CN103688751A

CN103688751A - 利用段木制作蜜环菌菌种的方法

Info

Publication number: CN103688751A
Application number: CN201310681599.5A
Authority: CN
Inventors: 马明山; 岳忠涛
Original assignee: CHONGQING FUXINYANG EDIBLE FUNGUS CO LTD
Current assignee: CHONGQING FUXINYANG EDIBLE FUNGUS CO LTD
Priority date: 2013-12-12
Filing date: 2013-12-12
Publication date: 2014-04-02
Anticipated expiration: 2033-12-12
Also published as: CN103688751B

Abstract

本发明属于菌种栽培技术领域，涉及一种利用段木制作蜜环菌菌种的方法，该方法包括：A、拌料：按照培养基配方称取培养料，混合均匀，加水至含水量为55%-70%；所述培养基按重量份计由以下组分组成：杂木树枝的枝段干重8-12份、麸皮12-18份、玉米粉8-12份、黄豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份；B、将上述混匀的培养料进行装袋、灭菌、接种；C、培养：将接种后的料袋于20-25℃下培养，至蜜环菌菌丝长满料袋即可。该方法中的培养基组分和配比适宜，营养均衡，进行蜜环菌菌种的制作，培养基保水性强，营养充分，获得的蜜环菌菌丝粗壮，成活率高，产量高。

Description

利用段木制作蜜环菌菌种的方法

技术领域

本发明属于菌种栽培技术领域，涉及一种利用段木制作蜜环菌菌种的方法。

背景技术

蜜环菌（Armillaria mellea）又称小蜜环菌、蜜色环菌、蜜蘑，属于真菌门，担子菌亚门，层菌纲，无隔担子菌亚纲，伞菌目，口蘑科，蜜环菌属，是一种药食兼用菌。其子实体一般中等大；菌盖直径4-14cm，淡土黄色、蜂蜜色至浅黄褐色；老后棕褐色，中部有平伏或直立的小鳞片，有时近光滑，边缘具条纹；菌肉白色；菌褶白色或稍带肉粉色，老后常出现暗褐色斑点；菌柄细长，圆柱形，稍弯曲，同菌盖色，纤维质，内部松软变至空心，基部稍膨大；菌环白色，生柄的上部，幼时常呈双层，松软，后期带奶油色。

研究发现，蜜环菌中含有胞内多糖、萜类化合物、酯类化合物、氨基酸等多种营养物质，具有定惊、熄风、健脑、增强人体免疫力、抗肿瘤等多种药理活性，可以治疗多种疾病。此外，蜜环菌还是名贵中药天麻和猪苓栽培必备的共生菌，蜜环菌的菌索侵入天麻块茎和猪苓菌核后被后者消化利用，成为它们的营养源。蜜环菌主要生活在树林中木材上，尤以枯枝落叶和死树营腐生生活；又可寄生在活树的根部造成树木的根腐营寄生生活，过着兼性寄生的苗头生活方式。人们根据它的这种生活方式将蜜环菌菌种接种在木材上和其他培养料上，用来作为栽培天麻的材料。

本发明所指的蜜环菌菌种是人工培养进行扩大繁殖和用于生产的纯菌丝体和菌索，为生产种或栽培种。菌种质量好坏直接影响栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种才能获得高产和优质的产品，因此生产优良的菌种是食用菌栽培的一个极其重要的环节。用于扩大繁殖成蜜环菌菌种的原种，一般可从以下三种途径获得：1）通过自制或引进健壮的纯菌种作种，人工培养的固体纯菌种；2）采集、分离纯化得到的野生菌种；3）从培菌和栽种天麻的单位直接引购的菌种。在实际生产中，大多采用第三种途径获得原种，并对原种进行扩大繁殖，从而获得蜜环菌菌种，再直接用于天麻等的栽植。

CN102342219B中公开了一种瓶装蜜环菌菌种的制备方法，其使用的培养基组成为：杂木屑82.7%、小麦麸10%、玉米粉5%、石膏粉1%、白糖1%、磷酸二氢钾0.2%、硫酸镁0.1%；其制备方法包括对干培养料进行装瓶、装料后的菌种瓶浸入水池中灌水的步骤。该方法解决了培养料太湿，不易装瓶，以及加水多灭菌时水分溢出，污染封口物的问题。但是，这种方法制作的培养基，湿度难以控制，培养料润湿也不均匀。另外，以杂木屑为主料的培养基，本身还存在菌种菌丝长势弱、不致密，在菌材培养中不耐高温、高湿等环境，接种后菌种容易死亡，成功接种率低等问题。

随着天麻栽培及蜜环菌菌种制作技术的发展，蜜环菌生产种质量获得了较大的改善，当前大规模生产中一般以小的杂木短树棍为主要原料通过装瓶、灭菌、接种并通过一定时间的培养，待菌丝长满后作为生产种使用。但是，就杂木短树棍蜜环菌生产种制作技术而言，已公开的培养基成分和制备方法在实际生产中并不能达到理想的效果，突出的缺点就在于培养基营养不均衡，菌种成活率低、产量低，以及段木保水性差等。

为解决上述现有技术存在的问题，发明人对段木制作蜜环菌菌种的方法进行了改进发明。

发明内容

有鉴于此，本发明首先提供一种营养丰富、适合培养蜜环菌菌种的培养基。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

用于培养蜜环菌菌种的培养基，按重量份计由以下组分组成：杂木树枝的枝段干重8-12份、麸皮12-18份、玉米粉8-12份、黄豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份。

所述杂木树枝可根据当地的林木资源，选用适当的阔叶树树种，一般常用青冈、桦木、野樱桃、栗树、牛奶五树、水冬瓜、竹子、葛根、法国梧桐、洋槐等。木质结构紧密、紧实的树种，如青冈接菌较慢、耐腐；木质结构不很紧密的树种，如桦木接菌较快，但不耐腐。使用时，可把耐腐和不耐腐的树材混合使用。进一步，优选新砍的鲜树枝，鲜树枝养分集中，杂菌感染少，发菌快，还可延长菌材的使用时间。用半干或脱水20%-30%的干的、未朽烂、无杂菌感染的树枝制作，或干鲜树枝混合使用亦可。优选带皮的树枝，因韧皮部和木质部交界面是最适宜蜜环菌生长的地方。优选直径在3cm以下，砍成长度为1-6cm的小树枝。

进一步，所述用于培养蜜环菌菌种的培养基，按重量份计由以下组分组成：新鲜杂木树枝的枝段干重9份、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份。

进一步，所述树枝的枝段直径为1-1.5cm，长为2-3cm。该大小的树枝最适合蜜环菌的生产，并且不会妨碍培养料的装瓶或装袋。

本发明用于培养蜜环菌菌种的培养基，其组分和配比适宜，在各组分的协同作用下，为蜜环菌生长提供了充分的碳源、氮源、微量元素、支撑物等，营养均衡，特别适合蜜环菌的萌发和生长。

本发明在上述提供的培养基的基础上，还提供一种成活率高、产量高的利用段木制作蜜环菌菌种的方法。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

利用段木制作蜜环菌菌种的方法，包括以下步骤：

A、拌料：按照培养基配方称取培养料，混合均匀，加水至含水量为55%-70%；所述培养基按重量份计由以下组分组成：杂木树枝的枝段干重8-12份、麸皮12-18份、玉米粉8-12份、黄豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份；

B、将上述混匀的培养料进行装袋、灭菌、接种；

C、培养：将接种后的料袋于20-25℃下培养，至蜜环菌菌丝长满料袋即可。

进一步，利用段木制作蜜环菌菌种的方法，包括以下步骤：

A、拌料：按照培养基配方称取培养料，混合均匀，加水至含水量为60%；所述培养基按重量份计由以下组分组成：新鲜杂木树枝的枝段干重9份、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份；

B、将上述混匀的培养料进行装袋、灭菌、接种；

C、培养：将接种后的料袋于20-25℃下培养35-45天，发出的菌丝即可用于生产。

进一步，所述树枝的枝段直径为1-1.5cm，长为2-3cm。

进一步，所述拌料是先将树枝的枝段浸泡于水中，待其泡发至原来重量的0.5倍以上取出，再与培养基的其它组分干拌成培养料，并用浸泡的水喷洒培养料至其总含水量为60%。这样有利于水分浸透树枝，充分进入树枝内部，且水分不容易散失，提高培养基保水性。在该过程中，对于易长菌的树木，还可在浸泡的水中加入0.15%的多菌灵或灭霉灵浸泡，以减少杂菌感染。

进一步，所述用浸泡的水喷洒培养料是多次进行的，每次喷洒至有水滴出即停止，于通风处放置至无水滴出，再继续喷洒，直至达到所需的含水量。该操作也有利于水分充分进入培养基内部，且水分不容易散失，提高培养基保水性。

进一步，所述培养基的拌料过程中，用到的水的pH为5.5-6.5。该pH环境下，蜜环菌生长良好。

进一步，所述装袋是将拌匀后的培养料装入菌种瓶或者菌种袋。所述菌种袋可为聚乙烯或聚丙烯材料的塑料袋。

进一步，所述灭菌是将装料后的料袋于100℃灭菌8-12小时，或者于120℃灭菌1-2小时。

进一步，所述培养过程中，于第10天和第25天向料袋口喷洒三十烷醇，浓度分别为0.2mg/m²和0.05mg/m²。三十烷醇是一种天然的长碳链植物生长调节剂，化学名称正三十烷醇，结构式CH₃（CH₂）₂₈CH₂OH，又称蜂花醇，是从蜜蜂蜡中纯化提取的天然生物产品，对人畜无害及副作用，对环境无污染。将其用于蜜环菌的生长调节，可缩短密环菌菌种的培养时间，提高生产效率。由于三十烷醇不溶于水，可将其制成混悬溶液进行喷洒。

本发明利用段木制作蜜环菌菌种的方法，获得的培养基组分和配比适宜，在各组分的协同作用下，为蜜环菌生长提供了充分的碳源、氮源、微量元素、支撑物等，营养均衡，特别适合蜜环菌的萌发和生长；采用上述方法进行蜜环菌菌种的制作，培养基保水性强，营养充分，获得的蜜环菌菌丝粗壮，成活率高，产量高。

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例和对照例进行详细描述。本实施例和对照例中用于扩大繁殖成蜜环菌菌种的原种购买自河南农富康生物科技有限公司；其中未注明具体条件的实验方法，参照NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行。

实施例1

将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，45天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

实施例2

将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于120℃灭菌1.5小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，40天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

实施例3

将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种袋，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，并于第10天向料袋口喷洒三十烷醇，浓度为0.2mg/m²，32天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

实施例4

将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种袋，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，并于第10天和第25天向料袋口喷洒三十烷醇，浓度分别为0.2mg/m²和0.05mg/m²，27天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

实施例5

准备培养基配料：直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份。先将树枝的枝段浸泡于水中，待其泡发至原来重量的0.5倍以上取出，再与培养基的其它组分干拌成培养料，并用浸泡的水多次喷洒培养料至其总含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于100℃高温灭菌12小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，42天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

实施例6

准备培养基配料：直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、黄豆粉3份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份。先将树枝的枝段浸泡于水中，待其泡发至原来重量的0.5倍以上取出，再与培养基的其它组分干拌成培养料，并用浸泡的水多次喷洒培养料至其总含水量为60%，该过程中水的pH维持在5.5-6.5。将混匀的培养料装入菌种瓶，于120℃灭菌2小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，43天左右蜜环菌菌丝即长满整个菌种瓶。获得的蜜环菌菌种菌丝粗壮，菌索密集，菌索韧。

对照例1

将直径为1-1.5cm的新鲜杂木树枝切成2-3cm长的小段9份（按干重计）、麸皮15份、玉米粉10份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，46天左右蜜环菌菌丝长到最佳状态。获得的蜜环菌菌种菌丝细脆，菌索稀疏，小部分料袋未萌发菌丝。

对照例2

将直径为1-1.5cm的陈放了2-3年的杂木树枝切成2-3cm长的小段4份（按干重计）、麸皮20份、玉米粉10份、白糖1份、石膏粉1份和磷酸二氢钾1份，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于120℃灭菌1.5小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，49天左右蜜环菌菌丝长到最佳状态。获得的蜜环菌菌种菌丝细脆，菌索极为稀疏，较多料袋未萌发菌丝。

对照例3

将杂木屑78%、麸皮20%、石膏粉1%和白糖1%，拌匀，控制含水量为60%。将混匀的培养料装入菌种瓶，于100℃高温灭菌10小时。按NY/T528-2010《食用菌菌种生产技术规程》标准要求进行接种培养等操作管理，于20-25℃下培养，49天左右蜜环菌菌丝长到最佳状态。获得的蜜环菌菌种菌丝细脆，菌索稀疏。

采集实施例1-6和对照例1-3培养的蜜环菌菌索，称重，以对照例3获得的蜜环菌菌种重量为基准，统计结果如表1所示。

表1蜜环菌菌种产量统计结果

序号	菌索相对对照例3产量	菌索相对对照例3产量提高
			实施例1	112%	13%
实施例2	114%	14%
			实施例3	116%	16%
实施例4	118%	18%
			实施例5	125%	25%
实施例6	129%	29%
			对照例1	106%	7%
对照例2	103%	4%
			对照例3	100%	0

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims

1.利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

B、将上述混匀的培养料进行装袋、灭菌、接种；

2.根据权利要求1所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

B、将上述混匀的培养料进行装袋、灭菌、接种；

3.根据权利要求1或2所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述树枝的枝段直径为1-1.5cm，长为2-3cm。

4.根据权利要求1所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述拌料是先将树枝的枝段浸泡于水中，待其泡发至原来重量的0.5倍以上取出，再与培养基的其它组分干拌成培养料，并用浸泡的水喷洒培养料至其总含水量为60%。

5.根据权利要求4所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述用浸泡的水喷洒培养料是多次进行的，每次喷洒至有水滴出即停止，于通风处放置至无水滴出，再继续喷洒，直至达到所需的含水量。

6.根据权利要求1、2、4或5所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述水的pH为5.5-6.5。

7.根据权利要求1所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述装袋是将拌匀后的培养料装入菌种瓶或者菌种袋。

8.根据权利要求1所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述灭菌是将装料后的料袋于100℃灭菌8-12小时，或者于120℃灭菌1-2小时。

9.根据权利要求1所述的利用段木制作蜜环菌菌种的方法，其特征在于：所述培养过程中，于第10天和第25天向料袋口喷洒三十烷醇，浓度分别为0.2mg/m²和0.05mg/m²。

10.用于培养蜜环菌菌种的培养基，其特征在于，按重量份计由以下组分组成：杂木树枝的枝段干重8-12份、麸皮12-18份、玉米粉8-12份、黄豆粉2-4份、白糖1份、石膏粉1份、磷酸二氢钾1份。