CN103609436A - 蓝花丹快繁技术 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物栽培技术领域，特别是蓝花丹组织培养技术领域，本发明解决该技术问题的技术方案是提供一种蓝花丹单芽诱导丛芽的繁殖方法，蓝花丹幼嫩茎段经处理后依次接种到单芽诱导丛芽培养基MS+0.2mg／L～1.0mg／L6-BA+1.0mg/L～4.0mg/L2,4-D；生根培养基MS+0.5mg／L～1.5mg/L IBA+0.0mg／L～1.0mg/L NAA中。培养温度为20～28℃，光照度为1500～2500Lx，光照时间为8～12h／d，蔗糖浓度为30g／L。培养基用6.5g/L琼脂固化，用0.1mol／L的NaOH或HCl调节培养基pH至5.8。采用本方法培养的蓝花丹成活率高，生根时间早，生长发育快，在降低成本的基础上，扩大繁殖系数，为蓝花丹的生产提供了新的高效繁殖方法，操作简单易行，易于推广，为解决目前我国对国外种源依赖进口，导致造价太高，影响蓝花丹的推广问题作出贡献。
Description
技术领域
本发明涉及植物组培技术领域，尤其涉及的是一种蓝花丹单芽诱导丛芽的繁殖方法。
背景技术
蓝花丹是一种观赏价值与药用价值俱佳的新型花卉。其长势强健，耐热，较耐高温、高湿，病虫害少，管理简单，观赏期长，是育种者普遍看好的抗性育种材料。目前，欧洲及非洲因为大面积采集蓝花丹提取白花丹素，使得该物种自然资源迅速枯竭。蓝花丹为花柱异长植物，存在自交不亲和现象，自然条件下结实率低，面对市场需求与植物资源间巨大的缺口，繁殖问题成为蓝花丹研究的首要问题。
植物组织培养是蓝花丹繁育、生产的重要手段。如果能对蓝花丹进行组织培养与快繁生产，既能丰富花卉品种，又能为工厂化育苗带来更大的经济效益；也可以为培育新品种以及有自主知识产权的品种打下基础，以此摆脱以往新品种依赖进口的局面。
在查阅有关文献的基础上，根据试验的目的和计划，着重研究蓝花丹植物单芽诱导丛芽技术的的关键环节，即外植体的选择、外植体消毒、基本培养基的选择以及初代培养、继代培养、生根培养各阶段植物生长调节物质的选择与用量，拟筛选出最优技术参数组合，最终建立高效的蓝花丹植物组织培养体系。
发明内容
本发明提供一种蓝花丹单芽诱导丛芽的繁殖方法，针对目前蓝花丹种源依赖国外进口导致造价过高，难于推广的问题，从而降低成本。
本发明提供了一种蓝花丹单芽诱导丛芽的繁殖方法，包括以下步骤：
A、外植体的处理：剪取长势良好无病虫害的幼嫩枝条，用洗衣粉溶液浸泡30min，刷去表面脏物，自来水冲洗2h左右后，75％的乙醇溶液浸泡45s，无菌水冲洗2次后，用0.1％的升汞溶液浸泡10min，之后用无菌水浸泡冲洗数次至材料表面无泡沫，最后置于超净工作台上，用无菌吸水纸吸去材料表面的水分。培养基的处理：配置诱导单芽诱导丛芽培养基MS+0.2mg／L～1.0mg／L6-BA+1.0mg／L～4.0mg／L2,4-D；生根培养基MS+0.5mg／L～1.5mg／L IBA+0.0mg／L～1.0mg／L NAA。蔗糖浓度设置为30g／L，培养基用6.5g／L琼脂固化，用0.1mol／L的NaOH或HCl调节培养基pH至5.8。
B、接种：将处理好的外植体接种到配置好的培养基中。
C、接种后管理：培养温度为20～28℃，光照度为1500～2500Lx，光照时间为8～12h／d；pH为5.8。
根据权利要求1所述的蓝花丹组培方法，其特征在于：步骤A所述的外植体是将枝条上的叶片切除后，切成1cm长左右的茎段，其中以茎节为界，上半部分保留0.3cm，下半部分保留0.7cm，每个茎段保留一个茎节。
新生叶片内生菌少，因此使用叶柄或嫩叶作为组织培养材料可以在一定程度上降低实验操作的复杂性。茎尖因其生长快速、不易发生遗传变异并且具有繁殖率高的特点而成为目前植物组织培养中最常用的一种材料；但在木本植物的组织培养中，使用茎尖进行培养时，分生组织会快速氧化，导致培养较为困难，在实际操作中一般都采用带芽的外植体进行培养。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。
实施例1
本实施例提供一种蓝花丹单芽诱导丛芽的繁殖方法，主要以植物组织培养技术作为技术支撑，选用蓝花丹幼嫩茎段作为外植体，通过不同的激素组合配方来诱导幼嫩茎段(激素组合配方见表1、表2、表3，经过优化组合最终选定了一组最优的激素组合配方。
首先准备外植体：剪取长势良好无病虫害的幼嫩枝条，用洗衣粉溶液浸泡30min，刷去表面脏物，自来水冲洗2h左右后，75％的乙醇溶液浸泡45s，无菌水冲洗2次后，用0.1％的升汞溶液浸泡10min，之后用无菌水浸泡冲洗数次至材料表面无泡沫，最后置于超净工作台上，用无菌吸水纸吸去材料表面的水分。将枝条上的叶片切除后，切成1cm长左右的茎段，其中以茎节为界，上半部分保留0.3cm，下半部分保留0.7cm，每个茎段保留一个茎节。
培养基的配置：
表1不同激素水平单芽诱导丛芽正交试验表L9(32)
Table1 Different hormone levels induced single bud orthogonal table L9(32)
表2不同激素水平诱导生根试验表L9(32)
Table2 Different rooting hormone level test table L9(32)
蔗糖浓度设置为30g／L，pH为5.8。
将处理的外植体接入培养基，单芽诱导丛芽培养基每个处理接种30个外植体，重复3次，30d后统计丛芽的出芽数、出芽率。切下单芽进行不同激素、不同水平的多因子正交试验，每个处理接种30个外植体，重复3次，30d后继续统计出芽数，出芽率。当丛芽长至3.0～4.0cm高时，切割成单芽转入不同激素组合的生根培养基中诱导生根，每个处理接种30个单芽，重复3次，35d后比较不同激素对蓝花丹无根苗生根的影响。
不同的激素组合配方的结果如下表：
表3单芽诱导丛芽培养基
Table3 Single bud buds induction medium
故最佳的单芽诱导丛芽培养基为：MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg／L2,4-D
表4生根培养基
Table4 Rooting medium
注：+++表示生长情况良好，++表示生长情况一般，+表示生长情况较差。
最佳生根培养基：MS+IBA1.5mg／L+NAA0.0mg／L
将处理后的外植体接入最佳单芽诱导丛芽培养基中，每升培养基分装30个组培瓶，每个培养基接种3个外植体，重复3次，一个月后转入最佳增殖培养基(配方同最佳单芽诱导丛芽培养基)，每个培养基接种3个，重复3次，每个月转瓶1次，两个月后，将诱导出的芽切下，转入最佳生根培养基中，每个培养基接种3个，重复3次，每个月转瓶1次，两个月后观察生根情况，统计成活苗数，并计算每株苗成本价，见表5。
表5蓝花丹组织培养成本表
Table5 Plumbago auriculata Lam.tissue culture costs table
1L单芽诱导丛芽培养基成本+电费=1L增殖培养基成本+电费=MS培养基+30g蔗糖+6.5g琼脂+0.001g6-BA+0.001g2,4-D+电费=4+0.9+3.12+0.01+0.0042+10.47≈18.5元
1L生根培养基成本+电费=MS培养基+30g蔗糖+6.5g琼脂+0.0015gIBA+电费=4+0.9+3.12+0.015+10.47≈18.5元
总价=1L单芽诱导丛芽培养基成本+2次×1L增殖培养基成本+2次×5倍×1L生根培养基成本=18.5+2×18.5+2×5×18.5=240.5元
实施例2
本实施例采用传统方法繁殖蓝花丹，即采用播种繁殖。
选取饱满无虫害的种子，用3％的高锰酸钾溶液消毒30min，蒸馏水冲净后，将种子进行吸涨处理。每个处理3次重复，每个重复30粒种子，将种子分别平铺于底部铺有湿润滤纸的培养皿中，放入光照培养箱中培养，培养温度为25℃／18℃(白天／夜晚)，光照12h。
培养期间用离子水保持种子表面湿润，发霉种子取出洗净再放回，并去除腐烂种子。每天观察种子发芽及生长情况，记录发芽粒数并测量根长，直至连续2次观察到种子发芽数均为0，以胚根突破种皮2mm作为萌发标准，在根长达到1.5cm时移栽，移栽15d后，统计其成活率，并计算每株苗的成本价，见表6。
表6蓝花丹播种繁殖成本表
Table6 Plumbago auriculata Lam.seed propagation costs table
表7实施例1和实施例2对比表
Table7 Example 1 and example 2 comparative table
由表7可以看出：采用本方法快繁的蓝花丹与传统的播种繁殖方法相比，所用的成本大大降低，成活率高。采用本方法培养的蓝花丹成活率高，生根时间早，生长发育快，在降低成本的基础上，扩大繁殖系数，为蓝花丹的生产提供了新的高效繁殖方法，为解决目前我国对国外种源依赖进口问题作出贡献。本方法操作简单易行，易于推广，符合大面积推广应用。
应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (2)
1.蓝花丹单芽诱导丛芽繁殖方法，其特征在于：
A、外植体的处理：剪取长势良好无病虫害的幼嫩枝条，用洗衣粉溶液浸泡30min，刷去表面脏物，自来水冲洗2h左右后，75％的乙醇溶液浸泡45s，无菌水冲洗2次后，用0.1％的升汞溶液浸泡10min，之后用无菌水浸泡冲洗数次至材料表面无泡沫，最后置于超净工作台上，用无菌吸水纸吸去材料表面的水分。培养基的处理：配置单芽诱导丛芽培养基MS+0.2mg／L～1.0mg／L6-BA+1.0mg／L～4.0mg／L2,4-D；生根培养基MS+0.5mg／L～1.5mg／L IBA+0.0mg／L～1.0mg／L NAA。蔗糖浓度设置为30g／L；
B、接种：将处理好的外植体接种到配置好的培养基中；
C、接种后管理：培养温度为20～28℃，光照度为1500～2500Lx，光照时间为8～12h／d，pH为5.8。
2.根据权利要求1所述的蓝花丹组培方法，其特征在于：步骤A所述的外植体是将枝条上的叶片切除后，切成1cm长左右的茎段，其中以茎节为界，上半部分保留0.3cm，下半部分保留0.7cm，每个茎段保留一个茎节。
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| CN (1) | CN103609436A (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104322372A (zh) * | 2014-11-07 | 2015-02-04 | 梁彩英 | 一种蓝雪花的组织培养快繁方法 |
| CN104686353A (zh) * | 2015-03-02 | 2015-06-10 | 刘祖英 | 一种蓝雪花组织培养技术 |
| CN105191796A (zh) * | 2015-09-28 | 2015-12-30 | 江苏农林职业技术学院 | 一种蓝雪花组织培养外植体消毒方法 |
| CN106417013A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-22 | 罗余基 | 蓝雪花的组织培养方法 |
| CN107667865A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-02-09 | 四川农业大学 | 一种岷江蓝雪花高效继代快繁方法 |
| CN107691222A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-02-16 | 四川农业大学 | 一种蓝花丹高效扦插快繁的方法 |
| CN109156351A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-01-08 | 江苏农林职业技术学院 | 一种提高组培植株诱导率的培养基及制备方法与应用 |
| CN112314232A (zh) * | 2020-11-09 | 2021-02-05 | 四川农业大学 | 一种调控蓝花丹花期的方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102559869A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-07-11 | 云南省烟草农业科学研究院 | 利用rgp-3特异性分子标记快速鉴别11个烟草种质的方法 |
| KR20130049125A (ko) * | 2011-11-03 | 2013-05-13 | 한국화학연구원 | 플럼바긴을 유효성분으로 함유하는 가시박 방제용 조성물 |
-
2013
- 2013-10-17 CN CN201310486103.9A patent/CN103609436A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20130049125A (ko) * | 2011-11-03 | 2013-05-13 | 한국화학연구원 | 플럼바긴을 유효성분으로 함유하는 가시박 방제용 조성물 |
| CN102559869A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-07-11 | 云南省烟草农业科学研究院 | 利用rgp-3特异性分子标记快速鉴别11个烟草种质的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| YI CHEN ET AL: "Preliminary Report of PGR’s Influence to Multiple Shoots Induction and Plant Regeneration on Plumbago auriculata", 《AMERICAN JOURNAL OF PLANT SCIENCES》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104322372A (zh) * | 2014-11-07 | 2015-02-04 | 梁彩英 | 一种蓝雪花的组织培养快繁方法 |
| CN104686353A (zh) * | 2015-03-02 | 2015-06-10 | 刘祖英 | 一种蓝雪花组织培养技术 |
| CN105191796A (zh) * | 2015-09-28 | 2015-12-30 | 江苏农林职业技术学院 | 一种蓝雪花组织培养外植体消毒方法 |
| CN106417013A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-22 | 罗余基 | 蓝雪花的组织培养方法 |
| CN107667865A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-02-09 | 四川农业大学 | 一种岷江蓝雪花高效继代快繁方法 |
| CN107691222A (zh) * | 2017-11-10 | 2018-02-16 | 四川农业大学 | 一种蓝花丹高效扦插快繁的方法 |
| CN109156351A (zh) * | 2018-09-29 | 2019-01-08 | 江苏农林职业技术学院 | 一种提高组培植株诱导率的培养基及制备方法与应用 |
| CN112314232A (zh) * | 2020-11-09 | 2021-02-05 | 四川农业大学 | 一种调控蓝花丹花期的方法 |
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