流连接部件(Ag/AgCl)5，连接辅助电极的导线4和辅助电极3，
绝缘板7，用于限定工作电极的面积，
实施例1中获得的试剂组合物8，用于涂覆工作电极，
具有0.07mm厚度的中间板9，通过使用两侧上的粘合剂层粘附上板和下板，并使血液由于血液的毛细管作用而扩散至电极中，
10为空气出口，和
上板11，辅助电极印刷在其上，以形成传感器。
<对比例1>
制备没有试剂稳定剂的试剂组合物
根据与实施例1相同的方法制备试剂组合物，除了不使用羟丙基-β-环糊精作为试剂稳定剂。
<对比例2>
包括对比例1的试剂组合物的面对面式生物传感器
根据与实施例1-2相同的方法制造面对面式生物传感器，除了在工作电极上涂覆对比例1的试剂组合物。
<实验例1>
通过使用标准葡萄糖溶液测量平面式生物传感器的电流变化
通过使用实施例2的平面式生物传感器测量葡萄糖标准溶液的电流。葡萄糖标准溶液意指具有各种葡萄糖浓度的血液样品，其通过从静脉抽取血液并使用葡萄糖分析仪(制造商:YSI,型号:2300Stat Plus)制备，其调节血细胞比容为42％。
具体地，当每个11、22、50、67、101、202、301、396或509mg/dL葡萄糖浓度的标准溶液同时覆盖在工作电极和辅助电极上时，工作电极被施加以0mV的电压3秒，200mV的电压1秒。然后，每个浓度测量电流10次，测量的电流值的平均值显示在图3中。
如图3中显示，随着葡萄糖浓度增加，实施例2的平面式生物传感器表现良好的线性增加的电流值。每单位面积的工作电极的电流值的斜率为20.5nA/(mg/dL)/mm2。
<实验例2>
测量面对面式生物传感器的电流变化
根据与实验例1相同的方法，通过使用实施例3的面对面式生物传感器测量葡萄糖标准溶液的电流，除了每个葡萄糖浓度为11、21、50、72、104、204、303、397或500mg/dL以外。
在该实施例中，根据与实施例1相同的方法，羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精和羟丙基-γ-环糊精代替HP-β-CD被用作制备试剂组合物的试剂稳定剂。通过使用根据与实施例3相同的方法的试剂组合物，制造生物传感器，并使用该生物传感器。每个浓度测量电流10次，测量的电流值的平均值显示在图4中。
如图4中所示，使用包括羟丙基-β-环糊精作为试剂稳定剂的试剂组合物的生物传感器表现了最好的线性。每单位面积的工作电极的电流值的斜率为26.9nA/(mg/dL)/mm2。使用其它试剂组合物的其它生物传感器也显示了良好的线性。
<实验例3>
测量在50℃温育的面对面式生物传感器的电流变化
为了制造待商业化的传感器，校验时间中的传感器的性能变化必须最小化。实验例3测试在传感器被储存长时间的情况下的性能稳定性。具体地，实施例3和对比例2的面对面式生物传感器在50℃温育4、11、17、24、29、36和43天，然后根据与实验例2相同的方法测量葡萄糖标准溶液的电流，结果呈现在图5中。在传感器于50℃储存43天的情况下，其对应于在室温储存17个月的情况。
如图5中所示，对于至少43天的储存时间，包括HP-β-CD作为试剂稳定剂的传感器呈现3.6％的最大斜率。随着储存时间的推移，不包括HP-β-CD的传感器在43天储存之后显示降低的斜率至21％。因此，当将HP-β-CD添加至试剂组合物时，可使传感器长时间储存而不改变性能变化。
包括HP-β-CD的用于氧化还原反应的试剂组合物显示在长时间储存时的高度稳定性，因此可用于生物传感器以检测血糖。实施例中的试剂组合物和成分比例仅以实施例呈现，可以自由地改善或变化以调节具体应用或性能所要求的敏感度。

Claims (17)

1.一种用于氧化还原反应的试剂组合物，包括氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物。
2.如权利要求1所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述亲水性包合化合物为选自由环糊精和所述环糊精的衍生物组成的组中的至少一种。
3.如权利要求2所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述亲水性包合化合物为选自由α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精和甲基-β-环糊精组成的组中的至少一种。
4.如权利要求1所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述氧化还原酶为选自由脱氢酶、氧化酶和酯酶组成的组中的至少一种；或
为选自由脱氢酶、氧化酶和酯酶组成的组中的至少一种氧化还原酶和选自由黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和吡咯并喹啉醌(PQQ)组成的组中的至少一种辅助因子的混合物。
5.如权利要求4所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述选自由脱氢酶、氧化酶和酯酶组成的组中的至少一种选自由葡萄糖脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、葡糖氧化酶、胆固醇氧化酶、胆固醇酯酶、乳酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、醇氧化酶、醇脱氢酶和胆红素氧化酶组成的组中。
6.如权利要求4所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述氧化还原酶为选自由黄素腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-葡萄糖脱氢酶组成的组中的至少一种。
7.如权利要求1所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述电子转移介体为第一电子转移介体和第二电子转移介体的混合物，
所述第一电子转移介体为含金属的络合物，所述含金属的络合物包括选自由Ru、Fe、Os、Rh、Mo和Ir组成的组中的至少一种，和
所述第二电子转移介体为选自由硫堇(3,7-二氨基-5-吩噻嗪氯化物)、1-甲氧基PMS(1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐)、3-氨基-7-(2,3,4,5,6-五羟基己酰氨基)-5-吩噻嗪)、1-甲氧基-5-甲基酚嗪、天青C、天青A、亚甲蓝、甲苯胺蓝及其衍生物组成的组中的至少一种。
8.如权利要求1所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述试剂组合物进一步包括选自由表面活性剂、水溶性聚合物、季铵盐、脂肪酸和增稠剂组成的组中的至少一种添加剂。
9.如权利要求8所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述表面活性剂为选自由Triton X-100、十二烷基硫酸钠、全氟辛烷磺酸盐和硬脂酸钠组成的组中的至少一种；
所述水溶性聚合物为选自由聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯醇(PVA)、全氟磺酸盐、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基纤维素(HPC)、羧甲基纤维素(CMC)、乙酸纤维素和聚酰胺组成的组中的至少一种；
所述季铵盐为选自由十二烷基三甲基铵、十四烷基三甲基铵、十六烷基三甲基铵、十八烷基三甲基铵和四己基铵组成的组中的至少一种；
所述脂肪酸为选自由具有C4至C20的碳链的脂肪酸和脂肪酸盐组成的组中的至少一种；
所述增稠剂为选自由羟乙基纤维素(Natrosol)和DEAE-葡聚糖盐酸盐组成的组中的至少一种。
10.如权利要求1-9任一项所述的用于氧化还原反应的试剂组合物，其中所述用于氧化还原反应的试剂组合物为用于电化学生物传感器的试剂组合物。
11.一种平面式电化学生物传感器，包括工作电极和位于同一板中的辅助电极，其中所述工作电极包括如权利要求10中所述的用于氧化还原反应的试剂组合物。
12.一种面对面式电化学生物传感器，包括工作电极和位于不同板中的辅助电极，其中所述工作电极包括如权利要求10中所述的用于氧化还原反应的试剂组合物。
13.一种制备用于氧化还原反应的试剂组合物的方法，包括混合氧化还原酶、电子转移介体和亲水性包合化合物。
14.如权利要求13所述的方法，其中所述亲水性包合化合物为选自由环糊精和所述环糊精的衍生物组成的组中的至少一种。
15.如权利要求14所述的方法，其中所述亲水性包合化合物为选自由α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精和甲基-β-环糊精组成的组中的至少一种。
16.如权利要求13所述的方法，其中所述氧化还原酶为选自由脱氢酶、氧化酶和酯酶组成的组中的至少一种；或
所述氧化还原酶包括选自由脱氢酶、氧化酶和酯酶组成的组中的至少一种和选自由黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和吡咯并喹啉醌(PQQ)组成的组中的至少一种辅助因子。
17.如权利要求13所述的方法，其中所述电子转移介体为第一电子转移介体和第二电子转移介体的混合物，
所述第一电子转移介体为含金属的络合物，所述含金属的络合物包括选自由Ru、Fe、Os、Rh、Mo和Ir组成的组中的至少一种，和
所述第二电子转移介体为选自由硫堇(3,7-二氨基-5-吩噻嗪氯化物)、1-甲氧基PMS(1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐)、3-氨基-7-(2,3,4,5,6-五羟基己酰氨基)-5-吩噻嗪)、1-甲氧基-5-甲基酚嗪、天青C、天青A、亚甲蓝、甲苯胺蓝及其衍生物组成的组中的至少一种。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI551860B (zh) * 2015-07-17 2016-10-01 台欣生物科技研發股份有限公司 測試片
CN108486027A (zh) * 2018-04-04 2018-09-04 江南大学 一种fad为辅基的葡萄糖脱氢酶的生产、纯化方法
CN109342525A (zh) * 2018-11-15 2019-02-15 江苏科技大学 还原氧化石墨烯与聚天青a双层膜及其制备方法与应用
CN112516325A (zh) * 2019-09-18 2021-03-19 洛阳赛威生物科技有限公司 一种稳定的口蹄疫疫苗组合物及其应用

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101490186B1 (ko) * 2013-05-08 2015-02-05 건국대학교 산학협력단 전도성 고분자 전극을 이용한 전기화학적 콜레스테롤 센서 및 그 제조방법
KR101531384B1 (ko) 2013-07-02 2015-06-24 주식회사 인포피아 바이오센서용 시약조성물 및 이를 포함하는 바이오센서
KR101573721B1 (ko) 2013-12-11 2015-12-02 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서용 산화환원반응 시약조성물 및 이를 이용한 바이오센서
KR101694982B1 (ko) * 2014-12-31 2017-01-10 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서
CN105136874B (zh) * 2015-06-05 2018-01-26 北京乐普医疗科技有限责任公司 一种酶生物传感器中的检测配方
JP6901717B2 (ja) * 2016-08-29 2021-07-14 国立研究開発法人産業技術総合研究所 グルコースセンサ用試薬、グルコースセンサ、グルコースセンサの製造方法、および、グルコース測定装置
JP6773507B2 (ja) * 2016-09-30 2020-10-21 アークレイ株式会社 バイオセンサ、その製造方法、グルコース又はラクテートの濃度測定方法及び濃度測定システム
CN106645763B (zh) * 2017-01-03 2019-03-22 长沙中生众捷生物技术有限公司 总胆固醇的检测试纸
KR102266197B1 (ko) * 2019-07-22 2021-06-17 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 글루코스 탈수소화효소 감응형 신규 루테늄계 전자전달 매개체, 이의 제조방법, 이를 포함하는 산화환원반응용 시약조성물 및 바이오센서
CN110749574B (zh) * 2019-11-05 2021-11-02 广东药科大学 双波长共振瑞利散射法测定全氟辛烷磺酸的方法及应用
KR102411089B1 (ko) * 2020-03-06 2022-06-20 (주)케어포유 바이오 센서용 조성물 및 이를 포함하는 바이오 센서
KR102596518B1 (ko) * 2021-05-11 2023-11-02 (주)오상헬스케어 산화 환원 반응용 시약 조성물 및 이를 포함하는 바이오센서
KR102596519B1 (ko) * 2021-05-11 2023-11-02 (주)오상헬스케어 산화 환원 반응용 시약 조성물 및 이를 포함하는 바이오센서
JP2023136725A (ja) * 2022-03-17 2023-09-29 アークレイ株式会社 バイオセンサを用いた酸化還元酵素の電気化学的測定方法及びそれに用いるバイオセンサ

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005118014A (ja) * 2003-10-20 2005-05-12 Arkray Inc 分析方法およびそれに用いる試薬

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE466158B (sv) 1989-04-25 1992-01-07 Migrata Uk Ltd Analysmetod foer glukosbestaemning i helblod
JPH05118014A (ja) * 1991-10-30 1993-05-14 Sekisui Chem Co Ltd 雪かき具
JP2653755B2 (ja) * 1994-03-08 1997-09-17 協和メデックス株式会社 高密度リポ蛋白中のコレステロールの定量法
JP3027306B2 (ja) * 1994-06-02 2000-04-04 松下電器産業株式会社 バイオセンサおよびその製造方法
JP3528529B2 (ja) 1997-07-31 2004-05-17 Ｎｏｋ株式会社 バイオセンサ
US5925534A (en) 1998-06-08 1999-07-20 Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Method for measuring LDL-cholesterol
JP2000065777A (ja) 1998-08-21 2000-03-03 Nok Corp バイオセンサ
JP3694424B2 (ja) 1998-09-29 2005-09-14 松下電器産業株式会社 グルコースセンサ
JP4256007B2 (ja) * 1999-01-29 2009-04-22 アークレイ株式会社 バイオセンサの製造方法
CN1162699C (zh) 1999-11-16 2004-08-18 松下电器产业株式会社 生物传感器
JP3775561B2 (ja) * 2000-02-17 2006-05-17 東洋紡績株式会社 安定なｐｑｑ依存性グルコースデヒドロゲナーゼ組成物
KR100364199B1 (ko) 2000-07-21 2003-01-24 주식회사 아이센스 크로마토그래피 기능의 다공성 박막이 구비된 바이오센서
US6767441B1 (en) * 2001-07-31 2004-07-27 Nova Biomedical Corporation Biosensor with peroxidase enzyme
JP4247440B2 (ja) 2002-08-13 2009-04-02 グンゼ株式会社 バイオセンサとその製造方法
KR100554649B1 (ko) 2003-06-09 2006-02-24 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서
US7109271B2 (en) * 2004-07-28 2006-09-19 Lifescan, Inc. Redox polymers for use in electrochemical-based sensors
KR100698961B1 (ko) 2005-02-04 2007-03-26 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서
AU2006220770A1 (en) * 2005-03-04 2006-09-14 Bayer Healthcare Llc Stabilizing the activity of PQQ-dependent glucose dehydrogenase in electrochemical biosensors
US8083926B2 (en) 2006-04-19 2011-12-27 Chen Ellen T Nanopore structured electrochemical biosensors
KR100854389B1 (ko) 2007-02-28 2008-08-26 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서
KR20080080841A (ko) 2007-03-02 2008-09-05 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서 및 이의 측정기
KR100874158B1 (ko) 2007-03-14 2008-12-15 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서 및 이의 측정기
KR100874159B1 (ko) 2007-03-28 2008-12-15 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서 및 이의 측정기
KR100890988B1 (ko) * 2007-10-29 2009-03-31 주식회사 아이센스 일정 소량의 시료를 균일하게 도입할 수 있는 시료도입부를구비한 전기화학적 바이오센서
JP2010237145A (ja) * 2009-03-31 2010-10-21 Cci Corp バイオセンサ
KR101137434B1 (ko) 2010-07-20 2012-04-20 한국에너지기술연구원 급속열처리 공정을 사용한 ｃｉｓ계 화합물 박막의 제조방법 및 상기 ｃｉｓ계 화합물 박막을 이용한 박막 태양전지의 제조방법
KR101355127B1 (ko) * 2011-09-30 2014-01-29 주식회사 아이센스 전기화학적 바이오센서용 산화환원반응 시약조성물 및 이를 포함하는 바이오센서

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005118014A (ja) * 2003-10-20 2005-05-12 Arkray Inc 分析方法およびそれに用いる試薬

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TANAKA K等: "612bis-Thionine and ferric chelate compounds as coupled mediators in microbial fuel cells", 《BIOELECTROCHEMISTRY AND BIOENERGETICS》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI551860B (zh) * 2015-07-17 2016-10-01 台欣生物科技研發股份有限公司 測試片
CN108486027A (zh) * 2018-04-04 2018-09-04 江南大学 一种fad为辅基的葡萄糖脱氢酶的生产、纯化方法
CN109342525A (zh) * 2018-11-15 2019-02-15 江苏科技大学 还原氧化石墨烯与聚天青a双层膜及其制备方法与应用
CN112516325A (zh) * 2019-09-18 2021-03-19 洛阳赛威生物科技有限公司 一种稳定的口蹄疫疫苗组合物及其应用
CN112516325B (zh) * 2019-09-18 2023-12-08 洛阳赛威生物科技有限公司 一种稳定的口蹄疫疫苗组合物及其应用

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